UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAD DE CIENCIAS
E.A.P BIOTECNOLOGA

OPERACIONES UNITARIAS I

DOCENTE:

JOS LUIS SILVA VILLANUEVA

CICLO:

VI

INTEGRANTES:

PAREDES NARVAEZ HELMAN

ROBERT
MURILLO PALLARA BADY

2016

1. Qu es un medio de cultivo? Cules son sus constituyentes bsicos?

Qu es un medio de cultivo?
Un medio de cultivo es un sustrato o una solucin de nutrientes que permite el
desarrollo de microorganismos incrementando el nmero de clulas de una poblacin
microbiana.
Cules son sus constituyentes bsicos?
1. Fuentes de energa

Orgnicas: carbohidratos, protenas, polisacridos, grasas, cidos orgnicos,

etc.
Inorgnicas: Ej. Amonio, nitritos, azufre, etc.
Luz.

2. Componentes estructurales celulares

Componentes principales: Carbono, hidrgeno, oxgeno, nitrgeno, azufre,

fsforo, potasio, magnesio, calcio, hierro y sodio.
Elementos trazas: Cobalto, zinc, molibdeno, cobre y manganeso.
Factores de crecimiento: Ej. Aminocidos, purinas, pirimidinas y vitaminas.

3. Agua
Cules son las condiciones ambientales que afectan el crecimiento de las
bacterias?
1. Temperatura
Cada microorganismo tiene una temperatura ptima en la cual su crecimiento es ms
rpido; una temperatura mnima por debajo de la cual no crece y una temperatura
mxima por encima de la cual el crecimiento no es posible, estas tres temperaturas se
denominan temperaturas cardinales y son caractersticas de cada microorganismo.
El rango de temperaturas entre las que un microorganismo puede crecer es variable,
hay microorganismos con un rango estrecho llamados ESTENOTERMALES y se
encuentran en hbitat de temperatura relativamente constante. Los microorganismos
de rangos ms amplios se encuentran en medios ambientales donde la temperatura
vara considerablemente y stos son llamados EURITERMALES.

De acuerdo con el rango de temperatura a la que crecen, los microorganismos se

dividen en:
1.1 Psicrfilos: Microorganismos capaces de crecer a bajas temperaturas. Existen
varias definiciones de psicrfilos, en un inicio se defina como Psicrfilo a cualquier
microorganismo que poda crecer a 0 C. Sin embargo, parecen haber dos grupos
diferentes que pueden crecer a esa temperatura. El primer grupo est constituido por
los psicr- filos estrictos o aquellos microorganismos que pueden crecer a 0 C pero
cuya temperatura ptima es de 15 C. El otro grupo los constituyen aquellos
microorganismos que pueden proliferar a 0 C pero que tienen temperaturas ptimas
ms elevadas 20 - 30 C llamados psicrfilos facultativos. Ej. Pseudomonas.
1.2 Mesfilos: Microorganismos cuya temperatura ptima de crecimiento se
encuentra dentro de un rango de 25 40 C. Dentro de este grupo se encuentran la
mayora de los microorganismos contaminantes de los productos farmacuticos,
alimentos y cosmticos y los microorganismos patgenos para el hombre. Ej.
Neisseria gonorrhoeae
1.3 Termfilos: Microorganismos cuya temperaturas ptima es de 50 - 60 C, hay
algunos con temperaturas ptimas an ms altas 80 - 121 C, a estos se les denomina
hipertermfilos o termfilos extremos. Ej. Thermus aquaticus (temperatura ptima 72
C; crece entre 50 - 80 C)

2. Actividad del agua (aw)

Como los microorganismos dependen del agua para la sntesis de sus componentes
celulares, es necesario que sta se encuentre disponible en el medio de cultivo para
que los microorganismos la puedan utilizar para su crecimiento. La cantidad disponible
de agua para los microorganismos en un medio de cultivo, no depende slo de la
cantidad que se ha aadido, ya que en estos medios se pueden encontrar sustancias
slidas disueltas que disminuyen su disponibilidad. La actividad del agua (aw) es una
expresin para la cantidad de agua disponible en un sustrato dado y se define como
la centsima parte de la humedad relativa del aire que est en equilibrio con ese
sustrato. Este valor nos indica la cantidad de agua disponible para ser utilizada por los
microorganismos.
El aw mnimo en que las bacterias crecen vara ampliamente pero los valores ptimos
para la mayora de las especies son mayores de 0,99. Existen ciertos
microorganismos que pueden crecer en medios con elevadas concentraciones de
solutos y se conocen como osmotolerantes. Otros microorganismos necesitan para
crecer elevadas concentraciones de solutos, a stos se les denomina osmoflicos.
Hay otros microorganismos que se han llamado haloflicos o halfilos estrictos, stos
requieren iones Na+ para crecer y lo hacen ptimamente en medios a los que se les
ha aadido NaCl para obtener valores de aw menores de 0,80 y los halfilos
facultativos que crecen a concentraciones de sales capaces de inhibir a la mayora de
las bacterias.
En la siguiente tabla se presentan como ejemplo algunos microorganismos y el valor
de aw en el que se produce su crecimiento.

