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Roya

Roya (pstulas)
La Roya es un hongo fcil de identificar, ya que presenta una serie de pstulas o bultitos de
color naranja sobre la cara de atrs (envs) de las hojas y los tallos. En verano, viran a
negro.
En el haz se aprecian manchas amarillentas.
Las hojas atacadas terminan por caer y la planta se debilita.
En ramas y brotes nuevos pueden aparecer unas manchas rojas.

Roya por el envs. Roya por el haz


Control
Es fcil evitarlo. Basta con los tratamientos que se hacen para los dems hongos (Oidio y
Mildiu). Tambin hay productos especficos para la Roya, tanto preventivos como curativos
(sistmicos).
Haz fumigaciones preventivas, sobre todo si el tiempo es lluvioso y las plantas han sido
atacadas otras veces.
Las hojas ya afectadas no se curan, pero protegers la nueva brotacin, flores y frutos si
realizas al menos 2 aplicaciones con 7-10 das de intervalo.
Sistmico y especfico para Roya es la materia activa Oxicarboxina. Hay que aplicar
rpidamente, en los primeros sntomas para que cure de verdad las hojas que acaban de ser
infectadas hace 24-48 horas.
Hay en el mercado productos para jardinera.
Retira y quema las hojas invadidas.
Objetivo :

Conocer y describir los principales sntomas y signos de enfermedades a


hongos.

Reconocer las estructuras reproductivas y vegetativas de los hongos


fitopatgenos.

Identificar los principales hongos fitopatgenos.

Metodologa :
La prctica de hongos se realizar en dos clases, en la primera se trabajar con las
clases Plasmodiophoromycetes, Oomycetes, Zygomycetes y Basidomycetes; en la
segunda con Ascomycetes y Deuteromycetes.
Cada clase prctica consisitir en observar y describir sntomas y signos de
enfermedades a hongos. Adems se analizarn algunos de los ciclos ms
caractersticos.
Para la realizacin de la actividad prctica se deber formar grupos entre 4 y 6
personas .
Bibliografa:

Agrios, G.N. 1995. Fitopatologa. 2a.ed. Mxico, Uthea. 838p.

Kimati, H.; Bergamin Filho, A.; Amorim, L. 1995. Manual de Fitopatologa.


Principios e conceitos.V.1. 3a ed. Sao Paulo. Ceres. 919 p.

PRINCIPALES SNTOMAS Y SIGNOS DE ENFERMEDADES CAUSADAS POR


HONGOS
Las enfermedades causadas por hongos producen en sus hospederos una amplia
variedad de tipos diferentes de sntomas. Entre otros los los hongos fitopatgenos
pueden producir manchas clorticas y necrticas, cribados, cancros, tiznes,
podredumbres hmedas o secas, momias, agallas, abolladuras, costras, ahogamientos,
marchitaminentos y pstulas.
Fotos con principales sntomas y signos

TCNICAS PARA LA IDENTIFICACIN DE LOS HONGOS


Para la identificacin de hongos fitopatgenos es necesario la observacin de sus
estructuras somticas y reproductivas. Mediante la tcnica de cmara
hmeda y/o aislamiento es posible inducir la aparcin de estas estructuras. La
observacin de las caractersticas de las estructuras producidas y el uso de claves
taxonmicas son necesarias para determinar el gnero y la especie del hongo
patgeno.

RECONOCIMIENTO DE ESTRUCTURAS VEGETATIVAS Y REPRODUCTIVAS :

I) ESTRUCTURAS VEGETATIVAS
Plasmodio: Se refiere al cuerpo o soma vegetativo de algunos hongos inferiores,
el cual est constitudo por una masa multinucleada, sin pared celular.
Son escasos los hongos fitopatgenos que poseen soma vegetativo de tipo
plasmodial.
Micelio: La mayora de los hongos poseen cuerpo filamentoso provisto de pared
celular. . A los filamentos que constituyen el cuerpo o soma vegetativo se les
denomina hifas. Al conjunto de hifas se le denomina micelio.
Cuando las hifas no presentan septas, el micelio es denominado cenoctico o no
tabicado y cuando las presenta el micelio se dice que es tabicado.

Micelio cenoctico. Estas hifas


pertenecientes a hongos
inferiores no presentan
tabiques.

Micelio tabicado. Los


tabiques se observan
con claridad sobre la
hifa que cruza en
diagonal la imagen.

Micelio
de Phytophthora sp.
sobre fruto de tomate.

Micelio de Sclerotium
rolfsii en la base del
tallo de morrn.

Esclerotos: Los esclerotos son estructuras de resistencia formados por


compactacin de hifas. Estos esclerotos pueden tener diferentes formas y
tamaos. A continuacin se muestran diferentes tipos de esclerotos:

Esclerotos de Sclerotinia
Sclerotos de Sclerotinia
sclerotiorum. Se caracterizan por su
sclerotiorumformndose
forma irregular, color negro y tamao
sobre una hoja de morrn. variable pudiendo llegar a 1 o 2
centmetros de longitud.

