DIFERENCIACION DE CELULAS PROCARIOTAS

Integrantes:
Cern Garzn ngela Geraldine
Orobio Caicedo Erika Yuliana
Pejendino Arteaga Yasmin Alexandra
Salazar Ordoez Mara Isabel
I.Am. G2-6

Prof.
Aurelio Cern Erazo

UNIVERSIDAD DE NARIO
Facultad de ciencias agrcolas
Programa Ing. Ambiental
San juan de pasto
Septiembre 16 de 2015

INTRODUCCION:
Los procariontes u organismos procariotas son aquellos microorganismos que estn
constituidos por clulas procariotas, es decir, clulas que presentan un ADN libre en el
citoplasma, ya que no hay ncleo celular. Han recibido diversas denominaciones tales como
bacterias, mneras, dependiendo de los autores y los sistemas de clasificacin . Actualmente
la mayora considera que en realidad se trata de 2 dominios diferentes: Bacteria y Archaea, y
minoritariamente se considera que forma un imperio denominado Procariota. Las clulas
procariotas estructuralmente son las ms simples y pequeas. Como toda clula, estn
delimitadas por una membrana plasmtica que contiene pliegues hacia el interior algunos de
los cuales son denominados laminillas y est relacionado con la divisin de la clula. La
clula procariota por fuera de la membrana est rodeada por una pared celular que le brinda
proteccin. El interior de la clula se denomina citoplasma. En el centro es posible hallar una
regin ms densa, llamada nucleoide, donde se encuentra el material gentico o ADN. Es
decir que el ADN no est separado del resto del citoplasma. En el citoplasma tambin hay
ribosomas, que son estructuras que tienen la funcin de fabricar protenas. Pueden estar libres
o formando conjuntos denominados poli ribosomas. Las clulas procariotas pueden tener
distintas estructuras que le permiten la locomocin, como por ejemplo las cilios (que parecen
pelitos) o flagelos (filamentos ms largos que las cilios).
OBJETIVOS:

Reconocer que los organismos procariotas constituyen un reino mnera

Reconocer que estos microorganismos carecen de pared celular
Identificar la tincin del Gram y porque es importante en la microbiologa
Identificar bacterias por el mtodo de tincin de Gram
Clasificar segn su color

MATERIALES:

Microscopio
Mechero
Caja Petri (con bacterias Gram positivas y negativas)
Asas bacteriolgicas
Rejillas para reportar portaobjetos
Mortero
Portaobjetos
Laminillas
Gotero
Guantes quirrgicos desechables
Solucin de cristal violeta
Fucsina
Solucin de lugol
Glicerina
Alcohol etilico96%

Aceite de inmersin
Yogurt
Fsforos
Reloj con segundero

RESULTADOS:
1.) De acuerdo a la forma como puede clasificarse las bacterias?
RTA/ Por su morfologa y agrupamiento
Cocos.

Estreptococos: en forma de cadenas.

Diplococos: en pares.
Ttradas: en grupos de cuatro.
Sarcinas: en forma de cubos.
Estafilococos: en forma de racimos.

Bacilos.

Diplobacilos: en pares.
Estreptobacilos: en forma de cadenas.
Empalizadas o Letras chinas.

Espirilos. Vibrios.
Por su afinidad tutorial... Cuando se descubri que las bacterias se tenan con colorantes
surgi otro criterio de agrupacin, su afinidad tutorial. As la tincin de Gram formo dos
grandes grupos bacterianos:
TINCION DE GRAM:

Gram positivo (que se tien de color violeta.)

Gram negativo (que se tien de color rojo

POR SU FORMA DE RESPIRACION

Cuando se descubri la forma de respiracin de las bacterias, surgi otro criterio de
clasificacin que las agrupo en cuatro tipos:

Aerobias estrictas: aquellas que requieren del oxgeno como ltimo aceptor de
electrones (H).
Anaerobias estrictas: que utilizan sales inorgnicas en lugar del oxgeno para
transferir electrones.
Aerobias y anaerobias facultativas: que pueden respirar en presencia y ausencia de
oxgeno, ya que cuentan con sistemas enzimticos que pueden activarse en cualquiera.
Microaerofilicas: que requieren de menor concentracin de oxgeno en el medio para
realizar mejor la respiracin.

POR SU METABOLISMO

Las caractersticas metablicas han sido por muchos aos el pilar de la identificacin
y agrupamiento de las bacterias, y con este criterio y la identificacin de los
antgenos bacterianos se hicieron las especies, los gneros, las tribus, las familias, los
rdenes, las clases y el reino.

POR SU TAXONOMA GENTICA

El criterio que actualmente se est utilizando, y que de hecho ha reclasificado algunas

bacterias en otros grupos, es la clasificacin por afinidad de la bacteria en el ADN.
La taxonoma es la disciplina que estudia la clasificacin. En este caso se estudia el
material gentico de la bacteria, analizando su cido nucleico y se hace su ubicacin
en funcin de las caractersticas de las cadenas de los poli nucletidos.
Si los genes de dos bacterias son los mismos, ah hay un 100% de genes comn. Las
dos son de una misma especie.
Si entre dos bacterias hay un 80% de genes en comn seguramente no pertenecen a la
misma especie, pero tal vez podran ser del mismo gnero o de la misma familia.