3. pH
La acidez o alcalinidad de un medio de cultivo se expresa por su pH. Para la mayora
de las bacterias el pH ptimo de crecimiento est entre 6,5 y 7,5 aun cuando algunas
pocas especies pueden crecer en los extremos del rango de pH. Las levaduras y los
mohos pueden crecer a valores de pH ms bajos.
Cuando se cultivan los microorganismos en un medio de cultivo originalmente ajustado
a un pH dado, 7 por ejemplo, es probable que este pH cambie como resultado del
metabolismo de esos microorganismos, el cambio de pH puede ser tan grande que
eventualmente podra inhibir el crecimiento de esos microorganismos. Para mantener
un pH relativamente constante durante el crecimiento microbiano, se le aaden
sustancias buffer a muchos medios de cultivo.
Aunque los microorganismos se encuentran en hbitats con amplios rangos de pH, el
pH dentro de sus clulas es probablemente cercano a la neutralidad. En un medio
cido, el microorganismo puede mantener un pH cercano a la neutralidad de dos
maneras diferentes, ya sea impidiendo la entrada de los iones H+ , o expelindolos
activamente tan rpidamente como entran.
4. Oxgeno
Segn sus requerimientos de oxgeno los microorganismos pueden ser:
4.1 Aerobios estrictos: requieren oxgeno para crecer. Ej. Mycobacterium tuberculosis.
4.2 Anaerobios facultativos: pueden crecer en presencia o en ausencia de oxgeno. Ej.
Levaduras, enterobacterias.
4.3 Anaerobios estrictos: crecen en ausencia de oxgeno. En presencia de oxgeno su
crecimiento cesa, algunos mueren rpidamente. Ej. Especies del gnero Clostridium.
4.4 Anaerobios aerotolerantes: crecen en ausencia de oxgeno, pero la presencia de
oxgeno no perjudica su crecimiento. Ej.: Especies del gnero Lactobacillus.
4.5 Microaeroflicos: requieren pequeas concentraciones de oxgeno para crecer. Ej.:
Especies del gnero Spirillum.

Cul es el medio de cultivo que se emplea para el aislamiento de hongos y

levaduras?
Medios de Cultivo:
PAPA DEXTROSA AGAR (PDA)
Es un medio muy usado que sirve para aislar todo tipo de hongos. Beauveria,
Paecilomyces, Lecanicillium (Verticillium) y Metarhizium, los ms importantes
hongos parsitos de insectos, al igual que los parsitos de plantas y los hongos
saprofitos crecen muy bien y esporulan en este medio. Cuando se aslan hongos a
partir de insectos colectados del suelo, es recomendable acidificar el medio con
cido lctico al 25%. Se agregan 3 4 gotas sobre el agar solidificado de la placa
con el objeto de evitar el desarrollo de bacterias. Con los mismos ingredientes,
excluyendo el agar, se obtiene el medio lquido de Papa Dextrosa (PD), muy
utilizado para la preparacin del inculo en forma masiva
Papa sin pelar
Dextrosa
Agar
Agua destilada

200 g
10 g
18 g
1 litro

FITOLEVADURA
Este medio se usa para aislar hongos a partir de animales. Los hongos aislados de
insectos crecen exuberantemente con micelio bien algodonoso y buena produccin
de esporas.
Dextrosa
Extracto de levadura
Peptona
Agar
Agua destilada

20 g
5g
5g
18 g
1 litro

SABOURAUD
Es un medio de cultivo muy utilizado para aislar hongos de animales. Sirve para el
aislamiento y mantenimiento de hongos en tubo inclinado. Debido a su
composicin, los hongos crecen exuberantemente y esporulan bien. Es el medio
estndar para observar la morfologa tpica de los hongos, pero no es el medio ideal
de crecimiento o para estudiar la esporulacin.
Dextrosa
Peptona
Agar
Agua destilada

20 g
10 g
18 g
1000 ml