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de Nicaragua
Instituto Politcnico de la Salud
DR. Luis Felipe Moncada
UNAN-MANAGUA
Manual
ndice
Contenido
Pagina
Introduccin
Gua # 1
Gua # 2
Determinacin
de
.
sustancias
8
qumicas
con
tiras
reactivas
Gua # 3
Gua # 4
Bibliografa
27
28
PGINA 1
YWC
Introduccin
La orina se produce en los riones, su composicin vara en funcin de la necesidad
de conservar o eliminar determinados solutos. La principal funcin de la orina es la
eliminacin del exceso de agua y solutos, junto con numerosos productos metablicos
y sustancias extraas, como son los frmacos y sus metabolitos.
PGINA 3
YWC
Introduccin
El Uroanlisis es un conjunto de anlisis cualitativos y semicuantitativos realizados en
una muestra de orina tomada al azar o en un tiempo definido. Es algo ms que la
simple impregnacin de una tira reactiva y la observacin del sedimento urinario, es
la aplicacin de todos nuestros conocimientos y el empleo de todos nuestro recursos
dentro del laboratorio para proporcionar al mdico y al paciente resultados de y con
calidad.
El urianlisis puede revelar enfermedades que han pasado inadvertidas debido a que
ellas no producen signos o sntomas llamativos. Los ejemplos incluyen diabetes
mellitus, varias formas de glomerulonefritis, y las infecciones crnicas del tracto
urinario. El dispositivo ms rentable para el anlisis de orina es un papel o tirita de
plstico. Este sistema microqumico ha estado disponible durante muchos aos y ha
permitido el anlisis cualitativo y semi-cuantitativo dentro de un minuto por
observacin simple pero cuidadosa. El cambio de color que ocurre en cada segmento
de la tira se compara a un cuadro de colores para obtener los resultados. Sin
embargo, el doctor descuidado, tcnico, o ayudante es completamente capaz de leer
mal o interpretar mal los resultados. El urianlisis microscpico requiere slo un
microscopio de luz relativamente barato.
El presente manual es una compilacin de una serie de Guas que pretenden
proporcionar una orientacin general de las diferentes pruebas utilizadas en el
Uroanlisis, aunque no se abarcaran todas las pruebas alternativas. Estas guas tienen
el propsito de orientar a los estudiantes de laboratorio clnico as como a aquellas
personas que quieran usar este documento a poder interpretar y realizar de una
manera mejor los exmenes o pruebas del rea de Uroanlisis.
PGINA 4
YWC
Materiales
Frascos para muestras
Lpiz graso o marcador
Gradillas
Equipos
Urodensimetro
Reactivos
Agua
destilada
cido actico
Paos
Erlen Meyer de 500ml
Papel filtro
Porta tubos
Probetas de 100ml
Tubos de ensayos
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YWC
Procedimiento tcnico
1. Mezclar bien la orina antes de analizar.
2. Pasar la muestra a una probeta graduada y observar:
a) Color: Vara de ambarino al amarillo plido, segn su contenido en pigmentos,
especialmente el urocromo, y en menor proporcin la uroeritrina y la hemato porfirina.
La intensidad del color es inversamente proporcional al volumen eliminado y la
densidad de la orina. Coloraciones normales: Incolora, de color amarillo claro, amarillo
oscuro o mbar intenso. Coloraciones patolgicas: Rojo o rojo pardusco, rojo pardusco
o pardo negro, amarillo verdoso o caoba oscuro, latescente, pardo al negro al
oxidarse. Cloraciones medicamentosas: Azul - verdoso, rosado o rojo en orinas
alcalinas, rojo, rosado, amarillo mbar, pardusco que vira al rojo al alcalinizarse.
b) Olor: El olor normal de la orina es un dbil olor aromtico, pero con el tiempo
adquiere un olor amoniacal desagradable debido a la descomposicin. El olor de las
orinas acidas y concentradas es ms fuerte (despus de la ingestin de carne,
ejercicios violentos, etc.). Olores patolgicos: Ptrido, Amoniacal, dulzn o a frutas,
hidrogeno sulfurado, fecal.
c) Aspecto: Las orinas normales tienen aspecto transparente, pero con el tiempo se
enturbia ligeramente (nubecula) al enfriarse la orina. Esta nubecula quedara flotando
o se depositara en el fondo de acuerdo a la densidad de la orina. El enturbiamiento de
las orinas puede deberse a la presencia de fosfatos, uratos, sangre, pus y bacterias.
