Revista Fitos Vol 9 N-3

Bauhinia forficata Link (Fabaceae)
e-ISSN 2446-4775
Volume 9 - Nmero 3
Julho - Setembro 2015
Antibacterial activity of Schinopsis brasiliensis against

phytopathogens of agricultural interest
Formao de mudas de alface provenientes de sementes
peletizadas com altas diluies
Bioactivity of extracts from Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.
Burtt & R.M. Sm. against sinusitis causing bacterial
pathogens
Anlise morfomtrica dos tbulos seminferos de
camundongos suplementados com leo de alho
Antioxidant and antimicrobial properties of ethanolic
extract of Libidibia ferrea pods
Estudo do desempenho comercial dos insumos
farmacuticos vegetais sob a tica do Comrcio Exterior
e-ISSN: 2446-4775
Presidente da Fundao Oswaldo Cruz (FIOCRUZ): Paulo Ernani Gadelha Vieira

Diretor do Instituto de Tecnologia em Frmacos (Farmanguinhos): Hayne Felipe da Silva
Coordenador do Ncleo de Gesto em Biodiversidade e Sade (NGBS): Glauco de Kruse Villas-Bas
Editor Coordenador:
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Editor Executivo:
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Classificao CAPES-Qualis
Qualis B5 (Medicina e Cincias Biolgicas II, Biodiversidade, Sade Coletiva)
Qualis B4 (Engenharia e Biodiversidade)
Qualis C (Cincias Biolgicas I e II, Farmcia, Biotecnologia, Qumica)
Escritrio Editorial
Assistente Editorial Yolanda Castro Arruda
Gerente Editorial Preciosa de Jesus Meireles de Oliveira
Gerente de Comunicao Denise Monteiro da Silva
Administrador do sistema e Designer Eugnio Fernandes Telles
Revisora Tatiana Vasconcelos Chaves Pontes
Auxiliar Administrativo Luana Antonio Oliveira
Associada ABEC
Ficha Catalogrfica elaborada pela Biblioteca de

Medicamentos e Fitomedicamentos/ Farmanguinhos / FIOCRUZ RJ
Revista Fitos: pesquisa, desenvolvimento e inovao em fitoterpicos. / Fundao Oswaldo Cruz; Instituto de
Tecnologia em Frmacos; Ncleo de Gesto em Biodiversidade e Sade. v.1, n.1, (Jun. 2005), - . Rio de Janeiro:
NGBS, 2005 v.: il.
Anual: 2007 e 2011
Interrompida: 2008, 2014
Quadrimestral: 2010
Trimestral: 2012
Semestral: 2005, 2006, 2009, 2013
e-ISSN 2446-4775
1. Fitoterpicos. 2. Fitofrmacos. 3. Medicamentos de origem vegetal. 4. Biodiversidade. 5. Pesquisa,
Desenvolvimento e Inovao (PD&I) I. Fundao Oswaldo Cruz. II. Instituto de Tecnologia em Frmacos.
Ncleo de Gesto em Biodiversidade e Sade.
CDD 615.12
SUMRIO
Revista Fitos
e-ISSN 2446-4775
Volume 9, nmero 3
Julho-Setembro, 2015
EDITORIAL
165-166
AGROECOLOGIA
Antibacterial activity of Schinopsis brasiliensis against phytopathogens of agricultural interest
Atividade antibacteriana de Schinopsis brasiliensis contra fitopatgenos de interesse na
agricultura
Ronan Batista, Poliana G. Guimares, Indiana S. Moreira, Pedro C. Campos Filho, Jos Lucas de A. A. Ferraz,
Quelmo S. de Novaes
167-176
AGROECOLOGIA
Formao de mudas de alface provenientes de sementes peletizadas com altas diluies
Lettuce seedlings formation from pelleted seeds with high dilutions
Roberto Luiz Queiroz, Elen Sonia Maria Duarte, Maximiliano Marques, Vanessa Aparecida Goulart, Guilherme
Ferreira Marques
177-184
ETNOFARMACOLOGIA
Bioactivity of extracts from Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm. against sinusitis
causing bacterial pathogens
Bioatividade de extratos de Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm. contra patgenos
bacterianos causadores de sinusite
Grasiela Mercia Costa, Rodrigo Suga, Patrcia Oliveira, Fernando Csar Silva, Paula Magalhes, Lucienir Duarte,
Luiz Macedo Farias
185-194
FARMACOLOGIA
Anlise morfomtrica dos tbulos seminferos de camundongos suplementados com leo de alho
Morphometric analysis of seminiferous tubules of mice supplemented with garlic oil
Nilo Francisco Zancanaro Filho, Alexandre Schneider Angioletti, Silvana Tomazoni de Oliveira
195-206
FARMACOLOGIA
Antioxidant and antimicrobial properties of ethanolic extract of Libidibia ferrea pods
Propriedade antioxidante e antimicrobiana do extrato etanlico de vagens de Libidibia ferrea
Patricia Nascimento, Talita Silva, Jos Gomes, Mitaliene Silva, Silvana Souza, Rosngela Falco, Tania Silva, Keila
Moreira
207-216
FARMACOLOGIA
Raquel Elisa Silva-Lpez, Bruna Cristina Santos
217-232
INOVAO (GESTO E CTI EM SADE)

Estudo do desempenho comercial dos insumos farmacuticos vegetais sob a tica do Comrcio
Exterior
Study of commercial performance of pharmaceutical drugs vegetables in a Foreign Trade optics
Orlando Nascimento, Jos Maldonado, Adriano Arnbio
233-246
EDITORIAL
A Revista Fitos Eletrnica (RFE), lanada em agosto de 2014, publica artigos relativos a Plantas Medicinais que
contribuam para PD&I (Pesquisa, Desenvolvimento e Inovao) de medicamentos nas seguintes reas do
conhecimento: Agroecologia, Botnica, Etnofarmacologia, Farmacologia, Inovao (Gesto e CT&I em Sade)
e Qumica.
Neste nmero, a Fitos traz artigos predominantemente nas reas de Agroecologia, Farmacologia e Inovao
(Gesto e CT&I em Sade).
Dois artigos, com focos bastante distintos, constam da sesso de Agroecologia que, segundo o Marco
Referencial em Agroecologia da Embrapa, publicado em 2006, definida como um campo de conhecimento
transdisciplinar que contem os princpios tericos e metodolgicos bsicos para possibilitar o desenho e o
manejo de agroecossistemas sustentveis e, alm disso, contribuir para a conservao da agrobiodiversidade
e da biodiversidade em geral, assim como dos demais recursos naturais e meios de vida. (Coellho, 2011).
http://www.essentiaeditora.iff.edu.br/index.php/sMosaicoAmbiental/article/view/2191
Um deles trata da aplicao da Homeopatia na agricultura, tecnologia que, segundo os autores, do Centro
Universitrio do Sul de Minas (UNIS), Varginha, MG, vem sendo aplicada com sucesso por agricultores nacionais
e de outros pases como Cuba, Inglaterra, Alemanha, Frana e Itlia.
No segundo artigo de Agroecologia, pesquisadores da UFBA e universidades estaduais da Bahia relatam
experimentos com Schinopsis brasiliensis Engl. (Anacardiaceae) na avaliao da atividade antimicrobiana in
vitro contra alguns fitopatgenos de interesse na agricultura, com resultados positivos. Neste caso,
interessante ressaltar que a espcie em questo, conhecida como brana ou barana, endmica, tpica da
Caatinga, e de reconhecida ao contra cepas resistentes deStaphylococcus aureus e que, mais uma vez se
observa o potencial de aplicaes de plantas medicinais em outras reas, como a agricultura.
Na sesso de Farmacologia encontram-se trs artigos. Um deles, de pesquisadores da Universidade do Vale
do Itaja UNIVALI, SC, relata experimentos de toxicologia em que se investiga a ao do leo de alho em
tbulos seminferos de camundongos. Sua importncia est relacionada ao uso, s vezes exacerbado do alho
e carncia de informaes quanto toxicidade e os efeitos, em especial, sobre o sistema reprodutor masculino.
Pesquisadores da FIOCRUZ, RJ, apresentam uma reviso sobre aspectos botnicos, empregos no medicinais,
fitoqumica e aes farmacolgicas da Bauhinia forficata Link (Fabaceae), uma planta medicinal da
biodiversidade brasileira.
O terceiro artigo se refere avaliao das atividades antioxidante e antimicrobiana de frutos do pauferro, Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.) L. P. Queiroz (Leguminosae), uma planta brasileira encontrada nas regies
norte e nordeste do Brasil.
O artigo de Nascimento, Maldonado e Arnbio, da FIOCRUZ, em que se analisa o Desempenho Comercial dos
Insumos Farmacuticos Vegetais sob a tica do Comrcio Exterior, no perodo de janeiro de 2002 a dezembro
de 2014, coloca em nmeros uma realidade da qual temos alguma conscincia, a dependncia externa do Brasil
na rea farmacutica, mas que, quando focada nos insumos farmacuticos vegetais, simplesmente chocante
para um pas que tem uma das maiores biodiversidades do planeta e o uso de plantas medicinais considervel.
Um aspecto positivo que as exportaes cresceram 222% no perodo considerado, mas as importaes
tiveram aumento semelhante mas deficits marcantes foram registrados em 2013 e 2014. Estes e outros dados
relevantes foram alvo de anlises e reflexes valiosas pelos autores. Todos estes artigos contribuem, portanto,
para o avano em PD&I de medicamentos a partir de plantas medicinais e aplicaes destas em reas no
menos importantes como, por exemplo, a agricultura.
Aproveitamos o momento para agradecer a todos os autores que tiveram seus artigos publicados na RFE em
2015 e desejamos que os leitores se sintam estimulados a contribuir para o sucesso da RFE em 2016.
Alade Braga de Oliveira
AGROECOLOGIA
DOI 10.5935/2446-4775.20150013
Antibacterial activity of Schinopsis brasiliensis

against phytopathogens of agricultural interest
Atividade antibacteriana de Schinopsis brasiliensis contra
fitopatgenos de interesse na agricultura
1
Poliana G. Guimares; 2 Indiana S. Moreira; 2 Pedro C. Campos Filho; 2 Jos Lucas de A. A. Ferraz;
3 Quelmo
S. de Novaes; 4* Ronan Batista
Department of Human Sciences and Technology, Bahia State University, Campus XXII, Brazil.
Department of Basic and Instrumental Studies, State University of Southeast of Bahia, Brazil.
Department of Plant and Animal Science, State University of Southeast of Bahia, Brazil.
Department of Organic Chemistry, Institute of Chemistry, Federal University of Bahia, Brazil.
Correspondncia: ronbatis@ufba.br
Resumo
O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana in vitro da planta Schinopsis brasiliensis contra
alguns fitopatgenos de interesse na agricultura. Extratos etanlicos foram obtidos e ensaiados contra o fungo
Fusarium solani e bactrias do gnero Xanthomonas, Pectobacterium, Ralstonia e Acidovorax. Os resultados
mostraram, em geral, um bom desempenho destes extratos contra as bactrias ensaiadas, com valores de
concentrao inibitria mnima entre 312,5 e 10.000g.mL-1. Alm disso, um triterpeno (glutinol) e um pirocatecol
so relatados como constituintes qumicos desta espcie. Conclui-se que S. brasiliensis apresenta potencial
para ser usado no controle de doenas de plantas causadas pelas bactrias pertencentes aos gneros
Xanthomonas, Ralstonia e Acidovorax.
Palavras-chave: fitopatgenos; Schinopsis brasiliensis; glutinol; pirocatecol; Artemia salina; agricultura.
Abstract
The aim of this work was to evaluate the in vitro antimicrobial activity of Schinopsis brasiliensis against certain
phytopathogens of agricultural interest. Ethanolic crude extracts were obtained and assayed against Fusarium
solani and bacteria pertaining to the genera Xanthomonas, Pectobacterium, Ralstonia and Acidovorax using the
broth micro-dilution technique. The results demonstrated a good aptitude of S. brasiliensis extracts to inhibit growth
of the majority of the evaluated phytopathogenic bacteria, with MIC values in the range from 312.5 to
10,000g.mL-1. Moreover, triterpene glutinol and a pyrocatechol are shown to be the chemical constituents of S.
brasiliensis. The results suggest that S. brasiliensis has the potential for agricultural use to control plant diseases
Revista Fitos, Rio de Janeiro, Vol, 9(3), 161-252, Jul-Set 2015
167
caused by phytopathogenic bacteria belonging to the genera Xanthomonas, Ralstonia and Acidovorax.
Keywords: phytopathogens; Schinopsis brasiliensis; glutinol; pyrocatechol; Artemia salina; agriculture.
growing resistance of pathogenic microorganisms to
1. Introduo
synthetic products (Amaral and Bara, 2005).
Recent estimates indicate that the worlds population

is expected to expand from the current 6.7 billion to 9
billion
by
2050
(Ronald,
2011).
Global
food
production is not increasing fast enough to support

this rapidly growing population; therefore, it is
believed that world agricultural production needs to
increase 50% by 2030 to accommodate this higher
demand for food (Ronald, 2011; Davies et al., 2009).
Diseases of crop plants are among the most
important constraints in the production of adequate
quantities of food, committing up to a third of the world
production (Khan, 2008; Agrios, 2005). Therefore, a
reduction in the losses of crops to pests and
phytopathogens is understood to be equivalent to
creating more land and more water to increase real
agricultural production (Ronald, 2011).
Pesticides are widely used to control plant diseases
around the world (Khamna, Yokota and Lumyong,
2009). Although the use of such products has a
positive short-term effect for the producer, their longterm employment has many negative effects for
society and the environment, such as the pollution of
soil and water, deposition of agrochemical residues
on food and the emergence of resistant pathogens,
among others (Khamna, Yokota and Lumyong, 2009;
Stangarlin et al., 1999; Kimati et al., 1997).
To reduce the negative effects of pesticides, natural
alternatives are being searched for the control of
phytopathogens. Within this context, there is an
intense and increasing current search for new
antimicrobial agents from plants as a result of the
168
According to Di Piero, Novaes and Pascholati (2010)

one valid alternative is to exploit the biological activity
of secondary metabolites available in crude plant
extracts and essential oils from medicinal plants of
native flora. In this connection, some examples can
be found in the literature, from which we select three
ones: 1. In vitro control of the fungi Colletotrichum
gloeosporioides,
C.
musae
and
Fusarium
subglutinans f. sp. ananas by the essential oils of

Cymbopogon nardus, C. citratus and Eucalyptus
citriodora (Alves et al., 2003); 2. Control of
anthracnose in guava fruit (Psidium guajava L.) by the
aqueous extract and essential oil of cloves (Syzygium
aromaticum) (Rozwalka et al., 2008); 3. Control of
common bacterial blight in bean plants by bushy
matgrass (Lippia Alba) and pepper-rosmarin (Lippia
sidoides) tinctures and the essential oils of rosemary
(Rosmarinus
officinalis)
and
cinnamon
(Cinnamomum zeylanicum) (Vigo et al., 2009).

Schinopsis brasiliensis Engl. (Anacardiaceae) is the
most important species representing the genus
Schinopsis native to Brazil (Saraiva et al., 2011;
Albuquerque et al., 2007). An endemic tree popularly
known as brana or barana (Albuquerque et al.,
2007; Cardoso, David and David, 2005), it is typical
of the Caatinga and of high economic value to the
Northeast region (Albuquerque et al., 2007). The
antibacterial activity of barana extracts against
resistant strains of Staphylococcus aureus has been
reported (Saraiva et al., 2011). Furthermore, few
phytochemical studies have been conducted with this

Poliana G. Guimares, Indiana S. Moreira, Pedro C. Campos Filho, Jos Lucas de A. A. Ferraz,
Quelmo S. de Novaes, Ronan Batista
plant, of which we highlight the isolation of a few alkyl
2011. An exsiccate was deposited at the UESB
and alkenyl phenols, among other components
herbarium, in Vitria da Conquista city, Bahia state,
(Cardoso, David and David, 2005).
Brazil, under the code HUESBVC 4124. The different

parts were dried separately in a forced air circulation
Schinopsis
brasiliensis
antibacterial
action
extracts
against
have
shown
oven at 50C for 48 hours. The dried plant material
microorganisms
leaves, bark and secondary roots was milled and
pathogenic to human beings and are considered to be
exhaustively
a plant species with a potential use in phytopathogen
maceration to give, after concentration in a rotary
control. As no research until this moment has
evaporator, the corresponding ethanolic extracts of
described the antimicrobial effect of this plant against
the leaves (EEL, 12.90g), stems (EES, 11.26g) and
phytopathogenic microorganisms, the purpose of this
roots (EER, 5.58g).
extracted
with
96%
ethanol
by
work was to assess the antimicrobial activity of

Schinopsis
brasiliensis
extracts
against
some
2.2. Isolation of compounds 1 and 2 from EEL
phytopathogenic agents with important economic

value for agriculture. Therefore, the S. brasiliensis
A part of the crude ethanolic leaf extract of Schinopsis
extracts were tested against the fungus Fusarium
brasiliensis (EEL, 9.0g) was chromatographed on a
solani, a causative agent of root rot of potatoes and
silica gel column and eluted with increasingly polar
beans; as well as against the phytopathogenic
solvent systems, resulting in eleven fractions of
Xanthomonas bacteria: Xanthomonas campestris PV
500mL each: two from hexane (Frs. 1-2), four from
(pv). Campestris and Xanthomonas campestris pv.
dichloromethane (Frs. 3-6), four from ethyl acetate
viticola, which causes black rot in crucifers and
(Frs. 7-10) and one from methanol (Fr. 11). Fraction
bacterial
respectively.
3 (294mg) was rechromatographed on the silica gel
In
canker
in
addition,
grapevines,
phytobacteria
column and eluted with increasingly polar mixtures of
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum,
hexane and ethyl acetate, resulting in forty-six sub-
which
soft rot in greenery; Ralstonia
fractions of 10mL each. Sub-fraction 11, eluted with
solanacearum, which causes bacterial wilt in banana
hexane-ethyl acetate (8:2), afforded substance 1
trees and green peppers; and Acidovorax avenae
(10mg),
subsp.
for bacterial spot in
spectroscopic analysis. This substance was identified
melons were also assayed. At last, the ecotoxicity
as triterpene glutinol on the basis of the IR, 1H and
potential of S. brasiliensis extracts was assessed
13C
by means of brine shrimp lethality (BSL) bioassay
in the literature (Tuan, Hung and Chien, 2005).
causes
citrulli,
the
responsible
which
was
pure
under
TLC
and
NMR data that were identical to those described
against Artemia salina.

The initial fractionation of EEL was repeated to obtain
a larger quantity of the dichlorometanic fractions,
2. Material and Methods

2.1.
Plant
material
collection
which were grouped (1.0g) and submitted again to

and
extract
preparation
column chromatography on silica gel, employing

increasingly polar mixtures of hexane and ethyl
acetate as eluents to afford seventy-seven fractions
The leaves, bark and secondary roots of Schinopsis
30mL each. Fraction 54, eluted with hexane-ethyl
brasiliensis were collected at the Caatinga Grande
acetate (7:3), provided compound 2 (44mg), which
ranch, municipal area of Malhada de Pedras,
was identified as a pyrocatechol whose IR and
southwest region of Bahia, during the month of June,
NMR data were very similar to those reported for

Z,Z-4-
169
(heptadeca-8,11-diennyl)-benzene-1,2-diol (Sargent,
incubation at 25C for seven days to allow the fungus
Wangchareontrakul and Jefferson, 1989).
to colonize the entire diameter of the dish.
Glutinol (1). IR, vmax (cm-1): 3445, 3391, 2930, 2850,
Extracts EEL, EES and EER (200mg each) were
NMR (CDCl3, 500 MHz, ): 5.63
separately diluted in acetone (5mL) and topped with
(m, 1H), 3.47 (s, 1H), 1.16 (s, 3H), 1.14 (s, 3H), 1.04
off distilled, autoclaved water (20mL), resulting in
(s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95
solutions each with a 10mg.mL-1 concentration. To
(s, 3H), 0.85. (s, 3H). 13C NMR (CDCl3, 125 MHz, ):
arrive at the desired concentrations of 0.001; 0.005;
18.2 (C-1), 27.8 (C-2), 76.3 (C-3), 40.8 (C-4), 141.6
0.01; 0.02; 0.05; 0.1; 0.25; 0.5 and 1mg.mL-1, the
(C-5), 122.0 (C-6), 23.6 (C-7), 47.4 (C-8), 34.8 (C-9),
solutions obtained from the extracts in PDA were
49.7 (C-10), 34.6 (C-11), 30.3 (C-12), 39.3 (C-13),
proportionally diluted and placed on Petri dishes. For
37.8 (C-14), 32.1 (C-15), 36.0 (C-16), 30.1 (C-17),
the negative control without extracts (0mg.mL-1), only
43.1 (C-18), 35.1 (C-19), 28.2 (C-20), 33.1 (C-21),
PDA medium, distilled and autoclaved water (20mL)
38.9 (C-22), 28.9 (C-23), 25.4 (C-24), 16.2 (C-25),
and acetone (5mL) were used.
1454, 1361, 1180.
1H
19.6 (C-26), 18.4 (C-27), 32.0 (C-28), 34.5 (C-29),

Following solidification of the culture medium on the
32.3 (C-30).
Petri dishes containing the concentrations mentioned

Pyrocathecol 2. IR, vmax (cm-1): 3375, 3008, 2924,
above, 5-mm discs containing 8-day-old Fusarium
2854, 1604, 1518, 1462, 1373, 1280, 1192, 1114,
solani mycelium were minced to the center of each
956, 864, 786, 721. 1H NMR (CDCl3, 500 MHz, ):
dish, which were then sealed with plastic film and
6.76 (d, J=8.0, 1H), 6.69 (t, J= 2.0, 1H), 6.59 (dd, J
placed randomly into the incubation chamber at 25C.
=2.0, 8.0; 1H), 5.35-5.14 (m, 4H), 2.77 (m, 2H), 2.48
The lowest concentration of extract that inhibited the
(t, J=8.0, 2H), 2.06-2.01 (m, 4H), 1.55 (m, 2H), 0.89
growth of the test microorganisms was determined to
(t, J=7.0, 3H). 13C NMR (CDCl3, 125 MHz, ): 141.31
be the Minimum Inhibitory Concentration (MIC)
(C-1), 143.43 (C-2), 115.44 (C-3), 136.10 (C-4),
(Ostrosky et al., 2008). This analysis was conducted
120.61 (C-5), 115.16 (C-6), 35.23 (C-1), 31.88 (C-2),
by measuring the diameters of the colonies (the mean
29.68 (CH2), 29.40 (CH2), 29.30 (CH2), 27.20 (CH2),
out of two diametrically opposed measurements)
130.11 (CH), 127.92 (CH), 25.62 (CH2), 128.00 (CH),
every two days, beginning after 48 hours of incubation
130.20 (CH), 29.23 (CH2), 31.57 (CH2), 22.66 (CH2),
and lasting for seven days, i.e., until the moment
14.09 (CH3).
when the control treatment fungus had colonized the

entire surface of the culture medium. Potassium
2.3. Antifungal assay
phosphite (K2HPO3) was used as the positive control.
For the antifungal evaluation of the extracts, the
2.4. Antibacterial assay
fungus Fusarium solani isolated from passion fruit

trees and kept at the UESB Phytopathology
To evaluate the antibacterial activity of the S.
Laboratory at the Vitria da Conquista campus was
brasiliensis extracts through the broth micro-dilution
used. Fusarium solani colonies were grown on 90-
technique, the following standard bacterium strains
mm Petri dishes containing potato-dextrose-agar
were utilized, which were supplied by the Cultures
(PDA) culture medium (Merck). The dishes were
Collection of the Phytopathology Laboratory, Rural
placed in Biochemical Oxygen Demand (BOD)
Federal
University
of
Pernambuco,
with
the
respective cultures from where they were isolated:
170

Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc56)
2.5; 1.25; 0.63; 0.31 and 0.16mg.mL-1). The
from cabbage leaves; Xanthomonas campestris pv.
microplates were incubated at 25C for 24h. The
viticola (Xcv112) from vine branches; Pectobacterium
inhibition of bacterial growth was assessed using
carotovorum subsp. carotovorum (Pcc23) from
0.01% Resazurin (7-Hydroxy-3H-phenoxazin-3-one-
lettuce leaves; Ralstonia solanacearum (Race 1)
10-oxide, Sigma-Aldrich) solution to verify the
(CGH12) from fresh pepper stems;
Ralstonia
presence of microbial growth (Suffredini et al., 2004).
solanacearum (Race 2) (B19) from bananas; and
A pink or red color after the addition of the Resazurin
Acidovorax avenae subsp. citrulli (Aac1.12) from
solution indicated the presence of growing viable
yellow melon.
cells, and a blue color indicated a lack of microbial

growth. MIC was determined to be the lowest
2.4.1. Preparation of inoculum
concentration visually analyzed to effect total growth

inhibition. Gentamicin was used as the positive
The inoculum was prepared by emulsifying the
control.
overnight colonies from an agar Mueller Hinton by

diluting a broth culture (Suffredini, Varella and
2.5. Brine Shrimp Lethality Bioassay
Younes, 2007). A 0.5 McFarland standard (Andrews,

2001) was used for visual comparison to adjust the
The toxicity bioassay against Artemia salina was
suspension to a density equivalent to approximately
conducted according to the procedure described
108
(CFU/mL).
recently (Batista et al., 2009). Brine shrimp eggs were
adjusted
hatched in artificial seawater (40g/L, sea salt). After
photometrically. The suspensions of the organisms
24 hours of incubation at warm room temperature (27-
were diluted in 0.85% saline or broth to give
30 C) under artificial light, the nauplii were collected
108CFU/mL.
The plates were inoculated within 30min
with a Pasteur pipette and maintained for an
of standardizing the inoculum to avoid changes in the
additional 24 hours under the same conditions to
inoculum density.
reach the metanauplii stage. We prepared the
colony-forming
Alternatively,
the
units
per
mL
inoculum could
be
solutions by diluting 50mg of each extract in 1mL of

