CARBOHIDRATOS

David Colorado Vega 10120042

Universidad Icesi
Facultad de Ciencias Naturales
Laboratorio de Bioqumica
Santiago de Cali, Colombia
21 de febrero de 2013
1. OBJETIVOS

Almidn

Reconocer y aplicar los fundamentos

fsicos
y
qumicos
para
la
identificacin de carbohidratos en
muestras biolgicas.
Identificar
y
diferenciar
las
estructuras de los carbohidratos,
prediciendo reactividades qumicas
como la propiedad reductora de
algunos carbohidratos.

Agua,
Yodo y
Almidn
Agua y
3
Amarillo
Amarillo
Yodo
Nota: Las Sln se calentaron en bao de
mara por 10 minutos.
2

Violeta/Az
ul

Incoloro

Tabla #3: Resultados Hidrolisis de Almidn.

2. RESULTADOS
Tabla

Benedict.

#1:

Resultados

de

la

Prueba

Prueba de Benedict
Present
a
Carbohidr
Presento
Activida
ato
Precipita
d
(Sln)
do
Reducto
ra
Si
Si
Fructosa
Si
Si
Xilosa
Si
Si
Lactosa
Si
Si
Glucosa
Si
Si
Galactosa
No
No
Sacarosa
No
No
Almidn
Nota: Sln: Solucin acuosa
Tabla #2: Resultado de Prueba de yodo
para Almidn.

Prueba de Yodo para Almidn

Color
Color al
Composic
Tub
Inicial de Calentar
in de la
o#
la Sln
la Sln
Sln
1
Violeta/Az Negro/Incolo
Agua,
ro
ul
Yodo y

Nota: El estado de la hidrolisis se

determin con yodo y a partir de una
alcuota para cada muestra; las Sln
fueron sometidas a un bao de mara
despus del tiempo cero.
Tabla #4: Resultados de la Hidrolisis de
Sacarosa

Hidrolisis de la
Sacarosa
Sln acuosa de HCl con
Sacarosa
Observacion
Estado
es (Color de
la Sln)
Aumenta
Incolora
T
Disminuy
Incolora
eT
Adicin
de NaOH

Incolora

Adicin
Rx de
Benedict
Aumenta
T

Azul, Puntos
rojos
Rojo ladrillo

Nota: T=Temperatura.

*Las concentraciones usadas de cada

carbohidrato, en este caso mono y
polisacridos,
fue
de
0.1M
a
excepcin del almidn (1% v/v).

*Se us una concentracin de HCl y

NaOH suficiente para aumentar de
forma considerable el pH de una
solucin acuosa. Necesario para los
medios de reaccin del Rx de
Benedict (medio alcalino) o para la
Hidrolisis de Sacarosa (medio acido).
*Para el Rx de Benedict se emplearon
soluciones de 2.5ml.
*El yodo se adiciono en gotas.
3. ANALISIS DE RESULTADOS
Los carbohidratos son compuestos
orgnicos de gran abundancia en la
tierra, se encuentra ntimamente
involucrado en el metabolismo de
muchos seres eucariotas y procariotas
as como en auttrofos y hetertrofos.
Funcionan
como
transporte
y
almacenamiento
de
la
energa
qumica, como sealizador celular y
hasta en la formacin de estructuras
de soporte macro y microscpicas;
por ello y por todo lo dems, son
indispensables para la vida como la
conocemos.
As, el estudio de estos compuestos
puede ser de gran ayuda a la hora de
comprender el desarrollo de los
fenmenos responsables de la vida.

