COLORACIN CELULAR

Vargas Edilma, Cardona Sebastin.

Corporacin tecnolgica de Bogot, (grupo 07)
Bogot, Septiembre 15 de 2015, Colombia

RESUMEN

ABSTRACT

El presente artculo contiene el

aprendizaje que se obtuvo en el
laboratorio
de coloracin celular,
dividido en dos grandes partes: la
coloracin de clulas vegetales y de
clulas animales. Con el objetivo de
entender el funcionamiento de las
plantas y de los animales, es necesario
conocer la estructura y funcionamiento
de las mismas y por ende de sus clulas.
Dado que para observar la estructura
celular es necesario el uso del
microscopio, se realiz el montaje de
una delgada muestra de papa con
cubreobjetos y una gota de lugol, una
delgada muestra de la epidermis de la
cebolla con cubreobjetos y una gota de
azul de metileno, llevndolos al objetivo
en 40 x y determinando sus
caractersticas ms relevantes, tomamos
una muestra de tomate de la capa
interna
y una capa externa, la
colocamos sobre el portaobjetos
,cubrindola con laminilla cubreobjetos
y observamos en el microscopio sus
diferencias. En la segunda parte del
laboratorio se extrajo y trato una
muestra de sangre con reactivo giemsa
sobre el portaobjetos y en un segundo
portaobjetos 2 gotas de sangre, una en
cada esquina de la lmina cubriendo con
un cubre objetos y agregando una gota
de agua a una de las 2 muestras
observando detenidamente en el
microscopio su reaccin y lo que
suceda.

This article contains the learning that

was
obtained
laboratory staining of cells is divided in
to two major parts; plant cell andanimal
cell staining. In order to understand the
functioning of plants and animals, it is
necessary to know the structure and fun
ction the same and hence of their cells.
Giventhat to observe the cell structure is
necessary the use of the microscope, wa
s themounting of a thin Pope with cover
slip sample and one drop of lugol's, and
a thinsample of onion with coverslip an
d a drop of methylene blue, leading the
m to the 40x objective and determining
its relevant characteristics, we
took a sample of the innerlayer and an
outer
layer tomato We put it on the slide,
covering with foil coverslip andobserve
their differences under the microscope. I
n the second part of the laboratorywas t
aken and I try a blood sample with reag
ent giemsa on the slide and a secondslid
e 2 drops of blood, one in each corner of
the foil covering with a covers objectsan
d adding a drop of water to one of the 2
samples carefully observed in themicros
cope his reaction and what was
happening.

Palabras clave:
coagulacin.

reactivo,

clula,

Key words: reactive, cell, coagulation

INTRODUCCIN
ORGANELOS ESPECIALES DE LA
CLULA VEGETAL
Cloroplastos: Son organelos rodeados
de una membrana doble. En su interior
contiene las enzimas y la clorofila para
la fotosntesis. En el interior del
cloroplasto se encuentra un complejo
sistema de membranas que constituye el
aparato fotosinttico.
Vacuola: Es una vescula grande,
rodeada por una membrana, que puede
llegar a ocupar el 90% del volumen
celular. Su funcin es almacenar agua y
sustancias en solucin, lo que permite
regular la presin osmtica.
Pared celular: Las clulas vegetales se
encuentran rodeadas por una pared
rgida formada por fibrillas de celulosa.
La funcin de la pared celular es dar
sostn y proteger la clula
TRANSPORTE CELULAR
Transporte a travs de membrana
De todas las propiedades descritas en el
modelo que tienen las membranas, se
desprende una que es la ms relevante
desde el punto de vista funcional: La
permeabilidad selectiva, es decir, la
posibilidad de que la membrana
restrinja los solutos que han de pasar a
su travs, pudiendo variar dicha
permeabilidad en funcin de las
necesidades celulares en cada momento.
1. TIPOS DE TRANSPORTE Una
forma muy simple de clasificar las
modalidades de transporte atiende al
punto de vista del consumo de energa
metablica. As el transporte que no
utiliza energa se define como transporte
pasivo mientras que el que la consume
se denomina transporte activo. En el
caso del transporte pasivo, el soluto se
mueve siempre a favor de gradiente,
que se convierte en la fuerza de
conduccin para el movimiento.
Adems del criterio anterior (consumo
de energa) existe la posibilidad de
dividir los sistemas de transporte en

