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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente


Protocolo de prcticas de la Fisiologa Vegetal

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA


ESCUELA DE CIENCIAS AGRICOLA, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE
ECAPMA

PROTOCOLO DE PRCTICAS PARA LA ESCUELA


GUIA I-

PRIMER SEMESTRE DE 2013


Nombre del Curso:

FISIOLOGIA VEGETAL

Cdigo: 201711

Germn Castellanos
(Director Nacional)

Fecha: Febrero 2013

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Informacin para el tutor de prctica

Para el componente prctico el curso de Fisiologa Vegetal se presenta 2 opciones (una


salida de campo y un laboratorio). El tutor de prctica podr seleccionar una opcin o las
2 opciones segn su criterio y recursos locales.
Es responsabilidad del tutor de prctica evaluar y calificar las actividades realizadas por
cada estudiante segn la rbrica de evaluacin que est al final de este documento y
enviar oportunamente al director del curso una sola nota por cada estudiante con un valor
de 1 a 100 puntos.
El tutor de prctica junto con las calificaciones de los estudiantes debe presentar un
informe al director de curso sobre las actividades prcticas realizadas anexando la lista de
asistencia de los estudiantes.
El tutor podr ampliar o modificar esta gua de actividad siempre y cuando realice una
justificacin, he informe al director de curso.

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Informacin para los Estudiantes


I ACTIVIDADES PARA EL ESTUDIANTE

OPCIN 1. Salida de Campo

1. IDENTIFICACION DE LA PRCTICA
Nombre de curso
Fisiologa Vegetal
Cdigo de curso

201711

Valor de esta actividad 100


prctica
Nombre del director de Germn Gonzalo Castellanos Martnez
curso
CEAD al que pertenece

Sede Nacional

Contacto del director de german.castellanos@unad.edu.co


curso
Espacio donde se debe Sistema de produccin agrcola o forestal
desarrollar la prctica
Objetivos de la prctica

Observar en el cultivo la arquitectura de la plantas, estado de desarrollo de


las plantas y sistema de cultivo (distribucin espacial de las plantas)
Observar las condiciones ambientales especficas en el sitio visitado que
pueden impactar fuertemente el rendimiento del cultivo (negativa o
positivamente).
Analizar lo observado relacionando la implicaciones sobre la transpiracin
y la fotosntesis.
Proponer recomendaciones para mejorar
aprovechamiento de la luz y del espacio.

Justificacin
prctica
Competencias
desarrollar

de

el

uso

del

agua,

el

la La fisiologa vegetal debe ser una herramienta que permita al estudiante de


las ciencias agrarias entender las interacciones que suceden entre las
plantas y el ambiente y sus implicaciones sobre el rendimiento de los
cultivos.
a El estudiante reconocer y comprender funcionamiento de las plantas y el
efecto del ambiente sobre ellas, as como propondr modificaciones de los
sistemas de cultivo para mejorar la produccin.

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Duracin de la prctica.

5 horas

Mecanismo mediante el Participacin activa en la salida de campo


cual se evaluar la
Informe escrito de la salida de campo.
prctica:

1. METODOLOGIA
A. Actividades a desarrollar:
Visita a anlisis de un sistema de cultivo agrcola o forestal
Descripcin de la ubicacin geogrfica del sitio y descripcin detallada las condiciones
ambientales y relieve.
Observacin de la arquitectura y morfologa de la plantas, estado de desarrollo de las
plantas (principales fases fenolgicas) y sistema de cultivo (arreglo y densidad de
siembra, riego, tutorado, etc).
Observar las condiciones ambientales (Temperatura, precipitacin, viento, radiacin solar,
HR, suelos), especficas en el sitio visitado que pueden impactar fuertemente el
rendimiento del cultivo (negativa o positivamente).
Analizar y discusin de lo observado relacionando las implicaciones sobre la
transpiracin, respiracin y la fotosntesis, nutricin, traslocacin de fotoasimilados, etc.
Proponer recomendaciones para mejorar en las plantas el uso del agua, el
aprovechamiento de la luz y el espacio.
B. Elementos necesarios para la prctica: Sistema de produccin agrcola o
Forestal
C. Productos a entregar al tutor de prcticas. El estudiante entregar: Informe
de las actividades realizadas.
El informe debe contener.
Portada
Introduccin
Resumen de actividades y resultados.
Anlisis y Discusin.
Conclusiones
Bibliografa

