Experimento 1

Isolamento do componente ativo de medicamentos

analgsicos
O

OH

O
O C CH3
O

HO

cido Acetilsaliclico

Objetivo geral:

N
H

H3C
CH3

Acetaminofeno

H3C

CH C
H2

CH3 O
C C OH
H

Ibuprofeno

Cada grupo receber amostras de dois medicamentos comerciais,

que devero ter seu princpio ativo identificado. O procedimento est segmentado em
duas etapas, correspondentes s atividades a serem desenvolvidas nas duas sesses
prticas semanais.

Primeira etapa
1. Extrao do Componente Ativo
Pulverize os comprimidos de cada uma das amostras fornecidas para seu grupo entre
dois pedaos de papel de pesagem (ou almofariz). No caso de comprimidos revestidos
(drgeas), lave-os rapidamente em gua corrente e seque-os com papel absorvente
para remover parcialmente seu material de revestimento. Aps uma primeira
pulverizao parcial das drgeas, caso necessrio remova com uma pina os pedaos
do revestimento que ainda possam ser identificados.
Transfira quantitativamente o material pulverizado para um erlenmayer, adicionando a
ele uma quantidade de metanol suficiente para recobrir o slido (cerca de 3 mL]. Feche
o frasco com uma rolha de cortia teflonizada e agite-o em movimentos rotatrios
constantes, no esquecendo de abrir a tampa pelo menos uma vez durante a agitao.
Deixe as pores no dissolvidas do p sedimentarem no frasco [mesmo aps cinco
minutos ou mais de espera, a fase sobrenadante pode permanecer levemente turva;
deve-se aguardar somente at que no mais se perceba o aumento da sedimentao
do material, isso , at que a quantidade de corpo de cho sedimentada seja
constante]. Transfira a fase liquida sobrenadante para um tubo de centrfuga, com o
auxlio de uma pipeta de Pasteur, evitando agitar o sistema. Adicione uma segunda
poro de metanol [de volume aproximadamente igual ao da primeira] ao slido
remanescente no frasco e repita o processo de extrao descrito acima. Aps

sedimentao do slido, transfira a segunda fase liquida para o tubo de ensaio que j
contm o primeiro extrato.
Coloque o tubo de ensaio contendo a amostra em uma centrfuga, em oposio a
outro tubo de igual massa, para equilibrar o rotor. Centrifugue a mistura por cerca de 2 a
3 minutos. Os slidos suspensos devem formar um agregado no fundo do tubo, resultando
em um sobrenadante lmpido. Caso persistam partculas em suspenso, repita a
operao de centrifugao.

2. Cromatografia em Coluna
O procedimento ser executado para cada uma das amostras-problema,
separadamente.
Prepare uma coluna de alumina usando uma pipeta de Pasteur conforme
esquematizado na Figura 1.1. Para isso, insira uma pequena bola de algodo no topo da
pipeta e, com o auxlio de um objeto longo e fino, empurre o algodo para baixo at
que este atinja o ponto de constrio da pipeta. Adicione cerca de 0,5 g de alumina
pipeta de Pasteur seca e feche a coluna com o dedo, exercendo presso, para
empacotar a alumina. Fixe a coluna em posio vertical, utilizando suporte universal, de
maneira que o liquido que a percorra possa gotejar em um erlenmayer.

Figura 1.1: Esquema de montagem da coluna para purificao dos analgsicos.

Adicione cerca de 2,0 mL de metanol coluna, com um conta-gotas, evitando

agitao da superfcie da alumina, e permita que o liquido escoe at que o nvel do
metanol esteja prximo ao topo da camada de alumina. Depois da adio de metanol
coluna, no se deve permitir que o topo da camada de alumina seque. Em caso de
necessidade, adicione mais metanol periodicamente.

Quando o nvel do metanol atingir a superfcie da alumina, transfira a soluo que

contm o frmaco, do bquer ou tubo de ensaio, para a coluna, usando uma pipeta de
Pasteur e colete o liquido que escoar atravs da coluna em um erlenmeyer limpo e seco.
Aps toda a soluo contendo o medicamento ter sido adicionada coluna,
acrescente uma poro adicional de 1,0 mL de metanol ao topo da coluna, antes que
ela tenha secado, e permita que o solvente escoe atravs dela, recolhendo a nova
alquota de material eludo sem trocar o erlenmayer. Este procedimento minimiza a perda
de amostra por reteno na coluna.

