IDENTIFICACIN DE ESPECIES DEL GENERO VIBRIO AISLADAS DE AGUAS COSTERAS.

Mara Isabel Gonzlez Gonzlez*

Virginia Leyva Castillo
*Instituto Nacional de Higiene, Epidemiologa y Microbiologa,
Infanta 1158, e/ Clavel y Llins, Centro Habana, CIP 10300, Cuba,
Fax: 78-1479, E-mail: saludamb@heinsa.sld.cu

RESUMEN

El gnero Vibrio comprende microorganismos anaerobios facultativos en forma de bastoncillos

encorvados, Gram negativos y por lo general oxidasa positivos. Muchas especies son patgenas
al hombre y se pueden relacionar con enfermedades transmitidas por los alimentos y el agua.
Durante los aos 1994, 1995 y 1996 se identificaron las especies del gnero Vibrio aisladas de
98 muestras de aguas costeras destinadas a la recreacin y al cultivo de ostiones para un 76 %
de positividad con la aplicacin del esquema propuesto por Alsina y Blanch. La especie
predominante result Vibrio cholerae no O1. Se aislaron otras especies como Vibrio mimicus,
Vibrio alginolyticus, Vibrio fluvialis, Vibrio pelagius, Vibrio vulnificus, Vibrio harveyi,
Vibrio furnisii, Vibrio anguillarum-like, Vibrio damsela y Vibrio logei. No se aisl Vibrio
cholerae O1. Se reportan tambin bacterias de la familia Aeromonadaceae asociadas a estos
aislamientos como Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae, Aeromonas trota y
Aeromonas veronii biovar sobria. Adems, en las muestras de aguas destinadas al cultivo de
ostiones, se encontr asociacin entre las especies aisladas de estas aguas y de los ostiones
analizados.
Palabras claves: aguas costeras, ostiones, identificacin, Vibrio, Aeromonas.

INTRODUCCION.

La contaminacin de las aguas superficiales, en especial las costeras, constituye un problema

crucial en ascenso para la salud humana. Las causas ms frecuentes se deben a continuas
descargas de aguas residuales domsticas no tratadas o con escaso tratamiento, situacin que
se agudiza en los pases en va de desarrollo. En el caso de las pequeas islas densamente
pobladas, el deterioro de los ecosistemas costeros se ha incrementado notablemente afectando
la calidad microbiolgica de las aguas destinadas a la recreacin, a la pesca y al cultivo de
mariscos.
Esta contaminacin puede causar enfermedades principalmente por la va fecal-oral a travs de
agentes patgenos que se adquieren por la prctica de la natacin o ms fcilmente por el
consumo de moluscos, crustceos y pescados, crudos o parcialmente cocinados. En especial los
moluscos bivalvos juegan un papel importante en la transmisin de enfermedades ya que son
capaces de filtrar grandes cantidades de agua concentrando el plancton y microorganismos
presentes en el sitio donde se desarrollan. Entre estos microorganismos se encuentran bacterias
de los gneros Salmonella, Vibrio, Aeromonas, Escherichia, etc.
Las infecciones causadas por el gnero Vibrio son las ms comunes en reas costeras de
diversos pases como los estados de la regin del Golfo de Mjico en Estados Unidos, en
especial Florida donde se reportaron 690 infecciones por especies de Vibrio durante 1981 a

1993 ( Levine et al., 1993; Hlady y Klontz, 1996). Doce especies han sido asociadas con
sndromes clnicos en el hombre como gastroenteritis, infecciones en heridas y septicemias, de
ellas las ms frecuentes son causadas por Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus y Vibrio
vulnificus ( Kelly, 1991).
Los miembros del gnero son auctctonos del medio acutico y a menudo estn asociados a
otros nichos ecolgicos como por ejemplo, los organismos quitinosos y las plantas acuticas,
especialmente en aguas estuarinas y marinas, considerndose su identificacin un aspecto
fundamental para poder establecer su posible vnculo con las enfermedades transmitidas por
estas aguas.
El objetivo de este trabajo ha sido la identificacin de especies de Vibrio en aguas costeras
destinadas a la recreacin y al cultivo de ostiones, aportando informacin sobre dichas especies
principalmente de las que pueden constituir un riesgo a la salud humana.