Esclertos de Sclerotium
rolfsii, esfricos de color
castao formndose
sobre un bulbo de cebolla

Esclerotos de Botrytis
squamosa sobre escapo
floral en cebolla

Esclerotos de Rizoctonia
solani sobre tubrculo de
papa. Su apariencia se
confunde con la tierra.

II) ESTRUCTURAS REPRODUCTIVAS


A) HONGOS INFERIORES Y PSEUDOHONGOS
Cuerpos fructferos representativos de los hongos inferiores y pseudohongos:

Los hongos inferiores se caracterizan por poseer micelio cenoctico. Segn su


reproduccin sexual estos hongos pueden pertenecer a dos diferentes clases:
Clase: Oomycetes:

Esta clase de hongos sexualmente producen oosporas, las que se originan por la
unin de dos gametos diferentes, el oogonio y el anteridio. Estas oosporas son
esfricas y de pared gruesa. Estos hongos se reproducen asexualmente producen
esporas flageladas, denominadas zoosporas. Estas zoosporas se encuentran
contenidas en cuerpos fructferos denominados zoosporangios. .

Zoosporangio de Phytophtho
ra sp.

Oospora

Para ver otras imgenes de Zoosporas de Phytophthora puede


visitar la siguiente pgina perteneciente a la Universidad de
Carolina del
Norte:http://www.cals.ncsu.edu/course/pp728/Phytophthora/m
otilezoospores.jpg

Para ver imgenes de zoosporangios en cadena


puede visitar la pgina en espaol del Departamento
de Botnica de la Universidad de Catania
(Italia): http://www.dipbot.unict.it/sistematica_es/
Albugo.html
Clase: Zigomycetes:
Esta clase de hongos Produce esporas asexuales no mviles contenidas en cuerpos
fructferos denominados esporangios. Sexualmente producen esporas denominadas
zigosporas

Para ver imgenes de Zygosporas (esporas

sexuales) puede visitar la pgina en


espaol del Departamento de Botnica de
la Universidad de Catania
(Italia):http://www.dipbot.unict.it/sistemati
ca_es/Rhizopu.html

Esporangio (reproduccin
asexual)

de Rhizopus sp.

B) HONGOS SUPERIORES
Estructuras representativas de la clase Ascomycetes.
Clase: Ascomycetes

La clase ascomycetes se caracteriza por poseer micelio tabicado y producir


esporas de origen sexual denominadas Ascosporas. Estas ascosporas se producen
dentro de sacos llamados ascas.
Las ascas pueden encontrarse en forma libre o contenidas en cuerpos fructferos. Los
cuerpos fructferos pueden ser de dos tipos: Apotecios y Cleistotecios.
A continuacin se muestran ejemplos de estas estructuras:
Ascas libres:

Ascas
libres
de Taphrin
a
deformans
en corte de
hoja de
duraznero.

Ascosporas dentro
de ascas libres
de Taphrina
deformans en corte
de hoja de
duraznero.

Hojas de
duraznero
presentando
sntomas de
ataque
por Taphrina
deformans.

Ascas en Apotecios:
Los apotecios son cuerpos fructferos con forma de copa.
Normalmente de colores marrones claros, se pueden producir a
partir de la germinacin de esclerotos o del mismo material
vegetal invadido por el hongo. Algunos alcanzan ms de un
centmetro de dimetro. Un corte de la copa permite observar
bajo el microscopio la presencia de ascas conteniendo
ascosporas.

Apotecios sobre
ramas
de frambuesa

Apotecios
germinando a
partir de
esclerotos
deSclerotinia
sclerotiorum.

Apotecios
de Sclerotinia
sclerotiorum.

Apotecios
de Monilinia
fruticola formados
sobre fruto
momificado en el
suelo.

Corte de un
apotecio
de Monilinia
fruticola
mostrando las
ascas.

Ascas de Monilinia
fruticolaconteniendo
cada una 8
ascosporas.

Acas en Peritecio:
Los peritecios son cuerpos fructferos con forma de pera y con una
abertura para la salida de las ascosporas. Generalmente se
producen sobre el tejido vegetal colonizado por el hongo. A simple
vista pueden observarse como puntuaciones negras.

Ascas en Peritecios de
en hojas de manzano

Ascas en Cleistotecio:

Peritecio
mostrando
las ascasde
Venturia
inaequalis co
n8
ascosporas
cada una.

En otoo caen las hojas


del manzano y es en ellas
que el hongo formar los
peritecios.

Los Cleistotecios son cuerpos fructferos con forma con forma


esfrica y que no poseen abertura para la salida de las ascosporas,
por lo tanto deben romperse para que estas se liberen.
Generalmente se producen sobre el tejido vegetal colonizado por el
hongo. A simple vista pueden observarse como puntuaciones
negras.

