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2010
INMOVILIZACIÓN DE CÉLULAS
PRÁCTICA N°3 DE BIOTECNOLOGÍA
DOCENTE:
PRESENTADO POR:
X CICLO
ICA – PERÚ
2010
PRÁCTICA III DE BIOTECNOLOGÍA
INMOVILIZACIÓN DE CÉLULAS
PRÁCTICA N°3:
INMOVILIZACIÓN DE CÉLULAS
I. INTRODUCCIÓN
Inmovilización en Poliacrilamida
PRÁCTICA III DE BIOTECNOLOGÍA
INMOVILIZACIÓN DE CÉLULAS
II. MATERIALES
Material biológico:
III. PROCEDIMIENTO
Se sembró por estría en tubos de agar Sabouraud la cepa de levadura. Incubar a temperatura
ambiente por 3 a 4 días.
Cepa reactivandose
PRÁCTICA III DE BIOTECNOLOGÍA
INMOVILIZACIÓN DE CÉLULAS
A partir de la cepa reactivada se sembró por superficie en 1 placa de agar Sabouraud con la
ayuda de un hisopo estéril. Incubar a temperatura ambiente por 3 a 4 días.
Cultivo proliferado
Remoción de células
Remoción con con
de células Inóculo
las perlas de vidrio
las perlas de vidrio
PRÁCTICA III DE BIOTECNOLOGÍA
INMOVILIZACIÓN DE CÉLULAS
Recuento:
a. Se tomó los 3.4 ml. del inóculo y se mezcló con 100 ml. de agar-agar fundido a 42ºC al 3%,
(concentración celular final 108 cél/ml).
Captura de los 3.4 ml del inóculo. Mezcla de los 3.4 ml del inóculo
en Agar-Agar.
Ci = 5 x 109 cel/ml. Cf = ?
Vi= 3.4 ml. Vf = 101 ml.
Ci x V1 = CIF x V2
(5 x 109 cel/ml.) x (3.4 ml.) = (Cf)x(101 ml.)
b. Con ayuda de pipetas estériles se tomó agar-agar con levaduras (mantenido en baño maría
a 42ºC) se deja caer gota a gota en forma rápida en aceite vegetal, contenido en un frasco
de vidrio sumergido en un recipiente con hielo en forma permanente.
c. Las perlas son lavaron con agua corriente y destilada estéril en forma sucesiva para
desprender el aceite de su superficie.
a. Se preparó un mosto de fruta de 2000 ml. A este se le agregó las células de levaduras
inmovilizadas en agar – agar y se dejó fermentar por espacio de una semana. Se realizaronr
las evaluaciones diarias determinando consumo de sustrato (azúcar) utilizando un
refractómetro (realizar la curva consumo de sustrato/tiempo).
IV. RESULTADOS
TABLA N° 1
Medición del Consumo de Azúcares Reductores por día mediante Refractómero
0 19
1 16
2 14.5
3 12
4 9.4
8* 4.5
9* 4
GRÁFICO N° 1
Medidas del Refractómero al inicio y al término de la fermentación
GRÁFICO N° 2
Consumo de Azúcares Reductores vs Tiempo (días)
CONSUMO DE AZÚCARES
REDUCTORES (% BRIX)
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
TIEMPO (días)
Características Obtenidas:
Sabor: Seco
Acidez: Elevada
Aspecto: Más turbio que al inicio
Color: Guinda
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INMOVILIZACIÓN DE CÉLULAS
V. DISCUSIÓN
Por otro lado no todas las levaduras se inmovilizaron, ya que hubieron brotes que se filtraron del
agar-agar (debido derrepente a su concentración) y se consolidaron como células libres.
Por último, la gran ventaja de este bioproceso es que se pueden reutilizar las levaduras
inmovilizadas en el agar-agar, siempre y cuando se le suministre una fuente carbonada que les
permita estar viables para una próxima fermentación.
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INMOVILIZACIÓN DE CÉLULAS
VI. CONCLUSIONES
Existe viabilidad de las levaduras inoculadas en el mosto, ya que hubo una considerable
reducción de azúcares y aumento de acidez.
La concentración celular de cada perla fue adecuada para la cantidad de mosto empleado.
EL aceite común utilizado fue un buen formador de perlas de agar-agar, debido a su propiedad
hidrofóbica.
VII. REFERENCIAS
3. EDWIN BALDEON CH, VICTOR MEZA C, JULIO GIRALDO H. Evaluación de un fermentador con
levaduras (S. cerevisiae) inmovilizadas en perlas de cerámica. Anales Científicos. UNALM. 2004.
Vol LVIII.