2.4.2. Microdilution broth assay
dimethylsulphoxide (DMSO). Working in triplicate

12.5, 25 and 50L aliquots of these solutions were
The extracts were tested using the microdilution broth

assay (MDBA) in sterile conditions, according to the
Clinical and Laboratory Standards Institute (2009)
(CLSI, 8th Ed.). The assay was adapted for highthroughput conditions using Meller-Hinton broth
(MHB) medium (Difco) in 96-well microplates. The
inoculum was adjusted to 1108CFU/mL with fresh
colonies grown on sterilized Meller-Hinton Agar
(MHA) medium (Difco). The bacterial suspensions
at the different concentrations were prepared in MHB
from the 1108CFU/mL stock. A 10L aliquot of the
bacterial suspension was dispensed into the wells
diluted in 5mL of previously prepared sea salt solution

containing A. salina larvae (10-20 metanauplii),
thereby obtaining concentrations of 125, 250 and
500g/mL of EEL, EES and EER extracts. A negative
control was prepared with DMSO sea salt solution
with only A. salina larvae (10-20 metanauplii), and
lapachol was used as the positive control. Twenty four
hours later, the number of survivors was counted, and
the lethal concentration 50% (LC50), defined as the
sample concentration that causes the death of 50%
of the larvae, was calculated using Probit analysis
with 95% confidence intervals (Finney, 1971).
containing MHB medium (45L) and a 45-L aliquot

of the extract at different concentrations (20; 10; 5;
171
brasiliensis
3. Results and Discussion
leaf
extract
presented
the
best
performance, being capable of inhibiting the growth of

The antifungal, antibacterial and brine shrimp lethality
activities of Schinopsis brasiliensis extracts EER,
EES
and
EEL
were
evaluated,
and
their
corresponding results are shown in TABLE 1. As

noted, the EER, EES and EEL extracts were inactive
the
microorganism
A.
avenae
subsp.
citrulli
(Aac1.12), with a MIC value of 312.5g.mL-1. In

general, these results demonstrate the good aptitude
of S. brasiliensis extracts to inhibit the growth of the
evaluated phytopathogenic bacteria.
against Fusarium solani, displaying MIC values

above 1mg/mL.
EEL was the most active extract against the

phytopathogenic bacteria assayed. It was submitted
TABLE 1 also presents the Minimum Inhibitory

Concentrations (MIC) of the S. brasiliensis ethanolic
extracts obtained by the broth micro-dilution method
against six phytopathogenic bacteria, displaying MIC
values in the range from 312.5 to 10,000g.mL-1. The
leaf extract exhibited a lower MIC against three of the
microorganisms tested: Ralstonia solanacearum
(Race 2, B19), A. avenae subsp. citrulli (Aac1.12) and
X. campestris pv. campestris (Xcc56). The stem
extract was efficient against only the bacteria R.
solanacearum (Race 1, CGH12), having a MIC of
312.5g.mL-1. The leaf, stem and root extracts were
equally efficient against X. campestris pv. campestris
(Xcc56).
From
all
the
bacterias
tested,
P.
carotovorum subsp. carotovorum (Pcc23) was the

most resistant, having a MIC between 5,000 and
10,000g.mL-1 for all three of the S. brasiliensis
extracts assayed. This result allowed us to consider
EER, EES and EEL to be inactive against this
bacterium according to the criteria established by
Tegos and collaborators (2002). The root extract
displayed a MIC of 625g.mL-1 against the bacteria X.
campestris pv. campestris (Xcc56) and A. avenae
subsp. citrulli (Aac1.12), and of 1,250g.mL-1 against
the bacteria X. campestris pv. viticola (Xcv112) and
R. solanacearum (Race 1, CGH12). We also noted
to a phytochemical study aiming to identify the

chemical entity(ies) responsible for its antibacterial
activity. This extract was fractionated on a silica gel
column, which provided triterpene glutinol (1) and a
pyrocatechol 2 (FIGURE 1), whose structures were
determined by comparison of their IR, 1H and
13C
NMR data with those available in the literature (Tuan,

Hung and Chien 2005; Sargent, Wangchareontrakul
and Jefferson, 1989). To the best of our knowledge,
this paper is the first to report the occurrence of both
natural products 1 and 2 in Schinopsis brasiliensis.
When compounds 1 and 2 were assayed against the
same phytopathogenic bacteria, neither was found to
be active, with MIC values above 5,000g.mL-1
(TABLE 1). These results indicate that the most
potent antibacterial activity observed for EEL is not
attributed to these isolated compounds, although they
may take part in a likely synergism or potentiation
when present in this extract, and thus deserve further
studies to clarify this possibility. Furthermore, Saraiva
and collaborators (2011) and Chaves and collaborators
(2011) attributed the antimicrobial activity of Schinopsis
brasiliensis to the high concentration of phenolic
compounds, such as tannins and flavonoids, which
could not be isolated from EEL in our attempts
described in this present paper.
that the stem extract presented the highest MIC

values against the majority of the assayed bacteria,
with the exception of X. campestris pv. campestris
(Xcc56) and R. solanacearum (Race 1, CGH12),
against which the extract reached a MIC value of 625
and 312.5g.mL-1, respectively. Additionally, the S.
172

FIGURE 1. Chemical structures of compounds glutinol (1) and pyrocatechol 2 isolated from Schinopsis brasiliensis leaves.
The preliminary results (data not shown) suggest that
residues that would rest on the agricultural products.
all of the extracts from Schinopsis brasiliensis might
The presence of bactericidal antibiotic substances
be acting as bacteriostatic agents. From the point of
would damage the local biodiversity and the health of
view of their potential application in agriculture, these
the consumers of these products. As an example,
findings are important results because apart from
copper sulfate, which is also a bacteriostatic agent, is
controlling
the
largely used to control phytopathogens in agriculture
lower
and has low toxicity compared to other pesticides
the
phytopathogens,
disease
they
caused
also
have
by
a
environmental impact due to the lack of more toxic
(Legaspi and Zenz, 1994).
TABLE 1. Antimicrobial and brine shrimp lethality (BSL) activities of Schinopsis brasiliensis extract EER, EES and EEL, and
substances 1 and 2 against some phytopathogens and Artemia salina.
Bacteria (MIC, g/mL) #
Fungus *
Sample
A. salina
(LC50, g/mL)
F. solani
(MIC, mg/mL)
X.c. (I) a
X.c. (II) b
P.c. c
R.s. (I) d
R.s. (II) e
A.a. f
EER 1
> 1.0
625
1,250
5,000
1,250
2,500
625
> 1000
> 1.0
625
2,500
10,000
312.5
10,000
2,500
> 1000
EEL 3
> 1.0
625
1,250
5,000
625
1,250
312.5
> 1000
EES
> 5,000
2
K2HPO3
> 5,000
> 5,000
> 5,000
> 5,000
> 5,000
> 5,000
0.250
0.031
0.031
0.031
> 4.00
0.031
0.001
Gentamicin
Lapachol
68.1
* Using the mycelial growth inhibition method in dishes;

Phytopathogenic bacteria:
(Xcv112);
Using the broth micro-dilution technique.
Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc56);
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc23);
Xanthomonas campestris pv. viticola
Ralstonia solanacearum (Race 1) (CGH12);
Ralstonia solanacearum (Race 2) (B19); Acidovorax avenae subsp. citrulli (Aac1.12).

1
Ethanolic extract of roots; 2 Ethanolic extract of stems; 3 Ethanolic extract of leaves.
173
Papadopoulos and collaborators (2004) reported the
bacteria belonging to the genera Xanthomonas,
presence of glutathione S-transferase (GST) as an
Ralstonia and Acidovorax.
internal
detoxification
system
in
the
three
development phases (24h, 48h and adults) of Artemia

salina, which are affected by a number of internal or
5. Acknowledgements
external factors, therefore changing the organisms
The authors are grateful to FAPESB (PET0009/2012)
susceptibility to various environmental contaminants.
for grants and financial support. Prof. Dr. Elineide
For this reason, this micro-crustacean is a valid model
Barbosa de Souza and the Phytobacteriology
to evaluate the toxicity of xenobiotics against
Laboratory of the Rural Federal University of
vertebrates and invertebrates (Brophy et al., 1989;
Pernambuco (UFRPE) are fully acknowledged for the
Grant and Matsumura, 1988) and can be used as a
donation of standard bacteria strains.
valid tool to evaluate the ecotoxicity of antimicrobial

agents and plant extracts (Nunes et al., 2006). When
the ecotoxicity of S. brasiliensis extracts was
evaluated using the BSL bioassay against A. salina,
the LC50 values were above 1,000g/mL for all of the
extracts
and
there
microcrustaceans
were
larvae
no
up
deaths
to
the
of
the
highest
concentration assayed, indicating that these extracts

are non-toxic for A. salina (TABLE 1) and potentially
non-toxic to the environment.
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botanical agent to control plant diseases caused by
phytopathogenic bacteria pertaining to the genera
Xanthomonas, Ralstonia and Acidovorax. Further
studies are still needed to confirm the in vivo
antibacterial activity of these extracts.
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4. Conclusions
atividade antifngica de extratos de plantas sobre o

This work reports the in vitro antibacterial activity of
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Schinopsis brasiliensis extracts against five strains of
Farmcia, v.2, p. 5-8.
phytopathogenic bacteria and shows that such

extracts are potentially non-toxic to the environment.
ANDREWS, J.M. 2001. Determination of minimum
Moreover, the triterpene glutinol and a pyrocathecol
inhibitory concentrations. Journal of Antimicrobial
are described here for the first time as the chemical
Chemotherapy, v. 48, p. 5-16.
constituents of S. brasiliensis. The results suggest

that this plant has potential for agricultural use to
control plant diseases caused by phytopathogenic
174
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176

AGROECOLOGIA
DOI 10.5935/2446-4775.20150014
Formao de mudas de alface provenientes de

sementes peletizadas com altas diluies
Lettuce seedlings formation from pelleted seeds with high
dilutions
1
Roberto Luiz Queiroz, 2 Elen Sonia Maria Duarte Rosa, 3Maximiliano Marques, 3 Vanessa Aparecida
Goulart, 3 Guilherme Ferreira Marques

1
Produo Agroecolgica e Homeopatia, Centro Universitrio do Sul de Minas (UNIS), Varginha, MG.
Departamento de Fitotecnia, IFET/BAIANO, Teixeira de Freitas, BA.
Curso de Engenharia Agronmica, Centro Universitrio do Sul de Minas (UNIS), Varginha, MG.
Correspondncia: robertoqueiroz@unis.edu.br
Resumo
A peletizao de sementes vem sendo caracterizada como uma importante forma de maximizao nos custos
de produo de mudas pelo fato de reduzir o trabalho e mo de obra de distribuio manual de sementes,
reduzindo ainda a prtica do desbaste de plantas excedentes. No entanto, o interesse comercial pelo
encapsulamento de semente avanou aps a semeadura mecanizada, prtica de plantio direto e, principalmente,
pela possibilidade de insero de nutrientes, reguladores de crescimento e aplicao de agrotxicos como forma
de constituir melhorias na sanidade das plantas. Nesse sentido, objetivou-se avaliar a produo de mudas de
alface (Lactuca sativa L. c.v. Grand Rapids) oriundas de sementes peletizadas com preparados homeopticos
submetidas cobertura de homeopatia de Phosphorus 30CH. Os resultados apontam que a utilizao de
homeopatia de Sulphur 6CH e Nux vomica 6CH so capazes de propiciar mudas sadias e vigorosas quando
comparadas com a testemunha.
Palavras-chave: agroecologia; homeopatia; Lactuca sativa L.
Abstract
The seed pelleting has been characterized as an important way of maximizing the seedlings production costs
because of lower labor and manpower manual seed distribution, while reducing the practice of surplus plants
thinning. However, the commercial interest in seed encapsulation advanced after mechanized seeding, tillage
practice and especially the possibility of inclusion of nutrients, growth regulators and pesticides application as a
way to provide improvements in the health of plants. In this sense, the objective was to evaluate the production
of lettuce seedlings (Lactuca sativa L. cv. Grand Rapids) arising from pelleted seeds with homeopathic
177
preparations submitted homeopathy coverage Phosphorus 30CH. The results show that the use of Sulphur 6CH
homeopathy and Nux 6CH are able to provide healthy and vigorous seedlings when compared to the control.
Keywords: agroecology; homeopathy; Lactuca sativa L.
possibilidades de analogia com a matria mdica
Introduo
humana e animal; pelo simillimum do elemento
A homeopatia vem se fundamentando como opo

de tratamentos de seres abiticos e biticos no intuito
de reordenar a energia vital do organismo, bem como
no equilbrio de sintomas (Arruda et al., 2005). Desde
a Instruo Normativa n 007, de 17 de maio de 1999
e, mais recentemente por intermdio da Instruo
Normativa n. 046, de outubro de 2011 (BRASIL,
2011),
os
preparados
altamente
diludos
(homeopatia) so recomendados tanto para o

controle fitossanitrio como para o reequilbrio
fisiolgico das plantas de acordo com o enunciado do
criador da Homeopatia, Samuel Hahnemann (17551843) e, ainda destacada como Tecnologia Social,
qumico nutricional de maior hierarquia na famlia,

gnero, espcie ou variedade, e tambm por
utilizao da isopatia.
No aspecto medicamentoso e, de acordo com o
conhecimento tradicional, Lactuca sativa utilizada
em diversos tratamentos, incluindo a insnia, tosse
seca, dores reumticas, ansiedade (Harsha e
Anilakumar, 2012), tambm confere proteo contra
estresse oxidativo, possivelmente pela atividade das
vitaminas C e E, polifenis e carotenoides (Harsha e
Anilakumar, 2013). Alm disso, o teor de nutrientes
deste vegetal inclui quantidade aprecivel de alguns
minerais, como clcio e ferro (Romani et al., 2002).
conforme a UNESCO e a Fundao Banco do Brasil,

em 2003 (Bonfim et al., 2012).
O negcio de hortalias multiplicadas por sementes

movimentou no varejo durante 2010/2011 a quantia
Em plantas, as experincias com uso da homeopatia,

vm sendo realizadas por agricultores nacionais e de
outros pases (Cuba, Inglaterra, Alemanha, Frana,
Itlia),
com
resultados
surpreendentes
na
minimizao de ataques de insetos, pragas (Almeida
de R$ 40,60 bilhes. A alface contribui com R$ 7,79

bilhes, representando a segunda principal hortalia
comercializada, sendo a alface tipo crespa com
aproximadamente
53%
do
mercado
nacional
(Absem, 2011).
et al., 2003), germinao de sementes (Bonfim et al.,

2012), aumento de compostos secundrios (Duarte,
A prtica de revestimento de sementes como forma
2007), fisiologia de plantas (Bonato, 2007) e
de proteo de plantas remota sendo originada no
produo de mudas sadias (Arruda et al., 2005).
sculo XVIII onde h relatos de utilizao de

salmoura no controle de pragas (Costa, 2003).
Em sistemas vegetais hortcolas a cincia da

ultradiluio
aplicvel,
pois
os
princpios
fundamentais da homeopatia so coerentes com as

leis da natureza, so imutveis e pertinentes a todos
os seres vivos. Casali, Castro e Andrade (2002),
Atualmente, com avano das doenas e pragas, a

peletizao
de
sementes
tornou-se
um
fator
importante para determinao do stand vegetativo

comercial no campo, sendo utilizados diversos
materiais
tais
como:
fungicidas,
nutrientes,
dissertam que a escolha do preparado homeoptico

a ser utilizado no vegetal deva ser pontuada pelas
178

Roberto Luiz Queiroz, Elen Sonia Maria Duarte, Maximiliano Marques,
Vanessa Aparecida Goulart, Guilherme Ferreira Marques
pesticidas, polmeros, corantes de identificao
As sementes tratadas de alface foram plantadas em
dentre outros.
bandejas descartveis de 200 clulas, preenchidas

com substrato de fibra de coco sendo disposta a 1m
Diante das diversas limitaes impostas pelos meios
de altura do cho e irrigadas duas vezes ao dia.
biticos e abiticos no estabelecimento de plntulas

e pela necessidade de desenvolver meios de
sobrevivncia do tegumento sem a utilizao de
determinada como cobertura
insumos no permitidos em sistemas orgnicos de
asperso (pulverizador manual tipo spray) nas folhas
produo, objetivou-se verificar a influncia de
das mudas de alface aps a semeadura com
diversas
repetio a cada trs dias, at o final do experimento.
peletizaes
homeopticas
no
desenvolvimento inicial de alface.
soluo
homeoptica
Phosphorus
30CH
foi aplicada por
Utilizou-se um papel cartolina objetivando proteger

os demais tratamentos da deriva do Phosphorus
30CH no momento da pulverizao.
Material e Mtodos
O experimento foi realizado em condies de cultivo
protegido na rea de experimento do UNIS-MG,
Varginha-MG. As sementes de alface, utilizadas no
experimento, foram aqunios convencionais, da
marca HORTICERES, cultivar GRAND RAPIDS,
origem: E.U. A; porcentagem de germinao de 98%
Os preparados homeopticos foram adquiridos de

farmcia
de
manipulao
de
medicamentos
homeopticos (Biotica Ltda. Varginha-MG) em

forma
lquida
(etanol
70%).
processo
de
revestimento das sementes, ou seja, a peletizao

seguiu a metodologia de Bonfim e colaboradores
(2012), respeitando a relao peso/volume, sendo: um
e pureza de 99%.
grama de p para um mL de adesivo. O insumo

O delineamento experimental foi no modelo em
utilizado foi talco farmacutico inerte, cuja composio
blocos ao acaso (DIC), em esquema fatorial 5 x 3,
Mg3Si4O10(OH)2, e o adesivo refere-se aos
sendo quatro tratamentos homeopticos alm da
tratamentos
testemunha - gua destilada e dois tipos de cobertura
Vegetabilis 6CH, Nux Vomica 6CH, Sulphur 6CH e
de plantas: gua destilada e homeopatia de
Arnica 6CH). Os preparados homeopticos foram
Phosphorus 30CH, perfazendo 15 tratamentos x 3
impregnados no talco farmacutico com auxlio de
repeties, em que cada parcela representada por
placa de petri com intuito de formar um p semi
cinquenta clulas da bandeja, sendo os tratamentos
pastoso, ntegro, branco, o qual revestiu as sementes.
de
solues
homeopticas
(Carbo
discriminados como:
As caractersticas analisadas foram: Massa fresca
1.
Sementes
peletizadas/
Talco
Carbo
(MFPA) e seca (MSPA) da parte area, Massa fresca
vegetabilis 6CH
(MFR) e seca (MSR) da raiz e Comprimento da Raiz
2.
Sementes peletizadas/ Talco + Nux vomica 6CH
(CR). A caracterstica (CR) foi determinada no final
3.
Sementes peletizadas/ Talco + Sulphur 6CH
do experimento, com auxlio de rgua graduada
4.
Sementes peletizadas/ Talco + Arnica montana 6CH
sendo
5.
Sementes
caractersticas de massa fresca de parte area e raiz
peletizadas/
Talco
gua
os
resultados expressos em mm.
As
(testemunha)
foram definidas, separadamente, por intermdio de
6.
Cobertura com Phosphorus 30CH
pesagem em balana eletrnica de preciso de
7.
Cobertura com gua destilada
0,001g.
Para a obteno das caractersticas de
massa seca da parte area (MSPA) e massa seca de
179
raiz (MSR), foi feita a embalagem (separados por
cobertura,
separadamente.
Para
fator
tratamentos e caractersticas) em sacos de papel
homeopatia somente a caracterstica de massa seca
Kraft, encaminhado secagem em estufa com
de parte area (MSPA) e massa seca de raiz, para
ventilao forada de ar, a 65 C, at peso constante
cobertura resultaram em efeitos no significativos.
e determinada a massa seca em balana eletrnica

As diferenas apontadas pela estatstica (TABELA 1)
de preciso de 0,01g.
sustentam a hiptese de que o talco e a gua

Os dados foram submetidos anlise de varincia e
possuem a capacidade de receber a informao dos
as mdias foram comparadas pelo teste Tukey a 5%
preparados
de probabilidade, no software ASSISTAT, verso 7.
contato com outro biossistema retransmitir essa

estrutura
homeopticos
informacional
resultados
apontam
e,
previamente,
(Bastide,
que
os
1995).
em
Esses
preparados
Resultados e Discusso
homeopticos foram capazes de provocar o sistema
De acordo com a anlise de varincia no se verificou
biolgico da semente demonstrando a eficcia da
interao entre peletizao e cobertura para as
homeopatia e contrapondo-se aos argumentos de
caractersticas
efeito placebo, to comumente propagada pelos que
estudadas,
permitindo
duvidam da cincia homeoptica (TABELA 1).
comparao/discusso dos fatores homeopatia e
TABELA 1. Resumo da anlise de varincia para massa fresca da parte area (MFPA), massa seca da parte area (MSPA),
massa fresca da raiz (MFR), comprimento da raiz (CR) e massa seca da raiz (MSR), de mudas de alface c.v GRAND RAPIDS
provenientes de peletizao de sementes com homeopatias e submetidas cobertura com preparado homeoptico de
Phosphorus 30CH. Varginha-MG, UNIS-MG, 2014.
QUADRADO MDIO
F.V
MFPA
MSPA
MFR
CR
MSR
(g)
(g)
(g)
(cm)
(g)
GL
Peletizao
0,008599**
0,000028 ns
0,009323*
705,33*
0,000012**
Cobertura
0,179189*
0,000270*
0,050262*
1435,90*
0,000007 ns
Peletizao*Cobertura
0,001607 ns
0,000101 ns
0,002880 ns
241,30 ns
0,000011 ns
109
0,002973
0,000055
0,001331
191,79
0,000005
27,23
44,25
22,69
15,68
23,33
Resduo
CV (%)
**Significativo pelo teste F a 5% de probabilidade.

* Significativo pelo teste F a 1% de probabilidade.
ns
No significativo.
O comprimento de raiz foi a nica caracterstica afetada
de 88,33 mm.
pela cobertura homeoptica de Phosphorus 30CH,
crescimento de raiz de eucalipto clone 3336 ao serem
resultando em resposta superior mdia geral que foi
submetidos s dinamizaes 6 e 12CH de Phosphorus.
180
Moraes (2009) obteve resposta no

A homeopatia de fsforo foi capaz de estimular o
medicamento com o organismo (Silva, 2006),
metabolismo
confirmando
radicular
das
mudas
de
alface,
que
as
ultradiluies
possuem
demonstrando que essas plantas foram capazes de
frequncia de onda prpria (Bonato, 2007) podendo
reagir presena da homeopatia no substrato.
derivar na falta de relao proporcional entre o

estmulo e a resposta (Bellavite, 2003).
Em todas as homeopatias utilizadas observam-se

caractersticas
Ao ser submetido homeopatia de Sulphur 6CH as
analisadas, escapando a linearidade dos estmulos,
mudas de alface c.v GRAND RAPIDS produziu
apresentado pela significncia nas diferenas das
aumento de 0,0454 g planta
caractersticas analisadas, excetuando a MSPA, bem
parte area (MFPA) em relao testemunha (gua)
como, MSR com homeopatia Phosphorus 30CH em
que apresentou 0,1790 g planta -1 como o menor valor
cobertura (TABELA 2). Esse padro de resposta
(TABELA 2).
respostas
diferenciadas
nas
-1
de massa fresca de
explicado como revelao da relao particular do
TABELA 2: Massa fresca (MFPA) e seca (MSPA) de parte area, massa fresca (MFR) e seca (MSR) de raiz e comprimento
da raiz (CR) de mudas de alface c.v GRAND RAPIDS, peletizadas com homeopatia expostas a cobertura de preparado
homeoptico de Phosphorus 30CH. Varginha-MG, UNIS-MG, 2014.
Caractersticas analisadas
Homeopatia
MFPA (g)
MSPA (g)
MFR (g)
CR (mm)
MSR (g)
gua (testemunha)
0,1790 b
0,0163
0,1621 ab
88,56 ab
0,0093 ab
Carbo vegetabilis 6CH
0,2137 ab
0,0181
0,1382 b
79,95 b
0,0082 b
Sulphur 6CH
0,2242 a
0,0159
0,1807 a
94,30 a
0,0095 a
Arnica montana 6CH
0,1987 ab
0,0172
0,1400 b
87,29 ab
0,0086 ab
Nux vomica 6CH
0,1853 ab
0,0152
0,1785 a
91,57 a
0,0100 a
Cobertura com Homeopatia
MFPA (g)
MSPA (g)
MFR (g)
CR (mm)
MSR (g)
gua (testemunha)
0,2388 a
0,0181 a
0,1798 a
84,87 b
0,0089
Phosphorus 30CH
0,1615 b
0,0151 b
0,1389 b
91,79 a
0,0093
CV(%)
27,23
44,25
22,69
15,68
23,33
Mdia Geral
0,2002
0,0168
0,1607
88,33
0,0091
Mdias seguidas pela mesma letra na coluna no se diferem entre si estatisticamente pelo teste de Tukey a 5% de
probabilidade.
Em estudos realizados por Bonato e Silva (2003)
estatisticamente entre os tratamentos. Resultados
ficou
semelhantes
comprovado
influncia
do
preparado
foram
apresentados
por
Bonato,
homeoptico Sulphur 5CH no aumento da produo
Proena e Reis (2009) que ao utilizar homeopatia de
de matria seca da parte area de rabanete,
Sulphur 6CH obtiveram incrementos na massa fresca
diferentemente deste experimento onde a mesma
de plantas de Mentha arvensis, bem como o aumento
caracterstica
no contedo de leo essencial.
(massa
seca)
no
diferiu
181
Nas caractersticas inerentes raiz (MFR, CR e
plantas e tambm no solo, propiciando-lhes a
MSR) nota-se que a homeopatia de Carbo vegetabilis
homeostase (Cupertino, 2008).
6CH
resultou
em
reduo
significativa
comparativamente ao preparado homeoptico de
Possivelmente
as
respostas
significativas
das
Sulphur 6CH que proporcionou as melhores mdias
ultradiluies de Nux vomica e Sulphur possam ter
no sistema radicular das mudas de alface. Esse
contribudo para com toda a potencialidade reao
resultado semelhante pesquisa de Pulido e
aos fatores externos cumprindo com a busca inerente
colaboradores (2014) que obtiveram o mesmo
pela sobrevivncia e pela auto regulao (Andrade,
padro estatstico, ou seja, melhores resultados
2004) das sementes de alface c.v. GRAND RAPIDS
utilizando Sulphur 6CH e piores usando ultradiluio
que estavam tratadas de forma convencional
de Carbo vegetabilis 6CH nas variveis: matria seca
(inseticida e fungicida), antes da peletizao com
de raiz e longitude da maior raiz de plntulas de
preparados homeopticos.
repolho hbrido Fuyutoy.

