11.

EFECTODELATEMPERATURA
AlaumentarlaTseaceleran2procesosindependientes:lavelocidaddelareaccinylainactivacintrmicadelE.Es
decir,sibienesnecesariounaumentodeTparaquelaactividadenzimticaaumente,tendremospuntosptimosa
partirdeloscualeslaactividadenzimticadisminuir.
Laactividadenzimticaresideenlaestructuraterciaria,demodoquesiaumentamoslatemperaturaapartirdelpunto
ptimo,elEabsorbedemasiadaenerga,alterandolaestructuraterciariay,portanto,inhibiendolaactividad.

EFECTODELATSOBRELASKEQ
ElefectodelaTsobrelasconstantesdeequilibriodeunareaccin,vienedadoporlaecuacindeVantHoff:
ln

ln

La tambinpuedeobtenersede:
log

1
2,3

log
2,3

1
2,3

2,3

eslaconstantecataltica,aunquetambinpuedeemplearselavelocidadmxima.

Enestecaso

Conocidaslaentalpayentropa,hallamoslaenergalibredeGibbs:

Otromododehallarlaentalpayentropason:
log
Sihacemoslarepresentacinde
(10,32

2,3

10,32

2,3

VS tendremosunarectaconpendientenegativa(

)yunpuntobiguala

).

ECUACINDEARRHENIUSYEA
Porlateoradelascolisionestenemosqueunareaccinqumicade
pendedelasfrecuenciasdelascolisiones,ennuestrocasoentreSy
E.Adems,necesitaremosunaenergamnimaparaquetengalugar
unareaccin(superelamontaaenergtico),conocidacomoenerga
deactivacin( ).
Laconstantedevelocidaddeunareaccines:

Donde eslaprobabilidaddequehayareaccincuandosedalacolisinentrereactantes; eslafrecuenciadela

colisin.Estaecuacinpuedetransformarseen:
ln

Integrando:
log
Donde

2,3

log

Representandolog

1/ ,elpuntodecorteeslog ylapendientees

sentamoslavelocidadfrentea1/T,yobtenemosuna

.Generalmente,enelgrficorepre

,quetienemnimasvariaciones.

Qusucedeconladesnaturalizacindelenzima?Quenosaparecerndospendientes(generalmenteunapositivay
unanegativa),indicndonosqueladesnaturalizacindelenzimarequieredeunaenergadeactivacin(mspositiva
queladereaccin).Tambinsucedequehayenzimasquetienendosactividadesdiferentesenfuncindelatempe
ratura,loqueserepresentaendospendientes(con y ).

EFECTOSOBRELASVELOCIDADESDELASREACCIONESCATALIZADASPORENZI
MAS
PARMETROSAFECTADOSPORT

Cambiosenlaestabilidad
Solubilidaddelosgases
pHdeltampn
AfinidaddeEporlosligandos(S,AoI)
Reaccionesquecompitenentres
Ionizacindegruposprototrpicosdelsistema(ES)
AfinidaddelEyS
VelocidaddeconversindelSaP
GradodeasociacindeEmultipeptdicos

ESTABILIDADDELOSE
LaestabilidaddeunEestenfuncinde:

T
pH
Fuerzainicaynaturalezadeltampn
PresenciaoausenciadeS/cofactores(ThompsonySullivandijeronquelosStiendenaprotegeralosEdela
inactivacin)
[E]
Otrasprotenasdelsistema
Tiempodeincubacin
PresenciaoausenciadeIyA

Todosestosfactoreshandeestarcontroladosy,siemprequerealicemosalgnensayo,tendremosquemantenerlas
condicionesideales.
LosEsonmsestablesabajasTgeneralmente,aunquehayenzimasquesonmenosestablesa10Cquea30C.
Ejemplos:

Lacatalasadehgadodebueyesinestablea35C.
Laribonucleasaresistea100C.
Laadenilatokinasapuedehervirsesinperderactividad
Lafosfatasaalcalinaylaperoxidasavegetalsonmsestablesalcalor(estandoapH7).Estosenzimaseemplea
enproductoslcteos.
2