MATERIALES Y METODO.

Durante los aos 1994 a 1996 se analizaron 98 muestras de aguas costeras destinadas a la
recreacin y al cultivo de ostiones, 46 procedentes del rea de playa de la zona este y oeste de
Ciudad de La Habana y 52 de la zona de la Baha de Cabaas, Provincia Habana, donde se
cultivan ostiones.
La toma, conservacin y transporte de las muestras de agua se realizaron en frascos estriles
de 1000 ml, procesndose dentro de las 4 a 8 horas de colectadas. Las muestras se analizaron
por la tcnica de filtracin de membrana, a travs de membranas estriles de nitrato de celulosa
(0,45 de porosidad y 47mm de dimetro Gellman Sciences) y equipo de filtracin de acero
inoxidable Sartorius (SM 16201) siguiendo recomendaciones de APHA (1992) para el
aislamiento de Vibrio cholerae.
Las muestras concentradas se cultivaron en caldo alcalino peptonado bufferado a 37 C
tomando inculo de la capa superior del cultivo a las 18-24 horas y se estriaban placas de Agar
TCBS y Agar MacConkey que se incubaban durante 22-24 horas a 35- 37 C. Al cabo de este
tiempo se seleccionaban al menos tres colonias presuntivas segn las caractersticas en el
medio de cultivo utilizado y se inoculaban en Agar Kligler para su posterior caracterizacin
segn West y Colwell (1984) y Kelly et al. (1991).
A las cepas clasificadas como Vibrio cholerae se les prob el antisuero polivalente de Vibrio
cholerae O1 (Welcome) y si no aglutinaban se clasificaban como Vibrio cholerae no O1. El
resto de las cepas dentro de la familia Vibrionaceae se identificaron segn el esquema de West
y Colwell (1984) y Alsina y Blanch (1994). Si las cepas pertenecan a la familia
Aeromonadaceae se clasificaron en especies segn Carnahan et al. ( 1991) y Furuwatari et al.
(1994).

RESULTADOS Y DISCUSION.

De las 98 muestras analizadas, 74 fueron positivas al gnero Vibrio, obtenindose por cientos
similares en ambas fuentes de agua; cultivo de ostiones, 75 % y recreativas, 76 % (Tabla 1).
Las bacterias de este gnero son autctonas del medio acutico, en especial en aguas con
cierta salinidad, suficientes nutrientes y la asociacin de algunas especies como Vibrio

cholerae al plancton y organismos marinos (Islam et al., 1993), lo que condiciona que por lo
general estas aguas presenten factores biticos y abiticos satisfactorios para su habitat.
Tabla 1. Nmero y porciento de muestras positivas a los gneros Vibrio y Aeromonas en las
aguas costeras analizadas. INHEM 1994-1996.
_____________________________________________________________________
MUESTRAS POSITIVAS (%)
FUENTE
No. de MUESTRAS
Vibrio
Aeromonas
_____________________________________________________________________
Aguas superficiales
*Cultivo de ostiones

52

39 (75)

18 (35)

*Recreativas

46

35 (76)

25 (54)

TOTAL

98

74 (76)

43 (44)

Adems, se encontr un 44 % de muestras positivas al gnero Aeromonas, aisladas la mayora

