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UNIVERSIDAD ANDRES BELLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS


DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLGICAS

LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR BIO-035


GUA N 6:
MITOSIS, MEIOSIS Y FECUNDACIN

INTRODUCCIN
Tal como enuncia la Teora Celular todos los organismos estn compuestos de clulas y
todas las clulas provienen de una clula preexistente. La capacidad de reproducirse es
una propiedad fundamental de la clula, la cual est finamente regulada, de modo que la
informacin gentica se conserve y se mantenga un equilibrio y una continuidad
genealgica entre las clulas preexistentes y las clulas nuevas.
Objetivo General del laboratorio:
Reconocer las diferentes etapas de la divisin celular, sealando las caractersticas ms
relevantes de cada fase.
Reconocer los procesos de gametognesis, identificando los diferentes tipos celulares
involucrados.
Identificar algunas caractersticas del proceso de fecundacin.

CICLO CELULAR
As como los seres superiores cumplen con un ciclo de vida en el que nacen, crecen, se
reproducen y mueren, las clulas en crecimiento pasan por el llamado Ciclo Celular. ste
comprende dos etapas fundamentales, la interfase y la divisin propiamente tal, que ocurre
por los procesos de mitosis o meiosis (Fig. 1).
La interfase es el perodo ms largo del ciclo celular y corresponde al tiempo que toma una
clula entre una divisin mittica y la siguiente, o sea que puede entenderse como un
perodo en el cual la clula se prepara para dividirse. Durante este tiempo, la clula
aumenta lentamente su tamao y duplica su material gentico en una secuencia ordenada de
eventos que pueden subdividirse en tres etapas principales, G1, S y G2.
Despus de una divisin celular, las clulas hijas resultantes comienzan la interfase de un
nuevo ciclo celular en la etapa G1. Durante esta etapa la clula retoma su actividad
biosinttica que durante la mitosis es muy baja, llevndola nuevamente a sus niveles
normales. Luego, la clula puede continuar hacia la fase S o detener la progresin del ciclo
celular en la fase G0.En la etapa G0 la clula entra en reposo y la divisin celular cesa, el
mejor ejemplo conocido de clulas que se detienen en esta etapa son las neuronas y las
clulas del musculo cardiaco. Por el contrario, las clulas que continan la progresin por
el ciclo celular pasan a la fase S. sta es una etapa de sntesis, en la cual la clula sintetiza
ADN y termina cuando el contenido de ADN se ha duplicado y los cromosomas se han
replicado. La etapa siguiente es G2, en ella la clula se prepara para su divisin mediante
un perodo de rpido crecimiento y un punto de control que determina si el ADN necesita
ser reparado por daos desde la ltima divisin, por lo que la divisin no contina mientras
no se complete la reparacin del ADN; si el dao en el ADN es muy extenso, la clula
entra en un proceso de apoptosis o muerte celular programada.
Despus de esta serie de etapas la clula se encuentra lista para una nueva divisin,
entrando
en
la
fase
M
(mitosis).

FIGURA 1: Ciclo celular completo.


MITOSIS
Durante la mitosis una clula se divide y da origen a dos clulas hijas diploides
genticamente iguales entre s. Lo que ocurre con el material gentico es una separacin
equitativa de dos conjuntos cromosmicos iguales entre s y al de la clula original. Esto es
posible gracias a que en la fase S de la interfase el material gentico y las protenas que
constituyen la cromatina han sido duplicados. La mitosis completa de una clula demora
aproximadamente una hora, durante la cual ocurren muchos eventos diferentes, los que se
han agrupado en 4 etapas (Fig. 3):
1. Profase: Dentro del ncleo la cromatina se condensa para formar los
cromosomas. Al principio stos se ven como filamentos largos y finos, pero al
trmino de la profase son ms cortos y gruesos, ubicndose cerca de la envoltura
nuclear. Los centrolos se han duplicado y se encuentran en polos opuestos de la
clula. Finalmente, la envoltura nuclear se rompe y la profase termina.
2. Metafase: Los cromosomas condensados al mximo se ubican en el centro o
ecuador de la clula gracias a la ayuda del huso mittico, que es un complejo
conjunto de microtbulos que se orientan de polo a polo de la clula cerca de los
centrolos. Los microtbulos se unen a los cromosomas al insertarse en el
cinetocoro de cada centrmero. Durante la metafase cada cromosoma est
compuesto por dos cromtidas, cada una de las cuales posee un cinetocoro (Fig. 2).