Signo de Erisiphe sp. sobre


hojas de pltano

Cleistotecio de Erisiphe sp

Para ver imgenes de Cleistotecios puede visitar la pgina


en espaol del Departamento de Botnica de la
Universidad de Catania
(Italia): http://www.dipbot.unict.it/sistematica_es/Uncinula
.html
Estructuras representativas de la clase Basidiomycetes.
Clase: Basidiomycetes
La clase basidiomycetes se caracteriza por por tener micelio tabicado y reproducirse
sexualmente mediante la produccin de basidioporas. Estas son producidas
exgenamente sobre una estructura llamada basidio. Los basidios pueden ser septados
o no.

Para ver imgenes de Basidios y basidiosporas puede


visitar la pgina en espaol del Departamento de Botnica
de la Universidad de Catania
(Italia): http://www.dipbot.unict.it/sistematica_es/Copr_bd
i.html
Basidos septados:

Royas:

Pstulas con
Pstulas con teliospora Pstula con teliospora de
uredosporas en hoja
en hoja de ajo
Puccinia sp.
de ajo de Puccinia allii
de Puccinia allii

Agallas en ramas de
ceibo producidas
por Ravenelia spp.

Carbones:

Espigas de Cynodon con


carbn. Las semillas estn
sustituidas por masas de
teliosporas carbonosas.

Espigas de trigo con


carbn.

Basidios no septados

Basidiocarpo en postes
de eucaliptus

Basidiocarpos sobre
tronco
de duraznero

Clase: Deuteromycetes
Esta Clase incluye a los hongos superiores (micelio tabicado) a los que no se les conoce
la reproduccin sexual. En algunos casos por no tener reproduccin sexual, o si la
tienen esta se produce rara vez, o simplemente porque no se le conoce an. Estos
hongos se reproducen de forma asexual formando esporas denominadas conidios.
Estos conidios pueden producirse en forma libre o dentro de cuerpos fructferos.
Los conidios pueden tener diferentes formas y tamaos. Pueden ser hialinos u
obscuros. Pueden ser unicelulares o multicelulares. Pueden estar sueltos o
agrupadosnen ramilletes o cadenas.

Estructuras representativas de la clase Deuteromycetes:


Conidios libres o expuestos:

Conidos de Monilia
fructicola sobre frutos de
durazno

Conidos
unicelulares
dispuestos en
cadena Monilia
fruticola

Manchas necrticas con


anillos concntricos
de Alternaria solani en
hoja de tomate

Conidios septados de
Alternaria solani

Para ver conidios de Alternaria solani dispuestos en forma de cadena


puede visitar la pgina del Departamento de Botnica de la
Universidad de Toronto (Canad):
http://www.botany.utoronto.ca/ResearchLabs/MallochLab/Malloch/Moul
ds/Alternaria.html

Esporulacin
de Penicillium
expansum sobre frutos
de manzana

Conidiforo y
conidios
de Penicillium
expansum.

Eporulacin de Botrytis
cinerea
sobre frutos de tomate

Conidios de Botrytis
cinerea agrupados
en forma de racimo

Para observar imgenes con la disposicin de los conidiforos


de Botrytis cinerea se puede visitar la
pgina:http://www.bioimages.org.uk/html/P154008.HTM

Micelio y esporas
de Fusarium sp.
en fruto de zapallo

Conidios septados
de Fusarium sp. Se trata de
conidios hialinos,
multicelulares y con forma
caracterstica de "banana"

Conidios en cuerpos fructferos:


Acrvulos: Los acrvulos son estructuras abiertas sobre la superficie del
vegatal que dejan expuestos a los conidios.

Acrvulos
de Pestalotia sp. en
ramas de arndano

Cirros de conidios
de Pestalotia sp.,
formados a partir
de los acrvulos
en ramas de
arndano

Conidios septados
de Pestalotia sp.

Para ver fotografas de acrvulos se puede visitar la pgina del


Departmento de Patologa de Plantas de la Universidad de Wisconsin
(EE.UU.):http://www.plantpath.wisc.edu/pp300/docs/collet.html

Picnidios: Los picnidios son curpos fructferos que poseen una


abertura por la que liberan los conidios producidos en su interior.

Picnidios de Phomopsis
viticola con cirros de conidio en
sarmientos de vid

MESAS DE TRABAJO
RECONOCIMIENTO DE SNTOMA Y SIGNOS

Picnidios
de Fusicoccum sp.con cirros
de conidios en ramas de
durazno

En cada muestra o fotografa:


1) Describir el sntoma y clasificarlo de acuerdo al glosario (anexo 1)
2) Para aquella muestras que presentan signo: determinar como est constitudoque
implicancias tiene en la diseminacin
3) indicar si es un endo o ectoparsito
TCNICAS PARA IDENTIFICACIN DE HONGOS
Cmara hmeda
1) A partir de la muestra identifique cul es el sntoma?
2) Qu estructuras reproductivas puede observar? Son de origen sexual o
asexual?
3) Observe al microscopio las estructuras encontradas y realice un esquema.