a partir del Agar MacConkey correspondiendo el mayor por ciento de aislamiento a las aguas
recreativas (54%) que a las de cultivo de ostiones (35%). Esto pudiera explicarse por ligeros
vertimientos de residuales domsticos existentes en algunas reas de playa analizadas, que
pudieran disminuir el grado de salinidad del agua y aumentar la concentracin de nutrientes, lo
que favorecera el crecimiento de este gnero.
En anteriores investigaciones (Gonzlez et al., 1995a,b), donde se analizan diferentes tipos de
agua, se encontraron altas positividades para ambos gneros en aguas costeras de Cuba
(Vibrio, 82,8% y Aeromonas, 96,1%), lo que indica que las condiciones ambientales para el
crecimiento de estos microorganismos son favorables en aguas costeras, de ah la importancia
de investigaciones epidemiolgicas de brotes de infecciones de posible asociacin con estas
bacterias patgenas.
De las 123 cepas aisladas del gnero Vibrio no se aisl Vibrio cholerae O1. El mayor por
ciento de las especies aisladas correspondi a Vibrio cholerae no O1 con 72 cepas (58%)
principalmente del Grupo I y II de Heiberg (Tabla 2). Otros autores (Garay et al., 1985; dos
Prazeres y Hofer, 1986) encontraron esta especie y serogrupo como la predominante en las
aguas costeras analizadas seguido de otras especies asociadas como las detectadas en este
estudio (Vibrio alginolyticus, Vibrio fluvialis y Vibrio vulnificus).
Aunque Vibrio cholerae no O1 ha sido asociado a gastroenteritis, infecciones por heridas y
septicemias relacionadas con el medio ambiente (Morris, 1990; Hlady y Klontz, 1996),
actualmente adquiere mayor importancia clnica debido a la aparicin de una nueva cepa,
Vibrio cholerae no O1 serogrupo O139, responsable de las epidemias de clera en al India y
Bangladesh. Algunos investigadores (Amaro et al., 1990) han demostrado la existencia de
factores de virulencia en cepas ambientales de V.cholerae no O1, adems, otros estudios
realizados por Colwell et al. (1995) demostraron que bajo ciertas condiciones de laboratorio,
algunos cultivos de V.cholerae no O1 podran contener clulas de V.cholerae O1, o producir
clulas que adquieran las propiedades antignicas del serogrupo O1, lo que se denomina
fenmeno de seroconversin. Todo esto representa una actual importancia sanitaria con
respecto a este serogrupo, debido a las implicaciones que representa en la transmisin del
clera y su epidemiologa a partir del estudio de los ecosistemas acuticos.

Tabla 2. Especies de Vibrio aisladas de aguas costeras. INHEM 1994-1996

__________________________________________________________
ESPECIES
No. DE CEPAS (%)
__________________________________________________________
V.cholerae no O1

72 (58)

V.alginolyticus

13 (11)

V.fluvialis

12 (10)

V.pelagius I

(6)

V.vulnificus

(3)

V.furnissii

(3)

V.anguillarum-like

(3)

V.mimicus

(3)

V.damsela

1 (1)

V.logei

1 (1)

V.harveyi

1 (1)

TOTAL

123 (100)

Cuatro cepas de Vibrio mimicus fueron aisladas en este estudio. Esta especie presenta
similares caractersticas bioqumicas y ecolgicas a la de V.cholerae, asociada tambin a
reservorios acuticos como Eichhornia crassipes (jacinto de agua), de marcada importancia
debido a su abundancia en aguas dulces y de baja salinidad (Chowdhury et al., 1989). Sin
embargo, su incidencia en infecciones es en menor nmero que las asociadas con V.cholerae,
causando fundamentalmente gastroenteritis y en algunos casos, infecciones en heridas y
septicemias.
El esquema de clasificacin propuesto por Alsina y Blanch (1994) fue utilizado con xito y
permiti la mejor identificacin de los vibrios halfilos aislados, que se muestran en la Tabla 2,
destacndose algunos de significacin clnica como Vibrio alginolyticus (13 cepas), Vibrio
fluvialis (12 cepas), Vibrio vulnificus (4 cepas), Vibrio furnisii (4 cepas) y Vibrio damsela (1
cepa). Todas estas especies se han asociado a infecciones en pacientes que por lo general han
consumido agua o alimentos marinos contaminados, fundamentalmente moluscos bivalvos
crudos o parcialmente cocinados y tambin por una invasin directa del patgeno a travs de
heridas en la piel (Desenclos et al., 1991; Levine et al., 1993; Hlady y Klontz, 1996).
Las especies detectadas se correlacionan con las aisladas de las muestras de ostiones,
reportadas por el laboratorio de Microbiologa de Alimentos del Instituto de Nutricin e Higiene
de los Alimentos, presentndose en mayor frecuencia V.cholerae no O1 seguido de