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OPCIN 2. LABORATORIO
1. IDENTIFICACION DE LA PRCTICA
Nombre de curso

Fisiologa Vegetal

Cdigo de curso

201711

Valor de esta actividad prctica 100


Nombre del director de curso

Germn Gonzalo Castellanos Martnez

CEAD al que pertenece

Sede Nacional

Contacto del director de curso

German.castellanos@unad.edu.co

Espacio
donde
se
desarrollar la prctica

debe Laboratorio de Biologa

Objetivos de la prctica

Determinar el contenido relativo de agua en plantas (CRA).


Determinar el potencia' de agua (A) en plantas.
Observacin de estomas a travs del microscopio.
Determinar la cantidad de clorofila total, y de clorofilas a y b presentes
en una muestra de hoja.

Justificacin de la prctica

Competencias a desarrollar

Duracin de la prctica.

Es necesario que los estudiantes se familiaricen con los instrumentos y


tcnicas de laboratorio utilizadas para realizar determinaciones de
indicadores fisiolgicos de las plantas y ser capaz de analizar los datos
obtenidos con el fin de contribuir a entender e investigar los procesos
fisiolgicos de las plantas.
Manejo de instrumentos de laboratorio y determinacin de indicadores
fisiolgicos de las plantas.
7 horas

Mecanismo mediante el cual se Participacin activa en la salida de campo


evaluar la prctica:
Informe escrito de la salida de campo.

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2. METODOLOGIA
Esta es una gua general para realizar el laboratorio de fisiologa vegetal, sin embargo el
tutor de prctica teniendo en cuenta el mdulo del curso podr cambiar, modificar o
proponer las actividades del laboratorio de acuerdo a disponibilidad de recursos y a la
experiencia profesional.
LABORATORIO DE FISIOLOGA VEGETAL
1. DETERMINACION DEL CONTENIDO DE AGUA EN LAS PLANTAS
Introduccin
El contenido de agua es la medida ms comn para estimar el grado de hidratacin de las
plantas. Por lo general, ste se expresa en trminos relativos, en relacin con la mxima
capacidad de agua que los tejidos vegetales pueden almacenar, y se expresa de manera
sencilla as:

= Pf - Ps
Donde:
= Contenido de agua en gramos
Pf = Peso fresco
Ps = Peso seco (a 85C hasta peso constante).

Sin embargo, esta medida es imprctica porque no se pueden hacer comparaciones con
otras medidas de contenido de agua en las mismas plantas o con otras especies.
El contenido de agua se puede expresar con base en peso seco o peso fresco; es decir:
Formula:

100

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100

Sin embargo, estas dos expresiones tambin subestiman o sobreestiman el contenido de


agua porque al expresarlo con base en peso seco, este tiende a cambiar diaria o
estacionalmente, y al expresarlo con base en su peso fresco, los problemas de cambio de
peso se minimizan, pero tambin tiende a minimizar cambios importantes en el contenido
de agua.
Para evitar estos errores, el se expresa con base en su peso trgido (Pt) que es el peso
del tejido a su mxima turgencia. De esta manera el se llama ahora "contenido relativo
de agua (CRA)" o "dficit de saturacin de agua (DSA)".

