Observacin e identificacin de las faces de la mitosis en la cebolla

(Allium cepa) y el efecto txico causado por el cadmio en el ciclo celular

Observation and identification of the phases of mitosis in onion (Allium

cepa) and the toxic effect caused by cadmium in the cell cycle
Esteban Vargas Parra, estudiante 5to semestre, programa biologa ambiental,
facultad ciencias e ingeniera, Universidad Jorge Tadeo lozano.
estebanvargasp@utado.edu.co
Gabriel Lpez Martin, estudiante 5to semestre, programa biologa marina,
facultad ciencias e ingeniera, Universidad Jorge Tadeo lozano.

Resumen
En el laboratorio de histologa de la Universidad Jorge Tadeo Lozano se realiz
un experimento en el cual por medio de un microscopio se observ las fases de
la mitosis en los meristemos de la cebolla (Allium cepa), las cuales fueron
sometidas a diferentes concentraciones de cloruro de cadmio (CdCl2), es cual
es un metal pesado y tiene una alta toxicidad en el medio ambiente. Para
cumplir con el objetivo planteado, la metodologa utilizada fue la propuesta por
la gua pero con algunas modificaciones. Los resultados obtenidos fueron
diferentes fases de la mitosis, en los que tenan mayos concentracin de
cadmio las clulas estaban menos teidas y un poco ms pequeas.
Palabras clave: mitosis, meristemos, metales pesados, toxicidad
Abstract

Key words: mitosis, meristems, heavy metals, toxicity

Introduccin
La divisin mittica de las clulas consiste en una divisin del ncleo seguida
por la divisin del citoplasma. La mitosis proporciona a cada clula hija una
copia de los cromosomas replicados de la clula original y la citoquinesis
usualmente localiza estos nuevos ncleos y organelos dispersos en el
citoplasma, en cada clula (Audesirk, 2010).

La fase M es el perodo ms llamativo del ciclo celular, en el que se produce la

reorganizacin de casi todos los componentes de la clula. Durante la mitosis
(divisin nuclear) los cromosomas se condensan, la envuelta nuclear de la
mayora de las clulas se desintegra, el citoesqueleto se reorganiza para
formar el huso mittico, y los cromosomas migran a polos opuestos Tras la
segregacin de los cromosomas se suele producir la divisin de la clula
(citocinesis). (Cooper, Hausman, 2010).
La mitosis comprende de distintas fases, las cuales son: La profase se
caracteriza por durar cerca de la mitad de la mitosis. Durante esta fase dos
pares de centriolos migran hacia polos opuestos de la clula para formar
microtbulos citoplsmicos que dan lugar a las fibras del huso acromtico. La
envoltura nuclear se comienza a descomponer y el nuclolo se desintegra. Las
fibras de cromatina se comienzan a condensar en cromosomas, siendo al final
de la fase claramente visibles. En la metafase cada cromosoma migra hacia el
plano ecuatorial, gracias a la unin de fibras del huso a una estructura asociada
al Centrmero de los cromosomas llamada cinetocoro. La anafase, la ms
corta, las cromticas hermanas de cada cromosoma se separan y migran
hacia los extremos opuestos de la clula, en la telofase el hecho ms
importante es la citoquinecis o divisin del citoplasma (Cooper, Hausman,
2010).
El cloruro de cadmio (CdCl 2) causa variaciones en la morfologa celular las
cuales son mayores a medida que aumenta la concentracin y el tiempo de
exposicin. Esto debido a que el cadmio tiene efecto citotoxic en la poblacin
celular de la cebolla (Allium cepa). Inicialmente el cadmio afecta el sistema de
transportes de iones a travs de la membrana alterando el flujo de sodio y
potasio, modificando as el metabolismo energtico y la sntesis del DNA y
RNA. (Marcano, et.al, 2001).
El propsito de esta prctica es emplear los conocimientos tericos recibidos
con anterioridad sobre la mitosis y el ciclo celular e identificar los daos que
pueden producir los metales pesados en las diferentes estructuras celulares y
en los procesos de duplicacin celular.
Metodologa
Para identificar las diferentes fases de la mitosis se realizaron una serie de
montajes de los meristemos de cebolla (allium cepa), para esto la cebolla se
dejo en agua con anterioridad para que esta tuviera sus races expuestas y as
hacer pequeos cortes con un escalpelo de la punta de la raz de la cebolla que
es donde se encuentra el material que se esta duplicando en esta planta, estos
pequeos trozos cortados son colocados sobre una lamina porta objetos y se
exponen a una solucin de hidrxido de sodio (NaOH) o de acido actico
(C2H4O2) Para ablandar las paredes celulares, se le retira el exceso de
hidrxido de sodio o el acido actico y se le agrega orceina A durante ocho
minutos para reblandecer las membranas celulares En este proceso la lamina
portaobjetos se flamea tres o cuatro veces sobre un mechero de alcohol sin
dejar quemar la muestra transcurridos los ocho minutos se retira el exceso de

