Prueba-Trabajo Introduccin a la Biologa Molecular

Nombre: Claudio C. Daz

Carrera: Ing. Qumica Ambiental

Profesor: Jos Lpez

Item I) tercera unidad: Cmo explicara a una persona que no tiene conocimientos de biologa
molecular, la siguiente oracin? ciertos neurotransmisores u hormonas pueden reducir la
produccin de AMPc, ya sea disminuyendo la sntesis basal o bien inhibiendo selectivamente la
formacin inducida por complejos ligando-receptor, acoplados con las protenas G.
Lo explicara primero por partes que es cada cosa, de manera cientfica y luego de manera ms amigable,
porque si es una persona sin conocimientos de biologa molecular, no posee conocimiento acerca de las
definiciones, ergo le explicara que significa cada concepto:
1) Neurotransmisor: Las sinapsis son los sitios donde tiene lugar un mecanismo de transduccin
mediante el cual las seales elctricas se convierten en seales qumicas y estas nuevamente en
seales elctricas. A nivel de las terminaciones nerviosas se producen sustancias activas de bajo
peso molecular (acetilcolina, noradrenalina, dopamina, glutamato, etc.), que estn contenidas
dentro de las vesculas sinpticas en cantidades multimoleculares. En resumen, son molculas
liberadas a partir de un impulso elctrico por los botones sinpticos de las neuronas a otras
neuronas. (De Robertis, 1981)
2) Hormonas: son molculas que transfieren la informacin desde un grupo de clulas hacia otro
ubicado a cierta distancia del primero. Por ejemplo, las clulas del lbulo anterior de la hipfisis
producen hormonas llevadas por el torrente circulatorio, que controlan a la tiroides, las gnadas,
la suprarrenal o el crecimiento del cartlago. Resumiendo, son molculas que transfieren
informacin, a largas distancias dentro del cuerpo, para la formacin o inhibicin de determinadas
protenas. (De Robertis, 1981).

3) AMPc: Nucletido que se genera a partir del ATP o la adenilato ciclasa en respuesta a varias
seales extracelulares. El cAMP acta como molcula seal intracelular. Principalmente activando
la quinasa dependiente de AMP cclico (PKA). Se hidroliza a AMP mediante una fosfodiesterasa
Es un nucletido que se genera a partir de ATP, fuente principal de energa en el cuerpo humano,
y que acta de mensajero de seales. (Alberts, 2008).
4) Sntesis basal: Se refiere a la sntesis de la molcula a la que se le est impidiendo su formacin,
sea la AMPc.
5) Complejo ligando-receptor: Es el complejo formado cuando la molcula seal (ligando) que se
encuentra en el medio extracelular, es captada por el receptor tambin encontrado en el medio
extracelular, tambin puede ser llamado receptor de superficie.

6) Protenas G: es una protena compuesta por una triada de subunidades (tambin llamado
trmero): alfa, beta y gamma. La cual estar en el citosol de manera inactiva, hasta que la
formacin del complejo ligando-receptor.
7) Receptor acoplado a protena G: Receptor de superficie celular, que atraviesa la membrana siete
veces que, cuando es activado por su ligando extracelular, activa a una protena G la cual, a su vez,
activa una enzima o un canal inico de la membrana plasmtica. Es un lugar de captacin para
un neurotransmisor u hormona. (Alberts, 2008)

Luego explicara tratando de ser lo ms claro posible:

hay dos tipos de molculas que van a inhibir la formacin de AMPc dentro del cuerpo, los
neurotransmisores y las hormonas, en que se diferencian, en que el neurotransmisor posee una vida ms
corta que la hormona, esto es debido a que la hormona debe viajar un largo trayecto por lo que se va a
demorar ms en su degradacin. El neurotransmisor est ubicado al final de las neuronas y estos pasan
de una neurona a otra debido a un impulso elctrico.
Para entender cmo puede decrecer la sntesis de AMPc, primero debemos explicar su formacin. Segn
Alberts Los receptores acoplados a protenas G actan regulando de forma indirecta la actividad de una
protena diana ligada a la membrana plasmtica, que por lo general es una enzima o un canal inico. La
interaccin entre el receptor y la protena diana esta mediada por una tercera protena, denominada
protena trimerica de unin a GTP (o protena G). sea que las protenas diana estarn en la membrana
plasmtica y esta a su vez estar acoplada a un receptor, este receptor (medio extracelular) al ser ocupado
por una molcula, la protena G que en su estado inactivo posee GDP (acoplado a la subunidad alfa) se
adhiere a la protena que posee el receptor, el GDP en la molcula se intercambia por una molcula de
GTP. Esto genera que la protena G se adhiera a una enzima que en este caso puede ser la adenilato ciclasa,
esta enzima convierte el ATP en AMPc.
El AMPc generado se inserta en una protena quinasa (enzima) inactiva, generando reacciones sucesivas
hasta la formacin de Glucosa-6-fosfato, que puede pasar a una ruta metablica denominada
fosfogluconato. La subunidad alfa a su vez hidroliza el GTP a GDP y vuelve a unirse al complejo alfa, beta
y gamma.
Sabiendo esto habr dos posibles formas en las que estas molculas podrn inhibir la formacin de AMPc
a) Bloqueando el receptor con un neurotransmisor u hormona de manera que no se genere la unin
ligando-receptor y as no se genere el AMPc.
b) Implantando en el receptor un neurotransmisor u hormona que sea inhibitoria, en este caso la
hormona o neurotransmisor tiene que ser especfica para el receptor al cual se est acoplando y
al acoplarse este y no la molcula que gatilla la funcin de la protena G, no hay formacin de
AMPc.