3. Evaporao do Solvente
No caso do cido acetil-saliclico, essencial que o processo de evaporao seja
efetuado em 10 a 15 minutos para minimizar a decomposio dessa substncia. Usando
uma pipeta de Pasteur, transfira cerca de metade do liquido eludo da coluna, para um
erlenmayer adequado, de menor capacidade possvel [ca. do dobro do volume a ser
contido] e proceda evaporao do metanol utilizando um banho de gua a cerca de
50C. Evapore o solvente at que o volume da soluo tenha sido reduzido metade e,
ento, adicione o restante do liquido ao erlenmayer, e reduza novamente o volume do
material cerca da metade. Permita que o frasco resfrie ligeiramente e observe se h
incio de formao de cristais [caso necessrio, continue a evaporao cuidadosamente
at que se perceba turvao ao se resfriar ligeiramente o erlenmayer].
Remova o frasco do banho de gua e deixe-o resfriar lentamente temperatura
ambiente. Para isso, tampe o erlenmayer com um papel alumnio perfurado para evitar
contaminao da amostra e permitir a evaporao lenta do solvente e guarde o
material eludo, adequadamente identificado, em seu armrio, para prosseguir o
experimento na prxima aula experimental.

Segunda etapa
Coloque os erlenmayers, j frios, em um banho de gelo por 10 a 15 minutos, permitindo
a formao da maior quantidade de cristais possvel [prepare o banho de gua gelada
em um bquer pequeno, utilizando gua e gelo; assegure-se de que o frasco no possa
tombar dentro do banho.] Se no tiver havido formao de cristais, o que bem possvel
no caso dos comprimidos contendo ibuprofeno ou acetaminofeno, a cristalizao do
produto pode ser induzida pelo atrito das paredes interiores do frasco com uma microesptula ou basto de vidro. Se o slido obtido for muito duro e agregado, deve-se partilo o mximo possvel antes de prosseguir para a etapa de filtrao a vcuo.

4. Filtrao a Vcuo
Monte uma aparelhagem para filtrao a vcuo com trompa dgua. Umedea o
papel de filtro com algumas gotas de metanol e transfira os cristais para o funil, com o
auxlio de uma esptula. Deixe os cristais secarem sob vcuo por 5 a 10 minutos para que
o solvente remanescente nos cristais seja retirado mais eficientemente.
Transfira os cristais, cuidadosamente, do papel de filtro para um vidro de relgio
previamente pesado. Deixe os cristais secarem ao ar no vidro de relgio antes de
determinar sua massa e seu ponto de fuso.
Use a massa especificada no rtulo da preparao como base de clculo para a
porcentagem de recuperao.
Use pequenas quantidades dos cristais isolados para determinao do ponto de fuso.

5. Anlise de Analgsicos por Cromatografia em Camada Delgada

Prepare pelo menos seis tubos capilares. Aps a preparao dos capilares, pegue 2
placas cromatogrficas. Na primeira placa, aplique as substncias-referncia (padres) a
serem utilizadas. Dissolva uma certa quantidade dos cristais, obtidos do isolamento feito
nas etapas anteriores, em uma soluo de diclorometano:metanol (1:1 v/v).

5.1 Anlise Cromatogrfica

Prepare uma cuba cromatogrfica (pode ser um bquer com uma placa de vidro
como tampa) e adicione a ela uma pequena quantidade do eluente (acetato de etila
contendo 0,5% de cido actico glacial), de forma a no ultrapassar a altura do ponto
de aplicao das amostras nas placas.
Quando o solvente estiver cerca de 0,5 cm do topo da placa, retire a placa da
cuba e, com o auxlio de um lpis, marque a altura atingida pelo solvente e deixe que o
eluente evapore para secar a placa (dentro da capela). Observe a placa seca sob luz
ultravioleta, marcando a posio e o contorno das manchas. Alternativamente, as
placas podem ser colocadas em uma cuba contendo iodo cristalino (deixe as placas
dentro desta cuba por alguns minutos e observe as modificaes em colorao). Calcule
os valores de Rf para cada mancha e compare-os com aqueles obtidos para as
substncias-referncia.