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Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

ESPECTROFOTOMETRA DEL VISIBLE


SELECCIN DE LA LONGITUD DE ONDA
ANALTICA
I OBJETIVOS
Operar adecuadamente el espectrofotmetro computarizado Shimadzu 160 - A .
Obtener espectros o Curva de absorcin
Seleccionar la longitud de onda de trabajo, mxima o analtica
II GENERALIDADES
En cada tipo de sustancias los tomos, iones o molculas absorben con cierta
preferencia longitudes de onda de una determinada gama de frecuencias; esto hace
que los tomos, iones o molculas puedan identificarse mediante la longitud de
onda a que se da lugar la absorcin. En el anlisis espectrofotomtrico, las
mediciones de absorbancia se realizan ordinariamente a una longitud de onda que
corresponda a un mximo del espectro de absorcin.
Para ello en una determinacin deber obtenerse siempre una curva de absorcin o
espectro de absorcin para ubicar en ella el pico ms alto y seleccionar la longitud
de onda a la cual se produce ese mximo de absorcin. A esta longitud de onda se
denomina longitud de onda analtica, de trabajo o mxima y es la longitud de onda
a la cual se realiza la medicin cuantitativa. A esta longitud de onda la variacin
de absorbancia por unidad de concentracin es mxima, con lo cual se obtiene la
sensibilidad mxima.
III FUNDAMENTO
Para encontrar la curva de absorcin se irradia a la solucin coloreada con energa
radiante de una gama de longitudes de onda de tal manera que a cada longitud de
onda se mide su valor de absorbancia o de % de transmitancia; esta energa
absorbida se traduce en un espectro de absorcin que es obtenido en funcin de
los valores de absorbancia o de % de transmitancia frente a las longitudes de onda.
En la curva se hace un barrido espectral y se ubica el mximo pico o valle ms
profundo que corresponde a un mximo de absorbancia a una determinada
longitud de onda; a esta longitud se denomina longitud de onda analtica, ptima o
de trabajo.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL

V APARATOS

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Espectrofotmetro Shimadzu 160 - A.


Cubeta: 1cm de trayecto ptico.
Regin de trabajo: espectro visible (450 - 600 NM).
Blanco: agua destilada.
VI MATERIALES
Fiolas de 100 y 250 ml.
Buretas de 25ml.
Vasos de precipitacin de 250ml.
VII REACTIVOS
Solucin Stock de permanganato de potasio 0,1000 N.
Solucin de permanganato de potasio con concentracin de 100 mg/L (ppm) de
manganeso
Soluciones estandares o patrones.
VII TCNICA
1.- PREPARACIN DE SOLUCIONES
A) Preparacin de una solucin dluida de 100 ppm en manganeso
Disponer de una solucin stock de KMnO4 0.1000 N, previamente valorada.
Calcular su concentracin en partes por milln referida a manganeso. Preparar
a partir de la solucin stock de 250 ml de una solucin de 100 p.p.m. de
manganeso
B) Preparacin de soluciones patrones o estndares
Preparar por dilucin 100 mililitros de los siguientes patrones: 2, 4, 6, 8,10,
12, y 16 ppm.
2.- SELECCIN DE MODO BSICO DE TRABAJO
Cuando el interruptor de potencia es llevado a on , el instrumento es inicializado
en 3 minutos, y entonces indica en pantalla el men de modo bsico,
MENU DE MODO BASICO
Modo No
1.- Fotmetro
2.- Espectro
3.- Barrido de tiempo
4.- Cintica
5.- Cuantitativo
6.- Multicomponente
7.- Memoria
8.- Sealamiento de condicin
9.- Enlace
Presione el Nro 2 y luego la tecla ENTER para seleccionar el modo espectro .
El blanco a emplear es agua destilada.
3.- AJUSTE DE PARMETROS ANALTICOS

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Luego que el modo bsico es seleccionado, es necesario primero establecer los


parmetros analticos de medicin siguientes:
MOSTRARIO DE CAMBIO DE PARAMETRO
Cambio de

Espectro
parmetros s/n
1.- s = 600,0 nm

E = 450,0

2.- Medicin (ABS / T %) = ABS.


3.- Superior = + 1,00 A

Inferior = + 0,00 A

4.- Velocidad de barrido = rpida


5.- Ciclo

T = 60 seg.

N =1

6.- Cubrir

Si

7.- Copiar

No

8.- Barrido OBS

No

9.- Fila
Si desea cambiar un parmetro presione la tecla Yes e ingrese el nmero del
parmetro correspondiente, y luego ingrese el nuevo valor para el parmetro
indicado por el cursor. Ahora si el ingreso es errneo presione la tecla CE y
reingrese el nuevo valor. Cuando el parmetro indicado por el cursor no ser
cambiado, presione directamente la tecla ENTER .
Cuando el proceso de cambio de parmetro est completo, presione la tecla NO
para terminar el procedimiento.
4.- MEDICIN DE STNDARES
Una vez ajustados los parmetros de medicin y al presionar la tecla No para el
cambio de parmetro aparece el mensaje de insertar una muestra y presionar la
tecla Star / Stop .El espectro medido es indicado en la pantalla.
5.- PROCESAMIENTO DE DATOS
Cuando la medicin termina, se indica el mensaje
DATOS S/N.

PROCESAMIENTO DE

Si no es necesario el procedimiento de datos, presionar NO y es posible


indicar la longitud de onda y valor medido a cualquier posicin deseada en el
espectro medido, la cual es recogida por el cursor usando la techa ----- o -----.Al espectro medido puede ser grabado en copia con la techa COPY .
b) Si es necesario un procesamiento de datos, presionar SI y es posible hacer
los siguientes procesamientos de datos:

a)

* Para almacenar el espectro medido en la memoria... presionar 1 ENTER


(nmero de canal) ENTER.
* Para expandir o comprimir el espectro...presionar 2 ENTER, y entonces
ajustar los parmetros de escala en la abcisa y ordenada de acuerdo con la

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indicacin del cursor presionando (valores) ENTER, sino hay cambio


necesario, slo presionar ENTER.
Despus de que el espectro es indicado con nuevos parmetros de escala, el
sistema pregunta VOLVER A LA CURVA ORIGINAL S/ N .Si presiona SI se
obtiene de nuevo el espectro original; si presiona la tecla NO el espectro expandido
es almacenado en la memoria.
Para hacer una deteccin de pico...presionar 3 ENTER, y entonces cada
pico y valle son marcados y tambin sus longitudes de onda y valores son
impresos.
Para obtener un espectro derivado o espectro suavizado... presionar 4
ENTER y luego ingresar la orden derivada presionando (N) ENTER de
acuerdo con la indicacin de la pantalla. Cuando el procedimiento es
terminado, con la escala automticamente ajustada al valor derivado. El
suavizado corresponde a la orden derivada.
Para imprimir datos a intervalos de longitud de onda regulares... Presionar 5
ENTER (intervalo de longitud de onda) y presionar ENTER
Para plotear los datos en el ploteador X-Y,... presionar 6 ENTER.
Cuando termine sus procedimientos de datos aparece en pantalla la curva debidamente
suavizada con los parmetros de absorbancia frente a las longitudes de onda en NM.
Con el cursor ubicar el pico ms alto de la curva, apareciendo en pantalla los valores de
absorbancia y longitudes de onda que corresponde a ese pico.
VIII INTERPRETACION DE DATOS
El espectro medido puede ser grabado en copia con la tecla de COPY . Imprimir las
curvas espectrales en un sistema de coordenadas teniendo en cuenta los siguientes
parmetros:
Absorbancia frente a longitudes de onda

Porcentaje de transmitancia frente a longitudes de onda.

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IX DISCUSION DE DATOS
Sealar las conclusiones que se desprenden de los grficos obtenidos.
X CUESTIONARIO:
1.- Defnase brevemente:
a) La radiacin monocromtica
b) El espectro de absorcin
c) Porque es importante monocromatizar la radiacin policromtica
2.- describir la diferencia entre un espectrofotmetro y un fotmetro
3.- En la longitud de onda de trabajo obtenida en la parte experimental a 525 nm calcular
la cantidad de energa que le corresponde a esa radiacin. Compararla con una longitud
de onda de 200 nm que corresponde a la regin UV
4.- Que tipo de informacin proporciona el espectro de absorcin
5.- Seale algunas razones el porque determina la longitud de onda analtica o de trabajo
6.- Indicar que formas conoce para representar una curva de absorcin
7.- Que es un espectro de absorcin atmica y que es un espectro de absorcin molecular

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INFORME DE LABORATORIO # 1
SELECCIN DE LA LONGITUD DE ONDA DE TRABAJO

Fecha

: _______

No GRUPO: ______

ANALISIS:
___________________________________________________________________
____________________________________________________________________
METODO:
___________________________________________________________________
MUESTRA:
___________________________________________________________________

CALCULOS:
A) Clculo de la concentracin de la solucin stock de KMnO4 0.1000N expresada
en ppm referida en Manganeso

B) CLCULO DEL VOLUMEN DE LA SOLUCIN STOCK REQUERIDO


PARA PREPARAR UNA SOLUCIN DE 100 PPM EN MANGANESO PARA
UN VOLUMEN DE 250 ML.

CLCULOS PARA PREPARAR 100 ML DE LAS SOLUCIONES PATRONES O


ESTNDARES DE 2, 4, 6, 8,10, 12 Y 16 PPM

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TABLA DE RESULTADOS:

OBTENER LOS VALORES DE ABSORBANCIA (ABS) DE LA SOLUCIN


PROBLEMA EN UN INTERVALO DE LONGITUDES DE ONDA DE 450 - 600
NM.

(a) Espectro de absorcin en trminos de absorbancia (ABS) frente a las


longitudes de onda (nm )

OBTENER LOS VALORES DE TRANSMITANCIA (% T) DE LA SOLUCIN


PROBLEMA EN UN INTERVALO DE LONGITUDES DE ONDA DE 450 - 600
nm.

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(b) ESPECTRO DEL PORCENTAJE DE TRANSMITANCIA (% T) FRENTE


A LONGITUDES DE ONDA (NM)

DISCUSIN DE RESULTADOS:

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APELLIDOS Y NOMBRES
___________________________________________________
FIRMA DEL ALUMNO: _______________________________
CUESTIONARIO:
1.- Defnase brevemente:
a) La radiacin monocromtica: Es aquella que est formada por componentes de
un solo color. Es decir, que tiene una sola longitud de onda, correspondiente al
color.
b) El espectro de absorcin: Muestra la fraccin de la radiacin
electromagntica incidente que un material absorbe dentro de un rango
de frecuencias. Se emplea para identificar los elementos componentes de
algunas muestras, como lquidos y gases; ms all, se puede emplear para
determinar la estructura decompuestos orgnicos.
c) Porque es importante monocromatizar la radiacin policromtica: Porque
cuando hacemos pasar una luz policromtica a travs de un objeto, este absorbe
algunas longitudes de onda y transmite las que no absorbe como colores.

2.- Describir la diferencia entre un espectrofotmetro y un fotmetro


-

Un espectrofotmetro es un instrumento usado en la anlisis qumico que sirve


para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una
misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y
la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra. Tambin es
utilizado
en
los
laboratorios
de
qumica
para
la cuantificacin de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de absorcin atmica o
espectrofotmetro de masa y visuales.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica a
travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha
muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:Dar informacin
sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra e indicar indirectamente qu
cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra
Fotmetro: Los fotmetros de luz incidente miden la intensidad de luz que
ilumina al objeto, la que cae sobre l. Para leer los valores de luz incidente se
coloca el fotmetro junto al objeto y se dirige hacia la cmara. Los fotmetros de
luz reflejada miden la intensidad luminosa reflejada por el objeto, la que l
emite.

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3.- En la longitud de onda de trabajo obtenida en la parte experimental a 525 nm calcular


la cantidad de energa que le corresponde a esa radiacin. Compararla con una longitud
de onda de 200 nm que corresponde a la regin UV
4.- Que tipo de informacin proporciona el espectro de absorcin
-

Un espectro de absorcin nos proporciona una representacin grfica de la


absorbancia de un analito o (o de otra magnitud equivalente) en funcin de la
longitud de onda de la radiacin, l, (o de otro parmetro relacionado con la
energa de la radiacin utilizada). El mximo de absorbancia obtenido en el
espectro de absorcin de un analito, nos dar la longitud de onda que proporciona
la mayor sensibilidad posible, y por tanto ser la que se utilizar en el anlisis
espectrofotomtrico de dicho analito.

5.- Seale algunas razones el porque determina la longitud de onda analtica o de trabajo
-

Se escoge para el registro y/o la observacin de la curva espectral o espectro de


la sustancia que indicar si es adecuado tomar la longitud de onda de mxima
absorcin u otra banda caracterstica de la sustancia como longitud de onda para
realizar las medidas, la longitud de onda escogida se conoce como longitud de
onda analtica.

6.- Indicar que formas conoce para representar una curva de absorcin:
-

La ecuacin de Wagner y Nelson est basada en el clculo de las reas bajo la


curva de absorcin, es decir, aquella rea delimitada por el grfico obtenida al
representar la concentracin plasmtica en funcin del tiempo.
Mtodos fotomtricos.
Mtodos espectrofotomtricos.

7.- Que es un espectro de absorcin atmica y que es un espectro de absorcin molecular


-

Un espectro de absorcin atmica representa la medicin de la concentracin de


la fase gaseosa de tomos. Ya que la mayora de las muestras son slidas o
lquidas, los tomos o iones de los analitos deben ser vaporizados a la flama o en
un horno de grafito.
Los tomos adsorben luz visible o ultravioleta y hacen transiciones a niveles de
energa ms altos.
Espectro de absorcin molecular : La absorcin por molculas poliatmicas, es
un proceso considerablemente ms complejo que la absorcin atmica, ya que el
nmero de estados de energa est muy aumentado.

Tanto las molculas como los tomos tienen un nmero limitado de niveles o
estados energticos cuantizados. Para que se produzca absorcin de radiacin, la
energa del fotn excitante (incidente) debe igualar a la diferencia de energa
entre el estado fundamental y uno de los estados excitados de la especie
absorbente. Estas diferencias de energa (E) son nicas, por lo tanto permiten
caracterizar los constituyentes de una muestra. Para este objeto se obtiene
experimentalmente una representacin grfica de la variacin de la absorbancia
en funcin de la longitud de onda.

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ESPECTROFOTOMETRIA DEL VISIBLE


DEMOSTRACION DE LAS LEYES FOTOMETRICAS Y ERROR RELATIVO
DE LA CONCENTRACION
I

OBJETIVOS
Construir curvas de calibracin
Verificar la conformidad de la ley Beer
Determinar las concentraciones lmites de los patrones

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II GENERALIDADES
Despus de determinar la longitud de onda a la cul deben de realizarse las medidas, se calibra el
mtodo midiendo una serie de patrones del constituyente en estudio. Generalmente se prepara una
solucin diluida de la sustancia que se desea determinar, se pipetean cuidadosamente porciones de
esta solucin, de distinto volumen, se aade el reactivo que forma color, y se ajustan las
condiciones para que se desarrolle el color en forma ptima, se diluye cada solucin a un volumen
predeterminado en una fiola, y luego se mide la absorbancia de cada solucin a la longitud de onda
analtica o de trabajo.
Las medidas de la absorbancia se realizan comnmente utilizando un blanco, que debe ser idntico
a la muestra en todo, excepto en que no debe contener el constituyente que se ha de determinar. El
blanco deber contener los reactivos, aditivos, disolvente, etc., en la misma naturaleza y
concentracin que las utilizadas en cada muestra desconocida en la que se desarrolle color. De esta
manera, las lecturas de las muestras estn corregidas automticamente para cualquier absorcin
pequea por accin de los reactivos y del disolvente. Con los datos absorbancia para las diferentes
concentraciones de las series patrn se construye una curva de calibrado. La cantidad de luz
absorbida por cada patrn se encuentra bien definida y se debe ajustar a ciertas leyes fsicas
denominadas leyes fotomtricas:
a)

Ley Lambert - Bouguer

Presenta dos partes:


1.- La relacin entre la energa radiante transmitida, P, y la incidente, Po, es una constante
expresada como T, y se denomina TRANSMITANCIA.
T = P / Po
2.- La energa de radiacin transmitida decrece en progresin geomtrica cuando la longitud del
camino ptico aumenta en progresin aritmtica. Se expresa matemticamente de la siguiente
manera:
log T = ab = A = - log T = - ( P/ Po ) = log ( Po/ P )
Ley Beer
Expresa la relacin entre transmitancia y concentracin de material absorbente, es decir, que la
transmitancia disminuye en progresin geomtrica cuando la concentracin aumenta en progresin
aritmtica. Por tanto:
-log T = ac = A = - log (P / Po) = lo (1/ T)
b)

c) Ley Combinada Lambert - Beer


Resulta de la combinacin de la ley de Lambert con la de Beer y suele llamarse simplemente ley de
Beer. Esta ley establece que: la cantidad de luz o energa ultravioleta o infrarroja absorbida o
transmitida por una solucin es una funcin exponencial de la concentracin de sustancia
absorbente presente y de la longitud de la trayectoria hacia la muestra. Se obtiene las siguientes
relaciones:
A = abc = = - log T = -log (P/ Po) = log (Po / P ) = log ( 1 / T ).
Donde:
T = transmitancia
a = absortividad del medio
b = Trayecto ptico
P = poder de radiacin transmitida
Po= poder de radiacin incidente.

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Esta forma matemtica de la ley combinada muestra que la absorbancia A en funcin de la


concentracin c es una lnea recta de pendiente a, y la representacin de log T frente a la
concentracin es una lnea recta de pendiente negativa. La representacin grfica de esta ley se
denomina representaciones de la ley Beer.
III FUNDAMENTO
La obtencin de la curva de calibrado y la demostracin de la ley de Beer se determinan
experimentalmente, preparando una serie de soluciones patrones y midiendo la absorbancia de cada
solucin a la longitud de onda analtica, mxima o de trabajo. Con los datos de absorbancia frente a
las concentraciones de los patrones se grfica en un sistema cartesiano y la representacin debe ser
una lnea recta de pendiente positiva si cumple con la ley Beer.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL

APARATOS
Espectrofotomtro
: Shimadzu 160 -A
Cubeta
: 1 cm. De trayecto ptico
Regin de trabajo
: Espectro visible
Longitud de Onda de trabajo : 525 nm

VI MATERIALES
Fiolas de 100 y 250 ml.
Buretas por 25 ml.

VII REACTIVOS
Solucin Stock O,100N de permanganato de potasio
Solucin diluda de permanganato de potasio de 100 ppm .de manganeso
soluciones patrones.
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones patrones
Preparar a partir de la solucin Stock de KMnO4 0, 1000N una solucin estandard diluida de 100
ppm en manganeso para un volumen de 250 ml y luego por dilucin preparar las soluciones
patrones siguientes:

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CUADRO DE SOLUCIONES
No
Patrn

Concentracin

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12

0,5
1,0
2,0
4,0
6,0
8,0
10,0
12,0
16,0
20,0
30,0
40.0

ppm Volumen a
Medir del estndar

Volumen a
preparar
ml
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0
50.0

2.- Seleccin de Modo


Cuando se enciende el instrumento el interruptor es llevado hacia arriba en la posicin ON y es
iniciado su funcionamiento. Cuando aparece el men de modo bsico seleccionar el modo 5 que
corresponde al modo cuantitativo.
3.- Ajuste de Parmetros
En el mostrario de la funcin CUANTITATIVO o de determinacin de la concentracin, ajuste los
parmetros de medicin.

