UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAD DE INGENIERA
E. A. P. DE ING. AGROINDUSTRIAL

PRACTICA 03: DETERMINACION

DE LAS PROPIEDADES QUIMICAS DE LAS PROTEINAS

CURSO

COMPOSICION BIOQUIMICA DE PRODUCTOS

AGROINDUSTRIALES

ALUMNOS

Cruzado Caldern Lisbet

Orbegozo Mattos Antony

PROFESOR

Ing. Vicente Carranza

Nvo. Chimbote, 16 de Mayo del 2016

I)

OBJETIVOS
Al trmino de esta prctica, fuimos capaces de describir y demostrar de manera
cualitativa las propiedades qumicas de las protenas en base a:
Solubilidad de protenas
Las propiedades electroqumicas de las protenas
El afecto acido-base en la solubilidad de las protenas

II)

FUNDAMENTO TEORICO
Las protenas son los materiales que desempean un mayor nmero de funciones
en las clulas de todos los seres vivos. Por un lado, forman parte de la estructura
bsica de los tejidos (msculos, tendones, piel, uas, etc.) y, por otro,
desempean funciones metablicas y reguladoras (asimilacin de nutrientes,
transporte de oxgeno y de grasas en la sangre, in activacin de materiales
txicos o peligrosos, etc.). Tambin son los elementos que definen la identidad
de cada ser vivo, ya que son la base de la estructura del cdigo gentico (ADN)
y de los sistemas de reconocimiento de organismos extraos en el sistema
inmunitario. Son macromolculas orgnicas, constituidas bsicamente por
carbono (C), hidrgeno (H), oxgeno (O) y nitrgeno (N); aunque pueden
contener tambin azufre (S) y fsforo (P) y, en menor proporcin, hierro (Fe),
cobre (Cu), magnesio (Mg), yodo (I), etc
ESTRUCTURA DE LAS PROTENAS
Viene definida en cuatro niveles:
Estructura primaria
La estructura primaria es la forma de organizacin ms bsica de las protenas.
Est determinada por la secuencia de aminocidos de la cadena proteca, es
decir, el nmero de aminocidos presentes y el orden en que estn enlazados por
medio de enlaces peptdicos.

Estructura Secundaria:
La estructura secundaria de las protenas es el plegamiento regular local entre
residuos aminoacdicos cercanos de la cadena polipeptdica. Se adopta gracias a la
formacin de enlaces de hidrgeno entre las cadenas laterales (radicales) de
aminocidos cercanos en la cadena.

Hlice alfa: En esta estructura la cadena polipeptdica se enrolla en espiral

sobre s misma debido a los giros producidos en torno al carbono alfa de cada
aminocido. Esta estructura se mantiene gracias a los enlaces de hidrgeno
intracatenarios formados entre el grupo -NH de un enlace peptdico y el grupo
-C=O del cuarto aminocido que le sigue.
Hlice beta: Cuando la cadena principal se estira al mximo que permiten sus
enlaces covalentes se adopta una configuracin espacial denominada
estructura beta

Giros beta: Secuencias de la cadena polipepetdica con estructura alfa o beta,

a menudo estn conectadas entre s por medio de los llamados giros beta. Son
secuencias cortas, con una conformacin caracterstica que impone un brusco
giro de 180 grados a la cadena principal de un polipeptido.

Hlice de colgeno: Es una variedad particular de la estructura secundaria,

caracterstica del colgeno, protena presente en tendones y tejido conectivo;
es una estructura particularmente rgida.

Lminas beta o lminas plegadas: algunas regiones de protenas adoptan una

estructura en zigzag y se asocian entre s estableciendo uniones mediante
enlaces de hidrgeno intercatenarios. Todos los enlaces peptdicos participan
en estos enlaces cruzados, confiriendo as gran estabilidad a la estructura.

Estructura terciaria
La estructura terciaria de las protenas es el modo en el que la cadena
polipeptdica se pliega en el espacio. Es la disposicin de los dominios en el espacio.
La estructura terciaria se realiza de manera que los aminocidos apolares se sitan
hacia el interior y los polares hacia el exterior
La estructura terciaria de las protenas es el modo en el que la cadena
polipeptdica se pliega en el espacio. Es la disposicin de los dominios en el espacio.
La estructura terciaria se realiza de manera que los aminocidos apolares se sitan
hacia el interior y los polares hacia el exterior
La conformacin globular se mantiene estable gracias a la existencia de enlaces entre
los radicales R de los aminocidos. Aparecen varios tipos de enlaces
Estructura Cuaternaria
Esta estructura informa de la unin, mediante enlaces dbiles (no covalentes) de
varias cadenas polipeptdicas con estructura terciaria, para formar un complejo
proteico. Cada una de estas cadenas polipeptdicas recibe el nombre de protmero.

