INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS

BIOLGICAS

1. Materia: Mtodos de anlisis (Laboratorio)

2. Prctica: ANLISIS ESPECTROFOTOMTRICO DE UN SISTEMA

3.
4.
5.
6.
7.
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9.

MLTIPLE
Alumna: Acua Vzquez Elia Gabriela
Grupo: 5QV2
Seccin 2
Profesor: Vctor Manuel Luis Macas Martnez
Fecha de realizacin: 28-08-2016
Fecha de entrega: 29-08-2016
Situacin escolar: Inscrita

OBJETIVO

Utilizar los conocimientos obtenidos en prcticas y semestres anteriores con

respecto al uso del espectrofotmetro y ampliarlos en busca de la comprobacin
de las diferentes leyes de espectrofotometra, as como su utilidad dentro del
laboratorio para la identificacin de sustancias y la medicin de sus
concentraciones.

FUNDAMENTOS

Ley de la Aditividad. Estipula que a absorbancia de un sistema mltiple es una

propiedad aditiva y supone que no hay interaccin qumica entre los cromforos.
Esta Ley se aplica cuando se requiere cuantificar simultneamente la absorbancia
de dos o ms sustancias en la misma solucin. (En una mezcla).

La ley de la Aditividad est dada por la siguiente ecuacin:

A T =a mAC A + amBC B
Siendo que:

amA

CA

amB

C B : concentracin de solucin B

: absorvitividad de la solucin A a determinada longitud de onda.

: concentracin de solucin A
: absorvitividad de la solucin B a determinada longitud de onda.

Ley de Lambert-Beer
Esta ley expresa la relacin entre absorbancia de luz monocromtica (de longitud
de onda fija) y concentracin de un cromforo en solucin:
A = log I/Io = cl
La absorbancia de una solucin es directamente proporcional a su concentracin
a mayor nmero de molculas mayor interaccin de la luz con ellas-; tambin
depende de la distancia que recorre la luz por la solucin a igual concentracin,
cuanto mayor distancia recorre la luz por la muestra ms molculas se
encontrar-; y por ltimo, depende de , una constante de proporcionalidad
-denominada coeficiente de extincin- que es especfica de cada cromforo. Como
A es adimensional, las dimensiones de dependen de las de c y l. La segunda
magnitud (l) se expresa siempre en cm mientras que la primera (c) se hace,
siempre que sea posible, en M, con lo que las dimensiones de resultan ser M1cm-1. Este coeficiente as expresado, en trminos de unidades de concentracin
molar (o un submltiplo apropiado), se denomina coeficiente de extincin molar
(M). Cuando, por desconocerse el peso molecular del soluto, la concentracin de
la disolucin se expresa en otras unidades distintas de M, por ejemplo gL-1, las
dimensiones de resultan ser distintas, por ejemplo g-1Lcm-1, y al coeficiente as
expresado se denomina coeficiente de extincin especfico (s).
La ley de Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas; para valores de c
altos, vara con la concentracin, debido a fenmenos de dispersin de la luz,
agregacin de molculas, cambios del medio, etc.

RESULTADOS
Determinacin de las longitudes de onda de trabajo 1 y 2
TABLA 1. VALORES DE ABSORBANCIA PARA CONSTRUIR LOS
ESPECTROS DE ABSORCIN DE K2Cr2O7 Y DE KMnO4
Longitud de onda (nm)
340
350
360
370
380
390
400
410
420
430
440
450
460
470
480
490
500
510
520
530
540
550
560
570
580
590
600

A K2Cr2O7
2000
1.976
1.938
1.613
1.542
1.240
0.847
0.617
0.564
0.585
0.603
0.579
0.534
0.453
0.358
0.269
0.194
0.122
0.074
0.040
0.023
0.011
0.006
0.003
0.004
0.003
0.001

A KMnO4
0.410
0.382
0.327
0.235
0.160
0.092
0.047
0.028
0.023
0.029
0.042
0.068
0.104
0.170
0.217
0.349
0.448
0.562
0.653
0.698
0.654
0.669
0.445
0.399
0.238
0.111
0.080