100

100

DSA = 100-CRA

CRA: Contenido Relativo de Agua


PF: Peso Fresco
PS: Peso Seco
PT: Peso Turgente

Objetivo
Determinar el contenido relativo de agua en plantas (CRA).
Material
Material vegetal, cajas de Petri, balanza y sacabocados de 17 rnrn de dimetro
aproximadamente.
Procedimiento
Con el sacabocados se cortan discos de hojas y se pesan (peso fresco: PF, despus se
colocan en cajas de Petri con agua destilada y se dejan saturar durante cuatro horas (es
importante que se determine el tiempo que se dejan saturar en agua las diferentes
especies de plantas a las cuales se les determine el CRA, por ejemplo, para el caso de
frijol son cuatro horas. Esto se logra si se pesa en diferentes intervalos hasta que las
muestras no cambian de peso). Despus, se sacan de la caja de Petri y se elimina el

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exceso de agua en la superficie utilizando papel secante y se pesan de nuevo (peso


trgido: PT). Finalmente, los discos se secan en una estufa a 85C durante 48 horas y se
pesan (peso seco: PS).
El contenido relativo de agua se determina con la siguiente ecuacin:

100

A continuacin, se muestran los resultados de CRA, obtenidos en las plantas de frijol en


condiciones de riego y sequa.

Tabla 1. Plantas de frijol con riego. Fuente: Larqu-Saavedra 1990.


Pf(mg)

Pt (mg)

Ps (mg)

CRA (%)

24.60

28.60

4.45

87

0.51

0.65

0.22

Xs

0.20

0.26

0.09

Tabla 2. Plantas de frijol en sequa. Fuente: Larqu-Saavedra 1990


Pf(mg)

Pt (mg)

Ps (mg)

CRA (%)

25.45

30.65

3.93

77

1.02

1.10

0.34

SX

0.41

0.45

0.14

2. DETERMINACIN DEL POTENCIAL DE AGUA TOTAL


La energa libre del agua es un concepto termodinmico que se usa para expresar la
capacidad que tiene el agua para realizar trabajo dentro del sistema de la planta
(potencial qumico) y ms apropiadamente se le llama "potencial de agua" (A). El A es

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la diferencia entre el potencial qumico del agua en el sistema y el potencial qumico del
agua pura a la misma temperatura, y se expresa de la siguiente manera:

Potencial de agua = A =

ln

Donde:
R = Constante de los gases
V = Volumen parcial molar
T = Temperatura absoluta
e = Presin de vapor del agua en el sistema
e = Presin de vapor a saturacin del agua pura.

El A en plantas integra el efecto de varios componentes: potencial osmtico (o),


potencial de turgencia (t), potencial matricial (m) y potencial gravitacional (g). El
potencial gravitacional se puede eliminar porque slo representa una fuerza de 0.01
Megapascales (MPa) por metro y la contribucin del potencial matricial tambin es
despreciable con valores cercanos a cero. Finalmente, el A total de un tejido est
expresado por los componentes: potencial osmtico (o) y potencial de turgencia (t).
A = o + t
Se supone que el A puro a la temperatura y presin estndar es igual a cero, por lo tanto,
el A de las plantas es, por lo general, negativo y se usan unidades de presin para
expresarlo:
1 baria = 1.0 X 10 dyn/cm = 1.0 X 10 N/m
= 0.987 atm = 1017 cm de agua = 75.0 cm Hg
= 14.50 Ib/pulg. = 10 Pa = 0.1 MPa = 100 J/Kg.

2.1 Mtodo de cambio de peso

Introduccin

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Este mtodo para determinar el potencial de agua (A) es uno de los ms antiguos. Se
basa en el hecho de que los tejidos vegetales ganan o pierden agua, cuando se les coloca
en soluciones que tienen un potencial osmtico (o) conocido como sacarosa, manitol o
polietiln glicol. Las soluciones con una concentracin conocida se utilizan para ceder o
absorber agua del tejido vegetal que se coloca en ellas. La finalidad de este mtodo es
encontrar una solucin en la cual el tejido no modifique su peso. Esto indica que no hubo
ni prdida ni ganancia de agua y que el tejido y la solucin estn en balance, por lo tanto,
el A del tejido es igual al A de la solucin.