MOSTRARIO DE CAMBIO DE PARAMETRO EN EL MODO CUANTITATIVO


CUANT.
1.2 .3.4.5.6.-

CAMBIO DE PARAMETRO S / N ?
METODO
:
1
1
=
525 NM
STANDAR No = 12
MUESTRA No =
1
REPETIR
=
1
IMPRESION DE DATOS
CURVA DE TRABAJO NO LINEAL

NO
NO

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7.-

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FILA

Para ajustar el primer parmetro METODO se sigue los siguientes pasos:


Para una medida a una longitud de onda nica.presionar SI ENTER, 1 ENTER. Luego
introducir la longitud de onda de medicin.
Para una medida con 2, 3 longitudes de onda, o para un anlisis con valores derivados...presionar
SI ENTER, y presionar la opcin 2, 3 o 4 y ENTER.
El segundo parmetro STANDARD significa introducir el nmero de soluciones patrones cuyos
valores de absorbancia se van a medir.
El tercer parmetro
automticamente.

MUESTRA No, significa la solucin muestra, este ser creado

El sexto parmetro CURVA DE TRABAJO NO LINEAL, cuando este parmetro es colocado


en SI, la curva trabajada es no lineal. Cuando este es colocado para NO , el trabajo de la curva
es lineal .
Cuando los parmetros han sido ajustados a las condiciones adecuados presionar en CAMBIO
DE PARAMETROS NO. De acuerdo con la indicacin de la pantalla, ingresar tantos valores de
concentracin como muestras standard o patrones exista. El sistema pregunta CAMBIO DE
CONCENTRACION S/ N. Si se cometi un error en la introduccin de datos, presionar SI
presionar el No del patrn para la correccin, ENTER, entrar el dato correcto, y ENTER.
Cuando no hay error en las entradas de concentracin, presionar la tecla NO luego el sistema
pregunta INGRESO MANUAL DE DATOS DE ABSORBANCIA S/ N? :
Al presionar la tecla SI puede ingresar los valores de absorbancias desde el patrn nmero 1
hasta el ltimo.
Para medir las muestras standares o patrones...presionar NO y luego medir los patrones desde
el nmero 1.
Cuando la entrada manual de las absorbancias de los patrones se ha terminado, el sistema pregunta
CAMBIO DE DATOS S/N igual que antes. Luego corregir las entradas equivocadas como se
seal anteriormente, y presionar por ltimo la tecla NO .
El sistema pregunta al operador MOSTRARIO DE CURVA DE TRABAJO S/ N , cuando se
presiona NO se puede iniciar una medicin inmediatamente. Si se presiona SI , la curva de
trabajo se indica en la pantalla. Cuando el sistema pregunta CAMBIO DE CONCENTRACION
EN CURVA DE TRABAJO S/ N , para cambiar la escala del eje de concentracin de la curva
de trabajo, presionar SI (valor de concentracin) ENTER. En este caso si se presiona NO , se
indican la curva de trabajo y su ecuacin.
4.- Medicin de la Muestra
Insertar una muestra y entonces presionar la tecla STAR/STOP , para iniciar su medicin.
IX INTERPRETACIN DE DATOS
Para copiar la curva de trabajo obtenida en pantalla en funcin de los valores de absorbancia en el
eje de la ordenada frente a las concentraciones en partes por milln de manganeso en el eje de la
abcisa, presionar la tecla COPY .

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Para seleccionar las soluciones patrones para la construccin de la curva de calibracin es necesario
calcular el error relativo de la concentracin o de la absorbancia que surge de un error fotomtrico
de 1 %, y se efectua a partir de la ecuacin siguiente:
dA = dC = 0.434 dT
A
C
t log t
Donde:
dA = dC = error relativo de la concentracin o de la absorbancia
A
C
dT = error fotomtrico de 1 %
t = transmitancia.

X CUESTIONARIO:
1.- Que son y cuales son las leyes fotmetricas?
2.- Como obtiene y para que se utiliza una curva de calibracin o de trabajo
3.- Como comprueba experimentalmente la ley Beer
4.- Sealar las razones por las cules se dan las limitaciones de la Ley de Beer
5.- A que se denominan y cuales son los errores personales
6.- Que criterios se maneja para seleccionar las soluciones patrones para ser utilizadas en un mtodo
espectrofotmetrico

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7.- Representar en forma grfica el error relativo de la concentracin considerando el 0.5 % de error
fotomtrico si las lecturas son de 1, 5, 10, 20, 30 ,40, 50, 60, 70, 80, 90, y 95 % de transmitancia
8.- Dar razones porque en espectroscopia se utilizan soluciones diludas
9.- Cuando una curva de calibracin no parte del origen sealar las razones que determinan este tipo
de curva
10.- Sealar los rangos de transmitancias y absorbancias de los patrones y de la muestra coloreada
donde el error relativo es mnimo

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Informe de laboratorio No 2
DEMOSTRACIN DE LAS LEYES FOTOMTRICAS Y ERROR RELATIVO DE LA
CONCENTRACIN

Fecha:

_____________

No GRUPO: ___________

Anlisis:
___________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________

SELECCIN DEL MODO DE TRABAJO (MODO CUANTITATIVO)


CUANT.
1.2 .3.4.5.6.7.-

CAMBIO DE PARAMETRO S / N ?
METODO
:
1
1
=
525 NM
STANDAR No = 12
MUESTRA No =
1
REPETIR
=
1
IMPRESION DE DATOS
CURVA DE TRABAJO NO LINEAL
FILA

NO
NO

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TABLA DE RESULTADOS:
N estandar concentracin ppm Mn Absorvancia % T
1
0.5
0.017
2
1
0.041
3
2
0.078
4
4
0.164
5
6
0.252
6
8
0.32
7
10
0.422
8
12
0.509
9
14
0.597
10
16
0.683
11
20
0.835
12
30
1.195

96.16
90.99
83.56
68.54
55.98
47.86
37.84
30.97
25.29
20.74
14.62
6.38

CURVA DE CALIBRACIN:

CLCULO DEL ERROR DE LA ABSORBANCIA O LA CONCENTRACIN:

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c = 0.434 T
c
t logt
Donde:
c/c = Error relativo de la concentracin
T = grado de inertidumbre 1% (0.01)
t
= transmitancia

CURVA DE ERROR RELATIVO

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TABULACIN DE DATOS:
%T

dc / c

95
90
80
70
60
50
40
30
20
15
10
5
1
DISCUSIN DE RESULTADOS:

Apellidos y nombres __________________________________________________


Firma del alumno: ____________________
CUESTIONARIO:
1.- Que son y cules son las leyes fotmetricas?

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Todas las sustancias pueden absorber energa radiante.


La absorcin de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las
molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica.
Adems, no est de ms mencionar el hecho de que la absorcin y trasmitancia de luz depende tanto
de la cantidad de la concentracin como de la distancia recorrida. Definidas por las siguientes leyes:
Ley de Beer
La Ley de Beer declara que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende de la
concentracin en la solucin.
Ley de Lambert
En la Ley de Lambert se dice que la cantidad de luz absorbida por un objeto depende de la
distancia recorrida por la luz.
Ley de Bouguer-Beer-Lambert
Una ley muy importante es la ley de Bouguer-Beer-Lambert (tambin conocida como ley
Lambert Bouguer y Beer) la cual es solo una combinacin de las citadas anteriormente.
2.- Cmo obtiene y para qu se utiliza una curva de calibracin o de trabajo?
La curva de calibrado es un mtodo de qumica analtica empleado para medir la concentracin de
una sustancia en una muestra por comparacin con una serie de elementos de concentracin
conocida. Se basa en la existencia de una relacin en principio lineal entre un carcter medible (por
ejemplo la absorbancia en los enfoques de espectrofotometra) y la variable a determinar (la
concentracin). Para ello, se efectan diluciones de unas muestras de contenido conocido y se
produce su lectura y el consiguiente establecimiento de una funcin matemtica que relacione
ambas; despus, se lee el mismo carcter en la muestra problema y, mediante la sustitucin de
la variable independiente de esa funcin, se obtiene la concentracin de esta. Se dice pues que la
respuesta de la muestra puede cuantificarse y, empleando la curva de calibracin, se
puede interpolar el dato de la muestra problema hasta encontrar la concentracin del analito. Las
curvas de calibracin suelen poseer al menos una fase de respuesta lineal sobre la que se realiza un
test estadstico de regresin para evaluar su bondad.

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

23

3.- Cmo comprueba experimentalmente la ley Beer?


La obtencin de la curva de calibrado y la demostracin de la ley de Beer se determinan
experimentalmente, preparando una serie de soluciones patrones y midiendo la absorbancia de cada
solucin a la longitud de onda analtica, mxima o de trabajo. Con los datos de absorbancia frente a
las concentraciones de los patrones se grfica en un sistema cartesiano y la representacin debe ser
una lnea recta de pendiente positiva si cumple con la ley Beer.

4.- Sealar las razones por las cules se dan las limitaciones de la Ley de Beer
Es una ley lmite (<0.01 M) A concentraciones mayores > 0.01 M la distancia promedio entre las
especies disminuye hasta el punto en que cada una afecta la distribucin de carga de sus vecinas
alterando la capacidad de absorcin a una .
En soluciones de baja concentracin del absorbente pero a concentraciones elevadas de otras
especies (electrolitos), la gran proximidad de iones al absorbente altera (interacciones
electrostticas) la absortividad molar. Este efecto se reduce al diluir.
5.- A qu se denominan y cules son los errores personales?
Se dan en la utilizacin y cuidado de las cubetas, deben de estar correctamente limpias, sin
huellas y sin ralladuras. Deben evitarse los cidos concentrados que puedan atacarlas, y se debe
comprobar antes y despus de la medida que no tengan burbujas ni partculas no disueltas que
pueden producir dispersin de la luz.
Otro error puede producirse en el control de la temperatura y tiempo.
- La temperatura influye dependiendo de qu reaccin sea.
- El tiempo se debe de controlar cuando tenemos reacciones que tardan un tiempo en producirse
y al cabo de un tiempo decaen.
- Tambin hay que tener en cuenta el orden de adicin de los reactivos, porque puede influir en
la obtencin de la absorbancia.

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24

6.- Qu criterios se maneja para seleccionar las soluciones patrones para ser utilizadas en un
mtodo espectrofotmetrico
Tienen composicin conocida.
Deben tener elevada pureza.
Debe ser estable a temperatura ambiente.
Debe ser posible su secado en estufa.
No debe absorber gases. No debe reaccionar con los componentes del aire.
Debe reaccionar rpida y estequiomtricamente con el titulante.
Debe tener un peso equivalente grande.
7.- Representar en forma grfica el error relativo de la concentracin considerando el 0.5 %
de error fotomtrico si las lecturas son de 1, 5, 10, 20, 30 ,40, 50, 60, 70, 80, 90, y 95 % de
transmitancia

Laboratorio de Anlisis Qumico II

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25

8.- Dar razones porque en espectroscopia se utilizan soluciones diludas


La ley de Bourguer-Lambert-Beer predice, para una longitud de onda constante y paso ptico
fijo, una relacin lineal entre Absorbancia y Concentracin conpendiente e l b e intercepto cero. Sin
embargo esta ley slo se cumple estrictamente o est limitada para soluciones diluidas,
generalmente concentraciones menores o iguales que 10-2 M. La suposicin de que e es
independiente de la concentracin de una sustancia para una longitud de onda dada, slo se cumple
en soluciones diluidas ya que e no es constante para soluciones concentradas sino que depende del
ndice de refraccin de la solucin.
9.- Cundo una curva de calibracin no parte del origen sealar las razones que determinan
este tipo de curva?

10.- Sealar los rangos de transmitancias y absorbancias de los patrones y de la muestra


coloreada donde el error relativo es mnimo

ESPECTROFOTOMETRIA DEL VISIBLE

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26

ANALISIS DE MANGANESO
I OBJETIVOS
Construir la curva de calibracin o de trabajo
Determinar el contenido de manganeso en muestras de alimentos y de frmacos.
II GENERALIDADES
Pueden determinarse por espectrofotometra y colorimetra en forma de permanganato pequeas
cantidades de manganeso en minerales, aguas, alimentos, aceros y frmacos.
Entre los diversos reactivos capaces de oxidar los estados inferiores de oxidacin del manganeso
a permanganato, tenemos el peryodato de potasio cuya reaccin se desarrolla de la siguiente
manera:
2 Mn+2 +
analito

5 IO4- +
peryodato

3 H2O

----

2 MnO4- + 5 IO3- + 6 H+
in permanganato

Existen productos farmacuticos que son agentes activos para el restablecimiento de la


capacidad corporal e intelectual y para la lucha contra las manifestaciones de desgaste. Las
cpsulas de Pharmaton son productos que contienen extracto de ginseng, vitaminas A, B1, B2,
B6, B12, C, D, E, hierro, calcio, fsforo, flor, cobre, potasio, magnesio, zinc, y manganeso en
cantidad de 1.0 mg por cpsula y otros componentes.
Muchas enzimas contienen manganeso o son activados por este elemento. El manganeso est
presente en los alimentos de origen vegetal, como t, harina integral, germenes de cereales y
nueces. La deficiencia de manganeso ocasiona trastornos del crecimiento, modificaciones de
esqueleto y alteracin del metabolismo de hidratos de carbono y grasas. A grandes dosis, el
manganeso es txico y produce ttrastornos en el tracto grastrointestinal y neumona. No se
conocen intoxicaciones debidas a una ingesta normal procedente de alimentos.

1.- Interferencias
Son pocas las interferencias para el mtodo. La presencia de iones coloreados se puede
compensar empleando como blanco un parte alcuota de la muestra problema , no oxidada por el
peryodato.El cerio (III) y el cromo (III) son excepciones ; estos dan productos de oxidacin por
el peryodato que absorben en el mismo grado a la longitud de onda que se usa para la medicin
del permanganato.
Los componentes que acompaan al manganeso comunican cierta coloracin a la solucin, el
in frrico de color amarillo se elimina con cido fosfrico por formacin del complejo hierrofosfrico incoloro, el color debido a pequeas cantidades de cromo, vanadio, nquel, y cobalto se
compensan con el blanco tal como se ha sealado.
Los cloruros reducen el permanganato formado y por lo tanto, si hubo necesidad de utilizar HCl,
deben ser eliminados previamente en forma de vapores de HCl llevando a fumacin con H2SO4

III FUNDAMENTO
La muestra es sometida a calcinacin seca entre 500 - 550 oC , hasta obtener un resduo de
cenizas, la que es disuelta por cido y tratada con peryodato de potasio en caliente ; el

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27

manganeso es oxidado por este reactivo hasta permanganato de color violeta. En esta condicin
de color desarrollado por reaccin y diluido a un volumen conocido se realiza la medicin
espectrofotomtrica a una longitud de onda de 525 nm.

IV ARREGLO EXPERIMENTAL

V APARATOS
Espectrofotmetro : Shimadzu 160 - A
Cubeta
: 1 cm. De trayecto ptico
Regin de trabajo : Espectro visible
Longitud de onda : 525 nm
Blanco
: agua
VI MATERIALES
Fiolas de 100 ml.
Pipeta graduada de 10 ml.
Equipo de filtracin
Vaso de precipitacin
Pisetas
VII REACTIVOS
Solucin de cido ntrico 1 : 1
Peryodato de potasio
Acido fosfrico
Solucin de Permanganato de potasio de 100 ppm en manganeso
Soluciones patrones o Standares.
VIII TECNICA
1.- Obtencin de curva de calibrado
Preparar las soluciones patrones o estandares de: 4, 6, 8, 12 y 16 ppm en manganeso para un
volumen de 100 ml.
CUADRO DE SOLUCIONES

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28

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No standard

Volumen del Stock

Volumen aforado

1
2
3
4

4.0
8.0
12.0
16.0

100.0
100.0
100.0
100.0

Concentracin
ppm
4
8
12
16

2.- TRATAMIENTO DE LA MUESTRA


A. Medida y disolucin de la muestra
Pesar 6.0000 g de muestra, colocarla en un crisol de porcelana y someterla a calcinacin a ms o
menos 550 oC, mantener esa temperatura por espacio de 3 - 4 horas hasta obtener un residuo de
cenizas.
Trasladar las cenizas a un vaso de precipitado de 250 ml y agregar 20 ml de HNO3 1:3, cubrir
el vaso con un vidrio de reloj y hervir lentamente hasta semisequedad. (En el curso de la
disolucin se produce NO2 y NO, estos pueden interferir posteriormente reduciendo el cido
peridico por ello deben ser removidos). Diluir con ms o menos 30 ml de agua destilada,
calentar suavemente y si queda un residuo slido filtrar.
Lavar el precipitado con agua destilada. El residuo slido de descarta
Oxidacin del Manganeso
Colocar la solucin filtrada en un vaso de 250 ml, aadir de 3 a 5 ml. de cido fosfrico al 85%
y unos 0.3 gramos de peryodato de potasio slido. Hervir la solucin suavemente durante unos 3
minutos. Retire del fuego y permita que se enfrie; despus aada otros 0.2 gramos del peryodato
de potasio (el exceso de peryodato estabiliza el permanganato). Haga hervir uno o dos minutos
ms para desarrollar el color purpreo, enfriar y llevar a un volumen de 25 50.0 ml en un
matraz aforado (segn intensidad del color obtenido)
Medir en el instrumento la solucin problema coloreada obtenida a la longitud de onda
seleccionada, utilizando como blanco agua.
B.

3.- Medicin Cuantitativa


A. Seleccin de Modo
Encender el instrumento y seleccionar en el men de modo bsico, presionando la tecla 5 que
corresponde al modo cuantitativo y ajustar los parmetros de medicin a lo siguiente:

CUANTIT.

