Professional Documents
Culture Documents
INGENIERA BIOTECNOLGICA
V APARATOS
INGENIERA BIOTECNOLGICA
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Espectro
parmetros s/n
1.- s = 600,0 nm
E = 450,0
Inferior = + 0,00 A
T = 60 seg.
N =1
6.- Cubrir
Si
7.- Copiar
No
No
9.- Fila
Si desea cambiar un parmetro presione la tecla Yes e ingrese el nmero del
parmetro correspondiente, y luego ingrese el nuevo valor para el parmetro
indicado por el cursor. Ahora si el ingreso es errneo presione la tecla CE y
reingrese el nuevo valor. Cuando el parmetro indicado por el cursor no ser
cambiado, presione directamente la tecla ENTER .
Cuando el proceso de cambio de parmetro est completo, presione la tecla NO
para terminar el procedimiento.
4.- MEDICIN DE STNDARES
Una vez ajustados los parmetros de medicin y al presionar la tecla No para el
cambio de parmetro aparece el mensaje de insertar una muestra y presionar la
tecla Star / Stop .El espectro medido es indicado en la pantalla.
5.- PROCESAMIENTO DE DATOS
Cuando la medicin termina, se indica el mensaje
DATOS S/N.
PROCESAMIENTO DE
a)
INGENIERA BIOTECNOLGICA
INGENIERA BIOTECNOLGICA
IX DISCUSION DE DATOS
Sealar las conclusiones que se desprenden de los grficos obtenidos.
X CUESTIONARIO:
1.- Defnase brevemente:
a) La radiacin monocromtica
b) El espectro de absorcin
c) Porque es importante monocromatizar la radiacin policromtica
2.- describir la diferencia entre un espectrofotmetro y un fotmetro
3.- En la longitud de onda de trabajo obtenida en la parte experimental a 525 nm calcular
la cantidad de energa que le corresponde a esa radiacin. Compararla con una longitud
de onda de 200 nm que corresponde a la regin UV
4.- Que tipo de informacin proporciona el espectro de absorcin
5.- Seale algunas razones el porque determina la longitud de onda analtica o de trabajo
6.- Indicar que formas conoce para representar una curva de absorcin
7.- Que es un espectro de absorcin atmica y que es un espectro de absorcin molecular
INGENIERA BIOTECNOLGICA
INFORME DE LABORATORIO # 1
SELECCIN DE LA LONGITUD DE ONDA DE TRABAJO
Fecha
: _______
No GRUPO: ______
ANALISIS:
___________________________________________________________________
____________________________________________________________________
METODO:
___________________________________________________________________
MUESTRA:
___________________________________________________________________
CALCULOS:
A) Clculo de la concentracin de la solucin stock de KMnO4 0.1000N expresada
en ppm referida en Manganeso
INGENIERA BIOTECNOLGICA
TABLA DE RESULTADOS:
INGENIERA BIOTECNOLGICA
DISCUSIN DE RESULTADOS:
INGENIERA BIOTECNOLGICA
APELLIDOS Y NOMBRES
___________________________________________________
FIRMA DEL ALUMNO: _______________________________
CUESTIONARIO:
1.- Defnase brevemente:
a) La radiacin monocromtica: Es aquella que est formada por componentes de
un solo color. Es decir, que tiene una sola longitud de onda, correspondiente al
color.
b) El espectro de absorcin: Muestra la fraccin de la radiacin
electromagntica incidente que un material absorbe dentro de un rango
de frecuencias. Se emplea para identificar los elementos componentes de
algunas muestras, como lquidos y gases; ms all, se puede emplear para
determinar la estructura decompuestos orgnicos.
c) Porque es importante monocromatizar la radiacin policromtica: Porque
cuando hacemos pasar una luz policromtica a travs de un objeto, este absorbe
algunas longitudes de onda y transmite las que no absorbe como colores.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
5.- Seale algunas razones el porque determina la longitud de onda analtica o de trabajo
-
6.- Indicar que formas conoce para representar una curva de absorcin:
-
Tanto las molculas como los tomos tienen un nmero limitado de niveles o
estados energticos cuantizados. Para que se produzca absorcin de radiacin, la
energa del fotn excitante (incidente) debe igualar a la diferencia de energa
entre el estado fundamental y uno de los estados excitados de la especie
absorbente. Estas diferencias de energa (E) son nicas, por lo tanto permiten
caracterizar los constituyentes de una muestra. Para este objeto se obtiene
experimentalmente una representacin grfica de la variacin de la absorbancia
en funcin de la longitud de onda.
10
INGENIERA BIOTECNOLGICA
OBJETIVOS
Construir curvas de calibracin
Verificar la conformidad de la ley Beer
Determinar las concentraciones lmites de los patrones
11
INGENIERA BIOTECNOLGICA
12
II GENERALIDADES
Despus de determinar la longitud de onda a la cul deben de realizarse las medidas, se calibra el
mtodo midiendo una serie de patrones del constituyente en estudio. Generalmente se prepara una
solucin diluida de la sustancia que se desea determinar, se pipetean cuidadosamente porciones de
esta solucin, de distinto volumen, se aade el reactivo que forma color, y se ajustan las
condiciones para que se desarrolle el color en forma ptima, se diluye cada solucin a un volumen
predeterminado en una fiola, y luego se mide la absorbancia de cada solucin a la longitud de onda
analtica o de trabajo.
Las medidas de la absorbancia se realizan comnmente utilizando un blanco, que debe ser idntico
a la muestra en todo, excepto en que no debe contener el constituyente que se ha de determinar. El
blanco deber contener los reactivos, aditivos, disolvente, etc., en la misma naturaleza y
concentracin que las utilizadas en cada muestra desconocida en la que se desarrolle color. De esta
manera, las lecturas de las muestras estn corregidas automticamente para cualquier absorcin
pequea por accin de los reactivos y del disolvente. Con los datos absorbancia para las diferentes
concentraciones de las series patrn se construye una curva de calibrado. La cantidad de luz
absorbida por cada patrn se encuentra bien definida y se debe ajustar a ciertas leyes fsicas
denominadas leyes fotomtricas:
a)
INGENIERA BIOTECNOLGICA
13
APARATOS
Espectrofotomtro
: Shimadzu 160 -A
Cubeta
: 1 cm. De trayecto ptico
Regin de trabajo
: Espectro visible
Longitud de Onda de trabajo : 525 nm
VI MATERIALES
Fiolas de 100 y 250 ml.
Buretas por 25 ml.
VII REACTIVOS
Solucin Stock O,100N de permanganato de potasio
Solucin diluda de permanganato de potasio de 100 ppm .de manganeso
soluciones patrones.
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones patrones
Preparar a partir de la solucin Stock de KMnO4 0, 1000N una solucin estandard diluida de 100
ppm en manganeso para un volumen de 250 ml y luego por dilucin preparar las soluciones
patrones siguientes:
14
INGENIERA BIOTECNOLGICA
CUADRO DE SOLUCIONES
No
Patrn
Concentracin
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
0,5
1,0
2,0
4,0
6,0
8,0
10,0
12,0
16,0
20,0
30,0
40.0
ppm Volumen a
Medir del estndar
Volumen a
preparar
ml
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
CAMBIO DE PARAMETRO S / N ?
METODO
:
1
1
=
525 NM
STANDAR No = 12
MUESTRA No =
1
REPETIR
=
1
IMPRESION DE DATOS
CURVA DE TRABAJO NO LINEAL
NO
NO
7.-
INGENIERA BIOTECNOLGICA
15
FILA
INGENIERA BIOTECNOLGICA
16
Para seleccionar las soluciones patrones para la construccin de la curva de calibracin es necesario
calcular el error relativo de la concentracin o de la absorbancia que surge de un error fotomtrico
de 1 %, y se efectua a partir de la ecuacin siguiente:
dA = dC = 0.434 dT
A
C
t log t
Donde:
dA = dC = error relativo de la concentracin o de la absorbancia
A
C
dT = error fotomtrico de 1 %
t = transmitancia.
X CUESTIONARIO:
1.- Que son y cuales son las leyes fotmetricas?
2.- Como obtiene y para que se utiliza una curva de calibracin o de trabajo
3.- Como comprueba experimentalmente la ley Beer
4.- Sealar las razones por las cules se dan las limitaciones de la Ley de Beer
5.- A que se denominan y cuales son los errores personales
6.- Que criterios se maneja para seleccionar las soluciones patrones para ser utilizadas en un mtodo
espectrofotmetrico
INGENIERA BIOTECNOLGICA
17
7.- Representar en forma grfica el error relativo de la concentracin considerando el 0.5 % de error
fotomtrico si las lecturas son de 1, 5, 10, 20, 30 ,40, 50, 60, 70, 80, 90, y 95 % de transmitancia
8.- Dar razones porque en espectroscopia se utilizan soluciones diludas
9.- Cuando una curva de calibracin no parte del origen sealar las razones que determinan este tipo
de curva
10.- Sealar los rangos de transmitancias y absorbancias de los patrones y de la muestra coloreada
donde el error relativo es mnimo
18
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Informe de laboratorio No 2
DEMOSTRACIN DE LAS LEYES FOTOMTRICAS Y ERROR RELATIVO DE LA
CONCENTRACIN
Fecha:
_____________
No GRUPO: ___________
Anlisis:
___________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________
CAMBIO DE PARAMETRO S / N ?
METODO
:
1
1
=
525 NM
STANDAR No = 12
MUESTRA No =
1
REPETIR
=
1
IMPRESION DE DATOS
CURVA DE TRABAJO NO LINEAL
FILA
NO
NO
INGENIERA BIOTECNOLGICA
TABLA DE RESULTADOS:
N estandar concentracin ppm Mn Absorvancia % T
1
0.5
0.017
2
1
0.041
3
2
0.078
4
4
0.164
5
6
0.252
6
8
0.32
7
10
0.422
8
12
0.509
9
14
0.597
10
16
0.683
11
20
0.835
12
30
1.195
96.16
90.99
83.56
68.54
55.98
47.86
37.84
30.97
25.29
20.74
14.62
6.38
CURVA DE CALIBRACIN:
19
INGENIERA BIOTECNOLGICA
c = 0.434 T
c
t logt
Donde:
c/c = Error relativo de la concentracin
T = grado de inertidumbre 1% (0.01)
t
= transmitancia
20
INGENIERA BIOTECNOLGICA
TABULACIN DE DATOS:
%T
dc / c
95
90
80
70
60
50
40
30
20
15
10
5
1
DISCUSIN DE RESULTADOS:
21
INGENIERA BIOTECNOLGICA
22
INGENIERA BIOTECNOLGICA
23
4.- Sealar las razones por las cules se dan las limitaciones de la Ley de Beer
Es una ley lmite (<0.01 M) A concentraciones mayores > 0.01 M la distancia promedio entre las
especies disminuye hasta el punto en que cada una afecta la distribucin de carga de sus vecinas
alterando la capacidad de absorcin a una .
En soluciones de baja concentracin del absorbente pero a concentraciones elevadas de otras
especies (electrolitos), la gran proximidad de iones al absorbente altera (interacciones
electrostticas) la absortividad molar. Este efecto se reduce al diluir.
5.- A qu se denominan y cules son los errores personales?
Se dan en la utilizacin y cuidado de las cubetas, deben de estar correctamente limpias, sin
huellas y sin ralladuras. Deben evitarse los cidos concentrados que puedan atacarlas, y se debe
comprobar antes y despus de la medida que no tengan burbujas ni partculas no disueltas que
pueden producir dispersin de la luz.
Otro error puede producirse en el control de la temperatura y tiempo.