As respostas positivas das aes homeopticas
Os aspectos estatsticos na resposta de Nux vomica
condizem com a teoria de Schembri (1992) e
6CH nas caractersticas da raiz de mudas de alface
Vithoulkas (1980). Os pesquisadores investigaram os
c.v.
ao
preparados homeopticos em baixas dinamizaes,
tratamento com Sulphur 6CH. Moreno (2000) e
que por serem densos e moleculares, so mais
Brunini
eficazes no corpo fsico como no caso dos vegetais.
GRAND
RAPIDS,
Sampaio
assemelharam-se
(1994)
caracterizam
as
homeopatias de Sulphur e Nux vomica como os

principais policrestos da matria mdica, cuja
patogenesia extensa e com os mais diversificados
sintomas. Efeito constatado em plantas de alface c.v.
Regina por Queiroz (2015), que comprovou aumento
nas mdias das caractersticas MFF (massa fresca
das folhas), NF (nmero de folhas) e MSF (massa
seca das folhas) submetidas ao preparado de Nux
vomica 6 CH quando comparado
ao tratamento
Arenales (1999) evidencia que o Carbo vegetabilis

o medicamento da geada, pois a geada queima os
tecidos vegetais pelo frio, assim como o fogo queima
o vegetal pela ao do calor. Com relao s
exigncias de clima, as plantas de alface tm
preferncia por climas amenos, tolerando geadas
leves. Por esse aspecto a preparao homeoptica
Carbo vegetabilis no possui similitude com mudas
de alface, podendo-se inferir que as respostas
controle (gua destilada).
negativas
de
Carbo
vegetabilis
6CH
nas
Preparado homeoptico de Sulphur manifesta-se
caractersticas de raiz de mudas de alface c.v.
fortificando a reao orgnica e jogando fora aquilo
GRAND RAPIDS, so sinais artificiais (patogenesia),
que se enquadra como prejudicial sua vitalidade.
denominada segundo Kent (1996) de ao primria
Sendo indicado em casos de intoxicao, que se
do ser submetido aos estmulos de preparados
externaliza na superfcie do corpo, bem como em
ultradiludos.
supresses que causam sintomas variveis e

alternantes, dadas as alteraes do meio (Voisin,
1987). Por outro lado, a ultradiluio de Nux vomica,
Concluses
tem sido maximizada como grande descontaminador
A cobertura com homeopatia de Phosphorus 30 CH,
de plantas intoxicadas por agrotxico e por adubos
propiciou maior comprimento de raiz, quando
qumicos sintticos solveis, agindo nos tecidos das
comparada com aplicao de gua (testemunha).
182

As homeopatias de Nux vomica 6CH e Sulphur 6CH,
ARRUDA, V. M.; CUPERTINO, M. do C.; LISBOA, S.
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Todos
os
medicamentos
homeopticos
foram
capazes de provocar maiores efeitos positivos e
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incrementaram, a depender do tratamento, a massa

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moleculares
de
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involved
184
in
the
protection
of

ETNOFARMACOLOGIA
DOI 10.5935/2446-4775.20150015
Bioactivity of extracts from Alpinia zerumbet (Pers.)

B.L. Burtt & R.M. Sm. against sinusitis causing
bacterial pathogens
Bioatividade de extratos de Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt
& R.M. Sm. contra patgenos bacterianos causadores de
sinusite
1
Grasiela M. Costa; 1 Rodrigo G. Suga; 2 Patrcia L. Oliveira; 2 Paula P. Magalhes; 2 Luiz M. Farias;
Lucienir P. Duarte;
1,3,* Fernando
C. Silva
Faculdade de Farmcia, Universidade de Itana, Minas Gerais, Brasil.
Departamento de Microbiologia, Instituto de Cincias Biolgicas, Universidade Federal de Minas Gerais, Minas Gerais, Brasil.
Departamento de Qumica, Universidade Federal de Minas Gerais, Minas Gerais, Brasil.
Correspondncia: fcsquimico@yahoo.com.br
Resumo
Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm. tem sido indicada na medicina popular brasileira para tratar
reumatismo, dor de cabea e sinusite. Para avaliar o efeito de extratos e fraes de flores de Alpinia zerumbet
(Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm., a fim de validar cientificamente o uso da planta para o tratamento de sinusite, foi
proposto este estudo. Os extratos e fraes foram preparados e analisados por ensaios fitoqumicos. A atividade
antibacteriana contra 12 patgenos bacterianos associados com a sinusite foi avaliada empregando o mtodo
de diluio em gar. A frao hexnica apresentou o mais amplo espectro de atividade, inibindo 10 das 12
bactrias testadas, especialmente Porphyromonas gingivalis, Fusobacterium nucleatum e Fusobacterium
necrophorum. O menor valor de MIC foi observado para a frao em acetato de etila contra Streptococcus
pneumoniae (32 gL-1). Todos os extratos e fraes testadas apresentaram atividade contra Prevotella
intermedia. Por outro lado, nenhum extrato ou frao exibiu efeito antibacteriano contra Streptococcus
agalactiae. A soluo usada na medicina popular brasileira mostrou atividade inibitria contra os microorganismos isolados a partir de pacientes com sinusite crnica e aguda. Este estudo demonstra promissora
atividade antibacteriana de Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm. contra bactrias responsveis pela
sinusite aguda e crnica e valida o seu uso pela primeira vez.
Palavras-chave: atividade antibacteriana; prospeco fitoqumica; medicina popular; Zingiberaceae.
185
Abstract
Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm. is indicated in Brazilian traditional medicine to treat rheumatism,
headache and sinusitis. To evaluate the effect of extracts and fractions of flowers from Alpinia zerumbet (Pers.)
B.L. Burtt & R.M. Sm. in order to provide a scientific rationale for the use of the plant for the treatment of sinusitis,
this study was realized. The extracts and fractions were prepared and analyzed by phytochemical investigation.
Antibacterial activity against 12 bacterial pathogens associated with sinusitis was evaluated by employing an
agar dilution method. The hexane fraction showed the broader activity spectrum inhibiting 10 out of the 12 tested
bacteria specially Porphyromonas gingivalis, Fusobacterium nucleatum, and Fusobacterium necrophorum. The
lower MIC value was observed for the ethyl acetate fraction against Streptococcus pneumoniae (32 gL-1). All
extracts and fractions tested expressed activity against Prevotella intermedia. On the other hand, none of them
exhibited antibacterial effect against Streptococcus agalactiae. The solution used in Brazilian traditional medicine
171
showed inhibitory activity against microorganisms isolated from acute and chronic sinusitis patients. This study
demonstrates the promising antibacterial activity of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm. against
bacteria responsible for acute and chronic sinusitis and validates its use for the first time.
Keywords: antibacterial activity; phytochemical investigation; traditional medicine; Zingiberaceae.
treatment cost associated with the disease has been
Introduction
estimated at $ 3.5 - 5.8 billion, including $ 1.8 billion
Sinusitis is defined as an inflammation of the tissues

lining one or more of the paranasal sinuses
consequently to an upper respiratory tract infection,
an allergic reaction, or autoimmune problems.
Infectious sinusitis is a highly prevalent respiratory
condition associated predominantly with viruses.
However, bacterial sinusitis usually causes more
severe symptoms and lasts longer than viral sinusitis
(DeMuri and Wald, 2012). The most common bacteria
isolated from pediatric and adult patients with acute
sinusitis
are
Streptococcus
pneumoniae,
Haemophilus influenza, Moraxella catarrhalis and

Streptococcus pyogenes. Staphylococcus aureus
and anaerobic bacteria (Prevotella, Porphyromonas,
Fusobacterium, and Peptostreptococcus) are the
main
microorganisms
recovered
from
chronic
sinusitis patients (Brook, 2011).
for children less than 12 years of age (Abzug, 2014).

Conventional medical treatment of sinusitis includes
antibacterials and corticosteroids, with adjunctive
care involving decongestants and antihistamines
(Helms and Miller, 2006).
Antimicrobial resistance has become a global
concern, mainly due to the increasing rates of
multiresistant bacterial pathogens consequently to
the haphazard use of commercial antibacterial drugs
commonly employed for the treatment of infectious
diseases. Medicinal plants offer the most suitable
alternative in the search for herbal and new
antibacterial compounds of natural origin (Panda,
2014). As an example recently Noundou and
collaborators (2014) reported the antibacterial activity
of the extracts of roots, stems, and leaves of
Alchornea floribunda Mll. Arg. a plant commonly
Sinusitis has also important implications from a
found throughout Central, Western, Eastern, and
societal perspective. In the United States, the annual
186
Bioactivity of extracts from Alpinia zerumbet against sinusitis

Grasiela Mercia Costa, Rodrigo Suga, Patrcia Oliveira, Fernando Csar Silva
Paula Magalhes, Lucienir Duarte, Luiz Macedo Farias
Southern Africa, used to treat urinary, respiratory, and
R.M. Sm. by using solvents with a large range of
intestinal problems.
polarities against pathogens related to sinusitis was

evaluated for the first time in order to validate the use
The growing use of phytotherapy as an integrating
of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm. in
medical practice in several countries has been
traditional treatments for the disease.
remarkable. The use of medicinal plants in Brazil is

facilitated by plant diversity and low cost associated
with therapeutics, which has called the attention of
health
assistance
programs
and
professionals
Materials and methods

Plant material
(Santos et al., 2011).

The flowers of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt &
Based on this context, Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.
Burtt & R.M. Sm. (Zingiberaceae) has considerable
value. The genus Alpinia originated in East Asia, but
it is currently cultivated in various regions, as a
particular consequence of its ornamental and
therapeutic value (Victrio, 2011). Alpinia zerumbet
(Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm. also known as A.
speciosa (Blume) D. Dietr is native of tropical China,
Japan, India, Cambodia, Thailand, Vietnam, and
R.M. Sm. were purchased from Company of Natural

Plants and Flowers, Natureza So Francisco LTDA,
Itana municipality, Minas Gerais state, Southeastern
Brazil, in september 2013. The identification of the
plant material was confirmed by comparing with INCT
Herbarium - Virtual Herbarium of the Flora and Fungi
(INCT, 2013), and with a voucher specimen (BHCB
2290) deposited in the BHCB Herbarium, ICB, UFMG,
Belo Horizonte, Brazil.
Malaysia. It is widely cultivated and distributed in most

tropical and semi-tropical areas including the United
Preparation of extracts and fractions
States, Peru, and Brazil (Thenmozhi, Sureshikumar

and Venugopalan, 2011). According to Victrio
The plant material was dried, finely ground into
(2011) the rhizomes of members of this species
powder, and extracted for 120 h (hours) with
arrived in Brazil by accident, having been mixed in the
methanol at room temperature (75 g plant material/1
sand that served as ballasts for the Portuguese
L solvent). After extraction, the methanol was
caravels returning from the Indies.
concentrated using a rotary evaporator and dried in a

fume hood, providing crude methanol extract (ME).
Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm. is
Approximately, 1/3 of the extract was sequentially
among the most popular medicinal plants in different
partitioned with hexane, dichloromethane, ethyl
regions of Brazil, and its use has been suggested by
acetate, and butanol. The fractions obtained from this
Brazils Unified Health System (UHS, in Brazil SUS
partition were concentrated using a rotary evaporator
Sistema nico de Sade (Brazil, 2009). The peasants
until the total removal of the solvent, providing
in the Ribeiro Preto municipality (So Paulo state,
fractions in hexane (HF), dichloromethane (DF), ethyl
Brazil) use the plant to treat rheumatism and heart
acetate (AF), and butanol (BF), according to the
disease (Victrio, 2011). In Recife (Pernambuco,
methodology proposed by Filho and Yunes (1998)
Northeastern Brazil), where Alpinia zerumbet (Pers.)
with modifications. The solution used in Brazilian
B.L. Burtt & R.M. Sm. is called colonia, it is used for
traditional medicine for treating sinusitis patients was
the treatment of sinusitis (Albuquerque et al., 2007).
also prepared. The flowers were dried, extracted with
The antibacterial activities of crude extracts prepared
ethanol 92 % at room temperature, concentrated
from flowers of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt &
187
using a rotary evaporator, and dried in a fume hood,
Antibacterial activity of the extract ME and its derived
providing the alcoholic extract (AE).
fractions HF, DF and AF was determined by

employing an agar dilution method (CLSI, 2013). This
Phytochemical investigation
quantitative assay allows the determination of the

minimum inhibitory concentration of each tested
The screening of chemical constituents (steroids,

triterpenes, saponins, alkaloids and flavonoids) of the
extracts and fractions was performed using chemical
methods, according to the methodology previously
suggested by Wagner and Bladt (2001). The chemical
substance. Stock solutions of the specified extracts

(5120 gmL-1) were prepared in 10% dimethyl
sulfoxide (DMSO)/water. The solutions were then
added to melted solid culture media in order to obtain
concentrations ranging from 512 to 0.25 gmL-1.
characterization was based on the addition of specific

reagents to decoction aliquots and observing the
Bacterial inoculate were adjusted to match the 0.5
changes in solution color or precipitate formation. The
McFarland turbidity standard and spotted onto the
following
performed:
agar surface. To confirm the viability of the
characterization of flavonoids (cyaniding reaction) and
organisms, two control plates containing culture
saponins (the rate of spume) and testing for the
media without any extract were included in every
presence
of
Burchard
reaction),
experiments
triterpenes,
were
steroids
(Liebermann-
assay. One of them was the first plate to be inoculated
alkaloids
(precipitation
and the other one corresponded to the last plate.
reactions with Dragendorff) (Wagner and Bladt, 2001).
Additionally, another control consisting of culture
and
media
Bacterial strains
Prevotella
Peptostreptococcus
intermedia
ATCC
25611,
anaerobius
ATCC
27337,
Fusobacterium nucleatum ATCC 10953, Fusobacterium

necrophorum ATCC 25586, Pseudomonas aeruginosa
ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 33591,
Streptococcus
with
different
concentrations
of
chloramphenicol was also employed. It was also
The bacterial pathogens Porphyromonas gingivalis FDC

381,
added
agalactiae
(clinical
sample),
Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus

pneumoniae
(clinical
Streptococcus
(clinical
sample),
sample),
-hemolytic
and
Moraxella
catarrhalis (clinical sample) were used as indicator of
confirmed that the final concentration of DMSO did

not inhibit bacterial growth.
The extract AE and the fraction BF were tested by
using an overlay method (Booth, Johnson and
Wilkins, 1977). An aliquot of 10 L of pure AE and BF
(5210 gmL-1) were dropped onto the surface of
Tryptic Soy Agar. After allowing the surface of the
agar plates to dry, semisolid medium added with each
tested bacterial culture was poured onto the plate.
Ethanol 92 % employed to obtain the extract AE was
also tested and showed no effect on bacterial strains.
biological activity of tested extracts and fractions.

Information
Antibacterial activity of extracts and fractions against
sinusitis-causing bacterial pathogens
188
regarding
culture
media,
bacterial
inoculates, and incubation conditions are described in

the TABLE 1. Both tests were performed in duplicate.

TABLE 1. Cultivation conditions and bacterial inoculate employed for antibacterial activity testing of extracts and fractions
obtained from flowers of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm.
Antibacterial
activity testing
Incubation
conditions
Overlay method
Bacterial strains
Agar dilution
(MICa)
Porphyromonas gingivalis, Prevotella

intermedia, Peptostreptococcus anaerobius,
Fusobacterium nucleatum and Fusobacterium
necrophorum
BAc
Pseudomonas aeruginosa and

Staphylococcus aureus
MHe
Mediab
Inoculate
BHI-Sd
150 L
Anaerobiosis
37 C, 48 h
TSBf
Aerobiosis,
10 L
37 C, 24 h
Streptococcus spp. And Moraxella catarrhalis
MH-Sg
Candle jar,
BHI-S
50 L
37 C, 48 h
, minimum inhibitory concentration; b, semisolid media (0.7 % w/v agar); c, Brucella Agar (Difco, Sparks, MD, USA) supplemented
with 0.05 mgmL hemin, 0.01 mgmL-1 menadione, and 5 % sheep blood; d, Brain Heart Infusion (Difco) supplemented with 0.5 %
yeast extract (Difco), 0.05 mgmL-1 hemin (Inlab, So Paulo, SP, Brazil), and 0.01 mgmL menadione (Inlab); e, Mueller Hinton Agar
(Difco);
, Tryptic Soy Broth (Difco);
, Mueller Hinton Agar (Difco) supplemented with 5 % sheep blood.
flowers employing methanol and ethanol and of the
Results and Discussion
fractions originated from the partition of ME revealed
Antimicrobial resistance is one of the most serious

health
threats
worldwide
with
unpredictable
consequences. The spread of drug resistance among

clinically relevant bacteria emphasizes the need for
searching for alternative antimicrobial agents. The
main advantage of natural products is that crude
extracts contain a mixture of compounds like phenols,
acids, esters, aldehydes etc. differently from synthetic
antimicrobial drugs that contain a single active
principle. This feature makes the development of
resistance unlike to occur (Rao et al., 2010).
the presence of five classes of secondary metabolites

as depicted in the TABLE 2. Triterpenoids were the
most commonly found compounds, detected in all but
one fraction. On the other hand, steroids and
saponins were observed in only one extract/fraction
each. AF and AE, the extract employed in Brazilian
traditional medicine showed the higher diverse
composition
metabolites
represented
groups.
Both
by
of
three
secondary
them
presented
triterpenoids and flavonoids. In addition, alkaloids and

saponins were also observed in AF and AE,
respectively.
The phytochemical screening of the extracts obtained

from Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm.
189
TABLE 2. Groups of secondary metabolites in the extracts
the major phenolics detected in the seeds (Elzaawely,
and fractions of flowers from Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.
Xuan and Tawata, 2007). The decoction of aerial
Burtt & R.M. Sm.
parts of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M.

Sm. showed the presence of flavonoids (Macedo et
al., 2012). Steroids were found in the acetone extract
Extracts its fractions

Secondary
metabolites
from rhizomes, stems, leaves, flowers, pericarps, and

AE
ME
HF
DF
AF
BF
Steroids
Triterpenoids
Saponins
seeds of the plant (Chompoo et al., 2012). To the best

of our knowledge, alkaloids and triterpenoids have
not been detected in Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.
Burtt & R.M. Sm. yet.
Sinusitis is a highly prevalent respiratory disease that
frequently presents infectious origin. Considering that
Flavonoids
the Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm.
alcoholic extract is employed to treat sinusitis

Alkaloids
patients, the antibacterial activity of two extracts and
the derived fractions obtained from plant flowers
dichloromethane; e, ethyl acetate fraction; f, butanol fraction.
against
, alcoholic extract; b, methanol extract; c, hexane fraction; d,
12
bacteria
were
evaluated.
The
microorganisms selected for the study are associated

with the etiopathogenesis of acute and chronic
Several reports on different Alpinia zerumbet (Pers.)
B.L. Burtt & R.M. Sm. extracts have been previously
published. A phytochemical investigation of aqueous
extract of leaves from the plant revealed the presence
of flavonoids (Mpalantinos et al., 1998). According to
Zoghbi
and
collaborators
(1999),
the
major
component of the essential oil from the leaves and

flowers of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M.
Sm. was identified as terpinene-4-ol. The leaves also
showed limonene (25.1%) and terpinene (17.4%) and
in the flowers 1,8-cineole (23.1%) and sabinene
sinusitis in both pediatric and adult patients. Two

different methods were selected taking into account
the characteristics and availability of the material. The
agar dilution method was used whenever possible.
This assay is more informative since it generates
quantitative data. The fraction BF could not be tested
by this technique due to the small amount available.
Also the determination of MIC was also not possible
for AE since the extract was tested used as it is
prepared in the traditional medicine without any
quantitation procedure.
(14.5%) were also identified. The terpenes 1,8cineole, camphor, borneol, and methyl cinnamate
Data regarding the susceptibility testing of tested
were reported as main constituents of essential oils of
sinusitis-causing bacteria are presented in the TABLE
Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm.
3. The lower MIC value was observed for a polar
flowers, whereas the major components of seed oils
fraction, AF (32 g/mL against S. pneumoniae). In this
were alpha-cadinol, T-muurolol, alpha-terpinenol,
result, among the non-polar fractions, the lower MIC
delta-cadinene, and terpinene-4-ol. The analysis of
value was observed for HF (64 g/mL against P.
phenolic composition indicated that p-hydroxybenzoic
gingivalis, F. nucleatum, and F. necrophorum). This
acid, syringic acid, and ferulic acid predominated in
fraction inhibited 10 out of the 12 tested strains,
the ethyl acetate extract of plant flowers, while p-
showing the broader antibacterial activity spectrum
hydroxybenzoic acid, syringic acid, and vanillin were
which demonstrates that overall HF was the most
190

active fraction. ME, DF, and AF exhibited activity
and the M. catarrhalis, agents of acute and chronic
against eight bacterial strains each. The fraction BF,
sinusitis. It should be highlighted that S. agalactiae was
tested by the overlay method, showed activity against
not inhibited by any of the tested extracts and fractions
only four bacterial strains each. The same result was
obtained from flowers of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.
observed for the extract employed in the Brazilian
Burtt & R.M. Sm. On the contrary, P. intermedia
traditional medicine. AE exhibited activity against P.
showed susceptibility to all of them.
intermedia, P. aeruginosa, -hemolytic Streptococcus,
TABLE 3. Results of the antibacterial activity testing of extracts and fractions obtained from flowers of Alpinia
zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M. Sm.
Plant extractions, fractions and control

Bacterial strains
MEa,b
HFa,c
DFa,d
AFa,e
CMa,f
AEg,h
BFg,i
Porphyromonas gingivalis
256j
64
-k
+l
Prevotella intermedia
512
128
256
256
Peptostreptococcus anaerobius
512
128
256
256
Fusobacterium nucleatum
512
64
512
512
Fusobacterium necrophorum
64
512
Pseudomonas aeruginosa
256
256
512
256
128
Streptococcus agalactiae
Streptococcus pyogenes
256
512
Streptococcus pneumoniae
128
128
128
32
-hemolytic Streptococcus
512
128
256
256
Moraxella catarrhalis
512
128
256
256
0.5
, agar dilution method; b, methanol extract; c, hexane fraction; d, dichloromethane; e, ethyl acetate fraction; f,
chloramphenicol; g, overlay method; h, alcoholic extract; i, butanol fraction;.j, minimum inhibitory concentration (gmL-1);
k
, absence of activity; l, antibacterial activity.
191
Correa, Lima and Costa (2010) published a survey of
bacterial
agents
of
sinusitis.
Five
secondary
investigations on Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt &
metabolites have been detected in the extracts and
R.M. Sm. conducted from 1987 to 2008. They reported
fractions and up to three metabolites groups have been
the expression of activity against several bacteria by
observed in each extract/fraction. Data generated
extracts of different polarities obtained from leaves and
suggest that more than one of these metabolites group
rhizomes of the plant. Results from qualitative and
expresses antibacterial activity that may explain the
quantitative assays were presented. The hexane,
different activity spectrum of the extracts and fractions
chloroform, acetone, methanol, and hydroalcoholic
obtained. Taken together, the results indicate the
extracts were tested against eight bacteria; S. aureus,
potentiality of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt &
Bacillus subtilis, Enterococcus faecalis, Micrococcus
R.M. Sm. as a source of antimicrobial substances
luteus, Escherichia coli, P. aeruginosa, Serratia
against clinically relevant bacteria.
marcescens, and Mycobacterium smegmatis. The

chloroform extract of the rhizome showed good activity
against E. faecalis. Also significant activities were
Acknowledgments
reported for the acetone extract of the rhizome against
Authors are thankful to the financial support provided
S. aureus, B. subtilis, E. faecalis, and M. luteus. Halos
by Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de
exceeding 20 mm were obtained for all of them and
Nvel Superior (CAPES) and Fundao Universidade
MIC value was 500 gmL-1 for E. faecalis and 125
de Itana.
gmL-1 for the other three microorganisms.

This paper reports, for the first time, the bioactivity of
References
extracts and fractions from Alpinia zerumbet (Pers.)

B.L. Burtt & R.M. Sm. flowers against sinusitiscausing bacterial pathogens. The overall data
generated, demonstrate that the antimicrobial activity
of the two extracts and the derived fractions cover a
wide
range
of
bacteria
associated
with
the
etiopathogeny of the disease, indicating that the plant

may
be
an
important
source
for
alternative
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DOI 10.5935/2446-4775.20150016
Anlise morfomtrica dos tbulos seminferos de

camundongos suplementados com leo de alho
Morphometric analysis of seminiferous tubules of mice
supplemented with garlic oil
Alexandre Schneider Angioletti; Nilo Francisco Zancanaro Filho; Silvana Tomazoni de Oliveira
1
Universidade do Vale do Itaja UNIVALI
Correspondncia: nilozancanaro@hotmail.com
Resumo
Introduo: O alho (Allium sativum) amplamente utilizado na culinria e no tratamento e preveno de
diversas patologias. A literatura carece quanto toxicidade e os efeitos que o consumo exacerbado de alho
pode ocasionar no sistema reprodutor masculino. O leo de alho composto por compostos volteis presentes
em seus bulbos. Este estudo tem como objetivo avaliar a morfometria de tbulos seminferos de camundongos
suplementados com leo de alho. Metodologia: Foram tratados 32 camundongos BALB/c machos divididos em
4 grupos experimentais: 1,4 mg/kg (dose teraputica); 14 mg/kg; 28 mg/kg; e controle incorporado ao farelo de
rao. Aps o perodo experimental os animais foram sacrificados e tiveram os testculos removidos e pesados.
Aps os procedimentos padres para preparao das lminas histolgicas, foi medida a espessura dos tbulos
seminferos, atravs da distncia da parede at o lmen. Resultados e Discusso: Atravs das medies, no
foram observadas diferenas estatsticas que pudessem indicar alteraes nestas estruturas em animais
suplementados com leo de alho quando comparados aos animais do grupo controle. A partir deste estudo
conclui-se que camundongos suplementados com leo de alho, em diferentes doses, em um perodo de 35 dias,
no apresentaram alteraes na morfometria de tbulos seminferos que pudessem indicar toxicidade.
Palavras-chave: Alho; Allium sativum; tbulos seminferos; histologia; camundongos; fitoterpicos.
Abstract
Introduction: Garlic (Allium sativum) is widely used in cooking and in the treatment and prevention of various
diseases. The literature lacks for toxicity and the effects that excessive consumption of garlic can cause the male
reproductive system. The garlic oil comprises volatile compounds in their bulbs. This study aims to evaluate the
morphometric of the seminiferous tubules with garlic oil supplemented mice. Methods: We treated 32 BALB/c
mice divided into 4 experimental groups: 1,4 mg/kg (therapeutic dose); 14 mg/kg; 28 mg/kg; and control
incorporated into feed meal. After the experimental period, the animals were sacrificed and had their testes
195
removed and weighed. Following standard procedures for preparation of histological slides, we measured the
thickness of the seminiferous tubules through the distance from the wall to the lumen. Results and Discussion:
Through the measurements of the seminiferous tubules, no statistical differences could indicate changes in these
structures in animals supplemented with garlic oil compared with the control group were observed. From this
study it is concluded that supplemented mice with garlic oil, in different doses, for a period of 35 days, showed
no morphometric changes in the seminiferous tubules which could indicate toxicity.
Keywords: Garlic; Allium sativum; seminiferous tubules; histology; mice; phytotherapics.
mais notvel a alicina, responsvel pelo odor
Introduo
caracterstico do alho. Quando o alho cortado,
O Allium sativum, de nome popular alho, um

vegetal da famlia das Lilceas. uma planta
utilizada tanto na culinria como no tratamento e
preveno de doenas com registros datados desde
amassado ou modo, ocorre a lise da membrana

celular do bulbo, isto faz com que o composto
precursor alina (sulfxido de S-alil-L-cistena) entre
em contato com a enzima alinase formando a alicina
e
o perodo medieval (Leonz, 2008).
outros
tiossulfinatos.
Esses
compostos
da
decomposio enzimtica tm funo importante na

Caracteriza-se por um bulbo arredondado, conhecido
dieta, apresentando efeitos farmacolgicos contra
como cabea, composto por 10 a 12 bulbilhos
diversas patologias. A atividade teraputica
(dentes),
demasiadamente
envolto
por
uma
casca,
que
pode
extensa,
como
por exemplo,
apresentar colorao branca, rosada ou roxa.
combater patologias cardiovasculares e endcrinas,
Existem diferentes tipos de alho e quase todos
alm
diferem em relao a tamanho, cor, forma, sabor,
antifngico, anti-helmntico, antiviral e antineoplsico
nmero de dentes por bulbo e acidez. A botnica
(Katzung, 2010).
de
apresentar
carter
antimicrobiano,
classifica todos os tipos de alho derivados da espcie

Allium sativum. Desta espcie originam-se duas
subespcies: a ophioscorodon e a sativum. Destas
duas subespcies existem oito variedades de alho:
seis do tipo ophioscorodon e dois do tipo sativum.
Abaixo dessas oito variedades existem outros 17
grupos de sub-variedades de alho; acredita-se que
existem mais de 600 sub-variedades de alho no
mundo. Isso ocorre porque as caractersticas
individuais do alho so modificadas de acordo com
as condies de cultivo, do solo, da temperatura, do
perodo de chuvas, da altitude e do tempo de cada
lugar (Revista Aditivos e Ingredientes, 2010).
A atividade farmacolgica do alho envolve uma
variedade de compostos de organoenxofre, destes o
196
Os
fitoterpicos
so
medicamentos
obtidos
exclusivamente a partir de matrias-primas ativas

vegetais (Brasil, 2004). A utilizao de plantas para
fins teraputicos uma das mais antigas formas de
prtica medicinal da humanidade (Veiga Jr., Pinto e
Maciel, 2005). Ao longo dos sculos os produtos de
origem
vegetal
tratamento
constituram
das
mais
as
bases
diversas
para
patologias
(Hohenberger et al., 2012).