Existeunarelacinentreeltamao,complejidadysusceptibilidadalcalordelenzima.Porejemplo,enzimasdePM
bajo(1250kDa)suelentenerunacadenapolipeptdicaysuelensermsresistentesaltratamientoporcalor;mien
trasqueenzimasdeestructuramsgrandeycomplejasonmenosresistentealcalor.
Adems,cuandoelenzimaseencuentraenextractocrudoesmuchomsestablequeestandopura,yaquelaconcen
tracindeenzimatotaldisminuye.Generalmente,cuandolaprotenaestyapurificada,sueleaadirsealgunapro
tenainerte,comolaBSAogelatinascomerciales,queaumentansuproteccin.

EFECTODELATENLAESTABILIDAD
Generalmente,apartirdeuntiempodeterminado,elenzimapierdelaactividad.Porello,definimoslavidamediadel
enzimacomoeltiempoqueelenzimatardaenperderel50%delaactividadmxima.Paraello,realizamoselsiguiente
experimento:trabajandoaaltastemperaturas,disminuimosla[E]activay,portanto,tendremosmenoractividad.Por
tanto,medimoslaactividadenzimticaenfuncindeltiempo(medira5y30,porejemplo)adiferentestemperatu
ras.
Sitrabajamosatiemposbajos,observaremosqueapartirdeunpunto,laactividadserlinealconeltiempo,peroa
partirdeunpuntodeT,observaremosunasvelocidadesinicialesaltas,peroenmuypocotiempolaactividaddismi
nuir.EstoesporquedisminuyelacantidaddelenzimaaldesnaturalizarseporlaTyeltiempo.
LaenergadeactivacinparatransformardeSaPvaraentre6000y15000cal/mol;mientrasquelasdedesnaturali
zacinoscilanentre50000y150000cal/mol.Otrodatoimportanteesqueaunqueelenzima,porejemplo,tengala
actividadmximaa30C,sesueletrabajara25o27C,porquelavelocidaddedesnaturalizacinesmuchsimomayor
a30quea25C.
OtroensayoquesiempresehaceesincubarelenzimaconelSavariastemperaturas.Seobservalaactividaddel
enzimaconeltiempo.Generalmente,aunrangobajodetemperaturaslaestabilidadesdel100%y,apartirdeun
punto,lapendienteconlaquecaelaestabilidadaumentarpidamente.

INACTIVACINREVERSIBLEDELE:
Paramostrarsielenzimasufreinactivacinreversible,calentamoselenzimaaunatemperaturamoderadamentealta,
ymedimoslavelocidaddereaccin.Acontinuacin,guardamosatemperaturasmsbajasymedimoslaactividadala
T ptima. Si la inactivacin fuera irreversible, la velocidad debera ser la misma que cuando se calent el enzima,
mientrasquesifuerareversible,laactividaddeberasermayorquealdesnaturalizarla.
Sinembargo,hayquetenerencuentaque,independientementedelareversibilidaddelenzima,siaumentamosde
masiadolatemperatura,tendremosinhibicinreversible.

CAMBIOSENLASOLUBILIDADDELOSGASESCONLAT
Lapolifenoloxidasa,lipooxigenasayglucosaoxidasatienencomosus
tratodelareaccinelO2.Siaumentamoslatemperaturadelamez
cla,alteramoslasolubilidaddelO2enelagua,yseinactivalareaccin.

EFECTODELATSOBRELAVELOCIDADDELAREACCIN
UnmododemedirlaactividadenzimticaeslaQ10,queeselcoefi
cienteconelquelavelocidaddelareaccinaumentacondiezgrados
msdetemperatura.Generalmenteestecoeficientees2enmuchos
enzimas,esdecir,quelaactividadseduplicacuandoaumentamosla
temperaturaen10grados.Sinembargo,cuandopasemoslaTptima,
elcoeficientedecrecer.
Estecoeficientevienedeterminadoporlafrmula: