Prctica5.

4: CINETICA ENZIMATICA (Efecto de la temperatura sobre la velocidad de reaccion)

INTRUDUCCIN:
Efecto de la temperatura sobre la actividad
enzimtica
La velocidad de una reaccin enzimtica vara al
aumentar la temperatura de acuerdo a lo
indicado en la Fig. , donde se representa una
tpica
curva
de
actividad
enzimtica/temperatura. Tal dependencia refleja
un doble efecto de la temperatura: positivo a
bajos valores, debido al incremento general que
experimenta la velocidad de cualquier reaccin
qumica al hacerlo la temperatura, y negativo a
valores altos, debido a la desnaturalizacin
trmica del enzima. Esto es, la velocidad de
una reaccin enzimtica se incrementa al
aumentar la temperatura dentro de un
determinado rango, alcanzando un valor
mximo a la denominada temperatura ptima. A
valores superiores la actividad
disminuye
debido a que el enzima, como cualquier otra
protena, sufre procesos de desnaturalizacin y,
por lo tanto, de inactivacin. Durante la fase de
incremento de la velocidad, la relacin entre
sta y la temperatura viene determinada por la
ecuacin de Arrhenius:
v = k e -Ea/RT
ln v = ln k - Ea/RT
Ea es la energa de activacin, R la constante
de los gases (1,9872 cal K-1 mol-1; 8,3145 J K1 mol -1) y T la temperatura absoluta (K). El
valor de Ea se puede calcular a partir de la
representacin de Arrhenius.
Otro parmetro que se utiliza para cuantificar el
efecto de la temperatura es el coeficiente de
temperatura (Q10), que se define, para una
temperatura dada, como el factor de incremento
de la velocidad de reaccin cuando
la
temperatura se incrementa 10 o C.
(Q10)t=vt+10/vt.

OBJETIVO:

Observar el efecto de la temperatura

sobre la velocidad de la reaccin catalizada por
la invertasa, calcular el valor de la energa de
activacin de la reaccin catalizada por la
invertasa, calcular el valor de Q10 a diferentes
intervalos de temperatura para la reaccin
catalizada por la invertasa, y observar cual es el
ms veloz.
Interpretacin:
Se interpolaron los valores de absorbancia
obtenidos en la prctica en la curva tipo de
azucares reductores para obtener los moles de
azcar reductor y as calcular la velocidad en
unidades de invertasa. Al graficar los resultados
obtenidos se obtuvieron una grfica de
velocidad contra temperatura, dicha grafica
presenta una forma de campana.
La forma acampanada de la grfica nos muestra
que al aumentar la temperatura la energa
cintica de las molculas reaccionantes
aumenta, lo que favorece colisiones efectivas
entre la invertasa y la sacarosa en solucin,
para que la reaccin enzimtica se lleve a cabo,
esto provoca que la velocidad de la reaccin
catalizada por la invertasa incremente con la
temperatura hasta un punto crtico(Temperatura
optima) , en el cual al continuar aumentando la
temperatura la velocidad de la reaccin
comienza a disminuir debido a q la enzima
comienza a desnaturalizarse, si la temperatura
continua aumentando la enzima continuara
desnaturalizndose hasta el punto tal en que la
enzima pierda por completo su actividad
enzimtica. La grfica nos proporciona el dato
de la temperatura ptima, es decir la
temperatura mxima donde la enzima es
estable, valores superiores la actividad

disminuye debido a que la enzima, como

cualquier otra protena, sufre procesos de
desnaturalizacin y, por lo tanto, de inactivacin,
la cual es de 50 C.
Si calculamos el ln de la velocidad y graficamos
1/T K contra lnVo obtenemos una lnea recta, si
calculamos la pendiente, con ayuda de la
ecuacin Ea = mR podemos hallar el valor de la
energa de activacin, el cual es de 12879.8764
cal/mol K, este valor es experimental, sabemos
que el valor de comparacin es de 9000 cal/mol
K, podemos observar que el valor obtenido es
superior al valor de comparacin, esto se puede
deber a que al realizar el experimento midieron
correctamente los volmenes que se
adicionaron a los tubos, otro factor que pudo
haber afectado es el tiempo de incubacin, ya
que algunos segundos aunque parecieran poco,
pueden afectar significativamente los resultados,
tal suceso se pudo haber presentado al
momento de la incubacin, de la inactivacin y
en el desarrollo del color donde el tiempo es
crucial para que los resultados que se obtengan
sean adecuados.
Al realizar la serie de Q10 podemos observar
que el intervalo de temperatura ms veloz es el
intervalo de 30-40 (C) esto es donde se
produce ms rpido la funcin enzimtica.
Al observar las absorbancias de los testigos,
notamos que el tubo numero 6 posee la mayor
absorbancia, esto se puede deber a que en las
condiciones del experimento, temperatura
elevada y pH acido, se favorece la hidrlisis de
Alumnos:
la sacarosa.
Flores Hernndez Carlos I.
Garca Mrquez Reynaldo
3IM2

Seccin: 3

Prctica5.4: CINETICA ENZIMATICA (Efecto de la temperatura sobre la velocidad de reaccion)

Omega Octava reinmpresion 1984.
http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biolmol/pdfs/31%20INVERTASA%20ENSAYO.pdf

KOOLMAN, J. (2004). Bioqumica: Texto y atlas.

3 ed. Editorial Mdica Panamericana. Madrid,
Espaa. Pgs.: 94 - 95.

http://pendientedemigracion.ucm.es/info/btg/pers
onales/jvsgago/fundaments%20de
%20biocatalis3%20%5bModo%20de
%20compatibilidad%5d.pdf.

PEA, A. (2004). Bioqumica. 2 ed. Editorial

Limusa. Mxico, D.F. Pgs.: 201 203

Conclusiones:
Para la Invertasa tenemos que:

Su temperatura ptima es de 50 C.
Su Energa de activacin es de
12879.8764 cal/mol K
Su intervalo de temperatura ms veloz
es Q10 (30-40)

BIBLIOGRAFA:
Albert L. Lehninger Bioquimica Ediciones

http://www.uco.es/dptos/bioquimicabiol-mol/pdfs/32%20INVERTASA
%20CIN%C3%89TICA.pdf

QUESADA, M. S. (2007). Manual de

experimentos de laboratorio para bioqumica.
Editorial EUNED. San Jos, Costa Rica. Pgs.:
37 38.