carlopez-humax-2012

Humax Mayo 2012

Carlos Lpez Qumico MSc.

Modos de Separacin en LC

Fase Reversa (RP)

HPLC- 2012

carlopez-humax-2012

Fase Normal (NP)

Fase Reversa Par Inico (RP-IP)

Hydrophilic Interaction (HILIC)
Intercambio Inico (Aninico y Catinico ) y Exclusion
Exclusin por Tamao (GPC / GFC)
Separaciones Quirales

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Que significa HPLC?

High Pressure Liquid Chromatography
High Performance Liquid Chromatography
High Price Liquid Chromatography
Hocus Pocus Liquid Chromatography
High Patience Liquid Chromatography..!!!!
Ultra High Performance Liquid Chromatography
Ultra-Performance Liquid Chromatography

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Aplicaciones de la HPLC?

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Ecuacin General de Resolucin

3. Eficiencia
2. Selectividad

1. Retencin

Tipos de
Interaccin

Modelo

a) Carga - Carga
Fuerza de mayor alcance: no direccional

b) Carga - dipole

Depende de la orientacin del

dipolo

Ejemplo

c) Dipolo-dipolo
-

Depende de la orientacin mutua de

los Dipolos

d) Carga- Dipolo inducido

Depende de la polarizabilidad de la
molcula en la cual el dipolo e
sinducido

e) Dipolo- dipolo inducido

Depende de la polarizabilidad de la
molcula en la cual se induce el
dipolo

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Interacciones entre solutos y fases estacionarias

g) Repulsin de Van
der Waals
Ocurre cuando se
solapan los orbitales con
electrones mas externos
h) Puente de
Hidrgeno
Atraccin por carga +
enlace covalente parcial

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f) Dispersin
Depende de la
polarizacin de la
molcula en la cual se
induce el dipolo

H....O

Hydrogen bond
length

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Fortaleza, direccin y distancias de trabajo de las

Interacciones moleculares

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El modo de HPLC Depender de:

HILIC

El peso Molecular del

soluto
La solubilidad en Agua
del soluto
La polaridad del soluto
El caracter Inico/noInico del soluto

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Guias Utiles de los Proveedores de Columnas

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carlopez-humax-2012

Phenomenex

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Fase Reversa (RP)

HPLC- 2012

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Fase Normal (NP)

Fase Reversa Par Inico (RP-IP)

Hydrophilic Interaction (HILIC)
Intercambio Inico (Aninico y Catinico ) y Exclusion
Exclusin por Tamao (GPC / GFC)
Separaciones Quirales

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Cromatografa por Adsorcin

Caractersticas
Una fase estacionaria liquida es retenida sobre la
superficie del empaque.
La Separacin est basada en las diferencias de
polaridad de los solutos.
Una fase sera polar y la otra no-polar.

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Silica Fase Estacionaria

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Silica Fase Estacionaria

Las Partculas son permeables al solvente

Generalmente SOLO usar a 2 < pH < 8.0
Hoy se disponen de columnas para todo el rango de pH

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Cromatografa de Adsorcin (LSC)

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Principio de Separacin en HPLC

Regla General
La polaridad de los analitos polaridad de la
fase estacionaria polaridad de la fase mvil
Para alcanzar una buena separacin, los
analitos deberan interactuar con la fase
estacionaria pero no de una manera muy fuerte
para que el tiempo de retencin no sea muy largo

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Cromatografa de Fase Normal

Caractersticas de la Fase Normal
Fases estacionarias altamente polares
Silica - Oxidos de Aluminio (Acido, Bsico y Neutro)
Florisil Silicas Modificadas
Solventes relativamente no polares
Pentano - Hexane MTBE - Diclorometano
Los solutos Menos polares eluyen primero
El aumento en la polaridad de la fase mvil disminuye los
tiempos de elucin (esto es, provocar que los compuestos
polares tiendan a permanecer por ms tiempo en la fase
mvil)

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carlopez-humax-2012

carlopez-humax-2012

Fase Normal

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Referenciadas en la USP 35

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L3 - Silica NP

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L29

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Desarrollo de Mtodos en NP

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Solventes para Fase Normal

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Fortaleza de Elucin

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Los poblemas del uso de NP

Varios problemas inter relacionados puden ocurrir cuando se realizan separaciones

por NP sobre columnas con empaque tipo SILICA:
Una muy pobre reproducibilidad de la separacin (incluyendo una sensibilidad extrema
al contenido de agua de la fase mvil)
Se pude presentar el demezclado de solventes (solvent demixing)
Un muy lento equilibrio de columna cuando se esta cambiando la fase mvil
se manifiesta coleo de picos
Los primeros tres problemas provienen de las muy fuertes interacciones de las
molculas pequeas y de molculas polares con los grupos silanoles de la superficie,
esto a su vez puede tener un efecto dramtico sobre la retencin de la muestra

