ESTUDIO PRELIMINAR DEL EFECTO DEL BROMURO DE METILO EN LA

HEMORRAGIA SUBMACULAR Y PRESION ARTERIAL DE LA RATA RATTUS

NORVEGICUS,MEDIANTE INGESTA DEL MANGOMANGIFERA

Objetivos
Objetivos generales
-

Evaluar el efecto del bromuro de metilo en la hemorragia sub macular y

presin arterial en RATTUS NORVEGICUS

MARCO TERICO
1. Aspectos generales del bromuro de metilo
El bromuro de metilo es un hidrocarburo aliftico halogenado que se presenta
como gas inodoro; incoloro y extremadamente toxico. Se usa como plaguicida
aplicado en la tierra, antes de sembrar tambin tiene efectos fungicidas,
acaricidas, nematocidas, rodenticidas y herbicidas (semillas en germinacin)
El bromuro de metilo es tres veces ms pesado que el aire y puede acumularse.
Despus de ser aplicado en la tierra, los vapores pueden disiparse en el aire,
afectando a las personas cercanas y causando lesin en la capa de ozono. La
Dosis Letal en ratas es de 214 mg/kg, inhalacin CL100 6 horas, para ratas 0.53
mg/L de aire.
El peligro vara con la concentracin, el volumen del local presentando(alergias,
problemas respiratorios o cardacos, etc.
El nivel de tolerancia en alimentacin humana es de 0,3 mg de bromuro por
kilogramo de peso corporal. Entonces los niveles de bromuro de metilo normales
en sangre son entre 0.2-10 mg/L, mostrando una buena correlacin con los niveles
en aire; en orina niveles de bromuros normales son 6.3 - 2.5 mg/L. A pesar de ello
no hay una correlacin entre los niveles de bromuros y los sntomas.
a. Mecanismo de accin
Es un potente agente alquilante no especfico, con especial afinidad por los grupos
sulfhidrilo y amino. Se une a los grupos amino de los aminocidos, interfiriendo
con la sntesis y funcin de las protenas.

Su toxicidad puede ser resultado tanto

de la alquilacin directa sobre los
componentes celulares (glutatin,
protenas, ARN o ADN) como de la
formacin de metabolitos txicos a
partir del glutatin metilado.
La ruta de exposicin ms importante
es la inhalatoria. El bromuro de metilo
inhalado es rpidamente distribuido a
todos los tejidos. El contacto drmico
con el bromuro de metilo lquido puede causar irritacin y su absorcin produce
ardor y toxicidad sistmica.
Al ingresar al organismo es metabolizado por hidrlisis a in bromuro y metanol
con gran reactividad en el sistema nervioso (sustancia gris y axones perifricos) y
en el hgado.
En animales se indica que aproximadamente el 50% es eliminado al exhalar como
dixido de carbono, 25% es excretado en la orina y heces y 25% est unido a los
tejidos como grupo metilo. La vida media de eliminacin del in bromuro es
aproximadamente de 12 das.
b. Mecanismos de los Agentes Alquilantes
Los agentes alquilantes Son compuesto qumico que reacciona con las
nucleoprotenas del ADN al que pertenecen; el efecto que provocan es la
inactividad de la molcula de ADN, y como consecuencia, el bloqueo de la divisin
celular. Estos agentes funcionan por medio de tres mecanismos diferentes, los
cuales todos alcanzan el mismo resultado - la interrupcin de la funcin del ADN y
la muerte celular.
-

Un agente alquilante adhiere grupos alquilos a las bases del ADN. Esta
alteracin resulta
para
que
el
ADN
sea
fragmentado
por
las enzimas de reparo cuando stas tratan de reemplazar las bases
alquiladas DIAGRAMA 3. Las bases alquiladas previenen de la sntesis del
ADN y la transcripcin del ARN del ADN afectado. DIAGRAMA 1

Cual los agentes alquilantes causan dao al ADN es en la formacin de

puentes cruzados, unin de tomos en el ADN. En este proceso, dos bases
son unidas por medio de un agente alquilante que tiene dos sitios de unin
con el ADN. Los puentes se forman dentro de una sola molcula de ADN o
como puentes cruzados que conectan dos molculas distintas de ADN. Este
enlace previene que el ADN sea separado para la sntesis o la
transcripcin.

Los agentes alquilantes es la induccin de nucletidos disparejos llevando a

mutaciones. En una doble hlice normal de ADN, que la Adenina se
empareja con la Timina y la Guanina se empareja con la Citosina. Como se
muestra en diagrama 3, las bases alquiladas Guanina pueden ser
emparejadas errneamente con la Timina. Si esta alteracin sucede y no
es corregida, esto puede resultar como una mutacin permanente.

2. Aspectos generales de Hemorragia

Las hemorragias son prdidas de sangre que pueden acontecer interna o

externamente. La hemorragia interna se refiere a sangre que gotea desde los
vasos sanguneos hacia el interior del cuerpo; mientras que como hemorragia
externa podemos diferenciar dos tipos: por orificio natural del cuerpo (recto, vagina
o boca), o externa simplemente (producida por la ruptura de la piel). Resumiendo
podramos decir que una hemorragia es la salida de sangre de los vasos
sanguneos a causa de su ruptura
2.1.

Factores de coagulacin

Son aquellas protenas originales de la sangre que participan y forman parte del
coagulo sanguneo. Son trece los factores de coagulacin, todos ellos necesitan
de cofactores de activacin como el calcio, fosfolpidos.

2.2.

Caractersticas de los factores de la coagulacin:

Para facilitar el entendimiento del sistema de la coagulacin, clasificaremos a los

factores de acuerdo con sus propiedades generales

2.3.

Factores dependientes de la vitamina K.

Algunos de los factores de la coagulacin requieren de vitamina K para su sntesis

completa. Estas protenas incluyen a los factores II, VII, IX y X, as como a las dos
protenas reguladoras protena C y protena S. Todas tienen estructuras similares
en sus regiones con cierta homologa y contienen de 10 a 12 residuos Glu, los
cuales son ca boxilados a cido -carboxiglutmico y, en presencia de vitamina K,
son importantes para la unin del Ca y necesarios para la interaccin de estas
protenas vitamina K dependientes con membranas plaquetarias (fosfolpidos
plaquetarios).9 En ausencia de vitamina K o en el caso de tratamiento con
anticoagulante con antagonistas de la vitamina K, los factores II, VII, IX y X son
sintetizados pero estn incompletos, carecen de la unin de calcio al cido
-carboxiglutmico y en el plasma se encuentran como factores no funcionales,
incapaces de unirse adecuadamente a los iones Ca; estos factores son conocidos
como PIVKA (por sus siglas en ingls): protenas inducidas por ausencia o
antagonismo de la vitamina K. Cofactores. Se dividen en dos grupos:
Procofactores plasmticos: Se incluyen los factores V y VIII y el CAPM. Los dos
primeros tienen propiedades bioqumicas y estructurales similares, son
sintetizados como una sola cadena con peso molecular (PM) aproximadamente de
280,000, tienen tres homologas; tres dominios A, un gran dominio B y un par
homlogo de dominio C. El FV circula en plasma como una protena monomrica,
y el FVIII circula con el factor de von Willebrand (FvW) y al activarse se disocian
por protelisis de uniones peptdicas. Ambos son sintetizados como procofactores
y, al ser activados por la trombina, se convierten a cofactores formando parte de
los complejos X-asa (FVIII) y II-asa (FV) sobre la superficie plaquetaria; otra
posibilidad de activacin del FV es por parte del FXa. Veinticinco por ciento del FV
se encuentra en los -grnulos de la plaqueta unido en complejo a una protena
multimrica, llamada multimerina, y es liberado en forma de procofactor. El CAPM
fue descrito con anterioridad. El otro grupo lo constituyen los Procofactores

celulares: Factor tisular (FT) y trombomodulina (TM). El FT es una protena

especfica presente sobre la membrana plasmtica de clulas como los monocitos;
clulas endoteliales y rico en carbohidratos; es el nico factor de la coagulacin
que no se encuentra normalmente en la circulacin o en contacto con ste. A
diferencia de los otros cofactores, factor V y factor VIII, el factor tisular no requiere
ningn proceso para su actividad y slo se necesita el contacto con el FVII. Uno
de los hallazgos ms importantes del factor tisular es que unido al FVII inician la
co gulacin plasmtica; tambin se ha observado que la iniciacin sola depende
de la ruptura de la barrera fsica que normalmente separa al FVII del FT y, por lo
tanto, para que la hemostasia ocurra, el dao por s mismo puede ser suficiente
para iniciar la coagulacin. Se ha informado que los factores VII y VIIa se unen al
FT con la misma constante de disociacin, por lo que el FVII se distingue de otros
zimgenos. La trombomodulina se expresa sobre clulas del endotelio vascular;
de los cofactores es el nico que participa como anticoagulante, activando a la
protena C (PC).
2.4.