En el presente informe se llevaron a

cabo varios mtodos tiles y prcticos
para la identificacin de algunos
azucares comunes.
El primero mtodo empleado fue la
Prueba
de
Benedict.
Consiste,
bsicamente, en agregar a una
solucin acuosa de algn sacrido un
volumen pequeo del reactivo de
Benedict. Este reactivo contiene
soluciones de carbonato de sodio
(Na2CO3), sulfato de cobre (Cu2SO4) y
citrato de sodio; y lo que se pretende
es identificar aquellos sacridos con
propiedad reductora.
Es decir que estos sacridos son
capaces de hacer partes de una
reaccin de tipo oxido/reduccin
(Redox). Donde el carbohidrato es el
agente reductor (cede electrones y se
oxida) y el Cu2+ es el agente oxidante
(gana electrones y se reduce a Cu +);
como se explica en el siguiente
esquema [1]:
[1]
Azcar reductor + Cu2+ Azcar
oxidado
+
Cu+
[2]

Cu+ + OH- CuOH (de color

amarillo)

2 Cu+ + 2OH- H2O + Cu2O (de

color rojo)

De lo anterior tenemos que en un

medio acuoso, si el azcar es
reductor, la solucin ha de cambiar su
color original hacia un amarillo/rojo
una vez precipite el Cobre; bajo un
bao de mara durante unos 10
minutos.
El Na2CO3 tiene como objetivo
alcalinizar la solucin donde se
encuentra el azcar, para lograr que

este pase de su estructura cclica a

una lineal, y as lograr que el Cu2+
se reduzca a Cu+ por parte del grupo
carbonilo (C=O) que hace parte de las
aldosas o cetosas. Segn el siguiente
esquema:
[3]

Na2CO3 + 2H2O H2CO3 +

2NaOH
Donde, del lado de los productos
tenemos un cido dbil (H2CO3) y
una base fuerte (NaOH). Por lo tanto
el hidrxido de sodio proporciona los
iones OH- necesarios para que se
forme el precipitado de Cu2O del
esquema [1]. Pero adems, reacciona
con
el
hidrxido
del
carbono
anomenrico en un ataque nucleofilo,
obligando al azcar a adoptar su
conformacin de aldehdo o cetona
(lineal), segn sea el caso, para que
suceda la reaccin Redox.

Los resultados para esta prueba se

reportaron en la Tabla #1, las
estructuras
de
la
Figura
#1
corresponden a los azucares de los
que se obtuvo un resultado positivo
en la Prueba de Benedict. Se pudo
apreciar como en cada uno de ellos el
carbono anomerico se encuentra con
su grupo hidroxilo libre para
interaccionar con el medio alcalino, y
enseguida actuar como un agente
reductor [3].
Por el contrario, en el caso de la
Sacarosa:

Figura #2
Ninguno de los carbonos anomericos
de los monosacridos constituyentes
de la Sacarosa (Fructosa y Glucosa;
Vase Figura #1) poseen el grupo
hidroxilo libre y por lo tanto no es
un azcar reductor, lo que se
confirm en la obtencin de un
resultado negativo para la prueba de
Benedict.
Anlogo a lo anterior, el caso del
almidn puede explicarse a partir del
mismo principio:

Figura #1

(1) Fructosa; (2) Xilosa; (3) Glucosa; (4)

Galactosa; (5) Lactosa

Por ello se encontr ms razonable el

argumento que sustenta la formacin
del complejo, en donde el calor
termina por romper los enlaces entre
las molculas de glucosa que
componen el Almidn; de este modo
a medida de que avanza el tiempo la
estructura del Almidn se hace cada
vez menos ramificada y simple
pasando
de
polisacrido
a
monosacridos de glucosa.
Figura #3

Fragmento de una molcula de Almidn

(amilopectina). El monmero que le
constituye es la glucosa.

Se infiri entonces que si en la

Sacarosa o el Almidn se rompieran
los enlaces (1-4) o
(1-6)
segn sea el caso, entonces sus
monmeros de azcar, que si son
reductores,
presentaran
en
las
condiciones indicadas, una prueba de
Benedict positiva.
Durante la prueba de Yodo para el
Almidn (Vase: Tabla #2) se pudo
comprobar que el gran tamao y las
ramificaciones de un polisacrido
como el almidn permite que su
interaccin con el Yodo no se d a
travs de una reaccin qumica, si no
a partir de la formacin de un
complejo gracias a las fuerzas
electrostticas
entre
ambos
compuestos.
El calor es un excelente catalizador
de las reacciones qumicas, porque a
nivel molecular, estimula la energa
interna (U) de las molculas; si la
Prueba de Yodo para Almidn fuese
una reaccin qumica, al avanzar en
el tiempo el color Azul/Violeta de la
solucin, producto de la interaccin
Yodo/Almidn, debera incrementar;
pero el resultado demuestra lo
contrario.