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Ejemplo Tpico en NP

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La Silica NO se recomienda en HPLC Analtica

p- ethyl phenol (A), Phenol, (B), p -chlorophenol, (C), p methoxy phenol,

(D), methyl p hydroxybenzoate, (E), p nitro phenol, (F), p hydroxybenzonitrile,
(G), p hydroxy benzaldehyde, (H), p hydroxyacetophenone, (I), and Hydroquinone (J).
Column: Lichrosorb SI - 60, Flow rate 1.0 mL /min

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Fases Estacionarias Enlazadas Fase Normal y Fase Reversa

CH3

CH3
Si

OH + Cl

Si

Si

Si

Tolueno, 110C

Superficie con
Grupos Silanol

CH3
R = CN, Diol, NH2, Ph, Cx,

Enlace covalente del grupo

sobre la fase estacionaria para
dar una fase enlazada ms
estable desde el punto de vista
trmico y ms resistencia a la
hidrlisis

CH3

Superficie con
Grupo funcional
enlazado

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Fases enlazadas para Fase Normal

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Ejemplo sobre Silica

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Ejemplos sobre Silica

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Comparacin Silica vs. Diol

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Selectividad de columnas en NP

Comparison of retention and selectivity among

different NPC columns.
Sample: 1, chrysene; 2, perylene; 3, 1nitronaphthalene; 4, 1-cyanonaphthalene; 5,
2-acetonaphthalene; 6, naphthalene-2,7dimethylcarboxylate; 7, benzyl alcohol. Conditions:
150 4.6-mm columns (column type indicated in
figure); hexane mobile phase; 35C;
2.0 mL/min. Chromatograms (a c) reconstructed
from data of [26]; (d) estimated from data
of [1] (note extreme change in retention range for
silica column d vs. polar-bonded columns
ac).

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Fase Reversa (RP)

HPLC- 2012

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Fase Normal (NP)

Fase Reversa Par Inico (RP-IP)

Hydrophilic Interaction (HILIC)
Intercambio Inico (Aninico y Catinico ) y Exclusion
Exclusin por Tamao (GPC / GFC)
Separaciones Quirales

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Fases Estacionarias Enlazadas Fase Normal y Fase Reversa

CH3

CH3
Si

OH + Cl

Si

Si

Si

Tolueno, 110C

Superficie con
Grupos Silanol

CH3
R = CN, Diol, NH2, Ph, Cx,

Enlace covalente del grupo

sobre la fase estacionaria para
dar una fase enlazada ms
estable desde el punto de vista
trmico y ms resistencia a la
hidrlisis

CH3

Superficie con
Grupo funcional
enlazado

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Cromatografa de Fase Reversa

Caractersticas de la Fase Reversa
Fases estacionarias poco polares
Silica Modificada- C1, C2, C3, C4, C6, C8,C18, Fenilo,
Ciclohexil, C30, etc
Solventes polares
Agua - ACN MeOH - THF
Los solutos ms polares eluyen primero
La disminucin de la polaridad de la fase mvil disminuye
los tiempos de elucin (esto es, provocar que los
compuestos menos polares eluyan ms rpido esto es se
aumenta la fortaleza del solvente)

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Fenil - RP

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L15 Hexil RP

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CN RP

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Diol- RP

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L10 CN RP (Agua- ACN - THF)

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Fase Reversa

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Orden de Elucin

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Qumica de Modificacin de la Silica

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Ejemplos de fases enlazadas para RP

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Ejemplos de fases enlazadas para RP

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Silica based C-8 modified stationary phase

with trimethylsilane endcapping

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C4 vs C8 vs C18 RP

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Cambios de Selectividad por Cambio de Columna

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Columna Phenyl RP

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Phenyl vs C18 RP

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La Estructura de la fase enlazada influencia la

selectividad

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Diferente Quimica Superficial / Diferente Selectividad

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C30

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L62

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Efecto del Solvente en RP

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Nomograma de Fortaleza de Solvente

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Efecto del contenido de Agua