Aislamiento e Identificacin
1) De las cajas de petri que se le presentan Cul corresponden a una siembra? y
Cul a un repique?
2) Con que objetivo se realizan los repiques?
3) Observe los conidios en los preparados; intente determinar el gnero al que
pertenecen. En caso de poder
identificarlo Qu otra informacin requiere?

EJEMPLOS DE ENFERMEDADES

Plasmopora viticola
Ver ciclo patolgico del mildiu de la vid producido por Plasmopora viticola (Agrios, G.
N. Fitopatologa)
1) A qu clase pertenece este hongo? Por qu?
2) Cmo se llama el sntoma que produce?
3) Cul es el inculo primario y cul su fuente?
4) Esa esporoulacin que usted observa en la foto, a qu tipo de inculo
corresponde?
5) El cultivo de vid se puede estar conducido en espaldera baja (1 metro de altura) o
parral entre otros. Qu implicancia tiene esto en la diseminacin inicial de la
enfermedad?
Rhizopus spp.

Ver ciclo patolgico de la pudricin blanda de los frutos y hortalizas producido por
Rhizopus spp. (Agrios, G. N. Fitopatologa)
1) Observe las estructuras del hongo
2) A qu subdivicin pertenece el gnero Rhizopus?
3) Qu caractersticas de este hongo consider para clasificarlo?
4) Cul es el sntoma que produce?

Puccinia graminis f.sp. tritici


Ver ciclo patolgico de la roya del tallo del trigo producida por Puccina graminis
f.sp. tritici (Agrios, G. N. Fitopatologa)
1) A qu clase pertenece este hongo?
2) Identifique en el ciclo las diferentes esporas que produce
3) Describa el ciclo de la enfermedad que se da durante el ciclo de cultivo
4) La roya del trigo es autoica o heteroica? Por qu?
5) En qu parte del ciclo se produce la mayor cantidad de propgulos?
6) Cules son las eporas que constituyen el mayor riesgo para el cultivo de trigo en
Uruguay
7) Qu implicancias tiene para el hongo la ausencia del husped alternativo en
Uruguay?

Carbones
Ver ciclo patolgico de los carbones voladores del trigo y de la cebada producidos
por Ustilago tritici y U. nuda, respectivamente (Agrios, G. N. Fitopatologa)
1) Cules son las fuentes de inculo primario y secundario del carbn volador del
trigo?
2) Por qu patgeno es producido?
3) Cmo se disemina?
4) Cmo se da la infeccin primaria?
5) Cuntos ciclos se producen durante el ciclo del cultivo?

Podredumbre de madera
1) A qu clase pertenece el hongo de la muestra?
2) Cul es el signo?
3) Dnde se forman las esporas?
Penicillium spp.

1) Cul es el sntoma?
2) Cmo se denominan las esporas y de que origen son?
3) Realice un preparado y observe al microscopio los conidios. Qu conclusiones
saca con respecto a la va de dispersin?

Botrytis cinerea; Botryotinia fuckeliana


Ver ciclo patolgico Moho gris producido por Botrytis (Agrios, G. N. Fitopatologa)
1) Explique por qu este hongo tiene dos nombres y por qu normalmente se lo
llama por el segundo
2) De qu origen es la esporulacin que observa tanto en la muestra como en las
fotografas?
3) Cmo es con respecto al rango de huspedes?

Glomerella sp.; Colletotricum sp.


1) Cmo se llaman los cuerpos fructferos que agrupan los conidios de estos
hongos?
2) Qu diferencia morfolgica existe entre Colletotricum y Gloesporium?
3) Qu grado de especificidad tiene este hongo?
4) Cmo se llama el sntoma que produce?

Claviceps sp - Sphacelia sp
1 Qu sntomas presentan las espigas de la muestra?
2 Cmo se denominan los cuerpos fructferos que contienen las esporas sexuales y en
qu estructuras se forman?
3 Realice un esquema de dicha estructura
4 Qu estructura de resistencia produce este hongo? Cmo se dispersa?

Oidium sp.
1 Observe la muestra lo que ve es el sntoma o el signo? Descrbalo
2 Indique cmo es este patgeno con respecto a:
- localizacin en la planta,
- la estructura que utiliza para nutrirse,
- se nivel de parasitismo.

Taphrina deformans

1. Qu sntoma observa?
2. A partir de las zonas grisceas de los sntomas, se realizaron cortes histolgicos que
se observan en las
diapositivas. A qu estructuras corresponde lo que observa en las mismas?
3. De acuerdo a los observado: a qu clase pertenece este hongo?

Leptosphaeria nodorum; Septoria nodorum


1. Este hongo puede formar dos tipos de cuerpos fructferos pririformes, cmo se
llaman y en qu se diferencian?
2. Las ascosporas son dispersadas por corrientes de aire; y los conidios?
3. Si no se da la reproduccin sexual cul es el inculo primario? Qu efecto tiene
esto sobre la capacidad de
dispersin del hongo?
4 En qu parte de la planta buscara las primeras infecciones considerando que la
principal fuente de inculo es el
rastrojo con estructuras asexuales? por qu?