otros dos grupos, segn que necesiten la

presencia de una protena transportadora
o no. As tenemos, por un lado, el
transporte libre en el que el soluto
atraviesa la membrana por diversos
lugares pero sin el concurso de
transportador alguno; y el transporte
mediado, en el que se requiere la
presencia de una protena de membrana
especfica para el soluto a transportar.
Regulacin del volumen celular
El mantenimiento del volumen celular
es un parmetro imprescindible para la
supervivencia de la clula. Este
mantenimiento se logra mediante una
adecuada cantidad de agua en el interior
celular. En el caso de la solucin
intracelular, la presin osmtica se
denomina presin osmtica coloidal,
debido al hecho de que en el interior
celular
existen
solutos
grandes
(protenas, fosfatos orgnicos) que no
pueden pasar a travs de la membrana, y
como tienen carga negativa atraen a
cationes de pequeo tamao y repelen a
aniones tambin de pequeo tamao.
Esto da lugar a una distribucin
desigual de pequeos iones que se
conoce con el nombre de equilibrio
Gibbs-Donnan y produce un pequeo
exceso de iones en el interior celular
denominado exceso Donnan. Por lo
tanto se observa una osmolaridad
ligeramente superior en el interior
celular. Esta situacin acarreara el flujo
de agua hacia el interior y el incremento
consiguiente de volumen; sin embargo
esto no ocurre debido a la existencia de
la
existencia
de
mecanismos
compensadores. Los factores que
determinan el volumen celular son: 1)
El nmero de partculas osmticamente
activas del interior celular. 2) La
osmolaridad del lquido extracelular. 3)
La permeabilidad de la membrana
celular. El comportamiento de una
clula en una solucin artificial depende
no slo de las osmolaridades sino
tambin de la permeabilidad de la

membrana celular a los solutos. As se

define un nuevo concepto que recibe el
nombre de tonicidad, el cual indica la
afectacin del volumen celular en una
solucin concreta. Se describe de forma
prctica como sigue:
1) Si al introducir una clula en una
solucin el volumen celular no vara, se
dice que dicha solucin es isotnica.
2) Si al introducir una clula en una
solucin el volumen celular aumenta, se
dice que dicha solucin es hipotnica.
3) Si al introducir una clula en una
solucin el volumen celular disminuye,
se dice que dicha solucin es
hipertnica.
TINCIN
Es importante destacar que el acto y la
consecuencia de teir tambin se
conocen como tintura. De este modo,
mientras que en el lenguaje coloquial
suele emplearse la idea de tintura, en el
campo de la qumica , la biologa y
la medicina
se prefiere el
trmino
tincin o coloracion.
En este sentido, se llama tincin a
una tcnica que
se
emplea
en
los laboratorios con
el
objetivo
de ayudar a la visin de aquello que se
observa a travs de un microscopio. La
tincin, de este modo, consiste en
aplicar una tintura a un tejido para que
resulte ms simple detectarlo y
analizarlo; Con la tincin, es posible
mejorar la definicin de grupos
de clulas o de fragmentos de tejido. de
ciertas sustancias o elementos en un
compuesto.
Cuando se tie un tejido vivo,
se habla de tincin in vivo. Esto permite
observar reacciones qumicas o
caractersticas morfolgicas. La tincin,
por otra parte, puede ser indirecta o
directa de acuerdo a la interaccin del
colorante con el tejido.

PROCEDIMIENTO
VEGETAL

MUESTRA

El procedimiento realizado fue el

siguiente:

rea de trabajo en condiciones

apropiadas para la realizacin de
la prctica.
Tomamos el microscopio optico
compuesto identificamos cada
una de sus partes, verificando
que se encontraran en perfecto
estado para su manipulacin y
as
logar
los
objetivos
propuestos para el desarrollo de
la practica
Tomamos una muestra de
cebolla( Allium cepa)
la
colocamos al lado izquierdo de
el portaobjetos cubrindola con
laminilla cubreobjetos.
Tomamos una muestra muy
delgada
de
papa
o patata (Solanum
tuberosum), enjuagamos para
sacar exceso de almidn la
colocamos al lado derecho de
el portaobjetos cubrindola con
laminilla cubreobjetos.
Tomamos el portaobjetos con las
dos
respectivas
muestras
aadiendo una gota de lugol al
borde
de
la
laminilla
cubreobjetos con la muestra de
almidn
de
papa,
luego
aadimos una gota de azul de
metileno a la muestra de cebolla.
Colocamos la muestra sobre la
platina sujetndola de forma
correcta
con
las
pinzas
metlicas.
Procedemos a observar las dos
muestras en el microscopio.