Desnaturalizacin:
Si en una disolucin de protenas se producen cambios de pH, alteraciones en la
concentracin, agitacin molecular o variaciones bruscas de temperatura, la
solubilidad de las protenas puede verse reducida hasta el punto de producirse su
precipitacin. Esto se debe a que los enlaces que mantienen la conformacin globular
se rompen y la protena adopta la conformacin filamentosa. De este modo, la capa
de molculas de agua no recubre completamente a las molculas proteicas, las cuales
tienden a unirse entre s dando lugar a grandes partculas que precipitan. Adems, sus
propiedades biocatalizadores desaparecen al alterarse el centro activo. Las protenas
que se hallan en ese estado no pueden llevar a cabo la actividad para la que fueron
diseadas, en resumen, no son funcionales.
Esta variacin de la conformacin se denomina desnaturalizacin. La
desnaturalizacin no afecta a los enlaces peptdico: al volver a las condiciones
normales, puede darse el caso de que la protena recupere la conformacin primitiva,
lo que se denomina re naturalizacin.
Ejemplos de desnaturalizacin son la leche cortada como consecuencia de la
desnaturalizacin de la casena, la precipitacin de la clara de huevo al
desnaturalizarse la ovo albmina por efecto del calor o la fijacin de un peinado del
cabello por efecto de calor sobre las queratinas del pelo.

Solubilidad:
La solubilidad de las protenas es sensible inica y al ph del medio, como asimismo a
la presencia de otros solventes. puesto que las, protenas son electrolitos (electrolitos
multivalentes),se comportan de modo similar a los electrolitos simples , y por .lo
tanto , son susceptibles a la concentracin inica del medio ; a medida que esta
aumenta ,mayor es la solubilidad de la protena , por que las cargas elctrica de esta
se estabilizan . Sin embargo, mas all de cierta concentracin inica, en general las
concentraciones bastantes altas, al solubilidad de las protenas disminuyen hasta
hacerse tan baja que precipitan. La causa es que los iones de las sales presentes en el
medio compiten con los grupos cargados de las protenas por las molculas de agua
disponibles.
El pH del medio afecta la solubilidad de las protenas, pues cuando es igual al punto
isoelctrico de la protena, esta se pierde su carga elctrica neta y con ello su
solubilidad, llegando a precipitar en algn caso.
La presencia de solventes orgnicos como la acetona, etanol, metanol, etc., afecta
tambin la solubilidad de las protenas, por que en su presencia disminuye la
capacidad de los solventes acuosos para separar y solubilizar a los grupos cargados
de protenas.
La temperatura tambin modifica la solubilidad de las protenas.

III)

PROCEDIMIENTO
A. AISLAMIENTO DE LA CASEINA: (se har previo a la prctica)

Se calent en un vaso precipitado (de 150ml)

50ml de leche hasta alcanzar 38 C

Gota a gota se adicion acido actico 2M

formndose un precipitado (la leche se corta)

Se sediment, decanto y filtro sobre el papel

filtro obtenindose el precipitado
Se lavo el precipitado formado con 20ml de
etanol en el mismo filtro. Luego, se llev a la
estufa
Se coloco en un vaso de precipitado pequeo
previamente pesado
Aadindose luego 5ml/g de ter etlico
producindose un nuevo filtrado
Obtenindose al final un precipitado blanco
(casena) de fcil manipulacin.

B. PREPARACION DE LA CASENA

Se coloco 0.2499 g de casena (precipitado

blanco) en un erlenmeyer de 150ml

Se agreg 20ml de agua destilada y 5ml de

NaOH, agitndose hasta que se diluya toda la
casena
En seguida se adiciono 5ml de acido actico
1N, diluyndose con agua destilada hasta 50ml.