Las clulas epiteliales, cilindros renales y albumina no modifican la transparencia de la
orina. Se debe determinar la causa de la turbidez dado el caso de la siguiente manera:
Informe del aspecto de la orina: Transparente, ligera turbia, turbia y muy turbia.
3. Determinar el pH.
a) Se puede determinar mediante las tiras reactivas el cual es el mtodo ms utilizado
actualmente, aunque existen otros mtodos para su determinacin. El pH de la orina
tambin puede medirse a travs de un equipo llamado Peachimetro. Este mtodo es
cuantitativo.
Informe de la reaccin: Si utiliza un mtodo cualitativo, informar: acida, alcalina,
neutra o anftera.
Si se utiliza un mtodo cuantitativo informar el pH que indica el equipo. Ej. PH= 6,5.
b) Densidad de la orina: la densidad de la orina oscila entre 1,010 y 1,030 en relacin
con los elementos en solucin y con el poder de concentracin y dilucin del rin. Se
utiliza el densmetro o urodensimetro para determinar la densidad de la orina, el cual
tiene una graduacin de 1,000 a 1,060.
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YWC
Colocar la orina en una probeta adecuada sin que forma espuma. En caso de
formarse puede eliminarse con un pedazo de papel de filtro.
Introducir el urodensimetro imprimindole un movimiento rotatorio y cuidando
que no toque las paredes ni el fondo de la probeta, realizar la lectura en la
parte inferior del menisco.
La mayora de los urodensimetro vienen graduados a 15 grados celcius, en
caso de que la orina tenga otra temperatura se debe hacer la correccin
correspondiente que ser aproximadamente de 0,001 por cada tres grados de
diferencia en relacin directa.
Como nuestra temperatura ambiente promedio oscila entre 25 y 27 grados
celcius dara una diferencia de 10 - 12 grados respectivamente, eso hara
corregir la densidad en 0,003 unidades por encima con respecto a la densidad
observada en la muestra de orina.
En algunos casos de orinas patolgicas ser til conocer la densidad neta ya
que hay elementos que aumentan la densidad como la glucosa en que un
gramo aumenta la densidad en 0,00041, y la albumina, en que 1 g la aumenta
en 0,003.
Introduccin
La tiras reactivas para Uroanlisis son de bases plsticas en las cuales hay adheridas
diversas reas reactivas para determinar sustancias qumicas de forma rpida y
sensible. La banda angosta de plstico contiene pequeos tacos adheridos, cada taco
contiene reactivos para una reaccin diferente lo que permite la determinacin
simultanea de varias pruebas en un corto tiempo (2 minutos), estas se sumergen en la
orina y cuando el resultado es positivo hay un viraje de color. Los resultados obtenidos
para las tiras proporcionan informacin referente al metabolismo de carbohidratos,
funcin heptica y renal, balance acido-base infecciones del tracto urinario.
Los valores mnimos detectables para la mayora de las tiras se resumen en la
siguiente tabla.
rea reactiva
Tiempo de lectura
Sensibilidad
Glucosa
30
75-125 mg/dl
Bilirrubina
30
0.4-0.8 mg/dl
Cetona
40
Sangre
60
Protena
60
Nitritos
60
Leucocitos
PH
60
Densidad
45
0.015-0.062 mg/dl
(Hemoglobina)
15-30 mg/dl (Albumina)
0.06-0.1 mg/dl (ion nitrito)
5-15 clulas/ul
5.0-8.5
1.000-1.030
PH
El filtrado glomerular del plasma sanguneo normalmente es acidificado por los
tbulos renales y los colectores de un pH de 7.4 a aproximadamente 6 en la orina
final. Sin embargo, dependiendo del estado cido-base, el pH urinario puede ir de tan
bajo como 4.5 a tan alto como 8.0. El cambio hacia lo cido de 7.4 es completado en
el tbulo contorneado distal y el colector.
Gravedad especfica
La gravedad especfica (qu es directamente proporcional a la osmolalidad de orina
que mide la concentracin de soluto) mide la densidad de la orina, o la capacidad del
rin de concentrar o diluir la orina por encima de la del plasma. Tiras reactivas estn
disponibles para medir la gravedad especfica en aproximaciones. La mayora de los
laboratorios mide gravedad especfica con un refractmetro.
