_I ndstria de papel

Brancura
total
Pequena empresa desenvolve
enzima para alvejar a celulose
sem dano ambiental

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_maro DE 2012

m novo tipo de enzima para branqueamento de celulose, mais eficiente e

barata e que no causa problemas ambientais, poder chegar em breve ao
mercado. Ela foi desenvolvida pela
empresa Verdartis Desenvolvimento Biotecnolgico, que se originou de um grupo de pesquisas
da Universidade de So Paulo (USP) em Ribeiro
Preto. Entre as vantagens do novo produto esto
a reduo do volume de gua usada no processamento da madeira para a obteno da celulose e da
quantidade de dixido de cloro, o agente qumico
empregado no seu branqueamento. Alm disso, a
enzima pode ser personalizada, de acordo com as
caractersticas e necessidade de cada indstria de
papel. Para conseguir cri-la, a Verdartis contou
com os recursos de cinco projetos financiados
pelo programa Pesquisa Inovativa em Pequenas
Empresas (Pipe), da FAPESP.
O scio da empresa, Marcos Roberto Lourenzoni, formado no Departamento de Qumica da
Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto (FFCLRP), da USP, explica que a
celulose composta de elementos fibrosos que
so individualizados no processamento industrial
da madeira e adquirem uma colorao marrom
devido presena de lignocompostos. Para tornar
essas fibras adequadas para a fabricao de papis, o branqueamento uma etapa fundamental
em que so necessrios compostos qumicos de
custo alto e exigentes em cuidados especficos
durante o descarte na forma de efluentes industriais. Nesse processo, duas substncias qumicas remanescentes, a lignina e grupos chamados
de urnicos, so responsveis pelo consumo dos
reagentes presentes nas fibras e que podem ser
reduzidos com o emprego de enzimas.
O dixido de cloro reage com a lignina, responsvel pela colorao marrom, quebrando-a
em molculas menores, que so solveis e extradas no processo. Muito dessa lignina fica encapsulada pela polpa, o que exige maiores quantidades de dixido de cloro e outros reagentes
para acess-la. No caso das enzimas, elas so
especficas para atuar na quebra do substrato e

leo ramos

Ambiente

de outros componentes da celulose, como a lignina residual, explica Lourenzoni. Isso proporciona a criao de poros na polpa e possibilita
que o dixido de cloro acesse mais facilmente a
lignina. Com isso, necessria uma quantidade
menor de qumicos para alcanar o mesmo efeito. A vantagem uma reduo de custos.
Alm de reduzir os custos do branqueamento,
as enzimas desenvolvidas pela Verdartis podem
fazer o mesmo em relao ao gasto com a energia
eltrica necessria para o refino da celulose. Nessa etapa, a celulose diluda em gua, passando
por refinadores para provocar desfibrilamento
de macrofibrilas consumindo energia eltrica em
processo mecnico. A ao das enzimas quebra
grupos de celulose, facilitando a ao de refino
e, consequentemente, diminuindo o consumo de
energia eltrica.
Enzimas so protenas produzidas pelos organismos vivos que desempenham a funo de catalisadores, ou seja, tm a propriedade de acelerar
reaes qumicas. Para que possam ser usadas em
um processo industrial, no entanto, elas tm de
ser produzidas em grande quantidade, em pouco
tempo e com caractersticas especficas e desejadas. J existe no mercado uma srie de enzimas
para branqueamento de celulose. O problema
que elas so muito caras e liberam grande quantidade de material orgnico nos efluentes, que
exige tratamento e mais aumento de custos.
a que entra a tecnologia desenvolvida pela
Verdartis. Por meio de engenharia molecular (ou
engenharia gentica), a empresa produz, a partir
de microrganismos como a bactria Escherichia
coli, catalisadores personalizados para cada processo industrial ou cada fbrica de seus clientes.
Ou seja, criamos a enzima para o processo em
vez de modificar o processo para a enzima, diz
Lourenzoni. Alm disso, ela no solta resduos
na gua, o que a torna mais eficiente no mbito
econmico e ambiental.
Entre as tcnicas usadas para isso, est a chamada evoluo dirigida, tambm conhecida como
biotecnologia evolutiva. De forma mais rpida
que na natureza, ela reproduz em laboratrio