Una vez bien mezclados se obtuvo

una solucin clara y limpia
C. pH DE LA CASEINA
En diez tubos de ensayos limpios y secos se adicion exactamente los
volmenes de los reactivos segn la siguiente tabla:
Tubo

Agua
destilada

Ac. Actico
0.01N

Ac. Actico
0.1N

Ac. Actico
1.0N

8.38

0.62

7.75

1.25

8.75

0.25

8.5

0.5

8.0

1.0

7.0

2.0

5.0

4.0

1.0

8.0

7.4

1.6

10

5.8

3.2

Luego se le agreg en cada tubo 1ml de la solucin de casena,

agitndose inmediatamente el contenido en el tubo y dejndolo reposar
durante 20minutos.
Pasado los 20 minutos, se registr el grado de turbidez de cada tubo,
pudiendo observar que el mismo existi en el tubo N 8 por lo que segn
la teora ser el valor del pH ms cercano al punto isoelctrico (pI) de la
protena.

IV)

RESULTADOS
A.

AISLAMIENTO DE LA CASEINA
s
Se dej calentar la leche hasta

alcanzar la temperatura de 38C

Gota a gota se adicion acido actico 2M

formndose un precipitado (la leche se
corta)

Se sediment, decanto y filtro

sobre el papel filtro
obtenindose un precipitado
solido (caseina)

Se lav el precipitado
formado con 20ml de etanol
y con ter etlico en el mismo
filtro

Finalmente se obtuvo el
precipitado blanco de la casena.

B. PREPARACION DE LA CASENA
Se coloco 0.2499 g de casena
(precipitado blanco) en un
erlenmeyer de 150ml

Se agreg 20ml de agua

destilada y 5ml de NaOH,
agitndose hasta que se diluya
toda la casena. As mismo, se
adiciono 5ml de acido actico
1N, diluyndose con agua
destilada hasta 50ml.

Una vez bien mezclados se obtuvo una

solucin clara y limpia
C. pH DE LA CASEINA
Despus de dejar reposar por 20 minutos los 10 tubos de ensayo con la
muestra de casena, se obtuvo el siguiente cuadro
CUADRO 01: SOLUBILIDAD DE LAS PROTEINAS PARA LA
DETERMINACION DEL PUNTO ISOELECTRICO POR ADICION
DE UN ACIDO
TUBO
SOLUBILIDAD

01

02

03

04

05

06

07

08

09

10

++++ ++++ +++++ +

Antes

Despus

Se puedo
observar que
en el tubo N 8 fue el que obtuvo el mayor grado turbidez, entonces de
acuerdo con lo estudiado, ser el valor del pH ms cercano al punto
isoelctrico (pI) de la protena.
V)

DISCUSION
Las protenas son polmeros de aminocidos que presentan diversos niveles en
su estructura, los mismos que pueden sufrir distintas modificaciones debido a la
accin de diversas sustancias. Tal efecto tambin es percibible en sistemas
complejos como los alimentos.
En nuestra prctica de laboratorio se trabajo con una muestra de leche fresca a
fin de obtener de ella una muestra de casena que nos permitiera determinar las
propiedades qumicas de las protenas, en especial aquellas relacionadas con su
comportamiento en su punto isoelctrico y el proceso de desnaturalizacin.
Despus del proceso de experimentacin se pudo notar que las muestras de
soluciones de casena de los TUBOS 7,8 Y 9 mostraron a la protena con baja
solubilidad. Se visualizaba una solucin blanquecina a diferencia de las otras
muestras con soluciones transparentes sin signos de contener partculas groseras
en suspensin.
S. BADUI (1995) refiere: debido a su naturaleza anftera, la solubilidad de las
protenas esta muy influenciado por el pH en que se encuentren: es mnima en su

