NIVERSIDAD NACIONAL DE

EDUCACIN
Enrique Guzmn y Valle
LA CANTUTA

BIOLOGIA CELULAR
MEDICIONES MICROMETRICAS

INTEGRANTES: Rivera Gonzales Sandra

Teves Mendoza Joel
SECCIN: C-7
PROMOCIN: 2015

2016

MEDICIONES MICROMETRICAS
FUNDAMENTO
Es importante conocer la cintica de crecimiento de los cultivos microbianos porque es
necesario poder predecir cmo va a evolucionar un cultivo, cmo va a ir
consumindose el substrato y cmo se va a ir acumulando el producto de una
fermentacin. Sin conocer estos factores es muy imprudente iniciar el cultivo en un
fermentador de 10.000 litros, por ejemplo, con el coste que ello supone, puesto que no
podemos predecir qu va a pasar, cundo va a completarse el crecimiento, cmo se
va a acumular el producto, etc. Las clulas aisladas cultivadas en un volumen finito de
medio de cultivo apropiado van utilizando los nutrientes que tienen disponibles con la
mayor eficiencia y rapidez que pueden, sintetizando sus propios componentes
celulares y dividindose en cuanto han podido duplicar su masa y su material gentico.
El tiempo que tarda una clula en hacer. Cada vez que transcurre un tiempo de
generacin, el nmero de clulas se duplica, siguiendo, por tanto, un incremento
exponencial.
La preparacin de medios para el desarrollo de procesos de fermentacin es una
etapa fundamental para asegurar la productividad de los mismos. Donde los
componentes de los medios constituyen los efectores externos de naturaleza qumica
que desempean un rol esencial en los procesos ya que deben cumplir con los
requerimientos del crecimiento y de formacin de productos y adems suministrar
energa para la sntesis de metabolitos y para el mantenimiento celular.

MATERIALES
Suspensin de carbohidratos.
Cmara de Neubauer.
Agua destilada.
Microscopio.
Balanza.
Matraces.
Pipetas.
Azcar.
Estufa.

PROCEDIMIENTO

Se coloca un cubreobjetos sobre la cmara de Neubauer, y se coloca en posicin

horizontal sobre la mesa, en un lugar donde nos sea cmodo pipetear.
2) se introduce una punta desechable en el extremo de la micropipeta.
3) se ajusta la micropipeta para succionar 10 uL de lquido. Generalmente este ajuste
se realiza girando el botn del embolo para seleccionar el volumen deseado.
4) se introduce la punta de la micropipeta en la muestra.
5) Se pulsa el pistn o embolo superior de la pipeta suavemente hasta que se siente
como el pistn llega al final de su recorrido.
6) Se saca la punta de la pipeta de la muestra, y siempre mantenindola en posicin
vertical se lleva hasta la cmara de Neubauer.
7) Se coloca la punta de la pipeta en el borde del cubreobjetos, en el extremo de la
cmara de Neubauer. Se trata de dejar que el lquido penetre entre la cmara y el
cubreobjetos desde el lateral, por capilaridad.
8) Se suelta el pistn suavemente mientras se supervisa que el lquido est entrando
correctamente y de forma uniforme en la cmara.
9) En caso de que aparezcan burbujas, el cubreobjetos se haya movido o algo no haya
salido bien, repetir la operacin.
Ya tenemos la cmara de Neubauer cargada, lista para el recuento celular.
PREPARACIN Y ENFOQUE DEL MICROSCOPIO
1. Colocar la cmara de Neubauer en la bandeja del microscopio. Si el microscopio
dispone de pinza de sujecin, fijar la cmara con ella.
2. Encender la luz del microscopio.
3. Enfocar el microscopio hasta que pueden verse ntidas las clulas mirando por el
binocular. 4. Buscar el primer cuadro donde vaya a realizarse el recuento. En este
ejemplo vamos a contar.
5 cuadros grandes de una cmara de Neubauer Improved de 0,1mm de profundidad.
6. Anotar en una hoja de resultados la cantidad de clulas contadas en el primer
cuadro.
7. Repetir el proceso para el resto de los cuadros que deseamos contar, anotando el
resultado de cada uno de ellos. Cuantos ms cuadros contemos, ms precisin
obtendremos en nuestra medida.

CUESTIONARIO

1.- Explique usted qu aplicaciones tiene el uso de la cmara de Neubauer.

*

2.- Cmo es que se reproduce la levadura y por qu necesita un ambiente

anaerbico?
* Las levaduras son microrganismo que pertenecen al reino funji (hongos), estos
son heterotrficos. Las levaduras se reproducen de forma asexual, como clulas
individuales por gemacin, para ser mas exactos por fisin.
* Las levaduras son anaerobias ya que estas obtienen energa sin presencia de
oxgeno, lo que hacen es degradar la glucosa y convertirla en ATP y de esta
manera respiran. Se le conoce tambien con el nombre de fermentacin.
3.- Elabore la grfica de crecimiento en interprete.

4.- Conclusiones y/o comentarios.

* Se conoci el procedimiento y uso de la cmara de Neubauer para el recuento de las
clulas.
* Se reconoci los errores al momento de buscar con el microscopio los recuadros
para el conteo de las clulas de la levadura.

Bibliografa
A., A. (1995). Microbiologa de las fermentaciones industriales. (7 ed.).
Zaragoza: Acribia.
http://celeromics.com/es/resources/docs/Articles/Conteo-CamaraNeubauer.pdf. (s.f.).
http://tertuliadeamigos.webcindario.com/. (s.f.).
http://www.cuinant.com/elllevat1.htm. (s.f.).
P., D. (1998). Biotecnologa de la fermentacin, Primera Edicin. Zaragoza:
Acriba S.A.