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I.
INTRODUCCION
La mayora de los mtodos de anlisis son en los casos ms favorables selectivos, pero
no especficos. Por ello, cuando se trata de muestras complejas la separacin del
analito de las posibles interferencias es una etapa esencial. An mejor sera la
posibilidad de determinar varios analitos despus de una separacin previa.
Uno de los mejores mtodos para conseguir esa separacin, y posiblemente, el ms
utilizado es la cromatografa. Este conjunto de tcnicas permite la separacin de
componentes estrechamente relacionados en mezclas complejas. La cromatografa en
sus orgenes era exclusivamente una tcnica de separacin que se transform en
tcnica de anlisis cuando se acopl con un dispositivo para monitorizar las especies
qumicas que se iban separando. As, la cromatografa se ha convertido en un mtodo
analtico de primer orden para separar, identificar y cuantificar los compuestos
presentes en muestras lquidas o gaseosas (para muestras slidas se requiere una
etapa de disolucin o extraccin).
En cromatografa, los solutos se separan en base a la distinta velocidad de
desplazamiento cuando son arrastrados por una fase mvil a travs de un lecho
cromatogrfico que contiene a una fase estacionaria (slida o liquda).
La muestra se disuelve en la fase movil y se hace pasar a travs de la fase
estacionaria (inmiscible con la mvil) que se mantiene fija en una columna o sobre una
superficie plana. Las dos fases se eligen de tal modo que los componentes de la
muestra se distribuyen de modo distinto entre las dos fases. Aquellos que son
fuertemente retenidos por la fase estacionaria se mueven lentamente con el flujo de
fase mvil, mientras que los que se retiene dbilmente avanzan con ms rapidez.
Existen dos modelos para explicar la cromatografa
Teora de platos viejo
II.
MARCO TEORICO
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Teora de platos
Considera que una columna cromatografa est constituida por una serie de capas
estrechas, discretas pero contiguas, denominadas platos tericos, en los cuales se
establece el equilibrio de distribucin de cada soluto entre la fase mvil y la fase
estacionaria.
Podemos definir, entonces, plato terico como la longitud de una columna en la que el
soluto experimenta un equilibrio completo entre las dos fase. El nmero de platos tericos
N de una columna de longitud L ser:
Cuantos ms platos tericos formen una columna mayor ser su eficacia (o lo que es lo
mismo, cuanto menor sea la altura de plato mayor ser la eficacia).
Como los picos cromatogrficos tienen forma de curva gaussiana, la anchura de cada
pico est directamente relacionada con la varianza () o la desviacin estndar (). Por
lo tanto, la altura de plato terico H se puede definir en funcin de dichos parmetros
como:
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Se puede deducir que el nmero de platos tericos se relaciona con parmetros que
pueden deducirse fcilmente de un cromatograma:
Estos tres factores se relacionan con la altura de plato mediante la ecuacin de van
Deemter
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Para realizar la representacin de van Deemter, es necesario calcular primero el valor del
nmero de platos tericos (N) y el de HETP (H) en cada condicin de flujo de fase mvil
y, para ello, triangular el pico. La triangulacin del pico se hace prolongando la lnea base
y despus trazando las tangentes al punto de inflexin, segn el esquema que se
presenta en la Fig. 3. El tringulo formado tiene una base que es la porcin de la lnea
base intersectada por las tangentes dibujadas en el pico y una altura desde esta base
hasta el punto de corte con las tangentes. De esta manera se obtiene el valor de la
anchura en la base ( b=4 ) y a media altura ( 1/2=2,35 ). Mediante esta representacin,
tambin se calcula la altura del pico (h), desde el punto de corte de las tangentes hasta la
anchura en la base. La altura a media anchura (h1/2) es justo la mitad del valor de h.
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III.
BIBLIOGRAFIA
https://lidiaconlaquimica.wordpress.com/2015/08/10/ensanchamiento-de-bandaextracolumna-en-hplc/
http://pendientedemigracion.ucm.es/info/cvicente/reduca/5.pdf
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