Regular
diafragma
para
controlar cantidad de luz que
saldr hacia el condensador.
Por medio del condensador
debemos condensar y enfocar
los
rayos
luminosos
provenientes de la fuente
luminosa que est ubicada en la
base del microscopio a fin de
iluminar el campo visual del
ocular.
Acercamos al mximo la lente
del objetivo (40x), empleando el
tornillo macro mtrico (mirando
directamente y no a travs de la
ocular, se corre el riesgo de
incrustar el objetivo en la
preparacin y daar ambos).
Observando a travs de los
oculares separamos lentamente
el objetivo de la preparacin con
el macro mtrico, y cuando se
observ algo ntido la muestra,
giramos el tornillo micromtrico
hasta obtener un enfoque ms
fino.
Bajamos la platina y retiramos la
muestra.
Procedemos a preparar nuestra
siguiente muestra vegetal.
Tomamos una muestra de un
tomate capa interna y una capa
externa la colocamos sobre el
portaobjetos, cubrindola con
laminilla cubreobjetos.
Colocamos la muestra sobre la
platina sujetndola de forma
correcta
con
las
pinzas
metlicas.
Ubicamos la muestra en
nuestro objetivo de 40 (x)
siguiendo
el
mismo
procedimiento para muestras
anteriores.

PROCEDIMIENTO CELULA
ANI MAL

Desinfeccin de la zona de
puncin del dedo

Por puncin dactilar tomamos

una
muestra
de
sangre
colocamos una gota al lado
derecho
de
la
laminilla
portaobjetos y otra al lado
izquierdo,
cubriendo
con
laminillas cubreobjetos cada
muestra.
A la muestra del lado derecho
agregamos una gota de agua y a
la del lado izquierdo aadimos
solucin salina (NaCl).
Colocamos la muestra sobre la
platina sujetndola de forma
correcta
con
las
pinzas
metlicas.
Regular
diafragma
para
controlar cantidad de luz que
saldr hacia el condensador.
Por medio del condensador
debemos condensar y enfocar
los
rayos
luminosos
provenientes de la fuente
luminosa que est ubicada en la
base del microscopio a fin de
iluminar el campo visual del
ocular.
Acercamos al mximo la lente
del objetivo (10x), empleando el
tornillo macro mtrico (mirando
directamente y no a travs de la
ocular, se corre el riesgo de
incrustar el objetivo en la
preparacin y daar ambos).
Observando a travs de los
oculares separamos lentamente
el objetivo de la preparacin con
el
macro
mtrico,
hasta
encontrar una muestra con

estructuras visibles esto lo

hacemos con muestra de sangre
con solucin salina.

ANLISIS Y RESULTADOS
CEBOLLA( Allium cepa)

40x (400 veces aumentada la

Desplazamos la platina para
muestra)
observar muestra de sangre con
Se observaron clulas de forma
agua y seguimos procedimiento
hexagonal
anterior.
Se observ la estructura de una clula
Observamos muestras en (40x)
vegetal. Las clulas de la epidermis
siguiendo mismo procedimiento
de cebolla son de forma alargada y
con muestras anteriores.
bastante grande. La membrana celular
Tomamos
otra
laminilla
se destaca muy clara, teida por el
portaobjetos en esta colocamos
colorante. Los ncleos son visibles,
una muestra
de sangre,
en el interior de los mismos se puede
extendindola
sobre
el
llegar a percibir granulaciones, son
portaobjetos. Dejamos secar.
los nuclolos, el citoplasma tiene
aspecto bastante claro, en l se
Se cubre la muestra con
distinguen algunas vacuolas.
colorante Giemsa.se deja actuar
por 15 min.
Se observa la muestra al
microscopio
utilizando
el
objetivo de 100x
para
Clulas
identificar
glbulos
rojos, Ncleo
epidrmicas
Vacuola
glbulos blancos y plaquetas.
Terminada la observacin, se
baja la platina, se retira la
muestra.
Nuclolos
Se apaga la luz del microscopio
y se desenchufa previamente.
Membran
a Celular
Dejar el rea de trabajo en
perfectas condiciones y entregar
el material utilizado
Citoplasma
Figura 1
MATERIALES

VEGETALES
ANIMALES
Portaobjetos
Cubreobjetos
Cuchillas
Palillos
Microscopio
Lugol
Azul de metileno
Papa
Tomate
Cebolla
Portaobjetos
Lancetas
Algodn
Bandeja de coloracin
Alcohol Antisptico
Aceite de Inmersin
Colorante de Giemsa
Sangre

Figura 2.

PAPA( Solanum tuberosum)

40x (400
muestra)

veces

aumentada

la

Al observar la muestra de la papa en

el microscopio pudimos observar que
esta contena muchos puntos cono
entre color morado y negro porque se
pintaron con la gota de lugol para ser
observables pero identificamos que
estos son los amilo plastos que son un
tipo de leocuplasto los cuales
almacenan almidn de reserva. Pero
al enfocar mejor el objetivo se
identifica con mayor claridad los
leucoplastos que contienen el
almidn del tubrculo, cuya forma es
ovoide y se agrupan formando
estructuras complejas de reserva.