Este mtodo, basado en el cambio de peso, puede ser muy til cuando no se tiene otros
instrumentos que ayuden a precisar el A.

Objetivo
Determinar el potencia' de agua (A) en plantas utilizando esta tcnica.

Material
Material vegetal (de preferencia papa). cajas de Petri sacabocados con un di~metro de 10
mm, balanza analtica, pinzas, papel secante y soluciones de sacarosa: 0,05 0,1 0,2 0,5
0,8 molal.

Procedimiento
Prepare las cajas de Petri con 50 ml de las soluciones de sacarosa. Tome muestras de la
papa con el sacabocados, aproximadamente cilindros de 1 cm de longitud y pese estos
tejidos en la balanza (peso inicial). Coloque cada cilindro en cada caja de Petri con la
solucin de sacarosa; mantngalo as y pese cada cilindro a intervalos de un .hora
(elimine el exceso de agua con papel secante), hasta que los cilindros de papa ya no
indiquen aumento de peso. Saque los cilindros de papa, elimine el exceso de agua con
papel secante y pselo. (Peso final).

Es conveniente pesar las muestras en orden cronolgico, segn se hayan Introducido en


la solucin. Elabore una tabla que muestre lo~ pesos Iniciales, los pesos finales y los
cambios de peso. Determine el porcentaje de cambio de peso con la siguiente frmula:

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% de cambio de peso =

%&' ()*+ %&' ,)(-(*+


100
%&' ,)(-(*+

Las diferentes especies de plantas tienen distinta velocidad de absorcin de agua, por eso
es importante pesar en diferentes intervalos y determinar el tiempo que tarda en alcanzar
el equilibrio cada una de las especies que se desea estudiar.

Ejemplo:
A continuacin, se indican los resultados de A obtenidos en esta prctica. El A es el
punto en que el tejido ni aumento ni perdi peso (igual al o de la solucin), este valor se
busca en tablas de presiones osmticas de la siguiente ecuacin:
o = -miRT
En donde:
o = potencial osmtico de la solucin
m = molalidad de la solucin (moles de soluto/1000 g H2O)
I = una constante que estima la ionizacin del soluto u otras desviaciones de soluciones
perfectas.
R = Constante general de los gases (0.0831 litros baria/mol grado).

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T = Temperatura absoluta (273 K)

En este caso, el resultado fue el siguiente:


o = - (0.35 mol/LH2O) (1.0) (0.0831 Litro baria/mol grado) (298 K)
o = - 8.66 barias a 25C
2.2 Mtodo de coloracin de Shardakov
Introduccin
Este mtodo consiste en sumergir muestras de tejido vegetal durante algn tiempo en un
gradiente de concentracin, de soluciones de sacarosa, manitol o polietilen-glicol. Las
soluciones ganarn o perdern agua
(disminuyendo y aumentado su densidad
respectivamente), esto depende del potencial del agua A del tejido.
Si la densidad de la solucin no cambia, esto indica que el tejido y la solucin tienen el
mismo A.
La presin de turgencia, la transpiracin, los componentes del soluto y la hidratacin son
factores que influyen en el potencial hdrico de una planta.
En el laboratorio se determinar el potencial hdrico a diferentes concentraciones de
sacarosa y se analizar qu sucede en cada una de ellas.
Fenmenos osmticos
Osmosis es la difusin de una sustancia a travs de una membrana semipermeable, es
decir, aquella que deja pasar los solventes pero no los solutos. En las clulas vegetales
ocurre smosis porque las membranas citoplasmticas no dejan pasar numerosas
sustancias disueltas en las vacuolas, lo cual determina la existencia de una menor
energa libre del agua en su interior, provocando la entrada de agua a la clula; a medida
que esta agua entra, el protoplasma es presionado contra la pared celular limitando ella
su grado de expansin. Dicha presin se denomina "presin de turgencia" y es el
producto, a su vez, de la presin osmtica del contenido celular.
El termino o conocido como potencial de solutos o potencial osmtico, representa el
efecto de la disolucin de solutos sobre el potencial hdrico. Los solutos reducen la
energa libre del agua por su dilucin. Este efecto es esencialmente un efecto entrpico;
es decir, la mezcla de solutos yagua aumenta el desorden (entropa) del sistema y,
consecuentemente, disminuye la energa libre. El efecto entrpico de los solutos disueltos
tambin se observa en otros efectos fsicos, conocidos como propiedades coligativas de
las soluciones: los solutos disminuyen la presin de vapor de las soluciones, aumentan su
punto de ebullicin y disminuyen su punto de congelamiento.
Para soluciones diluidas de sustancias no disociadas, el potencial osmtico puede ser
estimado por la ecuacin de Van't Hoff:

