Medios de cultivo en placa

EMB: agar selectivo

para el aislamiento de
Enterobacterias
patgenas.

Mac Conkey: Agar

selectivo y diferencial
para el aislamiento de
Enterobacterias.

Fundamento

Tcnica

Resultados

-Los colorantes de anilina

(Eosina y azul de metileno)
inhiben las bacterias Gram
positivas y las Gram
negativas exigentes
nutricionalmente. Tambin se
combinan precipitndose a
pH acido actuando como
indicadores de produccin de
cidos de los carbohidratos
presentes en el medio
(Lactosa y Sacarosa)

-Inocular realizando
siembra por
agotamiento
(Frobisher) a partir del
cultivo del
microorganismo en
estudio, incubar a 37
C por 24 horas

-Las colonias fermentadoras son

de color rosado.
Escherichia coli fermenta los
azucares y forma colonias verdes
con brillo metlico.

-El medio contiene sales

biliares y cristal violeta que
son inhibidores de la
microbiota Gram positiva. La
lactosa junto al indicador
Rojo neutro sirven para la
comprobacin de la
degradacin de dicho azcar,
dividiendo el grupo en 2:
Bacterias fermentadoras y no
fermentadoras de Lactosa.

-Sembrar en el agar
realizando siembra por
agotamiento a partir
del cultivo del
microorganismo en
estudio. Incubar 24
horas a 37 C.

Las colonias no fermentadoras son

incoloras.
-Las colonias fermentadoras de
lactosa dan un color rosado. Las
colonias no fermentadoras de
lactosa son incoloras, lo anterior
por el comportamiento del
indicador de pH.

Medios de cultivo en placa

Gelosa Sangre: Medio
para propsitos
generales, para el
aislamiento y cultivo
de numerosos
microorganismos.
Con la adicin de
sangre, el medio es til
tanto para el
aislamiento y cultivo
de microorganismos
aerobios y anaerobios
nutricionalmente
exigentes y para la
observacin de
reacciones de
hemlisis.
Sulfito de bismuto
-Medio selectivo para
el aislamiento y
diferenciacin de
Salmonella typhi y
otras Salmonellas.

Fundamento

Tcnica

-La infusin de msculo de

corazn y la peptona, otorgan
al medio un alto valor
nutritivo, que permite el
crecimiento de una gran
variedad de
microorganismos, an de
aquellos nutricionalmente
exigentes. El cloruro de sodio
mantiene el balance
osmtico.
-El agregado de sangre al
medio de cultivo, en
concentracin final de 5-10
%, aporta nutrientes para el
crecimiento bacteriano, y
permite detectar hemlisis.

-Por inoculacin
directa del material en
estudio, sobre la
superficie del medio de
cultivo.
-El tiempo,
temperatura y
atmsfera de
incubacin,
dependern del
microorganismo que se
quiera aislar.

-La peptona, el extracto de

carne y la dextrosa proporcionan
los nutrientes necesarios para el
crecimiento de los
microorganismos.
-El sulfato ferroso acta como
indicador en la produccin de
sulfuro de hidrgeno que se
manifiesta en el centro de la
colonia por un precipitado negro
y un halo negro grisceo con
brillo metlico por la reduccin
de los iones bismuto en
presencia del sulfuro de

-Sembrar la superficie
del medio de cultivo
con el material de
ensayo por estra
cruzada. Incubar 24 48 h a 35C

Resultados

-Salmonella typhi: Colonias con

centro negro, bordes claros, a las
48 h con halo negro grisceo
y brillo metlico

-Salmonella typhimurium: Colonias

negras a verdes

Medios de cultivo en placa

Hidrgeno.
-El sulfito de bismuto inhibe
considerablemente el
crecimiento de bacterias
contaminantes.

Fundamento

Tcnica

Resultados

Salmonela Shigella
(SS):
El agar SS es un medio
altamente selectivo
que inhibe el desarrollo
de la mayora de
coniformes y permite
el desarrollo de las
especies de Salmonella
y Shigella.

La alta concentracin de
sales biliares y citrato se
sodio inhibe a todas la
bacterias Gram positivas y a
algunas Gram negativas. La
Lactosa es el nico hidrato de
carbono y el Rojo neutro
detecta la produccin de
cido. El tiosulfato de sodio
es una fuente se azufre y las
bacterias que producen H2S
se detectan por la presencia
de un precipitado negro por
el citrato frrico.

Inocular realizando
siembra por
agotamiento a partir
del cultivo del
microorganismo en
estudio, incubar a 37
C por 24 horas.

Las cepas de Shigella y la mayora

de Salmonella presentan colonias
incoloras. Colonias trasparentes
con centro negro: Proteus y
algunas Salmonellas. Las bacterias
fermentadoras de Lactosa
presentan colonias rojas a rosadas.

Verde brillante:
-Medio de
enriquecimiento
altamente selectivo
para el aislamiento de
Salmonella spp.,
excepto S. typhi y S.
paratyphi.

En el medio de cultivo, la
pluripeptona y el extracto de
levadura, constituyen la
fuente de nitrgeno,
vitaminas y minerales. La
lactosa y la sacarosa son los
hidratos de carbono
fermentables, el rojo fenol es

-Sembrar en superficie
por estriado a partir de
una dilucin del
material a investigar o
de un cultivo previo en
un medio de
enriquecimiento
selectivo.

-Escherichia coli: Amarilloverdosas sobre fondo amarillento

-Salmonella enteritidis: Rosas,
blancas o transparentes sobre
fondo rojo
-Salmonella typhi: Crecimiento
inhibido
-Salmonella typhimurium: Rosas,

Medios de cultivo en placa

-Inhiben
considerablemente el
crecimiento de
bacterias
contaminantes

el indicador de pH, que vira

al amarillo cuando hay
produccin de cido a partir
de la fermentacin de
azcares, el cloruro de sodio
mantiene el balance
osmtico, y el verde brillante
acta como agente selectivo.

blancas o transparentes sobre

fondo rojo
-Shigella flexneri: Crecimiento
inhibido
-Staphylococcus aureus:
Crecimiento inhibido