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Efecto del % de modificador sobre la retencin

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Tio de modificador & selectividad

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Selectvidad por Modificador Orgnico

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Planos Isoeluotrpicos

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Efecto de la selectividad del solvente

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Cambio de selectividad: MeOH-ACN y THF

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Selectividad por cambio de columna

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Sustancias Ionizables

MeOH

Phenyl

Alto
C18

C4

pH

C8

Bajo

Solventes

Columnas
CN

ACN

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La Ionizacin de los Analitos

Las especies neutras son mas hidrofbicas, menos solvatadas, y mejor retenidas
bajo las condiciones de la HPLC - RP.
Componentes Acidos
AH

A- + H+

Componentes Basicos
B + H+

BH+

La constantes de equilibrio para los acidos se escriben de la siguiente forma:

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La Ionizacin de los Analitos

[C6H5COO-][H+]
Ka = [C H COOH]
6 5
Ka=6.4 10-5 ,

pKa=4.19

El aumento de la concentracin de protones en la fase mvil de HPLC desplaza

el equilibrio hacia la izquierda

pKb = 10.1
pKa= 4.6

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Dependencia de la ionizacin del analito con el pH de la fase mvil

100
90
80
70 [C6H5COO-]
60
50
40
pKa=4.2
30
20
10
0
0

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

pH

10

12

14

[C6H5NH3+]

pKb=9.3

pH
0

Acido Benzoico

10

Anilina

http://www.chemaxon.com/marvin/sketch/index.php
http://www.chemicalize.org/

12

14

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Efecto del pH para un Acido

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Efecto del pH para una Base

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Sustancias Ionizables

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Fase Reversa (RP)

HPLC- 2012

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Fase Normal (NP)

Fase Reversa Par Inico (RP-IP)

Hydrophilic Interaction (HILIC)
Intercambio Inico (Aninico y Catinico ) y Exclusion
Exclusin por Tamao (GPC / GFC)
Separaciones Quirales

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Por qu par Inico?

Cul ser el orden de Elucin en:

a. Fase Normal?
b. Fase Reversa?

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Fase Reversa Par Inico

En el pasado, la separacin cromatogrfica de analitos cargados se

alcanzaba por supresin Inica (con un cuidadoso ajuste del pH
para que el analito no se ionice)
La Cromatografa de par Inico se genera por la adicin de
compuestos inicos a la fase mvil que promuevan la formacin de un
par inico con los analitos cargados. Esos reactivos son compuestos
con cadenas alqudicas (C4 C8) con una terminacin ionizable (bien
sea cida o bsica). Su efecto es un aumento de la retencin de los
analitos

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Fase Reversa Par Inico

-Aumentando la retencin de los compuestos Inizables (cidos y/o bsicos)
con la adicin de un par Inico

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L10 CN RP- Ion Pair

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L21 RP Ion Pair

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Reactivos PIC

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Variable Operativas en RP IP

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Efecto de la concentracin del Par Inico sobre la retencin

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Aplicacin de la RP IP
(Reversed Phase Ion Pair)

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L7 (C8)

Fase Reversa (RP)

HPLC- 2012

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Fase Normal (NP)

Fase Reversa Par Inico (RP-IP)

Hydrophilic Interaction (HILIC)
Intercambio Inico (Aninico y Catinico ) y Exclusion
Exclusin por Tamao (GPC / GFC)
Separaciones Quirales

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HILIC

Hydrophilic Interaction Chromatography

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HILIC Hydrophilic Interaction Chromatography

HILIC es una variante de la cromatografa liquida en fase Normal donde una fase
estacionaria polar es usada con una fase mvil la cual contiene una alta
concentracin de un solvente orgnico (medianamente polar) y una baja
concentracin de un solvente acuoso (polar). En HILIC la porcin orgnica de la
fase mvil es el solvente dbil, la porcin acuosa es el solvente fuerte y la elucin
de los compuestos es en el orden de mayor hidrofibicidad. HILIC es tambin
referida como fase Normal Acuosa o fase reversa reversa ya que el orden
de elucin es similar a la de la fase normal y los solventes usados son similares
a los de la cromatografa en fase reversa.
El mecanismo de retencin de la HILIC es la particin del analito polar entre la
fase estacionaria rica en agua y una fase mvil pobre en agua. La fases
estacionarias polares tipo silica tambin pueden dar lugar a un intercambio
catinico dbil con los grupos silanoles cargados negativamente.
Esta combinacin de particin e intercambio catinico resulta en la retencin
para compuestos Difciles de analizar por RP