- La temperatura influye dependiendo de qu reaccin sea.
- El tiempo se debe de controlar cuando tenemos reacciones que tardan un tiempo en producirse
y al cabo de un tiempo decaen.
- Tambin hay que tener en cuenta el orden de adicin de los reactivos, porque puede influir en
la obtencin de la absorbancia.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
24
6.- Qu criterios se maneja para seleccionar las soluciones patrones para ser utilizadas en un
mtodo espectrofotmetrico
Tienen composicin conocida.
Deben tener elevada pureza.
Debe ser estable a temperatura ambiente.
Debe ser posible su secado en estufa.
No debe absorber gases. No debe reaccionar con los componentes del aire.
Debe reaccionar rpida y estequiomtricamente con el titulante.
Debe tener un peso equivalente grande.
7.- Representar en forma grfica el error relativo de la concentracin considerando el 0.5 %
de error fotomtrico si las lecturas son de 1, 5, 10, 20, 30 ,40, 50, 60, 70, 80, 90, y 95 % de
transmitancia
INGENIERA BIOTECNOLGICA
25
INGENIERA BIOTECNOLGICA
26
ANALISIS DE MANGANESO
I OBJETIVOS
Construir la curva de calibracin o de trabajo
Determinar el contenido de manganeso en muestras de alimentos y de frmacos.
II GENERALIDADES
Pueden determinarse por espectrofotometra y colorimetra en forma de permanganato pequeas
cantidades de manganeso en minerales, aguas, alimentos, aceros y frmacos.
Entre los diversos reactivos capaces de oxidar los estados inferiores de oxidacin del manganeso
a permanganato, tenemos el peryodato de potasio cuya reaccin se desarrolla de la siguiente
manera:
2 Mn+2 +
analito
5 IO4- +
peryodato
3 H2O
----
2 MnO4- + 5 IO3- + 6 H+
in permanganato
1.- Interferencias
Son pocas las interferencias para el mtodo. La presencia de iones coloreados se puede
compensar empleando como blanco un parte alcuota de la muestra problema , no oxidada por el
peryodato.El cerio (III) y el cromo (III) son excepciones ; estos dan productos de oxidacin por
el peryodato que absorben en el mismo grado a la longitud de onda que se usa para la medicin
del permanganato.
Los componentes que acompaan al manganeso comunican cierta coloracin a la solucin, el
in frrico de color amarillo se elimina con cido fosfrico por formacin del complejo hierrofosfrico incoloro, el color debido a pequeas cantidades de cromo, vanadio, nquel, y cobalto se
compensan con el blanco tal como se ha sealado.
Los cloruros reducen el permanganato formado y por lo tanto, si hubo necesidad de utilizar HCl,
deben ser eliminados previamente en forma de vapores de HCl llevando a fumacin con H2SO4
III FUNDAMENTO
La muestra es sometida a calcinacin seca entre 500 - 550 oC , hasta obtener un resduo de
cenizas, la que es disuelta por cido y tratada con peryodato de potasio en caliente ; el
INGENIERA BIOTECNOLGICA
27
manganeso es oxidado por este reactivo hasta permanganato de color violeta. En esta condicin
de color desarrollado por reaccin y diluido a un volumen conocido se realiza la medicin
espectrofotomtrica a una longitud de onda de 525 nm.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
V APARATOS
Espectrofotmetro : Shimadzu 160 - A
Cubeta
: 1 cm. De trayecto ptico
Regin de trabajo : Espectro visible
Longitud de onda : 525 nm
Blanco
: agua
VI MATERIALES
Fiolas de 100 ml.
Pipeta graduada de 10 ml.
Equipo de filtracin
Vaso de precipitacin
Pisetas
VII REACTIVOS
Solucin de cido ntrico 1 : 1
Peryodato de potasio
Acido fosfrico
Solucin de Permanganato de potasio de 100 ppm en manganeso
Soluciones patrones o Standares.
VIII TECNICA
1.- Obtencin de curva de calibrado
Preparar las soluciones patrones o estandares de: 4, 6, 8, 12 y 16 ppm en manganeso para un
volumen de 100 ml.
CUADRO DE SOLUCIONES
28
INGENIERA BIOTECNOLGICA
No standard
Volumen aforado
1
2
3
4
4.0
8.0
12.0
16.0
100.0
100.0
100.0
100.0
Concentracin
ppm
4
8
12
16
CUANTIT.
CAMBIO DE PARAMETRO S/ N
1.- Mtodo: 1
2.3.4.5.6.7.-
= 525 NM
Standard No = 4
Muestra No = 1
Repetir No = 1
Impresin de datos = NO
Curva de trabajo no lineal = NO
Fila
INGENIERA BIOTECNOLGICA
29
30
INGENIERA BIOTECNOLGICA
2.- Porque en espectroscopia visible la solucin debe presentar color natural o formado con
colorante cromoforo y cuales son los factores a tomar en consideracin
3.- Que papel desempea el reactivo peryodato de potasio y el cido fosfrico. Formule las
reacciones qumicas
4.- Seale razones porque la especie coloreada debe presentar una lectura del 36.8 % de
transmitancia de acuerdo al error relativo de la absorbancia
5.- Como emplea la curva de calibracin para determinar la concentracin de un analito
6.- Un peso de 15 mg de muestra de un compuesto con peso molecular de 384.63 se disuelve en un
matraz volumtrico de 5 ml. Un alcuota de 1 ml se coloca en un matraz de 10 ml y se diluye hasta
la marca de enrase.
a) Halle la concentracin de la muestra en el matraz de 5 ml
b) Determine la concentracin en el matraz de 10 ml
c) La muestra de 10 ml se coloca en una celda de 0.5 cm y se obtiene una absorbancia de 0.634 a
495 nm. Determinar la absortividad molar a dicha longitud de onda
7.- Una muestra de 0.525 g que contiene manganeso se disolvi y se oxid a in permanganato y la
solucin se diluy a 100 ml en un matraz volumtrico. La absorbancia a 525 nm en una celda de 1
cm fue de 0.496 y su absortividad molar de 2.24 x 10 3, calcule el porcentaje de manganeso en la
muestra.
8.- Calcular la concentracin de manganeso encontrado en la prctica utilizando el mtodo de
regresin lineal
Fecha
: ____________
No Grupo: ___________
31
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Anlisis:
____________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________
Procedencia:
________________________________________________________________________
DATOS:
-
- Peso de muestra
- Blanco
CLCULOS:
1.- MTODO GRFICO (Curva de calibracin)
= ----------= -----------
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Ap = a. b. Cp
a1 =
a2 =
a3 =
a4 =
a5 =
am =
Cmuestra =
32
INGENIERA BIOTECNOLGICA
33
No de Muestra
1
2
3
4
5
6
7
mg Mn/ %
DISCUSIN DE RESULTADOS:
CUESTIONARIO:
INGENIERA BIOTECNOLGICA
OBJETIVOS
Construir una curva de absorcin y de calibrado
Seleccionar la longitud de onda de trabajo
Analizar el contenido de hierro en un alimento.
II GENERALIDADES
34
INGENIERA BIOTECNOLGICA
35
Gran cantidad de iones inorgnicos que presentan color en solucin acuosa absorben suficiente
energa radiante en la regin visible, lo que permite su determinacin espectrofotomtrica
directa, incluso en muy bajas concentraciones. Pero no todos los iones metlicos presentan color
propio, y otros tienen poco color.
Los colores de muchos cationes se pueden intensificar por formacin de compuestos complejos
al hacerlo reaccionar con determinados reactivos denominados cromoforos. Muchos reactivos
que producen color han sido empleados para la determinacin de hierro, en algunos se efecta la
determinacin directa de hierro (III), mientras en otros se aprovecha la formacin de complejos
muy coloreados entre hierro (II ) y diversos ligandos orgnicos.
Entre los diversos reactivos ms importantes para la determinacin espectrofotomtrica del
hierro figuran el reactivo 1, 10 fenantrolina y sus anlogos como el 4, 7 difenil 1, 10 fenantrolina
(batofenantrolina). El ligando orgnico, tiene la estructura siguiente C12H8N2, donde tres de estos
ligandos estn coordinados con un catin de hierro (II), por los pares de electrones sobre los
tomos de nitrgeno, para formar el complejo indicado, que en forma abreviada se escribe as:
Fe+2
Analito
3 Fenan
ligando
=========
Fe (fen)3
+2
Cada tomo de nitrgeno de la fenantrolina forma un enlace coordinado con el hierro (II) y que
hay un total de 6 enlaces de este tipo. El complejo se llama tris 1, 10 fenantrolina, hierro II.
El hierro est contenido en el pigmento de la sangre (hemoglobina) y sirve principalmente para
el transporte del oxgeno y la hematopoyesis. El hierro se encuentra en hgado, riones, corazn,
carne, productos elaborados con cereales integrales, verdura verde, espinacas, etc. En los
productos farmacuticos se tiene la presencia de hierro como sulfato ferroso y estos productos
son empleados en caso de anema ferropnica (profilxis y tratamiento) y como suplemento
diettico.
1.- Interferencias
Las principales interferencias son plata (I), cobalto (II), cobre (II) y nquel (II) se ha demostrado
que una mezcla de cido ctrico y cido etilen diamino tetraactico ( EDTA ) puede emplearse
para enmascarar plata (I) , cobre (II), y nquel (II) y una gran cantidad de iones metlicos
comunes. Tambin resultan interferentes los oxidantes enrgicos como cianuros, nitritos, y
fosfatos. La adicin en exceso de hidroxilamina elimina los errores debido a estas sustancias.
III FUNDAMENTO
El mtodo de la fenantrolina consiste en reducir el hierro al estado ferroso con el reactivo
orgnico cloruro de hidroxilamina en un medio cido ajustado a ms menos 3.5, con solucin
buffer, en estas condiciones se agrega el reactivo complejante 1, 10 fenantrolina; formndose un
compuesto complejo de fierro fenantrolina de color rojo naranja, y que es medido luego
espectrofotomtricamente a una longitud de onda de 510 nm. La formacin cuantitativa del
complejo se observa en el margen de pH comprendido entre 3 y 9 pero se recomienda un pH
prximo a 4 para evitar la precipitacin de diversas sales de hierro.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
El circuito bsico del equipo instrumental es el siguiente:
APARATOS
Espectrofotmetro
Cubeta
Regin de trabajo
Longitud de onda
Blanco
:
:
:
:
:
36
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Shimadzu 160 - A
1 Cm. De trayecto ptico
Espectro visible
510 nm
Solucin de reactivos y disolvente menos hierro.
VI REACTIVOS
Solucin de Hidroxilamina .- Disolver 10.0 gramos de reactivo en 100 ml de agua destilada
Solucin buffer.- Disolver 250 gramos de acetato de amonio en 150 ml de agua destilada,
aadir 700 ml de cido actico glacial.
Solucin de fenantrolina.- Disolver 0.250 gramos de 1, 10 fenantrolina monohidratada en
100 ml de agua destilada, agitando y calentando a 80 oC. Se evita el calentamiento si se aade
2 gotas de cido clorhdrico en el agua destilada.
Solucin Stock de hierro.- La solucin se prepara a partir del sulfato ferroso amoniacal
[FeSO4 (NH4)2SO4.6H2O]. Para ello se disuelve 0.7020 gramos del reactivo, calidad analtica,
en 50 ml de agua destilada y 1 ml de cido sulfrico concentrado, pasar a una fiola en un litro,
diluir exactamente hasta el enrase y homogenice. La concentracin de la solucin es de 0.1
mg de hierro por mililitro de solucin (0.1 mg Fe / ml de solucin).
