Dra.

Lizzie Becerra Gutirrez

Ms.C. Carlos Abanto Daz
Ms.C. Juan Giles Saavedra
Ms.C. Jess Quiones Esquerre

Principales Funciones del Laboratorio

de Microbiologia
1. Examinar y Cultivar muestras
clinicas conteniendo
microorganismos patgenos
2. Efectuar la identificacion
exacta de la especie de
microorganismo
3. Llevar a cabo Pruebas
de Susceptibilidada
Antibioticos

RESULTADOS
EXACTOS

BUENA
RECOLECCION
Y
DEPENDE
TRANSPORTE
DE LA
RESULTADOS
MUESTRA
EXACTOS

OBJETIVOS

ASPECTOS GENERALES

Apropiada seleccin, coleccin y transporte de

las muestras clnicas.
Ser representativa.
Evitar la contaminacin con microorganismos
saprofitos del rea.
Sitio anatmico correcto
Nunca refrigere una muestra por anaerobios.
Apropiado volumen.

ASPECTOS GENERALES
Identificar cada muestra:
Nombre del paciente, procedencia
Tipo de muestra
Fecha de coleccin
Diagnstico clnico
Duracin de la enfermedad
Prueba requerida e iniciales del funcionario que tom la
muestra.

ASPECTOS GENERALES

Obtener en lo posible muestras antes de

administrar
antibiticos
a
agentes
antimicrobianos.

Coloque la muestra en un recipiente estril y

adecuado para su transporte

Ordene

siempre un frotis por gram para los

especimenes que proceden de cavidades aspticas,
y
anote
su
inters
en
determinado
microorganismo.

RECOLECCIN DE LA MUESTRA

Condiciones de esterilidad
Recipiente adecuado
Nmero y cantidad suficiente
Momento preciso

LA MUESTRA debe recogerse de la zona o en el

momento donde ms probabilidad haya de encontrar
los patgenos.
En las lesiones en las que se sospeche la presencia
de anaerobios la muestra debe recogerse por
aspiracin con jeringa y no con torunda. Estas
muestras nunca deben refrigerarse

MUESTRAS CLNICAS

PUNTOS CRTICOS:
Zonas estriles/ Zonas NO estriles
Tratamiento antibitico
Rapidez (cambios en la flora por T, pH)
Cantidad
Contacto con desinfectantes

CONTAMINACIONES ms FRECUENTES:
Propio enfermo
Persona que realiza la toma
Material utilizado
Manipulacin en el laboratorio

ZONAS CORPORALES LIBRES

DE BIOTA NORMAL
Aparato respiratorio inferior
-Laringe
-Traquea
-Bronquiolos
Aparato genitourinario
-Ureteros
-Vejiga
-Rin
-tero
Lquidos
-Sangre
-Mdula sea
-L.C.R.
-Lquido seroso
-Lquido sinovial
-Lquido pleural
-Orina
Tejidos

ZONAS CORPORALES CON DE

BIOTA NORMAL
Piel
Mucosas
-Boca
-Orofaringe
-Nasofaringe
Odo externo
Ojo
Aparato genitourinario
-Uretra anterior
-Vagina
Aparato gastrointestinal
-Estmago
-Intestino delgado
-Intestino grueso

TIPOS DE MUESTRAS CLNICAS

ORINA
EXUDADOS URETRAL Y VAGINAL
HECES
EXUDADO FARNGEO
EXUDADO NASAL
TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR: ESPUTOS
SANGRE
LQUIDO CEFALORRAQUDEO
OTROS LQUIDOS ESTRILES
(Sinovial,Pleural,Peritoneal)
COLECCIONES SUPURADAS

ORINA
OBJETIVO:
Obtener una muestra de orina como
diagnstico de alguna patologa (ITU, TBC)

apoyo

Se pueden realizar diferentes anlisis como son,

examen
microscpico
de
orina,
urocultivo,
determinacin
de
algunos
residuos
de
medicamentos (Doping) e investigacin de
microorganismos especiales como Leptospira.

ORINA
FISICO: aspecto, color, olor, densidad, volumen.
QUMICO: pH, glucosa, protenas, cetonas, bilirrubinas,
urobilinogeno, sangre, hemoglobina, *leucocitos. drogas
MICROSCOPICO:
Clulas: epiteliales, transicin, tubulares.
Eritrocitos
Leucocitos
Cilindros: hialinos, leucocitatios, eritrocitarios,
Cristales en orina cida y alcalina:
Parsitos:
BACTERIAS, etc.

ORINA

RECOLECCIN:

Se puede refrigerar hasta un mximo de 4 horas.