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Zorbax Eclipse XDB-C18 Column (RPLC Mode)

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Zorbax RX-SIL Column (HILIC Mode)

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Mecanismo de Separacin HILIC

Como ya se mencion HILIC describe un nuevo modo
de separacin en Fase Normal, que emplea una fase
Estacionaria polar pero que usa fases mviles
agua /solvente Orgnico, opuesto a lo que se usa en
fase Normal (nose permite el uso de Agua y solo se
usan solventes Orgnicos.
En contraste a la Cromatografa de fase Reversa, el
Componente acuoso de la fase mvil (agua o buffer)
Sirve como el solvente mas fuete y el solvente orgnico
(por ejemplo ACN o MeOH) es el solvente dbil. Los
Analitos eluyen en orden creciente de hidrofobicidad
(mas polares primero y despus los menos polares)
Debido a la naturaleza polar de la fase estacionaria, las
Molculas de agua se concentran en la superficie, creando
de esta manera una capa enriquecida de agua .
Se ha propuesto que en el modo HILIC la retencin ocurre
En la medida en que se da una particin entre la fase mvil
y la fase enriquecida en agua, la cual hidrata la fase
Estacionaria hidroflica. Esto contrasta con la retencin en
fase Normal, en la cual la adsorcin ocurre sobre la
Superficie de la fase estacionaria polar.
Hasta hoy da no hay claridad sobre si el mecanismo es por
Particin o por adsorcin- Falta mas investigacin sobre el tema

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Orden de Elucin tpico para los compuestos de Prueba

sobre una columna HILIC

Column: Experimental Modified

Hydride, 100 ,4.6 x 150 mm; 4 um
Mobile phase:75% ACN /25% H2O
Flow Rate = 0.5 ml/ml
Temp = 25 C
Injection Volume = 5 l

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El Efecto de incrmentar el %ACN sobre la Retencin

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Columnas HILIC

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Sistemas de Eluentes en HILIC

La fortaleza de la fase mvil es uno de los
parmetros ms importantes en HILIC. A
diferencia de la fase reversa el agua en HILIC
Es el solvente con mayor fortaleza de elucin.
En una tpica fase mvil para HILIC, el ACN se usa
como el componente dbil y el agua o buffer como
el componente fuerte. Debido a la escasez de ACN,
se ha considerado que puede ser reemplazado por
alcohol. Aunque esta alternativa ha fallado debido
a la insuficiente retencin y a la calidad de la
separacin.
El pH de la fase mvil tambin juega un papel
importante en HILIC. Debido a la inestabilidad de
la silica a altos pHs, se usan pHs cidos o neutros.
La fortaleza del solvente (desde el mas dbil al mas
fuerte) para HILIC sigue el siguiente orden:
THF<Acetona<ACN< isopropanol<etanol<metanol<agua,
aunque esto no es siempre cierto, algunas
veces no es posible predecir la fortaleza del
Solvente. En el lado opuesto se ilustra esta situacin.
Solventes muy fuertes como Dimetil formamida o DMSO
No son recomendados ya que dan picos mal formados,
adems deberan ser diluidos en ACN para mejorar esta
situacin

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Efecto del solvente Orgnico en HILIC

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Fase Reversa (RP)

HPLC- 2012

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Fase Normal (NP)

Fase Reversa Par Inico (RP-IP)

Hydrophilic Interaction (HILIC)
Intercambio Inico (Aninico y Catinico ) y Exclusion
Exclusin por Tamao (GPC / GFC)
Separaciones Quirales

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Cromatografa de Intercambio - IEC

Ion Exchange Chromatography

Principio Bsico de la Separacin:

Se da un equilibrio entre los iones en solucin y los iones
(de la misma carga) que son mantenidos por una
superficie de grupos funcionales enlazados

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Animacin IEC

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Ventajas de la Cromatografa Inica

Velocidad
- Perfil completo de aniones y cationes en aproximadamente 10 minutos

Sensitividad
- Anlysis en el rango ms bajo de ppb sin preconcentracin
- Anlisis en el rango ms bajo de ppt despus de una pre-concentracin
- Factor limitante: contaminaciones por iones tales como cloruro y sodio

Selectividad
- Gran variedad de fases estacionarias
- Deteccin especfica (supresin, UV, fluorescencia, MS, ICP)

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Ventajas de la Cromatografa de Iones

Simultaneidad
- Anlisis Simultneo de muchos componentes en la muestra
(Al contrario: AAS, Fotometra, Titulacin, etc.)
- Factor Limitante: extremas diferencias de concentracin entre la muestra y los
componentes (Ejemplo: Reactivos Quimicos grado Semiconductores)

Costos
- Perfil de aniones y cationes por IC aprox US$ 100

Robustez
- Separaciones compatibles con alto pH y solventes agresivos permiten una gran
variedad de aplicaciones
- Anlisis de matrices complejas tales como aguas residuales, alimentos y fludos
corporales, etc.