Sclerotinia sclerotiorum
Ver ciclo patolgico de Sclerotinia sclerotiorum (Agrios, G. N. Fitopatologa)
1. A qu clase pertenece este hongo?
2. Cmo sobrevive cuendo se dan las condiciones ambientales favorables?
3. Cules son las dos estructuras que pueden actuar como inculo? Cules son las
vas de dispersin para cada
una de ellas? Cul de estos tipos de inculo sera ms fcil de cuantificar a campo?

Preguntas

Qu tipo de organismos son los hongos?


Qu estructuras vegetativas pueden presentar los hongos fitopatgenos y qu
funciones cumplen cada una de ellas?
Qu tipo de reproduccin presentan los hongos fitopatgenos?
Todos los hongos se reproducen indistintamente sexual y asexualmente?
Qu estructuras vegetativas y/o reproductivas de los hongos presentan valor
taxonmico?
Qu estructuras reproductivas podemos encontrar en cada subdivisin de hongos?
Qu es una cmara hmeda y con qu objetivo se realiza?
Cmo se pueden aislar los hongos fitopatgenos?

Problemas
1.- La siguiente es la descripcin del ciclo de vida de un hongo, Venturia inaequalis,
ocasionando una conocida e importante enfermedad, la sarna del manzano:
Con la cada natural de las hojas en otoo y la presencia de bajas temperaturas, tiene
inicio la formacin de seudotecios dentro de las hojas atacadas. La maduracin de las
ascosporas ocurre al final del invierno e inicio de la primavera con temperaturas de 16
a 18?C. El nmero de ascosporas por hojas es muy variable. Recuentos hecho en un
centmetro cuadrado de hoja revelaron la existencia de hasta 150 seudotecios,
conteniendo c/u 60 a 70 ascas con 8 ascosporas. Suponiendo una superficie de 20 a 30
cm2 podran liberarse de 1 a 2 millones de ascosporas por hoja.
Despus de la maduracin de las ascas y de las ascosporas, las lluvias de la primavera
aumentan la presin dentro de los seudotecios, haciendo que las ascosporas sean
liberadas activamente, siendo eyectadas a una distancia de 5 a 15 mm de las hojas y
una vez en el aire pueden ser transportadas por los vientos a largas distancias.
Cayendo sobre una hoja hmeda la ascospora se reviste de una pelcula de agua, inicia
la germinacin y penetra en la cutcula, instalndose entre la misma y las clulas de la
epidermis.
El perodo de incubacin entre la penetracin del hongo y la aparicin de los sntomas,
depende de las condiciones climticas pero su duracin es de aproximadamente 15 a
20 das.
Despus de esta infeccin primaria causada por las ascosporas el hongo entra en una
fase reproductiva que se repite varias veces durante el ciclo vegetativo y en la cual se
producen gran nmero de conidios. Los conidios son liberados y transportados por
medio de las lluvias y vientos fuertes.
Los sntomas de la sarna del manzano en las hojas son manchas de color olivaceo al
principio, que luego se tornan de color negro y toman un aspecto ampollado (plateado).
Tambin afecta flores y frutos.
a)- Dentro de que subdivisin clasificara a este hongo?
b)- Qu tipo de micelio tiene este hongo?
c)- Cul es el inculo primario de esta enfermedad y cul la fuente de inculo?
d)- Existen diferencias entre el inculo primario y secundario?
Explique.
e)- En qu etapa del ciclo de la enfermedad este hongo se reproduce sexualmente y
en cul asexualmente?
f)- Qu nivel de parasitismo presenta Venturia inaequalis?
g)- En que etapas de la patognesis intentara interrumpir el ciclo de la enfermedad?

2.- La enfermedad ms importante de la vid en el Uruguay es el "mildi" o


"peronspera de la vid", la misma es ocasionada por un hongo llamado Plasmopara
viticola. Este hongo produce manchas sobre las hojas que al principio son amarillentas
y traslcidas. En el envs de estas manchas aparece una eflorescencia blanquecina
constituida por los zoosporangiforos y zoosporangios que salen a travs de los
estomas. Estas manchas finalmente se necrosan provocando en ataques severos una
fuerte disminucin del rea foliar. Brotes, zarcillos y racimos tambin son atacados y
cubiertos de la misma eflorescencia. Entre otros daos provoca la cada del racimo
floral.
Todos los tejidos verdes son susceptibles ocurriendo varios ciclos de infeccin en la
temporada. En el otoo caen las hojas y dentro de ellas se forman oosporas que
germinan en la primavera siguiente produciendo zoosporangios.
a).- Qu tipo de micelio presenta este hongo?
b).- Qu signo presenta esta enfermedad?
c).- Qu son y qu funcin cumplen los zoosporangios?
d).- Qu es la oospora y que funcin cumple?
e).- Cmo se clasifica taxonmicamente a este hongo?
f).- Qu factor ambiental considera indispensable para que ocurra la infeccin por
Plasmospora viticola?
g).- Qu importancia prctica tiene el saber a qu grupo taxonmico pertenece este
hongo?