Modelo clsico de la coagulacin:

La teora clsica de la coagulacin fue el esquema de Morawitz en 1904, quien

admiti que los tejidos vasculares liberan una tromboplastina tisular necesaria
para iniciar el proceso de coagulacin, y propuso los cuatro componentes
esenciales para la coagulacin en plasma: protrombina, fibringeno, calcio y
tromboplastina, y asumi la presencia de antitrombinas en circulacin que
modulan la trombocinasa. Estas ideas que surgieron a principios del siglo XX, la
trombocinasa es mejor conocida como el FT. Morawitz es considerado como el
padre de la coagulacin

2.5.

Deficiencia del factor II (protrombina)

Es un transtorno muy raro ya que ocasiona una coagulacin deficiente de la

sangre.
a. Causas de la deficiencia del factor II
- Deficiencia de vitamina K se produce por uso prolongado de antibiticos,
obstruccin de las vas biliares y mala absorcin de los nutrientes por parte
del tracto intestinal.
- Enfermedades hepticas graves
- Uso de anticuagulantes
3. Hemorragia submacular
La ubicacin de hemorragias en la macula son la pre retinales o sub hialoideas;
intraretinales y submaculares (sub retinianas; sub EPR y coroideas)
a. Las causas de las hemorragias submacular
- Degeneracin membrana neovasculares caroidea
- Causas infecciosas como retinitis
- Enfermedades sistmicas y traumas
La etiopatogenia en hemorragia sub macular los investigadores Glatt y machemer
demostraron que la sangre sub retiniana produce lesiones en los fotorreceptores
(FR) a las 24 horas y la degeneracin de la retina externa se produce entre el
cuarto y sptimo da
Son tres los mecanismos de dao:
Efecto toxico: consecuencia de los bioproductos frricos de la sangre. La ferritina
es toxica para la coriocapilar, los vasos sanguneos, los FR y el EPR.
Traccin mecnica por la fibrina: sobre los segmentos externos de los FR a las
pocas horas y a los pocos das del resto de la retina.
Efecto de barrera para la difusin de metabolitos toxicos y nutrientes.
Presin arterial:
La presin arterial se define como la fuerza que ejerce la sangre sobre las paredes
de las arterias. La presin de la sangre dentro de la circulacin arterial o
sangunea depende del gasto cardiaco, resistencia vascular perifrica y volemia,
se produce aumento de la presin arterial cuando aumenta la fuerza de
contraccin del miocardio, el volumen sanguneo y el tono vascular, en tanto baja
ante condiciones opuestas. La presin arterial aumenta y desciende
alternativamente con cada contraccin y relajacin de los ventrculos, la presin
ms alta debido a la sstole, es la presin sistlica, y la ms baja debido a la
distole, es la presin diastlica. La elasticidad de la aorta le permite acomodar el

gran volumen sistlico y atenuar el cambio de presin, de modo que el paso de

presin arterial sistlica a presin arterial diastlica sea progresivo. Para la
valoracin de la presin arterial se utiliza como unidad de medida el milmetro de
mercurio (mm Hg), usando el manmetro de mercurio como instrumento de
medida. En las grandes arterias la presin normalmente sube durante cada ciclo
cardaco a un valor mximo (presin sistlica) de 120 mm Hg aproximadamente y
cae a un valor mnimo (presin diastlica) cercano a 70 mm Hg. La presin arterial
se anota convencionalmente como presin sistlica sobre presin diastlica,
ejemplo 120/70 mm Hg. La presin arterial puede ser influenciada por diversos
factores, como emociones y ansiedad, y en algunas personas la presin
sangunea es mayor cuando se toma en la clnica que durante las actividades
normales en su hogar. En condiciones fisiolgicas existe un equilibrio entre los
sistemas que regulan la presin arterial normal, estos se encuentran tan
integrados que si por alguna razn la presin se incrementa, inmediatamente
aparece un mecanismo para corregirla. Cuando la presin arterial se mantiene alta
es porque existe una disfuncin en la interaccin de los mecanismos vasculares,
cardiognicos, renales o endocrinos