Na terapia contempornea observa-se crescente
redescoberta do valor das plantas medicinais para a
cura,
preveno
tratamento
de
patologias.
Entretanto, o uso incorreto desses fitoterpicos pode

causar danos sade do indivduo. Desta forma,
estudos envolvendo propriedades e toxicidade de
ingesto de um a dois dentes de alho cru por dia
plantas com propriedades medicinais tm sido
considerada segura para adultos (Silva, 2009).
exaustivamente investigadas.
H milhares de anos os leos essenciais so extrados
Os herbanrios e curandeiros utilizam o alho para
de plantas e usados nas indstrias de perfumes,
combater inmeras doenas h milhares de anos. H
cosmticos e frmacos. So fraes volteis, naturais,
indcios de seu uso no antigo Egito, na Grcia (onde
extradas de plantas aromticas que evaporam
era conhecido como rosa fedida) e na Babilnia h
temperatura ambiente. Os leos essenciais so
mais de cinco mil anos. Foi Hipcrates o primeiro a
geralmente extrados das plantas nas partes areas
descrever com detalhes o uso teraputico do alho,
(folhas e ramos finos), cascas, troncos, razes, frutos,
como diurtico e laxante. Plnio e Galeno, mdicos
flores, sementes e resinas (Santos et al., 2004). O leo
romanos,
de alho (Allium sativum) composto por leos volteis
tratamento de infeces intestinais, problemas
presentes em seus bulbos, cuja composio inclui os
digestivos, hipertenso, senilidade e impotncia.
compostos como o dialilsulfeto, dialildisulfeto e
Atualmente, mdicos naturalistas e outros adeptos
dialiltrisulfeto (Herbarium, 2013).
tambm
utilizavam
alho
para
da cura pelas ervas receitam o alho para prevenir

resfriados, gripes e outras doenas infecciosas
J so de domnio e conhecimento popular os
(Revista Aditivos e Ingredientes, 2010).
inmeros benefcios comprovados que o consumo de

alho traz sade. Entretanto, a literatura carece de
Os compostos ativos do alho mostram-se eficazes
informaes quanto toxicidade e os efeitos que o
quanto preveno de doenas cardiovasculares:
consumo exacerbado de alho pode ocasionar, em
aumentam os nveis sricos de HDL (colesterol
especial, ao sistema reprodutor masculino.
bom), reduzem as taxas de triglicerdeos, inibem a

possurem
Estudos recentes que investigaram os efeitos da
propriedades hipoglicemiantes. Estudos em relao
utilizao do leo de alho, na gestao de fmeas de
ao potencial antimicrobiano do alho mostraram-se
camundongos da linhagem Swiss, demonstraram
eficaz no combate da Helicobacter pylori, bactria
que a administrao diria desta substncia, em
responsvel pela maioria dos casos de dispepsia
doses mais elevadas do que aquelas recomendadas
(dificuldade de digesto), cncer gstrico e tambm
terapeuticamente, causou reduo da taxa de
de lceras gstricas e duodenais (Machado et al.,
implantao, viabilidade fetal e diminuio do peso
2010). Entretanto, a atividade antifngica do alho
dos fetos, embora no tenham apresentado ms
mais intensa do que a sua atividade antibacteriana
formaes externas (Macedo, 2012).
agregao
plaquetria,
alm
de
(Simes et al., 2010). Alguns dos princpios ativos do

alho inibem as nitrosaminas, substncias txicas
associadas ao cncer de estmago (Prati, 2012).
A partir destes resultados, que sugeriram a toxicidade

do leo de alho em fmeas gestantes, surgiu o
interesse em investigar a toxicidade no sistema
Apesar de o alho ser amplamente utilizado tanto na
reprodutor de camundongos machos, neste caso, em
culinria quanto para fins medicinais, o seu consumo
especial, nos testculos.
excessivo pode provocar efeitos adversos tais como,

transtorno gastrointestinal, flatulncia e mudanas na
flora intestinal. No h um consenso bem estabelecido
quanto ingesto diria recomendada, entretanto, a
Os efeitos colaterais do consumo de alho sobre as

funes
reprodutivas
investigadas.
Neste
permanecem
contexto,
estudos
pouco
recentes
197
evidenciaram que o consumo bruto, durante um ms,
As
de alho cru em doses de 5%, 10%, 15% e 30%,
espermatognias,
ocasionaram a reduo da secreo de testosterona e
prximo extremidade basal das clulas de Sertoli,
alterou a espermatognese de roedores (Hammami et
logo acima da lmina basal dos tbulos seminferos.
clulas
germinativas,
so
conhecidas
encontradas
como
agrupadas
al., 2008). Outros estudos apontaram que a ingesto
Elas sofrem divises mitticas produzindo clulas
de doses em 5%, 10% e 15% de alho cru induziu a
germinativas adicionais, onde algumas permanecem
apoptose em clulas germinativas testiculares de
prximo da borda externa do tbulo para produzir as
roedores provocando a inibio da expresso de
futuras espermatognias, e outras entram em meiose
enzimas das clulas de Leydig e marcadores das
clulas de Sertoli (Hammami et al., 2009).
espermatcito primrio sofre meiose e se divide em
tornam-se
espermatcitos
primrios.
Cada
dois espermatcitos secundrios. Destes, cada um

Ao investigar os efeitos do extrato aquoso de alho
se divide em duas espermtides. As espermtides,
sobre a morfologia testicular em ratos albinos,
que contm 23 cromossomos simples, amadurecem
Obidike e colaboradores (2012) observaram um
formando os espermatozoides que so liberados
aumento na reserva de esperma no epiddimo. Estes
dentro do lmen dos tbulos seminferos. O
resultados, de acordo com o autor do trabalho,
desenvolvimento dos espermatcitos ocorre em
sugerem que o alho possa ser utilizado para melhorar
colunas, da borda externa do tbulo em direo ao
a fertilidade masculina.
lmen. Entre cada coluna existe uma nica clula de

Sertoli que se estende da borda externa at o lmen
O sistema reprodutor masculino composto de

testculos, da genitlia interna (glndulas acessrias
e ductos) e da genitlia externa. Os testculos so
estruturas pares ovoides e possuem uma cpsula
externa fibrosa resistente que envolve uma massa de
tbulos seminferos enrolados e agrupados em cerca
de
250
300
compartimentos.
Os
tbulos
seminferos constituem aproximadamente 80% da

massa testicular de um homem adulto. Cada tbulo
do tbulo. Circundando o lado de fora do tbulo existe

uma lmina basal que atua como barreira, impedindo
que algumas molculas, presentes do lquido
intersticial, entrem no tbulo seminfero. Esta lmina
basal permite a entrada da testosterona, produzida
pelas clulas de Leydig, que se encontram na parte
externa do tbulo, onde existe um tecido intersticial
que consiste principalmente em vasos sanguneos e
estas clulas (Silverthorn, 2010).
individual tem 0,3 a 1 metro de comprimento e o

local de produo dos espermatozoides. No interior
dos tbulos seminferos podem ser visualizados dois
Materiais e Mtodo
tipos de clulas: as clulas germinativas em vrios

estgios de maturao e as clulas de Sertoli, que
regulam o desenvolvimento dos espermatozoides. A
espermatognese,
que
processo
de
desenvolvimento da espermatognia at a liberao

do espermatozoide, ocorre em cerca de 60 dias em
humanos (Silverthorn, 2010). Em camundongos este
processo leva cerca de 40 dias para ser finalizado
(Nagy et al.,2003).
Para os testes foram utilizados 32 camundongos

BALB/c machos (3 meses de idade) pesando entre
22 a 26g, provenientes do Biotrio da Universidade
do Vale do Itaja (UNIVALI). O projeto foi aprovado
pelo Comit de tica no Uso de Animais (CEUA
UNIVALI), sob o parecer n 014/12. Os animais foram
mantidos sob temperatura controlada a 22 2C e
com fotoperodo de 12 horas, com gua e rao ad
libitum, exceto durante o procedimento experimental.
Os animais foram distribudos em 9 caixas conforme
198
os grupos e as doses administradas. As caixas foram
Os animais foram tratados durante um perodo
forradas com maravalha, que so lminas finas de
experimental de 35 dias, perodo que compreende um
madeira, a fim de manter o ambiente interno livre da
ciclo da espermatognese em camundongos (Nagy et
umidade
que
al., 2003). Os grupos tratados receberam o leo de
certamente de maneira contrria desfavoreceriam o
alho incorporado ao farelo de rao umedecido com
bem estar dos animais. Alm disto, houve o
gua no perodo matutino, aps um perodo de jejum
fornecimento de papel toalha para enriquecimento
de 12h. Este protocolo de jejum foi estabelecido para
ambiental e para construo de ninhos, prtica esta
que se tivesse a garantia de que os animais comeriam
adotada em todos os protocolos experimentais do
todo farelo e desta forma o tratamento acontecer de
Laboratrio de Reproduo Assistida, local onde o
acordo com o padro pr-estabelecido. Aps todo o
protocolo experimental foi desenvolvido.
consumo da rao com o tratamento a rao
provocada
pela
urina
fezes
convencional retornava as caixas e assim permanecia

Os estudos in vivo foram realizados de acordo com
durante o restante do dia e, novamente, retirada
as normas e cuidados com o bem estar e
durante o perodo noturno. Os grupos testes foram
biossegurana
organizados da seguinte maneira:
na
experimentao,
conforme
descritas na Lei n 11.794, de 08 de outubro de 2008,

e de acordo com as diretrizes da Sociedade brasileira
Grupo 1 Controle (8 camundongos): receberam
de Cincia em Animais de Laboratrio (SBCAL).
somente gua filtrada em volume igual ao tratamento

incorporada ao farelo de rao durante 35 dias.
Para o tratamento foi utilizado leo de alho (Allium

sativum) adquirido em farmcias de manipulao. As
Grupo 2 Dose Teraputica (8 camundongos):
doses
por
receberam a dose teraputica correspondente a
extrapolao alomtrica, que significa estabelecer
posologia utilizada para seres humanos (1,4 mg/kg)
atravs de clculo matemtico as doses de frmacos
incorporada ao farelo de rao, durante 35 dias.
administradas
foram
calculadas
entre animais de grupos taxonmicos diferentes,

possibilitando o uso das referncias farmacolgicas
Grupo 3 Dose 10x (8 camundongos): receberam
de um animal modelo para um animal alvo. Essa
10x a dose teraputica (14 mg/kg) incorporada ao
metodologia
farelo de rao, durante 35 dias.
utiliza
taxa
metablica
basal,
possibilitando calcular doses em miligramas por

quilocaloria
consumida
pelo
animal
(mg/kcal)
Grupo 4 Dose 20x (8 camundongos): receberam

20x a dose teraputica (28 mg/kg) incorporada ao
(Pachaly, 2006).
farelo de rao, durante 35 dias.

De acordo com as diretrizes estabelecidas pela
Organisation
for
Economic
Co-operationand
Development - OECD (1996) para teste de produtos

qumicos, as doses administradas seguiram uma
sequncia descendente dividida em trs grupos de
teste e um grupo controle. Os animais foram tratados
com diferentes doses de leo de alho, baseando-se
na dose teraputica para seres humanos que de
500 mg/dia que equivale a 7,350 mg/kg/dia de alho
cru, considerando um adulto de 70kg.
Aps o
trmino do perodo
experimental
os
camundongos foram sacrificados em cmara de

O2/CO2. Os testculos foram coletados e tiveram seus
pesos registrados. Aps a pesagem deu-se incio aos
processamentos para anlise histolgica, adaptados
de Banzato (2010). Os testculos esquerdos foram
imersos em formol 10% por 10 horas para fixao.
Em seguida, foram removidos do fixador e cortados
transversalmente em trs pedaos. As extremidades
199
dos testculos foram desprezadas e somente a
poro mediana foi considerada para a anlise

histolgica. Aps 72 horas no formol, a soluo foi
substituda por lcool 70, para sofrer o processo de
desidratao. Aps 24 horas em lcool 70, as peas
receberam
quatro
banhos
nas
concentraes
alcolicas de 90 - 90 - 100 - 100 no perodo de 24

horas. Depois de 24 horas em lcool 100, em cada
pea foram aplicados trs banhos de xilol, com
durao de 30 minutos cada banho. Aps os banhos
em xilol, as peas receberam trs banhos de
O alho uma planta que vem sendo cultivada e

consumida pelos seres humanos h muitas dcadas.
Alm do seu uso na culinria para realar e recriar o
sabor dos alimentos o alho igualmente popular por
conta dos benefcios que o seu consumo pode trazer
para a sade reduzindo o mau colesterol e a presso
arterial. O alho tambm tem sido utilizado no combate
a infeces, como vermfugo e tambm no combate
a fungos do gnero Aspergillius encontrado em
amendoins que quando consumido por humanos
parafina, com durao de 1 hora cada banho.
podem causar cncer heptico (Viegas et al., 2005).

Concludo os banhos, as peas foram includas
transversalmente em parafina. Com a utilizao do
micrtomo, os blocos de parafina com as peas
includas foram submetidos a cortes histolgicos de
7m (micrmetros) de espessura. A partir da, foram
realizados os procedimentos do protocolo padro de
colorao H&E (hematoxilina e eosina) para posterior
Por possuir antioxidantes e flavonoides, compostos

extrados a partir do alho, tem sido utilizado, tambm,
pela indstria de cosmticos no combate ao
envelhecimento. Acredita-se que a maioria dessas
propriedades atribudas ao alho se deve riqueza de
substncias
sulfurosas
presentes
na
sua
composio. Entretanto, o consumo excessivo desta
anlise em microscpio ptico de luz.
planta pode trazer efeitos indesejveis ao trato

Para a anlise foi confeccionada uma lmina para cada
gastrointestinal, e isto tambm j conhecido. No
testculo, obtido dos animais de cada grupo. Cada
h um consenso estabelecido quanto dose diria
lmina correspondente ao testculo de um nico animal
recomendada (Silva, 2009).
contendo 5 seces histolgicas. O intervalo entre cada

seco histolgica foi de 10 m (micrmetros). Em cada
seco
histolgica
foram
analisados
tbulos
seminferos. Os tbulos seminferos selecionados para

anlise foram os que se encontravam no parnquima
cortical do testculo por conta da sua uniformidade. Em
cada estrutura foi realizada a medio da distncia da
parede externa at o lmen do tbulo seminfero
utilizando-se a lente objetiva que fornece um aumento
ampliado 400X. As medies foram realizadas em
microscpio ptico de luz com a utilizao de ocular
micromtrica OSM 221817.
testes estatsticos por anlise de varincia (ANOVA).

Todas as anlises foram avaliadas com confiana de
200
importantes para a determinao de efeitos adversos

e/ou txicos, j que existe uma grande quantidade de
fitoterpicos disponveis para consumo no mercado e
para a maioria deles no h dados suficientes que
comprovem cientificamente a veracidade dos seus
efeitos (Turolla e Nascimento, 2006).
Quanto toxicidade e os efeitos que o consumo
exacerbado de alho pode ocasionar, h escassez na
literatura, em especial, referentes ao sistema
reprodutor masculino. A toxicidade reprodutiva est
Os parmetros registrados foram submetidos a
95% ( =0,05).
Estudos sobre toxicologia clnica de fitoterpicos so
relacionada
com
qualquer
interferncia
na
capacidade reprodutiva, tanto em machos quanto em

fmeas, provocada por um agente causador da
toxicidade. A avaliao toxicolgica utilizada para
analisar resultados experimentais de um composto
pr-testicular
envolve
alteraes
no
eixo
com o objetivo de classific-lo e ao mesmo tempo
hipotalmico-hipofisrio-gonadal, com impedimento
obter informaes a respeito da forma correta quanto
da dinmica hormonal necessria ocorrncia da
sua utilizao.
espermatognese. Efeitos citotxicos e genotxicos

nas clulas da linhagem germinativa caracterizam os
Os ensaios pr-clnicos de toxicidade reprodutiva
efeitos testiculares (Oshio e Guerra, 2009).
avaliam o potencial de uma determinada substncia

em interferir sobre o sistema reprodutor e causar
A histopatologia testicular um dos parmetros mais
efeitos indesejveis capazes de comprometer a
sensveis para avaliar as possveis alteraes na
fertilidade,
fertilidade
acasalamento,
desenvolvimento
masculina.
Aspectos
degenerativos
embriofetal, o parto e o desenvolvimento ps-natal dos
testiculares podem ser identificados em seces
descendentes at maturidade sexual (Santos, 2012).
coradas por hematoxilina e eosina. A exemplo disso,

a hipocelularidade e a morte celular no epitlio
Para se avaliar o efeito txico causado por uma
seminfero, a formao de clulas multinucleadas
substncia pode ser analisado alteraes do peso
(clulas gigantes compostas de espermatcitos e
corporal e de rgos como fgado, bao, rins e
espermtides) e a presena de espermtides
gnadas (Reboredo et al., 2006).
arredondadas e restos celulares no epiddimo (Oshio

e Guerra, 2009).
Estudos realizados por Souza, Silva e Amaral (2013)

onde foi utilizado a suplementao com leo de alho,
Realizadas as medies dos tbulos seminferos
em camundongos, no foram observadas mudanas
(parede externa at o lmen) atravs da microscopia
fsicas
pudessem
ptica, no foram observadas diferenas estatsticas
caracterizar sinais de toxicidade sistmica nos
que pudessem indicar alteraes morfolgicas nestas
grupos estudados. O peso dos rins e do fgado no
estruturas em animais suplementados com leo de
foi diferente do encontrado no grupo controle.
alho com relao aos animais do grupo controle.
e/ou
comportamentais,
que
Alteraes no peso e morfologia do fgado so bons

indicadores de toxicidade, por ser este o rgo que
detm
grande
concentrao
de
enzimas
responsveis pela detoxificao dos agentes txicos

atravs dos hepatcitos (OGA, 2003).
No presente estudo os animais do grupo controle e
os animais tratados com Allium sativum tambm no
apresentaram alteraes significativas no peso
corporal. Um estudo similar realizado por Santiago e
colaboradores
(2009)
para
avaliar
alteraes
cardiovasculares em ratos tratados com alho (125

mg/Kg por via oral) no apresentou diferena nos
valores do peso corporal.
Os agentes nocivos podem exercer seus efeitos ao
nvel pr-testicular, testicular e ps-testicular. O nvel
FIGURA 1. Microscopia ptica do tbulo seminfero em

aumento de 400x, referente aos animais do grupo controle.
201

aumento de 400x, referente aos animais do grupo Dose
Teraputica (1,4 mg/kg).

aumento de 400x, referente aos animais do grupo Dose 20x
(28 mg/kg).
Tanto os animais do grupo controle quanto os

animais dos grupos que foram suplementados com
doses especficas de leo de alho, mostraram suas
caractersticas
morfolgicas
inalteradas,
no
apresentando sinais de toxicidade durante o perodo

de 35 dias de tratamento. Os valores das medies
dos tbulos seminferos e peso dos testculos
encontram-se nas TABELAS 1 e 2.

aumento de 400x, referente aos animais do grupo Dose 10x
(14 mg/kg).
202
TABELA 1. Mdia geral e valor mximo/mnimo das medidas (m) dos tbulos seminferos relacionado com os respectivos
grupos (Controle, Teraputica, 10x, 20x).
Controle
(gua)
Teraputica
(1,4 mg/kg)
10x
(14 mg/kg)
20x
(28 mg/kg)
80
80
80
80
243 27
270 25
265 27
272 15
Mximo
308
321
324
307
Mnimo
200
211
220
232
Dose
N de tbulos seminferos
analisados por grupo
Mdia e Desvio Padro
TABELA 2. Mdia geral e valor mximo/mnimo dos pesos (g) dos testculos dos 32 camundongos utilizados na pesquisa,
sem distino por grupo-dose.
Testculo
Direito
Esquerdo*
32
32
0,087 0,007
0,088 0,008
Mximo
0,101
0,112
Mnimo
0,072
0,073
Total de testculos Pesados
Mdia e Desvio Padro
* Testculo utilizado na pesquisa
Estudos com o leo de alho realizados por Souza,
Obidike e colaboradores (2012), que analisaram a
Silva e Amaral (2013), comprovaram que o peso dos
morfologia testicular em ratos albinos, sugeriram que
testculos e ndice gonadossomtico permaneceram
o extrato aquoso de alho resultou em uma melhora
inalterados
significativa, ao observar um aumento na reserva de
assim
como
os
parmetros
espermticos, corroborando com os resultados
esperma no epiddimo.
encontrados neste trabalho.
203
Estudos existentes a respeito do Allium sativum em
HAMMAMI,
diferentes doses de alho cru apresentaram toxicidade
C.; BENAHMED, M.; AMRI, M.; BEN A., A.; ZEKRI,
significativa
de
S.; EL MAY, A.; EL MAY, MV. 2008. The inhibitory
camundongos machos (Hammami et al., 2008,
effects on adult male reproductive functions of crude
2009). A eficcia quanto teraputica do alho na
garlic (Allium sativum) feeding. Asian Journal of
preveno das mais diversas patologias vem sendo
Andrology, China, v. 10, n. 4, p. 593-601.
nas
funes
reprodutivas
I.;
NAHDI,
A.;
MAUDUIT,
divulgadas e pesquisadas ano aps ano. A cada dia

surgem
novos
metodologias
protocolos
de
trabalhos
apresentando
pesquisas
experimentais
com
novas
padres
aprimorados.
Novos
HAMMAMI, I.; AMARA, S.; BENAHMED, M.; EJ MAY,

M.; MAUDUIT, C. 2009. Chronic crude garlic-feeding
modified
adult
male
rat
testicular
markers:
estudos podero confirmar ou questionar os dados j
mechanisms of action. Reprod. Biol. Endocrinol,
existentes e assim determinar qual a melhor forma de
Londres, v. 7, p. 65.
preparo e dosagens necessrias de alho para a

obteno de seus efeitos, ou mesmo se apresentar
HERBARIUM Laboratrio Botnico LTDA. 2013.

LEO DE ALHO (bula). Dra. Anny M. Trentini. CRF-
efeitos txicos.
PR n 4081. Colombo.
A partir deste estudo, foi possvel concluir que em
camundongos suplementados com leo de alho em
diferentes doses em um perodo de 35 dias, no
apresentaram toxicidade significativa na histologia
HOHENBERGER, G.F.; GROSSELLI, F.; KRANN,

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206
FARMACOLOGIA
DOI 10.5935/2446-4775.20150017
Antioxidant and antimicrobial properties

ethanolic extract of Libidibia ferrea pods
of
Propriedade antioxidante e antimicrobiana do extrato etanlico

de vagens de Libidibia ferrea
1Patrcia
2Silvana
L. A. Nascimento; 2Talita C. E. S. Nascimento; 2Jos E. G. Gomes; 2Mitaliene D. S. Silva;

A. Souza; 3Tania M. S. Silva; 4Rosangela A. Falco; 5*Keila A. Moreira
Faculty of Odontology, Caruaruense Association of Higher Education.
Departments of Morphology and Animal Physiology, Federal Rural University of Pernambuco.
3 Department of Molecular Sciences, Federal Rural University of Pernambuco.