En ese orden de ideas, aunque

durante la prctica no se realiz,
podra comprobarse la explicacin
anterior realizando una prueba de
Benedict pero aquellos tubos con
almidn que presentaron la coloracin
Azul/Violeta y que con el tiempo se
tornaron traslucidos, en donde la
prueba dar seguramente positivas
por la presencia de glucosa.
Esta inferencia se vio apoyada en los
resultados obtenidos para la Hidrolisis
de Almidn (Vase Tabla #3). En
donde bsicamente se sigue el mismo
principio fsico explicado para la
Prueba de Yodo para Almidn, pero en
esta ocasin se hizo un seguimiento
ms detallado de las rupturas de los
enlaces por accin del calor dentro de
la estructura del Almidn.
La
progresiva
degradacin
del
almidn de interpreto con la prdida
del color de la solucin; transcurridos
90 minutos se realiz la prueba de
Benedict, en la que se obtuvo, como
ya se haba predicho, un resultado
positivo.
Para la hidrolisis de la Sacarosa se
obtuvieron resultados homlogos a lo
sucedido con la Hidrolisis del Almidn,
solo que en este caso adems de
haber empleado el calor como
catalizador de la hidrolisis tambin se
us una solucin concentrada de HCl.

Por un lado, el cido clorhdrico es un

cido fuerte, y en medio acuoso:
[4]

HCl + H2O Cl- + H3O+

Donde el H3O+ es el ion hidronio y
tambin suele representarse, por
simplicidad, como H+.
Por otro lado, el enlace entre los
monosacridos glucosa y fructosa,
que en ltimas conforman a la
sacarosa, se denomina O-glicosidico
por que en el interviene un tomo de
oxigeno (tambin hay del tipo Nglucosidico).
El
oxgeno,
aun
formando dos enlaces en la molcula
de sacarosa, posee una carga parcial
negativa; y en un medio acido, con
incrementada concentracin de iones
H+, puede reaccionar fcilmente para
formar el grupo OH- produciendo en
este caso la hidrolisis de la molcula
de sacarosa.
Por consiguiente, despus de calentar
la solucin de sacarosa en un medio
acuoso, la teora sugiere que se
obtendr una solucin de glucosa y
fructosa en medio acido; para
comprobarlo
podramos
tambin
emplear el reactivo de Benedict, pero
el medio acido no permitira que la
reaccin Redox ocurra correctamente,
explicando as la necesidad que hubo
de neutralizar la solucin con NaOH y
en ultimas alcalinizar el medio para
finalmente confirmar la presencia de
azucares reductores en la muestra
(Glucosa y Fructosa).
CONCLUSIONES

Para identificar la presencia de

almidn en una muestra, la prueba de
yodo
para
almidn
sigue
un
fundamento fsico, precisamente las
interacciones electrostticas entre
molculas para la formacin de
complejos.
Las pruebas que identifican azucares
reductores se basan en principios
qumicos,
precisamente
en
las
reacciones redox, en donde se
emplea un agente fcil de oxidar;
como el ion Cu2+, tanto en la prueba
por reactivo de Benedict como en el
reactivo de Fehling[2].
La variedad de estructural de los
sacridos nos demuestra porque la
naturaleza ha evolucionado para
poder ser especfica a la hora de
emplearlos.
REFERENCIAS
[1] H.D. Durst, G.W. Gokel; Qumica
Orgnica
Experimental;
Reverte;
2007; Espaa; pp. 484 485.
[2] T.A. Geissman; Principios de
Qumica Orgnica; 2da edicin;
Reverte; 1974; Espaa; pp. 357 358.
[3] L. Stryer, J.M. Berg, J.L. Tymoczko;
Bioquimica; 4ta edicin; Reverte;
2007; Espaa; pp. 309 310.