punto isoelctrico y aumenta al alejarse de este. Dependiendo del pH del

sistema, estos polmeros pueden actuar como aniones o cationes, de tal manera
que al desarrollar la misma carga elctrica, provocan fuerzas de repulsin entre
ellos que repercuten en la solubilidad
Con esto podemos acotar que en los tubos en que se hizo visible una solucin
blanquecina es que hubo una perdida de solubilidad de la protena, lo que
evidencia la cercana al punto isoelctrico de la protena.
Lo contrario sucede con las otras muestras donde la solubilidad de la casena es
mayor.
Segnhttp://bioinformatica.uab.es/biocomputacio/treballs02-03/A_Ramos/ 2d.
html refiere: el punto isoelctrico (pI) de un protena es el valor especfico de pH
en que la carga neta de la protena es cero, de modo que no se desplaza al aplicar
un campo elctrico. Cuando una mezcla de protenas es introducida en un gel
con un gradiente de pH, tanto los extremos N y C terminal como las cadenas
laterales ionizables de las protenas captan o liberan protones de acuerdo con el
pH, de modo que la carga elctrica global de las protenas depender del pH del
entorno. Cuando se aplica un campo elctrico, todas las molculas con carga
neta positiva sern atradas hacia el ctodo, y todas las molculas con carga neta
negativa hacia el nodo. A medida que las molculas de protena se van
acercando a su punto isoelctrico irn perdiendo carga elctrica (lo ms habitual)
o ganando cargas de signo contrario, hasta llegar al valor de pH en que la carga
neta sea cero y las protenas dejen de moverse: se dice que las protenas se han
focalizado, ya que todas las molculas de una especie dada de protena
inicialmente dispersas a lo largo de todo el gradiente de pH se han concentrado
en un solo punto del gradiente, que corresponde a su pI.

Segn CHEFTEL- CHEFTEL refiere: La casena (fosofoprotenas) representa

el 80 % de la protena de la leche de vaca, el resto est constituido por lactolobulina (alrededor del 10% de las protenas totales), - lactoalbmina (en
torno al 2% de las protenas totales) y en gran nmero de diversas protenas
(enzimas, inmunoglobulina, etc.). Cuando se coagulan las casenas, quedan en
solucin las otras protenas, conjuntamente con la lactosa y sales minerales para
constituir lo que se llama lactosuero.
La FRACCION CASEINICA, cuyo pH isoelctrico global est prximo a 4.7,
comprende varios tipos de molculas de las cuales el 50% aproximadamente es
de alfa- casena, 30% de casena, 15% de k- casena y el 5% de y-caseina.eswtos
compuestos por diversos pueden separarse por electroforesis o por
ultracentrifugacin; la fraccin total casenica se precipita por descenso de pH de
la leche hasta un 4.7 aproximadamente.
La - LACTOGLOBULINA es una protena de peso molecular cercano a
18.000, se encuentra en la leche de vaca, oveja, cabra y de otros rumiantes. Es la
protena ms abundante en la lactosuero de la leche de vaca que contiene de 2 a

3 gramos por litro. Sus puntos isoelectricos van de 5.2 a 5.6. Estas variantes se
diferencian por su solubilidad y por su mayor o menor aptitud a polimerizarse y
a modificar su estructura, segn el pH. Tal polimorfismo conduce a una gran
variedad de combinaciones, lo que explica la abundancia de resultados
experimentales, difciles de interpretar globalmente.
La - LACTOALBUMINA es una protena que tiene un peso molecular de una
16.000 y un punto isoelectrico de 5.1. Es insoluble en una zona comprendida
entre pH 4.0 y 5.5. A un lado y a otro a esta zona, la molcula sufre
modificaciones de conformacin, rpidas y lentas, reversibles o no, que
conducen a diversas formas polimerizadas. As mismo, la agregacin puede
conducir a la gelificacin. Las fuerzas actuantes son diferentes de las que
conducen a la disociacin de la lactoglobulina; probablemente proceden de
enlaces hidrfobos. Estas transformaciones e interacciones dependen de las
concentraciones en protenas e iones y de la temperatura.
Esto se pudo ver en la prctica que la casena es un conjunto heterogneo de
protenas por lo que es difcil fijar una definicin de su pI, pues est compuesta
por - lactolobulina, - lactoalbmina y en gran nmero de diversas protenas
(enzimas, inmunoglobulina, etc.).

VI)

CONCLUSIONES
La Solubilidad de las protenas se mantiene siempre y cuando los enlaces
pepiticos estn fuertes. Si se aumenta la temperatura y el pH, se pierde la
solubilidad.
Se determino la capacidad electroltica de las protenas pudindose
observar que si se trasladan al polo positivo es porque su molcula tiene
carga negativa y viceversa.
El pI de la casena estuvo dad en nuestra practica por la turbidez de las
soluciones acido- base, la misma que no ser igual para todos pues
recordemos que la casena es un conjunto heterogneo de heterogneo
de protenas compuesta por - lactolobulina, - lactoalbmina y en gran
nmero de diversas protenas (enzimas, inmunoglobulina, etc.).
Se puedo observar la propiedad de Amortiguadora de pH de las
protenas debido a su carcter anftero, es decir, pueden comportarse
como cidos (aceptando electrones) o como bases (donando electrones).