Almid
n

Figura 1

leucoplastos
Figura 3
El lugol es una sustancia de yodo que se
emplea para la tincin, normalmente
reacciona con polisacridos como lo son
los almidones formando un complejo de
inclusin termolbil que se caracteriza
por ser colorido. Cuando el almidn se
pone en contacto con unas gotas de
Lugol toma un color azul-violeta
caracterstico (la amilosa se colorea de
azul oscuro a negro y la amilopec-tina
se colorea entre naranja y amarillo).
Se trata de una reaccin no qumica, en
la que se forma un compuesto de
inclusin del yodo en el interior de las
hlices de la amilosa. Esta inclusin es
reversible y est condicionada por la
temperatura. Por ello el color que tomo
el color de la muestra de almidon de
papa.
TOMATE

aminoplasto

Figura 2

10x (100 veces aumentada la

muestra)
Se observa la formacin celular
comprimida del tejido de la pulpa del
tomate, con diferenciacin de pared
celular.
40x (400 veces aumentada la
muestra)
Al observar la muestra del tomate en
el microscopio pudimos observar a
las vacuolas que se miraban como
unas bolsitas en las clulas del
tomate, en el tomate tambin Se
identifica con claridad la pared
celular, los cromoplastos, la vacuola,
el ncleo muy bien definido, y la
forma poligonal de la clula

Figura 3

Figura 1.
Figura. 1

Figura. 2
Figura 2.

SANGRE
CON
SOLUCION
SALINA
10x (100 veces aumentada la
muestra)
Observamos los eritrocitos
con
tendencia a adherirse entre s. Fig.1
40x (400 veces aumentada la
muestra)
Observamos los glbulos rojos o
eritrocitos adheridos entre s,
formando columnas en forma de pilas
de monedas tambin denominadas
rouleaux. Figura2

SANGRE CON GOTA DE AGUA

10x (100 veces aumentada la
muestra)
La membrana de las clulas tiende a
arrugarse Las clulas sanguneas no
se vieron claramente ya que el agua
se difunde a la clula, es decir, se
produce smosis de lquido hacia el
interior de la clula y al haber un
medio muy hipotnico: La clula se
ve obligada a igualar el medio
intracelular con el medio extra
celular, por esto, el agua penetra en la
clula y sta se hincha hasta que se
rompe la membrana citoplasmtica.
40x (400 veces aumentada la
muestra)
No identificacin del objetivo
Los
eritrocitos
se
encuentran
naturalmente
en
un
medio isotnico (con
la
misma

concentracin de sales minerales) que es

el
plasma
sanguneo.
Si
los
introducimos
en
un
medio hipotnico (con
una
concentracin salina inferior a la de su
citoplasma), el agua tender a entrar en
el eritrocito a travs de su membrana
plasmtica
para
igualar
ambas
concentraciones, y la clula reventar.
Si, por el contrario, los introducimos en
un
medio hipertnico (con
una
concentracin de sales superior a la del
eritrocito), el agua saldr de la clula
hasta
que
se
igualen
las
concentraciones, y la clula presentar
un aspecto arrugado al microscopio.

SANGRE CON GIEMSA

100x (1000 veces aumentada la
muestra)
Identificamos los glbulos blancos o
leucocitos
de tipo granulocitos
(poseen grnulos en su citoplasma)
entre los cuales identificamos
granulocito basfilos, granulocito
eosinofilo granulocito neutrfilo.

neutrfilo

CONCLUSIONES

Basfilo

eusonofilo

Se lograron los objetivos de la

prctica desarrollando diversas
tcnicas de montaje y coloracin
de
algunos
materiales
biolgicos en este caso (cebolla,
tomate, papa y sangre), que nos
permitieron observar, identificar
y hacer una diferenciacin de
las estructuras celulares.
El proceso coloracin celular o
tincin es importante debido a
que nos proporciona
un
contraste entre el objetivo a
analizar (cebolla, papa tomate,
sangre) y el medio que lo rodea,
permitiendo diferenciar cada
una de sus estructuras internas,
tales como paredes celulares,
vacuolas o cuerpos celulares.
La coloracin celular nos
permite el empleo de mayores
amplificaciones en cada uno de
los objetivos (10x, 40x y 100x)
en
el
microscopio
optico.Ademas de ello nos

permitio
identificar
las
diferencias de las estructuras de
una clula vegetal y una clula
animal.
Las clulas animales no se
pueden observar en un medio
acuoso ya que se genera un
proceso hipotnico las clulas se
rompen y no se se puede
identificar estructuras celulares.

BIBLIOGRAFIA.

-Cesar
Augusto
(2003).Concienci7
.Bogot: Editorial Norma.

Bejarano.

-http://ocw.unican.es/ciencias-de-lasalud/fisiologia-general/materiales-declase-1/bloque-ii/Tema%204-Bloque
%20II-Transporte%20a%20traves
%20de%20Membrana.pdf
Dpto. de Biologa
Prof. Silvia Huarapil G.