4 Department of Biological Sciences, University of Pernambuco.
5 Academic Unit of Garanhuns, Federal Rural University of Pernambuco.
* Corresponding author: moreirakeila@hotmail.com
Abstract
Libidibia ferrea is a typical plant of northern and north-east Brazil and has well-known medicinal properties that
can be found in ethanolic extracts such as antipyretic, anti-inflammatory and anti-rheumatic compounds. This
study seeks to evaluate the potential antioxidant and antimicrobial activity of ethanol extracts from Libidibia ferrea
pods. The pods were used for the preparation of ethanolic extracts of L. ferrea which is used to determine
biological activity, and measure their total phenolic content. For quantification of antioxidant methods of DPPH,
ABTS and -carotene were employed and the method of minimum inhibitory concentration (MIC) to measure the
antimicrobial activity. The ethanolic extract of L. ferrea showed excellent antioxidant activity, as well as other
similar substances commonly used for this purpose such as citric acid and trolox. In addition, it had antimicrobial
activity against Gram-negative and Gram-positive bacteria.
Keywords: pau ferro; Caesalpinia ferrea; medicinal properties; antioxidant.
Resumo
Libidibia ferrea uma planta tpica do norte e nordeste do Brasil conhecida por suas propriedades medicinais
que podem ser encontrados em extratos alcolicos, possui compostos antipirticos, anti-inflamatrios e
antirreumticos. Este estudo visa avaliar o potencial antioxidante e atividade antimicrobiana do extrato etanlico
de vagens de Libidibia ferrea. As vagens foram empregadas na preparao de extrato etanlico de L. frrea,
utilizado na determinao da atividade biolgica, e para mensurar seu contedo fenlico total. Os mtodos
207
DPPH, ABTS e -caroteno foram utilizados para quantificar a atividade antioxidante, e o mtodo da
Concentrao Inibitria Mnima (CIM) para avaliar a atividade antimicrobiana. O extrato etanlico de L. ferrea
apresentou atividade antioxidante excelente, bem como outras substncias compatveis normalmente utilizadas
para este fim, tais como cido ctrico e trolox. Alm disso, demonstrou atividade antimicrobiana contra bactrias
Gram-negativas e Gram-positivas.
Palavraschave: pau ferro; Caesalpinia ferrea; propriedades medicinais; antioxidante.
inflammatory and analgesic actions, which confirms
Introduction
its popular use and ethnomedicinal value (Carvalho
The basionym of Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.) L. P.

Queiroz (Leguminosae) is Caesalpinia ferrea Mart. ex
Tul. (Caesalpiniaceae) according to the International
Plant Names Index, 2009, (http://www.ipni.org/). It is
a large tree that is found in the north and north east
regions of Brazil, especially Pernambuco and Cear
states, where it is commonly known as juca or pau
ferro (Peters et al., 2008).
contains compounds which have antimicrobial, antianalgesic,
The crude extract of Caesalpinia ferrea contains

anthraquinones, alkaloids, depsides, depsidones,
flavonoids, lactones, saponins, sugars, tannins,
sesquiterpenes
and
triterpenes.
Tannins
are
considered as the main component (Souza et al.,

2006). Phenolic compounds, such as tannins and
flavonoids, have antimicrobial and antioxidative
Recent scientific studies have shown that L. ferrea
inflammatory,
et al., 1996; Pereira et al., 2012).
antioxidant
and
hypoglycemic properties (Ferreira and Soares, 2015).

It is used in folk medicine to treat diabetes, as
antipyretic and antirheumatic, anti-inflammatory and
antinociceptive activities have already been found in
the ethanol extract of the fruits of this species
(Vasconcelos et al., 2011; Lima et al., 2012).
properties and are involved in the defence against

fungi and other microorganisms (Oliveira et al., 2010).
For centuries, extracts from plants have been used as
folk remedies to treat various ailments, with many
natural products leading to the development of
clinically beneficial drugs (Siqueira et al., 2012).
Organisms that belongs to the vegetable kingdom are
those that have contributed most significantly to
providing compounds which possess a large spectrum
The aqueous extract of the seeds of C. ferrea have

cellulase, amylase, anticoagulant and larvicide activities
against A. aegypti (Cavalheiro et al., 2009). In the
Amazon region of Brazil, the fruits of C. ferrea (Brazilian
ironwood) are widely used as an antimicrobial and
healing medicine to treat many ailments including oral
infections (Sampaio et al., 2009).
of biological properties (Cavalheiro et al., 2009).

The aim of this study is to evaluate the potential of
both antioxidants, as the antimicrobial properties of
ethanolic extracts obtained from the pods of Libidibia
ferrea, are indicative of the presence of chemical
compounds that may be used in various branches of
industrial biology.
Phytochemical studies have reported that aqueous

extracts of Caesalpinia ferrea pods and barks consist
of a mixture of different compounds with anti-
208
Antioxidant and antimicrobial properties of Libidibia ferrea pods

Patricia Nascimento, Talita Silva, Jos Gomes, Mitaliene Silva, Silvana Souza,
Rosngela Falco, Tania Silva, Keila Moreira
(Slinkard and Singleton, 1977) with modifications.
Materials and Methods
Gallic acid was used as a standard. Briefly, 300 l of a

Plant material
solution of the ethanolic extract (1 mg.mL-1) was added
The pods (peel and seeds) of Libidibia ferrea (Mart. ex

Tul.) L. P. Queiroz (Leguminosae) were collected from
the town of Garanhuns, State of Pernambuco, in NorthEast Brazil. A sample of the collected material was
classified and filed (Specimen Number 89749), at the
Herbarium DArdano de Andrade Lima, Institute of
Agronomy, Pernambuco - IPA, Pernambuco, Brazil. It
was dried at 40C in a Circulated Air Incubator for 48
hours, grounded in a grinder and stored to -20 C.
Tryptic Soy Broth -TSB (Acumedia, Lansing, USA),

Meller-Hinton Broth (HIMEDIA, Mumbai, India),
sulfoxide
(FMaia,
Cotia,
Brazil),
chloramphenicol (Ariston, So Paulo, Brazil) were

used and all the solvents were HPLC commercial
grade. The -carotene, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl
(DPPH),
linoleic
acid,
6-hydroxy-2,5,7,8-
tetramethylchroman-2-carboxylic
acid
potassium
2,2-azinobis-(3-
persulfate,
(Trolox),
ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS), gallic

acid,
and
distilled water, and this mixture was stirred for 1 minute.

Following this, 180 l of sodium carbonate (2%) was
added to the mixture, which was then shaken for 30
seconds, and resulted in a final concentration of 100
g/ml. After two hours of incubation, the absorbance of
each sample was determined spectrophotometrically
at 760 nm. The results were expressed as mg of gallic
acid equivalents (GAE)/g of extract.
DPPH free radical scavenging assay
Reagents
dimethyl
to 60 l of the Folin-Ciocalteu reagent and 2460 l of
the
FolinCiocalteu
reagent
were
purchased from SigmaAldrich (St. Louis, USA).

Preparation of the extract
The free radical scavenging activities of the samples

were determined by means of the 2,2,-diphenyl-2picrylhydrazyl (DPPH) spectrophotometric method in
accordance with the study of Silva and collaborators
(2011). This method is often used to determine the
ability of plant species to capture free radicals
(Ghasemnezhad, Sherafati and Payvast, 2011).
A stock solution of the ethanolic extract of L.ferrea
pod was prepared at 5.0 mg/ml. The appropriate
amounts of an ethanolic solution of DPPH (23.6
g/ml) were added to samples to obtain final
concentrations ranging from 100 to 500 g/ml. The
absorbance was measured at 517 nm after an
incubation interval of 30 min with ultrasonication in the
The ethanolic extract of the L. ferrea pod was obtained
dark. The EC50 value is the sample concentration
by repeated soaking under agitation in ethanol P.A. at
necessary to reduce the absorbance of DPPH by
a ratio of 1:10, until the depletion of substances
50%; ascorbic acid was used as a standard.
extractable by ethyl alcohol. For the concentration of

the extract, ethanol was removed from the filtrate using
a rotary evaporator at 40C under reduced pressure.
Determination of the total phenolic content
ABTS radical cation assay

This test involves the generation of the ABTS
chromophore + by oxidation of ABTS [2,2'-azinobis(3-ethyl-benzothiazoline-6-sulfonic
acid)]
with
The determination of the total phenolic content present
potassium persulfate. The test was performed
in the ethanolic extract of L. ferrea pods was carried out
according to the method of Re and collaborators
by the Folin- Ciocalteu spectrophotometric method
(1999) with modifications. ABTS was dissolved in
209
water at a concentration of 7 mM. The ABTS radical
The microbial strains used belong to Gram positive
cation (ABTS+) was produced by reacting ABTS
families
stock solution with 2.45 mM potassium persulfate
Enterococcus faecalis ATCC 6057, Bacillus subtilis
(final concentration) and allowing the mixture to stand
UFPEDA
in the dark for 1216 h before use. After this, the
(Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumonia
ABTS+
ATCC
solution
was
diluted
with
ethanol
(Staphylococcus
86)
29665,
and
aureus
Gram
and
UFPEDA
negative
Pseudomonas
02,
families
aeruginosa
(approximately 1:100 v/v) until an absorbance of
UFPEDA 416) bacteria, which were acquired from the
0.70.05 nm was reached. A stock solution of the
Antibiotics Department of the Federal University of
ethanolic extract was prepared with a concentration
Pernambuco, Brazil.
of 1.0 mg/ml. An appropriate amount of ABTS+

(2700 l) was added to each sample to give final
The broth microdilution assay was performed in
concentrations ranging from 20 to 120 g/ml, and the
accordance with the CLSI reference method M7-A6,
samples were ultrasonicated in the dark after a period
for bacteria (Clinical Laboratory Standards Institute,
of 10 minutes. Then, the absorbance of the samples
2003). Ninety-six-well microplates were used to
was measured at 734 nm. Trolox (0.1 mg/ml) was
determine the MIC of the crude ethanolic extract of
used as a positive control.
Libidibia ferrea pod. Briefly, the crude extract was

dissolved in DMSO (1 mg/ml) and then diluted in
The -Carotene bleaching test
water to achieve concentrations ranging from

500g/ml to 25g/ml. The inoculum size was adjusted
The level of antioxidant activity was determined by
to each microorganism to yield a cell concentration of
conducting
and
108 CFU ml. A final volume of 100 l was achieved in
employing the method of Bamoniri and collaborators
each well. One well with a specific medium and
(2010) with modifications. A solution of linoleic -
microorganism was used as control of the growth, and
carotene/linoleic acid was prepared by adding an
one inoculated well was free of the test extract so that
aliquot of 150 l of -carotene solution to 160 l of
it could check the sterility of the media. The
linoleic acid and 660 l of Tween 20. After this, 140 ml
microplates were prepared in triplicate and incubated
of oxygenated distilled water was added to the system.
at 37C for 24 h. The MIC was determined by
The absorbance of this emulsion at 470 nm was
measuring the absorbance of each well with a
adjusted to 0.6 - 0.7 nm. Aliquots of the crude ethanolic
microplate reader (ASYS UVM 340, Cambridge, UK).
extract of L.ferrea pod (16 g/ml) were compared with
The MIC was defined as the lowest sample
the control (without an antioxidant) and to Trolox (16
concentration that inhibited bacterial growth in
g/ml), which was used as a standard antioxidant. An
proportion
initial
Chloramphenicol (50 g/ml) was used as a positive
the
reading
-carotene
of
the
bleaching
absorbance
test
was
taken
immediately after the samples and the standard were
to
the
growth
of
the
controls.
control for all the bacterial strains.
added to the system to determine the baseline.

Subsequently, the absorbance was monitored every
Statistical analysis
20 minutes for 120 minutes. The samples were kept in

a water bath at 40C between the readings. The
All the samples were analysed in triplicate, and the
antioxidant capacity was expressed as the percentage
results were pooled and expressed as the means
inhibition of oxidation.
standard error. A statistical analysis was performed

with
Determination of minimal inhibitory concentration
210
GraphPad
Prism
version
5.0
(GraphPad
Software Inc., San Diego CA, USA). The anti-free

radical activity was determined by conducting a linear
ferrea pods was evaluated to determine their total
regression analysis with a confidence interval of 95%
phenolic content by means of the Folin-Ciocalteu
(p<0.05). The results were expressed as EC50 SEM,
method; the radical scavenging activity was assessed
which represents the concentration of the sample
through
necessary to reduce the absorbance of DPPH or
antioxidant potential was measured through the -
ABTS+ by 50% compared with the negative control.
carotene bleaching test. TABLE 1 shows the free
DPPH
and
ABTS
assays
and
their
radical scavenging activity (DPPH and ABTS+) of

the ethanolic extract of the L. ferrea pod. The results
Results
demonstrated a high radical scavenging activity when
In choosing a suitable assay to investigate the
compared with a control of antioxidant capacity (trolox
antioxidant activity, ethanolic extract of Libidibia
and ascorbic acid).
TABLE 1. Free radical scavenging activity (DPPH and ABTS+) and total phenolic content of the ethanolic extract of L. ferrea pod.
Total Phenolic
(mg GAE/g extract SD)*
EC50 DPPH
(g /ml SD)
Ethanolic extract
Ethanolic extract
32.6 0.0
4.4 0.05
Ascorbic Acid
3.3 0.02
EC50 ABTS
(g /ml SD)
Ethanolic extract Trolox
2.5 0.06
2.9 0.05
*GAE/g extract - Gallic acid equivalent/g extract.
The antioxidant activity of the ethanolic extract of L.

ferrea which was determined by using the -carotene
bleaching test is shown in FIGURE 1. When the
extract activity is compared with the standard Trolox
which is a vitamin E analogue, it can be observed that
the antioxidant activity was excellent (46.63%).
The minimum inhibitory concentrations (MICs) in
g/ml for the ethanolic extract of L. ferrea pod, are
shown in TABLE 2. Our results reveal that all the
tested strains of Gram-positive and Gram-negative
bacteria were inhibited by the ethanolic extract of the
Libidibia ferrea pods.
FIGURE 1. Antioxidant activity of the ethanolic extract of L.
ferrea determined using the -carotene bleaching test. Black
columns Trolox (16 g/mL); white columns L. ferrea pod
ethanolic extract (16 g/mL).
211
TABLE 2. Minimal inhibitory concentrations (MIC) for the
tannins, coumarins, sterols and phenolic compounds
ethanolic extract of Libidibia ferrea pod tested on different
(Lima et al., 2012).
microorganisms.
The free radical scavenging of DPPH forms the basis

Concentrations (g.mL-1)
Microorganisms
of a common antioxidant assay (Sharma and Bhat,

2009). The DPPH (2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl-
Gram positive bacteria
hydrate) free radical method is an antioxidant assay

Enterococcus faecalis
50
Bacillus subtillis
50
125
based on electron-transfer that produces a violet

solution in ethanol. This free radical, which is stable
at room temperature, is reduced in size in the
presence of an antioxidant molecule, and gives rise
to a colourless ethanol solution. The use of the DPPH
Gram negative bactria
assay is an easy and fast way to evaluate

Escherichia coli
50
Klebsiella pneumoniae
125
Pseudomonas aeruginosa
50
antioxidants by spectrophotometry, so it might be a

useful way of assessing different products at the
same time (Huang, Ou and Prior, 2005). The extract
was able to reduce the stable free radical DPPH to
the yellow DPPH.
The ABTS assay is based on the generation of a
Discussion
blue/green
Antioxidant activity
ABTS+
that
can
be
reduced
by
antioxidants, and is applicable to both hydrophilic and
Phenolic compounds are commonly found in both

edible and inedible plants, and have multiple
biological effects, including antioxidant activity (Silva
et al., 2011).
lipophilic antioxidant systems. The ABTS assay is

superior to the DPPH assay when applied to a variety
of plant foods containing hydrophilic, lipophilic, and
high-pigmented antioxidant compounds, whereas the
DPPH assay uses a radical dissolved in organic
The total phenolic content value of this study was
media and is, therefore, applicable to hydrophobic
higher than that found by Oliveira and collaborators
systems (Floegel et al., 2011).
(2010) who identified a phenolic content of 0.151

0.005 mg GAE/g extract for C. ferrea wood extract.
However Surveswaran and collaborators (2007)
evaluated the total phenolic content of Caesalpinia
bonducella (L.) Roxb. Seeds and Caesalpinia sappan
L. heartwood and found 1.3 and 94.7 mg GAE/g dry
weight. The nature of the species, parts of the tree
and extraction techniques that were used may explain
the differences between the studies.
A
preliminary
phytochemical
analysis
the antioxidant capacities of Caesalpinia bonducella

(L.) Roxb. Seeds and Caesalpinia sappan L.
heartwood by ABTS and DPPH and their results were
0.61 and 0.13 mmol trolox/100g dry weight for C.
bonducella and 34.65 and 28.33 mmol trolox/100 g
dry weights respectively.
The health effects of medicinal plants can partly be
of
the
hydroalcoholic extracts of stem, bark and leaves of C.

Ferrea, showed the presence of flavonoids, saponins,
212
Surveswaran and collaborators (2007) evaluated all
attributed to the presence of phenolic compound,

which may have an effect as a result of their
antioxidant properties (Kaur, Arora and Singh, 2008).

Tannins and flavonoids have a therapeutic value due
Interestingly, our current findings show a remarkable
to their anti-inflammatory, anti-fungal, antioxidant and
antimicrobial activity against Gram negative and Gram
healing properties (Arajo et al., 2008).
positive bacteria, ranging from 50 to125 g/ml. To put

these values into context, extracts with MICs 100
With regard to its antioxidant activity, the use of the -
g/ml and isolated compounds with MICs 10 g/ml
carotene is due to the bleaching of this compound
can be considered to be of great value (Cos et al.,
during the autoxidation of linoleic acid in aqueous
2006). Significantly, since our results were an ethanolic
emulsion where the decay is monitored by its
extract, they how remarkable activity against most
absorbance in the visible region. The addition of an
Gram negative and Gram positive bacteria.
antioxidant-containing sample, individual antioxidants

or natural extracts assists in retarding the -carotene
A phytochemical investigation of the hydroalcoholic
decay (Roginsky and Lissi, 2005). Antioxidants are
extract of the stem bark and leaves of Caesalpinia
able to scavenge radicals, hydrogen peroxide and
ferrea has revealed flavonoids, saponins, tannins,
other peroxides and prevent the formation of radicals
coumarins, steroids and other phenolic compounds
(Martysiak-urowska and Wenta, 2012).
(Vasconcelos et al., 2011). Phenolic compounds,

such as tannins and flavonoids, have antimicrobial
Antimicrobial activity
and antioxidative properties and are involved in the

defence against fungi and other microorganisms
Generally, owing to their extra protective outer

membrane and other particular features, Gramnegative bacteria are considerably more resistant to
antibacterial agents than Gram-positive bacteria
(Bamoniri et al., 2010). However, in this study, a
higher concentration is only needed for S. aureus e K.
pneumoniae (125 g/ml). The MIC values obtained in
this study meet the stringent endpoint criteria adopted
by some authors (Cos et al., 2006; Mbosso et al.,
2010), which considers concentrations of up to 1
(Boudet, 2007). The antimicrobial activity of this

extract may be on account of
the presence of
tannins, flavonoids and terpenoids in its composition

(Siqueira et al., 2012). Nakamura and collaborators
(2002) study identified gallic acid among the active
constituents of Juca fruits. Gallic acid has been found
to
have
antibacterial,
antiviral
and
antifungal
activities, and also anti-inflammatory, anti-tumour,

antianaphylactic,
antimutagenic,
chloretic
and
bronchodilator activities (Nakamura et al., 2002).
mg/ml for extracts or 0.1 mg/ml for isolated

compounds when displaying antimicrobial activities.
Conclusion
Sampaio and collaborators (2009) found minimum
inhibitory concentration values of the crude extract of
In this study, it has been shown that ethanolic
C. ferrea fruits for Candida albicans, Streptococcus
extract of L. ferrea pod is capable of inhibiting the
mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus
growth of Gram positive and Gram negative
oralis and Lactobacillus casei of 25.0, 40.0, 66.0,
microorganisms. Moreover, antioxidant and free
100.0, 66.0 g/ml, respectively. Cavalheiro and
radical scavenging activity was found. It is expected
collaborators (2009) observed that the aqueous
that further studies currently in progress will enable
extract of seeds do not inhibit the growth of any
us to understand the nature of the precise
bacterial strains analyzed, which demonstrates the
compounds and mechanisms involved.
presence of distinct compounds between the pods

and seeds of this plant species.
213
CLINICAL
Acknowledgments
AND
LABORATORY
STANDARDS
INSTITUTE. CLSI. Methods for dilution antimicrobial

The authors thank the Rural Federal University of
Pernambuco (UFRPE), the National Council of
Technological and Scientific Development (CNPq),
susceptibility tests for bacteria that grow aerobically.

Wayne,
PA:
National
Committee
for
Clinical
Laboratory Standards; M7-A6. 2003.
and National Council for the Improvement of Higher

Education - CAPES, for structural and financial
COS, P.; VLIETINCK, A.J.; BERGHE, D.V.; MAES, L.
support.
2006 - Anti-infective potential of natural products:

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Conflicts of Interest
The authors declare that they have no conflicts of
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FARMACOLOGIA
DOI 10.5935/2446-4775.20150018

1*
Raquel Elisa da Silva Lpez e 1 Bruna Cristina dos Santos
Laboratrio de Qumica de Produtos Naturais, Instituto de Tecnologia de Frmacos, FIOCRUZ.
* Correspondncia: rlopez@far.fiocruz.br
Resumo
Bauhinia forficata uma leguminosa nativa da Mata Atlntica vulgarmente conhecida como pata de vaca. Ela
ocorre em quase todos os tipos de solos e sua madeira usada na produo de papel, lenha e peas de
carpintaria e, suas folhas como alimentao animal. tambm empregada como cobertura vegetal, planta
ornamental, mas sobre tudo, uma planta medicinal. Seus principais componentes biologicamente ativos
incluem compostos flavonides que parecem ser os grandes responsveis por suas propriedades
farmacolgicas, no entanto, terpenos, esterides, cidos aromticos, quinonas, lactonas, alcalides, inibidores
de proteases, proteases e lectinas tm sido isolados e purificados a partir de diferentes rgos de vrias espcies
do gnero Bauhinia. Estes novos compostos tm sido caracterizados e suas propriedades farmacolgicas so
objetos de intensas investigaes. As folhas, as flores e as cascas do caule de B. forficata tm sido usadas na
medicina popular para o tratamento de diferentes tipos de patologias, especialmente diabetes, dores e processos
inflamatrios.
Palavras-chave: gnero Bauhinia; Bauhinia forficata; pata-de-vaca; constituintes qumicos; efeitos
farmacolgicos.
Abstract
Bauhinia forficata is a legume native from Atlantic Forest named as cowage. It occurs in almost all types of soils,
its wood is used in the production of pulp and paper, wood and carpentry and its leaves employed as animal
feed. It is also used in plant cover, as an ornamental plant, but, more importantly, as a medicinal plant. Among
the most important biologically active ingredients include are flavonoid compounds that appear to be largely
responsible for its pharmacological properties. However, terpenes, steroids, aromatic acids, quinones, lactones,
alkaloids, lectins and protease inhibitors have also been isolated and purified from various organs of several
species of the genus Bauhinia. These new compounds have been characterized and their pharmacological
properties are the purpose of intense investigation. The leaves, seeds and stem from Bauhinia species have
been used in folk medicine for the treatment of different kinds of diseases and conditions, especially diabetes,
infection, pain and inflammatory processes.
217
Key-words: Bauhinia genus; Bauhinia forficate; cowage; chemical constituents; pharmacological effects.
so agudos ou acuminados e a margem folia lisa.
Introduo
A nervao palmada, sendo constituda de 9-11
Bauhinia um gnero denominado por Carolus

Linnaeus, em 1753, em homenagem ao botnico
franco-suo Gaspar Bauhin. Compreende mais de
300 espcies amplamente distribudas nas florestas
tropicais e subtropicais, sendo que 64 destas podem
ser encontradas no Brasil. Tais espcies pertencem
subfamlia Caesapinoideae e famlia Fabaceae
(Vaz e Tozzi, 2005). So comumente conhecidas
como pata de vaca ou unha de vaca devido ao
formato de suas folhas que so compostas de dois
fololos unidos na base (FIGURA 1). uma espcie
plstica quanto a solos, ocorrendo em quase todos
os tipos, preferindo os profundos, permeveis e de
boa fertilidade qumica (Costa, 1971). Suas folhas e
nervuras (Miyake, Akisue e Akisue, 1986).