 La isoterma que mejor representa los datos experimentales es la lineal,

siendo las constantes de adsorcin dependientes de la temperatura y no
del tiempo de proceso, no fueron ubicadas en esta prctica.
De acuerdo a los estudios realizados gracias ala apreciacin de este tipo
de prcticas se podra considerar como condiciones ptimas de
almacenamiento de harina de trigo una humedad relativa del 40 a 70 % y
la temperatura constante para prevenir reacciones enzimticos de
deterioro de carbohidratos, protenas, vitaminas, etc.

VII)

CUESTIONARIO

1.) DE QUE FACTORES DEPENDE LA SOLUBILIDAD DE UNA PROTEINA EN

AGUA?

Una protena tiene mltiples grupos acido-base, lo que hace sus propiedades de
solubilidad dependiente de la concentracin de sal, polaridad del solvente, pH, y
temperatura. Diferentes protenas tiene diferentes propiedades de solubilidad,
por lo que cuando una protena es soluble otras precipitan.
A continuacin se dan a conocer los factores dependientes de la solubilidad de la
protena ms detalladamente:
Efectos de la concentracin de sales
La solubilidad de una protena es sensible a la concentracin de sal. La
solubilidad de una protena a baja fuerza inica generalmente aumenta
con la concentracin de sal. El salting in es el fenmeno por el cual la
concentracin de sal aumenta la solubilidad de la protena. A altas fuerzas

inicas, la solubilidad de las protenas disminuye, este fenmeno es

conocido como salting out. Este fenmeno se da bsicamente por la
competencia por las molculas de agua que forman parte de la capa de
solvatacin
Solventes orgnicos
El uso de solventes orgnicos miscibles con el agua, tales como acetona y
etanol, actan como buenos precipitantes de protenas, ya que tienen
menor poder de disolver estas protenas, normalmente se utilizan abajas
temperaturas (0C), ya que a temperaturas mayores la protenas tienden a
desnaturalizarse.
Efectos del pH
Las protenas generalmente tiene muchos grupos ionizables, los que
tienen una variedad de pK. Cada protena tiene un pH caracterstico al
cual las cargas positivas se encuentran en igual cantidad a las cargas
negativas, a este pH se conoce como punto isoelctrico ( pI), el cual
puede ser conocido a travs del isoelectroenfoque. En el pI las protenas
tienen una solubilidad mnima. La solubilidad se incrementa cuando el
pH se aleja del pI.
Cristalizacin
Cuando la protena se encuentra en un razonable estado de pureza, esta
puede ser cristalizada. Esto se hace levando la solucin a una saturacin
de la protena punto en el cual se utilizan los mtodos de precipitacin ya
mencionados.
2.) EXPLICAR COMO AFECTA UN CAMBIO EN LA CONSTANTE
DIELECTRICA DEL AGUA EN LA SOLUBILIDAD DE UNA PROTEINA

Las sales, como el NaCl (cloruro de sodio) o el K 2HPO4 (fosfato cido de

potasio), se mantienen unidas por fuerzas inicas. Los iones de una sal, como lo
hacen cargas cualesquiera, interactan de acuerdo a la ley de Coulomb:

kq1 q2
Dr 2

en donde F es la fuerza entre las dos cargas elctricas (q1 y q2), que estn
separadas por una distancia r. D es la constante dielctrica del medio entre las
cargas y k es una constante de proporcionalidad (8.99 x 109 JmC-2).
Como podemos notar una disminucin en el valor de la constante dielctrica del
solvente, origina un aumento de la fuerza de atraccin entre las molculas del
soluto.

La adicin de solventes orgnicos a las soluciones de protenas causa un cambio

en la constante dielctrica del sistema, influyendo de manera muy marcada en la
estabilidad y solubilidad de las protenas.
Los disolventes con D menor al agua hacen que los grupos R de las protenas
disminuyan su rechazo entre si y tiendan a la agregacin y precipitacin.