3.- En un cultivo de zapallito aparecen manchas clorticas en las hojas. El productor


consulta en una agropecuaria y le venden un fungicida cuyo principio activo (Metalaxil)
tiene accin curativa especficamente contra Oomycetes.
El tcnico lleva una muestra a un laboratorio donde bajo lupa se observa una
eflorescencia blanquecina en las manchas, especialmente en el envs. Al microscopio
se observa un micelio que crece sobre la superficie de la hoja y que forma conidios en
cadena sobre conidiforos.
a).- Le parece correcta la recomendacin de la agropecuaria? Por qu?
b).- Cmo se llamara la enfermedad? Fundamente su respuesta.
c).- Cmo se alimenta el hongo causante de la enfermedad?

4.- En frutos de limn provenientes de una planta de empaque se observan manchas


oscuras, circulares, deprimidas, no coincidiendo dicha sintomatologa con ninguna de
las conocidas sobre dicho hospedero.
Luego de efectuar distintas metodologas de aislamiento a los efectos de la deteccin

de un factor patognico bitico, aparecen sistemticamente sobre medio de cultivo


bsico, colonias fngicas con caractersticas iguales y que presentan las siguientes
estructuras: micelio tabicado y acrvulos con setas negras y conidios unicelulares.
a).- Segn los datos del problema, a qu subdivisin(es) podra pertenecer el hongo
aislado? Fundamente su respuesta.
b).-Indique qu paso(s) seguira a los efectos de establecer la relacin de causalidad
entre el hongo aislado y los sntomas observados.

5.- Un productor de raigrs que produce su propia semilla, enva una muestra de la
misma al laboratorio a los efectos de obtener informacin sobre la calidad y estado
sanitario del lote. Si usted fuera el responsable del anlisis sanitario, qu
procedimiento(s) seguira a los efectos de establecer el mismo?
6.- En plantas de trbol blanco se observan pstulas de color negro en fololos.
a).- Como se llamara la enfermedad? Fundamente su respuesta.
b).- Indique qu pasos seguira para lograr el diagnstico de la enfermedad.
c).- Qu nivel de parasitismo presenta el agente causal?
d).- En caso de ser necesario evaluar la resistencia de distintos cultivares de trbol
frente al patgeno, qu metodologa seguira?

7.- En plantas de frutilla se observan manchas sobre fololos que se corresponden con
las causadas por un organismo fngico conocido sobre dicho hospedero.
Si usted quisiera confirmar el diagnstico a travs de tcnicas de laboratorio, qu
procedimientos seguira?
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BACTERIAS FITOPATOGENAS

Objetivo :

a) Reconocer los principales sntomas de enfermedades producidas por


bacterias fitopatgenas,
b) Familiarizarse con el uso de una clave rpida para identificar
bacterias fitopatgenas aisladas de tejido vegetal enfermo.
c) conocer los mtodos utilizados para el aislamiento de bacterias
fitopatgenas a partir de material vegetal enfermo.
d) Comprender el proceso de diagnstico de una enfermedad
bacteriana.
e) Conocer en que consiste y que utilidad tiene en el proceso de

diagnstico la prueba de hipersensibilidad en no huesped.

Metodologa :

TRABAJO GRUPAL
Describa la sintomatologa que presentan las plantas en fresco, que se encuentran
sobre las mesadas, mirando la muestra con luz incidente y a trasluz.
Observe la presencia de signo.
Para cada muestra, discuta la facilidad de realizar el aislamiento de la bacteria
fitopatgena.

A continuacin se presentan una serie de sntomas provocados por diferentes


enfermedades bacterianas.
Agallas o tumores

Agallas o tumores en races


de frambuesa provocados
porAgrobacterium
tumesfasiens.

Manchas foliares

Agallas o tumores en
races de frambuesa
provocados
por Agrobacterium
tumesfasiens.

Mancha en "V" en hoja de


repollo ocasionada
por Xanthomonas
campestris.

Mancha bacteriana en
hoja de tomate.

Mancha foliar en hoja de zapallo


ocasionada por Xanthomonas
campestris pv cucurbitae

Manchas en hojas de duraznero


provocadas por Xanthomonas
arboricola pv pruni. Observese la
distribucin sobre la nervadura y
parte inferior de la hoja en
coincidencia con los lugares en que
se acumula el agua de lluvia.

Costras en frutos

Costras en fruto de
tomate

Costras en frutos de tomate.

Costras en fruto
de Morrn.

Costras en fruto de morrn.

Manchas necrticas en tallo

Manchas necrticas en tallo de


tomate.
Lesiones en frutos

Lesin en fruto de zapallo


Kabuti

Corte del fruto para observar las


lesiones.
Observese el avance en
profundidad de aspecto acuoso

Lesiones en fruto de ciruelo


ocasionadas porXanthomonas
arboricola pv pruni.