FIGURA 2: Esquema de un cromosoma metafsico.


3. Anafase: La caracterstica principal de esta etapa es el movimiento de los
cromosomas hacia los polos de la clula. Esto ocurre gracias al acortamiento de
los microtbulos del huso mittico.
4. Telofase: Sobre los cromosomas que estn en los polos de la clula se forma la
envoltura nuclear. La cromatina se descondensa y el ncleo aumenta de tamao
por hidratacin. El ncleo resultante es esfrico y en l se puede observar el
nuclolo.
Citodiresis: En clulas animales esta etapa ocurre por un estrangulamiento del sector del
citoplasma que se encuentra entre los dos ncleos nuevos gracias a una gran concentracin
local de microfilamentos, lo que implica un gasto de energa. En clulas vegetales existe la
pared celular y esta etapa ocurre por la formacin de un tabique entre los dos ncleos
nuevos. El tabique se forma por vesculas del sistema de Golgi y finalmente se forman las
dos membranas plasmticas a cada lado del tabique, quedando completa la divisin celular.

FIGURA 3: Esquema general de la mitosis.

MEIOSIS
En todos los ciclos de reproduccin sexual la nueva generacin de individuos se origina por
la fusin de dos clulas haploides que provienen de los organismos progenitores. Estas
clulas son los gametos y se obtienen mediante el proceso de meiosis que ocurre en todos
los organismos de reproduccin sexual. La meiosis implica la produccin de clulas
haploides, las que se mantienen como tales hasta el momento de la fecundacin, en el que
los gametos se fusionan y el nuevo organismo obtiene un estado diploide. La meiosis
ocurre slo en las clulas germinales de las gnadas y da como resultado vulos o
espermios, (segn el sexo del organismo) a travs del proceso de gametognesis.
La meiosis implica una etapa de duplicacin del ADN y dos divisiones celulares
sucesivas para formar as cuatro clulas haploides que contienen la mitad del material
gentico original a partir de cada clula que entra en este proceso. Los eventos ms
destacados de la meiosis son: duplicacin del ADN nuclear, apareamiento de los
cromosomas homlogos, dos divisiones celulares sucesivas y finalmente, la formacin de
clulas hijas haploides.
Durante este proceso hay una activa transcripcin y sntesis de protenas celulares,
producindose una gran variabilidad gentica que se obtiene gracias a los fenmenos de
crossing-over y permutacin de los cromosomas, lo que asegura una muy baja
posibilidad de obtener gametos genticamente iguales. Lo anterior es una ventaja al
momento de adaptarse a un medio dinmico en constante cambio y otorga la individualidad
de los organismos.
Un ncleo diploide contiene dos juegos de cromosomas muy similares entre s, cada uno
de los cuales proviene de uno de los padres. Estas dos versiones de cada cromosoma son
los llamados cromosomas homlogos. Cuando los cromosomas se duplican por replicacin
de ADN, las copias del cromosoma replicado en un principio permanecen fuertemente
asociadas y se llaman cromtidas hermanas.
En una divisin meitica (Fig. 6) en que las clulas que se forman son haploides, cada
clula hija debe contener slo un miembro de cada cromosoma homlogo, el de origen
materno o el de origen paterno, obtenindose as slo la mitad del nmero original de
cromosomas.
Despus de la replicacin del ADN, cada par de cromosomas duplicados se empareja con
su homlogo y forman una estructura llamada bivalente que posee cuatro cromtidas.
Cuando la primera divisin celular ocurre, cada clula hija contiene dos copias de uno de
los cromosomas homlogos. En la segunda divisin celular los cromosomas no se duplican;
slo se ubican en el centro de la clula en el huso mittico y las cromtidas hermanas se
dividen como en una mitosis normal.
La meiosis se divide en varias etapas, stas se nombran de la misma forma que las etapas
de la mitosis, pero se les agrega un nmero I o II segn se trate de la primera o segunda
divisin
celular,
as,
la
meiosis
se
divide
en:

I.