MATERIALES Y MTODOS
Animales:
Se utilizaron ratas adultas hembras Rattus norvergicus (Rata albina) variedad
SPRAGE DAWLEY en el Bioterio de la facultad de ciencias de la universidad
JORGE BASADRE GROHOMANN. Los animales de experimentacin fueron
separados siendo dos las muestras a utilizar una de control y la otra experimental.
Fueron alimentadas con conejina y la infusin preparada, El diseo fue de tipo
experimental in vivo
Mtodo:
Se procedi a la preparacin del jugo de mango, que consisten en licuar 130
gramos de mango
Dos grupos compuestos de 2 ratas se alimentaron con jugo licuado de mango
durante dos semanas, de la forma siguiente: grupo 1, su alimentacin fue normal
(grupo control); grupo 2 y 3 se les aplico como dieta el juego de mango
La presin arterial se midi al inicio y al final del periodo, con un procedimiento no
invasivo en la cola de la rata utilizando un esfigmomanmetro y un equipo de

ultrasonido, este monitorea el flujo sanguneo acsticamente, haciendo el papel de

un estetoscopio.

Diseo de estudio:
Experimental
En el presente estudio se utilizaron ratas de laboratorio mantenidas en el bioterio y
posteriormente en espacios libres de nuestros hogares. Las ratas fueron
alimentadas con conejina de alimento comercial. Se les proporciono agua y
alimento, siendo su alimentacin ad- libitum, es decir que los alimentos se dejan a
disposicin de las ratas durante 24 horas; y se cuantifico su consumo diario.
En promedio, el consumo de alimento y liquidos por cada rattus se muestra a
continuacin en la tabla.
Numero de Peso
Rattus rattus inicial
(g)
1
215g
2
258g
3
315g
4
325g
5
266g
6
330g

Consumo de lquido
en 24 horas (ml)
65.8 ml/ dia
76.8 ml/dia
93.8 ml/dia
96.7ml/dia
99.0ml/dia
68.5ml/dia

Consumo
alimento
en 24 horas (g)
38.6 g/dia
47.6 g/ dia
58.1g/dia
59.9g/dia
75.5g/dia
62.2g/dia

de

Preparacin de la sustancia de prueba

Para la induccin de hemorragia experimental en rattus rattus, se prepara jugo de
la cascara Mangifera indica (mango), con un litro de agua. La mangifera esta
supuestamente fumigada con bromuro de metilo.
La presin arterial se midi antes del consumo y dos semanas despus del
consumo del jugo

RESULTADO
En las ratas que recibieron la dieta la presin arterial se elev desde 119,5 3,65
mm Hg a 120,4 3,9 mm Hg mediante la ingesta de mango mangifera
En el grupo control, los tres parmetros continuaron normales

El consumo de alimento no se redujo en ninguno de los grupos

DISCUSIN

CONCLUSIONES
El mangifera indica (mango) fumigado con bromuro de metilo puede producir
hemorragias sub maculares debido a que este gas toxico disminuye la vitamina K
y produce una coagula deficiente en la coagulacin, impidiendo que se activen uno
de los factores de coagulacin.
La ingesta de mango no produjo mucho cambio en cuanto a la presin
Cabe decir que las fuente de fructosa, azcar con importante impacto en el
incremento de triglicridos
La Musa paradisiaca (pltano) por su componente vitamnico es tratamientos que
se utiliza para que se active el mecanismo de coagulacin debido a la vitamina k.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Trastornos de coagulacin y su incidencia en el post operatorio exodoncico.
Raquel pinoargote intriago. Tesis de grado. Ecuador. 2012.
Mecanismos de activacin
Medigraphic. Mxico. 2006

de

la

coagulacin.

Carlos

Martnez

Murillo.

Estado actual del mecanismo de la coagulacin sangunea. Lic. Alina Daz

Concepcin y Dra. Delfina Almagro Vzquez. Revista Cubana Hematol Inmunol
Hemoter. Habana.2001