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones estandares o patrones
Estas soluciones se deben preparar instantes antes del anlisis porque son inestables. Disponer de
5 matraces aforados de 50 ml y rotular del uno al cinco; agregar a la fiola nmero 1, 0.5 ml,
agregar a la segunda fiola, 1.0 ml, a la tercera 1.5 ml, y a la cuarta fiola 2.0 ml de la solucin
Stock. A la quinta fiola no se le aade dicho reactivo (solucin blanco).
Se agrega a cada fiola, 3 ml de solucin de hidroxilamina, 3 ml de solucin de fenantrolina y
ajuste el pH de la solucin a 3.5 con la solucin buffer; diluya cada solucin con agua destilada
hasta el aforo, se tapa la fiola, se agita y se deja en reposo durante media hora. El color de la
solucin es rojo anaranjado.
CUADRO DE SOLUCIONES
No
volumen del Buffer
estandar Stock ml
Ml
d
Fenantrolina
Hidroxilamina ml
ml
Concentraci
n mg/ml
Volume
n final
ml
1
2
3
4
5
37
INGENIERA BIOTECNOLGICA
0.5
1.0
1.5
2.0
0.0
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
0.001
0.002
0.003
0.004
0.000
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
E = 400 NM
INFERIOR = + 0.00 A
Determinar la longitud de onda de trabajo en la curva espectral mediante el barrido con el cursor.
3.- Preparacin de la muestra
Pesar exactamente, 6.0000 g de la muestra y calcinar en una mufla a 550 o C hasta la obtencin
de cenizas blancas. Disolver con 10 ml de HCl 6 M, calentando suavemente evitando llegar a
sequedad. Diluir con ms o menos 20 ml de aguas destilada y calentar. Filtrar si es necesario y
recibir los filtrados en una fiola de 100 ml enrasar y homogenizar la solucin con agua destilada.
Medir una alcuota de 25.0 ml, colocarla en una fiola de 50.0 ml y darle el mismo tratamiento
que las soluciones estandar hasta obtener el color. Esta solucin de la muestra en estudio est
lista para ser sometida a medicin en el aparato.
4.- Medicin de la Muestra
Seleccionar en el men principal el modo CUANTITATIVO y ajustar los parmetros
analticos de medicin a la longitud de onda de trabajo y del nmero de standard por medir
empleando como blanco la solucin No 5 (Blanco).
IX CALCULOS
1.- Mtodo Grfico
Presionar la tecla COPY para obtener la curva de calibrado y en el se plotea el valor de
absorbancia de la muestra en la curva para determinar su concentracin. Calcular la
concentracin final de la muestra teniendo en cuenta las diluciones efectuadas.
= A1 / C1
= A2 / C2
INGENIERA BIOTECNOLGICA
38
a3 = A3 / C3
a4 = A4 / C4
Luego calcular la absortividad media:
a m = a1 +a2+ a3+ a4
4
b) Clculo de la concentracin de la muestra
En la ecuacin:
A = am.b.c.
C muestra =
c)
A muestra
am x b
X CUESTIONARIO
1.- Efectue la reaccin entre el hierro (II) y el reactivo fenantrolina
2.- Para que sirve el blanco y como esta constituido en la determinacin de hierro por el mtodo
de la fenantrolina
3.- Si una muestra contiene hierro (II) y hierro (III), disee una tcnica mediante un diagrama
de bloques para analizar estos componentes por separado.
4.- Que tipos de interferencia puede presentarse en un anlisis espectrofotomtrico
5.- Calcular la absortividad molar del complejo rojo anaranjado fe-fenantrolina, si se trat un
volumen alcuota de 5 ml de una solucin estandar con un total de 20 microgramos de hierro y
luego se diluy a un volumen final de 10 ml. La absorbancia de la solucin medida a 510 nm es
de 0.4 y se emple una celda de 1 cm
6.- Que otros mtodos espectroscpicos del visible conoce para la determinacin de hierro,
seale sus fundamentos brevemente
39
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Muestra
580 nm
volumen de muestra
ml
1
2
50
50
Volmenes, ml
oxidante
Fe(II)
ml
5.0
5.0
2.75 ppm
5.0
0.0
KSCN
0.050 M
20.0
20.0
H2O
ml
20.0
25.0
ABS
0.549
0.231
Informe de laboratorio No 4
Determinacin de Hierro
Fecha: ___________
No GRUPO: _________
Anlisis:
____________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________
INGENIERA BIOTECNOLGICA
DATOS:
Peso de la muestra
Volumen inicial
Volumen alcuota
Volumen final
40
INGENIERA BIOTECNOLGICA
CLCULOS:
1.- MTODO GRFICO (Curva de calibracin)
a1 =
a2 =
a3 =
a4 =
41
INGENIERA BIOTECNOLGICA
am =
Cmuestra =
mg %hierro
DISCUSIN DE RESULTADOS:
42
INGENIERA BIOTECNOLGICA
CUESTIONARIO:
1.- Efectue la reaccin entre el hierro (II) y el reactivo fenantrolina
43
INGENIERA BIOTECNOLGICA
44
2.- Para qu sirve el blanco y cmo est constituido en la determinacin de hierro por el
mtodo de la fenantrolina?
Es una muestra que no contiene el analito a tratar, en este caso el hierro. En nuestra prctica est
compuesto por por buffer, hidroxilamina y O-fenantrolina.
3.- Si una muestra contiene hierro (II) y hierro (III), disee una tcnica mediante un
diagrama de bloques Para analizar estos componentes por separado.
Se trata con
fenantrolina
(cromforo)
Se reduce a
Fe (II) por
ebullicin
con cido e
hidroxilamin
a
Se disuelve
el Fe, puede
ser con HCl.
La
formacin
del
complejo Fe
(II) con
fenantrolina
se da en un
intervalo de
pH
comprendid
o entre 2 a
9
5.- Calcular la absortividad molar del complejo rojo anaranjado fe-fenantrolina, si se trat
un volumen alcuota de 5 ml de una solucin estandar con un total de 20 microgramos de
hierro y luego se diluy a un volumen final de 10 ml. La absorbancia de la solucin medida
a 510 nm es de 0.4 y se emple una celda de 1 cm
(a) Concentracin de la muestra
45
INGENIERA BIOTECNOLGICA
6.- Que otros mtodos espectroscpicos del visible conoce para la determinacin de hierro,
seale sus fundamentos brevemente:
a) Para determinar la presencia del hierro como in frrico ( Fe 3+ ) se lo combina con
tiocianato de potasio ( KSCN ) formandose el in hexatiocianoferrato ( Fe(SCN)63- ) de
color rojo sangre.
b) El hierro se puede determinar en la leche en polvo por espectrofotometra visible despus
de reducir el Fe+3 a Fe+2 con clorhidrato de hidroxilamina y de 1, 10 fenantrolina como
complejador coloreado. Es as que luego de haber sometido a las muestras a las
condiciones necesarias para las lecturas del equipo, encontramos las cantidades de hierro
en las muestras, esto debido a la lectura de estndares de concentracin conocida y
recurriendo a la dependencia lineal entre la absorbancia y la concentracin.
c) Al determinar el Fe mediante la espectrofotometra UV-Visible observamos que esta
presenta Fe en las plantas nutricionales analizadas ya que este se dio por diferentes
mtodos como lo es la de absorcin atmica y molecular, donde en ambos se noto la
presencia de Fe. En cada una de las plantas a travs de estos mtodos se observaron
concentraciones de Fe que nosotros los seres humanos consumimos al comer esta planta,
donde nos ayuda para el mejoramiento y prevencin de la anemia que viene dada por
falta de hierro en el organismo.
Muestra
580 nm
volumen de muestra
ml
1
2
50
50
Volmenes, ml
oxidante
Fe(II)
ml
5.0
5.0
2.75 ppm
5.0
0.0
KSCN
0.050 M
20.0
20.0
H2O
ml
20.0
25.0
ABS
0.549
0.231
INGENIERA BIOTECNOLGICA
46
ESPECTROFOTOMETRIA TURBIDIMETRICA
DETERMINACION DE SULFATOS
I OBJETIVOS
Determinar el contenido de sulfatos en aguas de consumo humano
II GENERALIDADES
Aparte de una cantidad relativamente pequea de agua atmosfrica en forma de vapor, hay
cuatro tipos importantes de agua en la superficie terrestre, el agua dulce de rios y lagos, el agua
subterrnea, las capas de hielo continentales y las aguas saladas de los mares y ocanos
(constituye el 98 % del agua sobre la tierra).
El agua potable para que pueda ser utilizada para fines alimenticios debe estar totalmente limpia,
ser inspida, inodora e incolora y tener una temperatura aproximada de 15 oC, no debe contener
bacterias, virus, parsitos u otros grmenes que provoquen enfermedades, adems, el agua
potable no debe exceder en cantidades de sustancias minerales mayores de los lmites
establecidos.
Los estndares para agua potable del servicio de salud pblica tienen un lmte mximo de 250
ppm de sulfatos, ya que a valores superiores tienen una accin purgante. Los sulfatos se
combinan con el magnesio y calcio y por encima de 400 ppm perciben un sabor amargo.
Los mtodos turbidimtricos y nefelomtricos difieren de los mtodos analticos de absorcin en
dos aspectos, primero, la sustancia desconocida no est en solucin, sino en suspensin coloidal
y, segundo, parte de los fotones incidentes sobre la muestra se separan del haz incidente por
dispersin y no por absorcin.
Un mtodo turbidimtrico mide la energa radiante transmitida por la suspensin. En un mtodo
nefelomtrico se hace la medicin de la intensidad de la luz dispersa. Estos mtodos no son en
general tan exactos como los resultantes de mtodos analticos de absorcin.
Este mtodo analiza sulfatos en un intervalo de 0 a 25 ppm en muestras de aguas de uso
domstico, industrial y agrcola. Si la concentracin de sulfatos es superior a 25 ppm se diluye
segn se necesario.
INTERFERENCIAS
El color, slice, materia orgnica slidos suspendidos interfieren en la medicin de sulfatos. Parte
de la materia en suspensin puede ser eliminada por filtracin, si ambas interferencias son
pequeas en comparacin de sulfatos, se proceder a corregirlas midiendo blancos a los que no
se ha aadido BaCl2.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
47
Interfiere tambin un exceso de slice superior a 500 mg/ L y en las aguas con gran cantidad de
materia orgnica puede no ser posible precipitar BaSO4 satisfatoriamente.
La determinacin de sulfatos se debe realizar a temperatura ambiente, pero admite una variacin
mxima de 10 oC.
III FUNDAMENTO
El ion sulfato precipita en medio cido con cloruro de bario para formar una suspensin blanca
de sulfato de bario de tamao uniforme, se requiere de un solvente acondicionador, que contiene
glicerina y alcohol, para modificar la viscosidad de la muestra y asi permitir que el precipitado
de BaSO4 se mantenga en suspensin. La reaccin de formacin del precipitado es:
SO4 2- (ac) +
Ba 2+ (ac)
---- BaSO4 (s)
Analito
reactivo precipitante
sulfato de bario
Se mide la absorbancia en un espectrofotmetro o nefelmetro y se determina la concentracin
del ion sulfato por comparacin de la lectura con una curva de calibracin o mediante el mtodo
analtico.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
V APARATOS
Espectrofotomtro
: Shimadzu 160 A con barrido automtico e impresora
Cubeta
: 1 cm De trayecto ptico
Regin
: visible
Longitud de onda
: 420 nm
Blanco
: agua destilada
VI MATERIALES
Fiolas de 100 ml.