Profase I: sta es la primera etapa de la meiosis y tambin es la de mayor duracin.


En ella ocurre el proceso de crossing-over en el que los cromosomas homlogos
intercambian parte de su ADN por un proceso denominado recombinacin
gentica. Esto cambia el contenido del ADN de los gametos respecto al del
organismo progenitor y ocurre cuando los cromosomas homlogos se encuentran
muy juntos. Los lugares en los que ocurre recombinacin se llaman quiasmas.

La profase est dividida en 5 etapas.


En el Leptoteno cada cromosoma se condensa, permaneciendo unido por sus extremos a la
envoltura nuclear. Los cromosomas ya se han replicado y consisten en dos cromtidas
hermanas que se encuentran muy juntas.
En el Cigoteno los cromosomas homlogos comienzan a aparearse por sus extremos en
puntos muy cercanos a la envoltura nuclear. Luego, como en una especie de cierre, los
cromosomas continan aparendose para alinearse en toda su extensin, quedado los genes
homlogos enfrentados. Esta estructura se llama complejo sinaptonmico (Fig. 4), donde
los cromosomas homlogos as apareados son un bivalente que en realidad es una ttrada ya
que cada uno de los dos cromosomas est duplicado.

FIGURA 4: Complejo Sinaptonmico.


En el Paquiteno, que puede durar varios das, ocurren las recombinaciones en que se
intercambia el material gentico de cada cromosoma con su homlogo.
En el Diploteno los cromosomas homlogos se desaparean, el complejo sinaptonmico se
deshace y los cromosomas homlogos quedan separados, aunque permanecen unidos a
travs de los quiasmas. En esta etapa y en toda la profase I, ocurre sntesis de ARN.
En la Diacinesis la sntesis de ARN cesa, los cromosomas se condensan intensamente y se
sueltan de la envoltura nuclear que comienza a desaparecer. Los cromosomas homlogos
siguen unidos a travs de los quiasmas (Fig. 5) en los lugares donde ha ocurrido
recombinacin.

FIGURA 5: Quiasmas.
En este punto termina la Profase I y comienzan las etapas de divisin celular propiamente
tal:
II.

Metafase I: En esta etapa desaparecen los quiasmas. Los centrolos se encuentran


duplicados y se mueven hacia los polos de la clula. Se organiza el huso mittico y
los cromosomas se ubican por pares homlogos en el centro de la clula, de modo
que cada cromosoma de un par homlogo se orienta hacia un polo diferente de la
clula, sin importar si es paterno o materno, lo que genera diferentes distribuciones
posibles de cromosomas, aumentndose la variabilidad gentica del proceso.

III.

Anafase I: Los cromosomas migran hacia polos opuestos de la clula,


segregndose los cromosomas homlogos en los extremos opuestos de ella, gracias a
la depolimerizacin y polimerizacin de los microtbulos del huso mittico.

IV.

Telofase I: Alrededor de los cromosomas en cada extremo de la clula se


reconstituye la envoltura nuclear. La cromatina se descondensa y casi
simultneamente, ocurre la divisin del citoplasma o citodiresis.

Despus de la primera divisin cada clula resultante tiene la mitad del nmero de
cromosomas original, pero cada cromosoma se encuentra duplicado y compuesto por
dos cromtidas hermanas. Ahora comienza la segunda divisin celular, sin que se
produzca una nueva duplicacin del ADN.
V.

Profase II: La cromatina se condensa nuevamente en cromosomas y la envoltura


nuclear desaparece.

VI.

Metafase II: Los cromosomas se ubican en el centro de la clula y el huso mittico


se une a ellos de modo que cada cromtida hermana se orienta hacia un polo
distinto de la clula.