a evoluo da biodiversidade natural por meio

do mesmo mecanismo de seleo por adaptao ao ambiente. Na prtica, a evoluo dirigida
mimetiza o que ocorre na natureza, ou seja, na
evoluo natural (mutao, recombinao e seleo natural). A diferena que as propriedades
que se deseja para as enzimas so predefinidas
pelos cientistas.
Nessa tcnica, mutaes aleatrias so induzidas no DNA, dando origem a uma biblioteca
de genes modificados, na qual cada um deles codifica um catalisador. Nessa biblioteca h milhes de possibilidades ou combinaes, dentre
as quais algumas so boas solues para expressar
a caracterstica que se est buscando para uma
determinada enzima, explica Lourenzoni. Na
prtica, uma biblioteca com genes de enzimas
selvagens criada. Depois, cpias desses genes
so inseridas em vetores de expresso, que so
usados para transformar o microrganismo, no
caso da Verdartis, a E. coli.

biotecnologia

Genes para a evoluo

Dessa forma, um conjunto de bactrias, cada

uma com um determinado gene, vai produzir
uma enzima diferente. Um conjunto desses
selecionado, o que representa uma quantidade
bem pequena em relao a todas as combinaes
da biblioteca, pois impossvel processar e testar
todas as possibilidades geradas. Com esse conjunto possvel encontrar enzimas adaptadas para
atuar num determinado ambiente, que simula
as condies industriais desejadas, e selecionar
aquelas que forem funcionais. O passo seguinte
sequenciar o DNA dessas enzimas e verificar
suas mutaes. Os genes dessas melhores enzimas podem ser submetidos a recombinaes
visando evoluo, explica Lourenzoni.
Mas isso s no basta. Embora a evoluo dirigida seja muito mais rpida que a natural, no o
suficiente para sustentar o modelo de negcio de
enzimas parsonalizadas. O processo para criar uma
determinada enzima pode demorar meses, mas
a necessidade do mercado por novas imediata.
Por isso ele precisa ser acelerado. Para resolver
pESQUISA FAPESP 193

_ 67

US$5
bilhes
o valor das
exportaes de
celulose do Brasil
em 2011. O setor
cresceu 6,2%
em relao
ao ano anterior

o problema, a Verdartis desenvolveu um

software, chamado Artizima, usado para lidar com o nmero astronmico de
variantes de enzimas que so avaliadas
experimentalmente. O uso da ferramenta possibilita acelerar ciclos de evoluo
dirigida, minimizando o tempo do desenvolvimento de um catalisador especfico
para uma determinada funo.
O passo final da tecnologia a produo em escala laboratorial e posteriormente industrial fase que a empresa
ainda no atingiu. De qualquer forma,
Lourenzoni explica que esse processo
dividido em duas etapas: a primeira a produo propriamente dita em
fermentadores e a segunda, chamada
downstream, a de separao e purificao da enzima.
Bases da transformao

A biotecnologia foi inicialmente desenvolvida na tese de doutorado de Roberto Ruller, orientada pelo professor Richard John
Ward, do Departamento de Qumica da
FFCLRP. Aps o fim de seu prprio doutoramento, Lourenzoni foi trabalhar em
uma empresa de base tecnolgica, na qual
foi procurado por Ward, que queria saber
se ela se interessaria pela tecnologia. Como
o foco dela era tecnologia da informao, a
ideia no foi aceita. Decidimos ento, em
2006, abrir outra firma para transformar
a pesquisa feita pelo Ruller e Ward em
tecnologia, conta Lourenzoni.
Na poca, a Verdartis participou de
concursos de planos de negcios orga68