CAMBIO DE PARAMETRO S/ N

1.- Mtodo: 1
2.3.4.5.6.7.-

= 525 NM
Standard No = 4
Muestra No = 1
Repetir No = 1
Impresin de datos = NO
Curva de trabajo no lineal = NO
Fila

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29

El sistema pregunta CAMBIO DE PARAMETRO S /N al presionar NO aparece en


pantalla CALIBRATION e ingresar los valores de concentracin como soluciones Standares,
aparece luego en pantalla el mensaje de CAMBIO DE CONCENTRACION S / N .
Si presiona NO el sistema pregunta INGRESO MANUAL DE DATOS DE ABS. S / N .
Para ingresar las absorbancia de las soluciones Standares....presionar YES. Y luego ingresar los
valores de absorbancia desde el standard No 1 hasta el 4.
Cuando aparece MOSTRARIO DE CURVA DE TRABAJO S/N , presionar YES y la
curva se indica en pantalla. Presionar RETURN , aparece el modo cuantitativo y presionar la
tecla NO .
B.- Medicin
Cuando aparece en pantalla COLOCAR MUESTRA Y PRESIONAR LA TECLA START.
Luego aparecen los valores de absorbancia y concentracin para cada muestra.
IX CALCULOS
1.- Mtodo Grfico
Presionar la tecla COPY para obtener la curva de calibrado y en ella se plotea el valor de
absorbancia de la muestra en la curva para determinar su concentracin. Luego calcular la
concentracin final de la muestra teniendo en cuenta las alcuotas correspondientes.
2.- Mtodo Analtico
Los pasos a seguir en el clculo son:
A.- Clculo de las absortividades de los estandares en base a:
A p = a. b. Cp
B.- Clculo de la concentracin de la muestra en base a:
Am = a. b. C m
Donde:
Ap = absorbancia del patrn
Am = absorbancia de la muestra
Cp = concentracin del patrn
Cm = concentracin de la muestra
C.- Clculo de la concentracin de la muestra teniendo en consideracin las diluciones
efectuadas.
Considerar en estos clculos las diluciones que se han realizado con la solucin problema. Se
tiene un peso inicial, un volumen inicial de la solucin, una medicin de una porcin alcuota, y
finalmente un volumen final de la muestra.
d.- Expresin del resultado
El resultado del anlisis expresarlo bajo las dos formas siguientes: El frmaco declara en su
envase que contiene un peso determinado en miligramos por cpsula. En el caso de alimentos se
expresa el resultado como miligramos por ciento.
X CUESTIONARIO
1.- Que mtodos de trabajo conoce para determinar concentraciones de analitos en
espectrofotometra

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30

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2.- Porque en espectroscopia visible la solucin debe presentar color natural o formado con
colorante cromoforo y cuales son los factores a tomar en consideracin
3.- Que papel desempea el reactivo peryodato de potasio y el cido fosfrico. Formule las
reacciones qumicas
4.- Seale razones porque la especie coloreada debe presentar una lectura del 36.8 % de
transmitancia de acuerdo al error relativo de la absorbancia
5.- Como emplea la curva de calibracin para determinar la concentracin de un analito
6.- Un peso de 15 mg de muestra de un compuesto con peso molecular de 384.63 se disuelve en un
matraz volumtrico de 5 ml. Un alcuota de 1 ml se coloca en un matraz de 10 ml y se diluye hasta
la marca de enrase.
a) Halle la concentracin de la muestra en el matraz de 5 ml
b) Determine la concentracin en el matraz de 10 ml
c) La muestra de 10 ml se coloca en una celda de 0.5 cm y se obtiene una absorbancia de 0.634 a
495 nm. Determinar la absortividad molar a dicha longitud de onda
7.- Una muestra de 0.525 g que contiene manganeso se disolvi y se oxid a in permanganato y la
solucin se diluy a 100 ml en un matraz volumtrico. La absorbancia a 525 nm en una celda de 1
cm fue de 0.496 y su absortividad molar de 2.24 x 10 3, calcule el porcentaje de manganeso en la
muestra.
8.- Calcular la concentracin de manganeso encontrado en la prctica utilizando el mtodo de
regresin lineal

Informe de laboratorio No 3 :Determinacin de Manganeso

Fecha

: ____________

No Grupo: ___________

Laboratorio de Anlisis Qumico II

31

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Anlisis:
____________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________
Procedencia:
________________________________________________________________________
DATOS:
-

Longitud de onda de trabajo = -----------Volumen final


= ------------

- Peso de muestra
- Blanco

TABLA DE RESULTADOS DE LOS PATRONES

TABLA DE MEDICIN DE LA MUESTRA

CLCULOS:
1.- MTODO GRFICO (Curva de calibracin)

= ----------= -----------

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

2.- MTODO ANALTICO


Clculo de la absortividad media

Ap = a. b. Cp

a1 =
a2 =
a3 =
a4 =
a5 =

am =

Clculo de la concentracin de la muestra (Cm): Am = a. b. Cm

Cmuestra =

Clculo de la concentracin para las diluciones:

Clculo del peso de manganeso en miligramos:

32

Laboratorio de Anlisis Qumico II

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33

TABLA DE RESULTADOS DEL ANLISIS

No de Muestra
1
2
3
4
5
6
7

mg Mn/ %

DISCUSIN DE RESULTADOS:

Apellidos y nombres: ____________________________________________________________


Firma del alumno: ____________________

CUESTIONARIO:

Laboratorio de Anlisis Qumico II

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ESPECTROFOTOMETRIA DEL VISIBLE


ANALISIS DE HIERRO
I

OBJETIVOS
Construir una curva de absorcin y de calibrado
Seleccionar la longitud de onda de trabajo
Analizar el contenido de hierro en un alimento.

II GENERALIDADES

34

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

35

Gran cantidad de iones inorgnicos que presentan color en solucin acuosa absorben suficiente
energa radiante en la regin visible, lo que permite su determinacin espectrofotomtrica
directa, incluso en muy bajas concentraciones. Pero no todos los iones metlicos presentan color
propio, y otros tienen poco color.
Los colores de muchos cationes se pueden intensificar por formacin de compuestos complejos
al hacerlo reaccionar con determinados reactivos denominados cromoforos. Muchos reactivos
que producen color han sido empleados para la determinacin de hierro, en algunos se efecta la
determinacin directa de hierro (III), mientras en otros se aprovecha la formacin de complejos
muy coloreados entre hierro (II ) y diversos ligandos orgnicos.
Entre los diversos reactivos ms importantes para la determinacin espectrofotomtrica del
hierro figuran el reactivo 1, 10 fenantrolina y sus anlogos como el 4, 7 difenil 1, 10 fenantrolina
(batofenantrolina). El ligando orgnico, tiene la estructura siguiente C12H8N2, donde tres de estos
ligandos estn coordinados con un catin de hierro (II), por los pares de electrones sobre los
tomos de nitrgeno, para formar el complejo indicado, que en forma abreviada se escribe as:
Fe+2
Analito

3 Fenan
ligando

=========

Fe (fen)3

+2

complejo rojo anaranjado

Cada tomo de nitrgeno de la fenantrolina forma un enlace coordinado con el hierro (II) y que
hay un total de 6 enlaces de este tipo. El complejo se llama tris 1, 10 fenantrolina, hierro II.
El hierro est contenido en el pigmento de la sangre (hemoglobina) y sirve principalmente para
el transporte del oxgeno y la hematopoyesis. El hierro se encuentra en hgado, riones, corazn,
carne, productos elaborados con cereales integrales, verdura verde, espinacas, etc. En los
productos farmacuticos se tiene la presencia de hierro como sulfato ferroso y estos productos
son empleados en caso de anema ferropnica (profilxis y tratamiento) y como suplemento
diettico.
1.- Interferencias
Las principales interferencias son plata (I), cobalto (II), cobre (II) y nquel (II) se ha demostrado
que una mezcla de cido ctrico y cido etilen diamino tetraactico ( EDTA ) puede emplearse
para enmascarar plata (I) , cobre (II), y nquel (II) y una gran cantidad de iones metlicos
comunes. Tambin resultan interferentes los oxidantes enrgicos como cianuros, nitritos, y
fosfatos. La adicin en exceso de hidroxilamina elimina los errores debido a estas sustancias.
III FUNDAMENTO
El mtodo de la fenantrolina consiste en reducir el hierro al estado ferroso con el reactivo
orgnico cloruro de hidroxilamina en un medio cido ajustado a ms menos 3.5, con solucin
buffer, en estas condiciones se agrega el reactivo complejante 1, 10 fenantrolina; formndose un
compuesto complejo de fierro fenantrolina de color rojo naranja, y que es medido luego
espectrofotomtricamente a una longitud de onda de 510 nm. La formacin cuantitativa del
complejo se observa en el margen de pH comprendido entre 3 y 9 pero se recomienda un pH
prximo a 4 para evitar la precipitacin de diversas sales de hierro.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
El circuito bsico del equipo instrumental es el siguiente:

Laboratorio de Anlisis Qumico II

APARATOS
Espectrofotmetro
Cubeta
Regin de trabajo
Longitud de onda
Blanco

:
:
:
:
:

36

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Shimadzu 160 - A
1 Cm. De trayecto ptico
Espectro visible
510 nm
Solucin de reactivos y disolvente menos hierro.

VI REACTIVOS
Solucin de Hidroxilamina .- Disolver 10.0 gramos de reactivo en 100 ml de agua destilada
Solucin buffer.- Disolver 250 gramos de acetato de amonio en 150 ml de agua destilada,
aadir 700 ml de cido actico glacial.
Solucin de fenantrolina.- Disolver 0.250 gramos de 1, 10 fenantrolina monohidratada en
100 ml de agua destilada, agitando y calentando a 80 oC. Se evita el calentamiento si se aade
2 gotas de cido clorhdrico en el agua destilada.
Solucin Stock de hierro.- La solucin se prepara a partir del sulfato ferroso amoniacal
[FeSO4 (NH4)2SO4.6H2O]. Para ello se disuelve 0.7020 gramos del reactivo, calidad analtica,
en 50 ml de agua destilada y 1 ml de cido sulfrico concentrado, pasar a una fiola en un litro,
diluir exactamente hasta el enrase y homogenice. La concentracin de la solucin es de 0.1
mg de hierro por mililitro de solucin (0.1 mg Fe / ml de solucin).
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones estandares o patrones
Estas soluciones se deben preparar instantes antes del anlisis porque son inestables. Disponer de
5 matraces aforados de 50 ml y rotular del uno al cinco; agregar a la fiola nmero 1, 0.5 ml,
agregar a la segunda fiola, 1.0 ml, a la tercera 1.5 ml, y a la cuarta fiola 2.0 ml de la solucin
Stock. A la quinta fiola no se le aade dicho reactivo (solucin blanco).
Se agrega a cada fiola, 3 ml de solucin de hidroxilamina, 3 ml de solucin de fenantrolina y
ajuste el pH de la solucin a 3.5 con la solucin buffer; diluya cada solucin con agua destilada
hasta el aforo, se tapa la fiola, se agita y se deja en reposo durante media hora. El color de la
solucin es rojo anaranjado.

CUADRO DE SOLUCIONES
No
volumen del Buffer
estandar Stock ml
Ml
d

Fenantrolina
Hidroxilamina ml
ml

Concentraci
n mg/ml

Volume
n final
ml

Laboratorio de Anlisis Qumico II

1
2
3
4
5

37

INGENIERA BIOTECNOLGICA

0.5
1.0
1.5
2.0
0.0

3
3
3
3
3

3
3
3
3
3

0.001
0.002
0.003
0.004
0.000

50.0
50.0
50.0
50.0
50.0

2.- Determinacin de la longitud de onda analtica


Una vez iniciada el encendido del instrumento y aparece en pantalla el men bsico de
funciones, seleccionar la funcin ESPECTRO y ajustar en esta funcin los parmetros
analticos de:
S
= 600 NM
SUPERIOR = + 0.700 A

E = 400 NM
INFERIOR = + 0.00 A

Determinar la longitud de onda de trabajo en la curva espectral mediante el barrido con el cursor.
3.- Preparacin de la muestra
Pesar exactamente, 6.0000 g de la muestra y calcinar en una mufla a 550 o C hasta la obtencin
de cenizas blancas. Disolver con 10 ml de HCl 6 M, calentando suavemente evitando llegar a
sequedad. Diluir con ms o menos 20 ml de aguas destilada y calentar. Filtrar si es necesario y
recibir los filtrados en una fiola de 100 ml enrasar y homogenizar la solucin con agua destilada.
Medir una alcuota de 25.0 ml, colocarla en una fiola de 50.0 ml y darle el mismo tratamiento
que las soluciones estandar hasta obtener el color. Esta solucin de la muestra en estudio est
lista para ser sometida a medicin en el aparato.
4.- Medicin de la Muestra
Seleccionar en el men principal el modo CUANTITATIVO y ajustar los parmetros
analticos de medicin a la longitud de onda de trabajo y del nmero de standard por medir
empleando como blanco la solucin No 5 (Blanco).
IX CALCULOS
1.- Mtodo Grfico
Presionar la tecla COPY para obtener la curva de calibrado y en el se plotea el valor de
absorbancia de la muestra en la curva para determinar su concentracin. Calcular la
concentracin final de la muestra teniendo en cuenta las diluciones efectuadas.

2.- Mtodo Analtico


Seguir los procedimientos de acuerdo a los pasos sealados:
a)

Clculo de las absortividades de las soluciones estandar

Emplear la ecuacin base de las leyes fotmetricas:


A = a.b.c
Calcular las absortividades de las soluciones standard.
a1
a2

= A1 / C1
= A2 / C2

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

38

a3 = A3 / C3
a4 = A4 / C4
Luego calcular la absortividad media:
a m = a1 +a2+ a3+ a4
4
b) Clculo de la concentracin de la muestra
En la ecuacin:

A = am.b.c.

Se despeja C que corresponde a la concentracin de la muestra:

C muestra =

c)

A muestra
am x b

Clculo de la concentracin de la muestra teniendo en consideracin las diluciones


efectuadas

Calcular la concentracin de la muestra tomando en cuenta las diluciones realizadas a la solucin


problema.

Expresin del resultado


1.- En miligramos de hierro por mililitro
d)

X CUESTIONARIO
1.- Efectue la reaccin entre el hierro (II) y el reactivo fenantrolina
2.- Para que sirve el blanco y como esta constituido en la determinacin de hierro por el mtodo
de la fenantrolina
3.- Si una muestra contiene hierro (II) y hierro (III), disee una tcnica mediante un diagrama
de bloques para analizar estos componentes por separado.
4.- Que tipos de interferencia puede presentarse en un anlisis espectrofotomtrico
5.- Calcular la absortividad molar del complejo rojo anaranjado fe-fenantrolina, si se trat un
volumen alcuota de 5 ml de una solucin estandar con un total de 20 microgramos de hierro y
luego se diluy a un volumen final de 10 ml. La absorbancia de la solucin medida a 510 nm es
de 0.4 y se emple una celda de 1 cm
6.- Que otros mtodos espectroscpicos del visible conoce para la determinacin de hierro,
seale sus fundamentos brevemente

Laboratorio de Anlisis Qumico II

39

INGENIERA BIOTECNOLGICA

7.- Calcular la concentracin del analito Fe determinado en la prctica mediante el mtodo de


regresin lineal
8.- El Fe 3+ forma un complejo con el ion tiociantao, cuya frmula es FeSCN 2+ . El complejo
tiene un mximo de absorcin a 580 nm. Una muestra de agua de pozo se ensay en celda de 1
cm y arroj los siguientes resultados:

Muestra
580 nm

volumen de muestra
ml

1
2

50
50

Volmenes, ml
oxidante
Fe(II)
ml
5.0
5.0

2.75 ppm
5.0
0.0

KSCN
0.050 M
20.0
20.0

H2O
ml
20.0
25.0

ABS

0.549
0.231

Calcular la concentracin de hierro en partes por milln

Informe de laboratorio No 4
Determinacin de Hierro
Fecha: ___________

No GRUPO: _________

Anlisis:
____________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

DATOS:

Peso de la muestra
Volumen inicial
Volumen alcuota
Volumen final

= -----------------= -----------------= ----------------= -----------------

DETERMINACIN DE LA LONGITUD DE ONDA DE TRABAJO:

TABLA DE RESULTADOS DE LOS PATRONES:

40

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

TABLA DE MEDICIN DE LA MUESTRA:

CLCULOS:
1.- MTODO GRFICO (Curva de calibracin)

2.- MTODO ANALTICO


Clculo de la absortividad media

a1 =

a2 =
a3 =
a4 =

41

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

am =

Clculo de la concentracin de la muestra

Cmuestra =

Clculo de la concentracin para las diluciones

Clculo del peso de hierro en miligramos por ciento

TABLA DE RESULTADOS DEL ANLISIS:


No Muestra
1
2
3
4
5
6
7

mg %hierro

DISCUSIN DE RESULTADOS:

Apellidos y nombres: _______________________________________________


Firma del alumno: ____________________

42

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

CUESTIONARIO:
1.- Efectue la reaccin entre el hierro (II) y el reactivo fenantrolina

43

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

44

2.- Para qu sirve el blanco y cmo est constituido en la determinacin de hierro por el
mtodo de la fenantrolina?
Es una muestra que no contiene el analito a tratar, en este caso el hierro. En nuestra prctica est
compuesto por por buffer, hidroxilamina y O-fenantrolina.
3.- Si una muestra contiene hierro (II) y hierro (III), disee una tcnica mediante un
diagrama de bloques Para analizar estos componentes por separado.
Se trata con
fenantrolina
(cromforo)
Se reduce a
Fe (II) por
ebullicin
con cido e
hidroxilamin
a
Se disuelve
el Fe, puede
ser con HCl.

La
formacin
del
complejo Fe
(II) con
fenantrolina
se da en un
intervalo de
pH
comprendid
o entre 2 a
9

4.- Que tipos de interferencia puede presentarse en un anlisis espectrofotomtrico:


Los oxidantes furertes, cianuro, nitrito, fosfatos, cromo, zinc, cobalto y cobre. El bismuto, el
cadmio, el mercurio, el molibdato y la plata precipitan la fenantrolina. La adicin de un exceso
de hidroxilamina elimina los errores causados por exceso de reactivos oxidantes. En presencia de
iones metlicos, es necesario utilizar mayor exceso de fenantrolina, aunque tambin se puede
realizar una extraccin.
Si existen cantidades de materia orgnica o colorante, puede ser necesario evaporar la muestra,
llevar el residuo a combustin seca suave, y volver a disolver en cido. La presencia de cantidades
excesivas de materia orgnica puede hacer necesaria una digestin

5.- Calcular la absortividad molar del complejo rojo anaranjado fe-fenantrolina, si se trat
un volumen alcuota de 5 ml de una solucin estandar con un total de 20 microgramos de
hierro y luego se diluy a un volumen final de 10 ml. La absorbancia de la solucin medida
a 510 nm es de 0.4 y se emple una celda de 1 cm
(a) Concentracin de la muestra

Laboratorio de Anlisis Qumico II

45

INGENIERA BIOTECNOLGICA

6.- Que otros mtodos espectroscpicos del visible conoce para la determinacin de hierro,
seale sus fundamentos brevemente:
a) Para determinar la presencia del hierro como in frrico ( Fe 3+ ) se lo combina con
tiocianato de potasio ( KSCN ) formandose el in hexatiocianoferrato ( Fe(SCN)63- ) de
color rojo sangre.
b) El hierro se puede determinar en la leche en polvo por espectrofotometra visible despus
de reducir el Fe+3 a Fe+2 con clorhidrato de hidroxilamina y de 1, 10 fenantrolina como
complejador coloreado. Es as que luego de haber sometido a las muestras a las
condiciones necesarias para las lecturas del equipo, encontramos las cantidades de hierro
en las muestras, esto debido a la lectura de estndares de concentracin conocida y
recurriendo a la dependencia lineal entre la absorbancia y la concentracin.
c) Al determinar el Fe mediante la espectrofotometra UV-Visible observamos que esta
presenta Fe en las plantas nutricionales analizadas ya que este se dio por diferentes
mtodos como lo es la de absorcin atmica y molecular, donde en ambos se noto la
presencia de Fe. En cada una de las plantas a travs de estos mtodos se observaron
concentraciones de Fe que nosotros los seres humanos consumimos al comer esta planta,
donde nos ayuda para el mejoramiento y prevencin de la anemia que viene dada por
falta de hierro en el organismo.