GRFICA 1. ESPECTROS DE ABSORCIN DE K2Cr2O7 Y DE KMnO4

ESPECTROS DE ABSORCIN
0.8
0.7
0.6
0.5
A K2Cr2O7

Absorbancia 0.4

A KMn04

0.3
0.2
0.1
0
300 350 400 450 500 550 600 650

Longitud de onda (nm)

a) A partir de los espectros de absorcin, escoja la longitud de onda de

mxima absorbancia para el dicromato de potasio 1 y la de mxima
absorbancia para el permanganato de potasio 2.
Con estos datos llene la tabla 2.
TABLA 2. VALORES DE max PARA K2Cr2O7 Y KMnO4
Compuesto
K2Cr2O7
KMnO4

max
340
510

b) Por qu se eligen estas longitudes de onda y no otras?

Porque a 340 nm se lee claramente K2Cr2O7 y an se presenta lectura de
KMnO4 , al igual que en 510 nm se lee perfectamente KMnO 4 y an es
perceptible K2Cr2O7 .
La importancia de conocer la max es que sta nos permite leer diferentes
concentraciones incluso las mnimas con alta sensibilidad.
DISCUSIN:
El espectro de absorcin es una constante fotomtrica, es la
representacin grfica de la medicin de absorbancia de diferentes
longitudes de onda.
Para que sea el mismo espectro de absorcin el que se obtenga, debe
presentar ciertas caractersticas: misma sustancia, mismo intervalo de
longitudes de onda y mismo disolvente. Como podemos ver en la grfica
de los espectro anteriores, se nota el comportamiento de dos diferentes
sustancias el permanganato de potasio y el dicromato de potasio.

OBTENCIN DE LAS ABSORTIVIDADES MOLARES DE CADA

COMPONENTE A LAS DOS LONGITUDES DE ONDA SELECCIONADAS
(1 y 2)
Curvas de calibracin ajustadas por regresin lineal, de K 2Cr2O7 y KMnO4
a las dos longitudes de onda seleccionadas. Con los datos obtenidos
complete la tabla 3.
TABLA 3. CURVAS DE CALIBRACIN DE K2Cr2O7 Y KMnO4
COMPUESTO

DILUCIN

CONCENTRACIN A 1
A 2
MOLAR (Cm)
1:7
0.00022
0.527
0.022
1:6
0.00026
0.606
0.025
1:5
0.00032
0.690
0.032
K2Cr2O7
1:4
0.0004
0.758
0.033
1:3
0.00053
0.898
0.036
1:2
0.0008
1.635
0.063
1:7
0.000057
0.062
0.075
1:6
0.000066
0.063
0.086
1:5
0.00008
0.069
0.095
KMnO4
1:4
0.0001
0.081
0.116
1:3
0.00013
0.125
0.171
1:2
0.0002
0.196
0.256
a) En la misma grfica, construya las curvas de calibracin para cada
compuesto a las dos longitudes de onda colocando en el eje de las
ordenadas la absorbancia y en el de las abscisas la concentracin
molar (Grfica 2 y 3)

GRFICA 2. CURVA DE CALIBRACIN DE K2Cr2O7 ( 1 y 2)

GRFICA 3. CURVA DE CALIBRACIN DE KMnO4 ( 1 y 2)

b) A partir de las curvas anteriores, utilizando la ecuacin de la Ley

General de fotometra, determina los valores de a m para cada
sustancia a las dos longitudes de onda seleccionadas (1 y 2) y
complete la tabla 4. Escriba sus clculos.

TABLA 4. VALORES DE am PARA K2Cr2O7 Y KMnO4 A ( 1 y 2)

ABSORTIVIDAD/SUSTANCIA
am a 1
am a 2

K2Cr2O7
1828.2
65.761

KMnO4
319.07
241.9

DISCUSIN: Al observar la ecuacin de la Ley General de la fotometra se

percibe que sta tiene el mismo comportamiento que la ecuacin de la
recta as mismo, al sustituir los diferentes parmetros que la componen
resulta que am = Pendiente de la recta (m), y gracias a la curva de
calibracin de cada una de las sustancias logramos calcular no slo su
pendiente al linealizar los datos sino tambin su absorbitividad.
COMPROBACIN DE LA LEY DE LA ADITIVIDAD EN UN SISTEMA
MLTIPLE
Con los datos obtenidos en este experimento complete el siguiente cuadro.