-MICCION

(Chorro medio)

- SONDA

- Puncin vesical

MICCION

ORINA

30 - 40 mL

HECES
OBJETIVO:

Se toman muestra para identificar parsitos y otros

microorganismos que causan diarrea, portadores de
patgenos, para valorar la funcin intestinal y para
investigar la posibilidad de sangre oculta.

CANTIDAD:
Heces pastosas: muestras del tamao de una
aceituna son muy adecuadas pues permiten
realizar la mayora de los estudios.
Heces lquidas entre 5 y 10 mL

LAS MUESTRAS NO DEBEN CONTAMINARSE CON ORINA

UTILIZAR FRASCOS DE BOCA ANCHA, CON TAPA PARA IDENTIFICAR
NO ES NECESARIO QUE EST ESTRIL- LIMPIO
NO SE DEBE REFRIGERAR LA MUESTRA

TIPO DE EXAMNES:
PROCEDIMIENTO:

Coprocultivo
Parasitolgico seriado
Leucocitos fecales
Test de Graham
Thevenon
Hisopado rectal

Eficaz en el aislamiento de Neisseria gonorrhoeae, Campilobacter spp, Shigella spp,

C. difficile, virus del Herpes simplex y en portadores anales de Streptococcus
pyogenes.

COPROCULTIVO

Esta muestra se utiliza para el diagnstico etiolgico de

gastroenterocolitis aguda.
Excepcionalmente para la bsqueda de portadores de
Salmonella sp. En los laboratorios se realiza bsqueda
de Salmonella y Shigella.

En el caso de bsqueda de portadores de Salmonella, se

deber fundamentar adecuadamente el pedido y se
necesitan 3 muestras negativas para asegurar que el
paciente no es portador.

Las muestras para coprocultivo, debern tomarse antes

de la administracin de antimicrobianos y preferiblemente
antes de tomar antidiarreicos.

PARASITOLGICO SERIADO O
COPROPARASITARIO

Deteccin de parsitos como:

Helmintos (Ascaris, taenias)

Huevos o larvas de helmintos

Protozoos (Gardia)

Test de Graham
Deteccin de un parasito llamado:
Enterobius vermicularis -Oxiuriasis

Se toma una muestra diaria hasta completar 3

Cada da se toma una nueva

Se toma la muestra en la maana, antes de

cualquier actividad, aseo y antes defecar u

orinar

HEMOCULTIVO
OBJETIVO:

Determinar la presencia de microorganismos en la

sangre, como bacterias, micobacterias u hongos.

Frascos para Hemocultivo

HEMOCULTIVO
INDICACIONES:
Fiebre alta (>38.3 C).
Estado de shock no explicado por
causas hemodinmicas.
Infecciones localizadas que pueden
complicarse con bacteremia como
neumona, pielonefritis, meningitis,
infecciones
intraabdominales,
infecciones complicadas de la piel o
tejido celular subcutneo.
La
presencia
de
leucopenia,
leucocitosis o trombocitopenia no
relacionada
con
procesos
hematolgicos.

PROCEDIMIENTO:

MUESTRAS FARINGEAS Y AMIGDALARES

MICROORGANISMOS DEL AIRE POR ASPIRACIN DE HUMO, SMOG Y
POLVO , EL CUAL CONTIENE INNUMERABLES PATGENOS.

OBJETIVO:

Se utiliza para el diagnstico de faringitis estreptocccica.

Entre el 10-20% de las faringitis agudas en nios de 5-10
aos, estn ocasionadas por Streptococcus pyogenes.
Otras bacterias patgenas son: estreptococos grupos C o
G, C.diphteriae,H.influenzae (epiglotitis) .

FARINGITIS
Las manifestaciones:
Fiebre, dolor de garganta, edema,
inflamacin de las amigdalas y paredes
de la faringe.
Un exudado conteniendo pus se observa en
las infecciones por
S. pyogenes. Las
faringitis virales son de comn ocurrencia y
la nica forma de determinar el agente
etiolgico es efectuando un cultivo
farngeo.
Streptococcus pyogenes: Streptococcus

grupo A, se manifiesta en los meses de

mayor fro, y su complicacin mayor es
la
fiebre
reumtica,
y
la
glomerulonefritis
por
lo
cual
el
diagnstico del Streptococcus es tan
importante.

Corynebacterium diphteriae, es el agente

etiolgico de la difteria, enfermedad que
se presenta en nios, con dolor farngeo
y formacin de una pseudomembrana
sobre las amigdalas y al fondo de la
garganta.
Linfoadenopata
regional,
edema , aliento ftido, fiebre baja y tos.