VII.

Anafase II: Cada cromtida hermana migra hacia un polo distinto de la clula.

VIII.

Telofase II: Alrededor de los cromosomas en cada polo de la clula se


reconstituye la envoltura nuclear, se descondensan los cromosomas y ocurre la
divisin del citoplasma.

Cada clula resultante despus de la segunda divisin meitica es haploide, ya que


tiene slo la mitad de los cromosomas originales de la especie y cada cromosoma tiene
slo una cromtida.

FIGURA 6: La meiosis.

GAMETOGNESIS
La gametognesis es el proceso por el cual se lleva a cabo la produccin de gametos
masculinos (espermatozoides) o gametos femeninos (vulos) y ocurre en las glndulas
sexuales o gnadas tanto en machos como en hembras una vez que estos han alcanzado la
maduracin sexual.
El proceso de produccin de gametos femeninos se denomina ovognesis y el proceso de
produccin de gametos masculinos se denomina espermatognesis.
La ovognesis ocurre en los ovarios y la espermatognesis ocurre en los testculos,
especficamente en los tbulos seminferos. Ambos procesos se inician a partir de clulas
germinales diploides. Tras dos divisiones sucesivas; meiosis I y meiosis II (explicadas con
anterioridad) se producen cuatro clulas con la mitad del material gentico, entre las cuales
encontramos el vulo y el espermatozoide (Fig. 7).

FIGURA 7: Esquema del proceso de Ovognesis y Espermatognesis

FECUNDACIN
En el proceso de fecundacin (Fig. 8) los gametos haploides se fusionan para dar origen
a un nuevo organismo diploide. Cuando esto ocurre, el vulo se activa para comenzar el
desarrollo del nuevo individuo y los ncleos de ambos gametos se fusionan para formar el
genoma del nuevo organismo.

FIGURA 8: Esquema del proceso de fertilizacin.


La fecundacin es un proceso casi exclusivamente especie-especfico, lo que quiere decir
que los espermios y vulos de cada especie se reconocen entre s a travs de molculas
especiales de adhesin, lo que impide que espermios de una especie fertilicen vulos de
una especie diferente. Un ejemplo de excepcin a este enunciado es el caso de la mula, la
cual resulta del cruce entre una yegua y un burro (organismos de distinta especie).
Aunque muchos espermios ataquen a un mismo vulo (Fig. 9), un vulo slo puede ser
fecundado por un espermio. La poliespermia se encuentra bloqueada gracias a una
despolarizacin rpida de la membrana del vulo, el cambio de las cargas a travs de la
membrana impide que un segundo espermio pueda fusionarse. Esto es importante, porque
si ms de un espermio inyecta su ncleo en un vulo se forma ms de un huso mittico y la
segregacin de los cromosomas durante la divisin celular es anormal, resultando en
embriones alterados o no viables.

FIGURA 9: Microfotografa electrnica de un vulo rodeado de espermios.

La fertilizacin comienza cuando la cabeza de un espermio contacta la cubierta


gelatinosa de un vulo. Esto gatilla en el espermio la llamada reaccin del acrosoma, en la
que el contenido de la vescula del acrosoma se libera al medio externo. Este proceso
consiste en enzimas hidrolticas que ayudan a penetrar a travs de la capa vitelina para llegar
a la membrana plasmtica. Cuando las dos membranas plasmticas entran en contacto se
fusionan, y as se produce la entrada del ncleo del espermio hacia el interior del vulo.
Una vez fertilizado el vulo pasa a llamarse cigoto.
Una vez que los dos pro-ncleos se encuentran en el interior del vulo, deben migrar para
encontrarse y poder fusionarse. Este movimiento se realiza por medio del citoesqueleto. Los
cromosomas se juntan cuando las envolturas nucleares desaparecen en preparacin a la
primera divisin celular, dando trmino al proceso de fecundacin y comenzando el
desarrollo embrionario.
ACTIVIDADES PRCTICAS
A)
Observacin microscpica del proceso de fecundacin in vitro de molusco
(Choromytilus chorus)
Los moluscos son organismos invertebrados que se caracterizan por presentar una concha
dura en la que el carbonato clcico es el componente principal. La clase Bivalva,
comprende quizs las formas ms populares como lo son las ostras, los mejillones
(choritos), las almejas, las arcas o pepitonas y las vieiras o pectnidos. Todas se caracterizan
por tener el cuerpo comprimido por dos valvas unidas dorsalmente por medio de un gozne o
ligamento, un pie muscular caracterstico y una cavidad que encierran los rganos,
agrupados en una masa visceral rodeada por un manto, el cual secreta la concha calcrea
externa.
Dentro de los bivalvos existen especies que desarrollaron diversas especializaciones,
permitindoles vivir en distintos ambientes, ya sea en forma libre o fija a sustratos duros por
una estructura llamada biso (Fig. 10).