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Esquema de un HPLC para IC

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Tipos de Cromatografa Inica

Ion Exchange Chromatography (IEC)

Ion Exclusion Chromatography (IEC)
Ion Pair Chromatography (IPC)

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Aniones que pueden ser analizados por IEC

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Ejemplos sin Supresin

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Ejemplos con Supresin

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L17

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L61

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L12 IEC

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Aplicaciones de la IEC

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carlopez-humax-2012

carlopez-humax-2012

Criterios de Seleccin para los modos de seperacin y

deteccin

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carlopez-humax-2012

Intercambio Inico con Reactor Post-Column

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Deteccin Directa vs Deteccin Indirecta

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Deteccin Indirecta Uv-Vis

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El papel de la supresin Qumica

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Generadores de gradiente en IC

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Dionex - ICS-2100 Reagent-Free Ion Chromatography System Demo Video

http://www.youtube.com/watch?v=rQXa6qqxN5k
Dionex - ICS-5000 Capillary Ion Chromatography System Demo Video
http://www.youtube.com/watch?v=5zBu5okgNXU

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Parmetros que determinan la Retencin

Propiedades de los Iones

Valencia
Tamao
Polarisabilidad
(Fortaleza Acida)

Cl-

Cl-

F-

SO42-

NO2-

F-

NO2-

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Parmetros que determinan la Retencin (I)

SO42Br-

BrNO3-

NO3PO43-

S
PO430
0

I-

Minutes

10

SCNS2O32-

0
0

10

20

30

Minutes

Aniones Monovalentes Aniones Multivalentes

Cl-

Cl-

F-

SO42-

NO2-

F-

NO2-

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Parmetros que determinan la Retencin (II)

Br-

BrNO3-

SO42-

NO3PO43-

PO43Una excepcin a la regla?

0
0

I-

10

Minutes

10

SCNS2O32-

20

30

Minutes

ClF-

NO2-

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Parmetros que determinan la Retencin (III)

SO422-

BrNO3-

PO43-

I-

S
O

O
S

10

SCNS2O32-

20

2-

30

Minutes

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Cation Exchange
Anion Enchange

Ejemplo de Cromatografa de Intercambio

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Columnas Capilares en IEC

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Exclusin de Inica
Schematic of Ion Exclusion Mechanism

- +

SO3 H

Mobile Phase
H20

Stationary Phase
SO3-H+

H+Cl (Eluent)

- +

SO3 H
H20

SO3 H+
H2 0
SO3 H+

H20
H20
H20

CH3COOH

Donnan-Membrane
9963

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Ion Exclusion - Process

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carlopez-humax-2012

Textos

carlopez-humax-2012

carlopez-humax-2012

carlopez-humax-2012

carlopez-humax-2012

Fase Reversa (RP)

HPLC- 2012

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Fase Normal (NP)

Fase Reversa Par Inico (RP-IP)

Hydrophilic Interaction (HILIC)
Intercambio Inico (Aninico y Catinico ) y Exclusion
Exclusin por Tamao (GPC / GFC)
Separaciones Quirales

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Separaciones Quirales

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Anlisis Estereoselectivo
1. Si se necesita conocer la composicin enantiomrica de una sustancia la
cual ha sido obtenida desde una sntesis asimtrica o por un proceso
biocataltico .
2. Para determinar una impureza enatiomrica de un compuesto que ser
usado como un sinton quiral, medicamento, agroqumico, aditivo de
alimentos, catalizador quiral on para una formulacin.
3. Para la deteccin de la racemizacin en el proceso de produccin de un
unico enantimero quiral
4. Para el anlisis de la integridad estereoqumica (estabilidad
configuracional ) o en la interconversin de estereoismeros .
5. Para la determinacin indirecta de la configuracin absoluta.
6. Para estudios farmacocinticos estereoselectivo, y
7. Para estudios estereoselectivos de enlaces drogas - protenas.