7.- Calcular la concentracin del analito Fe determinado en la prctica mediante el mtodo


de regresin lineal
8.- El Fe 3+ forma un complejo con el ion tiociantao, cuya frmula es FeSCN 2+ . El
complejo tiene un mximo de absorcin a 580 nm. Una muestra de agua de pozo se ensay
en celda de 1 cm y arroj los siguientes resultados:

Muestra
580 nm

volumen de muestra
ml

1
2

50
50

Volmenes, ml
oxidante
Fe(II)
ml
5.0
5.0

2.75 ppm
5.0
0.0

Calcular la concentracin de hierro en partes por milln

KSCN
0.050 M
20.0
20.0

H2O
ml
20.0
25.0

ABS

0.549
0.231

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

46

ESPECTROFOTOMETRIA TURBIDIMETRICA
DETERMINACION DE SULFATOS
I OBJETIVOS
Determinar el contenido de sulfatos en aguas de consumo humano
II GENERALIDADES
Aparte de una cantidad relativamente pequea de agua atmosfrica en forma de vapor, hay
cuatro tipos importantes de agua en la superficie terrestre, el agua dulce de rios y lagos, el agua
subterrnea, las capas de hielo continentales y las aguas saladas de los mares y ocanos
(constituye el 98 % del agua sobre la tierra).
El agua potable para que pueda ser utilizada para fines alimenticios debe estar totalmente limpia,
ser inspida, inodora e incolora y tener una temperatura aproximada de 15 oC, no debe contener
bacterias, virus, parsitos u otros grmenes que provoquen enfermedades, adems, el agua
potable no debe exceder en cantidades de sustancias minerales mayores de los lmites
establecidos.
Los estndares para agua potable del servicio de salud pblica tienen un lmte mximo de 250
ppm de sulfatos, ya que a valores superiores tienen una accin purgante. Los sulfatos se
combinan con el magnesio y calcio y por encima de 400 ppm perciben un sabor amargo.
Los mtodos turbidimtricos y nefelomtricos difieren de los mtodos analticos de absorcin en
dos aspectos, primero, la sustancia desconocida no est en solucin, sino en suspensin coloidal
y, segundo, parte de los fotones incidentes sobre la muestra se separan del haz incidente por
dispersin y no por absorcin.
Un mtodo turbidimtrico mide la energa radiante transmitida por la suspensin. En un mtodo
nefelomtrico se hace la medicin de la intensidad de la luz dispersa. Estos mtodos no son en
general tan exactos como los resultantes de mtodos analticos de absorcin.
Este mtodo analiza sulfatos en un intervalo de 0 a 25 ppm en muestras de aguas de uso
domstico, industrial y agrcola. Si la concentracin de sulfatos es superior a 25 ppm se diluye
segn se necesario.
INTERFERENCIAS
El color, slice, materia orgnica slidos suspendidos interfieren en la medicin de sulfatos. Parte
de la materia en suspensin puede ser eliminada por filtracin, si ambas interferencias son
pequeas en comparacin de sulfatos, se proceder a corregirlas midiendo blancos a los que no
se ha aadido BaCl2.

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

47

Interfiere tambin un exceso de slice superior a 500 mg/ L y en las aguas con gran cantidad de
materia orgnica puede no ser posible precipitar BaSO4 satisfatoriamente.
La determinacin de sulfatos se debe realizar a temperatura ambiente, pero admite una variacin
mxima de 10 oC.
III FUNDAMENTO
El ion sulfato precipita en medio cido con cloruro de bario para formar una suspensin blanca
de sulfato de bario de tamao uniforme, se requiere de un solvente acondicionador, que contiene
glicerina y alcohol, para modificar la viscosidad de la muestra y asi permitir que el precipitado
de BaSO4 se mantenga en suspensin. La reaccin de formacin del precipitado es:
SO4 2- (ac) +
Ba 2+ (ac)
---- BaSO4 (s)
Analito
reactivo precipitante
sulfato de bario
Se mide la absorbancia en un espectrofotmetro o nefelmetro y se determina la concentracin
del ion sulfato por comparacin de la lectura con una curva de calibracin o mediante el mtodo
analtico.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL

V APARATOS
Espectrofotomtro
: Shimadzu 160 A con barrido automtico e impresora
Cubeta
: 1 cm De trayecto ptico
Regin
: visible
Longitud de onda
: 420 nm
Blanco
: agua destilada
VI MATERIALES
Fiolas de 100 ml.
Bureta por 25 ml.
Pipeta por 2, 5, 10 ml.
VII REACTIVOS
Solucin stock de 100 mg/ L de sulfato
Disolver 0.1479
gramos de sulfato de sodio anhidro en agua destilada, transferir
cuantitativamente a una fiola de un litro, enrasar y homogenizar la solucin.
Solucin amortiguadora
Aadir 50 ml de glicerina a una solucin que contenga:

Laboratorio de Anlisis Qumico II

48

INGENIERA BIOTECNOLGICA

a) 30 ml de cido clorhdrico concentrado


b) 300ml de agua destilada
c) 100 ml de alcohol etlico
d) 75 g de cloruro de sodio
Enrasar y homogenizar la solucin en fiola de un litro con agua destilada.
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones patrones
Preparar 6 Fiolas de 100 ml. y preparar las soluciones patrones midiendo los volumenes alcuotas
de la solucin stock de sulfatos tal como se seala y llevar al enrase con agua destilada y
homogenizar la solucin.
Soluciones Estandares
No de patrn Volumen
ml
1
0.0
2
5.0
3
10.0
4
15.0
5
20.0
6
25.0

alcuota Volumen final Concentracin


ml
sulfatos
100.0
0.0
100.0
5.0
100.0
10.0
100.0
15.0
100.0
20.0
100.0.
25.0

mg/L

Transferir el contenido de las fiolas con las soluciones de cada patrn a vasos de 250 ml y aadir
1 ml de solucin cida acondicionadora a cada uno de los vasos. Agitar cada una de las
soluciones de calibracin con un agitador magntico a velocidad constante y aadir
aproximdamente 200 mg de cristales de cloruro de bario. Mantener la agitacin por 60 seg.
Al finalizar la agitacin verter la solucin en la celda de medicin y dejar reposar durante 2 min.
Transcurridos los 2 min de reposo, medir de inmediato la turbiedad originada por la precipitacin
de BaSO4 en cada una de las soluciones de calibracin. Graficar la curva de calibracin.
2.- Determinacin de la longitud de onda analtica
Seleccionar la funcin ESPECTRO en el modo bsico del men y ajustar los parmetros
analticos siguientes:
1.- INTERVALO DE LONGITUD DE ONDA
S = 1100 NM
E = 200 NM
2.- RANGOS DE ABSORBANCIA
UPPER = + 1.00
LOWER = 0.00

Graficar la curva de absorcin y efectuar un barrido con el cursor y determinar su longitud de


onda de trabajo. Usar como blanco agua destilada.
3.- Medicin de las muestras
Tomar 50.0 ml de la muestra, dluirla a 100.0 ml. Aadir a la muestra 1 ml de solucin
acondicionadora, agitar la mezcla con un agitador magntico a velocidad constante y aadir
aproximadamente 200 mg de cristales de cloruro de bario.
Darle a la muestra el mismo tratamiento que los patrones y seleccionar en el men bsico de
funciones el modo CUANTITATIVO y ajustar los parmetros analticos de medicin a la
longitud de onda de trabajo y del nmero de patrones por medir. Medir los valores de

Laboratorio de Anlisis Qumico II

49

INGENIERA BIOTECNOLGICA

absorbancias originada por la suspensin del precipitado de BaSO4 que presentan la solucin
problema.
IX CALCULOS
1.- Mtodo Grfico
Presionar la tecla COPY para obtener la curva de calibrado y en ella se plotea el valor de
absorbancia de la muestra para determinar su concentracin. Efectuar los clculos y expresar los
resultados como ppm referidos a sulfatos
X DISCUSION DE DATOS
Los datos experimentales obtenidos en el trabajo de laboratorio contrastarlos con los valores
considerados tericos o verdaderos.
CUESTIONARIO
1.- Calcular la concentracin en ppm en la solucin stock
2.- En que consiste los mtodos nefelomtricos y los mtodos turbidimtricos
3.- De razones porque los resultados del anlisis se expresan en ppm
4.- Que funcin cumple la solucin acondicionadora en los patrones y en la muestra en estudio
5.- En el trabajo experimental quin es el responsable de la absorbancia de la radiacin
6.- Que otros mtodos de determinacin de sulfatos conoce
7.- Esquematizar el arreglo experimental de un turbidimetro

Informe de laboratorio No 5
Determinacin de Sulfatos

Fecha :

____________________

No GRUPO: _________

Anlisis:
__________________________________________________________________________
Mtodo:
__________________________________________________________________________
Muestra:
_________________________________________________________________________

DATOS
Volumen de muestra = ------------------ Volumen final
= ------------------- Blanco
= -------------------

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

DETERMINACIN DE LA LONGITUD DE ONDA DE TRABAJO

TABLA DE RESULTADOS DE LOS PATRONES

TABLA DE RESULTADOS DE MEDICIN DE LAS MUESTRAS

CLCULOS:
1.- Mtodo Analtico
a) Absortividad

b) Concentracin de la muestra

50

Laboratorio de Anlisis Qumico II

51

INGENIERA BIOTECNOLGICA

TABLA DE RESULTADOS
# muestra
1
2
3
4
5
6
7

ppm sulfatos

DISCUSIN DE RESULTADOS

APELLIDOS Y NOMBRES_________________________________________________
Firma del alumno: ____________________
CUESTIONARIO

ESPECTROFOTOMETRIA DEL ULTRAVIOLETA


ANALISIS DEL ACIDO ACETILSALICILICO
I

OBJETIVOS
Construir una curva de absorcin y de calibrado.
Seleccionar la longitud de onda de trabajo
Analizar y determinar el grado de pureza del Acido acetilsaliclico en una aspirina.

II GENERALIDADES
Este acetilderivado del cido saliclico se obtiene por la reaccin de este cido con el anhdrido
actico. La reaccin de formacin es la siguiente:
OH
(CH3 CO )2 O

+ C6 H4

---------- C6 H4
COOH

Anhidrido actico

OCOCH3

cido saliclico

+ CH3 - COOH
COOH

cido acetilsaliclico

cido actico

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

52

El cido acetilsaliclico llamado tambin ter actico del cido saliclico, aspirina o cido ortoaatoxibenzoico, son cristales blancos en pequeas tablas o agujas, inodoros, de sabor ligeramente
cido, estables en ambiente seco, pero se hidrolizan gradualmente en medio hmedo
transformndose en cido saliclico y cido actico , y se vuelve perceptible el olor del segundo.
Se funde a unos 135o C pero el punto de fusin vara segn las condiciones en que se haga el
ensayo. Su solucin alcohlica no se tie de color violado con el cloruro frrico (en lo que se
diferencia del cido saliclico).
Un gramo de cido acetilsaliclico se disuelve en unos 300 mililitros de agua destilada, en 5 ml.
de alcohol de 90o en 17 ml. de cloroformo y en 10 a 15 ml. de ter. En las soluciones
concentradas de acetato de amonio y en las soluciones de carbonatos e hidrxidos alcalinos es
soluble con descomposicin.
Se emplea en el tratamiento sintomtico del dolor articular muscular. En la fiebre reumtica,
produce alivio sintomtico del dolor y disminuye el grado de inflamacin articular, suprime la
fiebre. Se usa tambin como antipirtico en procesos infecciosos, txicos o de deshidratacin.
II FUNDAMENTO
El cido acetilsaliclico no disociado interacciones con la energa radiante en la regin que
corresponde al ultravioleta presentando dos picos en la curva de absorcin. Un pico primario a
una longitud de onda de 230 nm y el otro secundario a 275 nm.
La medicin espectrofotomtrica en esta regin del espectro se realiza a la longitud de onda de
230 NM.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL

APARATOS
Espectrofotmetro
Cubeta
Regin de trabajo
Longitud de onda
Blanco

: Shimadzu 160 - A
: 1 cm. De trayecto ptico
: Espectro Ultravioleta
: 230 NM
: agua

VI MATERIALES
Fiolas de 50, 100.0 y 250 ml.
Pipetas graduadas de 1, 2, 5 y 10 ml.
Mortero de porcelana.
VII

REACTIVOS

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

53

Solucin Stock de Acido Acetilsaliclico de 0.25 mg / ml.


Pesar exactamente 250 miligramos de cido acetilsaliclico grado reactivo analtico, disolver
en agua destilada agitando fuertemente y llevar a una fiola de 1000.0 ml de capacidad.
Enrasar y homogenizar.
Solucin de Acido clorhdrico 1 N.
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones estandares o patrones
Preparar 3 Fiolas de 50 ml. y agregar a la fiola # 1, 1.0 ml., a la fiola # 2 aadir 2.0 ml. y a la
fiola # 3 agregar 3.0 ml. respectivamente de la solucin Stock de cido acetilsaliclico cuya
concentracin es 1 ml = 0.25 mg. AAS. Agregar al 50 % de su capacidad la solucin de HCl 1N
y enrasar con agua destilada. Agitar adecuadamente para homogenizar la solucin.

CUADRO DE SOLUCIONES
No Standard
1
2
3

Volumen del Stock


1.0 ml
2.0
3.0

Volumen aforado
50.0 ml.
50.0
50.0

Concentracin AAS mg/ ml.


0.005
0.010
0.015

2.- Determinacin de la longitud de onda analtica


Seleccionar el modo bsico en funcin ESPECTRO y ajustar los parmetros analticos de :
S = 300 NM
E = 200 NM
Superior = + 0.700 A
Inferior = + 0.00A
Determinar la longitud de onda de trabajo en la curva espectral mediante el barrido con el cursor.
3.- Preparacin de la muestra
Tomar 10 pastillas de muestra, triturar, homogenizar adecuadamente y pesar exactamente 80
miligramos de muestra. Disolver en agua fra con agitacin constante por espacio de 5 a 10
minutos.
Filtrar cuidadosamente para separar el insoluble, lavar adecuadamente el residuo slido. La
solucin filtrada llevar a un volumen de 100.0 ml. en fiola.
Medir una alcuota de 1.00 ml., colocarlo en una fiola de 50.0 ml, agregarle HCl 1N hasta el 50%
de su volumen. Enrasar con agua destilada. Agitar para homogenizar la solucin y rotular
debidamente.

Seleccin de modo y medicin de la muestra


Seleccionar en el men principal el modo CUANTITATIVO y ajustar los parmetros
analticos de medicin a la longitud de onda de trabajo ( 230 NM ) y del nmero de patrones por
medir (3 ) empleando como blanco agua destilada..
a)

IX CALCULOS

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

54

1.- Mtodo grfico


Presionar la tecla COPY para obtener la curva de calibrado y en ella se plotea el valor de
absorbancia de la muestra en la curva para determinar su concentracin. Calcular la
concentracin final de la muestra teniendo en cuenta las diluciones efectuadas.
2.- Mtodo Analtico
Seguir los procedimientos de clculo de acuerdo a los pasos sealados en la sesin anterior:
a)
b)
c)
d)

Clculo de las absortividades de los estndar


Clculo de la concentracin de la muestra
Clculo de la concentracin de la muestra teniendo en consideracin las diluciones efectuadas
Expresar el resultado del anlisis en miligramos de cido acetilsaliclico y en porcentaje del
mismo.

X CUESTIONARIO
1.- Sealar que tipos de compuestos absorben radiacin UV
2.- Indicar como se clasifica la regin del UV
3.- Cules son las aplicaciones analticas ms importantes de los mtodos del UV
4.- Qu limitaciones tiene la espectroscopia de absorcin uv como tcnica de anlsis
cualitativo?
5.- (a) Preparar una curva de calibrado para la determinacin de monoclorobenceno, utilizando
los datos tabulados a continuacin:
Concentracin ppm
1.2
2.5
3.7
5.1
7.2
9.8

Absorbancia
0.24
0.50
0.71
0.97
1.38
1.82

(b) Se analizan tres muestras de clorobenceno obtenindose unas transmitancias de 90, 85 y


80%, respectivamente, en las mismas condiciones experimentales empleadas en la obtencin de
la curva de calibrado. Cul es la concentracin de clorobenceno en cada muestra?
6.- Explique el fundamento de la determinacin del mtodo de anlisis

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

INFORME DE LABORATORIO No 6
Determinacin del Acido acetil salicilico
Fecha : _____________
Anlisis:
____________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________
Procedencia:
_______________________________________________________________________

DATOS :

Peso de la tableta
Peso de muestra
Volumen inicial
Volumen alcuota
Volumen final

= ________
=__________
= _________
= _________
= __________

DETERMINACIN DE LA LONGITUD DE ONDA DE TRABAJO

55

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

TABLA DE RESULTADOS DE LOS PATRONES

TABLA DE MEDICIN DE LA MUESTRA

CLCULOS:
1.- MTODO GRFICO (Curva de calibracin)

56

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

2.- MTODO ANALTICO


Clculo de la absortividad media
a1 =
a2 =
a3 =
am =

Clculo de la concentracin de la muestra

Cmuestra =

Clculo de la concentracin para las diluciones

Clculo del porcentaje de cido acetilsalicilico

Clculo del peso en miligramos de cido acetisalicilico por tableta

TABLA DE RESULTADOS DEL ANLISIS


No Muestra Resultado como % AAS
1
2
3
4
5
6
7

Resultado como mg AAS / tableta

57

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

DISCUSIN DE RESULTADOS

Apellidos y nombres ____________________________________


Firma: ____________________

CUESTIONARIO

ESPECTROFOTOMETRIA DEL ULTRAVIOLETA


DETERMINACION DE ACIDO BENZOICO
I OBJETIVOS
Obtener su espectro de absorcin
Seleccionar la longitud de onda de trabajo.

