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Microbiologie
ED Diarrhes
Diagnostic, Techniques et Interprtation
des Examens Bactriologiques
Objectifs
1.
Plan de cours
I- Dfinition..............................................................................................................................2
II- Flore bactrienne normale du tube digestif ....................................................................2
VI- La coproculture.................................................................................................................5
VII- Autres Mthodes de Recherche de Bactries..............................................................6
VIII- Principales bactries recherches au cours dune coproculture et impliques en
pathologie (voir Tableau I) ......................................................................................................6
IX- Ouvrages et site de rfrence .........................................................................................6
Annexe 1 .................................................................................................................................7
Annexe 2 .................................................................................................................................8
Octobre 2005
JP. LAVIGNE
Module de Base 3
Microbiologie
I- Dfinition
Diarrhe : Emission trop rapide, trop frquentes (>3/j) de selles trop liquides et trop abondantes (au
dessus de 300 g /j).
Aigu : < 2-3 semaines
Flore Commensale : 400 espces prsentes, environ 1014 bactries dans le tube digestif
- Flore dominante Anarobie :
Bacille Gram ngatif : Bacterodes
Bacille Gram positif : Bifidobacterium, Clostridium
Cocci Gram positif : Peptostreptococcus
- Flore sous dominante Arobie :
Bacille Gram ngatif : Entrobactries (E. coli +++)
Cocci Gram positif : streptocoques, entrocoques
Flore de passage (saprophyte) :
Corynbactries (apport par le fromage)
Propionibacterium
Lactobacillus (apport par les yaourts)
1010 1011 bactries viables par gramme de selles fraches
II.4- Physiologie
9 litres deau dapport quotidien soit 7 litres de scrtion et 2 litres de lalimentation
7 8 litres sont absorbs par lintestin grle et 1 2 litres par le colon
Normalement environ 200 ml d'
H2O sont limins par jour dans les selles
Octobre 2005
JP. LAVIGNE
Module de Base 3
Microbiologie
III.1-Processus Toxique
Troubles de la fonction de scrtion (entrotoxine)
Octobre 2005
JP. LAVIGNE
Module de Base 3
Microbiologie
Cas N2
Salmonella enteritidis
Octobre 2005
JP. LAVIGNE
Module de Base 3
Microbiologie
V- Mode de contamination
VI- La coproculture
Objectif : La finalit de la coproculture consiste tenter disoler au sein dune flore complexe un
nombre limit despces, rputes pathognes, responsables de diarrhes.
Recueil : selles fraches ou couvillonnage rectal
La transmission au laboratoire doit tre rapide ; des germes comme Shigella ne supportant pas un
sjour prolong dans les selles. Si le temps dacheminement est trop long, il faut utiliser un milieu de
transport.
Examen macroscopique:
la consistance : aqueuse, liquide, molle, moule
l'
aspect : purulent, prsence de sang
Examen microscopique (coloration de Gram) :
Celui-ci apprcie l'
importance et l'
quilibre de la flore: Gram + et Gram (selles normales : 35% de
Gram +, 65% de Gram -)
Rechercher un dysmicrobisme (flore monomorphe Gram + ou -) et les microorganismes
caractristiques (Campylobacter, Vibrion, Candida)
Permet dorienter le diagnostic et les cultures :
- en cas de diarrhes germes invasifs : prsence de leucocytes ;
- en cas de diarrhes germes entrotoxinognes : absence de leucocytes
Culture : Rechercher une aiguille dans une botte de foin ! .
Ensemencement de plusieurs milieux, le plus souvent slectifs.
Incuber 24h 37C.
Utilisation de galerie didentification de germes.
Ralisation dun antibiogramme pour toutes les bactries pathognes isoles dans des coprocultures.