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(R)- and (S)-lactic acid are mirror images

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Separaciones Quirales

Thalidomide
1961

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Fases estacionarias Quirales

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Fases Estacionarias Quirales en HPLC

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Ciclodextrinas

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Determinacin de la composicin Enantiomrica

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Las Separaciones Quirales en la Web

http://www.chiral-application-guide.com/

http://chirbase.u-3mrs.fr/

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http://www.sigmaaldrich.com/analytical-chromatography/analytical-products.html?TablePage=17362182

http://www.chiraltech.com/col_overview.asp

http://www.registech.com/Markets/Chiral.html

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http://www.raell.demon.co.uk/chem/CHIbook/chiral.htm

http://quimica.udea.edu.co/~carlopez/cromatogc/chiralreview.pdf

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Fase Reversa (RP)

HPLC- 2012

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Fase Normal (NP)

Fase Reversa Par Inico (RP-IP)

Hydrophilic Interaction (HILIC)
Intercambio Inico (Aninico y Catinico ) y Exclusion
Exclusin por Tamao (GPC / GFC)
Separaciones Quirales

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La Cromatografa de Exclusin por Tamao

Size Exclusion Cromatography - SEC

Gel Permeation Chromatography, (GPC) Sol. Orgnico
Gel Filtration Chromatography (GFC) Sol. Agua
Es la tcnica de la Cromatografa Lquida ms fcil de entender.
La separacin est basada estrictamente en el tamao de las
molculas en solucin, y por lo tanto, no debera existir ningn tipo de
interaccin con el empaque de la columna, (adsorcin, particin, etc.),
como ocurre con los otros modos de separacin en la HPLC.
El modo de separacin no est basado en el peso molecular, pero s en
el tamao del material que est siendo analizado (usualmente un
polmero) en solucin.
En otras palabras, para realizar la GPC correctamente se requiere
que la muestra este disuelta en un solvente apropiado.

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Animacin SEC

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GPC - GFC

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Polmeros
Acrylonitrile/Methylmethacrylate
Cellulose Acetate
Cellulose Acetate/Butyrate
Cellulose Acetate/Propionate
Cellulose Triacetate
Diallyl Phthalate
Ethyl Cellulose
Epoxy Resins
Phenolic Resins
Polyglycolic Acid
Polyester Alkyd Resins
Polymethylmethacrylate and Acrylics and Acrylates
Polypropyleneglycol
Polystyrene
Polystyrene/Acrylonitrile
Polysulfone
Polyurethane
Algunos Polyvinylacetate
Polyvinylbutyral
Polyvinylchloride
Polyvinylchloride/Acetate
Polyvinylidenechloride
Polyvinylformal
Thermosetting Polyesters
Polybutadiene
Polychloroprene (Neoprene)

Polydimethylsiloxane
Rubber
Polyisobutylene
Polyisoprene
Natural Rubber
Chlorinated Rubber
Styrene/butadiene
Rubber (SBR)
Styrene/isoprene
Chorinated Polyethylene
Polyethylene
Polyethylene/Ethyl acrylate
Polyethylene/Vinyl acetate
Polyethylene/Methacrylic acid
Poly-4-Methyl pentene
Polypropylene
Ultra High Molecular Weight
Polyamide-imide
Polyether Sulfone
Polyvinylidene Fluoride
Polyacetals
Polyetherketone
Starch
Cellulose
Polyvinyl alcohol
Polyacrylamide
Polyacrylic acid Anionic

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L54 GFC

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L25 GFC

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Tpico Anlisis con SEC

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Las columnas de SEC

http://www.chem.agilent.com/en-US/products/columns-supplies/lc-lc-mscolumns/gpc-sec/Pages/default.aspx

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Las columnas de SEC

Rango de Peso Molecular
Da

Tamao de Poro (Angstroms)

100 1000

50A

250 2500
1,000 18,000

100A

500

5,000 40,000

103A

10,000 200,000

104A

50,000 1,000,000

105A

200,000 - >5,000,000

106A

500,000 - ~20,000,000

107A

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Seleccin de Columnas

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Diferencias Prcticas entre GPC y HPLC

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Requerimientos de los empaques de columnas para HPLC y

GPC

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Calibracin de Columnas para GPC

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Ejemplos de Analisis de Polmeros

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Polibutadieno IR - UV

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Los Detectores en SEC

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Bibliografia

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Bibliografia

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