FIGURA 10: Esquema de la morfologa externa e interna de un bivalvo tipo.

ACTIVIDAD PRCTICA N 1:
Con el objeto de obtener especmenes de chorito adecuados para nuestro trabajo prctico,
se escogieron ejemplares vivos y se mantuvieron en un acuario con agua de mar filtrada,
suministrando una adecuada oxigenacin del medio con una bomba de aire.
Una forma de detectar el sexo de los choros es mediante el color de las gnadas (amarillas
en los machos y rojizas en las hembras), ya que estos animales no presentan dimorfismo
sexual externo.
En los choritos las gnadas estn compuestas por conductos ciliados ramificados desde
donde se abren numerosos sacos o folculos, se encuentran rodeando el intestino y estn
muy prximas, siendo a veces muy difcil separarlas. Cuando las gnadas o el tejido
gonadal han alcanzado la plena madurez, son fciles de ver y ocupan gran parte del cuerpo
blando del animal. Los gonoductos que transportan los gametos hasta la cavidad corporal
se desarrollan, aumentan de tamao y se pueden observar a simple vista.
Una vez identificadas las gnadas se toma una muestra de gametos masculinos de los
ejemplares con gnadas amarillas, presionado suavemente sobre la gnada hasta poder
aspirar con una pipeta Pasteur la solucin lquida que se libera. Este procedimiento permite
obtener espermatozoides maduros, los que deben ser depositados en un vaso de
precipitados pequeo. Repitiendo el mismo procedimiento con los ejemplares de gnadas
rojas o caf oscuras (hembras), se obtienen vulos maduros, los que al igual que en el caso
anterior, deben ser depositados en un vaso precipitado pequeo para su posterior
observacin al microscopio.
Ya obtenidos los gametos se deben adicionar a cada vaso precipitado 2 ml de agua de mar
filtrada, con el objetivo de resuspender las clulas y evitar que se deshidraten.
En un tercer vaso precipitado se adicionar 1 ml de cada una de las soluciones de gametos
(vulos y espermatozoides). Con una pipeta pasteur resuspenda suavemente con el objetivo
de que los gametos femeninos y masculinos entren en contacto. Utilizando esta
metodologa hemos realizado una fecundacin in vitro.
Realice preparaciones frescas de la solucin de gametos femeninos, masculinos y de la
fecundacin in vitro adicionando una gota de cada muestra sobre un porta objetos limpio y
seco. Cubra con un cubreobjetos y observe las preparaciones al microscopio con los
objetivos 4X, 10X y 40X.
Realice un dibujo esquemtico de los gametos femeninos, masculinos y del proceso de
fecundacin vistos con el objetivo 40X. Cada dibujo debe ser realizado dentro de un
crculo de 8cm de dimetro, indicando a un costado de ste, ttulo de muestra; tipo de
muestra (temporal o permanente); tincin; aumento objetivo; aumento total y
observaciones. Anote los nombres de las estructuras identificadas en su observacin.