TOMA DE MUESTRA
HISOPADO
FARINGEO:
criptas tonsilares y
la faringe posterior

MUESTRAS NASALES
OBJETIVO:

Esta muestra solo se utiliza para buscar

portadores de S.aureus o en el diagnstico
etiolgico de imptigo.
No es til para el diagnstico etiolgico en
casos de rinitis, rinosinusitis ni en casos de
otitis media ni cuadros respiratorios altos
prolongados

NMERO DE MUESTRAS Y/O VOLUMEN

Basta con un hisopo ligeramente hmedo

HISOPADO NASAL:

HISOPADO
NASOFARINGEO

CATTERES
OBJETIVO:
Nos va a permitir en ocasiones conocer el
agente causal de una bacteriemia relacionada
con el catter y por otra parte, prevenir que
aparezca dicha bacteriemia.
El 82% de las bacteriemias nosocomiales se
relacionan con la presencia de catteres.

TOMA DE MUESTRA:

LIQUIDOS ESTRILES LCR

OBJETIVO:
Para el estudio de agentes causantes de meningitis septica.
Los agentes infecciosos ms comunmente identificados incluyen
N. meningitidis, S. pneumoniae , H. influenzae, S. agalactiae
Otros agentes menos frecuentes son: Enterobacterias,
C.
neoformans, C. albicans, algunos BGNF, S. aureus entre otros.

VOLUMEN:
Para el estudio bacteriolgico rutinario es suficiente 1 ml,
aunque es preferible disponer de volmenes superiores.
Para hongos o micobacterias se necesitan al menos 2 ml
adicionales ms por cada uno de los estudios, siendo deseable
llegar a los 10 mL.
Para estudio de virus se necesita por lo menos 1 mL ms.

CONSIDERACIONES:
El producto debe enviarse inmediatamente al Laboratorio,
pues alguno de los agentes etiolgicos como S.
pneumoniae, pueden lisarse rpidamente a partir de una
hora tras su recogida.
Si no es posible se mantendr en estufa a 35-37C y una
parte se incubar en un frasco de hemocultivo que se
mantendr
en
idnticas
condiciones
hasta
su
procesamiento en el laboratorio.
Si no se dispone de estufas se mantendr a temperatura
ambiente.
Nunca deber refrigerarse pues se puede afectar la
viabilidad de N. meningitidis y H. influenzae.

TOMA DE MUESTRA LCR:

EXTRACCIN DE SANGRE
PERIFRICA
1. Colocar sobre la mesa de trabajo todo el material que se
necesitar para ejecutar la obtencin de la muestra.
2. Lavarse las manos previamente a la extraccin de la
sangre y si es preciso colocarse guantes.
3. El paciente deber sentarse cmodamente de manera
que el brazo quede colocado paralelamente a la mesa de
trabajo, donde se realizar la extraccin se sangre.
4. Apoyar el brazo del paciente sobre un pequeo cojn bajo
el codo. Con la palma de la mano hacia arriba.

5. Colocar la ligadura aproximadamente dos dedos por

encima de la flexin del codo. sta se deber ajustar solo
lo suficiente para aminorar la corriente sangunea y
dilatar la vena.
6. Pedir al paciente que abra y cierre la mano varias veces,
para favorecer la dilatacin de las venas.
7. Con el dedo ndice palpar la vena.
8. Desinfectar la zona donde se realizar la puncin.
9. Tomar la jeringa con la mano derecha, colocar la yema
del dedo ndice sobre la base de la aguja.
10.Colocar la aguja sobre la vena con el bisel hacia arriba,
introducir la aguja de 1 a 1,5 cm aproximadamente.
11.Luego de extraer la sangre por puncin venosa, retirar la
aguja de la jeringa y colocarla en un depsito de metal
(para autoclavar o incinerar); verter lentamente la sangre
en un tubo o en el caldo de cultivo.

TRANSPORTE Y ENVO DE MUESTRAS

Consideraciones:
Mantener la muestra lo ms cerca posible de su
estado original con un deterioro mnimo.
Evitar condiciones ambientales adversas (fro o
calor extremo, desecamiento excesivo)
Deben ser trasladadas al laboratorio lo mas pronto
posible (Lmite: 2horas y se aconseja utilizar medios
de transporte y en otros casos usar refrigeracin)
Deben ser debidamente empaquetadas (evitar
golpes)
Deben ser debidamente rotuladas (bioseguridad)

TRANSPORTE Y ENVO DE MUESTRAS

TRANSPORTE
Hisopos estriles individualizados en envase que lleva el medio
de transporte:
Tamponado
Sin nutrientes
Indicador de pH o de la presencia de oxgeno
- Stuart: para exudados farngeos, conjuntivales, nasales,
de heridas
- Cary-Blair: para heces, es bueno para recuperar
Salmonella, Shigella o Vibrio

ENVO (SI ES PRECISO)

Refrigeradas (excepto LCR)
Evitar rotura de los envases
La sangre no se enva entera. Se separa el suero y se enva
ste

correcto

incorrecto