Octobre 2005
JP. LAVIGNE
Module de Base 3
Microbiologie
Test immunoenzymatique : Kit de dtection rapide par ELISA de C. difficile (environ 15)
Culture cellulaire : cellules HeLa pour rechercher E. coli entroinvasif ; cellules vro pour
rechercher E. coli entrohmorragique.
n1
en
France),
Octobre 2005
JP. LAVIGNE
Module de Base 3
Microbiologie
Annexe 1
TABLEAU I : Principaux germes responsables de diarrhes. (TIAC : toxi-infection alimentaire collective ; GE : Gastro-entrite ; FQ : fluoroquinolones)
Germes
Contexte
Epidmiologique
Facteurs
Favorisants
Incubation
Processus Toxique
Vibrio cholerae Staphylococcus Escherichia coli
aureus
entrotoxinogne
Processus Invasif
Shigella
Salmonella
non typhique
re
Voyage
rcent Voyage
rcent TIAC 1 cause
dans Pays Tropical dans Pays Tropical de GE/Voyage
rcent
dans
Pays Tropical
Eaux et aliments Aliments
Eaux et aliments Eaux et aliments Aliments
contamins
contamins
contamins
contamins
contamins
(glace,
(volaille, ufs,
(lgumes, fruits)
Interhumaine
gteaux, plats
Porteurs sains
aliments crus)
cuisins)
Porteurs sains
6-72 heures
1-6 heures
12-36 heures
36-72 heures
8-48 heures
Voyage
dans
Tropical
rcent TIAC
Pays
Cholriforme
(abondantes,
liquide, profuse,
afcale, odeur de
poisson, couleur
eau de riz)
Signes Cliniques Vomissements
incoercibles
associs
Douleurs
abdominales
Pas de Fivre
Diarrhe
turista
modre,
cholriforme
(liquide,
afcale,
odeur de poisson,
couleur eau de riz)
Nauses,
Pas de Fivre
Vomissements Douleurs
++
abdominales
Pas de Fivre
Profuse,
liquide,
douloureuse
Clostridium
difficile
Secondaire un
TIAC/Voyage
rcent dans Pays traitement
Tropical
Aliments
contamins
(volailles,porc)
Porteur sain
Eaux et aliments
souills (animaux
de boucherie)
Petits Enfants et
enfants
24-36 heures
Antibiotiques
(clindamycine,
lincosamide,
cphalosporines)
48-120 heures
Afcale, glaireuse,
mucosanglante
Polynuclaires
fcaux+++
Liquide,
abondante,
parfois glaireuse
Polynuclaires
fcaux +
Mucosanglante,
glaireuse
Polynuclaires
fcaux+++
Vomissement
colique
abdominale,
preinte, tnesme
Fivre 40C
Fivre
Douleurs
abdominales
Fivre leve
# colite ulcre
Fivre 38c
Douleurs FID++
Dshydratation
Cholcystite
Arthrite
ractionnelle
Arthrite
ractionnelle,
Eruption cutane
(rythme noueux)
Macrolides
14 jours
FQ ou Ttracycline
10 jours
Dshydratation++ Dshydratation
Choc
Autres Signes
Dshydratation
++
Choc
Traitement
Antibiotique
Ttracycline ou Gurison
FQ ou Ttracycline FQ
Cotrimoxazole
spontane sans ou Cotrimoxazole
Cotrimoxazole
3 jours
traitement
5 jours
5 jours
Dshydratation
++
Collapsus
TIAC
2e cause de GE
Yersinia
enterocolitica
Campylobacter
ou FQ 5 jours
Colite
pseudomembraneuse
Fivre
leve,
douleurs
abdominales,
altration de ltat
gnral
Vancomycine
Mtronidazole
10 jours
Octobre 2005
JP. LAVIGNE
ou
Module de Base 3
Microbiologie
Annexe 2
Tableau II : Les 4 principaux types dEscherichia coli impliqus dans les diarrhes
Contexte
Clinique
Physiopathologie
- Adhsion
- Phnomne dattachement-effacement
- Cytotoxines (ou vrotoxine) SLT (ou VT) :
inhibition de la synthse protique et destruction
cellulaire
Enfant - Adulte
Syndrome dysentrique
(cf Shigella)
Voyage turista
Syndrome cholriforme
(cf V. cholerae)
- Facteurs dadhsion
- Entrotoxines (thermostable ST et thermolabile
LT)
Pas de pntration des bactries dans les
cellules pithliales
Germes
E. coli entropathogne (EPEC)
Octobre 2005
JP. LAVIGNE