Bureta por 25 ml.
Pipeta por 2, 5, 10 ml.
VII REACTIVOS
Solucin stock de 100 mg/ L de sulfato
Disolver 0.1479
gramos de sulfato de sodio anhidro en agua destilada, transferir
cuantitativamente a una fiola de un litro, enrasar y homogenizar la solucin.
Solucin amortiguadora
Aadir 50 ml de glicerina a una solucin que contenga:
48
INGENIERA BIOTECNOLGICA
mg/L
Transferir el contenido de las fiolas con las soluciones de cada patrn a vasos de 250 ml y aadir
1 ml de solucin cida acondicionadora a cada uno de los vasos. Agitar cada una de las
soluciones de calibracin con un agitador magntico a velocidad constante y aadir
aproximdamente 200 mg de cristales de cloruro de bario. Mantener la agitacin por 60 seg.
Al finalizar la agitacin verter la solucin en la celda de medicin y dejar reposar durante 2 min.
Transcurridos los 2 min de reposo, medir de inmediato la turbiedad originada por la precipitacin
de BaSO4 en cada una de las soluciones de calibracin. Graficar la curva de calibracin.
2.- Determinacin de la longitud de onda analtica
Seleccionar la funcin ESPECTRO en el modo bsico del men y ajustar los parmetros
analticos siguientes:
1.- INTERVALO DE LONGITUD DE ONDA
S = 1100 NM
E = 200 NM
2.- RANGOS DE ABSORBANCIA
UPPER = + 1.00
LOWER = 0.00
49
INGENIERA BIOTECNOLGICA
absorbancias originada por la suspensin del precipitado de BaSO4 que presentan la solucin
problema.
IX CALCULOS
1.- Mtodo Grfico
Presionar la tecla COPY para obtener la curva de calibrado y en ella se plotea el valor de
absorbancia de la muestra para determinar su concentracin. Efectuar los clculos y expresar los
resultados como ppm referidos a sulfatos
X DISCUSION DE DATOS
Los datos experimentales obtenidos en el trabajo de laboratorio contrastarlos con los valores
considerados tericos o verdaderos.
CUESTIONARIO
1.- Calcular la concentracin en ppm en la solucin stock
2.- En que consiste los mtodos nefelomtricos y los mtodos turbidimtricos
3.- De razones porque los resultados del anlisis se expresan en ppm
4.- Que funcin cumple la solucin acondicionadora en los patrones y en la muestra en estudio
5.- En el trabajo experimental quin es el responsable de la absorbancia de la radiacin
6.- Que otros mtodos de determinacin de sulfatos conoce
7.- Esquematizar el arreglo experimental de un turbidimetro
Informe de laboratorio No 5
Determinacin de Sulfatos
Fecha :
____________________
No GRUPO: _________
Anlisis:
__________________________________________________________________________
Mtodo:
__________________________________________________________________________
Muestra:
_________________________________________________________________________
DATOS
Volumen de muestra = ------------------ Volumen final
= ------------------- Blanco
= -------------------
INGENIERA BIOTECNOLGICA
CLCULOS:
1.- Mtodo Analtico
a) Absortividad
b) Concentracin de la muestra
50
51
INGENIERA BIOTECNOLGICA
TABLA DE RESULTADOS
# muestra
1
2
3
4
5
6
7
ppm sulfatos
DISCUSIN DE RESULTADOS
APELLIDOS Y NOMBRES_________________________________________________
Firma del alumno: ____________________
CUESTIONARIO
OBJETIVOS
Construir una curva de absorcin y de calibrado.
Seleccionar la longitud de onda de trabajo
Analizar y determinar el grado de pureza del Acido acetilsaliclico en una aspirina.
II GENERALIDADES
Este acetilderivado del cido saliclico se obtiene por la reaccin de este cido con el anhdrido
actico. La reaccin de formacin es la siguiente:
OH
(CH3 CO )2 O
+ C6 H4
---------- C6 H4
COOH
Anhidrido actico
OCOCH3
cido saliclico
+ CH3 - COOH
COOH
cido acetilsaliclico
cido actico
INGENIERA BIOTECNOLGICA
52
El cido acetilsaliclico llamado tambin ter actico del cido saliclico, aspirina o cido ortoaatoxibenzoico, son cristales blancos en pequeas tablas o agujas, inodoros, de sabor ligeramente
cido, estables en ambiente seco, pero se hidrolizan gradualmente en medio hmedo
transformndose en cido saliclico y cido actico , y se vuelve perceptible el olor del segundo.
Se funde a unos 135o C pero el punto de fusin vara segn las condiciones en que se haga el
ensayo. Su solucin alcohlica no se tie de color violado con el cloruro frrico (en lo que se
diferencia del cido saliclico).
Un gramo de cido acetilsaliclico se disuelve en unos 300 mililitros de agua destilada, en 5 ml.
de alcohol de 90o en 17 ml. de cloroformo y en 10 a 15 ml. de ter. En las soluciones
concentradas de acetato de amonio y en las soluciones de carbonatos e hidrxidos alcalinos es
soluble con descomposicin.
Se emplea en el tratamiento sintomtico del dolor articular muscular. En la fiebre reumtica,
produce alivio sintomtico del dolor y disminuye el grado de inflamacin articular, suprime la
fiebre. Se usa tambin como antipirtico en procesos infecciosos, txicos o de deshidratacin.
II FUNDAMENTO
El cido acetilsaliclico no disociado interacciones con la energa radiante en la regin que
corresponde al ultravioleta presentando dos picos en la curva de absorcin. Un pico primario a
una longitud de onda de 230 nm y el otro secundario a 275 nm.
La medicin espectrofotomtrica en esta regin del espectro se realiza a la longitud de onda de
230 NM.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
APARATOS
Espectrofotmetro
Cubeta
Regin de trabajo
Longitud de onda
Blanco
: Shimadzu 160 - A
: 1 cm. De trayecto ptico
: Espectro Ultravioleta
: 230 NM
: agua
VI MATERIALES
Fiolas de 50, 100.0 y 250 ml.
Pipetas graduadas de 1, 2, 5 y 10 ml.
Mortero de porcelana.
VII
REACTIVOS
INGENIERA BIOTECNOLGICA
53
CUADRO DE SOLUCIONES
No Standard
1
2
3
Volumen aforado
50.0 ml.
50.0
50.0
IX CALCULOS
INGENIERA BIOTECNOLGICA
54
X CUESTIONARIO
1.- Sealar que tipos de compuestos absorben radiacin UV
2.- Indicar como se clasifica la regin del UV
3.- Cules son las aplicaciones analticas ms importantes de los mtodos del UV
4.- Qu limitaciones tiene la espectroscopia de absorcin uv como tcnica de anlsis
cualitativo?
5.- (a) Preparar una curva de calibrado para la determinacin de monoclorobenceno, utilizando
los datos tabulados a continuacin:
Concentracin ppm
1.2
2.5
3.7
5.1
7.2
9.8
Absorbancia
0.24
0.50
0.71
0.97
1.38
1.82
INGENIERA BIOTECNOLGICA
INFORME DE LABORATORIO No 6
Determinacin del Acido acetil salicilico
Fecha : _____________
Anlisis:
____________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________
Procedencia:
_______________________________________________________________________
DATOS :
Peso de la tableta
Peso de muestra
Volumen inicial
Volumen alcuota
Volumen final
= ________
=__________
= _________
= _________
= __________
55
INGENIERA BIOTECNOLGICA
CLCULOS:
1.- MTODO GRFICO (Curva de calibracin)
56
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Cmuestra =
57
INGENIERA BIOTECNOLGICA
DISCUSIN DE RESULTADOS
CUESTIONARIO
58
INGENIERA BIOTECNOLGICA
59
V APARATOS
Espectrofotomtro
Cubeta
:
:
Regin
Longitud de onda
Blanco
60
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Ultravioleta
: 242 NM
: cloroformo
VI MATERIALES
Fiolas de 10 ml.
Bureta por 25 ml.
Pipeta por 2, 5, 10 ml.
Embudo de separacin
VII REACTIVOS
Cloroformo
Solucin saturada de cloruro de sodio acidificada con HCl (pH= 3 - 4 )
Solucin de HCl 0.001 M
Solucin stock de cido benzoico de 250 ppm
Calidad reactivo analtico, pureza 99.9%, se pesa 62.5 miligramos, se diluye y enrasa con
cloroformo en una fiola de 250 ml, agite para homogneizar la solucin.
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones o patrones
Preparar 4 Fiolas de 50 ml. y preparar las soluciones patrones midiendo 5, 10, 15 y 20 ml de la
solucin stock de cido benzoico. Llevar al enrase con cloroformo y homogenizar la solucin.
Soluciones Estandar
No Standard
1
2
3
4
Volumen a medir
5 ml.
10
15
20
Volumen Final
50.0 ml
50 .0
50.0
50.0
Concentracin
25
50
75
100
INGENIERA BIOTECNOLGICA
61
IX CALCULOS
1.- Mtodo Grfico
Presionar la tecla COPY para obtener la curva de calibrado y en ella se plotea el valor de
absorbancia de la muestra para determinar su concentracin.
X CUESTIONARIO
1.- Indicar las limitaciones que presenta el agua como disolvente en la regin uv
2.- Porq el cido benzoico absorbe radiacin UV
3.- Seale razones porque se utiliza disolventes orgnicos en estos mtodos
4.- Porque razones se emplean celdas de material de cuarzo en la espectroscopia UV
5.- Como prepara la solucin stock de 250 ppm de cido benzoico a partir del reactivo de fbrica
si presenta una pureza del 99%
6.- Se trataron 2 ml de una muestra de orina que contiene fosfatos, despues de la disolucin se
diluy a 100 ml, la medida fotomtrica de una alcuota de 25 ml dio una absorbancia de 0.428.
Calcular la concentracin de fosfatos como fosforo en mg / ml si la absortividad molar es de 750
( la medicin se efectu en celda de 1 cm)
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Informe de laboratorio No 7
Determinacin de Acido Benzoico
Fecha :
____________________
Anlisis:
____________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________
62
INGENIERA BIOTECNOLGICA
CLCULOS:
1.- Mtodo Analtico
a) Absortividad
b) Concentracin de la muestra
C) Dilucin
c) resultado en mg/ %
TABLA DE RESULTADOS
63
INGENIERA BIOTECNOLGICA
No de muestra
mg/% acido benzoico
1
2
3
4
5
6
7
DISCUSIN DE RESULTADOS
APELLIDOS Y NOMBRES_________________________________________________
CUESTIONARIO
64
INGENIERA BIOTECNOLGICA
65
APARATOS
Espectrofotomtro
Cubeta
Regin
Longitud de onda
INGENIERA BIOTECNOLGICA
66
VI MATERIALES
Fiolas de 25 ml.
Bureta por 25 ml.
Pipeta por 2, 5, 10 ml.
VII REACTIVOS
Etanol absoluto con 99.7 % de pureza.
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones standard o patrones
Preparar 5 Fiolas de 25 ml. y preparar las soluciones patrones de 10, 20, 40, 60 y 80 % de
alcohol a partir del Etanol absoluto por dilucin con agua destilada. Enrase, agite para
homogenizar y rotule adecuadamente cada fiola.
Soluciones Estandar
No estandar
1
2
3
4
5
Volumen a medir
2.50 ml.
5.00
10.03
15.04
20.06
Volumen Final
25.0 ml
25 .0
25.0
25.0
25.0
Concentracin % Etanol
10
20
40
60
80
INGENIERA BIOTECNOLGICA
67
3.- Cuales son las caracteristicas que presentan las curvas de absorcin IR
4.- Porque en la prctica los valores d absorbancia presentan signo negativo?
