Laboratorio de Bioqumica QIM117

1 Semestre de 2015

ANLISIS DE RESULTADOS

1.- Cromatografa de aminocidos: Adjunte su placa cromatogrfica e identifique

las diferentes manchas e indique las distancias correspondientes. (1.0 pto.)

Solucin

ala

glu

N
de
manchas
2

Distancia
recorrida por
la
muestra
(cm)
Distancia
recorrida por
el
solvente
(cm)
Rf

1,0
y

,7

1
-

,7

1,7
5,3

5,4

5,4

5,4

5,3

5,3

5,3

5,4

5,4

5,4

0,13

0,26

0,26

0,28

0,28

0,13

Glut

Ala

Ala

Ala

Ala

Glut

0,18
0,13
y
0,31
Identificacin Glut / Glut
Ala

1,

1,

1,

Tabla 1: Nmero de manchas, Rf de cada solucin e Identificacin en cromatografa de

aminocidos.

Ejemplo de clculo
Distancia recorrida por el solvente: 5,3 cm
Distancia recorrida por F: 1,4 cm
Rf = Distancia recorrida por analito = 1,4 cm = 0,26
Distancia recorrida por el frente
5,3 cm

1,

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2.- Cromatografa de -cetocidos: Adjunte su placa cromatogrfica e identifique

las diferentes manchas e indique las distancias correspondientes. (1.0 pto.)

Solucin

N
de
manchas
/
Distancia
recorrida por /
la
muestra
(cm)
Distancia
5,4
recorrida por
el
solvente
(cm)
Rf
/
Identificacin

cetoglut piruva

,4

1,8

5,4

5,4

5,4

5,4

5,4

5,4

5,4

5,4

5,4

0,44

0,33

0,33

0,33

0,33

0,44

Piruv

Alfa-C /

Alfa-C

Alfa-C

Alfa -C

Piruv

1,

1,

1,8
4

Tabla 2: Nmero de manchas, Rf e identificacin en cromatografa de alfa-cetoacidos

3.- Discuta sus resultados (obtenidos en cada uno de los tubos) en base a las
reacciones qumicas de transaminacin correspondientes. (4.0 ptos.)
En el tubo A se agreg piruvato y glutamato, por lo que debi ocurrir transaminacin,
debido a que en el extracto crudo est presente la enzima transaminasa, por tanto,
debiesen estar presentes los dos aminocidos (glutamato y alanina) y los dos ceto
cidos (alfaceto glutarato y piruvato), sin embargo, no aparecen los ceto cidos, y esto
puede deberse a errores cometidos en la prctica.
En el tubo B, se agreg glutamato, y extracto crudo, por tanto, no ocurri
transaminacin, debido a la ausencia de un acepto ceto.
En el tubo C, se agreg solo piruvato, y por tanto no ocurre transaminacin, por falta
de un aminocido.
En el tubo D, se agreg piruvato y glutamato, pero esta vez con crudo hervido, por
tanto, no ocurre transaminacin debido a la ausencia de la enzima transaminasa la
cual se denatur producto de que se hirvi el crudo. Es por esto que solo deba
marcarse el glutamato y el piruvato.
En el tubo E, se agreg alanina y alfaceto glutarato, por lo que deba ocurrir
transaminacin, sin embargo, esto no se observa en la placa, por lo que se debieron
haber cometido errores, que impidieron que ocurriera transaminacin, pues solo
parece alanina y alfaceto glutarato.

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En el tubo F, se agreg alanina solamente, por lo que no ocurre transaminacin por

falta de un aceptor ceto.
En el tubo G, se agreg alfa ceto grlutarato solamente, por lo que no ocurre
transaminacin
En el tubo H, se agreg alanina y alfaceto glutarato, pero esta vez con extracto
hervido, y no ocurre transaminacin por falta de transaminasa.
Las reacciones de transaminacin ocurridas sonesta o la inversa:

Alanina

+
-cetoglutarato

<->
Transaminacin

Bibliografa:
[1] Voet, Bioqumica, tercera edicin, pg1024
[2] Anil K. Rustgi. Los requisitos en gastroenterologa, volumen 3, pg 8