Possuem flores zigomorfas dispostas em racemos
axilares que variam de cor, de acordo com a espcie
e subespcie, geralmente rseas ou brancas. A
inflorescncia em racemo axilar, as flores so
vistosas, possuem 5 ptalas alongadas com at 9
cm de comprimento e 10 estames compridos
(Carvalho, 2003). Seus frutos so legumes ou
vagens achatados e deiscentes do tipo linear
(Fortunato, 1986). As sementes so achatadas e
apresentam poros, medindo aproximadamente 1 cm
e a colorao de castanho a preta (Carvalho,
2003). Possui tronco tortuoso de 30 a 40 cm de
dimetro (Fortunato, 1986).
caule so usados na medicina popular para o

tratamento
de
especialmente
diferentes
tipos
de
diabetes,
infeces,
patologias,
dores
processos inflamatrios (Alice et al., 1995). Nos

ltimos anos, o interesse nas plantas do gnero
Bauhinia tem aumentado consideravelmente em todo
o mundo, uma vez que estudos experimentais
confirmaram suas observaes etnofarmacolgicas.
A maioria das espcies so de origem do continente
Asitico mas existem espcies nativas do Brasil
como a B. longifolia e a B. forficata (Fortunato, 1986).
As plantas do gnero Bauhinia apresentam porte
suas
FIGURA 1. Bauhinia forficata (Subfamlia Caesalpinaceae).
propriedades medicinais, apresentam potencial para
Nota-se que as folhas so bilobadas, que caracterstica
arbreo
mdio
ou
arbustivo.
Alm
de
uso em recuperao de reas degradadas, sendo

empregada
tambm
como
planta
ornamental
marcante do gnero (Plataforma Agroecolgica da Fiocruz

PAF, FIOCRUZ, agosto de 2013, foto de Valrio Morelli).
(Oliveira et al., 2001). Suas folhas medem quando

adultas de 7-12 cm de comprimento e como
O objetivo deste estudo foi fazer uma breve reviso
caracterstica marcante, apresentam-se divididas em
acerca dos aspectos botnicos, dos empregos no
dois lobos, como j mencionado. Os pices dos lobos
medicinais, dos principais constituintes e das
218

Raquel Elisa da Silva Lpez e Bruna Cristina dos Santos
possveis
forficata,
aes
que
farmacolgicas
uma
planta
da
Bauhinia
medicinal
da
biodiversidade brasileira.
Esta espcie fonte de madeira que usada em

caixotaria, na produo de celulose e papel, na
construo civil servindo para caibros, moures e
estacas, para produo de carvo e lenha de boa
qualidade e na produo de peas em carpintaria e
Reviso da Literatura
marcenaria (Backes e Irgang, 2004). Tem importante
Bauhinia forficata
emprego paisagstico pela beleza de suas flores,

uma espcie ornamental, nos parques e jardins ou
A leguminosa B. forficata se assemelha muito com
como cerca-viva, tambm recomendada para
outras folhas de outras espcies do gnero Bauhinia,
arborizao de ruas estreitas e sob a rede eltrica
contudo sua principal caracterstica morfolgica a
(Vaz, 2013). Esta espcie importante fixadora de
presena
nitrognio no solo, portanto o seu uso recomendado
de
espinhos
suas
flores
so
exclusivamente brancas (Oliveira e Saito, 1989). Ela
em
possui dois espinhos no ramo onde fica aderido o
recuperao de ecossistemas degradados e de
pecolo de cada folha, formando uma espcie de
terrenos erodidos, bem como na restaurao de mata
forca, dando origem ao nome (FIGURA 1). Planta
ciliar em locais com inundaes peridicas de rpida
arbustiva, decdua, grande ou arbrea, perene, que
durao ou perodos de leve encharcamento
atinge at 8m de altura. Tem ramos frgeis,
(Lorenzi, 2002).
reflorestamentos
mistos
destinados
pendulares, glabros ou pubescentes, com acleos

gmeos na axila foliar. Folhas alternas, medindo de
As ptalas frescas de B. forficata so comestveis in
8 a 9 cm de comprimento, ovais ou lanceoladas,
natura,
divididas acima do meio, glabras, compostas de dois
adicionadas em doces, compotas e geleias. Alm
fololos unidos pela base, pouco divergentes, obtusas
disso, so tambm melferas e fornecem plen. Suas
ou um pouco agudas, ou acuminadas na base,
folhas so utilizadas na alimentao animal, a
arredondadas ou subcodiformes, membranceas,
forragem, pois so ricas em protenas e carboidratos
com a forma tpica de 9 nervos. Acleos quase
(Hayashi e Appezzato-da-Glria, 2009). As cascas
sempre gmeos, ora uniformemente retos, ora
de seus frutos so utilizadas em artesanato e as
ligeiramente curvos para dentro, finos, ou grossos.
fibras destas cascas so to resistentes que eram
Flores axilares ou terminais, brancas. Seus frutos so
usadas na fabricao de cordas (Vaz, 2013). Apesar
do tipo legume, lineares, medindo 15 a 25 cm de
do uso desta leguminosa para os mais diversos fins,
comprimento por 2 cm de largura (Costa, 1971).
B. forficata uma importante planta medicinal
Planta caduciflia, rebrotando a partir de outubro.
brasileira, e todos os seus rgos so utilizados para
Espcie pioneira, helifita, habita a Mata Atlntica, na
diferentes propsitos teraputicos (Trojan-Rodrigues
Floresta Ombrfila Mista, Floresta Ombrfila Densa e
et al., 2012). Esta grande diversidade de aes e
Floresta Estacional Decidual. So encontradas na
emprego se deve variedade de seus constituintes
regio
Bahia,
qumicos, localizados em diferentes rgos da planta
Alagoas), Sudeste (Minas Gerais, Esprito Santo,
e que variam desde metablitos secundrios at
So Paulo, Rio de Janeiro) e Sul (Paran, Santa
compostos mais complexos como peptdeos e
Catarina, Rio Grande do Sul) (Vaz, 2013).
protenas.
Nordeste
(Pernambuco,
sendo
carnosas
Alguns
destes
adocicadas,
componentes
ou
sero
discutidos adiante.
219
usadas na medicina popular, como a B. monandra, B.
Principais substncias isoladas
holophylla e B. rufa, porm ainda no foram

1) Metablitos secundrios
encontrados
Embora o foco deste estudo seja a espcie B.

forficata,
importante
mostrar
panorama
fitoqumico do gnero Bauhinia (TABELA I), visto que

tais constituintes parecem ser conservados entre as
diferentes
espcies,
tais
informaes
so
essenciais para o bom entendimento da constituio

qumica e dos respectivos efeitos farmacolgicos.
Estudos fitoqumicos e farmacolgicos realizados
com diversas espcies do gnero Bauhinia revelaram
que
as
principais
secundrio
molculas
incluem
em
geral
do
os
metabolismo
flavonides,
terpenides, triterpenides, glicosdeos esteroidais,

lactonas, esteroides, taninos e quinonas (TABELA I).
Contudo, apesar da maioria destes compostos serem
conhecidos, muito pouco sabido sobre suas
atividades
farmacolgicas.
As
espcies
mais
estudadas fitoquimicamente so: B. manca, B.

candicans, B. uruguayensis, B. purpurea, B. forficata
estudos
consistentes
sobre
constituio qumica e a respectiva atividade

farmacolgica da maioria destas espcies (Silva e
Cechinel Filho, 2002).
De modo geral, as espcies do gnero Bauhinia so
caracterizadas pelo acmulo de flavonides livres e
glicosilados nas suas folhas e, especialmente em B.
forficata, so relatados elevados teores de -sitosterol
e kanferol-3,7-diramnosdeo (Pinheiro et al., 2006;
Ferreres et al., 2012) e tambm de um heterosdeo
denominado de bauhinsideo particularmente em
suas folhas e sementes (Costa, 1971).
Nas partes vegetais da espcie forficata, foram
encontrados esteris, flavonides (especialmente
Kampferol, rutina e quercetina), pinitol, taninos
(flobatnicos
piroglicos),
cumarinas,
cidos
orgnicos, glicosdeos, heterosdeos (cianognicos e

saponnicos), gomas, mucilagens e sais minerais
(Silva et al., 2000).
e B. splendens. Existem outras espcies de Bauhinia
TABELA I Alguns compostos identificados nas espcies do gnero Bauhinia
Espcie de
Bauhinia
Molculas
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B. candidans
Sitosterol; campesterol; estigmasterol; colesterol; estigmasta-3,5dieno-7-ona; sitosterol 3-O--D-glucosdio; sitosterol 3-O-Dxilurono-furanosdio; kampferol 3-O--D-rutinosdio; 7-O-rhamnopirano-sdio; trigonelina, triacontanol 3-O-metil-D-inositol (D-pinitol)
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B. championii
cido glico, buahinina,
Silva e Chechinel Filho, 2002.
B.guianensis
Sitosterol; estigmasterol, 4-hidroxi-7-metoxiflavona
Silva e Chechinel Filho, 2002.
220

B. manca
Sitosterol-3-3-O--D-glucosdio, estigmasta-4-eno-3-ona e -3,6diona, cido cinmico; cinamoil--D-glicose; ster metlico do

cido (E)-4-hidroxi-cinmico; ster metlico do cido (E)-4- hidrxi3-metoxi-cinmico; cido glico, galato de metila; ster metlico do
cido 4-hidroxi-2-metoxibenzico; ster metlico do cido 4hidroxi-3- toxi-benzico; ster metlico do cido 3,4
dihidroxibenzico; hidroxipropioguaiacona; siringaresinol; (7S,8R,
8R)-5,5dimetoxilarici-resinol.
Achenbach, Stocker e
Constenla, 1988.
B. megalandra
5,7,5-tri-hidroxi-2-O-ramnosil-flavona; 5,7,2-trihidroxi-5-Oramnosil-flavona
Silva e Cechinel Filho, 2002.
B.purpurea
5,6-di-hidroxi-7-metoxiflavona 6-O--D-xilopiranosdeo
B.racemosa
Pacharina, racemosol; des-O-metil racemosol
Gupta e colaboradores, 2005.
B.reticulata
Quercetina
Rabat, 1938.
B.rufescens
5,6-di-hidro-11-metoxi-2,2,12-tri-metil-2H-nafto-[1,2] [1]-benzopirano-8,9-diol; 11-metoxi-2,2,12-trimetil-2H-nafto-[1,2] [1]-benzopirano-8,9-diol; 1,7,8,12b-tetra-hidro-2,2,4-trimetil-2H-benzo-[6,7]ciclo-hepta-[1,2,3-de] [1]benzo pirano-5,10,11-triol
Maillard e colaboradores,
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B. splendens
Sitosterol; estigmasterol; cido esterico, bausplendina,

quercetina, rutina, galato de etila
Cechinel Filho e
colaboradores, 1995.
B. tarapotensis
Ciclohexanona, derivado de ester de cafeoil, (-)-isolariciresinol 3alfa-O--D-glucopiranosdeo, (+)-1-hidro xipinoresinol 1-O--glico

piranosdeo, isoacteoside, luteolin 4'-O--D-glucopiranosdeo e
indollico-3-carboxlico acido 3 indlico
Braca e colaboradores, 2001.
B. tomentosa
Isoquercitrina; quercetina e rutina
B. thonningii
Grifonilida
Okwute e Ndukwe, 1986.
B. uruguayensis
Estigmasta-1,3,5-trieno; estigmasta 3,5-dieno; campesterol;

estigmasterol; sitosterol; estigmasta-4,6-dien-3-ona; sitosterol-3-O-D-riburono-furanosdio; sitosterol-3-O--D-xilopiranosdio; Sitos
terol-3-O-D-xiluronofuranosdio; sitosterol-3-O--D-glicopirano
sdio, quercetina-3-O-L-ramno-piranosdio; kampferol-3-O-L-ram
nopira-no-sdio, cido asprtico; treonina; serina; glutamato;
prolina; glicina; alanina; valina; metionina; isoleucina; leucina;
tirosina; fenilalanina; histidina; colina e lcoois lineares.
B. vahlii
Campesterol; estigmasterol; sitosterol, cido betulnico,

quercetina; quercetina-3-glucosdio; kaempferol; agathisflavona
Sultana e colaboradores,
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B. variegata
Sitosterol, lupeol, narigenina-5,7-dimetoxi-4-aminoglucosdio;

kaempferol-3-galactosdio; kaempferol-3-ramno-glicosdio
Rahman e Begun, 1966.
2) Peptdeos e protenas
especialmente no gnero Bauhinia. Tais substncias

inibem
Inibidores de proteases
uma
grande
variedade
de
enzimas
proteolticas, que incluem as proteases da prpria

planta e as proteases digestivas de mamferos,
Alm dos metablitos secundrios, os inibidores de

proteases (IPs) constituem uma importante classe de
molculas biologicamente ativas em plantas e
insetos,
bactrias
fungos,
constituindo
um
importante mecanismo de defesa contra insetos

herbvoros e patgenos de modo geral (Silva-Lpez,
221
2009; Zhu-Salzman e Zeng, 2015). Os IPs e suas
inibidores de tripsina de B. bauhinioides: o BbTI-I, o
proteases esto amplamente distribudos em todos
BbTIII que inibe a calicrena pancretica (Oliva et al.,
os organismos vivos e desempenham papis
1999a), o BbKI, que inibe exclusivamente a calicrena
fundamentais em quase todos os fenmenos
e o BBCI que um importante inibidor da atividade
biolgicos (Van der Hoorn, 2008).
da cruzipana. Esta enzima, a cisteno-protease

mais importante de Trypanossoma cruzi, o causador
A maioria dos IPs so polipeptdeos de 5 a 25 kDa,
da Doena de Chagas. Estudos demonstraram que o
com estrutura compacta e muitas pontes de enxofre,
BBCI induziu morte seletiva deste parasito em
que lhes confere estabilidade a variaes de
cultura,
temperatura e pH (Gomes et al., 2011). So
alternativa no tratamento da Doena de Chagas
encontrados em tecidos de estoque como sementes,
(Bilgin et al., 2010). Em B. ungulata tambm foi
gros e tubrculos (1-10% da protena total), e esto
purificado um IP do tipo tripsina que inibe tanto a
especialmente distribudos em sementes de espcies
kalicrena quanto o fator Xa da coagulao (Oliva et
das
al., 1999b).
famlias
Fabaceae
ou
Leguminosae,
podendo
assim
constituir
uma
nova
Brassicaceae, Poaceae bem como em tubrculos de

Solanaceae (De Leo et al., 2002; Nielsen et al., 2004;
Em sementes de B. purpurea foram obtidos dois
Van Der Hoorn e Jones, 2004; Oliva et al., 2011). So
inibidores de tripsina, o BpuTI com 20 kDa e estrutura
classificados como inibidores de serino, cisteno,
primria muito semelhante com BbTI-I e BdTIII (Silva-
asprtico ou metalo-protease de acordo com o tipo
Luca et al., 2010) e o BPLTI que exibiu um amplo
cataltico da protease que inibem (Barret, 1994) e
espectro
ainda, podem ser agrupados em famlias e cls de
apopttica sobre clulas humanas de carcinoma
acordo com a similaridade das suas estruturas
hepatocelular
primrias e tercirias (Rawlings, Barrett e Bateman
candidato promissor para o tratamento de carcinoma
2010). Os inibidores de serino-proteases do tipo de
hepatocelular humano (Fang et al., 2012).
de
atividade
HepG2.
anti-proliferativa
Constituindo
assim
pr-
um
tripsina so os mais abundantes em plantas

e
Os IPs de plantas j esto sendo empregados no
Gramineae (Bateman e James, 2011). Eles conferem
tratamento de diversas patologias humanas, visto
planta resistncia a parasitos, insetos, larvas,
que inibem proteases que desempenham funes
micro-organismos e pragas. Estes IPs inibem as
estratgicas nos organismos humano e animal.
enzimas proteolticas destes organismos, retardando
Alguns IPs atuam como agentes anti-fibrinolticos,
a protelise das paredes celulares e de protenas da
pois inibem os fatores da hemostasia (Vanassche et
membrana da planta, reduzindo a desorganizao
al., 2015), outros inibem proteases de clulas
celular e dificultando a penetrao de patgenos e
tumorais, demonstrando atrativo potencial anti-
impedindo assim, a mobilizao das protenas de
cncer (Roomi et al., 2014; Rakashanda et al., 2015).
particularmente
das
famlias
Leguminosae
reserva (Silva-Lpez, 2009).

Vrios
IPs
foram
isolados,
Proteases
purificados
caracterizados de diversas espcies de Bauhinia. Os

primeiros inibidores isolados foram do tipo tripsina e
obtidos das espcies B. petandra e B. bauhinoides
(Oliva, 1986; Oliva, Sampaio e Sampaio, 1988).
Posteriormente
222
foram
isolados
quatro
outros
Tambm chamadas de peptidases (E.C. 3.4), so

enzimas que hidrolisam ligaes peptdicas em
protenas ou peptdeos. Em plantas, alm de
degradarem
protenas
para
reciclagem
de
aminocidos, as proteases regulam processos

biolgicos que incluem embriognese, senescncia,
subunidade e de origem no imune. So aglutinantes
florao,
seletivos
formao
crescimento
de
plen,
de
clulas
glicoconjugados,
com
estmatos, cloroplastos, caules, razes, folhas e
capacidade de reconhecimentos especficos e de
sementes, termotolerncia, resistncia a fatores
manter ligaes reversveis com carboidratos ou
ambientais, respostas de defesa que culminam com
substncias contendo acares, sem alterar suas
a morte dos agentes agressores, dentre outros
estruturas covalentes (Sharon e Lis, 2004). So
processos fisiolgicos e patolgicos (Van der Hoorn,
universalmente distribudas na natureza, sendo
2008). So expressas no tempo e espao e
principalmente
acumulam-se
compartimentos
leguminosas (Hivrale e Ingale, 2013). O primeiro
subcelulares (van der Hoorn e Jones, 2004). As
reporte da presena de lectinas em Bauhinia foi em
proteases esto presentes em todos os organismos
sementes de B. purpurea (Uhlembruck e Dahr, 1971)
vivos e em todas as organelas e so adaptadas aos
e demonstrou importante atividade estimulante sobre
ambientes onde atuam, por isso, so enzimas muito
linfcitos em cultura (Imai e Osawa, 1983). Depois
diversas.
disso,
em
diferentes
Classificam-se
de
acordo
com
outras
encontradas
lectinas
nas
foram
sementes
de
identificadas
aminocido cataltico do stio ativo em serino,
caracterizadas em diversas espcies de Bauhinia
asprtico, cisteno, treonino, glutmico proteases e
como em B. carronii (Flower et al., 1984), B.
estas por sua vez, tambm esto distribudas em cls
malabarica Roxb (Vijayakumari,
e famlias de acordo com suas sequncias de
Janardhanan, 1993), B. monandra (Andrade et al.,
aminocidos e seus mecanismos de ao (Rawlings,

2005), B. variegata (Moreira
Barrett e Bateman, 2012).
bauhinoides (Silva
Diversas classes de proteases j foram descritas em
plantas
especialmente
em
sementes
de
leguminosas (Demartini, Wlodawer e Carlini, 2007),

contudo, esto presentes em todos os rgos da
planta e cada rgo possui um conjunto particular de
enzimas (Pacheco e Silva-Lpez, 2012). Embora
muitos IPs tenham sido reportados em vrias
espcies de Bauhinia, apenas uma nica protease de
(Teixeira
Siddhuraju e
et al., 2013), B.
et al., 2011), B. cheilantha
et al., 2013) e B. forficata (Silva et al.,
2012). Todas as lectinas de Bauhinia apresentam

caractersticas qumicas distintas entre si, mas todas
elas exibem importante atividade aglutinante sobre
diversos tipos celulares, podendo inibir a adeso de
bactrias ou clulas cancerosas aos tecidos e
interferir no curso de uma infeco e na progresso
tumoral (Silva et al., 2014).
30 kDa foi identificada e caracterizada em folhas de

B. forficata (Andrade et al., 2011; Silva-Lucca et al.,
Uso medicinal de Bauhinia forficata
2013). Esta enzima denominada de baupana uma

cisteno-protease capaz de clivar o cininognio de
A pata-de-vaca uma das 71 plantas selecionadas
alto peso molecular humano e liberar a bradicinina
pelo Ministrio da Sade como de interesse ao
(Andrade et al., 2011), que por sua vez um potente
Sistema nico de Sade (SUS). utilizada na
modulador do tnus da musculatura lisa de diversos
medicina popular como hipoglicemiante, purgativa,
rgos (Kaplan, 2014).
diurtica, antidiarreica, depurativa e tnica renal.

Possui a propriedade peculiar de reduzir a excreo
Lectinas
de urina, nos casos de poliria e de glicosria,

regularizando a glicemia, sobretudo em portadores
As lectinas so protenas ou glicoprotenas com um

ou mais stio(s) de ligao de acares por
de diabetes mellitus (Engel et al., 2008). indicada

como adjuvante no tratamento de molstias da pele,
223
lceras e hipertenso, para aumentar a eliminao
sabido que chs e infuses de suas folhas e cascas
de cido rico, em dores na coluna, nas afeces
de caule so usados em diferentes preparaes para
vesicais, priso de ventre e elefantase. Possui
diminuir nveis de glicose no sangue (Silva e Cechinel
propriedades
Filho, 2002; Salgueiro et al., 2013).
mucilaginosas
adstringentes.
Antigamente o seu uso medicinal era como

diurtica, tnica, estimulante, e tambm contra
Muitos
diabetes, blenorragias, tuberculose e anemia (Alice
hipoglicemiante especialmente em modelos animais
estudos
tm
demonstrado
efeito
et al., 1995).
com diabetes induzido (Silva et al., 2002; Pepato et

al., 2002 e 2004; Lino et al., 2004). A administrao
Na medicina popular, as folhas, a casca, o lenho e as
oral crnica do decoto da planta em ratos
razes da pata-de-vaca so usados no tratamento
diabticos, imitando o uso na medicina popular, foi
das afeces urinrias. As flores novas possuem
obtida uma significativa diminuio da glicemia e
ao purgativa e seu ch diurtico, bom para rins,
tambm da glicosria (Pepato et al., 2002 e 2004).
bexiga, garganta, tosses e bronquites (gargarejos),
Outros
sfilis, verminoses. J os chs das folhas possuem
hipoglicemiante
propriedades medicinais efetivas no tratamento do
mecanismo de ao da planta e as molculas
diabetes. Costa (1942) menciona propriedades
responsveis
estimulantes, expectorantes e adstringentes ligando-
investigados. A baixa da glicemia tambm foi
as muitas vezes s cascas do caule, propriedades
observada em ratas grvidas, cujo controle da
diurticas, antiblenorrgicas e vermfugas, s razes
glicemia
e finalmente, propriedades purgativas s flores.
progesterona e estrognio durante o perodo de
estudos
comprovaram
de
por
B.
forficata,
este
alterado
ainda
devido
efeito
contudo,
esto
ao
sendo
aumento
de
gravidez (Damasceno et al., 2004). Por este motivo,

O
ch
das
folhas
apresentam
propriedades
comum a constatao de que gestantes diabticas
semelhantes quelas dos chs das flores e usado
fazem uso de B. forficata. Preparaes de um
para as mesmas finalidades. Alm disso, atua
extrato de folhas secas de B. forficata obtido com
favoravelmente em males do corao porque
etanol-gua
apresenta importante efeito na diminuio dos nveis
diabticos e foi observado queda nos nveis de
sricos de colesterol (Alice et al., 1995). As folhas
glicose.
devem ser colhidas de preferncia antes da florao,
hipoglicemiante desta planta e este efeito pareceu
e secas ao sol. Contudo, as razes so venenosas,
ser dependente da presena da quercetina-3,7-di-
mas se usada em decoto, funciona como vermfugo
O-a-L-rhamnopiranosdeo e de Kampferol-3,7-di-O-
e ajuda a matar os micrbios (Pereira et al., 2004).
a-L-rhamnopiranosdeo (kampferitrina) (Da Cunha
(1:2)
Esta
foi
administrado
observao
reforou
em
ratos
papel
et al., 2010).
Embora a Bauhinia tenha seus usos populares no
tratamento de vrias enfermidades, pouco se
A ao diurtica pde ser comprovada atravs do teste
conhece a respeito dos mecanismos de ao e das
geral de atividades. Nesta avaliao foi administrado o
molculas
atividades
extrato bruto da tintura da planta e dez minutos aps a
farmacolgicas. Um dos primeiros relatos de estudo
administrao, houve intensa diurese em modelos
clnico do uso de B. forficata foi justamente pela sua
animais (Silva e Cechinel Filho, 2002). Pizzolatti e
propriedade antidiabtica (Juliani, 1941). Por este
colaboradores (2003) relataram que a infuso das
motivo, este gnero mais frequentemente estudado
folhas de B. forficata utilizada na medicina popular
quanto sua possvel ao hipoglicemiante, pois
brasileira,
224
envolvidos
em
suas
tem
comprovado
efeito
diurtico,

hipoglicemiante, tnico, depurativo, eficaz no combate
atividade anticoagulante e antifibrinognica (Oliveira
elefantase, pois reduz importantemente o edema e
et al., 2005) e tambm do veneno de escorpio Tityus
na reduo da glicosria.
serrulatus (Vasconcelos et al., 2004).
O potencial antioxidante do Kampferol-3,7-L-O-a-
Substncias isoladas de B. forficata exibiram
diraminosdeo, um dos produtos isolados a partir da
comprovada atividade anticncer: um inibidor de
frao n-butanlica de B. forficata, foi avaliado e
protena quinase ciclina-dependente que interfere no
demonstrou uma reduo dos nveis de radicais livres
ciclo
no soro de modelos animais diabticos (De Souza et
proliferao (Lim et al., 2006); uma lectina obtida de
al., 2004). sabido que o aumento crnico dos nveis
sementes de B. forficata que induziu morte de
sricos de glicose no sangue, como no caso do
clulas de cncer de mama humano, por inibir a
diabetes, desencadeia a oxidao de lipdeos e
adeso integrina-dependente destas clulas matriz
protenas acarretando dano celular (Oyenihi et al.,
extracelular,
2015). O ch das folhas de B. forficata atua como
tumoral (Silva et al., 2014) e como j mencionado, o
potente antioxidante, visto que protegeu os grupos
inibidor de proteases BPLTI que apresentou amplo
sulfidrila de protenas de ratos diabticos contra
espectro
oxidao e peroxidao de lipdeos (Salgueiro et al.,
apopttica sobre clulas humanas de carcinoma
2013). A diminuio da produo de radicais livres foi
hepatocelular HepG2 (Fang et al., 2012). Embora o
observada tambm quando ratas diabticas grvidas
uso medicinal de B. forficata no seja para o
foram tratadas com o ch de folhas de B. forficata
tratamento de tumores, seus constituintes indicam
(Volpato et al., 2008). Alm disso, foi observado que
seu potencial na terapia destas doenas.
celular
de
clulas
interferindo
de
atividade
HeLa,
assim
inibindo
na
sua
progresso
anti-proliferativa
pr-
os flavonoides presentes nas folhas so tambm

responsveis pela expressiva atividade antioxidante
observada em B. forficata (Miceli et al., 2015).
Concluso
Apesar de B. forficata ser uma planta medicinal
A atividade antimicrobiana dos extratos e fraes de

B. forficata tambm foi avaliada, atravs do mtodo
de difuso radial em Agar com espcies de bactrias
e foi observada expressiva inibio do crescimento
com cepas patognicas de Escherichia coli e
Staphylococcus aureus (De Souza et. al. 2004),
Streptococcus mutans e sanguis (Souza et al., 2014),
bastante utilizada no Brasil e ter seu uso bem

estabelecido,
apenas
pouco
tempo
seus
constituintes qumicos foram estudados e seus efeitos

farmacolgicos
comprovados,
abrindo
assim
possibilidade do desenvolvimento de fitoterpicos ou

fitomedicamentos utilizando extratos, fraes ou
substncias purificadas obtidos desta espcie vegetal.
Bacillus cereus e subtilis, Micrococcus luteus,

Staphylococcus epidermidis, Proteus mirabilis e
Salmonella typhimurium (Pereira et al., 2014).
Agradecimentos
O extrato aquoso de B. forficata foi capaz de
Ao Departamento de Qumica de Produtos Naturais,
neutralizar a coagulao induzida por veneno das
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cobras Bothrops e Crotalus, demonstrando possuir
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232

INOVAO (CT&I E SADE)