La gravedad especfica entre 1.002 y 1.035 en una muestra al azar debe ser
considerada normal si la funcin del rin es normal. Ya que la densidad del filtrado
glomerular en el espacio de Bowman va de 1.007 a 1.010, cualquier medida por
debajo de este rango indica hidratacin y cualquier medida sobre l indica
deshidratacin relativa.
Si la densidad no es > 1.022 despus de un periodo de 12 horas sin comer o beber, la
capacidad de concentracin renal est daada y el paciente o tiene un deterioro renal
generalizado o diabetes inspida nefrognica. En la enfermedad renal terminal, la
densidad tiende a 1.007 a 1.010.
Cualquier orina que tiene una gravedad especfica ms de 1.035 o est contaminada,
contiene niveles muy altos de glucosa, o el paciente puede haber recibido
recientemente una solucin intravenosa de contraste para estudios radiogrficos o
soluciones de extraos de pesos moleculares bajos. Restar 0.004 por cada 1 % de
glucosa para determinar la concentracin de soluto no-glucosa.
Protenas
El test para protenas se hace en orina entera, pero para pruebas semi-cuantitativas
de protena urinaria deben realizarse en el sobrenadante de orina centrifugada ya que
las clulas suspendidas en orina normal puede producir una estimacin falsamente
alta de protena. Normalmente, slo pequeas protenas del plasma son filtradas al
glomrulo y son reabsorbidas por los tbulos renales. Sin embargo, una cantidad
pequea de protenas del plasma filtradas y protena secretada por el nefrn (protena
de Tamm-Horsfall) pueden encontrarse en orina normal. La excrecin de la protena
total normal generalmente no excede 150 mg/24 horas o 10 mg/100 ml en cualquier
muestra simple. Ms de 150 mg/24 horas se define como proteinuria. Proteinuria >
3.5 g/24 horas son severas y conocidas como sndrome nefrtico.
Las tiras detectan protena por produccin de color del colorante indicador, Azul de
Bromofenol que es muy sensible a la albmina pero detecta globulinas y pobremente
protena de Bence-Jones. La precipitacin a travs de calor es un mejor mtodo
semicuantitativo, pero no es una prueba muy sensible. El test del cido sulfosaliclico
es una prueba de precipitacin ms sensible. Puede detectar albmina, globulinas, y
protena de Bence-Jones a concentraciones bajas.
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Urobilinogeno
El test se basa en una reaccin con para-dimetilaminobenzolaldehido y un buffer acido
que reaccionan con el Urobilinogeno produciendo un color caf-anaranjado.
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Materiales
Reactivos
Frascos
Tiras reactivos
Gradillas
Lpiz graso
Paos
Tubos de ensayo
Procedimiento tcnico
Bilirrubina: Positivo
Densidad: 1.010
Protenas: 3+
Urobilinogeno: Normal
Glucosa: 30mg/dl
Leucocitos: Positivo
Sangre: 3+
NOTA: los cambios de color que aparezcan en el margen de la zona de test, as como
las coloraciones que aparezcan despus de dos minutos carecen de significacin.
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Leucocitos
Hemates
la orina con densidad elevada, los eritrocitos tienden a adoptar formas dentadas o
crenadas.
Clulas epiteliales
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Cilindros hialinos
diversas
situaciones
como
la
Cilindros hialino-granulosos
Cilindros leucocitarios
Los leucocitos pueden penetrar en la luz de los tbulos renales desde el intersticio, a
travs de las clulas epiteliales renales y entre ellas. Existen diversas enfermedades
renales como la pielonefritis, glomerulonefritis, nefritis intersticial, nefritis lpica, e
incluso el sndrome nefrtico que pueden presentar cilindros leucocitarios,
acompaados en ocasiones de abundantes leucocitos neutrfilos e inflamacin
intersticial del rin. Sin embargo, es la pielonefritis la que con ms frecuencia
presenta dichas alteraciones celulares.
