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INTRODUCCIN
Tal como enuncia la Teora Celular todos los organismos estn compuestos de clulas y
todas las clulas provienen de una clula preexistente. La capacidad de reproducirse es
una propiedad fundamental de la clula, la cual est finamente regulada, de modo que la
informacin gentica se conserve y se mantenga un equilibrio y una continuidad
genealgica entre las clulas preexistentes y las clulas nuevas.
Objetivo General del laboratorio:
Reconocer las diferentes etapas de la divisin celular, sealando las caractersticas ms
relevantes de cada fase.
Reconocer los procesos de gametognesis, identificando los diferentes tipos celulares
involucrados.
Identificar algunas caractersticas del proceso de fecundacin.
CICLO CELULAR
As como los seres superiores cumplen con un ciclo de vida en el que nacen, crecen, se
reproducen y mueren, las clulas en crecimiento pasan por el llamado Ciclo Celular. ste
comprende dos etapas fundamentales, la interfase y la divisin propiamente tal, que ocurre
por los procesos de mitosis o meiosis (Fig. 1).
La interfase es el perodo ms largo del ciclo celular y corresponde al tiempo que toma una
clula entre una divisin mittica y la siguiente, o sea que puede entenderse como un
perodo en el cual la clula se prepara para dividirse. Durante este tiempo, la clula
aumenta lentamente su tamao y duplica su material gentico en una secuencia ordenada de
eventos que pueden subdividirse en tres etapas principales, G1, S y G2.
Despus de una divisin celular, las clulas hijas resultantes comienzan la interfase de un
nuevo ciclo celular en la etapa G1. Durante esta etapa la clula retoma su actividad
biosinttica que durante la mitosis es muy baja, llevndola nuevamente a sus niveles
normales. Luego, la clula puede continuar hacia la fase S o detener la progresin del ciclo
celular en la fase G0.En la etapa G0 la clula entra en reposo y la divisin celular cesa, el
mejor ejemplo conocido de clulas que se detienen en esta etapa son las neuronas y las
clulas del musculo cardiaco. Por el contrario, las clulas que continan la progresin por
el ciclo celular pasan a la fase S. sta es una etapa de sntesis, en la cual la clula sintetiza
ADN y termina cuando el contenido de ADN se ha duplicado y los cromosomas se han
replicado. La etapa siguiente es G2, en ella la clula se prepara para su divisin mediante
un perodo de rpido crecimiento y un punto de control que determina si el ADN necesita
ser reparado por daos desde la ltima divisin, por lo que la divisin no contina mientras
no se complete la reparacin del ADN; si el dao en el ADN es muy extenso, la clula
entra en un proceso de apoptosis o muerte celular programada.
Despus de esta serie de etapas la clula se encuentra lista para una nueva divisin,
entrando
en
la
fase
M
(mitosis).
MEIOSIS
En todos los ciclos de reproduccin sexual la nueva generacin de individuos se origina por
la fusin de dos clulas haploides que provienen de los organismos progenitores. Estas
clulas son los gametos y se obtienen mediante el proceso de meiosis que ocurre en todos
los organismos de reproduccin sexual. La meiosis implica la produccin de clulas
haploides, las que se mantienen como tales hasta el momento de la fecundacin, en el que
los gametos se fusionan y el nuevo organismo obtiene un estado diploide. La meiosis
ocurre slo en las clulas germinales de las gnadas y da como resultado vulos o
espermios, (segn el sexo del organismo) a travs del proceso de gametognesis.
La meiosis implica una etapa de duplicacin del ADN y dos divisiones celulares
sucesivas para formar as cuatro clulas haploides que contienen la mitad del material
gentico original a partir de cada clula que entra en este proceso. Los eventos ms
destacados de la meiosis son: duplicacin del ADN nuclear, apareamiento de los
cromosomas homlogos, dos divisiones celulares sucesivas y finalmente, la formacin de
clulas hijas haploides.
Durante este proceso hay una activa transcripcin y sntesis de protenas celulares,
producindose una gran variabilidad gentica que se obtiene gracias a los fenmenos de
crossing-over y permutacin de los cromosomas, lo que asegura una muy baja
posibilidad de obtener gametos genticamente iguales. Lo anterior es una ventaja al
momento de adaptarse a un medio dinmico en constante cambio y otorga la individualidad
de los organismos.
Un ncleo diploide contiene dos juegos de cromosomas muy similares entre s, cada uno
de los cuales proviene de uno de los padres. Estas dos versiones de cada cromosoma son
los llamados cromosomas homlogos. Cuando los cromosomas se duplican por replicacin
de ADN, las copias del cromosoma replicado en un principio permanecen fuertemente
asociadas y se llaman cromtidas hermanas.
En una divisin meitica (Fig. 6) en que las clulas que se forman son haploides, cada
clula hija debe contener slo un miembro de cada cromosoma homlogo, el de origen
materno o el de origen paterno, obtenindose as slo la mitad del nmero original de
cromosomas.
Despus de la replicacin del ADN, cada par de cromosomas duplicados se empareja con
su homlogo y forman una estructura llamada bivalente que posee cuatro cromtidas.
Cuando la primera divisin celular ocurre, cada clula hija contiene dos copias de uno de
los cromosomas homlogos. En la segunda divisin celular los cromosomas no se duplican;
slo se ubican en el centro de la clula en el huso mittico y las cromtidas hermanas se
dividen como en una mitosis normal.
La meiosis se divide en varias etapas, stas se nombran de la misma forma que las etapas
de la mitosis, pero se les agrega un nmero I o II segn se trate de la primera o segunda
divisin
celular,
as,
la
meiosis
se
divide
en:
I.
FIGURA 5: Quiasmas.
En este punto termina la Profase I y comienzan las etapas de divisin celular propiamente
tal:
II.
III.
IV.
Despus de la primera divisin cada clula resultante tiene la mitad del nmero de
cromosomas original, pero cada cromosoma se encuentra duplicado y compuesto por
dos cromtidas hermanas. Ahora comienza la segunda divisin celular, sin que se
produzca una nueva duplicacin del ADN.
V.
VI.
VII.
Anafase II: Cada cromtida hermana migra hacia un polo distinto de la clula.
VIII.
FIGURA 6: La meiosis.
GAMETOGNESIS
La gametognesis es el proceso por el cual se lleva a cabo la produccin de gametos
masculinos (espermatozoides) o gametos femeninos (vulos) y ocurre en las glndulas
sexuales o gnadas tanto en machos como en hembras una vez que estos han alcanzado la
maduracin sexual.
El proceso de produccin de gametos femeninos se denomina ovognesis y el proceso de
produccin de gametos masculinos se denomina espermatognesis.
La ovognesis ocurre en los ovarios y la espermatognesis ocurre en los testculos,
especficamente en los tbulos seminferos. Ambos procesos se inician a partir de clulas
germinales diploides. Tras dos divisiones sucesivas; meiosis I y meiosis II (explicadas con
anterioridad) se producen cuatro clulas con la mitad del material gentico, entre las cuales
encontramos el vulo y el espermatozoide (Fig. 7).
FECUNDACIN
En el proceso de fecundacin (Fig. 8) los gametos haploides se fusionan para dar origen
a un nuevo organismo diploide. Cuando esto ocurre, el vulo se activa para comenzar el
desarrollo del nuevo individuo y los ncleos de ambos gametos se fusionan para formar el
genoma del nuevo organismo.
ACTIVIDAD PRCTICA N 1:
Con el objeto de obtener especmenes de chorito adecuados para nuestro trabajo prctico,
se escogieron ejemplares vivos y se mantuvieron en un acuario con agua de mar filtrada,
suministrando una adecuada oxigenacin del medio con una bomba de aire.
Una forma de detectar el sexo de los choros es mediante el color de las gnadas (amarillas
en los machos y rojizas en las hembras), ya que estos animales no presentan dimorfismo
sexual externo.
En los choritos las gnadas estn compuestas por conductos ciliados ramificados desde
donde se abren numerosos sacos o folculos, se encuentran rodeando el intestino y estn
muy prximas, siendo a veces muy difcil separarlas. Cuando las gnadas o el tejido
gonadal han alcanzado la plena madurez, son fciles de ver y ocupan gran parte del cuerpo
blando del animal. Los gonoductos que transportan los gametos hasta la cavidad corporal
se desarrollan, aumentan de tamao y se pueden observar a simple vista.