Figura 1: proceso de formacin de AMPc a partir de una hormona estimuladora

Se sabe en la actualidad que existen otras hormonas que incrementan la concentracin de AMP cclico
en sus tejidos blanco, seguramente porque se unen a centros receptores especficos de la superficie de
las clulas que constituyen sus blancos y estimulan a la adenilato-ciclasa unida a la membrana. Este grupo
hormonal incluye a las hormonas de la pituitaria anterior, ACTH, LH, FSH y TSH. (Lehninger, 1980)

Item II) cuarta unidad: principales tcnicas moleculares.

1) Qu tcnica molecular utilizara usted para evidenciar la pregunta del tem I?
2) Por qu utilizo dicha tcnica y no otra?
1) El mtodo para protenas ms potente es el denominado Western blot en el que las protenas
son separadas en primer lugar mediante electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones
desnaturalizantes (s, el viejo y conocido SDS-PAGE) y posteriormente se transfieren a una
membrana, mediante la aplicacin de un campo elctrico perpendicular al gel (electroblotting).
Una vez completada esta operacin la protenas de inters son reveladas por el agregado de un
anticuerpo especfico. Por lo tanto utilizara la tcnica molecular llamada western blot.
(Universidad nacional de Quilmes, 2010)
2) Debido a que de las tcnicas moleculares anteriormente propuestas por el profesor en clases es
la nica que estudia la presencia de protenas y en el caso expuesto ac el trabajo de generar o de
inhibir el AMPc son de la protena G y las enzimas que se encuentran dentro del proceso como
por ejemplo adenilato ciclasa.
Lo que cabra esperar entonces sera separar la protena G y la enzima por separado y hacer el
proceso anteriormente explicado, para observar de manera clara si realmente as se producen las
reacciones de formacin de AMPc y que tipo de neurotransmisor u hormona inhiben su
formacin.

A pesar de que en la transferencia Western no existe hibridacin entre cidos nucleicos, se describe aqu
este mtodo por su similitud y mecanistica con las hibridaciones southern y northern. El ensayo western
se emplea para detectar las protenas presentes en una muestra. Para ello, son sometidas a electroforesis
en gel de poliacrilamida (separndose en funcin de tamao y carga, salvo en el caso frecuente de
electroforesis en presencia de SDS, que separa solo en funcin de tamao) y transferidas a una membrana
(western blot). La deteccin de las bandas proteicas en la membrana o filtro se realiza gracias a la unin
especfica de un anticuerpo contra la protena o regin proteica que se quiere estudiar. De forma similar
al marcaje y deteccin de sondas de cido nucleico, se puede marcar directamente el anticuerpo o
detectarlo mediante la unin de una protena ligante marcada a su vez, tanto empleando isotopos como
tcnicas no radiactivas.(Luque. J., 2006)

Bibliografa

Alberts. 2008. Biologa molecular de la clula.

De Robertis. E. 1981.Biologa celular y molecular. El ateneo.
Lehninger. A. 1980. Bioqumica. Omega.
Luque. J.2006. Biologia molecular e ingeniera gentica. Elsevier.
Pacheco. L. sin fecha. Mecanismos de control endocrino.
http://163.178.103.176/Tema1G/APortal/FisioGenCG/GyMOb1/Cap12Rhoades/Histo01.html
Universidad nacional de Quilmes. 2010. Pdf. https://ibcmunq.files.wordpress.com/2010/03/tp6.pdf.