DOI 10.5935/2446-4775.20150019
Estudo do desempenho comercial dos insumos

farmacuticos vegetais sob a tica do Comrcio
Exterior
Study of commercial performance of pharmaceutical drugs
vegetables in a Foreign Trade optics
1Terra
Junior, O. N.; 2Maldonado, J.V.; 1Arnobio, A.
Universidade do Estado do Rio de Janeiro. Departamento de Patologia e Laboratrios.
Escola Nacional de Sade Pblica Srgio Arouca/ Fiocruz. Departamento de Administrao e Planejamento.
* Correspondncia: orlando_ntj@hotmail.com
Resumo
Os medicamentos fitoterpicos so produtos naturais obtidos de plantas medicinais a partir de um conhecimento a
respeito das atividades teraputicas destes. As vendas desta indstria crescem atravs do surgimento de novos
produtos e medicamentos inovadores. Entretanto, a dificuldade do Brasil em promover inovao a partir dos
fitoterpicos se mostra conflitante em um pas de grande potencial em biodiversidade e excelentes condies
ambientais. Desta maneira, o objetivo do estudo foi avaliar o desempenho comercial dos insumos farmacuticos
vegetais no Brasil. Para proceder investigao, foram utilizados dados secundrios de exportao/importao
disponveis no Sistema de Anlise das Informaes de Comrcio Exterior via Internet (ALICEweb, 2015). Os valores
analisados de exportao e importao de insumos farmacuticos vegetais no perodo de janeiro de 2002 a
dezembro de 2014 demonstram que o Brasil apresenta grande dependncia externa. Diversos so os elementos
que condicionam tal comportamento. No mbito deste artigo dado nfase ao perfil produtivo, P&D e aparato
regulatrio. Portanto, a partir desta reflexo observada a necessidade do desenvolvimento de polticas pblicas
para o estmulo da produo dos insumos farmacuticos vegetais de alto valor agregado e a adoo de estratgias
para o fortalecimento da sua base produtiva. Alm da necessidade de flexibilizao nos marcos regulatrios
explanados de maneira que priorizem a segurana e a qualidade dos fitoterpicos provenientes destes insumos.
Palavras-chave: medicamentos fitoterpicos; insumos farmacuticos; exportao d e produtos; importao de
produtos.
Abstract
Herbal medicines are natural products derived from medicinal plants from knowledge of the therapeutic activities
of these. Sales of this industry grow through the emergence of new products and innovative medicines. However,
233
the difficulty of Brazil to promote innovation from herbal is conflicting in a country of great potential in biodiversity
and excellent environmental conditions. Thus, the aim of the study was to evaluate the trade performance of
active pharmaceutical ingredients plant in Brazil. To conduct research, secondary data of exportation / importation
were used and they are available in the Sistema de Anlise das Informaes de Comrcio Exterior via Internet
(Aliceweb, 2015). The analyzed values of exports and imports of vegetable pharmaceutical ingredients from
January 2002 to December 2014 show that Brazil has great external dependence. There are several elements
that influence such behavior. Within this article is emphasized the productive profile, P&D and regulatory
apparatus. Therefore, from this reflection is observed the need to develop public policies to stimulate the
production of vegetables pharmaceutical ingredients with high added value and the adoption of strategies to
strengthen its production base. Besides the need for flexibility in the regulatory framework explained in ways that
prioritize the safety and quality of herbal medicines from these inputs.
Key-words: phytotherapeutic drugs; pharmaceutical raw material; exportation of products; importation of products.
nmero de pequenas e mdias firmas atuando de
Introduo
maneira complementar aos grandes laboratrios.
O mercado farmacutico se consolida como um dos

mais
dinmicos,
economia
lucrativos
mundial.
Apenas
competitivos
no
Brasil,
da
seu
faturamento foi de aproximadamente R$ 64,4 bilhes

em 2014, um crescimento de 14% em relao ao ano
anterior (Valcio, 2015). Esta indstria estratgica
para os pases, tanto pelo seu carter social - ao
responder s permanentes necessidades sanitrias
da populao, como pelo carter econmico considerando-se que suas atividades produtivas so
intensivas em cincia, tecnologia e inovao.
No Brasil, a atuao das empresas farmacuticas

brasileiras principalmente direcionada a produtos de
menor complexidade tecnolgica, como por exemplo,
medicamentos genricos, similares e fitoterpicos.
Estes ltimos, oriundos da biodiversidade, tm sido
inseridos no portflio de algumas empresas, como
oportunidade de inovao, diferenciao de produtos,
de menores custos em P&D, etc., e j chamam a
ateno de laboratrios pblicos, que tambm
compem parte do mercado farmacutico brasileiro
(Gadelha e Maldonado, 2008).
Ademais, possui uma complexa cadeia tecnolgica

articulada com empresas, universidades, instituies
O consumo dos medicamentos fitoterpicos cresce
de pesquisa e governo (Queiroz, 2011). A premissa
tanto em pases desenvolvidos quanto em pases em
estratgica de competio da indstria se sustenta
desenvolvimento (Santos et al, 2011). Alguns fatores
na diferenciao de produtos baseada na intensidade
explicam o incremento dos fitoterpicos no contexto
de gastos em pesquisa e desenvolvimento (P&D),
econmico da indstria farmacutica: aumento da
para
preferncia dos consumidores por esta forma de
lanamento
constante
de
produtos
inovadores, e em propaganda e marketing.
terapia, preocupao com os efeitos colaterais dos

medicamentos sintticos (fruto da crena equivocada
A indstria altamente concentrada em nvel

mundial, tendo um nmero relativamente pequeno de
grandes empresas multinacionais e um elevado
234
que os fitoterpicos no possuem efeitos colaterais),

benefcio de custo ao consumidor final e confiana dos
profissionais da sade (Yunes e Calixto, 2001). Tal
Desempenho comercial dos insumos farmacuticos vegetais sob a tica do Comrcio Exterior
importncia se reflete no mercado mundial de
enquanto formulador de polticas e estratgias de
fitoterpicos dimensionado em cerca de US$ 44
desenvolvimento nacional. As novas orientaes
bilhes, tornando-se um importante nicho da indstria
concretizaram-se
farmacutica (Mioto, 2010).
governamentais que buscaram reforar a estrutura
num
conjunto
de
aes
produtiva e inovativa do tecido industrial brasileiro em

Porm,
sua
representatividade
na
economia
geral, e das indstrias da sade em particular.
brasileira permanece insatisfatria, o que se mostra

conflitante em um pas de grande potencial em
No mbito dos fitoterpicos, saliente-se a atuao do
biodiversidade e excelentes condies ambientais,
Ministrio da Sade. Em 2006 foi instituda a Poltica
onde possvel adaptar inmeras espcies vegetais
Nacional de Prticas Integrativas e Complementares
(Zuanazzi e Mayorga, 2010).
no SUS (PNIC), a fim de estimular e promover o

acesso da populao a servios de oferta sade
O objetivo deste trabalho foi o de analisar o
(Brasil, 2006a). Tal poltica props a incluso de
desempenho dos insumos farmacuticos vegetais na
plantas medicinais e fitoterpicos entre outras
balana comercial brasileira e, luz dos dados obtidos,
prticas mdicas complementares como opes
identificar
vm
teraputicas no Sistema nico de Sade. A incluso
promovendo tal comportamento. Deve-se salientar
de 12 medicamentos fitoterpicos na Relao
que uma contribuio primordial deste trabalho foi de
Nacional de Medicamentos Essenciais (RENAME)
fornecer dados quantitativos sobre uma atividade
disponveis no SUS (Espinheira-santa, Guaco,
econmica nacional para a qual existem muitos
Alcachofra, Aroeira, Cscara-sagrada, Garra-do-
poucos trabalhos que os sistematizem, restrio
diabo, Isoflavona-de-soja, Unha-de-gato, Hortel,
observada inclusive pela prpria Associao Brasileira
Babosa, Salgueiro, Plantago) ocorreu em 2007
de Empresas do Setor Fitoterpico (Abifisa, 2015).
(Brasil, 2012).
Alm desta introduo, o presente artigo composto
Tambm em 2006 foi aprovada a Poltica Nacional de
por mais quatro itens. No primeiro so apresentadas
Plantas Medicinais e Fitoterpicos (PNPMF), uma
as principais iniciativas governamentais no que tange
das mais impactantes normatizaes do setor. A
s polticas pblicas e aspectos regulatrios brasileiros
mesma estabelece diretrizes em torno de objetivos
nos
absolutamente
voltados garantia de acesso seguro e uso racional
essenciais no que tange ao desempenho da indstria
de plantas medicinais e fitoterpicos, contemplando
de fitoterpicos. O segundo item ressalta os mtodos
desde a minimizao da dependncia tecnolgica at
adotados. O terceiro, resultados e discusso, discorre
melhoria de ateno sade, uso sustentvel da
sobre os principais elementos que vm condicionando
biodiversidade, fortalecimento das cadeias e arranjos
o comportamento da balana comercial de insumos
produtivos,
farmacuticos
perfil
desenvolvimento industrial e tecnolgico, perspectiva
produtivo, P&D e aparato regulatrio. O quarto e ltimo
de incluso social e regional e participao popular
item apresenta as consideraes finais.
(Brasil, 2006b).
Referencial Normativo
Em 2008 foi aprovado o Programa Nacional de
os
ltimos
principais
anos,
elementos
elementos
vegetais,
que
nomeadamente,
gerao
de
emprego
renda,
Plantas Medicinais e Fitoterpicos e o Comit

Assistiu-se no Brasil nos anos 2000 a mudanas
significativas no que tange ao papel do Estado
Nacional de Plantas Medicinais e Fitoterpicos, com

o objetivo de regular a produo, uso e distribuio
235
das plantas medicinais afim de garantir populao
durante as inspees sanitrias (Brasil, 2010a). Em
brasileira o acesso seguro e o uso racional de plantas
2010, considerando os diversos assuntos que so
medicinais e fitoterpicos, promovendo o uso
pertinentes
sustentvel da biodiversidade, o desenvolvimento da
Fitoterpicos, Dinamizados e Notificados (COFID),
cadeia produtiva e da indstria nacional (Brasil,
elaborou um consolidado o qual disponibiliza as
2008). O Comit, composto por 26 representantes e
normas mais utilizadas no registro ou notificao dos
respectivos suplentes e coordenado pelo Ministrio
medicamentos fitoterpicos (Brasil, 2010b).
agncia,
Coordenao
de
da Sade atravs da Secretaria de Cincia e

Tecnologia e Insumos Estratgicos, tem como funo
Por sua vez, a RDC n 18 de 2013, disps sobre as
monitorar e avaliar o Programa.
boas prticas de processamento e armazenamento

de plantas medicinais, preparao e dispensao de
Em 2009 foi divulgada a Relao Nacional de Plantas
produtos magistrais e oficinais de plantas medicinais
Medicinais de Interesse ao SUS (RENISUS),
e fitoterpicos em farmcias vivas no mbito do
contemplando 71 plantas medicinais indicadas para
Sistema nico de Sade (SUS) (Brasil, 2013).
uso teraputico da populao, que tem como

finalidade nortear estudos e pesquisas em plantas
J a RDC n 26 de 2014 definiu as categorias de
medicinais que apresentam potencial para gerar
medicamento
produtos de interesse ao SUS, com o intuito de
fitoterpico e estabeleceu os requisitos mnimos para
desenvolvimento e inovao na rea de plantas
o registro e renovao de registro de medicamento
medicinais e fitoterpicos (Brasil, 2009).
fitoterpico, e para o registro, renovao de registro
fitoterpico
e produto
tradicional
e notificao de produto tradicional fitoterpico

Em 2010, por meio da Portaria n 886, o Ministrio da
(Brasil, 2014). Medicamentos fitoterpicos so
Sade instituiu no mbito do SUS a Farmcia Viva, que
aqueles cuja segurana e eficcia esto baseadas
tem como atribuies realizar todas as etapas, iniciando
em evidncias clnicas, e produtos tradicionais
pelo cultivo, abrangendo a coleta, o processamento, o
fitoterpicos
armazenamento de plantas medicinais, a manipulao
efetividade esto fundamentadas na tradicionalidade
e a dispensao de preparaes magistrais e oficinais
de uso por perodo mnimo de 30 anos, concebidos
de plantas medicinais e produtos fitoterpicos (Batista e
para
Valena, 2012).
superviso mdica, em condies clnicas brandas
so
serem
aqueles
utilizados
cuja
sem
segurana
necessidade
de
(Brasil, 2014).
Em 2012, o Ministrio da Sade publicou nos
Cadernos de Ateno Bsica Prticas integrativas e
Outra novidade da regulao a possibilidade da
complementares: plantas medicinais e fitoterapia na
notificao
para
Ateno Bsica, no qual se destaca o carter
Formulrio
de
estratgico da oferta de aes e servios de fitoterapia
Brasileira e que possuam monografia especfica de
na ateno bsica (Batista e Valena, 2012).
controle da qualidade publicada em farmacopeia
os
fitoterpicos
Fitoterpicos
da
previstos
no
Farmacopeia
reconhecida pela ANVISA. A notificao possibilita a

No mbito da ANVISA, a RDC n 17 de 2010
imediata fabricao, importao ou comercializao
estabeleceu os requisitos mnimos a serem seguidos
do produto (COFID, 2015).
na fabricao de medicamentos para padronizar a

verificao do cumprimento das Boas Prticas de
Este conjunto de medidas reflete o crescente interesse
Fabricao de Medicamentos (BPF) de uso humano
do ponto de vista governamental em estabelecer
236
estratgias que visam promover o acesso aos
13.02-
insumos
utilizados
na
fitoterpicos bem como o desenvolvimento produtivo e
medicamentos
inovativo da indstria de fitoterpicos.
captulos 12 (Sementes e frutos oleaginosos; gros,
fitoterpicos,
produo
de
respectivamente,
sementes e frutos diversos; plantas industriais ou

medicinais; palhas e forragens) e 13 (Gomas, resinas
Materiais e Mtodos
e outros sucos e extratos vegetais).
Para elaborao deste artigo foram adotadas trs

Deve-se salientar que a principal limitao na coleta de
abordagens metodolgicas principais.
dados residiu na dificuldade para dimensionar a

Para a pesquisa bibliogrfica, que serviu de base
evoluo de alguns produtos em particular, tais como
para o desenvolvimento deste trabalho, foi efetuado
planta medicinal in natura, sucos e extratos, princpios
criterioso levantamento da literatura cientfica a partir
ativos
da compilao de trabalhos publicados em revistas,
medicinais, devido existncia de categorias bastante
livros especializados e artigos integrados nas bases
genricas na atual NCM, aspecto j mencionado por
de dados LILACS e Medline, alm de documentos e
Rodrigues e Nogueira (2008). Por exemplo, algumas
relatrios oficiais, legislao, teses e dissertaes.
matrias vegetais, tais como razes de Ginseng
medicamentos
advindos
de
plantas
(cdigo n. 1211.20.00) possuem uma nomenclatura

Para a coleta dos dados referentes ao comrcio
(NMC) especfica, enquanto que outras plantas como
exterior foi utilizado o Sistema de Anlise das
ipecacuanha (Cephaelis ipecacuanha) e fava-danta
Informaes de Comrcio Exterior via Internet
(Dimorphandra mollis) esto includas no cdigo
(ALICEweb, 2015) que um sistema online
1211.90.90, que corresponde a outras (plantas e partes,
desenvolvido pelo Ministrio do Desenvolvimento,
para perfumaria, medicina e semelhantes), que dificulta
Indstria e Comrcio Exterior (2015) visando o
uma anlise pontual de um determinado insumo, caso
acesso aos dados de comrcio exterior do Brasil.
ele no tenha sido discriminado em uma subposio.
Realizou-se ento uma coleta abrangendo o perodo

de 01 de janeiro de 2002 a 31 de dezembro de 2014.
No mbito do tratamento dos dados, os mesmos

foram organizados e tabulados em planilha utilizando
Para proceder pesquisa utilizou-se a Nomenclatura
o software Microsoft Excel e, em seguida,
Comum do MERCOSUL (NCM), que se trata de uma
agrupados de acordo com as posies (12.11 e
numerao adotada pelo governo brasileiro para
13.02). Para facilitar a anlise dos resultados, estes
identificar a natureza das mercadorias e facilitar a
foram transformados em FIGURAS.
coleta e anlise das estatsticas do comrcio exterior.

Foram contemplados na investigao os seguintes
cdigos de NCM:
O mercado mundial de medicamentos fitoterpicos

12.11- plantas, partes de plantas, sementes e frutos,
das
espcies
perfumaria,
utilizadas
medicina
ou
principalmente
como
em
inseticidas,
parasiticidas e semelhantes, frescos ou secos,

mesmo cortados, triturados ou em p.
movimenta cerca de US$ 44 bilhes por ano, sendo

a Alemanha considerada o pas lder desta indstria,
seguida da Frana e Itlia. No Brasil no existem
dados oficiais acerca do tamanho deste mercado,
mas estima-se que varie entre US$ 350 milhes e
US$ 550 milhes (Mioto, 2010). Tal estimativa
237
evidencia
um
mercado
nacional
relativamente
no
mercado
brasileiro
apresentaram
taxa
de
pequeno, ao se considerar que representa apenas
crescimento de 12%, mesmo percentual dos dois
3% do mercado farmacutico brasileiro que o sexto
anos anteriores (Valcio, 2014).
maior
do
mundo,
em
um
pas
com
uma
biodiversidade mpar (Velani, 2013). No entanto, vem
A FIGURA 1 apresenta a evoluo do comrcio
apresentando taxas de crescimento superiores a
exterior brasileiro de insumos farmacuticos vegetais
10% a.a. (Gadelha, 2010) e um comrcio exterior em
de 2002 a 2014.
ascenso. De 2012 a 2013, por exemplo, as vendas
Valores em US$ milhes e condio Free On Board
Fonte: Elaborao prpria a partir de levantamento efetuado no Sistema ALICEWeb, 2015, (SECEX/MDIC).
FIGURA 1. Evoluo do comrcio exterior de insumos farmacuticos vegetais na posio 12.11 e 13.02, 2002-2014
No perodo considerado, as exportaes tiveram um
O crescimento das exportaes por sua vez, reflete
aumento de 222%, enquanto que as importaes
um aumento do mercado consumidor exterior,
cresceram
que
principalmente da Europa onde se concentra 50% do
representou um dficit comercial de 2002 a 2014. Em
aproximadamente
227%,
mercado global de fitoterpicos, sobretudo da
2014, o dficit comercial foi de US$ 32 milhes.
Alemanha, que o atual maior produtor de
Ambas as categorias apresentaram uma tendncia
medicamentos fitoterpicos no mundo (Ribeiro e
crescente no perodo, com duas flutuaes mais
Scaramuzzo, 2009).
significativas: uma queda das exportaes e das

importaes de 2008 a 2009, em funo da crise
Em relao ao consumo, cerca de 80% da populao
mundial, e uma queda das importaes de 2013 para
europeia consome medicamentos fitoterpicos e, na
2014, que correspondeu ao baixo desempenho da
sia, esse percentual de mais de 40% (Global
economia brasileira e j sinalizava a crise atual.
Industry Analysts, 2011). Na Austrlia e nos EUA, por

exemplo,
238
quase
metade
da
populao
utiliza
tratamentos
incluindo
evoluo do comrcio exterior de insumos
apesar
do
farmacuticos. Em ambos os casos fica evidente a
crescimento registrado nos ltimos anos, estima-se
situao de dependncia externa do pas em relao
que apenas 10% das pessoas consumam esse tipo
no apenas aos insumos farmacuticos (produtos
de produto. Isso se explica tanto pelo fato de o
qumicos orgnicos), mas tambm frente a produtos
mercado brasileiro de fitoterpicos ainda ser recente
acabados
em comparao aos europeus e asiticos que
farmacuticos). A rigor, esta dependncia reflete uma
consomem o produto h muitos anos, como pela
base endgena de inovao extremamente frgil,
pouca credibilidade dos medicamentos fitoterpicos
no apenas em fitoterpicos, mas em relao a toda
pela populao e pelos mdicos prescritores.
fitoterapia.
no
No
convencionais,
Brasil,
entretanto,
fabricados
indstria
no
farmacutica
exterior
nacional
(produtos
(Gadelha,
Maldonado e Costa, 2012).

Estes dados corroboram os apresentados por
Rodrigues e Nogueira (2008) que ao analisarem a
Esta situao fica ainda mais evidente ao se analisar
cadeia produtiva das plantas medicinais no Brasil
a evoluo do saldo comercial de 2002 a 2014 por
entre 1996-2006 observaram aumento do dficit
principais
comercial em 55,2%, bem como reforam os achados
apresentado na FIGURA 2.
parceiros
comerciais,
conforme
de Mota, Cassiolato e Gadelha (2012) relativamente
Valores em US$ milhes e condio Free On Board
Fonte: Elaborao prpria a partir de levantamento efetuado no Sistema ALICEWeb, 2015, (SECEX/MDIC).
FIGURA 2. Balana comercial de insumos farmacuticos vegetais na posio 12.11 e 13.02:
principais parceiros comerciais, 2002-2014
239
Diversas so as causas que conduzem a esta
indstrias processadoras/laboratrios que esto, em
situao. No que tange estrutura produtiva, o cultivo
sua maioria, nele localizados (Corra e Alves, 2008).
de plantas medicinais no Brasil est relacionado

agricultura familiar, ou seja, feito em pequenas
A indstria brasileira de fitoterpicos constituda por
propriedades
uma
um grande nmero de empresas, mais de centena e
infraestrutura adequada de cultivo e processamento
meia, de tamanho variado, de capital estrangeiro e
das plantas. Se a planta no for bem cultivada e se o
nacional,
extrato no for bem preparado, a indstria no pode
medicamentos acabados, do que de insumos (Torres,
us-lo,
importado.
2013). Hasenclever (2009), ao destacar o alto grau de
Atualmente, 80% dos extratos utilizados pela
concentrao nesta indstria, salienta a baixa
indstria na fabricao de medicamentos provm do
propenso das empresas em investir em P&D. Esta
exterior (Maral, 2011).
perspectiva reforada, segundo a autora, pela fraca
rurais.
privilegiando
pas
no
produto
tem
mais
voltadas
para
produo
de
e descontnua interao com instituies de pesquisa,

De um modo geral, os produtores tm baixo ndice de
no perfil dos produtos comercializados - os baseados
associativismo, falta de assistncia tcnica, baixa
em plantas nativas esto fundamentados apenas no
produtividade, ausncia de infraestrutura, carncia
uso popular e os de origem extica tiveram pesquisas
de linhas de crdito, condies precrias para o
para comprovao de sua segurana e eficcia
escoamento da produo e pouco poder de barganha
realizadas em seus pases de origem e do nmero
na hora da comercializao. Os agricultores mais
reduzido de patentes por empresas brasileiras o que,
isolados tm grandes problemas para escoar sua
mais uma vez, privilegia a importao de insumos.
produo e, mesmo os que possuem certificao de

produo orgnica, devido falta de um local
A baixa propenso em investimentos em P&D no pas
exclusivo para esse tipo de produto, vendem seus
decorrente ainda das dificuldades impostas pela
produtos junto com os agricultores convencionais.
Medida Provisria n 2186 de 2001 que objetivou
Estes fatores contribuem para transformar esta
coibir a biopirataria. A mesma criou no mbito do
atividade pouco atrativa e economicamente pouco
Ministrio do Meio Ambiente o Conselho de Gesto
vivel (Ricardo, 2009).
do Patrimnio Gentico (CGEN), rgo normativo e

deliberativo responsvel pela avaliao dos projetos
A produo de plantas medicinais se estende desde a
de pesquisa que envolve acesso ao patrimnio
produo at o empacotamento, extrao de leo
gentico e ao conhecimento tradicional associado
essencial, indstrias de alimentos e bebidas, de
para fins de pesquisa cientfica, bioprospeco e
cosmticos, de fitoterpicos, corantes, entre outros.
desenvolvimento tecnolgico (Silva e Spindola,
Deve-se
de
2011). A instituio que est interessada em
desenvolvimento de aes integradas com o objetivo
ainda
ressaltar,
que
por
falta
pesquisar e utilizar ativos da biodiversidade brasileira
de agregao de valor, a produo destes agricultores
em
quase toda transferida in natura para a etapa
documentao necessria antes de iniciar s
seguinte da cadeia de valor, isto , transformao do
pesquisas, e solicitar a autorizao junto aos rgos
produto. O Estado de So Paulo considerado o
competentes. O principal problema relacionado ao
grande centro de comercializao e um grande
CGEN advm da dificuldade em se regulamentar a
consumidor de plantas medicinais, tanto pelos
repartio dos benefcios gerados, tanto com base no
consumidores finais de plantas secas, quanto pelas
acesso
seus
aos
estudos
recursos
dever
providenciar
genticos
quanto
nos
conhecimentos tradicionais sobre propriedades de
240
animais e plantas (Saccaro e Nilo 2011). Segundo
Outro problema a falta de padronizao da matria-
vrios crticos, esta questo burocratizou e tolheu a
prima e a qualidade da mesma. Existem muitos
pesquisa de produtos naturais por pesquisadores
produtos com nomes iguais, mas de espcies
brasileiros,
diferentes.
restringindo
desenvolvimento
da
fitoterapia no pas (Palma e Palma, 2012).
Composies
qumicas
diferentes
possuem efeitos farmacolgicos distintos. Nesta

perspectiva a Embrapa assinou convnio com a
Na ltima dcada do sculo passado e primeiros anos
Universidade do Mississipi, EUA, em 2010, justamente
do atual, houve grandes avanos na pesquisa de
para padronizar os extratos de plantas, alm de
fitoterpicos no pas, com crescente interesse da
descobrir novos compostos qumicos e frmacos no
indstria. Depois, com as dificuldades de acesso ao
Cerrado e na Caatinga. A parceria visa ainda
patrimnio gentico brasileiro, ocorreu um retrocesso
desenvolver mtodos para autenticar e padronizar os
e desestimulou a atividade de pesquisa, j que muitas
fitoterpicos, alm de fornecer dados de manejo
empresas tm dificuldades em atender s normas do
adequado. Acredita-se que ao se tomar medidas para
CGEN. Vrios projetos em desenvolvimento em
estabelecer normas de cultivo e processamento de
parceria entre institutos pblicos e empresas foram
plantas medicinais, ocorrero melhoras na qualidade
descontinuados e, de um modo geral, as pesquisas
dos fitoterpicos (EMPRAPA, 2010). Para Alves e
acadmicas prevalecentes no tm direcionamento
colaboradores (2008), a qualidade dos insumos tem
para o sistema produtivo (Biodiversidade Brasileira,
obrigado o pas a import-los e a faz-lo anualmente
2014). Com isso, as empresas tm preferido trabalhar
em maiores propores, uma vez que a demanda no
com
espcies
segmento de fitoterpicos vem aumentando. A
exticas adaptadas. At hoje, s um fitoterpico
indstria produtora brasileira de fitoterpicos tem tido
baseado na flora brasileira foi desenvolvido em
dificuldade em se adequar aos padres de produo e
territrio
qualidade, dentro de suas prprias regulamentaes e
medicamentos
nacional.
preparados
Trata-se
com
do
anti-inflamatrio
Acheflan do laboratrio Ach (Mioto, 2010).
normatizaes, dificultando assim o acesso a insumos

ou matrias primas de qualidade para produo em
No que se refere aos aspectos legais, como
escala industrial.
consequncia da publicao da RDC 17 de 2010, que

trouxe
novos
critrios
para
registro
dos
medicamentos fitoterpicos, parte importante das
Concluso
empresas tem dificuldade de se adequar s exigncias

das novas regulamentaes da ANVISA. Neste
sentido, Carvalho, Perfeito e Silva (2011) apontam que
das solicitaes de registro de fitoterpicos de 2005 a
2010, 45% foram indeferidas. Entre as razes salientese o no cumprimento das exigncias determinadas
pela ANVISA, bem como a ausncia de comprovao
de qualidade, segundo requisitos da legislao sanitria
brasileira. Desta forma, as empresas brasileiras vm
sendo obrigadas a ampliar sua importao de matriasprimas com o consequente aumento em seus custos de
fabricao (ANVISA, 2006).
Em fitoterpicos, o Brasil tem grande potencial de se

tornar um polo de plantas medicinais no mundo, se
colocando no mercado farmacutico de substncias
processadas de alto valor agregado e no apenas
servindo como mero fornecedor de matria-prima. O
pas dispe de grande biodiversidade, o que significa
matria-prima abundante, alm de possuir produo
cientfica, profissionais capacitados, rgos pblicos e
privados com competncia e recursos tcnicos e
financeiros, base produtiva, polticas pblicas para a
rea, aparato regulatrio, entre outros elementos
sistmicos fundamentais inovao. Todavia, o Brasil
241
ainda no conseguiu desenvolver uma indstria
Relativamente legislao sobre o acesso ao
fitoterpica
patrimnio gentico, a mesma vem sofrendo diversas
forte
competitiva,
sendo
grande
importador de insumos e de produtos acabados.
crticas por pesquisadores, empresrios e mesmo

autoridades, no sentido de que o marco legal atual
A sade, conforme expresso por Gadelha (2003)
no favorece estudos e desenvolvimento de produtos
comporta duas dimenses essenciais: a social e a
com plantas nativas, alm de no coibir a biopirataria.
econmica. A primeira constitui um valor humano e um

direito de cidadania, garantido na Constituio Federal
Crescentes restries sanitrias e de acesso
de 1988. A dimenso econmica leva em conta que
biodiversidade brasileira acabam privilegiando, de
todos os produtos e servios da sade so gerados a
algum modo, a incluso no mercado nacional de
partir de uma base produtiva, pblica e privada.
insumos e plantas medicinais consideradas exticas,

uma vez que a maioria dos trabalhos de referncia na
Sob este olhar, a sade constitui-se em espao de
literatura, no contemplam estudos clnicos de
tenso e de negociao entre os interesses sanitrios
plantas nativas utilizadas na medicina popular. Ao
e econmicos, coletivos e privados, evidenciando-se a
mesmo tempo, vm justificando crescentes dficits
necessidade de atuao do Estado no que se
comerciais de insumos farmacuticos vegetais.
relaciona mediao e acomodao entre a dimenso

econmica, vinculada ao processo de inovao, de
Impe-se, portanto uma atuao qualificada do Estado
acumulao e de eficincia econmica, e a dimenso
no sentido da adoo de aes que estabeleam um
sociossanitria,
da
adequado trade-off entre as dimenses social e
populao e equidade, a partir da compreenso da
econmica, isto , algum tipo de flexibilizao no
sade como direito de cidadania.
marco regulatrio que priorize a segurana e a eficcia
vinculada
aos
interesses
dos fitoterpicos e, ao mesmo tempo, promova o