TABLA 5. VALORES DE Cm Y ABSORBANCIA EN LAS MEZCLAS DE

K2Cr2O7 Y KMnO4
Mezcla No.

A observada
1
2
1
0.00080
0.0004
0.092
1.702
2
0.00040
0.00010
0.150
1.056
3
0.0002
0.00020
0.272
0.565
a) A partir de la ley General de la Fotometra, obtenga la absorbancia
calculada de cada mezcla a las dos longitudes de onda ( 1 y 2).
Compare estos valores con los observados y complete la tabla 6.
Escriba todos sus clculos.
Cm K2Cr2O7

Cm KMnO4

TABLA 6. VALORES DE ABSORBANCIA OBSERVADOS Y

CALCULADOS DE ABSORBANCIA DE LAS MEZCLAS DE K 2Cr2O7 Y
KMnO4 A ( 1 y 2)
Mezcla No.
1
2

A observada
1
2
0.092
1.702
0.150
1.056

A calculada
1
2
1.59
0.149
0.76
0.050

0.272

0.565

0.429

0.061

CLCULOS REALIZADOS

b) Para la verificacin adecuada del seguimiento de la ley de

aditividad, calcule el valor de r y r 2 a 1 y 2, a partir de un grfico
en el que se considere como variable independiente las
absorbancias calculadas y como variable dependiente, las
absorbancias observadas. Diga si se cumple la ley de la aditividad
y explique su respuesta.

GRFICA 4. LEY DE LA ADITIVIDAD

DISCUSIN: La ley de aditividad de la absorbancia se puede ver

reflejada cuando se prepara una solucin de dos sustancias
coloreadas, la presencia del segundo componente a veces produce un
cambio en las propiedades de absorcin de luz de la primera sustancia.
En estas condiciones, la absorbancia de los componentes no es aditiva
debido a la mutua interaccin. Sin embargo, hay muchas circunstancias
en que los componentes no interactan entre si de ese modo la
presencia de uno no afecta ninguna de las propiedades de absorcin
del otro. En tal caso la absorcin de luz de estos componentes es
aditiva, es decir, que la absorbancia total de la solucin es la suma de
las absorbancias individuales que tendrn ambas sustancias si
estuvieran en soluciones separadas y fuesen medidas bajo las mismas
condiciones. Cuando esto se cumple es posible realizar un anlisis
espectrofotomtrico simultneo para ambos componentes. Para
descartar posibles interacciones es necesario previamente investigar
los espectros de absorcin de cada una de las sustancias en
soluciones separadas as como el espectro de una solucin mezcla y
comprobar la condicin de aditividad. En el caso de nuestros
resultados, pudieron existir este tipo de interacciones ya que al
momento de comprobar la ley de la aditividad la absorbancia calculada
y observada no coincidieron. Cuando existe ms de un componente
que absorbe radiacin, se emplea la ley de aditividad para
absorbancias, que asume que las especies actan independientes unas
de otras y que sus absorbancias son aditivas.
TABLA 7. VALORES DE r y r2 A ( 1 y 2)

1
0.9023
0.8142

r
r2

2
0.8542
0.7298

DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN DE K 2Cr2O7 Y KMnO4

EN LA SOLUCIN PROBLEMA
A 1 = 1.726
Cm de K2Cr2O7=
A 2= 0.329
Cm de KMnO4 =
DISCUSIN: Se obtuvieron diferentes absorbancias a pesar de tratarse
mismo problema ya que como mencion al principio del informe las
diferentes longitudes de onda tienen sensibilidad a diferentes
concentraciones, en este caso el factor que vari fue la concentracin
ya que en el rango de lectura que utilizamos dicha variacin fue
reconocida sin embargo no con la misma intensidad en cada una de las
longitudes de onda.
CONCLUSIONES

El espectro de absorcin es una constante fotomtrica.

La absorbitividad es una constante fotomtrica.
EXTRA
4 BANDAS DE ROCK DE LOS 70

The beach boys (Son de los 60 pero amo Wouldnt it be nice)

Pink Floyd
Rollings Stones
The Allman Brothers Band