5.- Represente y seale los componentes un arreglo experimental de un espectrofotometro IR de
doble haz
6.- Cul de los rangos del IR presentan mayor aplicacin en el anlisis
Informe de laboratorio No 8
Determinacin de Etanol
Fecha :
_____________
Anlisis:
____________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________
INGENIERA BIOTECNOLGICA
68
# muestra
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Marca
ABS
CLCULOS:
1.- MTODO GRFICO (Curva de calibracin)
DISCUSIN DE RESULTADOS
Valor terico
Valor Practico
INGENIERA BIOTECNOLGICA
69
APELLIDOS Y NOMBRES_________________________________________________
Firma del alumno: ____________________
CUESTIONARIO
ELECTROQUMICA ANALTICA
MEDICIONES DE POTENCIAL DE CELDA
I OBJETIVOS
Construir una celda electroqumica
Determinar la medicin del potencial de la celda Daniel.
II GENERALIDADES
Las celdas electroqumicas son dispositivos donde se efectan procesos qumicos espontaneos
con el fin de producir energa elctrica til o el consumo de energa elctrica con el objeto de
conseguir una reaccin qumica.
Las celdas se clasifican en:
a) Celdas galvnicas, que transforman la energa qumica en energa elctrica, en el interior de
la celda se una reaccin qumica en forma espontana, dando lugar a cambios de orden
qumico con variaciones en la concentracin, generan energa elctrica que puede ser
convertida en trabajo til.
b) Celdas elctricas, transforman la energa elctrica en energa qumica, se le llama proceso no
espontaneo, las celdas para su funcionamiento requieren auxilio de la energa electrica
proveniente de una fuente exterior.
c)
Una celda electroqumica consiste de dos conductores denominados electrodos, cada uno
sumergido en una solucin electroltica. En la mayora de las celdas que nos interesan, las
soluciones en que se sumergen los dos electrodos son diferentes y deben estar separadas para
evitar la reaccin directa entre los reactivos. La manera ms comn para evitar que se mezclen,
es insertar un puente salino entre las soluciones, La conduccin de electricidad desde una
solucin electroltica a la otra, ocurre entonces por desplazamiento de los iones potasio en el
puente en una direccin, y de iones cloruro en la otra, sin embargo no hay contacto directo entre
el cobre metlico y los iones plata.
La celda experimenta una reaccin de oxidacin (nodo), los electrones fluyen a travs del
circuito externo hacia al otro electrodo, provocando una reduccin (ctodo); el voltmetro mide
la diferencia de potencial entre los dos metales sumergidos en las soluciones electrlitos.
III FUNDAMENTO
La celda electroqumica basa su funcionamiento en la diferencia de potencial elctrico que existe
entre dos electrodos sumergidos en una solucin, la corriente que desarrollan dichos electrodos
son amplificados electrnicamente infinidad de veces para ser registrados en un potenciomtro o
en un voltmetro electrnico.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
70
Semicelda andica
Semicelda catdica
Puente salino
Aparato
Calibrado
Lectura
APARATO
pHmetro Schott Gerate CG 820
Electrodo de plata
Lmina de cobre
Lmina de zinc
=
=
=
=
=
=
Zn / Zn +2
Cu/ Cu +2
K Cl saturado
pHmetro Digital Schott gerate CG 820
no indispensable
Unidades de milivoltios.
VI MATERIALES
Vasos de precipitados de 150 ml.
Tubo de vidrio en U.
VII REACTIVOS
Preparar las siguientes soluciones electrolticas:
Solucin de nitrato de plata 0.0100 M
Solucin de sulfato de cobre 0.010 M
Solucin de sulfato de cobre 0.010 M
Solucin de Fe +3 0.001 M
Solucin Fe +2 0.1 M
INGENIERA BIOTECNOLGICA
71
Solucin de Mn +7 0.1 M
Solucin de Mn+2 0.01 M
Solucin saturada de cloruro de potasio
VIII TECNICA
1.- Puesta en Marcha
Conectar el instrumento a la red elctrica y preparar las medias celdas seleccionadas
2.- Trabajo preliminar
se dispone de dos vasos de 150 ml, en uno de ellos se despositan 100 ml de la solucin de sulfato
de cobre 0.0100 M y en el otro 100 ml de solucin de sulfato de zinc 0.0100 M. En el primer
vaso colocar el electrodo de cobre metlico y en el segundo el electrodo de zinc metlico.
3.- Medicin de celda
Se conectan ambas semiceldas a un potenciometro o voltmetro electrnico y se introduce un
puente salino de tal manera que se conectan externa e internamente las dos medias celdas.
Colocar el selector en unidades de voltaje y registrar la medicin del potencial generado por la
pila.
Formar y medir las celdas siguientes
A) Zn o/ Zn +2 ( 0.0100 M) // Cu +2 ( 0.0100 M) / Cuo
B)
Cu o / Cu +2 (0.0100 M) // Mn+7 (25 ml, 0.1 M), Mn+2 (5 ml, 0.01 M), H +(0.1 ml, 18
M) / Pt
c)
Zn o/ Zn +2 ( 0.0100 M) // Fe +3 (15 ml, 0.001 M), Fe +2 (15 ml, 0.01 M) /Pt
D) Pt/ Fe +3 (15 ml, 0.001 M), Fe +2 (15 ml, 0.01 M) // Mn+7 (25 ml, 0.1 M), Mn+2 (5 ml,
0.01 M), H +(0.1 ml, 18 M) / Pt
IX CALCULOS
a) Calcular los potenciales de media celda andica y catdica en funcin de la ecuacin de
Nernst
b) Determinar el potencial de celda
X CUESTIONARIO
1.- Sealar las diferencias existentes entre las celdas galvnicas y electrolticas
2.- Indicar el campo de aplicacin de las celdas electroqumicas
3.- Formular la deduccin y uso de la ecuacin de Nernst
4.- Que funcin tiene el puente salino y que es el ptencial de unin lquida
5.- Calcular el potencial terico de las siguientes celdas:
Pb/PbSO4(sat), SO4 -2(0.2M) // Sn+2 (0.150M), Sn +4 (0.250M)/ Pt
Pt/ Fe +3 (0.010 M), Fe +2(0.001 M) // Ag+ (0.035 M)/ Ag
6.- Calclese el potencial de un electrodo de cobre sumergido en un a solucin de Cu (NO3)2
0.0440 M
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Informe de laboratorio No 1
Determinacin de Potencial de Celdas Electroqumicas
Fecha
__________________
Anlisis: ______________________________________________________________
Mtodo: ______________________________________________________________
Muestra: _____________________________________________________________
A) TIPO DE CELDA A:
Representacin abreviada
72
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Potencial de celda
B) TIPO DE CELDA B:
Representacin abreviada
C) TIPO DE CELDA C:
Representacin abreviada
73
74
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Potencial de celda
D) TIPO DE CELDA D:
Representacin abreviada
Potencial de celda
Tabla de resultados
Tipo de celda
A
B
C
D
E Terico
E prctico
INGENIERA BIOTECNOLGICA
75
DISCUSIN DE RESULTADOS
POTENCIOMETRIA DIRECTA
MEDICION DE pH
I
OBJETIVOS
Construir una celda galvnica
Explicar el funcionamiento del electrodo de membrana de vidrio para pH
Determinar experimental el pH de soluciones y de sustancias slidas
II GENERALIDADES
Para realizar esta medicin potenciomtrica es necesdario construir una celda galvnica y que
est constituida por dos semiceldas; una de referencia cuyo potencial sea conocido y constante;
la otra semicelda conformada por la solucin en estudio que contiene el ion de inters, cuya
concentracin se desea determinar. En ella se introduce un electrodo denominado indicador cuyo
potencial es consecuencia de la concentracin del analito.
El valor de potencial de pila se determina en forma experimental intercalando un voltmetro
electrnico o un potencimetro. El potencial de la media celda problema se calcula en funcin de
la siguiente relacin:
Ep = Er + Ei
Donde:
Ep = potencial de celda (valor experimental dado por el instrumento)
Er = potencia estandar (valor de potencial conocido dado en tablas)
E i = potencial de la media celda problema o indicadora)
La concentracin del analito se calcula en funcin de la ecuacin de Nernst:
E p = E o - 0.0591 log [ C ] [ D ]
n
[A] [ B ]
Donde:
E p = potencial de pila
E o = potencial normal
INGENIERA BIOTECNOLGICA
76
V APARATOS
INGENIERA BIOTECNOLGICA
77
78
INGENIERA BIOTECNOLGICA
E) Medicin
En la solucin decantada o filtrada intoducir los electrodos con ucho cuidado a una altura
prudencial del fondo del vaso y medir su pH.
IX CALCULOS
Calcular el pH de las soluciones problemas con la finalidad de determinar su valor terico
empleando la siguiente relacin:
PH = - log [H +]
CUESTIONARIO
1.- Explique el funcionamiento del electrodo de vidrio para pH
2.- Seale razones porque se calibra un pHmetro antes de medir el pH de la solucin
3.- Cul es el fundamento de la determinacin de pH en sustancias slidas
4.- Que es lo mide el pHmetro en una solucin alcalina y como mide el pH de la solucin
5.- Como define la potenciometra directa y cual es el mbito de su aplicacin
6.- Se tiene una celda del siguiente tipo: ECS // H + ( a= x) /electrodo de vidrio, esta celda
tiene un potencial de 0.2094 V cuando en el compartimiento derecho es un amortiguador de pH
4.006. Cuando el amortiguador se reemplaz con soluciones desconocidas sus potenciales
fueron: A) -0.3011 V b) 0.1163 V. Calcular el pH de cada solucin problema.
7.- A que se denomina solucin buffer o amortiguadora?
8.- La siguiente celda ECS//Mg A2 (a = 9.62 x 10 -3/ electrodo de membrana de vidrio de Mg
tiene un potencial de 0.367 v. Cuando la solucin de magnesio de actividad conocida se
reemplazo con una solucin problema, el potencial era 0.544 V, cules el pMg de la solucin
problema
Informe de laboratorio No 2
Determinacin de pH
Fecha _____________________
Anlisis: _______________________________________________________________________
Mtodo: _______________________________________________________________________
TABLA DE RESULTADOS DE SOLUCIONES ACUOSAS DE LABORATORIO
muestra
Buffer biftalato de
potasio
Acido clorhdrico
Acido actico
Concentracin molar
0.00496
0.0100
0.0100
pH terico
4.002
pH practico
79
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Buffer Brax
Hidrxido de sodio
Hidrxido de amonio
0.00997
0.0100
0.0100
9.220
CALCULO DE pH TEORICOS
Acido Clorhdrico
Acido Actico
Hidrxido de sodio
Hidrxido de amonio
pH terico
4.002
pH practico
80
INGENIERA BIOTECNOLGICA
PH terico
7.00
PH practico
DISCUSIN DE RESULTADOS
Apellidos y Nombres:
_____________________________________________
OBJETIVOS
Preparar soluciones valoradas cidas y bsicas.
graficar curvas de titulacin cido- base
Determinar puntos de equivalencia.
II GENERALIDADES
Las titulaciones son otra de las aplicaciones de la potenciometra dentro del campo del anlisis y
comprende las valoraciones de neutralizacin, precipitacin, complexometra y por
xidoreduccin.