58

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

59

Determinar el contenido de cido benzoico en un producto conservado


II GENERALIDADES
La salsa de tomate es un producto alimenticio que contiene pur de tomate, azcar, vinagre, sal,
cebolla y ajo u otras especies. A fin de asegurar el umplimiento de las normas legales se deben
examinar las muestras de salsa de tomate respecto a los conservadores permitidos, como bixido
de azufre y cido benzoico, conservadores no permitidos, por ejemplo, cido srbico y
contaminacin metlica, debido a cobre, plomo, o arsnico.
La mayor parte de las muestras caen dentro de los siguientes lmites:
Slidos totales
20 - 40 %
Slidos de tomate
6 - 17 % (min. 6 %)
Cenizas
2.9 - 4.0
Sal
1.6 - 3.6
Azcares totales
10 - 25
Acisez total ( como cido actico) 0.8 - 3.0
Cobre menos de 5 ppm ( mximo 20 ppm)
El cido benzoico (122.12 g/ mol) se utiliza comnmente como conservador en forma de sales de
sodio, o potasio, pero para el objeto de la reglamentacin la cantidad presente se calcula como el
cido mismo. El cido benzoico retarda el crecimiento de levaduras y mohos, el cido no
disociado es el agente eficaz.
III FUNDAMENTO
El mtodo se basa en medir espectrofotomtricamente el cido benzoico extrado en forma
discontinua y en medio cido por medio del disolvente orgnico cloroformo de la muestra en
estudio. La medicin se realiza en la regin del ultravioleta a la longitud de onda de trabajo.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL

V APARATOS
Espectrofotomtro
Cubeta

:
:

Shimadzu 160 A con barrido automtico e impresora


1 cm. De trayecto ptico

Laboratorio de Anlisis Qumico II

Regin
Longitud de onda
Blanco

60

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Ultravioleta
: 242 NM
: cloroformo

VI MATERIALES
Fiolas de 10 ml.
Bureta por 25 ml.
Pipeta por 2, 5, 10 ml.
Embudo de separacin
VII REACTIVOS
Cloroformo
Solucin saturada de cloruro de sodio acidificada con HCl (pH= 3 - 4 )
Solucin de HCl 0.001 M
Solucin stock de cido benzoico de 250 ppm
Calidad reactivo analtico, pureza 99.9%, se pesa 62.5 miligramos, se diluye y enrasa con
cloroformo en una fiola de 250 ml, agite para homogneizar la solucin.
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones o patrones
Preparar 4 Fiolas de 50 ml. y preparar las soluciones patrones midiendo 5, 10, 15 y 20 ml de la
solucin stock de cido benzoico. Llevar al enrase con cloroformo y homogenizar la solucin.
Soluciones Estandar
No Standard
1
2
3
4

Volumen a medir
5 ml.
10
15
20

Volumen Final
50.0 ml
50 .0
50.0
50.0

Concentracin
25
50
75
100

2.- Determinacin de la longitud de onda analtica


Seleccionar la funcin ESPECTRO en el modo bsico del men y ajustar los parmetros
analticos siguientes:
1.-

INTERVALO DE LONGITUD DE ONDA


S = 300 NM
E = 200 NM

2.- RANGOS DE ABSORBANCIA


UPPER = + 1.00
LOWER = 0.00

Graficar la curva de absorcin y efectuar un barrido con el cursor y determinar su longitud de


onda de trabajo. Usar como blanco cloroformo
3.- Medicin de las muestras
Pesar exactamente 5.0000 gramos de muestra, se trata con una solucin de 50 ml de cloruro de
sodio saturada y ligeramente acidificada con cido clorhdrico hasta obtener ms o menos un pH
3 - 4 en un embudo de separacin.

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

61

Agite y agregue aproximadamente 40 ml de cloroformo, se agita fuertermente para que el cido


benzoico pase de la fase acuosa a la orgnica. Deje en reposo para permitir la sepracin de las
dos fases. Separe la fase orgnica llevndola a otro embudo de decantacin cuidando de que no
pase la fase cuosa ni la emulsin formada. Repita nuevamente el ensayo agregando sobre la fase
acuosa del primer embudo ms o menos 30 ml de clorformo. Agitar, separar y llevar la fase
orgnica para que incremente el solvente de segundo embudo. Repetir por tercera la extraccin
del componente activo.
Lavar por tres veces la fase orgnica con el componente extrado, con solucin ligeramente cida
de cido clorhdrco (0.001 M) con porciones de 40, 30 y 20 ml de solucin. Llevar la solucin
orgnica a una fiola de 100ml completando hasta el aforo con cloroformo. Homogenice la
solucin.
Seleccionar en el men bsico de funciones el modo CUANTITATIVO y ajustar los
parmetros analticos de medicin a la longitud de onda de trabajo y del nmero de patrones por
medir empleando como blanco cloroformo. Medir los valores de absorbancias que presentan
cada solucin problema.

IX CALCULOS
1.- Mtodo Grfico
Presionar la tecla COPY para obtener la curva de calibrado y en ella se plotea el valor de
absorbancia de la muestra para determinar su concentracin.

X CUESTIONARIO
1.- Indicar las limitaciones que presenta el agua como disolvente en la regin uv
2.- Porq el cido benzoico absorbe radiacin UV
3.- Seale razones porque se utiliza disolventes orgnicos en estos mtodos
4.- Porque razones se emplean celdas de material de cuarzo en la espectroscopia UV
5.- Como prepara la solucin stock de 250 ppm de cido benzoico a partir del reactivo de fbrica
si presenta una pureza del 99%
6.- Se trataron 2 ml de una muestra de orina que contiene fosfatos, despues de la disolucin se
diluy a 100 ml, la medida fotomtrica de una alcuota de 25 ml dio una absorbancia de 0.428.
Calcular la concentracin de fosfatos como fosforo en mg / ml si la absortividad molar es de 750
( la medicin se efectu en celda de 1 cm)

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Informe de laboratorio No 7
Determinacin de Acido Benzoico
Fecha :

____________________

Anlisis:
____________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________

Peso de la muestra: ___________


Volumen final
: ___________

DETERMINACIN DE LA LONGITUD DE ONDA DE TRABAJO

TABLA DE RESULTADOS DE LOS PATRONES

62

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

TABLA DE RESULTADOS DE MEDICIN DE LAS MUESTRAS

CLCULOS:
1.- Mtodo Analtico
a) Absortividad

b) Concentracin de la muestra

C) Dilucin

c) resultado en mg/ %

TABLA DE RESULTADOS

63

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

No de muestra
mg/% acido benzoico
1
2
3
4
5
6
7

DISCUSIN DE RESULTADOS

APELLIDOS Y NOMBRES_________________________________________________

Firma del alumno: ____________________

CUESTIONARIO

64

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

65

ESPECTROFOTOMETRIA DEL INFRARROJO CERCANO


DETERMINACION DE ETANOL
I OBJETIVOS
Obtener el espectro de absorcin y seleccionar la longitud de onda de una solucin de alcohol
etlico
Construir la curva de trabajo para verificar la ley Beer
Determinar el contenido alcohlico en bebidas alcohlicas destiladas
II GENERALIDADES
La espectrofotometra infrarroja es una de las herramientas ms potentes para la identificacin
cualitativa de los compuestos orgnicos. En general para trabajar con radiacin infrarroja, se
tiene que evitar la presencia del agua, pues sta no solamente absorbe en regiones muy amplias
de esta regin, sino que ataca tambin a muchos de los materiales empleados para la
construccin de celdas.
El agua absorbe la radiacin infrarroja a varias longitudes de onda en la regin de 800 a 2500
NM (cercano infrarrojo) y tambin en la regin de 2500 - 10000 NM. Para determinaciones
cuantitativas, presenta determinadas dificultades que no existen en la regin visible; una
dificultad es que la lnea base a menudo no permanece en la absorbancia cero ni cerca de ella).
La absorbancia de la lnea base puede restarse de la absorbancia medida a la longitud de onda
analtica, pero slo cuando la lnea base est perfectamente definida y demuestra qu valor debe
restarse.
Las mediciones en la regin del infrarrojo cercano se efectan con relativa facilidad porque hay
menos picos de absorcin en esta regin y puede obtenerse una lnea base estable. La
espectrofotometra visible puede adaptarse para funcionar en esta regin, empleando materiales
pticos de vidrio o cuarzo, y celdas del mismo material.
III FUNDAMENTO
El mtodo consiste en someter a medicin una muestra problema que contiene alcohol etlico
cuyo grupo funcional ROH el enlace OH del agua une a un tomo H con un grupo OH, y la
energa de radiacin infrarroja que el agua absorba ser mayor que en el caso de la mayora de
las molculas que tienen un enlace RO-H. Por tanto, la molcula de agua absorber energa
infrarroja de longitudes de onda menores que otras molculas de este tipo.
La medicin se realiza a una longitud de onda de 980 NM y usando como blanco agua
destilada.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
V

APARATOS
Espectrofotomtro
Cubeta
Regin
Longitud de onda

: Shimadzu 160 A con barrido automtico e impresora


: 1 cm. De trayecto ptico
: Infrarrojo cercano
: 980 NM

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

66

VI MATERIALES
Fiolas de 25 ml.
Bureta por 25 ml.
Pipeta por 2, 5, 10 ml.
VII REACTIVOS
Etanol absoluto con 99.7 % de pureza.
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones standard o patrones
Preparar 5 Fiolas de 25 ml. y preparar las soluciones patrones de 10, 20, 40, 60 y 80 % de
alcohol a partir del Etanol absoluto por dilucin con agua destilada. Enrase, agite para
homogenizar y rotule adecuadamente cada fiola.
Soluciones Estandar
No estandar
1
2
3
4
5

Volumen a medir
2.50 ml.
5.00
10.03
15.04
20.06

Volumen Final
25.0 ml
25 .0
25.0
25.0
25.0

Concentracin % Etanol
10
20
40
60
80

2.- Determinacin de la longitud de onda analtica


Seleccionar la funcin ESPECTRO en el modo bsico del men y ajustar los parmetros
analticos siguientes:
1.- INTERVALO DE LONGITUD DE ONDA
S = 1050 NM
E = 900 NM
2.- RANGOS DE ABSORBANCIA
UPPER = + 0.00
LOWER = - 0.20 A
3.-

SUPERPONER CURVAS ( OVERLAY )

Graficar la curva de absorcin y efectuar un barrido con el cursor y determinar su longitud de


onda de trabajo. Usar como blanco agua destilada.
3.- Medicin de las muestras
Seleccionar en el men bsico de funciones el modo CUANTITATIVO y ajustar los
parmetros analticos de medicin a la longitud de onda de trabajo y del nmero de patrones por
medir empleando como blanco agua destilada. Medir los valores de absorbancias que presentan
cada solucin problema.
IX CALCULOS
X CUESTIONARIO
1.- Una aplicacin importante de la espectroscopia del IR es en el campo del anlisis cualitativo,
como identifica a un compuesto
2.- Cuales son las aplicaciones que presenta la espectroscopia IR

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

67

3.- Cuales son las caracteristicas que presentan las curvas de absorcin IR
4.- Porque en la prctica los valores d absorbancia presentan signo negativo?
5.- Represente y seale los componentes un arreglo experimental de un espectrofotometro IR de
doble haz
6.- Cul de los rangos del IR presentan mayor aplicacin en el anlisis

Informe de laboratorio No 8
Determinacin de Etanol

Fecha :

_____________

Anlisis:
____________________________________________________________________________
Mtodo:
____________________________________________________________________________
Muestra:
___________________________________________________________________________

DETERMINACIN DE LA LONGITUD DE ONDA DE TRABAJO

TABLA DE RESULTADOS DE LOS PATRONES

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

68

TABLA DE RESULTADOS DE MEDICIN DE LAS MUESTRAS

# muestra
1
2
3
4
5
6
7
8
9

Marca

ABS

CLCULOS:
1.- MTODO GRFICO (Curva de calibracin)

DISCUSIN DE RESULTADOS

Valor terico

Valor Practico

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

69

APELLIDOS Y NOMBRES_________________________________________________
Firma del alumno: ____________________
CUESTIONARIO
ELECTROQUMICA ANALTICA
MEDICIONES DE POTENCIAL DE CELDA
I OBJETIVOS
Construir una celda electroqumica
Determinar la medicin del potencial de la celda Daniel.
II GENERALIDADES
Las celdas electroqumicas son dispositivos donde se efectan procesos qumicos espontaneos
con el fin de producir energa elctrica til o el consumo de energa elctrica con el objeto de
conseguir una reaccin qumica.
Las celdas se clasifican en:
a) Celdas galvnicas, que transforman la energa qumica en energa elctrica, en el interior de
la celda se una reaccin qumica en forma espontana, dando lugar a cambios de orden
qumico con variaciones en la concentracin, generan energa elctrica que puede ser
convertida en trabajo til.
b) Celdas elctricas, transforman la energa elctrica en energa qumica, se le llama proceso no
espontaneo, las celdas para su funcionamiento requieren auxilio de la energa electrica
proveniente de una fuente exterior.
c)
Una celda electroqumica consiste de dos conductores denominados electrodos, cada uno
sumergido en una solucin electroltica. En la mayora de las celdas que nos interesan, las
soluciones en que se sumergen los dos electrodos son diferentes y deben estar separadas para
evitar la reaccin directa entre los reactivos. La manera ms comn para evitar que se mezclen,
es insertar un puente salino entre las soluciones, La conduccin de electricidad desde una
solucin electroltica a la otra, ocurre entonces por desplazamiento de los iones potasio en el
puente en una direccin, y de iones cloruro en la otra, sin embargo no hay contacto directo entre
el cobre metlico y los iones plata.
La celda experimenta una reaccin de oxidacin (nodo), los electrones fluyen a travs del
circuito externo hacia al otro electrodo, provocando una reduccin (ctodo); el voltmetro mide
la diferencia de potencial entre los dos metales sumergidos en las soluciones electrlitos.
III FUNDAMENTO
La celda electroqumica basa su funcionamiento en la diferencia de potencial elctrico que existe
entre dos electrodos sumergidos en una solucin, la corriente que desarrollan dichos electrodos
son amplificados electrnicamente infinidad de veces para ser registrados en un potenciomtro o
en un voltmetro electrnico.

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

70

El potencial de celda es obtenido experimentalmente construyendo la celda y conparando el


potencial de celda terica calculada mediante la ecuacin de Nernst
IV ARREGLO EXPERIMENTAL

Las caractersticas del arreglo experimental son:

Semicelda andica
Semicelda catdica
Puente salino
Aparato
Calibrado
Lectura

APARATO
pHmetro Schott Gerate CG 820
Electrodo de plata
Lmina de cobre
Lmina de zinc

=
=
=
=
=
=

Zn / Zn +2
Cu/ Cu +2
K Cl saturado
pHmetro Digital Schott gerate CG 820
no indispensable
Unidades de milivoltios.

VI MATERIALES
Vasos de precipitados de 150 ml.
Tubo de vidrio en U.
VII REACTIVOS
Preparar las siguientes soluciones electrolticas:
Solucin de nitrato de plata 0.0100 M
Solucin de sulfato de cobre 0.010 M
Solucin de sulfato de cobre 0.010 M
Solucin de Fe +3 0.001 M
Solucin Fe +2 0.1 M

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

71

Solucin de Mn +7 0.1 M
Solucin de Mn+2 0.01 M
Solucin saturada de cloruro de potasio

VIII TECNICA
1.- Puesta en Marcha
Conectar el instrumento a la red elctrica y preparar las medias celdas seleccionadas
2.- Trabajo preliminar
se dispone de dos vasos de 150 ml, en uno de ellos se despositan 100 ml de la solucin de sulfato
de cobre 0.0100 M y en el otro 100 ml de solucin de sulfato de zinc 0.0100 M. En el primer
vaso colocar el electrodo de cobre metlico y en el segundo el electrodo de zinc metlico.
3.- Medicin de celda
Se conectan ambas semiceldas a un potenciometro o voltmetro electrnico y se introduce un
puente salino de tal manera que se conectan externa e internamente las dos medias celdas.
Colocar el selector en unidades de voltaje y registrar la medicin del potencial generado por la
pila.
Formar y medir las celdas siguientes
A) Zn o/ Zn +2 ( 0.0100 M) // Cu +2 ( 0.0100 M) / Cuo
B)
Cu o / Cu +2 (0.0100 M) // Mn+7 (25 ml, 0.1 M), Mn+2 (5 ml, 0.01 M), H +(0.1 ml, 18
M) / Pt
c)
Zn o/ Zn +2 ( 0.0100 M) // Fe +3 (15 ml, 0.001 M), Fe +2 (15 ml, 0.01 M) /Pt
D) Pt/ Fe +3 (15 ml, 0.001 M), Fe +2 (15 ml, 0.01 M) // Mn+7 (25 ml, 0.1 M), Mn+2 (5 ml,
0.01 M), H +(0.1 ml, 18 M) / Pt

IX CALCULOS
a) Calcular los potenciales de media celda andica y catdica en funcin de la ecuacin de
Nernst
b) Determinar el potencial de celda

X CUESTIONARIO
1.- Sealar las diferencias existentes entre las celdas galvnicas y electrolticas
2.- Indicar el campo de aplicacin de las celdas electroqumicas
3.- Formular la deduccin y uso de la ecuacin de Nernst
4.- Que funcin tiene el puente salino y que es el ptencial de unin lquida
5.- Calcular el potencial terico de las siguientes celdas:
Pb/PbSO4(sat), SO4 -2(0.2M) // Sn+2 (0.150M), Sn +4 (0.250M)/ Pt
Pt/ Fe +3 (0.010 M), Fe +2(0.001 M) // Ag+ (0.035 M)/ Ag
6.- Calclese el potencial de un electrodo de cobre sumergido en un a solucin de Cu (NO3)2
0.0440 M

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Informe de laboratorio No 1
Determinacin de Potencial de Celdas Electroqumicas

Fecha

__________________

Anlisis: ______________________________________________________________
Mtodo: ______________________________________________________________
Muestra: _____________________________________________________________

A) TIPO DE CELDA A:
Representacin abreviada

Reaccin andica y catdica

Potencial de media celda anodica

Potencial de media celda Catodica

72

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Potencial de celda

B) TIPO DE CELDA B:
Representacin abreviada

Reaccin andica y catdica

Concentraciones de los electrolitos

Potencial de media celda anodica

Potencial de media celda catdica

C) TIPO DE CELDA C:
Representacin abreviada

Reaccin andica y catdica

Concentraciones de los electrolitos

Potencial de media celda anodica

73

Laboratorio de Anlisis Qumico II

74

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Potencial de media celda Catodica

Potencial de celda

D) TIPO DE CELDA D:
Representacin abreviada

Reaccin andica y catdica

Concentraciones de los electrolitos

Potencial de media celda anodica

Potencial de media celda Catodica

Potencial de celda

Tabla de resultados
Tipo de celda
A
B
C
D

E Terico

E prctico

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

75

DISCUSIN DE RESULTADOS

Apellidos y nombres: ______________________________________


Firma del alumno: ____________________

POTENCIOMETRIA DIRECTA
MEDICION DE pH
I

OBJETIVOS
Construir una celda galvnica
Explicar el funcionamiento del electrodo de membrana de vidrio para pH
Determinar experimental el pH de soluciones y de sustancias slidas

II GENERALIDADES
Para realizar esta medicin potenciomtrica es necesdario construir una celda galvnica y que
est constituida por dos semiceldas; una de referencia cuyo potencial sea conocido y constante;
la otra semicelda conformada por la solucin en estudio que contiene el ion de inters, cuya
concentracin se desea determinar. En ella se introduce un electrodo denominado indicador cuyo
potencial es consecuencia de la concentracin del analito.
El valor de potencial de pila se determina en forma experimental intercalando un voltmetro
electrnico o un potencimetro. El potencial de la media celda problema se calcula en funcin de
la siguiente relacin:
Ep = Er + Ei
Donde:
Ep = potencial de celda (valor experimental dado por el instrumento)
Er = potencia estandar (valor de potencial conocido dado en tablas)
E i = potencial de la media celda problema o indicadora)
La concentracin del analito se calcula en funcin de la ecuacin de Nernst:
E p = E o - 0.0591 log [ C ] [ D ]
n
[A] [ B ]
Donde:
E p = potencial de pila
E o = potencial normal