COMENSALES:

Cuando habitan en el husped, adquieren su alimento de l, pero no le causan dao.

Cuando se encuentran en sitios particulares del cuerpo humano, en individuos sanos, y
varan de acuerdo a los diferentes sitios anatmicos, la edad y el sexo.
Los miembros de la flora normal se clasifican en dos categoras:

SIMBIONTES O MUTUALISTAS: cuando producen beneficios al husped, algunas

bacterias bloquean el establecimiento de patgenos y evitan la infeccin del husped, otro
beneficio por bacterias es la produccin de elementos esenciales para los fenmenos bilgicos
y produccin de vitaminas.
COMENSALES: son bacterias que establecen una relacin neutral con el husped.
FLORA TRANSITORIA: aquella que se establece y coloniza pero que tiende a ser excluida
por competencia o por factores inmunolgicos.
FLORA RESIDENTE: es aquella que se encuentra presente de manera invariable por
semanas o meses en un sitio anatmico

2.) En que principios se asa la reaccin de tincin de Gram?

RTA/ Los principios de la tincin de Gram estn basados en las caractersticas de la pared
celular de las bacterias, la cual le confiere propiedades determinantes a cada microorganismo.
La pared celular de las bacterias Gram negativas est constituida por una capa fina de
peptidoglucano y una membrana celular externa, mientras que las bacterias Gram positivas
poseen una pared celular gruesa constituida por peptidoglucano, pero no cuentan con

membrana celular externa; as pues, la composicin qumica y el contenido de peptidoglucano

en la pared celular de las bacterias Gram negativas y Gram positivas.
3.) De acuerdo a la tincin de Gram como se clasifican las bacterias. Y a que se deben
esas diferencias en coloracin?
RTA/Segn la tincin de Gram las bacterias se clasifican en: Gran-positivas y Gramnegativas. La tincin de Gram es un proceso que para un organismo, determina muchas cosas
sobre la resistencia a los antibiticos. La tincin consiste en tintar un grupo de bacterias con
cuatro lquidos diferentes. En primer lugar se aade violeta cristal, luego, se tie con yodo y
finalmente con safranina. Luego se somete a un lavado con alcohol. Las bacterias que retienen
la mancha purpura (violeta/morado) del violeta cristal son Gram-positivas, y las que toman el
tinte rosado de la safranina son Gram-negativas. Esto se debe a que la capa externa de la
clula de las bacterias Gram-positivas tiene una gruesa capa de peptidoglicano, que absorbe la
tincin de Gram. Las bacterias Gram negativas tienen una bicapa lipdica gruesa en la parte
exterior esta es selectivamente permeable, no todo pasa a travs de ella, impidiendo la
absorcin de la tincin de Gram.
4.) RTA/
Muestra
Caja Petri 1
Estreptococos

Caja Petri 2
Escherichia-coli

Yogurt

Resultados obtenidos
Forma
En la muestra preparada con
el cultivo de bacterias de la
caja Petri 1, se observan:
-Cocos
-Estreptococos
-Ttradas -Diplococos
-Sarcina -Estafilococos
En la muestra preparada con
el cultivo de bacterias de la
caja Petri 2, se observan:
-Cocobasilos
-Bacilos
-Diplobacilos
-Estreptobacilos
En la muestra preparada con
yogurt, se observan:
*Cocos:
-Cocos
-Diplococos
-Estreptococos
*Bacilos
-Bacilos
-Cocobacilos
-Diplobacilos

Coloracin
Color morado/violeta (grampositivo)

Color rosado/rojo (gramnegativo)

Color morado/violeta (grampositivo)

Rhizobium

*Espirilos
En la muestra preparada con
rhizobium, se observan:
*Cocos:
-Cocos
-Diplococos
-Estreptococos
-Estafilococos
*Vibrios

Color rosado/rojo (gramnegativo)

5.) Compare sus resultados con los de sus compaeros; si se presentan diferencias
sustente las posibles razones para que esto se presente
RTA/Entre las principales caractersticas de las bacterias se encuentran su tamao, forma,
estructura y tipo de agrupacin. Todas estas caractersticas van a constituir la morfologa
propia de las clulas bacterianas
La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglicano,
adems de dos clases de cidos: anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la
membrana plasmtica, se encuentra el cido lipoteicoico, y ms en la superficie, el cido
teicoico que est anclado solamente en el peptidoglicano
Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada, y se encuentra
unida a una segunda membrana plasmtica exterior (de composicin distinta a la interna) por
medio de lipoprotenas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana
exterior por lipoprotenas. La membrana exterior est hecha de protena,
fosfolpido y lipopolisacrido.
Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tien diferencialmente debido a estas diferencias
constitutivas de su pared. La clave es el peptidoglicano, ya que es el material que confiere su
rigidez a la pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha mayor
proporcin que las Gram negativas.
La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloracin, se debe a que la membrana
externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgnicos, como por ejemplo la mezcla
de alcohol/acetona. La capa de peptidoglucano que posee es demasiado delgada como para
poder retener el complejo de cristal violeta/yodo que se form previamente, y por lo tanto este
complejo se escapa, perdindose la coloracin azul-violcea. Pero por el contrario, las Gram
positivas, al poseer una pared celular ms resistente y con mayor proporcin de
peptidoglicanos, no son susceptibles a la accin del solvente orgnico, sino que este
acta deshidratando los poros, cerrndolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo
cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloracin azul-violeta.
6.) Porque los cultivos viejos pueden presentar alteraciones en los resultados?