Una valoracin potenciomtrica se realiza midiendo el potencial de una pila formada por el
electrodo de referencia , de potencial conocido, y un electrodo indicador cuyo potencial es
funcin de la concentracin del in problema. Esta medicin se efecta durante el desarrollo de
una valoracin y que es funcin del valorante agregado.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
81
Para valoraciones cido - base se debe tener en cuenta que el punto de equivalencia va ha
depender del tipo de reactivos reaccionantes y de sus concentraciones. El pH en el punto de
equivalencia puede ser igual o diferente de 7.00.
Son mtodos que estn basados en la siguiente reaccin:
H+
OH -
-------------
H2 0
III FUNDAMENTO
Son mtodos basados en el cambio gradual de pH establecido entre dos electrodos sumergidos en
una solucin donde se encuentra el componente activo y a la que se adiciona otra solucin que
presenta concentracin conocida que al combinarse con la primera va variando su concentracin.
Este mtodo consiste en medir y registrar la variacin de pH que experimenta la celda galvnica
formada por dos semiceldas, una de referencia y otra indicadora formada por un electrodo de
vidrio sensible a los iones hidrgeno , con la finalidad de localizar con precisin el punto de
equivalencia y determinar la concentracin del componente activo.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
El equipo experimental se establece de la siguiente manera:
INGENIERA BIOTECNOLGICA
82
V APARATOS
pHmetro Schott Gerate CG 820
Electrodo mltiple de vidrio
Agitador magntico
VI MATERIALES
Buretas de 25 y 50 ml.
vasos de precipitacin de 250 ml.
VII REACTIVOS
Solucin de Acido clorhdrico 0.1000 N.
Solucin de hidrxido de sodio 0.1000 N.
Solucin Buffer de pH 4 y 9.
Carbonato de sodio y biftalato de potasio en calidad reactivo analtico.
VIII TECNICA
1.- Trabajo preliminar
Conectar el aparato a la red elctrica y colocar los electrodos. Lavarlos adecuadamente y secarlos
con papel filtro.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
83
Para el segundo caso de titulacin (200 mg. Biftalato de potasio con hidrxido de sodio
0.100N)
Para el tercer caso ( 10.0 ml. de Solucin de cido clorhdrico con hidrxido de sodio
0.100N).
INGENIERA BIOTECNOLGICA
84
1. Mtodo Grfico
En cada uno de los casos graficar los datos obtenidos de pH frente al volumen de la solucin
titulante. La curva obtenida se denomina curva de titulacin potenciomtrica y en ella se
encuentra su punto de equivalencia mediante el ploteo de datos. En base a la curva obtenida
determinar para cada caso lo siguiente:
A)
B)
C)
pH en el punto de equivalencia
Volumen consumido de la solucin valorante
Seleccionar el indicador ms adecuado para cada tipo de titulacin.
X CUESTIONARIO
1.- Que es una curva de titulacin potenciomtrica
2.- Cul es el uso de una curva de titulacin
3.- Que ventajas y desventaja presenta una titulacin potenciomtrica
4.- Que caractersticas presenta una curva
5.- Cul es el objeto de una titulacin potenciomtrica
6.- Seale diferencias entre una valoracin potenciomtrica y una valoracin volumtrica de
neutralizacin.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
85
TITULACIONES:
1.- Titulacin de 100 miligramos de carbonato de sodio con cido clorhdrico 0.100 N
DATOS:
Peso de muestra
: ------------
Concentracin del titulante : ------------
Factor del HCl
: ------------TABULACIN DE DATOS:
Volumen ml HCl PH
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
11.0
12.0
13.0
14.0
15.0
16.0
17.0
18.0
19.0
20.0
21.0
22.0
23.0
24.0
25.0
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Peso de muestra
= ----------------
Concentracin titulante = ---------------
Factor del NaOH
= ---------------Tabulacin de datos:
Volumen ml NaOH
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
11.0
12.0
13.0
14.0
pH
86
INGENIERA BIOTECNOLGICA
87
INGENIERA BIOTECNOLGICA
14.0
Elaboracin de la curva de titulacin:
DISCUSIN DE RESULTADOS
Apellidos y monbres:
_______________________________________________
88
INGENIERA BIOTECNOLGICA
89
I OBJETIVOS
Preparar una solucin valorada cida
Determinar el grado de pureza que presenta una bebida mineral en contenido de bicarbonatos
II GENERALIDADES
Los mtodos potenciomtricos son aplicables a las titulaciones por neutralizacin , es decir,
cuando reaccionan cidos y bases o viceversa, dando como producto de la reaccin agua, de
acuerdo a la siguiente reaccin :
H+
+ OH- ---------- H2O
Una aplicacin en este campo de las valoraciones potenciomtricas cido - base , es la
determinacin del bicarbonato de sodio en un producto farmacutico, como es la ampolla de
bicarbonato de sodio, control del contenido de bicarbonatos en aguas minerales,etc.
III FUNDAMENTO
La titulacin potencimetrica de bicarbonatos se realiza con un cido fuerte, como es el cido
clorhdrico, que acta como solucin valorante. La reaccin de titulacin entre el analito
bicarbonato y la solucin titulante es la siguiente :
HCO3analito
productos
Para realizar esta medicin en forma experimental es necesario construir una celda galvnica
cuya solucin problema est constituida por la solucin de bicarbonato de sodio, y introduciendo
en ella los electrodos de referencia y de menbrana de vidrio para pH. Se intercala en los
conductores externos un dispositivo de medicin como un pHmetro, la operacin de titulacin se
realiza a incrementos conocidos del titulante tomando lecturas de pH a cada volumen agregado
de la solucin cida. Se determina el punto de equivalencia y luego se calcula la concentracin
del analito.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
Calibrado
INGENIERA BIOTECNOLGICA
90
pH 9.00
V APARATOS
pHmetro digital Schott gerate
Electrodo combinado de vidrio
Equipo de agitacin magntica.
VI MATERIALES
Bureta por 25 ml.
vasos de precipitacin de 150 y 250 ml.
VII REACTIVOS
Solucin Buffer de pH 9.00
Solucin valorada de cido clorhdrico 0.1000 M.
VIII TECNICA
1.- Trabajo Preliminar
Medir por pipeta exactamente 1.00 mililitro de la solucin de la ampolla de bicarbonato de sodio,
y diluirla adecuadamente con agua destilada en un vaso de 250 ml.
2.- Calibrado del Instrumento
Standarizar el pHmetro sumergiendo los electrodos en la solucin buffer de pH 9.00, ajustar la
temperatura del instrumento a la de solucin y el pH del instrumento a la de la solucin buffer.
Apagar el aparato, retirar, enjuagar los electrodos y secarlos con papel filtro.
3.- Titulacin
Armar el equipo de acuerdo al arreglo experimental y titular potencimetricamente con la
solucin de cido clorhdrico 0.1000 M. aadiendo la solucin titulante a incrementos de 1.0 ml.
hasta completar un volumen total de 18.0 ml, A cada incremento del titulante se toma las lecturas
de pH.
IX CALCULOS
1.- Tabulacin de Datos
Los datos experimentales obtenidos se tabulan en forma ordenada y clara.
2.- Mtodo grfico de clculo del punto de equivalencia
Levantar una curva de titulacin en funcin de los parmetros de pH / V.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Valor Mximo de pH / V
= ........................
Intervalo de volumen
= ........................
Valor anterior al valor mximo = .......................
Valor posterior al valor mximo = .......................
Por interpolacin de los valores de volmenes y de primera derivada se determina el volumen
requerido de la solucin titulante en la reaccin con el bicarbonato.
4.- Clculo de la concentracin de los bicarbonatos en partes por milln
mg/ L HCO3- = ml gastados x Meq / ml x 61 mg/ meq
x 1000 ml
ml. de solucin problema x 1 L
X CUESTIONARIO
1.- En que consiste el mtodo de la primera derivada
2.- Calcule el error relativo del anlisis de bicarbonatos
3.- Porqu no utiliza algn indicador en esta titulacin
4.- Como determina el punto de equivalencia por medio del mtodo grfico de la primera
derivada
5.- De los resultados obtenidos cul cree que es un valor que se puede descartar
91
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Informe de laboratorio No 12
Determinacin de bicarbonatos
Fecha ___________________
Anlisis:
_________________________________________________________________________
Mtodo:
_________________________________________________________________________
Muestra:
_________________________________________________________________________
Contenido declarado ________________________________________
DATOS:
Volumen de la muestra
= -----------Concentracin del titulante = ------------
pH
Clculos
1.- Mtodo grfico (Primera derivada)
pH / v
92
93
INGENIERA BIOTECNOLGICA
ppm HCO3 -
% NaHCO3
1
2
3
4
5
6
7
DISCUSIN DE RESULTADOS
APELLIDOS Y NOMBRES_________________________________________
Firma: ____________________
94
INGENIERA BIOTECNOLGICA
CUESTIONARIO
C4O6H6
analito
2 NaOH
titulante
-------------
Na2C4O6H4
productos
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
Las caractersticas del sistema son:
Electrodos
Instrumento
Lectura
H2 O
Calibrado
INGENIERA BIOTECNOLGICA
95
pH 4.00
V APARATOS
pHmetro Schott Gerate C-G 820
electrodo combinado de vidrio para pH - referencia
Agitador magntico.
VI MATERIALES
Bureta por 25 ml.
Vasos de precipitacin de 150 ml.
VII REACTIVOS
Solucin de hidrxido de sodio 0.1000N.
Solucin Buffer de pH 4.00
Biftalato de potasio en reactivo calidad analtica.
VIII TECNICA
1.- Trabajo Preliminar
Medir 25.0 mililitro de la muestra vino y diluirla con agua destilada hasta obtener un volumen
adecuado para que se sumergan los electrodos a una altura prudencial del fondo del vaso.
2.- Calibrado
En un vaso limpio colocar unos 100 ml. de la solucin buffer de pH 4.00 y sumergir el
electrodo combinado de vidrio. Realizar los ajustes de calibracin con las perillas de temperatura
INGENIERA BIOTECNOLGICA
96
y de incremento de pH. Retirar los electrodos cuando se apaga el instrumento, lavarlos con agua
destilada y secarlos con papel filtro.
3.- Titulacin
Colocar en la solucin problema la barra magntica y centrar el vaso de tal manera que gire la
barra sin provocar molestias. Introducir los electrodos a una altura adecuada del fondo del vaso y
colocar la perilla de encendido en la posicin de pH y mida el valor de pH a cero mililitro del
titulante. Agregar desde una Bureta la solucin de hidrxido de sodio a incremento de 1.0 ml.,
anotando los valores correspondientes de pH, hasta completar un volumen de 15.0 ml.
IX CALCULOS
1.- Tabulacin de datos
Los datos obtenidos en la determinacin analtica ordenarlos adecuadamente.
2.- Localizacin del punto de equivalencia por el Mtodo Grfico
El punto de equivalencia de la valoracin se localiza mediante el mtodo grfico de la primera
derivada. Colocar los resultados obtenidos en papel milimetrado, trazando dos coordenadas
cartesianas y ubicando en el eje de la ordenada los valores de primera derivada pH / V, y
en el eje de la abcisa los volmenes de la solucin de hidrxido de sodio.
Vx =
4.- Clculo de la concentracin en porcentaje de cido tartrico
INGENIERA BIOTECNOLGICA
97
INGENIERA BIOTECNOLGICA
98
Informe de laboratorio No 13
Determinacin de la Acidez del vino
Fecha ____________________________
Anlisis: ________________________________________________________________________
Mtodo: ________________________________________________________________________
Muestra: _______________________________________________________________________
DATOS:
Volumen de la muestra
= -----------Concentracin del titulante = ------------
pH
Clculos
1.- Mtodo grfico (Primera derivada)
pH / v
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Vx =
% Acidez =
% cido tartrico
99
100
INGENIERA BIOTECNOLGICA
OBJETIVOS
Preparar una solucin valorada de nitrato de plata
Elaborar una curva de titulacin potenciomtrica por precipitacin.
Analizar y discutir el contenido de cloruros presentes en una muestra de orina
II GENERALIDADES
Este tipo de titulaciones estn orientadas a determinar haluros en una muestra, siendo su reaccin
general la siguiente:
XAnalito
Ag +
titulante
==========
Ag X
Producto insoluble
Donde:
X - = Cl- , Br- , I- ( haluros )
Para las volumetras de precipitacin el electrodo indicador generalmente es del metal de quien
deriva el catin reaccionante. En ocasiones, no obstante, se emplea un sistema electrdico
indicador que responde directamente al anin, las valoraciones potenciomtricas de precipitacin
se caracterizan por la formacin en uno de sus productos de la reaccin qumica de una sal
insoluble o poco soluble.
La orina contiene en su composicin sustancias orgnicas e inorgnicas, su composicin vara
ampliamente de acuerdo a los alimentos ingeridos: Los principales componentes que presentan
son:
Sustancias orgnicas
Son productos finales del metabolismo de las protenas. Entre ellos se tiene urea, cido rico y
creatinina.
a)
Sustancias inorgnicas
Contiene agua, sodio, potasio, fosfato, sulfatos, bicarbonatos, calcio, magnesio, cloruros,
amonaco. etc. Su pH promedio es 6 siendo su rango de 4.7 - 8.0 y su contenido en cloruros se
encuentra en un intervalo de 10 a 15 gramos por mil.
b)
III FUNDAMENTO
Consiste en hacer reaccionar cuantitativamente al anin cloruro con el reactivo valorante nitrato
de plata, formando un producto insoluble de cloruro de plata. La celda galvnica dispone de un
electrodo selectivo a uno de los iones que forma parte de la sustancia insoluble, para que
evidencie con ntidez el punto de equivalencia, mediante el mtodo de la segunda derivada.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
101
Electrodo de referencia
Electrodo indicador
Puente salino
Instrumento
Lectura
Calibrado
Celda
:
:
:
:
:
:
:
Electrodo de referencia
V APARATOS
potencimetro digital Schott gerate CG 820
Electrodo de calomel saturado
Electrodo de plata metlica( electrodo de segundo orden )
Agitador magntico.
VI MATERIALES
Vasos de precipitacin de 150 ml. y 250 ml.
Electrodo indicador
INGENIERA BIOTECNOLGICA
102
2.- Titulacin
Armar el equipo de acuerdo al esquema experimental y titular potenciomtricamente con
solucin valorada de nitrato de plata 0.0282N. a incremento de 1.0 ml. Despus de La adicin de
cada volumen efectuar la lectura en milivoltios, titular hasta completar 15.0 ml.
IX CALCULOS
1.- Tabulacin de datos
Los datos obtenidos en la valoracin tabularlos adecuadamente.
2.- Localizacin del punto de equivalencia por el mtodo grfico
103
INGENIERA BIOTECNOLGICA
ml de muestra
Informe de laboratorio No 14
Determinacin de Cloruros
Fecha __________________________
Anlisis:
__________________________________________________________________________
Mtodo:
___________________________________________________________________________
Muestra:
__________________________________________________________________________
DATOS :
Volumen de la muestra
= -----------Concentracin del titulante = ------------
mv
mv / v
2mv / v2
INGENIERA BIOTECNOLGICA
15.0
16.0
17.0
18.0
Clculos
1.- Mtodo grfico (primera derivada)
Na Cl
DISCUSIN DE RESULTADOS
104
INGENIERA BIOTECNOLGICA
105
APELLIDOS Y NOMBRES_________________________________________
Firma: ____________________
CUESTIONARIO
II GENERALIDADES
Toda reaccin de oxidoreduccin da lugar a la ganancia y prdida de electrones que indica la
transferencia de los mismos. En potenciometra esta transferencia es medida desde el inicio hasta
el final de la valoracin mediante un voltmetro electrnico.
Los mtodos potenciomtricos por xido reduccin son apropiados para controlar la marcha de
una titulacin por oxidacin y reduccin. Cuando se desea determinar potenciomtricamente un
in metlico, por ejemplo, hierro y no se dispone de un indicador adecuado para determinarlo
directamente, se hace uso de su capacidad para oxidarse o reducirse frente a un reactivo titulante
y se hace uso tambin de un electrodo indicador inerte capaz de seguir paso a paso el cambio de
estado de oxidacin, es decir, capaz de relacionar las concentraciones de los dos estados de
oxidacin, para luego determinar el punto de equialencia.
III FUNDAMENTO
Consiste en titular potenciomtricamente una solucin de hierro (II) con una solucin valorada
de permanganato de potasio en medio cido o de sulfato de cerio (IV), para ello se construye una
celda donde el potencial del electrodo indicador cambia gradualmente y proporcionalmente al
logaritmo de las concentraciones de dos estados de oxidacin ( Fe +2/ Fe +3) que pueden ser del
INGENIERA BIOTECNOLGICA
106
: ECS
: Platino brillante
: potenciometro
: milivoltios
: No indispensable
:
Reaccin de reduccin:
M n + 1 + e ----------- M n
APARATOS
Phmetro digital Shoott Gerate CG 820
Electrodo de platino brillante
Electrodo de calomel saturado
INGENIERA BIOTECNOLGICA
107
VI MATERIALES
Vaso de precipitacin
Pipeta de 10 ml
VII REACTIVOS
Acido sulfrico concentrado
Solucin valorada de permanganato de Potasio 0.100N
III TECNICA
1.- Trabajo preliminar
Prepare y valore una solucin de permanganato de potasio 0.100N o de sulfato crico ( IV).
Pesar 8.0000 gramos de muestra y calcinar a 550 oc hasta obtener las cenizas correspondientes,
disolver las cenizas con 5 ml cido clorhdrico 6 M, calentando suavemente. Se aade 20 ml de
agua destilada, se calienta y se filtra si es necesario.
Los filtrados se tratan con agua de bromo y se hierve para eliminar el exceso de bromo. Se aade
hidrxido de amonio 1:1 hasta percibir un fuerte olor amoniacal, se hierve la solucin para
eliminar el exceso de hidrxido, filtrar empleando un papel de filtro adecuado y se lava con agua
caliente,
El precipitado se regresa al vaso donde se efectu la precipitacin con chorro de piseta y se
disuelve con cido clorhdrico 1:1 en caliente; la solucin se diluye con 20 ml de agua destilada
y presenta una coloracin amarillenta.
A la solucin cida de hierro se le aade unas granallas de zinc y se lleva a ebullicin por el
tiempo que sea necesario para conseguir la completa decoloracin de la solucin problema.
Conseguido esto, se retira el vaso de la fuente de calor.
La solucin decolorada se filtra rpidamente por algodn y se lava con agua caliente,
recibindose los filtrados en un vaso de precipitados. Agregar 4 ml de cido sulfrico
concentrado, y calentar.
2.- Titulacin
Arme el equipo de acuerdo al esquema experimental. Encender el instrumento y pasar el selector
a la funcin de milivoltios, valorar con solucin valorada de permanganato de potasio 0.100N a
incrementos de ml , haciendo las lecturas de voltajes despues de cada adicin hasta obtener
valores constantes. Titular hasta un volumen de 8 ml.
IX CALCULOS
1.- Tabulacin de datos
2.- Localizacin del punto de equivalencia por el mtodo grfico
El punto de equivalencia en la curva de titulacin se localiza por el mtodo de la primera
derivada.
3.- determinacin del punto de equivalencia por el mtodo analtico de la primera derivada
Calcular el volumen reaccionante en funcin de los datos siguientes:
INGENIERA BIOTECNOLGICA
x 100 %
Informe de laboratorio No 15
Determinacin de Hierro
Fecha _____________________
Anlisis:
__________________________________________________________________________
Mtodo:
__________________________________________________________________________
Muestra:
__________________________________________________________________________
DATOS:
108
109
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Peso de la muestra
= -----------Concentracin del titulante = ------------
mv
mv / v
11.0
12.0
13.0
14.0
15.0
Clculos :
1.- Mtodo grfico (segunda derivada)
Vx =
2 mv / v2
INGENIERA BIOTECNOLGICA
110
% Fe
mg FeSO4
DISCUSIN DE RESULTADOS
CONDUCTIMETRIA
Generalidades
Las soluciones en general poseen propiedades elctricas que son susceptiblas a ser medidas.
Estas propiedades dependen del nmero y naturaleza de las partculas que estn en la solucin y
adems, de los tipos de enlaces que se presenten en las partculas del soluto.
La propiedad ellctrica de las sustancias o soluciones sujeta a ser medidas es sui poder de
conduccin elctrica que presentan. Los responsables de la conduccin elctrica son los iones
INGENIERA BIOTECNOLGICA
111
FUNDAMENTO
Son mtodos de anlisis electromtricos basados en la medicin de la habilidad de una solucin
para transportar la corriente elctrica por medio de aniones y cationes, al someterse bajo la
influencia de un campo elctrico establecido.
La conduccin de la corriente elctrica en los electrlitos es similar a la de los conductores
metlicos, especialmente a voltajes muy elevados o frecuencias muy altas ( 60 hasta 4000 cps).
El conductimetro LBR 40 consiste en un puente Wheatstone que opera en 40 4000 HZ, este
puente consiste de cuatro resistencia, el punto de equilibrio queda establecido mediante un
indicador cero en el instrumento. El resultado se expresa en resistencia ( ohms) o el valor
recprocode esta resistencia se conoce como conductividad y se mide en Siemens ( mhos).
Clasificacin
La aplicacin que presenta la conductimetra son :
1.- Conductimetra directa
Son mtodos basados en la medicin directa de la conductancia
2.- Titulaciones conductimtricas
Basadas en la medicin de la conductancia de una solucin a travs de una valoracin con la
finalidad de detectar su punto final y la concentracin del componente activo.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
112
CONDUCTIMETRA DIRECTA
DETERMINACIN DE LA CONSTANTE DE CELDA
I OBJETIVOS
Operar adecuadamente el conductimetro
Determinar la constante de celda del tipo inmersin y tipo vasija
II GENERALIDADES
La conductividad de una solucin es una medida de su facilidad para transportar corriente
elctrica, es decir, flujo de electrones.
Desde el punto de vista conductimtrico toma el nombre de conductancia y es la inversa de la
resistencia. Los electrones son transportados por los iones, los psitivos emigran a traves de la
solucin hacia el ctodo, donde captan electrones. Los aniones se dirigen hacia el nodo, donde
ceden electrones; el resultado neto es un fljo de electrones a travs de la solucin, es decir, la
solucin conduce la corriente elctrica.
La conductimetra se encarga de medir la resistencia o la conductancia de un electrlito. El
equipo empleado es fundamentalmente un puente conductimtrico y las celdas de conductancia.
Las celdas conductimtricas estn constituidas por un material no conductor y poseen dos
electrodos de platino o niquel recubierto con platino platiinizado, estas celdas tienen dos
parmetros importantes que es necesario mantener inalterables y estas son: La distancia entre
electrodos ( d ) y el rea de los mismos ( A ), la relacin de estos parmetros es una constante
llamada constante de celda y se representa por :
= d = cm = cm 1
A
cm 2
Cada celda posee su propia constante que la da el fabricante, pero por razones de tiempo de
servicio sta se altera, razn por la que se debe determinar frecuentemente.