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

76

[ C ] [ D ] = concentraciones molares de las sustancias resultantes


[ A ] [ B ] = concentraciones molares de las sustancias reactantes
Una aplicacin importante de la potenciometra directa es determinar concentraciones de iones
metlicos y no metlicos. La determinacin de la concentracin de iones hidrgeno (H +) de una
solucin es un caso especial de estos tipos de anlsis.
III FUNDAMENTO
Se basan en determinar la diferencia de potencial elctrico que existe entre dos electrodos
sumergidos en una solucin que contiene iones hidrgeno (H +); estos electrodos estn
constituidos por un electrodo de vidrio y un electrodo de referencia de plata o de calomel, ambos
pueden formar las partes de un electrodo de combinacin y se calibran usando soluciones
amortiguadoras preparadas o adquiridas comercialmente de pH conocido con exactitud. Los
resultados de la medicin son registrados directamente en unidades de pH.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
El equipo experimental se establece de la siguiente manera:

Las caractersticas del arreglo son:

Electrodo de referencia : plata cloruro de plata


Electrodo indicador
: Electrodo de menbrana de vidrio para pH
Instrumento
: pHmetro
Lectura
: pH
Calibrado
: a pH conocido

V APARATOS

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

77

pHmetro Schott Gerate CG 820


Electrodo mltiple de vidrio
Agitador magntico
VI MATERIALES
vasos de precipitacin de 150 ml.
VII REACTIVOS
Solucin Buffer de pH 4.002.- Preparar una solucin de biftalato de potasio 0.0496 M, para
ello disolver 10.12 g KHC8H4O4 puro, previamente secado a 105 o C, en 1 L de agua
destilada.
Solucin Buffer de pH 9.22.- Preparar una solucin de brax 0.00997 M, disolver 3.800 g
del reactivo puro en 1 L de agua destilada.
Solucin de Acido clorhdrico 0.01000 M
Solucin de hidrxido de sodio 0.01000 M.
Solucin de cido actico 0.01000 M
Solucin de hidrxido de amonio 0.0100 M
VIII TECNICA
1.- Puesta en marcha
Conectar el aparato a la red elctrica y colocar los electrodos. Lavarlos adecuadamente y secarlos
con papel filtro.
2.- Calibracin del phmetro
Colocar el conmutador en la posicinde "pH". Elegir dos soluciones tampn con el valor pH
prximo al punto cero del electrodo (pH = 7.00) y la segunda solucin tampn a la distancia de
una tres unidades de pH de la anterior (pH 4.00 o pH 10.00).
Poner en equilibrio de temperatura las soluciones tampn y el electrodo. Sumergir el electrodo
en la solucin tampn con el valor de pH = 7.00, hasta que aparesca la indicacin digital al valor
de la solucin tampn.
Enjuagar el lectrodo con agua destilada y sumergirlo en la segunda solucin tampn con el valor
de pH = 4.00 o 10.00 , ajustar mediante el mando respectivo, la indicacin digital al valor de pH
de la segunda solucin. Con ello queda adaptado el instrumento a la funcin del electrodo
(calibrado); se enjuaga el electrodo con agua destilada y se seca con papel filtro.
Una vez estandarizado se apaga el instrumento y se retiran los electrodos, se lavan y secan con
papel filtro (No mover los sensores de calibracin).
3.- Medicin de pH en soluciones
Introducir los electrodos en la solucin a medir (meas), leyndose el valor de pH en la ventanilla
de indicacin tras un perodo de tiempo razonable hasta que aparesca el icono de lectura. Tomar
lectura del pH de la muestra.
4.- Medicin de pH en sustancias slidas
a) TRABAJO PREVIO
Pesar 10.0000 g de muestra, trirurar en un mortero de porcelana o licuar la muestra. Diluir con
100.00 ml de agua destilada, agitar, decantar o filtrar.
b) CALIBRADO
Estandarizar el instrumento a pH conocido (pH 7.00)

Laboratorio de Anlisis Qumico II

78

INGENIERA BIOTECNOLGICA

E) Medicin
En la solucin decantada o filtrada intoducir los electrodos con ucho cuidado a una altura
prudencial del fondo del vaso y medir su pH.
IX CALCULOS
Calcular el pH de las soluciones problemas con la finalidad de determinar su valor terico
empleando la siguiente relacin:
PH = - log [H +]

CUESTIONARIO
1.- Explique el funcionamiento del electrodo de vidrio para pH
2.- Seale razones porque se calibra un pHmetro antes de medir el pH de la solucin
3.- Cul es el fundamento de la determinacin de pH en sustancias slidas
4.- Que es lo mide el pHmetro en una solucin alcalina y como mide el pH de la solucin
5.- Como define la potenciometra directa y cual es el mbito de su aplicacin
6.- Se tiene una celda del siguiente tipo: ECS // H + ( a= x) /electrodo de vidrio, esta celda
tiene un potencial de 0.2094 V cuando en el compartimiento derecho es un amortiguador de pH
4.006. Cuando el amortiguador se reemplaz con soluciones desconocidas sus potenciales
fueron: A) -0.3011 V b) 0.1163 V. Calcular el pH de cada solucin problema.
7.- A que se denomina solucin buffer o amortiguadora?
8.- La siguiente celda ECS//Mg A2 (a = 9.62 x 10 -3/ electrodo de membrana de vidrio de Mg
tiene un potencial de 0.367 v. Cuando la solucin de magnesio de actividad conocida se
reemplazo con una solucin problema, el potencial era 0.544 V, cules el pMg de la solucin
problema

Informe de laboratorio No 2
Determinacin de pH
Fecha _____________________
Anlisis: _______________________________________________________________________
Mtodo: _______________________________________________________________________
TABLA DE RESULTADOS DE SOLUCIONES ACUOSAS DE LABORATORIO
muestra
Buffer biftalato de
potasio
Acido clorhdrico
Acido actico

Concentracin molar
0.00496
0.0100
0.0100

pH terico
4.002

pH practico

Laboratorio de Anlisis Qumico II

79

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Buffer Brax
Hidrxido de sodio
Hidrxido de amonio

0.00997
0.0100
0.0100

9.220

CALCULO DE pH TEORICOS

Acido Clorhdrico

Acido Actico

Hidrxido de sodio

Hidrxido de amonio

TABLA DE RESULTADOS DE MUESTRAS NATURALES y INDUSTRIALES


MUESTRA
Buffer Biftalato de potasio
Coca cola
Vinagre
Zumo de naranja
Orina
Yogurt
Agua potable
Frugo
Agua de mesa san antonio

pH terico
4.002

pH practico

Laboratorio de Anlisis Qumico II

80

INGENIERA BIOTECNOLGICA

TABLA DE RESULTADOS DE MUESTRAS SLIDAS


MUESTRA
Buffer
Galleta de soda
Harina

PH terico
7.00

PH practico

DISCUSIN DE RESULTADOS

Apellidos y Nombres:

_____________________________________________

Firma del alumno: ____________________

TITULACIONES POTENCIOMETRICAS POR NEUTRALIZACION


CURVAS DE TITULACION
I

OBJETIVOS
Preparar soluciones valoradas cidas y bsicas.
graficar curvas de titulacin cido- base
Determinar puntos de equivalencia.

II GENERALIDADES
Las titulaciones son otra de las aplicaciones de la potenciometra dentro del campo del anlisis y
comprende las valoraciones de neutralizacin, precipitacin, complexometra y por
xidoreduccin.
Una valoracin potenciomtrica se realiza midiendo el potencial de una pila formada por el
electrodo de referencia , de potencial conocido, y un electrodo indicador cuyo potencial es
funcin de la concentracin del in problema. Esta medicin se efecta durante el desarrollo de
una valoracin y que es funcin del valorante agregado.

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

81

El objetivo principal de este procedimiento es la localizacin precisa del punto de equivalencia y


luego determinar la concentracin del elemento de inters o analito.
Las caractersticas de una titulacin potenciomtrica son:
a) La titulacin se realiza siempre en exceso.
b) No se emplean reactivos indicadores.
c) Casi siempre se conoce la cantidad del volumen del titulante
d) Al inicio de la valoracin se agrega cantidades relativamente grandes del titulante
e) En las cercanas del punto de equivalencia el volumen agregado es pequeo
f) Pasado el punto de equivalencia el volumen agregado es similar al inicio de la titulacin.
Las ventajas que presentan estos tipos de titulaciones son:
a)
b)
c)
d)

Se usan en soluciones coloreadas o turbias.


Se emplean cuando no se disponen de indicadores apropiados.
Se aplica a valoraciones en medio acuosas y no acuosas.
El resultado depende del instrumento en uso.

Para valoraciones cido - base se debe tener en cuenta que el punto de equivalencia va ha
depender del tipo de reactivos reaccionantes y de sus concentraciones. El pH en el punto de
equivalencia puede ser igual o diferente de 7.00.
Son mtodos que estn basados en la siguiente reaccin:
H+

OH -

-------------

H2 0

III FUNDAMENTO
Son mtodos basados en el cambio gradual de pH establecido entre dos electrodos sumergidos en
una solucin donde se encuentra el componente activo y a la que se adiciona otra solucin que
presenta concentracin conocida que al combinarse con la primera va variando su concentracin.
Este mtodo consiste en medir y registrar la variacin de pH que experimenta la celda galvnica
formada por dos semiceldas, una de referencia y otra indicadora formada por un electrodo de
vidrio sensible a los iones hidrgeno , con la finalidad de localizar con precisin el punto de
equivalencia y determinar la concentracin del componente activo.

IV ARREGLO EXPERIMENTAL
El equipo experimental se establece de la siguiente manera:

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

82

Las caractersticas del arreglo son:

Electrodo de referencia : plata cloruro de plata


Electrodo indicador
: Electrodo de menbrana de vidrio para pH
Instrumento
: pHmetro
Lectura
: pH
Calibrado
: a pH conocido

V APARATOS
pHmetro Schott Gerate CG 820
Electrodo mltiple de vidrio
Agitador magntico
VI MATERIALES
Buretas de 25 y 50 ml.
vasos de precipitacin de 250 ml.
VII REACTIVOS
Solucin de Acido clorhdrico 0.1000 N.
Solucin de hidrxido de sodio 0.1000 N.
Solucin Buffer de pH 4 y 9.
Carbonato de sodio y biftalato de potasio en calidad reactivo analtico.
VIII TECNICA
1.- Trabajo preliminar
Conectar el aparato a la red elctrica y colocar los electrodos. Lavarlos adecuadamente y secarlos
con papel filtro.

2.- Calibrado del Instrumento


En un vaso limpio colocar unos 100 mililitros de una solucin buffer de pH conocido (De
acuerdo al tipo de solucin por titular), sumergir los electrodos en esta solucin, ajustar la
temperatura del aparato, colocar el conmutador en la posicin de funcin pH y ajustar con la
perilla al pH del buffer.
Una vez standarizado se apaga el instrumento y se retiran los electrodos, se lavan y secan con
papel filtro (No mover las perillas de calibracin).
3.- Titulacin

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

83

En un vaso completamente limpio y seco depositar 100 miligramos de carbonato de sodio, en


otro colocar 200 miligramos de biftalato de potasio y en otro vaso colocar 10.0 ml. de la solucin
de cido clorhdrico 0.100 N. Cada solucin problema diluirla a un volumen aproximado de 100
ml.
Coger el primer vaso e introducir la barra de agitacin, llevar y centrar el vaso sobre el agitador.
Introducir poco a poco el electrodo combinado de vidrio a prudente altura del fondo del vaso y
de la barra de agitacin. La bureta debe contener la solucin (cido clorhdrico 0.100N. en el
primer caso, hidrxido de sodio en el segundo y tercer caso.)
Armar el equipo de acuerdo al arreglo experimental y pasar la perilla a la posicin de pH y mida
el valor de pH a cero mililitros del titulante. Aadir progresivamente solucin titulante a
incrementos de 1.0 ml. haciendo lecturas de pH despus de cada adicin. Continuar la valoracin
hasta lograr constancia de lecturas de pH.
Una vez terminada la titulacin apague el aparato, retire los electrodos y desarme el equipo.
IX CALCULOS
Los datos experimentales obtenidos tabularlos en forma ordenada de acuerdo al siguiente cuadro:
Para el primer caso de titulacin (100 mg. Carbonato de sodio con Acido clorhdrico
0.100N. )

Para el segundo caso de titulacin (200 mg. Biftalato de potasio con hidrxido de sodio
0.100N)

Para el tercer caso ( 10.0 ml. de Solucin de cido clorhdrico con hidrxido de sodio
0.100N).

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

84

1. Mtodo Grfico
En cada uno de los casos graficar los datos obtenidos de pH frente al volumen de la solucin
titulante. La curva obtenida se denomina curva de titulacin potenciomtrica y en ella se
encuentra su punto de equivalencia mediante el ploteo de datos. En base a la curva obtenida
determinar para cada caso lo siguiente:
A)
B)
C)

pH en el punto de equivalencia
Volumen consumido de la solucin valorante
Seleccionar el indicador ms adecuado para cada tipo de titulacin.

X CUESTIONARIO
1.- Que es una curva de titulacin potenciomtrica
2.- Cul es el uso de una curva de titulacin
3.- Que ventajas y desventaja presenta una titulacin potenciomtrica
4.- Que caractersticas presenta una curva
5.- Cul es el objeto de una titulacin potenciomtrica
6.- Seale diferencias entre una valoracin potenciomtrica y una valoracin volumtrica de
neutralizacin.

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

85

Informe de laboratorio No11


Determinacin de Curvas de titulacin potenciomtrica
Fecha _____________________
Anlisis: ________________________________________________________________________
Mtodo: ________________________________________________________________________

TITULACIONES:
1.- Titulacin de 100 miligramos de carbonato de sodio con cido clorhdrico 0.100 N
DATOS:

Peso de muestra
: ------------
Concentracin del titulante : ------------
Factor del HCl
: ------------TABULACIN DE DATOS:
Volumen ml HCl PH
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
11.0
12.0
13.0
14.0
15.0
16.0
17.0
18.0
19.0
20.0
21.0
22.0
23.0
24.0
25.0

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Elaboracin de la curva de titulacin:

Sealar en la curva graficada:


A) pH en el punto de equivalencia
= -------------------B) Volumen requerido de la solucin valorante = -------------------C) Seleccionar el indicador adecuado
= ------------------2.- Titulacin de 200 miligramos de biftalato de potasio con hidrxido de sodio 0.100 N
DATOS :

Peso de muestra
= ----------------
Concentracin titulante = ---------------
Factor del NaOH
= ---------------Tabulacin de datos:
Volumen ml NaOH
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
11.0
12.0
13.0
14.0

pH

86

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Elaboracin de la Curva de titulacin:

Sealar en la curva graficada:


A) pH en el punto de equivalencia
= ---------------B) Volumen requerido de NaOH
= ---------------A) Seleccionar el indicador adecuado = --------------3.- Titulacin de 10.0 ml de solucin de HCl 0.100N con hidrxido de sodio 0.100N
DATOS:

Volumen de HCl 0.100 N = -----------


Concentracin titulante
=-----------
Factor del NaOH
= ----------TABULACIN DE DATOS:
Volumen en ml titulantePH
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
11.0
12.0
13.0

87

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

14.0
Elaboracin de la curva de titulacin:

Sealar en la curva graficada:


A) pH en el punto de equivalencia
B) Volumen requerido de NaOH
C) Seleccionar el indicador adecuado

= --------------= --------------= ----------------

DISCUSIN DE RESULTADOS

Apellidos y monbres:

_______________________________________________

Firma del alumno: ____________________


CUESTIONARIO

TITULACIONES POTENCIOMETRICAS POR NEUTRALIZACION


ANALISIS DE BICARBONATOS

88

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

89

I OBJETIVOS
Preparar una solucin valorada cida
Determinar el grado de pureza que presenta una bebida mineral en contenido de bicarbonatos
II GENERALIDADES
Los mtodos potenciomtricos son aplicables a las titulaciones por neutralizacin , es decir,
cuando reaccionan cidos y bases o viceversa, dando como producto de la reaccin agua, de
acuerdo a la siguiente reaccin :
H+
+ OH- ---------- H2O
Una aplicacin en este campo de las valoraciones potenciomtricas cido - base , es la
determinacin del bicarbonato de sodio en un producto farmacutico, como es la ampolla de
bicarbonato de sodio, control del contenido de bicarbonatos en aguas minerales,etc.
III FUNDAMENTO
La titulacin potencimetrica de bicarbonatos se realiza con un cido fuerte, como es el cido
clorhdrico, que acta como solucin valorante. La reaccin de titulacin entre el analito
bicarbonato y la solucin titulante es la siguiente :
HCO3analito

+ H + ----------- CO2 + H2O


titulante

productos

Para realizar esta medicin en forma experimental es necesario construir una celda galvnica
cuya solucin problema est constituida por la solucin de bicarbonato de sodio, y introduciendo
en ella los electrodos de referencia y de menbrana de vidrio para pH. Se intercala en los
conductores externos un dispositivo de medicin como un pHmetro, la operacin de titulacin se
realiza a incrementos conocidos del titulante tomando lecturas de pH a cada volumen agregado
de la solucin cida. Se determina el punto de equivalencia y luego se calcula la concentracin
del analito.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL

las caractersticas del arreglo experimental son :


Electrodos
: Electrodo combinado de vidrio - plata cloruro de plata
Instrumento
: pHmetro
Lectura
: Unidades de pH

Laboratorio de Anlisis Qumico II

Calibrado

INGENIERA BIOTECNOLGICA

90

pH 9.00

V APARATOS
pHmetro digital Schott gerate
Electrodo combinado de vidrio
Equipo de agitacin magntica.
VI MATERIALES
Bureta por 25 ml.
vasos de precipitacin de 150 y 250 ml.
VII REACTIVOS
Solucin Buffer de pH 9.00
Solucin valorada de cido clorhdrico 0.1000 M.
VIII TECNICA
1.- Trabajo Preliminar
Medir por pipeta exactamente 1.00 mililitro de la solucin de la ampolla de bicarbonato de sodio,
y diluirla adecuadamente con agua destilada en un vaso de 250 ml.
2.- Calibrado del Instrumento
Standarizar el pHmetro sumergiendo los electrodos en la solucin buffer de pH 9.00, ajustar la
temperatura del instrumento a la de solucin y el pH del instrumento a la de la solucin buffer.
Apagar el aparato, retirar, enjuagar los electrodos y secarlos con papel filtro.
3.- Titulacin
Armar el equipo de acuerdo al arreglo experimental y titular potencimetricamente con la
solucin de cido clorhdrico 0.1000 M. aadiendo la solucin titulante a incrementos de 1.0 ml.
hasta completar un volumen total de 18.0 ml, A cada incremento del titulante se toma las lecturas
de pH.
IX CALCULOS
1.- Tabulacin de Datos
Los datos experimentales obtenidos se tabulan en forma ordenada y clara.
2.- Mtodo grfico de clculo del punto de equivalencia
Levantar una curva de titulacin en funcin de los parmetros de pH / V.