Los cilindros leucocitarios se observan de forma caracterstica en infecciones
localizadas en el parnquima renal (pielonefritis aguda), pero, en ocasiones, pueden
aparecer en enfermedades renales inflamatorios no infecciosas como la
glomerulonefritis, nefritis intersticial, nefritis lpica (nefritis de colagenosis). Su
presencia, no obstante, exige siempre una investigacin bacteriolgica de la orina. Los
leucocitos pueden alcanzar la luz del tbulo a travs de la desestructuracin
glomerular en enfermedades que cursan con inflamacin aguda inespecfica. Slo en
este caso, la aparicin de los cilindros leucocitarios se asocia a piuria, hematuria,
proteinuria y cilindruria de otros tipos. Los cilindros leucocitarios aparecen cuando los
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leucocitos quedan atrapados en una matriz proteica. Suelen tener forma cilndrica y
estar repletos de leucocitos
Cilindros hemticos
Los
cilindros
hemticos
poseen
glbulos rojos en mayor o menor
nmero, alternando, a veces, con finas
granulaciones. Presentan color rojo
anaranjado
que
le
confiere
la
hemoglobina.
Los bordes de las
clulas son definidos y resulta visible
la forma uniformemente esfrica de
los eritrocitos.
Muy a menudo, sin embargo, dichos eritrocitos se han deteriorado y estn fundidos en
masas de restos celulares. En tales casos, la identificacin puede ser difcil, excepto si
se ha conservado el color caracterstico de la hemoglobina; entonces se habla de un
cilindro
de sangre o hemoglobina. La presencia de cilindros hemticos indica
hemorragia dentro de la nefrona, que puede ser resultado de una lesin glomerular
como la que se ve en la nefritis hemorrgica aguda o una enfermedad manifestada
por necrosis vascular, como ocurre en la periarteritis nodosa.
Aparecen frecuentemente en distintos tipos de glomerulonefritis, la nefropata por
depsito de IgA, la nefritis lpica, la endocarditis bacteriana subaguda y el infarto
renal. Tambin pueden aparecer en el sedimento urinario de pacientes con necrosis
tubular renal acompaada de inflamacin intersticial, etc.
Cilindros epiteliales
Los cilindros epiteliales, a diferencia de los hialinos, poseen relativamente poca matriz
proteica. Estn constituidos, fundamentalmente, por las clulas epiteliales
descamadas resultantes de una enfermedad renal intrnseca con afectacin tubular.
El proceso comienza con la prdida del cemento intercelular del epitelio tubular,
posteriormente, las clulas se desprenden y, por ltimo, se fusionan.
La identificacin exacta de un cilindro de clulas epiteliales solamente es posible
cuando los entornos de las clulas estn suficientemente intactos como para permitir
su diferenciacin de los leucocitos. En general, las clulas epiteliales son mayores que
los leucocitos y suelen presentar ms degeneracin citoplasmtica hialina y grasa. La
tincin supravital, la microscopa de contraste de fases y la tincin de Papanicolaou
permite distinguir los cilindros de clulas epiteliales tubulares de los cilindros
leucocitarios.
La presencia de cilindros de clulas epiteliales renales es indicativa de lesin tubular,
apareciendo generalmente en los casos de necrosis tubular aguda, la enfermedad
vrica producida por CMV o la exposicin a determinados medicamentos y txicos.
En diversos tipos de intoxicaciones por metales pesados (plomo, mercurio y talio),
tetracloruro de carbono, etilenglicol y salicilatos es frecuente encontrar en el
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Cilindros creos
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Elementos no organizados
Cristales: el hallazgo de estos en el sedimento, aunque sean abundantes, no significa
en modo alguno que esta aumentada la eliminacin, sino en todo caso la precipitacin
de aquella sustancia de que se trate, as como la falta de coloides protectores. Muchos
tienen escasa significacin, excepto en los casos de trastornos metablicos, formacin
de clculos, y en aquellos en que sea necesario regular la medicacin. Se identifican
por su aspecto, sus caractersticas de solubilidad y su formacin tiende a ser
dependiente del PH.
Cristales de Orinas cidas
En orinas cidas podemos encontrar los siguientes tipos de cristales:
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Los cristales de tirosina y leucina suelen aparecer juntos en la orina cida, por lo
general, como resultado de una grave enfermedad heptica en la que existe una
destruccin o necrosis tisular importante del tejido heptico como ocurre en la
hepatitis fulminante, hepatitis txica e insuficiencia heptica aguda. A menudo
presentan color amarillo, debido a la presencia de ictericia (bilirrubina). Los cristales
de tirosina adoptan la forma de agujas finas aisladas, en haces o en rosetas. Tambin
pueden presentar forma tubular.