orceina A lavando con agua suavemente, se procede a agregar unas cuantas

gotas de orceina B hasta cubrir la muestra dejndola actuar durante 1 minuto
para completar el proceso de tincin del material cromosmico se lava con
agua suavemente retirando el sobrante de orceina B, para analizar el efecto del
cadmio en el ciclo celular se dejaron unos bulbos de cebolla (allium cepa), en
varias concentraciones de cloruro de cadmio (CdCl2) 0.1, 0.01, 0.001 al retirar
las races de las soluciones de cadmio se hace la preparacin y la tincin
mencionada con anterioridad con ayuda de la orceina A y B. al tener las
laminas portaobjetos listas se coloca una lamina cubreobjetos sobre las
muestras para iniciar el proceso de observacin de las diferentes fases de la
mitosis bajo un microscopio nikon eclipse E200 las placas se enfocaron en un
objetivo de 100x con ayuda de aceite de inmersin y se tomaron algunas
fotografas de las fases de la mitosis observadas tanto de las expuestas al
cloruro de cadmio y el material que no tenia cadmio con ayuda de una cmara
de 5mpx de una tablet Samsung, para comparar el material observado el
docente suministro material fotogrfico para la realizacin de este documento.
Esta practica de la materia gentica se realizo en la universidad Jorge Tadeo
lozano laboratorio de ptica.
Resultados

1. Clula en profase

2. Clula en metafase

3. Diferentes fases de la mitosis

5. Capa de clulas

4. Clulas en divisin

6. Clulas en divisin celular

Discusin
En la imagen nmero 3 se puede observar los efectos que causa el cadmio en
la mitosis, se puede observar que as de todas formas se pueda observar la
telofase y anafase temprana, stas no tienen un suficiente tamaos y en la
imagen 6 stas no estn lo suficientemente teidas lo cual indica que el
colorante no alcanz a adherirse a los cromosomas, entonces al no haber
clulas en la fase de mitosis donde la cromatina empieza a condensarse el
colorante nos tiene donde unirse por lo cual sale. Esto sucede porque el
cadmio, uno de los metales ms txicos encontrados en el ambiente (Marcano
et al. 1998), puede producir perturbaciones en el crecimiento de clulas del
tejido animal y aberraciones cromosmicas en estas (Deaven, Campbel. 1980
en Marcano et al. 1998).
En cambio en la figura 4 y 2 se observa que las clulas tienen una buena
tincin y un buen tamao lo cual da a decir que la concentracin de cadmio fue
muy mnica o pudo haber sido agua. Cada vez que se empieza a aumentar la
cantidad de cadmio el proceso de mitosis va a empezar a disminuir ya

(Marcano et al. 1998). Como se pudo observar en este trabajo, aunque no se

diferenci cuales clulas tenan ms concentracin de cadmio que las otras por
simple vista se puede observar que las clulas que estn ms pequeas y con
menos tincin se expusieron a una concentracin ms alta de cadmio, mientras
las clulas que estn en mejor estado y ms teidas pudieron haberse
expuesto a una concentracin de cadmio baja o solo en agua.
El aumento en la concentracin de cadmio no solo interviene en el crecimiento
de los meristemos, sino que tambin ocasiona cambios en los cromosomas de
las clulas, originando as mutaciones o mltiples muertes celulares (Marcano
et al. 1998). Aunque no se evidenci de la misma forma en el laboratorio, pero
la mayora quedaban en profase y anafase, se puede decir que el cadmio par
el ciclo celular de una forma inmediata.
Conclusiones

A mayor concentracin de CdCl2se detiene ms el ciclo celular, debido al

efecto mitxico y genotxico en los meristemos radiculares de Allium
cepa alterando su ultraestructura celular en la cual se puede observar
vacuolas de diferentes tamaos y nuclolos colapsados.
La mejor forma de ver todas las fases de la mitosis es a bajas
concentraciones de cadmio o en agua, ya que esto no va inhibir el ciclo
celular.

Bibliografa

Audesirk. T, Audesirk. G, Byers. B. (2010), Biology: Life on Earth with

Physiology, 9th edition.

Cooper. G, Hausman. R. (2010), la clula, captulo 16 ciclo celular. 5th

edicin, pgs. 654 - 672.

Marcano. L, Carruyo. I, Montiel. X. (2001). Alteraciones citolgicas

inducidas por el cadmio en clulas meristematicas de races de cebolla
(allium cepa). Revista facultad agronoma universidad de Zulia. Vol 18.
Pags 247 257.

Marcano, Letty; Xiomara, M; Bracho, M; Atencio, L. Efecto mitotxico y

genotxico del cadmio en clulas meristemticas de cebolla (Alliutn cepa
L.). 1998. Scentific Journal from Ihe Experimental Faculity of Sciences,
Volume 6 N 2. Revista CIENCIA. 1998.