3.- Mtodo Analtico de la primera derivada para determinar el punto de equivalencia


Calcular los valores de primera derivada que corresponde a cada incremento de la solucin
titulante teniendo en cuenta los incrementos de pH e incrementos de volmenes del cido,

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Valor Mximo de pH / V
= ........................
Intervalo de volumen
= ........................
Valor anterior al valor mximo = .......................
Valor posterior al valor mximo = .......................
Por interpolacin de los valores de volmenes y de primera derivada se determina el volumen
requerido de la solucin titulante en la reaccin con el bicarbonato.
4.- Clculo de la concentracin de los bicarbonatos en partes por milln
mg/ L HCO3- = ml gastados x Meq / ml x 61 mg/ meq
x 1000 ml
ml. de solucin problema x 1 L

X CUESTIONARIO
1.- En que consiste el mtodo de la primera derivada
2.- Calcule el error relativo del anlisis de bicarbonatos
3.- Porqu no utiliza algn indicador en esta titulacin
4.- Como determina el punto de equivalencia por medio del mtodo grfico de la primera
derivada
5.- De los resultados obtenidos cul cree que es un valor que se puede descartar

91

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Informe de laboratorio No 12
Determinacin de bicarbonatos
Fecha ___________________
Anlisis:
_________________________________________________________________________
Mtodo:
_________________________________________________________________________
Muestra:
_________________________________________________________________________
Contenido declarado ________________________________________
DATOS:

Volumen de la muestra
= -----------Concentracin del titulante = ------------

Tabulacin de datos experimentales


Volumen ml del titulante
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
11.0
12.0
13.0
14.0
15.0
16.0
17.0
18.0

pH

Clculos
1.- Mtodo grfico (Primera derivada)

pH / v

92

Laboratorio de Anlisis Qumico II

93

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Mtodo Analtico (primera derivada)

Valor mayor de Pera derivada


= ---------------Intervalo de volumen
= ---------------era
Valor anterior al mximo de P derivada = ---------------Valor posterior al mximo
= -----------------

Clculo del volumen del titulante


Vx =
Clculo de ppm de bicarbonatos

TABLA DE RESULTADOS DEL ANALISIS


No Muestra

ppm HCO3 -

% NaHCO3

1
2
3
4
5
6
7
DISCUSIN DE RESULTADOS

APELLIDOS Y NOMBRES_________________________________________
Firma: ____________________

Laboratorio de Anlisis Qumico II

94

INGENIERA BIOTECNOLGICA

CUESTIONARIO

TITULACIONES POTENCIOMETRICAS POR NEUTRALIZACIN


ANALISIS DE VINAGRE
I OBJETIVOS
Preparar una solucin valorada de hidrxido de sodio
Obtener una curva de trabajo
Determinar el contenido de cido tartrico en vino
II GENERALIDADES
los mtodos de titulacin por neutralizacin permiten analizar sustancias que presentan un
carcter cido mediante titulacin potenciomtrica con una base fuerte. Uno de estos ejemplos,
lo constituye la determinacin analtica de la cidez del vino.
La palabra vino procede de la palabra latina VINUM. El vino es una bebida obtenida de la uva
mediante la fermentacin alcohlica de su mosto o zumo. La fermentacin convierte los azcares
(glucosa o fructuosa) del mosto en alcohol etlico y dixido de carbono, que permanece en
disolucin del vino final, por medio de la accin de las levaduras del gnero de la sacharomyces
cerevisia.
Se da el nombre de vino nicamente al lquido resultante de la fermentacin alcohlica total o
parcial, del zumo de uva. El contenido de alcohol vara entre 7-14% de acuerdo al tipo de uva.
Los cidos en el vino tienen una capacidad de conservante y uno de ellos es el cido tartrico que
reacciona con el potasio de la uva dando lugar a tartaratos potsicos, otros acidos son el mlicos,
actico, succnico, lctico.
La mayor parte de los vinos tienen una acidez total, como cido tartrico, de 0.3-0.55%.
III Fundamento
El mtodo consiste en titular el cido tartrico con una solucin de concentracin conocida de
hidrxido de sodio aadido a incrementos conocidos. Se mide los cambios de pH que
experimenta las sustancias reaccionantes en el interior de la celda galvnica, para luego localizar
el punto de equivalencia y calcular mediante el mtodo la acidez del vino.
La reaccin qumica se realiza de acuerdo a la siguiente expresin:

C4O6H6
analito

2 NaOH
titulante

-------------

Na2C4O6H4

productos

IV ARREGLO EXPERIMENTAL
Las caractersticas del sistema son:
Electrodos
Instrumento
Lectura

: Electrodo combinado de vidrio - plata cloruro de plata


: pHmetro schott gerate C- G 820
: Unidades de pH

H2 O

Laboratorio de Anlisis Qumico II

Calibrado

INGENIERA BIOTECNOLGICA

95

pH 4.00

V APARATOS
pHmetro Schott Gerate C-G 820
electrodo combinado de vidrio para pH - referencia
Agitador magntico.
VI MATERIALES
Bureta por 25 ml.
Vasos de precipitacin de 150 ml.
VII REACTIVOS
Solucin de hidrxido de sodio 0.1000N.
Solucin Buffer de pH 4.00
Biftalato de potasio en reactivo calidad analtica.
VIII TECNICA
1.- Trabajo Preliminar
Medir 25.0 mililitro de la muestra vino y diluirla con agua destilada hasta obtener un volumen
adecuado para que se sumergan los electrodos a una altura prudencial del fondo del vaso.
2.- Calibrado
En un vaso limpio colocar unos 100 ml. de la solucin buffer de pH 4.00 y sumergir el
electrodo combinado de vidrio. Realizar los ajustes de calibracin con las perillas de temperatura

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

96

y de incremento de pH. Retirar los electrodos cuando se apaga el instrumento, lavarlos con agua
destilada y secarlos con papel filtro.

3.- Titulacin
Colocar en la solucin problema la barra magntica y centrar el vaso de tal manera que gire la
barra sin provocar molestias. Introducir los electrodos a una altura adecuada del fondo del vaso y
colocar la perilla de encendido en la posicin de pH y mida el valor de pH a cero mililitro del
titulante. Agregar desde una Bureta la solucin de hidrxido de sodio a incremento de 1.0 ml.,
anotando los valores correspondientes de pH, hasta completar un volumen de 15.0 ml.
IX CALCULOS
1.- Tabulacin de datos
Los datos obtenidos en la determinacin analtica ordenarlos adecuadamente.
2.- Localizacin del punto de equivalencia por el Mtodo Grfico
El punto de equivalencia de la valoracin se localiza mediante el mtodo grfico de la primera
derivada. Colocar los resultados obtenidos en papel milimetrado, trazando dos coordenadas
cartesianas y ubicando en el eje de la ordenada los valores de primera derivada pH / V, y
en el eje de la abcisa los volmenes de la solucin de hidrxido de sodio.

3.- determinacin del punto de equivalencia por el Mtodo analtico


Calcular los valores de primera derivada a cada adicin del reactivo titulante y ubicar en ella los
siguientes datos :
Valor mximo de pH / V
= --------------Intervalo de Volumen
= --------------Valor anterior al valor mximo = --------------Valor posterior al valor mximo = --------------Calcular mediante interpolacin el volumen requerido de la solucin titulante.

Vx =
4.- Clculo de la concentracin en porcentaje de cido tartrico

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Aplicar la relacin general de clculo de la concentracin:


% tartrico = ml. gastados x Factor x 0.1Meq / ml. x 0.075045 g Ac / meq x 100%
ml. de muestra

97

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

98

Informe de laboratorio No 13
Determinacin de la Acidez del vino

Fecha ____________________________
Anlisis: ________________________________________________________________________
Mtodo: ________________________________________________________________________
Muestra: _______________________________________________________________________
DATOS:

Volumen de la muestra
= -----------Concentracin del titulante = ------------

Tabulacin de datos experimentales


Volumen ml del titulante
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
11.0
12.0
13.0
14.0
15.0
16.0
17.0
18.0

pH

Clculos
1.- Mtodo grfico (Primera derivada)

pH / v

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

2.- Mtodo Analtico (primera derivada)

Valor mayor de Pera derivada


= ---------------Intervalo de volumen
= ---------------Valor anterior al mximo de Pera derivada = ---------------Valor posterior al mximo
= -----------------

Clculo del volumen del titulante

Vx =

Clculo del % de la cidez

% Acidez =

TABLA DE RESULTADOS DEL ANALISIS


No Muestra
1
2
3
4
5
6
7
DISCUSIN DE RESULTADOS

% cido tartrico

99

Laboratorio de Anlisis Qumico II

100

INGENIERA BIOTECNOLGICA

APELLIDOS Y NOMBRES ______________________________________


Firma: ____________________
CUESTIONARIO
TITULACIONES POTENCIOMETRICAS POR PRECIPITACIN
ANALISIS DE CLORUROS
I

OBJETIVOS
Preparar una solucin valorada de nitrato de plata
Elaborar una curva de titulacin potenciomtrica por precipitacin.
Analizar y discutir el contenido de cloruros presentes en una muestra de orina

II GENERALIDADES
Este tipo de titulaciones estn orientadas a determinar haluros en una muestra, siendo su reaccin
general la siguiente:
XAnalito

Ag +
titulante

==========

Ag X
Producto insoluble

Donde:
X - = Cl- , Br- , I- ( haluros )
Para las volumetras de precipitacin el electrodo indicador generalmente es del metal de quien
deriva el catin reaccionante. En ocasiones, no obstante, se emplea un sistema electrdico
indicador que responde directamente al anin, las valoraciones potenciomtricas de precipitacin
se caracterizan por la formacin en uno de sus productos de la reaccin qumica de una sal
insoluble o poco soluble.
La orina contiene en su composicin sustancias orgnicas e inorgnicas, su composicin vara
ampliamente de acuerdo a los alimentos ingeridos: Los principales componentes que presentan
son:
Sustancias orgnicas
Son productos finales del metabolismo de las protenas. Entre ellos se tiene urea, cido rico y
creatinina.
a)

Sustancias inorgnicas
Contiene agua, sodio, potasio, fosfato, sulfatos, bicarbonatos, calcio, magnesio, cloruros,
amonaco. etc. Su pH promedio es 6 siendo su rango de 4.7 - 8.0 y su contenido en cloruros se
encuentra en un intervalo de 10 a 15 gramos por mil.
b)

III FUNDAMENTO
Consiste en hacer reaccionar cuantitativamente al anin cloruro con el reactivo valorante nitrato
de plata, formando un producto insoluble de cloruro de plata. La celda galvnica dispone de un
electrodo selectivo a uno de los iones que forma parte de la sustancia insoluble, para que
evidencie con ntidez el punto de equivalencia, mediante el mtodo de la segunda derivada.

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

101

Durante el proceso de la valoracin se experimenta la variacin de la fem de la celda galvnica,


debido a que el in activo va variando su concentracin por formacin del producto insoluble.
Localizado el punto de equivalencia se calcula la concentracin de cloruros presentes en la orina
y expresando el resultado del anlisis en gramos por mil ( o / oo ).
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
El esquema experimental presenta el siguiente arreglo:

Las caractersticas del sistema son los siguientes:

Electrodo de referencia
Electrodo indicador
Puente salino
Instrumento
Lectura
Calibrado
Celda

:
:
:
:
:
:
:

Calomel saturado (ECS).


Plata metlica
Nitrato de potasio saturado.
potencimetro digital Schott gerate CG 820
Escala de milivoltios
No indispensable

Hg / Hg2 Cl2(s) , K Cl (s)

// puente // Cl- ( XM ), Ag. Cl / Ag.

Electrodo de referencia
V APARATOS
potencimetro digital Schott gerate CG 820
Electrodo de calomel saturado
Electrodo de plata metlica( electrodo de segundo orden )
Agitador magntico.

VI MATERIALES
Vasos de precipitacin de 150 ml. y 250 ml.

Electrodo indicador

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

102

Bureta por 25 ml.


Puente de vidrio en forma de U
VII REACTIVOS
Nitrato de potasio 1M.
Nitrato de plata 0.0282 N.
VIII TECNICA
1.- Trabajo preliminar
Medir exactamente 1.0 mililitro de muestra problema y diluir con agua destilada hasta
aproximadamente 100 ml. en un vaso de 250 ml.

2.- Titulacin
Armar el equipo de acuerdo al esquema experimental y titular potenciomtricamente con
solucin valorada de nitrato de plata 0.0282N. a incremento de 1.0 ml. Despus de La adicin de
cada volumen efectuar la lectura en milivoltios, titular hasta completar 15.0 ml.
IX CALCULOS
1.- Tabulacin de datos
Los datos obtenidos en la valoracin tabularlos adecuadamente.
2.- Localizacin del punto de equivalencia por el mtodo grfico

3.- Determinacin del punto de equivalencia por el mtodo analtico de la segunda


derivada
4.- Clculo de la concentracin de cloruros expresada en gramos por mil (o /oo) de cloruro
de sodio
o / oo NaCl = ml. gastados x Factor x 0.0282 meq/ ml x 0.05845 g./ meq x 1000

Laboratorio de Anlisis Qumico II

103

INGENIERA BIOTECNOLGICA

ml de muestra

Informe de laboratorio No 14
Determinacin de Cloruros

Fecha __________________________
Anlisis:
__________________________________________________________________________
Mtodo:
___________________________________________________________________________
Muestra:
__________________________________________________________________________
DATOS :

Volumen de la muestra
= -----------Concentracin del titulante = ------------

Tabulacin de datos experimentales


Volumen ml del titulante
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
11.0
12.0
13.0
14.0

mv

mv / v

2mv / v2

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

15.0
16.0
17.0
18.0

Clculos
1.- Mtodo grfico (primera derivada)

2.- Mtodo Analtico (primera derivada)


Valor mayor
Intervalo de volumen
Valor anterior al mximo
Valor posterior al mximo

= ---------------= ---------------= ---------------= -----------------

Clculo del volumen del titulante


Vx =
Clculo de la concentracin de cloruro de sodio expresada en gramos por mil
Na Cl =
TABLA DE RESULTADOS DEL ANALISIS
No Muestra
1
2
3
4
5
6
7

Na Cl

DISCUSIN DE RESULTADOS

104

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

105

APELLIDOS Y NOMBRES_________________________________________
Firma: ____________________
CUESTIONARIO

TITULACIONES POTENCIOMETRICAS POR OXIDO REDUCCION


DETERMINACION DE HIERRO
I OBJETIVOS

Preparar una solucin valorada de permanganato de potasio


Elaborar una curva de titulacin
Analizar y discutir el contenido de hierro en una muestra

II GENERALIDADES
Toda reaccin de oxidoreduccin da lugar a la ganancia y prdida de electrones que indica la
transferencia de los mismos. En potenciometra esta transferencia es medida desde el inicio hasta
el final de la valoracin mediante un voltmetro electrnico.
Los mtodos potenciomtricos por xido reduccin son apropiados para controlar la marcha de
una titulacin por oxidacin y reduccin. Cuando se desea determinar potenciomtricamente un
in metlico, por ejemplo, hierro y no se dispone de un indicador adecuado para determinarlo
directamente, se hace uso de su capacidad para oxidarse o reducirse frente a un reactivo titulante
y se hace uso tambin de un electrodo indicador inerte capaz de seguir paso a paso el cambio de
estado de oxidacin, es decir, capaz de relacionar las concentraciones de los dos estados de
oxidacin, para luego determinar el punto de equialencia.
III FUNDAMENTO
Consiste en titular potenciomtricamente una solucin de hierro (II) con una solucin valorada
de permanganato de potasio en medio cido o de sulfato de cerio (IV), para ello se construye una
celda donde el potencial del electrodo indicador cambia gradualmente y proporcionalmente al
logaritmo de las concentraciones de dos estados de oxidacin ( Fe +2/ Fe +3) que pueden ser del

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

106

componente activo o de la solucin titulante, cuando el sistema reaccionante se acerca al punto


de equivalencia el cambio de potencial nuevamente se hace gradual y no muy significativo.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
El esquema presenta el siguiente arreglo:

Componentes del arreglo:


a) Electrodo de Referencia
B) Electrodo indicador
C) Instrumento
D) Lectura
E) Calibrado
F) Celda

: ECS
: Platino brillante
: potenciometro
: milivoltios
: No indispensable
:

Hg/ Hg2 Cl2, KCl( S) // M n +1 ( yM ) / M n ( XM) / Pt


Reaccin de oxidacin:
2 Hgo + 2 Cl -

------- Hg2 Cl2 + 2 e

Reaccin de reduccin:
M n + 1 + e ----------- M n

APARATOS
Phmetro digital Shoott Gerate CG 820
Electrodo de platino brillante
Electrodo de calomel saturado

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

107

VI MATERIALES
Vaso de precipitacin
Pipeta de 10 ml
VII REACTIVOS
Acido sulfrico concentrado
Solucin valorada de permanganato de Potasio 0.100N

III TECNICA
1.- Trabajo preliminar
Prepare y valore una solucin de permanganato de potasio 0.100N o de sulfato crico ( IV).
Pesar 8.0000 gramos de muestra y calcinar a 550 oc hasta obtener las cenizas correspondientes,
disolver las cenizas con 5 ml cido clorhdrico 6 M, calentando suavemente. Se aade 20 ml de
agua destilada, se calienta y se filtra si es necesario.
Los filtrados se tratan con agua de bromo y se hierve para eliminar el exceso de bromo. Se aade
hidrxido de amonio 1:1 hasta percibir un fuerte olor amoniacal, se hierve la solucin para
eliminar el exceso de hidrxido, filtrar empleando un papel de filtro adecuado y se lava con agua
caliente,
El precipitado se regresa al vaso donde se efectu la precipitacin con chorro de piseta y se
disuelve con cido clorhdrico 1:1 en caliente; la solucin se diluye con 20 ml de agua destilada
y presenta una coloracin amarillenta.
A la solucin cida de hierro se le aade unas granallas de zinc y se lleva a ebullicin por el
tiempo que sea necesario para conseguir la completa decoloracin de la solucin problema.
Conseguido esto, se retira el vaso de la fuente de calor.
La solucin decolorada se filtra rpidamente por algodn y se lava con agua caliente,
recibindose los filtrados en un vaso de precipitados. Agregar 4 ml de cido sulfrico
concentrado, y calentar.
2.- Titulacin
Arme el equipo de acuerdo al esquema experimental. Encender el instrumento y pasar el selector
a la funcin de milivoltios, valorar con solucin valorada de permanganato de potasio 0.100N a
incrementos de ml , haciendo las lecturas de voltajes despues de cada adicin hasta obtener
valores constantes. Titular hasta un volumen de 8 ml.
IX CALCULOS
1.- Tabulacin de datos
2.- Localizacin del punto de equivalencia por el mtodo grfico
El punto de equivalencia en la curva de titulacin se localiza por el mtodo de la primera
derivada.
3.- determinacin del punto de equivalencia por el mtodo analtico de la primera derivada
Calcular el volumen reaccionante en funcin de los datos siguientes:

