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DETECCIN DE NEISSERIA MENINGITIDES POR PCR | Elaborado por:

Vanessa Ros

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO


FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE MEDICINA
ASIGNATURA: MICROBIOLOGA PRCTICA II
ENSAYO DE INVESTIGACIN BASADO EN LA PRCTICA Y LABORATORIO

TEMA: DETECCIN DE NEISSERIA MENINGITIDES POR PCR

ELABORADO POR: Vanessa Ros


CUARTO SEMESTRE A
DOCENTE: ING. FLIX FALCONI
FECHA DE PRCTICA: 21 de Julio del 2016
FECHA DE ENTREGA: 28 de Julio del 2016
PERODO: ABRIL AGOSTO 2016
RIOBAMBA - ECUADOR

RESUMEN
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DETECCIN DE NEISSERIA MENINGITIDES POR PCR | Elaborado por:


Vanessa Ros
El presente trabajo tiene la finalidad de comprender la importancia de realizar la
extraccin de ADN mediante PCR, ya que hoy en da existen bacterias microscpicas
que utilizando los cultivos tradicionales son difciles de identificar por esa razn en esos
casos particulares y que necesitan un diagnstico inmediato se utiliza el mtodo de
Reaccin en cadena Polimerasa a travs de la electroforesis, en un gel llamado agarosa
para poder identificar el ADN del microrganismo que est causando los sntomas del
paciente obteniendo como resultados un diagnstico seguro y sobretodo poder aplicar,
el tratamiento especfico para llegar a la cura de la enfermedad
INTRODUCCIN
La meningoencefalitis bacteriana (MEB) constituye una amenaza para la vida, ya que
afecta el sistema nervioso central (SNC) y se ubica entre las causas principales de
muertes en los nios menores de cinco aos, es por esto que resulta de vital importancia
realizar un diagnstico rpido y exacto, junto a un tratamiento efectivo . La
identificacin del agente causal constituye una valiosa herramienta en la conducta
teraputica a emplear y para el sistema de vigilancia epidemiolgica. El diagnstico
bacteriolgico permite identificar a los microorganismos capaces de provocar esta
patologa. Actualmente, este diagnstico adquiere mayor importancia, debido a la
incorporacin de las vacunas contra N. meningitidis en el Programa Nacional de
Inmunizacin. Los mtodos tradicionales de diagnstico incluyen el examen
microscpico directo y el cultivo del microorganismo a partir de las muestras clnicas
(LCR). El primero no tiene buena sensibilidad, y el cultivo presenta el inconveniente de
que su resultado puede demorar 24-72 h y en aquellos pacientes con tratamiento
antimicrobiano previo, puede resultar negativo.
La sensibilidad y especificidad del PCR convierten a esta tcnica en un mtodo
complementario a los mtodos convencionales utilizados en el diagnstico de las
enfermedades infecciosas . Para la deteccin de las principales especies patgenas
involucradas en la MEB de forma individual, se emplean distintos ensayos con
diferentes genes como blanco. No obstante, encontrar un gen que permita la deteccin
simultnea de varias especies, en este caso cuatro, se hace complicado y hasta ahora se
ha utilizado fundamentalmente al ARNr, especialmente el 16S ARNr.

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El problema radica en el procedimiento que tiene este mtodo ya que, la manipulacin
necesaria en la mayora de los protocolos de extraccin del ADN descritos los hace
propensos a la contaminacin cruzada de las muestras; adems, es necesario utilizar
reactivos y procedimientos agresivos dentro de nuestro medio es importante porque, es
una bacteria de difcil identificacin y que necesita ser tratada inmediatamente por ende
este mtodo de PCR nos ayuda a identificar rpidamente a este parasito, el objetivo es
comprender la importancia de realizar la extraccin de ADN mediante PCR.
DESARROLLO
Neisseria meningitides
Neisseria meningitides a menudo denominada meningococo, es una bacteria gram
negativa que puede causar meningitis y otras formas de enfermedad meningoccica, por
ejemplo meningococemia, un tipo de sepsis potencialmente mortal. Esta bacteria se
conoce como coco porque es redonda y ms especficamente como diplococo porque
tiende a formar pares. Alrededor del diez por ciento de los adultos son portadores de
meningococos en la nasofaringe. 1
Como patgeno exclusivamente humano N. meningitidis es la principal causa de
meningitis bacteriana en nios y adultos jvenes y provoca deterioro del desarrollo y
muerte en el diez por ciento de los casos. Los meningococos producen la nica forma
conocida

demeningitis

bacteriana

epidmica,

sobre

todo

en frica y Asia. N.

meningitidis, que se transmite por contacto directo a travs de la saliva y las secreciones
respiratorias emitidas en forma de gotitas por los pacientes infectados al toser,
estornudar, besar y morder juguetes, para infectar las clulas se adhiere a ellas con sus
filamentos largos y delgados llamados pili y con la intermediacin de las protenas
expuestas en la membrana Opa y Opc, adems de con sus diversos factores de
virulencia.2
Reaccin en cadena de Polimerasa
La reaccin en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en ingls
(polymerase chain reaction),

es

una

tcnica

debiologa

molecular desarrollada

en 1986 por Kary Mullis. Su objetivo es obtener un gran nmero de copias de un


fragmento de ADN particular, partiendo de un mnimo; en teora basta partir de una
nica copia de ese fragmento original, o molde.3
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Esta tcnica sirve para amplificar un fragmento de ADN; su utilidad es que tras la
amplificacin

resulta

mucho

ms

probabilidad, virus o bacterias causantes

fcil
de

identificar

con

una enfermedad,

una

identificar

muy

alta

personas

(cadveres) o hacer investigacin cientfica sobre el ADN amplificado. Estos usos


derivados de la amplificacin han hecho que se convierta en una tcnica muy extendida,
sobre todo en el mbito de la investigacin forense, con el consiguiente abaratamiento
del equipo necesario para llevar a cabo dicha tcnica.4
CONCLUSION
Es muy importante este mtodo para poder diagnosticar rpidamente enfermedades que
no son fciles de identificar en los cultivos tradicionales, al utilizar este mtodo se pude
diagnosticar rpidamente el agente causal y dar un tratamiento adems de que, este
procedimiento debe ser hecho con rigurosidad y cuidado ya que posee reactivos
cancergenos y adems se puede perder la muestra de ADN al ser constantemente
manipulada.

BIBLIOGRAFA
1. Koneman, E. Diagnostico microbiolgico, Editorial mdico Panamericana,
2. Kenneth R. "Introduccin a las Enfermedades microbiolgicas" McGraw-Hill
Medical
3. Alberts B; Bray D; Lewis J; Raff M; Roberts K; Watson JD. Molecular Biology of the
Cell. 2002. Garland Publishing Inc. New York.
4. Bailey & Scott, Diagnstico microbiolgico, 11 edicin, Editorial Panamericana,
Buenos Aires Argentina, 2004.
5. Griffiths AJF, Miller JH, Suzuki DT, Lewontin RC, Gelbart WM. Gentica. 3a.
edicin. 2002.

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