Lesiones en fruto de
durazno ocasionadas
por Xanthomonas
arboricola pv pruni.

Pudredumbres hmedas

Podredumbre hmeda en hojas de cebolla

Podredumbre basal
de la planta de papa
ocasionada
por Erwinia.

Signos de las bacterias


(Zoogleas)

Zooglea saliendo de los


haces vasculares de una
papa afectada
por Pseudomonas
solanacearum.

Zooglea saliendo de los haces


vasculares de una planta de
tomate afectada.

Tcnicas utilizadas para observar el signo de las bacterias.

Microcorrida: Se utiliza en el caso de manchas foliares. Un pequeo corte de la


zona de avance de la mancha foliar es colocado en un portaobjeto se le agrega
uuna gota de agua y es observado bajo microscopio. El flujo bacteriano se
observa como una pequea nube descargndose desde el tejido vegetal.
Test de Flujo: Se utiliza en el caso de bacterias vasculares. Un trozo del tallo
supuestamente atacado por alguna bacteria vascular es cortado y se coloca
suspendido en un vaso de agua. En este caso las bacterias (zooglea) fluye (se
descarga) hacia al agua. Se observa a simple vista.
Microcorrida:

Test de flujo:

Un trozo de una
mancha foliar
colocado bajo el
microscopio permite
observar el flujo
bacteriano. (desde el
tejido vegetal fluye
con apariencia de
nube hacia el agua)

Un trozo de tallo de
tomate sumergido en
un vaso de agua
permite observar el
flujo bacteriano.

IDENTIFICACION DE BACTERIAS :

1) En el cabn de diapositivas se ilustra el aislamiento e identificacin de una bacteria


que causa podredumbre en zapallo cabuti. A partir de los resultados que observa en
los test bioqumicos y con ayuda de la "Clave abreviada de identificacin de bacterias"
(anexo 2, Gua para las clases prcticas)indique a que Gnero pertenece la bacteria
causante de la podredumbre.

Esquema simplificado
para la identificacin
de bacterias
fitopatgenas a nivel
de Gnero

2) Se muestran distintas bacterias (cultivos puros) aisladas de plantas de tomates,


cuyo sntoma en hojas se observa en la fotografa presentada y plantas de tabaco en
las que se realiz una prueba de hipersensibilidad de las mismas bacterias.

a) Describa los siguientes tem para cada una :


forma y tamao
1

Borde
Elevacin
Color
forma y tamao

Borde
Elevacin
Color
forma y tamao

Borde
Elevacin
Color

forma y tamao
4

Borde
Elevacin
Color
forma y tamao

Borde
Elevacin
Color

Fig. 5 Morfologa de colonias de algunas bacterias fitopatgenas.

Coloracin
Elevacin
Borde

De Harrigan, W.F. y Cance M.E Laboratory methods in microbiology. 1996.

b) Con esta informacin es posible identificar la bacteria causal de la enfermedad


observada? qu pasos seguira para identificarla?

Preguntas

Qu tipo de organismos son las bacterias?


Qu caractersticas tienen las bacterias fitopatgenas?
Cules son los sntomas ms caractersticos de las
enfermedades bacterianas?
Qu signo presentan las enfermedades bacterianas?
En qu consiste y qu utilidad prctica tiene el llamado "test de
flujo"?
En qu consiste y qu utilidad prctica tiene el llamado "test de
hipersensibilidad"?
En base a qu elementos se realiza la clasificacin taxonmica
de las bacterias fitopatgenas?
Desde el punto de vista agronmico: qu caractersticas de una
enfermedad bacteriana le interesara conocer?
Problemas
1.- Muestras de bulbos de cebolla dulce, llegaron al laboratorio
presentando pudricin blanda de las catfilas internas. Se
procedi al aislamiento y se obtuvo una bacteria a la cual se le
realiz la prueba de patogenicidad reproduciendo los sntomas al
inocularse trozos de bulbos sanos. Se inocularon plantas de
tabaco con el propsito de comprobar la reaccin de
hipersensibilidad; y se observ rpida necrosis en los tejidos de
la zona infiltrada con la suspensin bacteriana.
Con el propsito de identificar a la bacteria problema se
realizaron las siguientes pruebas bioqumicas y fisiolgicas:
- Coloracin de Gram, resultando ser Gram negativa.
- Siembra sobre el medio agar-levadura-dextrosa-CaCO3 las
colonias obtenidas no presentaron coloracin amarilla.
- Siembra sobre medio B de King no observndose produccin
de pigmentos fluorescentes.
- Test de Hugh & Leifson's (O/F), es anaerobia facultativa
(reaccin oxidativa)

De acuerdo con la bibliografa consultada los bulbos de cebolla


son afectados por pudriciones blandas ocasionadas por Erwinia y
Pseudomonas.
En base a los resultados obtenidos qu gnero de bacterias
estar causando el problema estudiado?