3.) QUE RELACION EXISTE ENTRE EL PUNTO ISOELECTRICO DE UNA

PROTEINA Y SU SOLUBILIDAD?
Debido a su naturaleza anftera, la solubilidad de las protenas esta muy influenciada
por el pH en que se encuentren; es minima en su punto isoelctrico y aumenta al
alejarse de el, dependiendo del pH del sistema. Las protenas pueden actuar como
aniones o cationes, de tal manera que al desarrollar la misma carga, provocan fuerzas de
repulsin entre ellas y que repercute en un aumento de su solubilidad y estabilidad.
En el punto isoelctrico, dichas fuerzas son minimas, con lo cual favorecen las
interacciones protena-proteina que inducen a la agregacin e insolubilizacin final.

4.) Importancia industrial de la casena

La casena tiene una gran importancia industrial, pues se utiliza:
Elaboracin de productos alimentarios: derivados lcteos (forma la cuajada
que se emplea para fabricar queso), crnicos, panes y productos de
repostera, etc.
La casena se utiliza en la elaboracin de productos no alimentarios:
pegamentos y pinturas, cubiertas protectoras, plsticos
Otros usos tecnolgicos son la clarificacin de vinos o como ingrediente en
preparados de biologa molecular y microbiologa (medios enriquecidos
para el cultivo microbiano).
En la alimentacin especial, la casena sirve para la elaboracin de
preparados mdicos y concentrados proteicos destinados a la alimentacin
de los deportistas, especialmente despus de su entrenamiento. As, se ha
observado que la digestin de las casenas es ms lenta que la de las
lactoprotenas solubles (tambin denominadas seroprotenas) y, por ello,
ms apropiada para reparar el anabolismo de los aminocidos durante el
perodo que sigue a una comida.
A continuacin se da a conocer el uso industrial de la casena, como una protena
esencial para la vida, as tenemos:
IMPORTANCIA INDUSTRIAL DE LA CASEINA

Producto
Envoltura

Propiedad

Adhesivo

Plstico

Surfactante

Capacidad de formar
pelculas
Adherencia

Aplicacin

Pintura

Tinta

Papel

Embalaje

Acabado del cuero

Envoltura textil
Cola con base acuosa

Manejabilidad

Fuerza de adhesin

Resistencia al agua
Buen procesado

Plstico rgido

Resistencia mecnica

Plstico desechable

Resistencia al agua

Fibra

Pelcula/ lmina de envoltura

en embalajes
Emulgente, detergente

Tensin superficial

Estabilidad de interface

5) Cul es el pI de la casena?
Como sabemos, Las casenas es un conjunto heterogneo de protenas por lo que es
difcil fijar una definicin de su pI. Sin embargo, todas las protenas englobadas en
lo que se denomina casena tienen una caracterstica comn: precipitan cuando se
acidifica la leche a pH 4,6. Por ello, a la casena tambin se le suele denominar
protena insoluble de la leche. Por otra parte, y aunque las protenas que se
denominan casenas son especficas de cada especie, se clasifican en los siguientes
grandes grupos de acuerdo con su movilidad electrofortica: s1-casena, s2casena, -casena y -casena.
Ahora bien, el pI es diferente para cada una de las fracciones casenicas, ya que
vara entre el 4,44-4.97 para la s1-casena y el 5,3-5,8 en la variante gentica B de

la -casena. Si le damos un promedio de manera general podemos decir que esta en

un rango de 5.
6.- Averige el punto isoelctrico de tres protenas de inters
Tenemos:
PROTENA
CISTEINA
ALBUMINA
LISINA
METIONINA
HISTIDINA
LEUCINA
ARGININA
FENILALANINA

pI
5.07
4.9
9.74
5.74
7.59
5.98
10.76
5.48

VIII) REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

CHEFTEL- CHEFTEL
SALBADOR BADUI
http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S010120612006000400017&script=sci_arttext
IGLESIAS, H. A.; CHIRIFE, J.; MONTAN, C. F. ON THE TEMPERATURE
DEPENDENCE OF ISOSTERIC HEATS OF WATER
PRIMO, E. QUMICA DE LOS ALIMENTOS, 1 ED., EDITORIAL
SNTESIS S.A. MADRID, 1998.
DEBNATH, S; HEMAVATHY, J; BHAT, K. K. MOISTURE SORPTION
STUDIES ON ONION POWDER. FOOD CHEMISTRY, V. 78, N. 4, P. 479482, 2002.