V.alginolyticus y V.vulnificus. Esto coincide con resultados de otros investigadores (dos

Prazeres y Hofer, 1986) donde se observa una estrecha relacin entre las especies aisladas de
los organismos bivalvos y las identificadas de las aguas donde ellos habitan. De ah que se
ratifique la capacidad de filtracin que poseen los moluscos al adquirir microorganismos del
gnero Vibrio y acumularlos en sus tejidos, generalmente en concentraciones muy elevadas, a
travs de su mecanismo de nutricin, lo que evidencia la necesidad de incrementar el control y
vigilancia de estas aguas y sus productos con el fin de disminuir el riesgo para la salud de su
consumo.
En la Tabla 3 se observan las especies de Aeromonas aisladas con un total de 63 cepas
predominando Aeromonas caviae con 35 cepas, seguido de Aeromonas hydrophila (18
cepas), Aeromonas veronii biovar sobria (8 cepas) y Aeromonas trota (2 cepas) (Tabla 3).
Este orden de frecuencia encontrado coincide con reportes de otros autores (Chouwdhury et al.,
1990) donde esta especie anaerognica ocup el primer lugar en aguas con cierto grado de
salinidad y concentracin de nutrientes.

Tabla 3. Especies de Aeromonas aisladas de aguas costeras. INHEM 1994-1996.

__________________________________________________________________
ESPECIES
No. DE CEPAS (%)
__________________________________________________________________

A.caviae

35 (56)

A.hydrophila

18 (28)

A.veronii biovar sobria

8 (13)

A.trota

2 (3)

TOTAL

63 (100)

Las infecciones por Aeromonas han sido las ms frecuentemente relacionadas con el gnero
Vibrio, provocando gastroenteritis y en algunos casos infecciones extraintestinales, algunas de
ellas asociadas a la exposicin del individuo con el medio acutico o el consumo de alimentos
marinos crudos (Kelly , 1991).
A.hydrophila ha predominado en otras investigaciones (Gonzlez et al., 1995b) en diferentes
tipos de agua, en especial en aguas de pozos y manantiales de Cuba, a diferencia de estos
resultados donde ocup el segundo lugar. Esta especie fue la ms frecuentemente identificada
en aguas dulces y estuarinas de diferentes reas costeras de British Columbia en todas las
pocas del ao, favoreciendo su ocurrencia por la baja salinidad y temperatura adecuada y
adems, fue recobrada del 9% de los ostiones cultivados (Kelly y Stroh, 1988).
En conclusin, diferentes especies de Vibrio de importancia clnica fueron aisladas de aguas
costeras, lo que indica que existen condiciones favorables para su habitat, por lo que se debe
considerar su vinculacin en posibles infecciones adquiridas por el consumo de alimentos
marinos crudos o mal cocidos o el riesgo de contraer enfermedades asociadas con el bao en
aguas recreativas. V.cholerae no O1 fue la especie ms frecuentemente identificada. Si se
considera que V.cholerae O1 y V.cholerae O139 pueden existir en ambientes similares,

adems del fenmeno de seroconversin, existe un riesgo potencial de contraer infecciones

vinculadas al gnero.
Es notable la significacin sanitaria de propuestas de normas adecuadas a las condiciones
ambientales de cada pas para las aguas destinadas a la recreacin y al cultivo de ostiones.
Estas regulaciones deben estar basadas en estudios epidemiolgicos, donde se investiguen los
reservorios acuticos y la influencia de los factores biticos y abiticos que puedan influir en la
transmisin de estas enfermedades. Estas investigaciones pueden brindar informacin de
carcter bsico y aplicado para el perfeccionamiento de los sistemas de vigilancia de la calidad
microbiolgica del agua en las reas costeras del cualquier pas o territorio.

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