2.- A partir de rganos de reserva de una hortaliza que


presentaban sntomas de pudricin hmeda se aisl y purific
una bacteria en el laboratorio. Se comprob su patogenicidad en
rganos de reserva. Al ser inoculada en tabaco di una reaccin
hipersensible.
a).- Qu gneros de los mencionados abajo descartara segn
los datos indicados?
b).- Qu prueba(s) realizara sobre el patgeno aislado para
determinar a cul de los restantes gneros pertenece?
-

Bacillus
Xanthomonas
Erwinia
Corynebacterium
Pseudomonas
Streptomyces

3.- Un cultivo de poroto desarrollado en un verano clido y con


muchas precipitaciones, present los siguientes sntomas:
manchas necrticas, pequeas, angulosas, de aproximadamente
3 mm de dimetro, rodeadas de un halo ancho de color verde
plido; dichas manchas aparecan tanto en hojas, como tallos,
vainas y semillas, y su tamao, forma y disposicin variaban de
acuerdo al rgano de la planta sobre el que se desarrollaban.
Sobre esas lesiones, a veces, se presentaba un exudado de
color blanco-grisceo.
Este cultivo fue cosechado y la semilla obtenida se sembr al
ao siguiente en el mismo lugar de la chacra que el ao

anterior.
De acuerdo a los datos suministrados responda las siguientes
preguntas:
a).- Cul cree Ud. que sea el factor patognico responsable de
esta sintomatologa y en qu se fundamenta para dicha
afirmacin-?
b).- Cuales pasos realizara par aislar a dicho patgeno en
cultivo puro y demostrar su patogenicidad?. Fundamente su
respuesta.
c).- En donde cree Ud. que este patgeno persiste de una
estacin de crecimiento a la siguiente?. Fundamente su
respuesta.
d).- Considera Ud. que el productor debi considerar algn tipo
de medida de control al haber sembrado la segunda vez? -por
qu? cules seran dichas medidas?. Fundamente su respuesta.

4.- Se pretende autorizar la entrada al pas de una partida de


papa semilla.
Se extrae una muestra para ser inspeccionada y al cortar los
tubrculos se observaron necrosis vasculares de donde, al
presionar, fluye un exudado mucoso de color blancuzco. En el
laboratorio estatal encargado de realizar las pruebas necesarias
para comprobar su buena sanidad, se logra aislar una bacteria.
Se sabe que existen dos enfermedades a bacterias en papa que
presentan esta sintomatologa, una de ellas es causada por una
especie del gnero Pseudomonas y la otra por una especie de
Corynebacterium.
a).- A los efectos de una primera aproximacin que permita
diferenciar entre los dos gneros mencionados. Qu prueba
rpida podra llevarse a cabo?
b).- Cree Ud. que esa prueba es totalmente concluyente para
un diagnstico definitivo? Si Ud. cree que no lo es, qu pasos
deberan cumplirse para lograr su identificacin?

5.- En nuestro laboratorio de diagnstico se recibe una bolsa de


plstico con una muestra que consiste de hojas de naranjo.
Dicha muestra no se encuentra en muy buen estado y por lo
tanto, los sntomas que se observan no son muy claros. Cuando
se procede al aislamiento se asla un hongo y una bacteria.
a).- Para el caso de la bacteria, qu prueba/s deber/n
realizarse para demostrar su patogenicidad?
b).- Qu opinin le merece las condiciones de envo de la
muestra?

6.- A la clnica de diagnstico llega una muestra de plantas de


trigo con sntomas de estras en las hojas y vainas; dichas
estras son relativamente cortas, translcidas, de aspecto
hmedo, encontrndose limitadas por las nervaduras. La
muestra es analizada en forma simultnea por la seccin de
enfermedades a hongos y a bacterias.
Qu mtodos de aislamiento podran realizarse en la seccin a
bacterias?

7.- En el laboratorio se reciben tubrculos de papa con sntoma


de pudricin blanda.
a).- Qu mtodo de aislamiento utilizara con este tipo de
muestra?
b).- Qu pruebas podran utilizarse parta demostrar la
patogenicidad de la bacteria aislada?

8.- Aparece una nueva enfermedad bacteriana sobre naranjos


que presenta sntomas en hojas, ramitas y frutos; en los tres
rganos del rbol los sntomas son manchas.
Se sabe que la bacteria penetra por heridas y que la
enfermedad aparece en dos zonas citrcolas, pero con mayor

incidencia en una de ellas, donde el suelo es ms arenoso y


suelto, llueve ms y los inviernos son ms fros y ventosos.
a).- Cmo hara Ud. un cultivo puro de esta bacteria y como
demostrara la relacin de causalidad entre ella y su
hospedante?. Explique.
b).- Mencione por lo menos tres condiciones predisponentes a
esta enfermedad y en que se fundamenta para ello.
c).- Qu medidas de tipo cultural se podran tomar en un
monte de naranjo ya afectado para disminuir la incidencia de
esta enfermedad?
d).- Cul cree Ud. sea el principal dao ocasionado por esta
enfermedad?

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