RTA/Los cultivos viejos de los Gram positivos presentan alteraciones en los resultados, ya
que las bacterias pueden estar muertos o tener problemas en su pared celular esto la convierte
en una pared celular compleja, hacindose ms permeable a la entrada de tintes y
reaccionando como Gram-negativos, es decir se obtiene un falso Gram negativo.
7.) Cual es la composicin qumica de la pared celular de las bacterias?
RTA/En las bacterias, la pared celular se compone de peptidoglucano. Llamado antiguamente
MURENA. Esta sustancia est compuesta por cadenas de polisacrido enlazadas por
pptidos inusuales que contienen AMINOCIDOS Estos aminocidos no se encuentran en
las protenas, por lo que protegen a la pared de la mayora de las PEPTIDASAS.
8.) Que tipo de bacterias (Gram positivas y negativas) son ms susceptibles al control
con penicilinas? Justifique su respuesta teniendo en cuenta la organizacin de la pared
celular
RTA/La coloracin de Gram es una manera de dividir a las bacterias en dos grupos
principales. Las bacterias Gram positivas retienen el colorante de cristal violeta durante el
proceso de coloracin, tornndose prpura, mientras que las bacterias Gram negativas se
tornan rosa durante el proceso. Algunas bacterias son variables, y las Gram positivas pueden
convertirse en Gram negativas bajo ciertas circunstancias. La diferencia entra ambas reside en
sus membranas celulares. Las bacterias Gram positivas tienen una clula gruesa que est casi
toda hecha de peptidoglucano. La capa de peptidoglucano en la bacteria Gram negativa es
muy delgada y su capa ms exterior est protegida por una membrana de molculas de
lipoprotenas. Esto significa que los dos tipos de clulas tienen propiedades muy diferentes y
responden de manera distinta a los qumicos.
El principal peligro de las bacterias Gram negativas es que estas infecciones no responden a
los tratamientos antibiticos estndar. Por ejemplo, las bacterias Gram negativas resisten los
efectos de la penicilina y la cefalosporina porque estos antibiticos funcionan interrumpiendo
las paredes celulares, que no tienen las bacterias Gram negativas. La membrana exterior de
esta bacteria resiste los efectos de muchos tipos de antibiticos porque es impermeable a
stos. Esto significa que las infecciones causadas por una bacteria Gram negativa son muy
difciles de tratar.
RECOMENDACIONES:

clasificar los distintos tipos de bacterias se utiliza una tcnica llamada tincin de Gram,
que consiste en colorearlas para observar cmo reaccionan las paredes celulares al
colorante. Aquellas que se tien de color azul o violeta se denominan bacterias Gram
positivas, ya que sus gruesas paredes de murena retienen el colorante. Las bacterias que
no se tien son Gram negativas, y se caracterizan por tener una doble membrana lipdica
con una fina pared celular entre ambas.
Tener un manejo adecuado con el microscopio, Tener un correcto enfocamiento de la
muestra para observar correcta mente la muestra y diferenciar su estructura
Seguir el procedimiento adecuado para obtener resultados ptimos.
Emplear los materiales correctos de acuerdo a la prctica que se lleve a cabo.

CONCLUSIONES:

El empleo de colorantes en la observacin de clulas representa una gran ventaja ya que

permite identificar con mayor facilidad las estructuras bsicas de la misma, siempre y
cuando se empleen concentraciones bajas, de lo contrario se convierte en problema porque
si el colorante es muy concentrado no deja diferenciar nada en la clula.

Se reconocieron en el microscopio, las diferencias morfolgicas fundamentales entre

clulas eucariotas y procariotas.

Tanto las bacterias Gram positivas como las Bacterias Gram negativas se presentan
morfolgicamente como cocos o bacilos, si embargo al ejecutar tincin de Gram en estas
para identificar su grupo taxonmico, las Gram positivas se tien de color violeta mientras
que las Gram negativas se tien de color rosado

BIBLIOGRAFIAS:
grupoenfermeriaunpa.blogspot.com/.../clasificacion-bacteriana-lisbeth-m...
http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf
http://www.ehowenespanol.com/cuales-son-peligros-bacterias-gram-negativasinfo_191193/
www.biblioteca.org.ar/Libros/hipertextos%20de%20biologia/micro4.

ANEXOS:
ESCHERICHACOLI Y=99 X=34

RHIZOBIUM Y= 95 X=35

STRETOCOCOS Y=95 X=30

YOGOURT Y=84X=21