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o = - RTCs
Donde:
R = constante de los gases (8,32 Lmolv.k': 0,00831Kg.MPa.moll.okl)
T = temperatura absoluta en grados Kelvin
Cs = concentracin de solutos de la solucin expresada como osmolalidad (moles de
solutos totales disueltos por litro de agua [mol.L:']).
Objetivos
Determinar con esta tcnica el potencial de agua del tejido vegetal.

Observar cambios en el potencial hdrico y osmtico a travs de diferencias de


densidad.

Distinguir el potencial hdrico como un factor importante en el desarrollo integral de


una planta.

Entender los diferentes procesos que ocurren dentro de una hoja.

Materiales
Tubos de ensayo (10)
Material vegetal (hojas o trozos de papa de igual tamao)
Pipetas de 10 mL
Azul de metileno al 1 %
Gradilla
Pinzas y cuchillas
Pipetas Pasteur o cuentagotas
Soluciones de sacarosa con concentraciones de 0,05 0,1 0,2 0,5 0,8 molal
Metodologa
Preparar 2 series de 5 tubos de ensayo con las soluciones de sacarosa. Se debe
etiquetar dos tubos de ensayo por cada una de las concentraciones de sacarosa.
Realice cortes con un sacabocados crculos de tejido de las hojas (o papa para que el
proceso sea ms rpido) o con un bistur cortes de un cm2.
En la primera serie se agrega a cada tubo 15 mL de una solucin de sacarosa y 4
cortes o discos de hojas, del cual se desea conocer su potencial hdrico. En la
segunda serie se colocan 15 mL de solucin de sacarosa ms cuatro gotas de azul de
metileno. Se deben tapar los tubos con papel parafilm para evitar la evaporacin.
Al cabo de dos horas, se retira con unas pinzas el tejido vegetal de cada uno de los
tubos. Con el cuentagotas o una pipeta Pasteur se toman unas gotas de la solucin
coloreada de sacarosa 0,05 molal y se libera a unos 3 cm bajo la superficie de de la
solucin del el tubo donde estaba el tejido a la concentracin 0,05 molal, observando

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qu sucede con la gota coloreada, y as con cada uno de los dems tubos de forma
respectiva. Se toma como parmetro si la gota sube, baja o se diluye. Escriba los
resultados en una tabla.
El potencial hdrico ser igual al potencial osmtico de la solucin coloreada en la cual
la gota de la solucin coloreada permaneci suspendida.
Discuta los resultados.

Figura tomada de Flrez 2004


3. DISTRIBUCIN DE LOS ESTOMAS E NDICE ESTOMTICO.
IMPRESIN

TCNICA DE

Introduccin
La prdida de agua que sufren las plantas es un fenmeno totalmente fsico; el agua se
evapora de la hoja como lo hara de un recipiente cualquiera. La hoja necesita estar
saturada de agua para su vida normal, y aunque tiene la epidermis impermeable, siempre
hay difusin a travs de ella; igualmente, la hoja tiene estomas y, si bien puede cerrarlos,
el cierre no es hermtico. Adems, los estomas se abren conforme a las leyes
fisicoqumicas. Es claro que una planta no podra vivir sin intercambio de O2 y CO2 con el
ambiente; y por donde entra CO2 escapa H2O gaseoso, lo cual se da con la apertura de
los estomas que depende de las circunstancias del medio ambiente.