_maro DE 2012

nizados pela Incubadora de Empresa

de Base Tecnolgica Supera, criada em
2003, numa parceria entre a USP, a Fundao Instituto Polo Avanado em Sade (Fipase), a Prefeitura Municipal de
Ribeiro Preto e o Sebrae. Vencemos
o concurso em 2007 e um dos prmios
foi o direito de ter uma sala na incubadora, que era muito pequena e o espao
muito disputado, lembra o diretor da
Verdartis. Dessa forma, a empresa foi
criada em junho do mesmo ano, quando
submetemos um projeto Pipe do qual fui
coordenador.
O financiamento da FAPESP possibilitou empresa avanar no desenvolvimento de tecnologias a partir do que
foi transferido dos laboratrios de Ward.
Outros projetos apoiados pelo Pipe se seguiram. O segundo, aprovado em 2009,
foi para o desenvolvimento do bioprocesso para produo de enzimas. Ainda no
mesmo ano, a Verdartis teve um terceiro
projeto aprovado na FAPESP, dessa vez
um Pipe para a criao de software para auxiliar a desenvolver catalisadores
in silico (num computador). A empresa tambm recebe recursos da Financiadora de Estudos e Projetos (Finep)
e dos scios.
Em 2011, o quarto Pipe foi iniciado e
est em vigncia, com o objetivo de melhorar a eficincia cataltica de enzimas,
em altas temperaturas e pHs entre 8 e 10.
Em 2012 a Verdartis aprovou no edital
Pipe-III seu quinto projeto, para desenvolver parte do escalonamento do bioprocesso de produo de enzimas. Esse
projeto est sendo apoiado pela Suzano
Papel e Celulose S/A, que tem interesse
nesse desenvolvimento. O prximo passo
construir uma fbrica, com capacidade
para a produo de qualquer catalisador,
por meio de fermentao de qualquer
microrganismo. Para mont-la, a Verdartis est em conversaes com alguns
possveis parceiros investidores.
No que depender da avaliao da Suzano, as enzimas desenvolvidas pela pequena empresa de Ribeiro Preto tm
futuro. Ns j testamos a maior parte
das que existem no mercado e sempre
encontramos problemas, conta Augusto Fernandes Milanez, consultor de
produo e pesquisa e desenvolvimento da companhia. Os dois principais
so o preo alto e a grande quantidade
de material orgnico que elas liberam
nos efluentes. Por isso, a Suzano est

apoiando e orientando a Verdartis no

desenvolvimento de seus catalisadores,
alm de fornecer a celulose para testes e
realizar ensaios e anlises dos resultados.
O pessoal dessa empresa tem conseguido avanos promissores, diz Milanez. A
cada vez que vemos o produto, constatamos evolues. Por isso vemos potencial
nas enzimas da Verdartis.
O que tambm no falta mercado
em potencial para esses catalisadores. O
Brasil um dos maiores e mais modernos fabricantes de papel do mundo, com
222 indstrias em atividade e 2,2 milhes
de hectares de florestas plantadas para
fins industriais. Segundo dados da Associao Brasileira de Celulose e Papel
(Bracelpa), a receita de exportaes do
setor em 2011 foi de US$ 7,2 bilhes, um
crescimento de 6,2% em relao a 2010.
Desse total, US$ 5 bilhes correspondem
s exportaes de celulose, responsveis
por 69,5% da receita total de exportaes
do segmento no ano passado. Como se
v, no faltar mercado para enzimas
branqueadoras. n
Evanildo da Silveira

Os Projetos
1 - Persozyme enzimas personalizadas
criadas por evoluo dirigida para uso no
biobranqueamento da polpa de celulose
n 2007/51561-1
2 - Artizima - ferramenta computacional
para evoluo in silico de enzimas utilizadas
em biorrefinarias n 2007/59308-3
3 - Bioprocesso de produo de enzimas
para biorrefinaria de biomassa:
branqueamento de celulose
n 2008/53426-7
4 - Desenvolvimento de enzimas para
biobranqueamento de celulose: servio de
personalizao de enzimas atravs de um
processo robusto e inovador de engenharia
molecular n 2010/50328-4
5 - Bioprocesso de produo de enzimas
para biorrefinaria de biomassa:
branqueamento de celulose
n 2011/51096-2
modalidade
1 a 5 Programa Pesquisa Inovativa em
Pequenas Empresas (Pipe)
Coordenadores
1 - Marcos Roberto Lourenzoni Verdartis
2 - Renato Luis Tame Parreira Verdartis
3 e 5 - Alvaro de Baptista Neto Verdartis
4 - Ninive Aguiar Frattini Verdartis
investimento
1- R$ 261.866,47 e US$ 72.891,00 (FAPESP)
2- R$ 79.120,80 (FAPESP)
3- R$ 141.712,46 e US$ 22.582,85 (FAPESP)
4- R$ 262.280,68 e US$ 145.863,76 (FAPESP)
5- R$ 64.463,72 e US$ 38.212,41 (FAPESP)