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Los cristales de fosfato triple (fosfato amnicomagnsico) son incoloros y presentan la forma tpica
de atad o bien cristales plumosos. Su cristalizacin
suele aparecer a pH entre 7 y 9, aunque a veces
puede aparecer a pH inferior a 7. Es un compuesto
que no aparece en individuos normales. Su aparicin
indica la existencia de una hiperamoniuria de origen
infeccioso o metablico. Para su confirmacin es
necesario utilizar orinas frescas para descartar que se produzcan despus de haber
sido emitida la orina, por el aumento del pH como consecuencia del desarrollo y
actividad metablica de bacterias ureolticas contaminantes.
Cristales de cistina
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Cristales de colesterol
Cristales de creatina
Los cristales de creatina (figura 35) son cristales birrefringentes, muy pequeos, de
aspecto inicialmente rectangular, pero con una observacin cuidadosa se observan
que tienen una configuracin pseudohexagonal. Se pueden confundir con oxalato
clcico dihidratado dodecadrico, pero se diferencia en la ausencia de los vrtices
bipiramidales. No se suele observar en individuos sanos, pero en ciertas situaciones
fisiolgicas y patolgicas donde se producen un
aumento de la creatinuria, que sobrepasa la
capacidad de reabsorcin tubular y aparece en orina.
Estas situaciones son:
1. Fisiolgicas:
Embarazadas.
Puerperio.
Nios prepuberales.
Adultos
con
dietas
pobres
carbohidratos.
Adultos con ayunos prolongados.
Mayores de 70 aos.
2. Patolgicas:
Esclerosis miotrfica.
Poliomielitis.
Miastenia gravis.
Distrofias musculares
Miositis difusa.
en
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Estructuras diversas
En el sedimento tambin pueden aparecer: bacterias, levaduras, hilos mucosos,
cuerpos
ovales
grasos
y
gotitas
de
grasa,
espermatozoides, parsitos (Trichomonas vaginalis),
contaminantes y artefactos.
Se suelen
Bacterias
Hongos o levaduras
Materiales
Equipos
Gradillas
Microscopios
Lpiz graso
Laminas portaobjetos
Laminas cubreobjetos
Papel de seda
Paos
Tubos cnicos
Procedimiento tcnico
1. Enumerar las muestras y tubos de ensayo respectivamente
2. Mezclar la muestra cuidadosamente y colocar en un tubo de ensayo 10-15ml
de orina (3/4 partes).
3. Centrifugar a 3400 rpm por 5 minutos.
4. Eliminar el lquido sobrenadante.
5. Colocar una gota del sedimento en un portaobjetos limpio cubrindola con un
cubreobjetos.
Interpretacin de resultados
Se reporta de acuerdo a los elementos observados, informando el nombre y dando
una estimacin de su nmero. Para realizar el informe de los resultados utilice el
siguiente esquema, los recuentos representan un promedio de 10 campos observados.
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Introduccin
La HCG es una hormona secretada por la placenta de la mujer embarazada que
aparece relativamente pronto en sangre y orina despus de la implantacin del
embrin fecundado. Puede ser detectada en orina a partir del tercer da de la prdida
del periodo menstrual y su concentracin sigue aumentando hasta alcanzar niveles
muy altos despus de las 10 semanas de gestacin.
Materiales
Placas de lectura negras
Palillos
Guantes descartables
Equipos
Reactivos
Ltex
Lpiz grasoso
Control +
(Tapn rojo)
Control
Frascos de orina
(Tapn azul)
Procedimiento tcnico
Examinar
macroscpicamente
la
presencia
o
ausencia
de
aglutinacin
inmediatamente despus de retirar el porta del agitador. La presencia de aglutinacin
indica una concentracin de HCG igual o superior a 200ul/l.
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Bibliografa
Aguilar-Vallejo A, Sols-Jaramillo M, Villa de Navarro M. Atlas de sedimento urinario.
Medelln, Colombia: Editorial Universidad de Antioquia; 2003.
Arbelez-Gmez M. Uroanlisis. Laboratorio al Da. 1996; 6:221-232.
Benejam R, Narayana AS. Urinalysis: the physicians responsibility. Am Fam
Physician. 1985; 31:103-111.
Campuzano Maya G, Arbelez-Gmez M. Uroanlisis: ms que un examen de
rutina. Medicina & Laboratorio. 2006; 12:511-555.
Dvila Mara Elena, (2013) Guas de Laboratorio UNAN-MANGUA.
Gmez M Beln; Snchez M Jos
Orina
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