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La mayor parte de la transpiracin se hace por los estomas; aun cuando el ostolo est
cerrado, deja un orificio de aproximadamente 0,211 y, dado el tamao de la molcula de
agua (0,3nm), se calcula que pueden pasar por el estoma cerrado unas 5.000 molculas.
Los estomas son poros formados por un par de clulas especializadas llamadas clulas
guarda. Se encuentran en la epidermis de las partes areas de la mayor a de las plantas
terrestres.
Convencionalmente, un estoma se acepta como el poro y las dos clulas que lo rodean
(clulas guarda). Un complejo estomtico se refiere a las clulas guarda y a las clulas
vecinas (clulas subsidiarias).
La apertura y cierre del estoma es posible por la morfologa especial de las clulas
oclusivas o guardas, que al llenarse de agua, se alargan y se despegan las paredes que
forman el borde del ostolo, el cual queda abierto; cuando sale agua de ellas, quedan
flcidas y por elasticidad toman su forma primitiva.
El estudio de los estomas es uno de los campos ms activos en la fisiologa vegetal y una
de las razones de este gran inters se debe a que los estomas intervienen en el control de
dos de los ms importantes procesos fisiolgicos en las plantas: fotosntesis y
transpiracin.
Usualmente, los estomas estn distribuidos al azar en la epidermis de las plantas. Sin
embargo, en la mayora de las monocotiledneas y en gimnospermas los estomas estn
distribuidos en hileras.
Factores genticos y ambientales como disponibilidad de agua, intensidad de luz,
temperatura, y concentracin de CO2 influyen en la distribucin, frecuencia y morfologa
de los estomas. Debido a que todos estos factores influyen en la frecuencia. Salisburv
introdujo, en 1928, el trmino ndice estomtico, que relaciona el nmero de estomas por
unidad de rea con el nmero de clulas epidrmicas por unidad de rea:
Indice estomtico =

Nm. de estomas por unidad de rea


Nm. de estomas por rea + Nm. de clulas epidrmicas por rea

Al parecer este ndice permanece constante dentro de las hojas de una misma planta.
El estudio de los estomas se puede realizar mediante dos mtodos: los directos y los
indirectos. Los directos incluyen las observaciones directas en las hojas en el microscopio
o mediante rplicas de la superficie de las hojas. Los mtodos indirectos incluyen las
estimaciones de la apertura de los estomas mediante pormetros de flujo de masas,
pormetros de resistencia a la difusin.
Objetivo
Dominar la tcnica de impresin de estomas y determinar el ndice estomtico en
diferentes especies de plantas.
Material

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Plantas de la especie que se desee, portaobjetos y cubreobjetos, pinzas pequeas, barniz


para uas y microscopio.
Procedimiento
En la superficie de las hojas a las cuales se quiere tomar impresiones, coloque una
pelcula delgada de esmalta (barniz para uas), -es conveniente usar uno de buena
calidad y de secado rpido- con un pincel de aproximadamente 1 cm2 (tener en cuenta de
no tocar la pelcula con la mano para no dejar huellas. Espere unos 30 minutos para que
la pelcula seque y, despus, con pinzas, desprenda la pelcula plstica que se form y
colquela sobre el portaobjetos cuidando que la superficie que estuvo en contacto con la
epidermis de la hoja quede hacia arriba, coloque el cubreobjetos y proceda a observar la
pelcula en el microscopio.
Halle el ndice estomtico.
Dibuje y comente los resultados.
4. PIGMENTOS VEGETALES
Introduccin
Todos los organismos que habitan en la biosfera dependen de las plantas como fuente de
energa, debido a su capacidad de fijar dixido de carbono por medio de la fotosntesis
para constituir molculas ms complejas. Entre estas molculas encontramos la glucosa,
azcar simple precursor de compuestos orgnicos. La capacidad de las plantas para fijar
carbono a travs del proceso fotosinttico depende en gran medida de la cantidad de
radiacin disponible.
La fotosntesis es un proceso biolgico de foto-absorcin de energa y foto-asimilacin de
elementos esenciales. Durante la fase de foto-absorcin de energa, la luz visible del
espectro radiactivo electromagntico incidente es absorbida diferencialmente por las
molculas de los pigmento s vegetales, logrando que la energa lumnica sea
transformada en energa electroqumica.
Esta energa es almacenada en dos biomolculas estables: NADPH (fuente de poder
reductor) y ATP (poder de enlace), necesarias para la fase siguiente.
Durante la fase de foto-asimilacin de elementos esenciales, se asimilan los elementos
constitutivos de la materia orgnica a partir de fuentes minerales inorgnicas y se
incorporan en biomolculas orgnicas metabolizables. Por ejemplo, la energa de la
primera fase es usada en la conversin de CO2 yagua en azcares.
Existen diferentes tipos de pigmentos foto sintticos que se encuentran en mayor o menor
proporcin en las diversas especies; stos comprenden las clorofilas a y b, algunas
xantofilas y carotenos. Para su identificacin y valoracin se hace necesario un proceso
de extraccin en el que se macera el tejido vegetal en presencia de un solvente orgnico.

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Objetivos
Determinar la cantidad de clorofila total, y de clorofilas a y b presentes en una muestra de
hoja.
Materiales e Instrumentos
- Material vegetal (Hojas de la planta seleccionada)
- Mortero y pistilo
- Probeta
- Acetona
- ter de petrleo
- Tubos de ensayo
- Pinzas
- Espectrofotometeo
Extraccin de clorofila
- Embudo de decantacin
- Pipetas
- Carbonato de calcio
- Cloruro de sodio (10%)
- Sulfato de sodio anhidro
Procedimiento
1) Tome 3 g de tejido foliar sin nervadura.
2) Macere.
3) Aada 0,1 g de CaC03 y contine macerando.
4) Aada 10 ml, de acetona al 80% y contine macerando.
5) Tome el sobrenadante del macerado y llvelo al embudo de separacin. Tpelo
para evitar que se volatilice la acetona.
6) lave nuevamente el macerado con 10 ml, de acetona, lleve el sobrenadante al
embudo de separacin y tpelo.
7) Agregue 15 ml, de ter de petrleo al mortero y termine de macerar el tejido
vegetal.
8) Vierta el sobrenadante en el embudo de separacin y tpelo.
9) Agite el embudo de separacin en forma rotatoria, teniendo cuidado de que el
tapn no salga expulsado del embudo.
10) Prepare una solucin de NaCl al 10%.
11) Tome 60 ml, de solucin de NaCl y adala al embudo de separacin. Tape y
agite en forma rotatoria.
12) En el embudo de separacin se forman dos capas. Retire el tapn y elimine la
capa inferior abriendo la llave de paso.
13) Repita los pasos 11 y 12 .:
14) Recoja la capa superior en un tubo de ensayo, tpelo y llvelo a la oscuridad para
evitar la incidencia de la luz.

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Cantidad de clorofila
Calibre el fotocolormetro utilizando acetona al 80% como blanco de calibracin. Tome
la densidad ptica del extracto de clorofila con el fotocolormetro, ajustando el aparato
a longitudes de onda entre 663 y 645 nm para cada medida.
Si el extracto est muy concentrado, haga una dilucin 1: 10 con acetona al 80%.
Cantidad de clorofila (a, b o total) en mg de clorofila por g de tejido (mg!g):

Clorofila a =

(12,7 x D663) (2,69 x D 645) x V


1.000 xW

Clorofila b =

(22,8 x D 645) (4,48 x D 663) x V


1.000 xW

Clorofila total =

(20,2 x D645) + (8,02 x D663) x V


1.000 xW

Donde:
D = densidad ptica o absorbancia.
V = volumen de extracto utilizado en la determinacin de la densidad ptica.
W = masa del material inicial (3 g de tejido foliar).

Resultados y preguntas

Presente los clculos de las cantidades de clorofila (total, a y b) en


Mg/g de tejido.
Bibliografa
Azcn-Bieto, J., Taln, M. (2003). Fundamentos de la Fisiologa Vegetal. McGraw-Hill
Interamericana. Edicions Universitat de Barcelona.
Flrez R. y Cruz R 2004. Guas de laboratorio de fisiologa vegetal. Universidad Nacional
de Colombia. Bogot.
Larqu-Saavedra A. El agua en las plantas. Manual de prcticas de fisiologa vegetal.
Trillas. Mxico.
Salisbury, F. B., y Ross, C. W. (1994). Fisiologa Vegetal. Grupo Editorial
Iberoamericana. Mxico.

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD


Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente
Protocolo de prcticas de la Fisiologa Vegetal

A. Productos a entregar al tutor de prcticas. El estudiante entregar: Informe


de laboratorio.
El informe debe contener mnimo
Portada
Introduccin
Actividades realizadas
Resultados (tablas de datos y figuras)
Anlisis y Discusin de resultados
Conclusiones
Bibliografa

Nota: El tutor de prctica debe enviar un informe de prcticas al director del curso
con las actividades realizadas, fecha de realizacin de la prctica, la lista de
estudiantes con nombres completos, cdigos de estudiantes y las calificaciones
respectivas (teniendo en cuenta la rbrica de evaluacin). La calificacin final del
componente prctico de los estudiantes debe ser de 0 a 100 puntos (ver rbrica de
evaluacin).

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Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente
Protocolo de prcticas de la Fisiologa Vegetal

RBRICA DE EVALUACION ACTIVIDAD PRCTICA


Item

Participacin en
La actividad
practica

Valoracin Baja

Valoracin Media

Valoracin Alta

Mximo

El estudiante
El estudiante no particip en El estudiante tuvo una deficiente
particip
el actividad prctica
participacin en las actividades prcticas. activamente en las
prcticas
(Puntos 0)

40

(Puntos=20 )
(Puntos =40)

Estructura del
Documento

El estudiante no tuvo en
cuenta las normas bsicas de
El documento tiene la
presentacin de trabajos
El archivo le falta algunos elementos de la
estructura y nombre
escritos ni las orientaciones estructura solicitada
de archivo adecuado.
de la gua para la
construccin del documento.
(Puntos = 8)
(Puntos= 15)

15

(Puntos = 0)

Fines del trabajo

Aunque se entrega un documento, este no Se cumpli con los


El documento no da
objetivos del trabajo
respuesta a los lineamientos soluciona de manera adecuada la situacin
planteada. El anlisis de la informacin es de manera
de la actividad propuesta.
superficial, la bibliografa consultada y las satisfactoria.
conclusiones no se corresponden con las
situaciones descritas.

(Puntos = 0)

Referencias
bibliogrficas

(Puntos =10)

Se maneja de manera
inadecuada el uso de citas y
Aunque presenta referencias en la
referencias (no hace las citas
bibliografa, estas no tienen errores de
en el texto), o las
forma.
referencias no son acordes a
la temtica de trabajo.
(Puntos = 5)

(Puntos = 20)
El manejo de citas y
referencias es
satisfactorio.

10

(Puntos =10)

(Puntos = 0)

Ortografa

25

El documento presenta ms
de 3 errores de ortografa.

El documento no
El documento presenta hasta 3 errores de
presenta errores de
ortografa.
ortografa.

(Puntos=0)

(Puntos=5)

10

(Puntos =10)

TOTAL DE
PUNTOS
POSIBLES

Si el tutor de prctica realiza las dos opciones de prctica, la nota ser el


promedio de la calificacin de ambas actividades.

100

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