B)
Observacin microscpica de preparaciones permanentes de tejidos vegetales
en distintas etapas de la mitosis.
ACTIVIDAD PRCTICA N2:
Aplicando sus conocimientos de microscopa observe una preparacin de clulas vegetales
de Allium cepa (L.) con el objetivo 100X e identifique en la muestra las distintas etapas de
la mitosis. Para la observacin con el objetivo 100X recuerde utilizar el aceite de
inmersin.
Realice un dibujo esquemtico que incorpore todas las etapas de la mitosis que ha
identificado. El dibujo debe ser realizado dentro de un crculo de 8cm de dimetro,
indicando a un costado de ste, ttulo de muestra; tipo de muestra (temporal o permanente);
tincin; aumento objetivo; aumento total y observaciones. Anote los nombres de las
estructuras identificadas en su observacin.
C) Observacin microscpica de una preparacin permanente de tejidos en
meiosis.
ACTIVIDAD PRCTICA N3:
Aplicando sus conocimientos de microscopa observe con el objetivo 40X la preparacin
de gametognesis femenina y masculina en tejido ovrico y testicular de Rattus norvegicus
(Berkenhout)
Realice un dibujo esquemtico que incorpore al menos tres clulas en distina etapa de
maduracin durante la gametognesis femenina y masculina. Cada dibujo debe ser
realizado dentro de un crculo de 8cm de dimetro, indicando a un costado de ste, ttulo de
muestra; tipo de muestra (temporal o permanente); tincin; aumento objetivo; aumento
total y observaciones. Anote los nombres de las estructuras identificadas en su observacin.
D)
Observacin microscpica de preparaciones permanentes de gametos
masculinos.
ACTIVIDAD PRCTICA N4:
Haciendo uso del objetivo 100X observe detalladamente la morfologa de las clulas
espermatozoides de Bos taurus (Linnaeus) y Rattus norvegicus (Berkenhout). Para la
observacin con el objetivo 100X recuerde utilizar el aceite de inmersin
Realice un dibujo que represente la muestra de espermatozoides de Bos taurus (Linnaeus)
y otro dibujo que represente los espermatozoides de Rattus norvegicus (Berkenhout).
Ambos dibujos deben ser realizados dentro de un crculo de 8cm de dimetro, indicando a
un costado de ste, ttulo de muestra; tipo de muestra (temporal o permanente); tincin;
aumento objetivo; aumento total y observaciones. Anote los nombres de las estructuras
identificadas
en
su
observacin.

BIBLIOGRAFA
Biologa Celular y Molecular. De Robertis y de Robertis.
11 ed., 2da impresin, 1998, Ed. El Ateneo, Bs. Aires.
Elementos de Biologa Celular y Gentica. Parte 3. Transmisin de la Informacin y
Reproduccin. Varios Autores.1 ed., 1985, Departamento de Biologa Celular y Gentica,
Facultad de Medicina, Universidad de Chile.
Molecular Biology of the Cell. Alberts, Bray, Lewis, Raff Roberts & Watson. 3th ed., 1994,
Garland Publishing Inc., New York & London.
Zoologa de los Invertebrados. Barnes, R., 2 edicin, 1969, Ed. Interamericana, Mxico.
Histologa humana. Stevens, Alan. 3 edicin, 2006.
Histologa [recurso electrnico]: Texto y atlas color con biologa celular y molecular.
Ross, Michael H. 5a. ed.; 2007.
Embriologa Humana y Biologa del Desarrollo. Bruce M. Carlson. . 3a edicin, 2005.

Materiales Laboratorio. Mitosis, Meiosis y Fecundacin


Materiales por grupo (3 alumnos por grupo)
2 unidades de erizo negro o chorito maltn.
3 microscopios.
Preparaciones histolgicas (1 de cada una):
Mitosis (catafilo de cebolla),
Corte de testculos,
Corte de ovario,
Muestra de espermatozoides de toro y rata.
1 Tijera.
1 pinza.
2 gotarios.
1 porta objeto escavado.
Cubre objetos
2 vasos pp. 50 ml
Lpiz rotulador
Por curso:
Agua de mar filtrada.
Televisor con microscopio.
3 Aceite de inmersin.
3 Solucin limpiadora.
Papel ptico.

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