Una vez identificadas las gnadas se toma una muestra de gametos masculinos de los
ejemplares con gnadas amarillas, presionado suavemente sobre la gnada hasta poder
aspirar con una pipeta Pasteur la solucin lquida que se libera. Este procedimiento permite
obtener espermatozoides maduros, los que deben ser depositados en un vaso de
precipitados pequeo. Repitiendo el mismo procedimiento con los ejemplares de gnadas
rojas o caf oscuras (hembras), se obtienen vulos maduros, los que al igual que en el caso
anterior, deben ser depositados en un vaso precipitado pequeo para su posterior
observacin al microscopio.
Ya obtenidos los gametos se deben adicionar a cada vaso precipitado 2 ml de agua de mar
filtrada, con el objetivo de resuspender las clulas y evitar que se deshidraten.
En un tercer vaso precipitado se adicionar 1 ml de cada una de las soluciones de gametos
(vulos y espermatozoides). Con una pipeta pasteur resuspenda suavemente con el objetivo
de que los gametos femeninos y masculinos entren en contacto. Utilizando esta
metodologa hemos realizado una fecundacin in vitro.
Realice preparaciones frescas de la solucin de gametos femeninos, masculinos y de la
fecundacin in vitro adicionando una gota de cada muestra sobre un porta objetos limpio y
seco. Cubra con un cubreobjetos y observe las preparaciones al microscopio con los
objetivos 4X, 10X y 40X.
Realice un dibujo esquemtico de los gametos femeninos, masculinos y del proceso de
fecundacin vistos con el objetivo 40X. Cada dibujo debe ser realizado dentro de un
crculo de 8cm de dimetro, indicando a un costado de ste, ttulo de muestra; tipo de
muestra (temporal o permanente); tincin; aumento objetivo; aumento total y
observaciones. Anote los nombres de las estructuras identificadas en su observacin.
B)
Observacin microscpica de preparaciones permanentes de tejidos vegetales
en distintas etapas de la mitosis.
ACTIVIDAD PRCTICA N2:
Aplicando sus conocimientos de microscopa observe una preparacin de clulas vegetales
de Allium cepa (L.) con el objetivo 100X e identifique en la muestra las distintas etapas de
la mitosis. Para la observacin con el objetivo 100X recuerde utilizar el aceite de
inmersin.
Realice un dibujo esquemtico que incorpore todas las etapas de la mitosis que ha
identificado. El dibujo debe ser realizado dentro de un crculo de 8cm de dimetro,
indicando a un costado de ste, ttulo de muestra; tipo de muestra (temporal o permanente);
tincin; aumento objetivo; aumento total y observaciones. Anote los nombres de las
estructuras identificadas en su observacin.
C) Observacin microscpica de una preparacin permanente de tejidos en
meiosis.
ACTIVIDAD PRCTICA N3:
Aplicando sus conocimientos de microscopa observe con el objetivo 40X la preparacin
de gametognesis femenina y masculina en tejido ovrico y testicular de Rattus norvegicus
(Berkenhout)
Realice un dibujo esquemtico que incorpore al menos tres clulas en distina etapa de
maduracin durante la gametognesis femenina y masculina. Cada dibujo debe ser
realizado dentro de un crculo de 8cm de dimetro, indicando a un costado de ste, ttulo de
muestra; tipo de muestra (temporal o permanente); tincin; aumento objetivo; aumento
total y observaciones. Anote los nombres de las estructuras identificadas en su observacin.
D)
Observacin microscpica de preparaciones permanentes de gametos
masculinos.
ACTIVIDAD PRCTICA N4:
Haciendo uso del objetivo 100X observe detalladamente la morfologa de las clulas
espermatozoides de Bos taurus (Linnaeus) y Rattus norvegicus (Berkenhout). Para la
observacin con el objetivo 100X recuerde utilizar el aceite de inmersin
Realice un dibujo que represente la muestra de espermatozoides de Bos taurus (Linnaeus)
y otro dibujo que represente los espermatozoides de Rattus norvegicus (Berkenhout).
Ambos dibujos deben ser realizados dentro de un crculo de 8cm de dimetro, indicando a
un costado de ste, ttulo de muestra; tipo de muestra (temporal o permanente); tincin;
aumento objetivo; aumento total y observaciones. Anote los nombres de las estructuras
identificadas
en
su
observacin.
BIBLIOGRAFA
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