Entretanto,
assiste-se
claramente
uma
no
desenvolvimento da indstria nacional. Ademais, tal
convergncia de interesses entre as duas dimenses
atuao deve necessariamente envolver a adoo de
no campo dos fitoterpicos. Por um lado, a legislao
vises sistmicas que levem em conta as diferentes
brasileira vem reforando os critrios de segurana e
dimenses da criao/reforo de vantagens competitivas
eficcia que validem cientificamente os medicamentos
das empresas industrial, tecnolgica, comrcio exterior,
fitoterpicos ao estabelecer requisitos para o seu
recursos humanos, tributria, entre outras.
registro. Por outro, em funo do perfil da estrutura

produtiva desta indstria no Brasil, as normas
Deve-se mencionar que as atividades produtivas da
reguladoras acabam funcionando como barreiras
sade compartilham entre si alto grau de inovao e
produo e desenvolvimento de novos produtos, uma
apresentam elevado dinamismo em termos de taxa
vez que para a obteno de registro de um
de crescimento e de competitividade. Neste sentido,
medicamento fitoterpico, necessria a realizao
constituem
de diferentes testes para validao com a finalidade de
oportunidades de investimento, renda, emprego e
garantir a segurana e a eficcia na utilizao e na
inovao, ou seja, um lcus essencial de
qualidade do produto. Para grande parte das
desenvolvimento econmico. Dessa forma, o Brasil
empresas, os custos de validao que passam por
poderia se apropriar da fitoterapia como uma grande
etapas que vo desde a bioprospeco at os testes
oportunidade
pr-clnicos e clnicos representam srios obstculos.
considerando todos os aspectos naturais e culturais
um
espao
de
no
qual
desenvolvimento
se
geram
nacional,
que o beneficiariam, tornando-se um dos maiores
242
produtores nesta indstria. Entretanto, polticas e
manufacturers in the State of Rio de Janeiro. Cincia
normativas que se debruam sobre o pas impedem
& Sade Coletiva, v.13(Sup), p. 745-753.
o alcance de um desempenho econmico e inovativo

BATISTA, L.; VALENA, A. 2012. A Fitoterapia no
da fitoterapia no pas mais efetivo.
mbito da Ateno Bsica no SUS: Realidades e

Sugere-se, portanto, a partir desta reflexo a
Perspectivas. Disponvel em <http://revista.uepb.edu
necessidade
.br/index.php/pboci/article/viewFile/1604/848 2012>.
do
desenvolvimento
de
polticas
pblicas para o estmulo da produo dos insumos
Acesso 10 set. 2015.
farmacuticos vegetais de alto valor agregado e a

adoo de estratgias para o fortalecimento da sua
BIODIVERSIDADE BRASILEIRA. 2014. Especial
base produtiva, alm da j mencionada necessidade
Fitoterpico. Ano XXI, n 256. Disponvel em
de flexibilizao nos marcos regulatrios explanados
<http://issuu.com/guiadafarmacia/docs/especialfito/2
de maneira que priorizem a segurana e a qualidade
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dos fitoterpicos provenientes destes insumos.

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(APLs) no contexto da implementao da Poltica e
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crescimento anual. Especial Fitoterpicos. Disponvel
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Moderna. Chapec: Argos.
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Qumica Nova, v.33, n.6, p.1421-1428.
246
MAYORGA,
Desenvolvimento
P.
2010.
Econmico.
INSTRUES AOS AUTORES
A revista Fitos publica artigos com elevado mrito
1.4 Debate: artigo terico que se faz acompanhar de
cientfico
cartas crticas assinadas por autores de diferentes
relativos
Plantas
Medicinais,
que
contribuam para os campos temticos: pesquisa,
instituies,
desenvolvimento e inovao de medicamentos da
seguidas de resposta do autor do artigo principal;
diversidade
vegetal
para
estudos
convidados
pela
equipe
editorial,
e
1.5 Frum: seo destinada publicao de 2 a 3
aprofundamentos de temas e disciplinas afins.
artigos coordenados entre si, de diferentes autores, e

A Revista publica trabalhos nas seguintes reas do
versando
sobre
tema
de interesse
atual.
Os
conhecimento:
interessados em submeter trabalhos para essa seo

devem consultar o Conselho Editorial da Revista Fitos;
Agroecologia
Botnica
1.6 Perspectivas: anlises de temas conjunturais, de
Etnofarmacologia
interesse imediato e sobre a importncia das plantas
Farmacologia
medicinais;
Inovao (gesto e CTI em sade)
desenvolvimento
Qumica
biodiversidade brasileira e de temas e disciplinas
da
gesto
da
de
inovao
medicamentos
e
da
afins, em geral a convite da equipe editorial;

Os autores devem ler atentamente as instrues
abaixo antes de submeterem seus artigos Revista
1.7 Questes Metodolgicas: artigo completo, cujo
Fitos. Na submisso, os autores devem indicar em
foco a discusso, comparao e avaliao de
que rea do conhecimento se enquadra seu artigo e
aspectos metodolgicos importantes para o campo,
enviar ttulo resumido, com no mximo 100
seja na rea de desenho de estudos, anlise de
caracteres, incluindo os espaos.
dados ou mtodos qualitativos;
1. A REVISTA FITOS aceita trabalhos para as
1.8 Resenhas: resenha crtica de livro relacionado
seguintes sees:
aos
campos
temticos
da
REVISTA
FITOS,
publicado nos ltimos dois anos;

1.1 Reviso: reviso crtica da literatura sobre temas
pertinentes ao estudo de plantas medicinais; da
1.9 Cartas: crtica a artigo publicado em fascculo
gesto
anterior da REVISTA FITOS;
da
inovao
desenvolvimento
de
medicamentos da biodiversidade brasileira e de

temas e disciplinas afins;
2. Diretrizes para autores
1.2 Artigos: resultado de pesquisa de natureza
2.1 A REVISTA FITOS publica somente artigos
emprica, experimental ou conceitual;
inditos e originais, e que no estejam em avaliao

em nenhum outro peridico simultaneamente. Os
1.3
Comunicao
Breve:
relatando
resultados
autores
devem
declarar
essas
condies
no
preliminares de pesquisa, ou ainda resultados de
processo de submisso. Caso seja identificada a
estudos originais que possam ser apresentados de
publicao ou submisso simultnea em outro
forma sucinta;
peridico o artigo ser desconsiderado. A submisso
247
simultnea de um artigo cientfico a mais de um
2.9.2 Fornecedores de materiais ou equipamentos,
peridico constitui grave falta de tica do autor.
gratuitos ou com descontos, tambm devem ser

descritos como fontes de financiamento, incluindo a
2.2 Uma vez aceito, os direitos autorais de todos os
origem (cidade, estado e pas).
artigos, incluindo a sua reproduo por qualquer

meio, seja eletrnico ou impresso, pertencer
2.9.3 No caso de estudos realizados sem recursos
Revista Fitos. O autor dever preencher uma
financeiros institucionais e/ou privados, os autores
declarao de cesso de direitos autorais enviada
devem declarar que a pesquisa no recebeu
pela Revista Fitos.
financiamento para a sua realizao.
2.3 Sero aceitas contribuies de artigos escritos
2.10 Conflito de interesses
em Portugus, Ingls, Francs ou Espanhol.

2.10.1 Os autores devem informar qualquer potencial
2.4 Todos os trabalhos envolvendo estudos em
conflito de interesse, incluindo interesses polticos
humanos ou animais devero estar acompanhados
e/ou
dos Pareceres dos Comits de tica de Pesquisa em
propriedade, proviso de materiais e/ou insumos e
Seres Humanos ou em Animais das instituies a que
equipamentos utilizados no estudo pelos fabricantes.
financeiros
associados
patentes
ou
pertencem os autores, autorizando tais estudos.

2.11 Formatao Inicial do Trabalho
2.5
Qualquer
conceito
emitido
nos
trabalhos
publicados ser de responsabilidade exclusiva dos
2.11.1 Os originais devero ser redigidos na
autores.
ortografia oficial e digitados em papel tamanho A4,

espao duplo, fonte tipo Times New Roman, tamanho
2.6 Os autores devero manter uma cpia dos
12, com texto justificado, margem de 2 cm em cada
manuscritos em seu poder, em caso de eventual
um dos quatro lados, e perfazendo o total de, no
extravio daquele enviado revista.
mximo, 20 e, no mnimo, 5 pginas, incluindo

figuras, tabelas e quadros.
2.7 As figuras, tabelas, quadros, estruturas qumicas,

fotografias, grficos, desenhos etc. devero ser
2.11.2 Ttulo e subttulo: devero estar de acordo com
inseridas
locais
o contedo do trabalho, levando em conta o mbito da
adequados e numeradas consecutivamente em
Revista. Estes devero estar escritos em negrito com
algarismos
legendas
a primeira letra da palavra em maiscula, fonte tipo
devero ser claras, concisas, sem abreviaturas e
Times New Roman, tamanho 14. Devero tambm
localizadas na parte superior das mesmas. As
estar em verso para a lngua inglesa, com as mesmas
tabelas no podem ser fechadas por linhas laterais.
caractersticas, mas em fonte tamanho 12.
2.8 Notas de rodap no sero aceitas.
2.11.3 Autores: o primeiro nome de cada autor deve
pelos
prprios
arbicos.
As
autores
nos
respectivas
vir abaixo do ttulo, esquerda. O nome e o ltimo

2.9 Fontes de financiamento
2.9.1 Os autores devem declarar todas as fontes de
financiamento ou suporte, institucional ou privado,
para a realizao do estudo.
248
sobrenome devem ser por extenso. Os demais

sobrenomes devem conter apenas a primeira letra
inicial (ex. Jos Carlos F. P. Oliveira.). No caso de
vrios autores, seus nomes devero ser separados
por ponto e vrgula.
Intrues aos autores
2.11.4 Filiao dos autores: antes do nome de cada
Processos e tcnicas j publicados, amenos que
autor dever constar um nmero arbico, sobrescrito,
tenham sido extensamente modificados, devero ser
indicando seu local de trabalho, com endereo
referenciados por citao.
completo (inclusive CEP) e dever aparecer logo

abaixo dos nomes dos autores, tambm esquerda.
2.12.3 Resultados: devero ser apresentados com o
Deve-se assinalar o nome do autor principal com um
mnimo possvel de discusso ou interpretao
asterisco
pessoal e, sempre que possvel, ser acompanhados
sobrescrito,
para
qual
toda
de tabelas e figuras adequadas. Os dados, quando
correspondncia dever ser enviada.
pertinentes, devero ser submetidos a uma anlise

2.11.5 Resumo em portugus: dever apresentar
estatstica.
concisamente o trabalho, destacando as informaes

de
maior
importncia,
expondo
metodologia,
2.12.4 Discusso: dever ser restrita ao significado
resultados e concluses. Permitir avaliar o interesse
dos
pelo artigo, prescindindo de sua leitura na ntegra.
evitando-se inferncias no baseadas nos mesmos.
Dever-se- dar destaque ao Resumo como tpico do
Obs.: Eventualmente, Resultados e Discusso
trabalho, (mximo de 200 palavras).
podero ser apresentados num nico item.
2.11.6 Abstract: verso do resumo para a Lngua
2.12.5 Agradecimentos: Possveis menes em
Inglesa. Evitar tradues literais. Quando no houver
agradecimentos incluem instituies que de alguma
domnio
pessoas
forma possibilitaram a realizao da pesquisa e/ou
qualificadas. Providenciar tambm verso do ttulo
pessoas que colaboraram com o estudo, mas que
para a lngua inglesa.
no preencheram os critrios para serem coautores.
deste
idioma,
consultar
dados
obtidos
resultados
alcanados,
Este item opcional e dever vir antes das

2.11.7
Palavras-chave:
devero
Referncias.
identificar/representar o contedo do artigo. Observar

o limite mximo de 6 (seis). So importantes para
levantamentos em banco de dados, com o objetivo
de localizar e valorizar o artigo em questo. Devero
vir separados por ponto e vrgula.
2.12 Formatao do Trabalho
2.13 Referncias: baseadas nas normas da ABNT

2.13.1 Referncia dentro do texto:
No incio da citao. Nome do(s) autor (es) em caixa
baixa, seguido do ano entre parnteses. Ex. Pereira
(1999) descreveu a atividade ansioltica de Lippia
2.12.1 Introduo: dever estabelecer com clareza o
alba. Quando houver dois autores, dever obedecida
objetivo do trabalho e sua relao com outros
a ordem alfabtica dos autores e seguido o seguinte
trabalhos na mesma rea. Extensas revises da
padro: Castro e Silva (1998) analisaram a
literatura devero ser substitudas por referncias s
toxicologia do extrato de Psidium guajava. Para trs
publicaes mais recentes, onde estas revises
autores, a regra ser semelhante anterior,
tenham sido apresentadas.
separando os dois primeiros autores por meio de

vrgula. Por exemplo, Amoroso, Costa e Soares
2.12.2 Materiais e Mtodos: a descrio dos
(1997) descreveram a propriedade analgsica de
materiais e dos mtodos usados dever ser breve,
toxicologia da Lippia alba No caso de mais de trs
porm suficientemente clara para possibilitar a
autores, dever ser mencionado apenas o nome do
perfeita compreenso e a reproduo do trabalho.
primeiro, seguido de e colaboradores e do ano entre
249
parnteses. Por exemplo, Silva e colaboradores
SIMES, C.M.O.; SCHENKEL, E.P.; GOSMAN, G.;
(1999) confirmaram o efeito broncodilatador de
PALAZZO DE MELO, J.; MENTZ, L.A.; PETROVICK,
Mikania glomerata.
P.R. (org.) 2003. Farmacognosia: da Planta ao

Medicamento. Editora da UFRGS/Editora da UFSC.
No final da citao. Autor em caixa baixa seguido do
Porto Alegre/Florianpolis.
ano. Ex. (Silva, 1999). Quando houver dois autores,

estes devero ser separados pela partcula e e ser
YUNES, R.A.; CALIXTO, J.B (ed.) 2001. Plantas
obedecida a ordem alfabtica. Ex. (Castro e Silva,
Medicinais sob a tica da Qumica Medicinal
1998). No caso de trs autores, a regra ser
Moderna. Editora Argos. Chapec.
(Albuquerque, Lima e Sousa, 2000). Quando houver

mais de trs autores, dever ser mencionado apenas
2.13.3.4 Captulo de livro:
o nome do primeiro, seguido de et al. e do ano. Por

exemplo, (Silva et al., 1999) ou (Silva et al., 1995a,b).
Autor(es),
ano,
ttulo
do
captulo,
editor
(ou
organizador), ttulo do livro em itlico, pginas inicial

2.13.2 Citao textual: colocar, tambm, a pgina.
e final, editora, cidade.
Ex. (Silva, 1999, p.24)

FURLAN, M.; BERGAMO, D.C.B.; KATO. M.J. 2009.
2.13.3 As Referncias no final do artigo devero ser
Biossntese de Produtos Naturais: Atualidades e
ordenadas alfabeticamente pelo sobrenome do
Perspectivas
primeiro autor, em caixa baixa e em ordem crescente
Frmacos. In: YUNES, R.A.; CECHINEL FILHO, V.
de data de publicao, com o ano de publicao
(org.),
sempre aps o nome do ltimo autor. Devem-se levar
Frmacos e a Moderna Farmacognosia, p. 83-102.
em considerao as seguintes ocorrncias:
Editora da Universidade do Vale do Itaja. Itaja.
2.13.3.1 Livro com um autor:
2.13.3.5 Tese ou Dissertao:
Autor, ano, ttulo do livro em itlico, editora, cidade.
Autor, ano, ttulo da tese ou dissertao em itlico,

nome
COSTA, A.F. 1996. Farmacognosia. Fundao
no
Qumica
da
Desenvolvimento
de
Produtos
Faculdade
ou
de
Naturais:
Instituto,
Novos
Novos
nome
da
Universidade, cidade.
Calouste Gulbenkian. Lisboa.

LIMA, N. 1991. Influncia da ao dos raios solares
2.13.3.2 Livro com dois ou mais autores:
na germinao do nabo selvagem. Tese (Doutorado).

Faculdade de Cincias Agrrias, Universidade
Autores, ano, ttulo do livro em itlico, editora, cidade.
Estadual de Campinas.
SANTOS, I.F.; PEREIRA, F.L. 1995. Criando um
2.13.3.6 Artigo de peridico:
Novo Mundo. Atheneu, So Paulo.

Devero ser citados os nomes de todos os autores,
2.13.3.3 Livro editado
ano, ttulo do artigo, nome completo do peridico em

itlico, volume, pgina inicial e final.
Devero ser citados os nomes de todos os editores

ou organizadores. Editor(es) ou organizador(es),
CARLINI,
ano, ttulo do livro em itlico, editora, cidade.
RODRIGUES, E.; Tabach, R. 2010. Antiulcer effect of
250
E.A.;
DUARTE-ALMEIDA,
J.M.;
Intrues aos autores
the pepper trees Schinus terebinthifolius Raddi
Decreto no 3.945, de 28 de setembro de 2001, que
(aroeira-da-praia)
regulamenta a Medida Provisria no 2.186-16, de 23
and
Myracrodruon
urundeuva
Allemao, Anacardiaceae (aroeira-do-serto). Revista
de agosto de 2001.
Brasileira de Farmacognosia, v.20, p.140-146.

2.13.3.11 Banco/Base de Dados
2.13.3.7 Citao indireta:
BIREME. Centro Latino-Americano e do Caribe de
As duas citaes devem ser mencionadas de
Informao em Cincias da Sade. Lilacs Literatura
maneira completa, com autor, ano, ttulo do livro ou
Latino-Americana e do Caribe em Cincias da Sade.
do peridico.
Disponvel
em:
<http://bases.bireme.br/cgibin/wxislind.exe/iah/online
CARBALLO, S.A. 1995. Plantas medicinales del
/?IsisScript=iah/iah.xis&base=LILACS&lang=p>.
Escambray cubano. Apuntes cientficos. TRAMIL VII.
Acesso em: 27 ago. 2009.
Isl San Andrs, Colmbia. apud GERMOSNROBINEAU, L. G., (ed) 1996. Farmacopea Vegetal
2.13.3.12 Homepage/Website
Caribea, p.127-130. Editions Emile Dsormeaux,

WORLD HEALTH ORGANIZATION (WHO). WHO
Fort-de-France, Martinica.
Guidelines for Pharmacological Management of

2.13.3.8
Eventos
cientficos
(Congressos,
Seminrios, Simpsios e outros):
Pandemic (H1N1) 2009 Influenza and other Influenza

Viruses. 20 August 2009. 91 p. Disponvel em:
<http://www.who.int/csr/resources/publications/swine
Autor(es). Ttulo do trabalho, ano, nome do evento,
flu/h1n1_guidelines_pharmaceutical_mngt.pdf>.
n do evento, identificao do trabalho ou resumo,
Acesso 28 ago. 2009.
cidade de realizao do evento.

2.14 Nomenclatura
OLIVEIRA, J.P.C.; FERREIRA, E.L.F.; CHAVES,
M.H. 2009. Fenis totais e atividade antioxidante e
Devem ser observadas as regras de nomenclatura
citotxica de extratos das folhas de Lecynites pisonis.
botnica e zoolgica, assim como abreviaturas e
32 Reunio anual da Sociedade Brasileira de
convenes adotadas em disciplinas especializadas.
Qumica, PN-003, Fortaleza.

3. Submisso de Artigos
2.13.3.9 Patentes
3.1 Os artigos devero ser encaminhados para
Devem ser identificadas conforme modelo abaixo.
submisso
atravs
Ichikawa, M.; ogura, M. e lijima, T. 1986. Antiallergic
http://revistafitos.far.fiocruz.br/, com indicao da
flavone glycoside from Kalanchoe pinnatum. Jpn.
rea do conhecimento qual o artigo pertence
Kokai Tokkyo Koho JP 61,118,396, apud Chemical
(Agroecologia,
Abstracts 105: 178423q.
Farmacologia, Inovao, Qumica e Monografia).
2.13.3.10 Leis, Resolues e demais documentos
3.2 Todos os manuscritos sero submetidos
Botnica,
do
site
Etnofarmacologia,
apreciao de consultores ad hoc, cujos nomes

BRASIL, 2003. Decreto n 4.946 de 31 de dezembro
permanecero em sigilo absoluto, e que dispem de
de 2003. Altera, revoga e acrescenta dispositivos ao
plena autoridade para decidir sobre a pertinncia de
251
sua aceitao, podendo, inclusive, reapresent-los
3.3 Os artigos aceitos para a publicao devero ser
aos autores com sugestes para que sejam feitas as
devolvidos
alteraes necessrias e/ou para que os mesmos
recomendaes feitas pelos referees no prazo
sejam adequados s normas editoriais da Revista.
mximo de dois meses, caso contrrio a aceitao do
Os trabalhos que no forem selecionados para
mesmo ser cancelada.
ao
Editor
Coordenador
com
as
publicao sero devolvidos aos autores.
252
Intrues aos autores

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Bauhinia forficata Link (Fabaceae)

Antibacterial activity of Schinopsis brasiliensis against

Presidente da Fundao Oswaldo Cruz (FIOCRUZ): Paulo Ernani Gadelha Vieira

Alade Braga de Oliveira, UFMG

Adrian M Pohlit, INPA

Rosane de Albuquerque dos Santos Abreu, FIOCRUZ

Luis Vitor Sacramento, UNESP Araraquara

Anny Magali Maciel Trentini, GETEC, Herbarium

Mahabir Gupta, Universidad do Panam

Benjamin Gilbert, FIOCRUZ

Manuel Odorico de Moraes Filho, UFCE

Carmen Penido, FIOCRUZ

Maria Aparecida Medeiros Maciel, UFRN

Ceclia Veronica Nunez, INPA

Maria Cristina Marcucci Ribeiro, UNIBAN

Claudia do Pessoa, UFCE

Maria Fni Dolabela, UFPR

Cristina Dislich Ropke, Centroflora

Mary Ann Foglio, CPQBA-UNICAMP

Edeltrudes de Oliveira Lima, UFPB

Paulo Kageyama, USP

Elfriede Marianne Bacchi, USP

Rivaldo Niero, UNIVALI

Emdio Vasconcelos Leito da Cunha, UFPB

Ronan Batista, UFBA

Emiliano Barreto, UFAL

Rosendo Augusto Yunes, UFSC

Ferno Castro Braga, UFMG,

Snia Soares Costa, UFRJ

Joo Antonio Pegas Henriques, UFRGS

Suzana Guimares Leito, UFRJ

Joo Carlos Palazzo de Mello, UEM

Thereza Christina Barja Fidalgo, UERJ

Joo Ernesto de Carvalho, CPQBA UNICAMP

Valdir Cechinel Filho, UNIVALI

Joo Marcos Hausmann Tavares, UFRJ

Valdir Florencio da Veiga Junior, UFAM

Jos Maria Barbosa Filho, UFPB

Wagner Luiz Barbosa, UFPA

Lucio Ferreira Alves, FIOCRUZ

Wagner Vilgas, UNESP Araraquara

Luis Carlos Marques, UNIBAN

Ficha Catalogrfica elaborada pela Biblioteca de

INOVAO (GESTO E CTI EM SADE)

Antibacterial activity of Schinopsis brasiliensis

S. de Novaes; 4* Ronan Batista

Department of Organic Chemistry, Institute of Chemistry, Federal University of Bahia, Brazil.

Revista Fitos, Rio de Janeiro, Vol, 9(3), 161-252, Jul-Set 2015

growing resistance of pathogenic microorganisms to

synthetic products (Amaral and Bara, 2005).

Recent estimates indicate that the worlds population

production is not increasing fast enough to support

According to Di Piero, Novaes and Pascholati (2010)

subglutinans f. sp. ananas by the essential oils of

(Cinnamomum zeylanicum) (Vigo et al., 2009).

Antibacterial activity of Schinopsis brasiliensis against phytopathogens of agricultural interest

plant, of which we highlight the isolation of a few alkyl

2011. An exsiccate was deposited at the UESB

and alkenyl phenols, among other components

herbarium, in Vitria da Conquista city, Bahia state,

(Cardoso, David and David, 2005).

Brazil, under the code HUESBVC 4124. The different

oven at 50C for 48 hours. The dried plant material

leaves, bark and secondary roots was milled and