DETERMINACIN DEL POTENCIAL DE AGUA EN LOS VEGETALES

METODO DE VOLUMEN O PESO TISULAR CONSTANTE

Este consiste en colocar muestras de tejido en soluciones de concentracin variable, pero
conocidas, por un tiempo suficiente (alrededor de 45minutos), para permitir el equilibrio
con la solucin. Por lo general, se emplean como solutos, sacarosa, sorbitol, manitol o
polietilenglicol (PEG), de mltiples formulaciones que van desde PEG-400 a PEG-6000.
La seleccin del soluto se fundamenta en que, por el tamao de sus molculas, no pase
con facilidad a travs de las membranas y que no dae el tejido (Salisbury y Ross, 1994).
El objetivo es, encontrar la solucin acuosa en la cual el tejido no cambia de peso; lo que
indica que, el contenido celular del tejido est en equilibrio con la solucin. De esta
forma el del tejido y el de la solucin sern iguales (Jaramillo et al, 1993).
En consecuencia, la solucin donde no ocurra cambio de peso, es la concentracin que se
encuentra en equilibrio con el contenido celular del tejido en observacin, lo cual indica
que los potenciales de agua de la solucin y el tejido son iguales.'
Debido a que las mediciones se hacen en soluciones que se encuentran sometidas a la
presin atmosfrica, conforme lo expresan Salisbury y Ross, (1994), elpser igual a cero
MPa (0 MPa). Segn lo mencionado por estos mismos autores, el sde la solucin se
puede calcular por medio de la frmula:
s=-CiRT
s = Potencial osmtico
C = concentracin de la solucin expresada como molalidad (moles de solutoporkg
H2O)
i = constante para la ionizacin del soluto y otras variaciones respecto a las soluciones
ideales. Para la sacarosa i=1.
R= Constante de los gases (0,00831 kg.MPa.mol-1.K-1, 0,080205 kg..Atm.mol-1.K-1).
T=Temperatura absoluta K = C+273.
Debe tenerse presente que, la temperatura de la solucin a la que se le calcular el s,
se asimila a la ambiental del laboratorio, cuando se realiza el procedimiento. Por otra
parte, estas soluciones, por encontrarse a presin atmosfrica, se ha aceptado, dentro
de la comunidad cientfica universal(Salisbury y Ross, 1994), que el p es igual a cero
MPa. En consecuencia, el de la solucin es igual al s; as mismo, en el equilibrio el
de la solucin es igual al del tejido.

MATERIALES Y METODOS
MATERIALES
Tubos de ensayo, agua destilada, sacarosa, tubrculos de papa (Solanum tuberosumL.),
sacabocados, toallas de papel, balanza-de precisin, pinzas; bistur, gradillas, probeta
graduada de 50 ml, marcador indeleble.
METODOLOGIA
METODO DE VOLUMEN O PESO TISULAR CONSTANTE.
Se dispondr de las siguientes concentraciones molales de soluciones de sacarosa en
agua destilada: 0.05, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 (mol.kg-1);adems, se tendr
como testigo un tubo de ensayo con agua destilada (0.0 mol kg-1).
Se depositar, en cada tubo de ensayo, 10 ml de las soluciones de sacarosa y de agua
destilada indicadas. Es importante mantener el orden para no alterar la concentracin. A
continuacin, del tejido previamente descortezado, con un sacabocado, tome cilindros de
1 cm de dimetro; luego, crtelos en fracciones de longitud uniforme y squelos,
rpidamente,con servilleta de papel. Mejores resultados se lograrn si los segmentos se
manipulan con pinzas, pero evite exprimirlos.
Pese inmediatamente las porciones de tejido y, colquelas en cada uno de los tubos de
ensayo que contienen las soluciones y el agua destilada. Treinta o cuarenta y cinco
minutos despus de haber colocado el tejido, en los tubos de ensayo (la duracin del
contacto con la solucin depende del tiempo disponible), squelo y squelo con
servilletas de papel y pese de inmediato.
Para conveniencia de los clculos escriba en la Tabla 1, los cambios de peso que se
presentarn en las rodajas de los tejidos, de acuerdo con las soluciones empleadas. Con
base en los registros de peso, obtenidos antes y despus de sumergir los segmentos en las
soluciones y el agua destilada, establezca las diferencias alcanzadas y calcule el potencial
hdrico del tejido (tejido) analizado.

Tabla 1. Registro de datos con el mtodo de peso constante empleado en la determinacin

del potencial de agua

Concentracin
de
la solucin
(Molal)

Peso del Tejido (g)

.'
Inicial

Final

Potencial (MPa)
Diferencia

Osmtico
(s) de la
solucin

0.0
0.05
0.10
0.20
0.30
0.40
0.50
0.60
0.70
0.80
0.90
Tomado de Cartagena, J. R., Martnez, E., y Rodrigo, H. (2001).

BIBLIOGRAFA
Cartagena, J. R., Martnez, E., y Rodrigo, H. (2001). Manual de prcticas laboratorio de
fisiologa vegetal 12 bioensayos. Medelln: Centro de publicaciones Universidad Nacional
de Colombia, sede Medelln.
Jaramillo, S., Lagos. E., y Montoya. L.(1993). Manual de prcticas de fisiologa vegetal.
Medelln: Universidad Nacional de Colombia, sede Medelln.
Salisbury, F. y Ross, C. (1994). Fisiologa vegetal4a edicin
Mxico: Grupo Editorial Iberoamrica.

Hdrico
(tejido) del
tejido