III FUNDAMENTO
La determinacin de la constante de celda se realiza midiendo la conductancia o resistencia que
presenta una solucin de cloruro de potasio 0.01 M y se mide la conductancia de la solucin y la
temperatura. Con el auxilio de tablas se determina la conductividad especfica para el cloruro de
potasio 0.01M y finalmente se calcula el valor de la constante de celda.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
INGENIERA BIOTECNOLGICA
113
Caractersticas
a) Celdas conductimtricas : Electrodos de platino platinizado
b) Instrumento
: Puente de conductividad
C) Lectura
: Conductancia (micromhos)
Resistencia (ohm)
d) Medidor de equilibrio
: Galvanmetro o por ojo electrnico
III APARATOS
Conductimetro LBR 40 de corriente alterna de 60 y 1000 ciclos por segundo
Celdas de conductancia tipo vasija
Celdas de conductancia tipo inmersin
Termmetro
IV MATERIALES
Vaso de precipitacin de 150 ml
Fiolas de 100 ml
V REACTIVOS
Cloruro de potasio 0.01 M
VI TECNICA
1.- Trabajo preliminar
Preparar una solucin de cloruro de potasio 0.01 M para un volumen de 100 ml. Lavar con agua
destilada las celdas de conductividad y enjuagar con una porcin de solucin de cloruro de
potasio. Llenar la celda tipo vasija con la solucin de cloruro.
En un vaso limpio y sebado, depositar otro volumen de la solucin patrn de cloruro de potasio y
sumergir la celda tipo inmersin conectando los terminales de la celda al conductmetro.
2.- Medicin
Conectar el equipo a la red, 220 V y 50 ciclos. Conectar la celda de medicin en el punto
marcado " ZELLE" en la parte posterior del equipo e introducir la celda en la solucin a medirse
(Ambas superficies de platino deben sumergirse completamente).
Ajuste la frecuencia de medicin a lo deseado (para conductividad alta 4 KHZ, para
conductividad baja 40 HZ). Seleccione el rango ( mhos ohms ). No presionar " EXT. REF."
Ajuste el control de sensibilidad hacia la parada izquierda " GROB " (ajuste grueso) y el control
del ngulo de prdidas al centro.
Presione el botn " EIN" (prendido) y ponga el botn principal a la posicin de " MESSEN"
(medir) para realizar la medicin correspondiente. Gire el botn grande hasta que el instrumento
" MINIMUM " se desva hasta la izquierda. El ajuste correcto se encuentra aumentando la
sensibilidad (gire el botn del control de sensibilidad hacia la derecha " FINE ") y con
movimientos oscilantes del botn grande, cuando se indica a cero en el minimun en el
instrumento, el ajuste correcto ha sido encontrado.
INGENIERA BIOTECNOLGICA
114
El valor que se lee en la escala de la perilla con indice debe ser multiplicada con el factor del
botn de rango. Medir la conductancia o la resistencia de esta solucin y tomar la temperatura de
la solucin lo ms pronto posible. Operar primero con la celda tipo vasija y luego con la celda
tipo inmersin.
VII CALCULOS
Ordenar los datos obtenidos en las mediciones:
Celda tipo vasija
Conductancia (L )
=
o
Temperatura ( T C ) =
---------------------------------------
----------------------------------------------
-1 cm 1
17
18
19
20
21
22
23
0.001199
0.001225
0.001251
0.001278
0.001305
0.001332
0.001359
Conocidos los valores anteriores se calcula la constante de celda en base a la siguiente ecuacin:
= K ( valor en tabla )
L (conductancia lo da el aparato)
Donde:
= cm 1
K = -1 cm 1
El valor de L est dado en micromhos ( mhos )
L = mhos x mhos
10 6 mhos
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Informe de laboratorio No 16
Determinacin de la Constante de celda
Fecha ____________________
Anlisis:
__________________________________________________________________________
Mtodo:
__________________________________________________________________________
Muestra: _______________________________________________
DATOS
115
INGENIERA BIOTECNOLGICA
= K = -1 x cm -1 =
L
-1
en celda vasija
en celda inmersin
DISCUSIN DE RESULTADOS
Apellidos y nombres_________________________________________
Firma : ____________________
116
INGENIERA BIOTECNOLGICA
117
II GENERALIDADES
Se llama conductividad especfica al poder conductor de un cubo de solucin que tiene un
cemtimetro de arista, siendo sus dimensiones en centimetros y ohmios reciprocos.
Sus usos son determinar la conductancia equivalente de los electrlitos, el grado de pureza de
sustancias y el control de aguas desionizadas.
III FUNDAMENTO
Consiste en medir la conductancia o resistencia de las diferentes soluciones y con la constante de
celda se determina la conductancia especfica de las soluciones en estudio.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
III APARATOS
INGENIERA BIOTECNOLGICA
118
Conductimetro
Celda de conductancia tipo inmersin
IV MATERIALES
V REACTIVOS
VI TECNICA
1.- Trabajo preliminar
Preparar las soluciones problemas para un volumen de 100 ml. Lavar las celdas de conductividad
tipo inmersin y enjuagar con una porcin de las soluciones problemas.
Depositar la solucin en estudio en un vaso de 250 ml.
2.- Medicin
Conectar el equipo a la red, 220 V y 50 ciclos. Conectar la celda de medicin en el punto
marcado " ZELLE" en la parte posterior del equipo e introducir la celda en la solucin a medirse
(Ambas superficies de platino deben sumergirse completamente).
Ajuste la frecuencia de medicin a lo deseado (para conductividad alta 4 KHZ, para
conductividad baja 40 HZ). Seleccione el rango (mhos ohms). No presionar " EXT. REF."
Ajuste el control de sensibilidad hacia la parada izquierda " GROB " (ajuste grueso) y el control
del ngulo de prdidas al centro.
Presione el botn " EIN" (prendido) y ponga el botn principal a la posicin de " MESSEN"
(medir) para realizar la medicin correspondiente. Gire el botn grande hasta que el instrumento
" MINIMUM " se desva hasta la izquierda. El ajuste correcto se encuentra aumentando la
sensibilidad (gire el botn del control de sensibilidad hacia la derecha " FINE ") y con
movimientos oscilantes del botn grande, cuando se indica a cero en el minimun en el
instrumento, el ajuste correcto ha sido encontrado.
El valor que se lee en la escala de la perilla con indice debe ser multiplicada con el factor del
botn de rango.
VII CALCULOS
Calcular la conductancia especfica de la solucin en estudio en base a la siguiente ecuacin:
K=L
Donde:
K = cm -1
= cm 1
L = -1
INGENIERA BIOTECNOLGICA
119
-1
Informe de laboratorio No 17
Determinacin de conductancias especificas
Fecha ____________________
Anlisis: ________________________________________________________________________
Mtodo:
_________________________________________________________________________
Muestra: _______________________________________________________
DATOS
Tipo de celda
= ----------------Constante de celda ( ) = ----------------
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Conductancia ( L ) = --------------------Clculos :
A) Conductividad especfica del Acido clorhdrico 0.01 M
K = . L = cm -1 x -1 =
K=
G) Acido Actico 0.01M
K=
H) Agua potable
K=
TABLA DE RESULTADOS
No Muestra
1 H Cl 0.1 M
2 H Cl 0.01 M
3 HAC 0.1 M
4 HAC 0.01M
5 Agua potable
DISCUSIN DE RESULTADOS
Apellidos y Nombres________________________________________
Firma: ____________________
120
INGENIERA BIOTECNOLGICA
121
TITULACIONES CONDUCTIMETRICAS
VALORACIONES ACIDO BASE
I OBJETIVO
II GENERALIDADES
Las valoraciones conductimtricas son aplicadas a diversas sustancias, particularmente a
sustancias en soluciones muy diludas, sustancias cuyas reacciones son relativamente
incompletas, soluciones coloreadas y cuando no se dispone de indicadores adecuados..
Su aplicacin est orientada a titulaciones por neutralizacin. Por preciputacin y por formacin
de complejos, pero no incluye a los mtodos de xido reduccin.
En las valoraciones de este tipo uno de los mayores errores que se cometen es el aumento de
volumen por el efecto del incremento de volumen del titulante; el error consiste en que la
conductividad vara por efecto de la dilucin alterando la que se produce por reaccin propia de
las sustancias reaccionantes y la concentracin del titulante se recomienda que sea 10 50 veces
mayor que la solucin que se titula.
Para obtener resultados de conductancia satisfatorios es necesario aplicar una correccin segn la
frmula siguiente:
L corregida = L observada (V + v 1)
V
Donde:
V = volumen inicial
V 1 = volumen agregado del titulante.
III FUNDAMENTO
Las titulaciones conductimtricas por neutralizacin se basan en encontrar el punto de
equivalencia en base a la medicin de la conductancia de una solucin durante el desarrollo de
una titulacin. El mtodo consiste en adicionar volumenes del titulante efectandose mediciones
de conductancia antes y despues del punto de equivalencia.
Con estos valores obtenidos se levanta una grfica de conductancia (L) frente al volumen del
titulante determinndose en l el punto final de la valoracin.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
INGENIERA BIOTECNOLGICA
122
V APARATOS
Conductimetro
Celda de conductancia tipo inmersin
VI MATERIALES
Vasos de precipitacin de 150 ml
Bureta de 25 ml
VII REACTIVOS
Solucin de cido clorhdrico 0.01 N
Solucin de cido actico 0.01 N
Solucin de hidrxido de sodio 0.1 N
Solucin de hidrxido de amonio 0.1 N
VII TECNICA
1.- trabajo preliminar
Depositar 50 ml de la solucin de cido clorhdrico y diluir a 100 ml con agua destilada. Ubicar
el vaso en el agitador magntico y sumergir la celda conductimtrica en la solucin problema.
Conectar los terminales de la celda al puente conductimtrico.
2.- Titulacin
Armar el equipo de acuerdo al arreglo experimental y efectuar la medida de conductancia de la
solucin a volumen cero.
Titular con solucin valorada de hidrxido de sodio 0.1 N a incrementos de medio mililitro
tomando la lectura de conductancia despues de cada adicin. Valorar hasta completar un
volumen de 10 ml.
Titular de igual manera la solucin de cido actico con hidrxido de sodio y cido actico con
hidrxido de amonio.
3.- Tabulacin de datos
La informacin obtenida tabularla de la siguiente manera:
volumen
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
L observada
L corregida
123
INGENIERA BIOTECNOLGICA
6.0
VIII CALCULOS
El punto final se determina en forma grfica. Se traza un grfico en un sistema coordenado
ubicando los valores de conductancia en la ordenada y el volumen del titulante en la abcisa.
Informe de laboratorio No 18
Titulaciones conductimtricas de neutralizacin
Fecha ____________________
Anlisis:
_________________________________________________________________________
Mtodo:
_________________________________________________________________________
Muestra: _______________________________________________________
L observada
L corregida
124
INGENIERA BIOTECNOLGICA
L observada
L corregida
125
INGENIERA BIOTECNOLGICA
Clculos
A) Determinar en la grfica el punto de equivalencia
B) Calcular la concentracin de las soluciones problemas
Acido clorhdrico 0.01 N
Volumen de muestra: ------------Gasto del titulante : -----------Acido actico 0.01N
Volumen de muestra: ---------------Gasto del titulante : ---------------TABLA DE RESULTADOS
No Muestra
1
2
3
4
5
6
7
DISCUSIN DE RESULTADOS
Normalidad HCl
Normalidad HAC
INGENIERA BIOTECNOLGICA
126
126
126
Pgina: 126
Pgina: 126