Valor mximo de primera derivada = -----------------Intervalo de volumen


= ------------------Valor anterior al mximo
= ------------------Valor posterior al mximo
= -------------------

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Calcular mediante interpolacin el volumen Vx:


Vx =
4.- Clculo de la concentracin de hierro en porcentaje

% = ml gastados x 0.100 meq/ ml x 0.05585 g / meq


Peso de muestra (g )

x 100 %

Informe de laboratorio No 15
Determinacin de Hierro
Fecha _____________________
Anlisis:
__________________________________________________________________________
Mtodo:
__________________________________________________________________________
Muestra:
__________________________________________________________________________

DATOS:

108

Laboratorio de Anlisis Qumico II

109

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Peso de la muestra
= -----------Concentracin del titulante = ------------

Tabulacin de datos experimentales


Volumen ml del titulante
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0

mv

mv / v

11.0
12.0
13.0
14.0
15.0
Clculos :
1.- Mtodo grfico (segunda derivada)

Mtodo Analtico (segunda derivada )


Valor mayor de P era derivada
= --------------- Intervalo de volumen
= ---------------era
Valor anterior al mximo de P derivada = --------------- Valor posterior al mximo
= ----------------Clculo del volumen del titulante

Vx =

2 mv / v2

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

110

Clculo de la concentracin de hierro expresada como porcentaje


% =

TABLA DE RESULTADOS DEL ANALISIS


No Muestra
1
2
3
4
5
6
7

% Fe

mg FeSO4

DISCUSIN DE RESULTADOS

Apellidos y nombres : ____________________________


Firma ____________________

CONDUCTIMETRIA
Generalidades
Las soluciones en general poseen propiedades elctricas que son susceptiblas a ser medidas.
Estas propiedades dependen del nmero y naturaleza de las partculas que estn en la solucin y
adems, de los tipos de enlaces que se presenten en las partculas del soluto.
La propiedad ellctrica de las sustancias o soluciones sujeta a ser medidas es sui poder de
conduccin elctrica que presentan. Los responsables de la conduccin elctrica son los iones

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

111

(cationes y aniones), es decir, hay transporte de materia acompaada de reacciones qumicas, en


la conduccin de la corriente elctrica, las soluciones o electrlitos se comportan como si estas
fueran conductoras metlicos, por tanto cumplen la ley de Ohm, los electrlitos tienen o
presentan resistencia al paso de la corriente elctrica.
La conductividad elctrica de un electrlito en solucin acuosa, aumenta a medida que la
solucin es ms diluida, sin embargo, a soluciones muy grandes, deja de comportarse como
conductor de la electricidad.
En conductimetra cuando se trata de soluciones , se acostumbra expresar la habilidad de
transportar la corriente mediante el trmino de Conductancia que viene a ser la reciproca de
la resistencia y se le representa por la letra L:
L = 1 = 1 = -1
R

FUNDAMENTO
Son mtodos de anlisis electromtricos basados en la medicin de la habilidad de una solucin
para transportar la corriente elctrica por medio de aniones y cationes, al someterse bajo la
influencia de un campo elctrico establecido.
La conduccin de la corriente elctrica en los electrlitos es similar a la de los conductores
metlicos, especialmente a voltajes muy elevados o frecuencias muy altas ( 60 hasta 4000 cps).
El conductimetro LBR 40 consiste en un puente Wheatstone que opera en 40 4000 HZ, este
puente consiste de cuatro resistencia, el punto de equilibrio queda establecido mediante un
indicador cero en el instrumento. El resultado se expresa en resistencia ( ohms) o el valor
recprocode esta resistencia se conoce como conductividad y se mide en Siemens ( mhos).
Clasificacin
La aplicacin que presenta la conductimetra son :
1.- Conductimetra directa
Son mtodos basados en la medicin directa de la conductancia
2.- Titulaciones conductimtricas
Basadas en la medicin de la conductancia de una solucin a travs de una valoracin con la
finalidad de detectar su punto final y la concentracin del componente activo.

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

112

CONDUCTIMETRA DIRECTA
DETERMINACIN DE LA CONSTANTE DE CELDA
I OBJETIVOS
Operar adecuadamente el conductimetro
Determinar la constante de celda del tipo inmersin y tipo vasija
II GENERALIDADES
La conductividad de una solucin es una medida de su facilidad para transportar corriente
elctrica, es decir, flujo de electrones.
Desde el punto de vista conductimtrico toma el nombre de conductancia y es la inversa de la
resistencia. Los electrones son transportados por los iones, los psitivos emigran a traves de la
solucin hacia el ctodo, donde captan electrones. Los aniones se dirigen hacia el nodo, donde
ceden electrones; el resultado neto es un fljo de electrones a travs de la solucin, es decir, la
solucin conduce la corriente elctrica.
La conductimetra se encarga de medir la resistencia o la conductancia de un electrlito. El
equipo empleado es fundamentalmente un puente conductimtrico y las celdas de conductancia.
Las celdas conductimtricas estn constituidas por un material no conductor y poseen dos
electrodos de platino o niquel recubierto con platino platiinizado, estas celdas tienen dos
parmetros importantes que es necesario mantener inalterables y estas son: La distancia entre
electrodos ( d ) y el rea de los mismos ( A ), la relacin de estos parmetros es una constante
llamada constante de celda y se representa por :
= d = cm = cm 1
A
cm 2
Cada celda posee su propia constante que la da el fabricante, pero por razones de tiempo de
servicio sta se altera, razn por la que se debe determinar frecuentemente.
III FUNDAMENTO
La determinacin de la constante de celda se realiza midiendo la conductancia o resistencia que
presenta una solucin de cloruro de potasio 0.01 M y se mide la conductancia de la solucin y la
temperatura. Con el auxilio de tablas se determina la conductividad especfica para el cloruro de
potasio 0.01M y finalmente se calcula el valor de la constante de celda.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

113

Caractersticas
a) Celdas conductimtricas : Electrodos de platino platinizado
b) Instrumento
: Puente de conductividad
C) Lectura
: Conductancia (micromhos)
Resistencia (ohm)
d) Medidor de equilibrio
: Galvanmetro o por ojo electrnico
III APARATOS
Conductimetro LBR 40 de corriente alterna de 60 y 1000 ciclos por segundo
Celdas de conductancia tipo vasija
Celdas de conductancia tipo inmersin
Termmetro
IV MATERIALES
Vaso de precipitacin de 150 ml
Fiolas de 100 ml
V REACTIVOS
Cloruro de potasio 0.01 M
VI TECNICA
1.- Trabajo preliminar
Preparar una solucin de cloruro de potasio 0.01 M para un volumen de 100 ml. Lavar con agua
destilada las celdas de conductividad y enjuagar con una porcin de solucin de cloruro de
potasio. Llenar la celda tipo vasija con la solucin de cloruro.
En un vaso limpio y sebado, depositar otro volumen de la solucin patrn de cloruro de potasio y
sumergir la celda tipo inmersin conectando los terminales de la celda al conductmetro.
2.- Medicin
Conectar el equipo a la red, 220 V y 50 ciclos. Conectar la celda de medicin en el punto
marcado " ZELLE" en la parte posterior del equipo e introducir la celda en la solucin a medirse
(Ambas superficies de platino deben sumergirse completamente).
Ajuste la frecuencia de medicin a lo deseado (para conductividad alta 4 KHZ, para
conductividad baja 40 HZ). Seleccione el rango ( mhos ohms ). No presionar " EXT. REF."
Ajuste el control de sensibilidad hacia la parada izquierda " GROB " (ajuste grueso) y el control
del ngulo de prdidas al centro.
Presione el botn " EIN" (prendido) y ponga el botn principal a la posicin de " MESSEN"
(medir) para realizar la medicin correspondiente. Gire el botn grande hasta que el instrumento
" MINIMUM " se desva hasta la izquierda. El ajuste correcto se encuentra aumentando la
sensibilidad (gire el botn del control de sensibilidad hacia la derecha " FINE ") y con
movimientos oscilantes del botn grande, cuando se indica a cero en el minimun en el
instrumento, el ajuste correcto ha sido encontrado.

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

114

El valor que se lee en la escala de la perilla con indice debe ser multiplicada con el factor del
botn de rango. Medir la conductancia o la resistencia de esta solucin y tomar la temperatura de
la solucin lo ms pronto posible. Operar primero con la celda tipo vasija y luego con la celda
tipo inmersin.
VII CALCULOS
Ordenar los datos obtenidos en las mediciones:
Celda tipo vasija
Conductancia (L )
=
o
Temperatura ( T C ) =

Celda tipo inmersin

---------------------------------------

----------------------------------------------

TABLA DE CONDUCTANCIA ESPECIFICA DEL CLORURO DE POTASIO 0.01 M A


DIFERENTES TEMPERATURAS
Temperaturas o C

-1 cm 1

17
18
19
20
21
22
23

0.001199
0.001225
0.001251
0.001278
0.001305
0.001332
0.001359

Conocidos los valores anteriores se calcula la constante de celda en base a la siguiente ecuacin:
= K ( valor en tabla )
L (conductancia lo da el aparato)
Donde:
= cm 1
K = -1 cm 1
El valor de L est dado en micromhos ( mhos )
L = mhos x mhos
10 6 mhos

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Informe de laboratorio No 16
Determinacin de la Constante de celda
Fecha ____________________
Anlisis:
__________________________________________________________________________
Mtodo:
__________________________________________________________________________
Muestra: _______________________________________________

DATOS

Concentracin del Cloruro de potasio = ------------

Tabulacin de datos experimentales


A) Celda tipo Vasija
Conductancia (L) = ------------------mhos
Temperatura
= ------------------

B) Celda tipo Inmersin


Conductancia (L) = -------------------mhos
Temperatura
= ------------------Clculos

1.- Constante de celda en el tipo Vasija


= K = -1 x cm -1 =
L
-1

2.- Constante de celda en el tipo Inmersin

115

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

= K = -1 x cm -1 =
L
-1

TABLA DE RESULTADOS DEL ANALISIS


No Muestra
1
2
3
4
5
6
7

en celda vasija

en celda inmersin

DISCUSIN DE RESULTADOS

Apellidos y nombres_________________________________________
Firma : ____________________

116

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

117

DETERMINACIN DE LA CONDUCTANCIA ESPECFICA


I OBJETIVO

Determinar la conductancia especifica de soluciones

II GENERALIDADES
Se llama conductividad especfica al poder conductor de un cubo de solucin que tiene un
cemtimetro de arista, siendo sus dimensiones en centimetros y ohmios reciprocos.
Sus usos son determinar la conductancia equivalente de los electrlitos, el grado de pureza de
sustancias y el control de aguas desionizadas.

III FUNDAMENTO
Consiste en medir la conductancia o resistencia de las diferentes soluciones y con la constante de
celda se determina la conductancia especfica de las soluciones en estudio.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL

III APARATOS

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

118

Conductimetro
Celda de conductancia tipo inmersin

IV MATERIALES

Vaso de precipitacin de 150 ml

V REACTIVOS

Acido clorhdrico 0.1 M y 0.01 M


Acido actico 0.1 M y 0.01 M

VI TECNICA
1.- Trabajo preliminar
Preparar las soluciones problemas para un volumen de 100 ml. Lavar las celdas de conductividad
tipo inmersin y enjuagar con una porcin de las soluciones problemas.
Depositar la solucin en estudio en un vaso de 250 ml.
2.- Medicin
Conectar el equipo a la red, 220 V y 50 ciclos. Conectar la celda de medicin en el punto
marcado " ZELLE" en la parte posterior del equipo e introducir la celda en la solucin a medirse
(Ambas superficies de platino deben sumergirse completamente).
Ajuste la frecuencia de medicin a lo deseado (para conductividad alta 4 KHZ, para
conductividad baja 40 HZ). Seleccione el rango (mhos ohms). No presionar " EXT. REF."
Ajuste el control de sensibilidad hacia la parada izquierda " GROB " (ajuste grueso) y el control
del ngulo de prdidas al centro.
Presione el botn " EIN" (prendido) y ponga el botn principal a la posicin de " MESSEN"
(medir) para realizar la medicin correspondiente. Gire el botn grande hasta que el instrumento
" MINIMUM " se desva hasta la izquierda. El ajuste correcto se encuentra aumentando la
sensibilidad (gire el botn del control de sensibilidad hacia la derecha " FINE ") y con
movimientos oscilantes del botn grande, cuando se indica a cero en el minimun en el
instrumento, el ajuste correcto ha sido encontrado.
El valor que se lee en la escala de la perilla con indice debe ser multiplicada con el factor del
botn de rango.
VII CALCULOS
Calcular la conductancia especfica de la solucin en estudio en base a la siguiente ecuacin:
K=L
Donde:

Laboratorio de Anlisis Qumico II

K = cm -1
= cm 1
L = -1

INGENIERA BIOTECNOLGICA

119

-1

Informe de laboratorio No 17
Determinacin de conductancias especificas
Fecha ____________________
Anlisis: ________________________________________________________________________
Mtodo:
_________________________________________________________________________
Muestra: _______________________________________________________

DATOS
Tipo de celda
= ----------------Constante de celda ( ) = ----------------

Tabulacin de datos experimentales


A) Acido clorhdrico 0.01 M
Conductancia ( L ) = ------------------mhos

B) Acido clorhdrico 0.01 M


Conductancia ( L ) = -------------------mhos

C) Acido actico 0.1M


Conductancia ( L ) = -------------------

D) Acido Actico 0.01M


Conductancia ( L ) = -------------------E) Agua potable

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Conductancia ( L ) = --------------------Clculos :
A) Conductividad especfica del Acido clorhdrico 0.01 M
K = . L = cm -1 x -1 =

B) Acido clorhdrico 0.01 M


K =
F) Acido actico 0.1M

K=
G) Acido Actico 0.01M
K=

H) Agua potable
K=
TABLA DE RESULTADOS
No Muestra
1 H Cl 0.1 M
2 H Cl 0.01 M
3 HAC 0.1 M
4 HAC 0.01M
5 Agua potable

DISCUSIN DE RESULTADOS

Apellidos y Nombres________________________________________
Firma: ____________________

120

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

121

TITULACIONES CONDUCTIMETRICAS
VALORACIONES ACIDO BASE

I OBJETIVO

Determinar la concentracin de sustancias problemas mediante titulaciones


conductimtricas.

II GENERALIDADES
Las valoraciones conductimtricas son aplicadas a diversas sustancias, particularmente a
sustancias en soluciones muy diludas, sustancias cuyas reacciones son relativamente
incompletas, soluciones coloreadas y cuando no se dispone de indicadores adecuados..
Su aplicacin est orientada a titulaciones por neutralizacin. Por preciputacin y por formacin
de complejos, pero no incluye a los mtodos de xido reduccin.
En las valoraciones de este tipo uno de los mayores errores que se cometen es el aumento de
volumen por el efecto del incremento de volumen del titulante; el error consiste en que la
conductividad vara por efecto de la dilucin alterando la que se produce por reaccin propia de
las sustancias reaccionantes y la concentracin del titulante se recomienda que sea 10 50 veces
mayor que la solucin que se titula.
Para obtener resultados de conductancia satisfatorios es necesario aplicar una correccin segn la
frmula siguiente:
L corregida = L observada (V + v 1)
V
Donde:
V = volumen inicial
V 1 = volumen agregado del titulante.
III FUNDAMENTO
Las titulaciones conductimtricas por neutralizacin se basan en encontrar el punto de
equivalencia en base a la medicin de la conductancia de una solucin durante el desarrollo de
una titulacin. El mtodo consiste en adicionar volumenes del titulante efectandose mediciones
de conductancia antes y despues del punto de equivalencia.
Con estos valores obtenidos se levanta una grfica de conductancia (L) frente al volumen del
titulante determinndose en l el punto final de la valoracin.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

122

El equipo de trabajo est conformado de la siguiente manera:

V APARATOS
Conductimetro
Celda de conductancia tipo inmersin
VI MATERIALES
Vasos de precipitacin de 150 ml
Bureta de 25 ml
VII REACTIVOS
Solucin de cido clorhdrico 0.01 N
Solucin de cido actico 0.01 N
Solucin de hidrxido de sodio 0.1 N
Solucin de hidrxido de amonio 0.1 N
VII TECNICA
1.- trabajo preliminar
Depositar 50 ml de la solucin de cido clorhdrico y diluir a 100 ml con agua destilada. Ubicar
el vaso en el agitador magntico y sumergir la celda conductimtrica en la solucin problema.
Conectar los terminales de la celda al puente conductimtrico.
2.- Titulacin
Armar el equipo de acuerdo al arreglo experimental y efectuar la medida de conductancia de la
solucin a volumen cero.
Titular con solucin valorada de hidrxido de sodio 0.1 N a incrementos de medio mililitro
tomando la lectura de conductancia despues de cada adicin. Valorar hasta completar un
volumen de 10 ml.
Titular de igual manera la solucin de cido actico con hidrxido de sodio y cido actico con
hidrxido de amonio.
3.- Tabulacin de datos
La informacin obtenida tabularla de la siguiente manera:
volumen
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5

L observada

L corregida

Laboratorio de Anlisis Qumico II

123

INGENIERA BIOTECNOLGICA

6.0
VIII CALCULOS
El punto final se determina en forma grfica. Se traza un grfico en un sistema coordenado
ubicando los valores de conductancia en la ordenada y el volumen del titulante en la abcisa.

Informe de laboratorio No 18
Titulaciones conductimtricas de neutralizacin
Fecha ____________________
Anlisis:
_________________________________________________________________________
Mtodo:
_________________________________________________________________________
Muestra: _______________________________________________________

Titulacin Acido Clorhdrico con Hidrxido de sodio


Tabulacin de datos experimentales
Volumen del titulante
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
6.0
6.5
7.0
.5
8.0
8.5
9.0
9.5
10.0

L observada

L corregida

Laboratorio de Anlisis Qumico II

124

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Obtencin de la grfica de titulacin Acido clorhdrico 0.01 N

Titulacin Acido Actico con Hidrxido de sodio


Tabulacin de datos experimentales
Volumen del titulante
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
6.0
6.5
7.0
7.5
8.0
8.5
9.0
9.5
10.0

L observada

L corregida

Laboratorio de Anlisis Qumico II

125

INGENIERA BIOTECNOLGICA

Obtencin de la grfica de titulacin Acido Actico 0.01 N

Clculos
A) Determinar en la grfica el punto de equivalencia
B) Calcular la concentracin de las soluciones problemas
Acido clorhdrico 0.01 N
Volumen de muestra: ------------Gasto del titulante : -----------Acido actico 0.01N
Volumen de muestra: ---------------Gasto del titulante : ---------------TABLA DE RESULTADOS
No Muestra
1
2
3
4
5
6
7

DISCUSIN DE RESULTADOS

Normalidad HCl

Normalidad HAC

Laboratorio de Anlisis Qumico II

INGENIERA BIOTECNOLGICA

126

Apellidos y Nombres _______________________________________________


Firma: ____________________

126
126
Pgina: 126
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