Definicin de cromatografa

En 1906 Tswett defini la cromatografa como:

Mtodo en el cual los componentes de una mezcla son separados en una columna
adsorbente dentro de un sistema fluyente.
Recientemente la I.U.P.A.C define la cromatografa de forma ms amplia como:
Mtodo usado principalmente para la separacin de los componentes de una muestra, en el
cual los componentes son distribuidos entre dos fases, una de las cuales es estacionaria,
mientras que la otra es mvil. La fase estacionaria puede ser un slido o un lquido
soportado en un slido o en un gel (matriz). La fase estacionaria puede ser empaquetada en
una columna, extendida en una capa, distribuida como una pelcula, etc...
Se utiliza el trmino general de lecho para definir las distintas formas en que puede
encontrarse la fase estacionaria. Las separaciones cromatogrficas se consiguen mediante la
distribucin de los componentes de una mezcla entre la fase fija y la fase mvil. La
separacin entre dos sustancias empieza cuando una es retenida ms fuertemente por la
fase estacionaria que la otra, que tiende a desplazarse ms rpidamente en la fase mvil. las
retenciones mencionadas pueden tener su origen en dos fenmenos de interaccin que se
dan entre las dos fases y que pueden ser :
1.-La adsorcin, que es la retencin de una especie qumica por parte de los puntos activos
de la superficie de un slido quedando delimitado el fenmeno a la superficie que separa las
fases o superficie interfacial.
2.- La absorcin, que es la retencin de una especie qumica por parte de una masa, y
debido a la tendencia que esta tiene a formar mezcla con la primera, absorcin pura, o a
reaccionar qumicamente con la misma, absorcin con reaccin qumica, considerando ambas
como un fenmeno msico y no superficial.

Clasificacin de los mtodos cromatogrficos

Clasificacin segn el procedimiento de separacin
El principio bsico de la separacin de las sustancias que componen una mezcla se
fundamenta en una serie de sucesivos equilibrios entre la fase estacionaria y la fase mvil. El
equilibrio depender de la particin o diferente adsorcin que tengan la fase estacionaria y
los componentes de la mezcla.

La diferencia depender de las propiedades fsicas y qumicas de los componentes. El mayor

o menor avance en el sistema cromatogrfico depender de la afinidad del componente y la
fase estacionaria. El componente con menor afinidad por la fase estacionaria en presencia de
una fase mvil llamada eluyente ser eluido en primer lugar, y por tanto se desplazar con
mayor velocidad por el sistema cromatogrfico.

Tabla de clasificacin de mtodos cromatogrficos

F. estacionaria
Slido (adsorcin)

F. mvil

Soporte

Cromatografa

Siglas

Gas

columna

slido-gas

G.S.C / G.C

lquido

columna

lquida

C.L / H.P.L.C

capa fina

en papel y/o capa fina

T.L.C

lquido

gas

columna

lquido-lquido

C.G.L

(particin)

liquido

columna

gas-lquido

C.L.L / H.P.L.C

resina

lquido

columna

intercambio inico

lquido

columna

filtracin de gel

(intercambio inico)
gel
(filtracin en )

*H.P.L.C : cromatografa lquida de alta presin.

Clasificacin segn el proceso de desarrollo

Segn el procedimiento en que se desarrolla se utiliza la siguiente clasificacin, que fue la
usada por Tiselius en 1940:

Desarrollo por elucin.

Desarrollo por desplazamiento.

Anlisis frontal.

Desarrollo por elucin

Representa el concepto bsico de la separacin cromatogrfica y es la tcnica ms usada en
los distintos mtodos cromatogrficos (gaseosa, lquido-gas, lquido-lquido, slido-lquido).
Para describir esta tcnica considrese una mezcla de slo dos componentes. Dicha mezcla
se introduce en el extremo superior de una columna adsorbente y sus componentes se
separan en zonas, al pasar uno o ms eluyentes a travs de la columna, debido a las
distintas afinidades entre los componentes y ambas fases.
La fase mvil es adsorbida dbilmente por la fase slida estacionaria. Este ideal terico de
desarrollo por elucin no siempre se consigue en la prctica. Es un mtodo analtico esencial.

Desarrollo por desplazamiento

Consiste en desarrollar con un disolvente que sea adsorbido por la fase estacionaria con
mayor fuerza con que adsorbe a los componentes de la mezcla, al contrario que el desarrollo
por elucin. A medida que el disolvente pasa a lo largo de la columna, desplaza a la mezcla,
que al mismo tiempo se separa parcialmente.
Parte del material menos fuertemente adsorbido se recupera de forma pura, seguido por una
mezcla (interfase) y seguido posteriormente del otro componente en forma pura. Es un
mtodo preparativo til.

Anlisis frontal
Consiste en la aplicacin continua de una mezcla en el origen. En principio el componente
menos fuertemente adsorbido fluye a lo largo de la columna, mientras que el ms
fuertemente adsorbido se acumula cerca del origen. Sin embargo existe un lmite en la
capacidad del adsorbente y, cuando este lmite se alcanza, tambin el componente ms
fuertemente adsorbido empieza a desplazarse a lo largo de la columna. Por esto, las
primeras fracciones contendrn el material menos fuertemente adsorbido; ms tarde
aparecer una mezcla de ambos componentes. Es una tcnica preparativa ms que analtica.

Simulador
HPLC

Aplicacin que pretende simular el funcionamiento de un cromatgrafo de lquidos de alta resoluc

encuentra en una versin inicial, pero pretendo ir desarrollndolo en lo sucesivo adoptando nueva
funcionalidades. Las sugerencias de aquellos que os decidis por descargarlo sern decisivas en
Descargar:.......................................... SimuladorHPLC.zip (39.8 Kb)
Obtener informacin tcnica sobre el simulador:............................aqu