Control de calidad en el laboratorio

de Microbiologa
1. Control de calidad: Concepto y marco histrico
Introduccin despus de la Segunda Guerra Mundial, los conceptos aplicados para la
produccin mundial, debieron ser cambiados en forma drstica, ya que antes focalizaban todo
el esfuerzo en la produccin la calidad no se contemplaba y se cre el concepto de trabajar
con calidad.
Este principio condujo a que los laboratorios hospitalarios comenzaran a trabajar bajo el
concepto de calidad, realizar el procedimiento correcto, hacerlo bien y satisfacer al paciente.
Por lo tanto, un laboratorio de Microbiologa debe poner en prctica una serie de acciones que
le permitan asegurar una adecuada prctica en el aislamiento, identificacin y caracterizacin
de agentes etiolgicos y su correspondiente prueba de susceptibilidad como una gua de la
terapia. Ello implica que debe llevarse a cabo el monitoreo de medios de cultivo, reactivos,
instrumentos, procedimientos y que se debe poner especial nfasis en la capacitacin
permanente del personal.
El control de calidad son las tcnicas operativas que facilitan la realizacin de un monitoreo
diario de los procedimientos practicados en el laboratorio, lo que permite detectar errores en
la ejecucin de una tcnica e identificar problemas que se presenten con los reactivos de uso
diario o espordico. La calidad incluye calidad total, mejoramiento de la calidad y
aseguramiento de la misma.
Un programa de control de calidad debe incluir un Manual de Procedimientos, una validacin
de metodologas y equipos, el desarrollo de ciclos de educacin continua, procesos de bio
seguridad y supervisin sobre los reportes generados en el trabajo diario.
En este sentido, se debe hacer nfasis en la correcta valoracin de las pruebas de laboratorio,
los agentes causales de enfermedades, el conocimiento de la flora normal, la taxonoma
bacteriana y la interpretacin correcta de las pruebas de susceptibilidad a los anti
microbianos. Por ltimo, para que un plan de control de la calidad funcione y para que se
logre el objetivo de obtener una mejora continua en la calidad de los servicios brindados por
el laboratorio, se debe llegar a la conclusin de que esto tiene que ser un compromiso de
todos, desde las autoridades ms altas, hasta los trabajadores con menos responsabilidades.
Entonces se puede definir control de calidad como: serie de procesos sistemticos designados
a detectar problemas sutiles antes de que causen errores mayores, llevndose a cabo
revisiones peridicas de todos los procesos analticos para asegurar la calidad dentro del
laboratorio.

2. Normas ISO
La serie de Normas ISO 9000 son un conjunto de enunciados, los cuales especifican que
elementos deben integrar el Sistema de Gestin de la Calidad de una Organizacin y como
deben funcionar en conjunto estos elementos para asegurar la calidad de los bienes y
servicios que produce la Organizacin.

Las Normas ISO 9000 son generadas por la International Organization for Standardization,
cuya sigla es ISO. Esta organizacin internacional est formada por los organismos de
normalizacin de casi todos los pases del mundo. Los organismos de normalizacin de cada
pas producen normas que se obtienen por consenso en reuniones donde asisten
representantes de la industria y de organismos estatales. De la misma manera, las Normas
ISO se obtienen por consenso entre los representantes de los organismos de normalizacin
enviados por cada pas.
Las Normas ISO 9000 no definen como debe ser el Sistema de Gestin de la Calidad de una
organizacin, sino que fija requisitos mnimos que deben cumplir los sistemas de gestin de la
calidad.
Dentro de estos requisitos hay una amplia gama de posibilidades que permite a cada
organizacin definir su propio sistema de gestin de la calidad, de acuerdo con sus
caractersticas particulares.
Las Normas ISO relacionadas con la calidad son las siguientes:
ISO 9000: Sistemas de Gestin de la Calidad Fundamentos y Vocabulario. En ella se definen
trminos relacionados con la calidad y establece lineamientos generales para los Sistemas de
Gestin de la Calidad.
ISO 9001: Sistemas de Gestin de la Calidad Requisitos. Establece los requisitos mnimos
que debe cumplir un Sistema de Gestin de la Calidad. Puede utilizarse para su aplicacin
interna, para certificacin o para fines contractuales.
ISO 9004: Sistemas de Gestin de la Calidad Directrices para la Mejora del desempeo.
Proporciona orientacin para ir ms all de los requisitos de la ISO 9001, persiguiendo la
Mejora Continua del Sistema de Gestin de la Calidad.
Para asegurar a nivel europeo que todos los evaluadores de la conformidad de los diferentes
pases actan de igual manera se ha creado un conjunto de normas que fueron las antiguas
normas EN45000 aplicables a dichos evaluadores

La forma de asegurar que dichos evaluadores cumplen dichas normas es la comprobacin por
una tercera parte independiente, considerndose que dicha tercera parte acredita el
funcionamiento del evaluador.
Por el contrario y con carcter general para cualquier tipo de empresa, se ha visto la
necesidad de una organizacin interna que redundar en una mejora de la calidad. A esta
organizacin se la denomina Sistema de la Calidad, y se ha creado a nivel internacional una
norma ISO 9001: 2000 que define como construirlo.
La demostracin del cumplimiento de dicha norma, la atestiguan los certificadores de
sistemas.
Por tanto las caractersticas de la Acreditacin que la diferencia de la Certificacin
bsicamente son:
Sistema de calidad en el laboratorio: ISO 9001:2000 e ISO 17025.
Acreditacin: Reconocimiento formal por una tercera parte autorizada, de la competencia
tcnica de una entidad (organismo de certificacin, entidad de inspeccin, verificador
medioambiental, laboratorio de ensayo o calibracin) para la realizacin de una actividad
determinada perfectamente definida.
Certificacin de conformidad: Acto por el que una tercera parte certifica que ha obtenido la
adecuada confianza sobre la conformidad de un producto, proceso o servicio, debidamente
identificado, con una norma o con otro documento normativo especificado.
Para asegurar que en todos los pases se cumplen unos requisitos comunes en cuanto a la
evaluacin de sus evaluadores se han propuesto a nivel europeo, una serie de criterios
comunes:
1) Existencia de un nico organismo de Acreditacin en cada pas.
2) Formacin de organizaciones internacionales a los que pertenecen las diferentes entidades
de acreditacin mediante acuerdos multilaterales de reconocimiento.
3) Evaluacin de unas entidades de acreditacin por otras antes de la firma de dichos
acuerdos.
4) Reconocimiento de las actividades realizadas por las diferentes entidades fruto de la firma
del acuerdo multilateral.
Adems estos Club regionales ( el europeo se denomina EA)participan en organizaciones
supranacionales que tienen como objetivo establecer criterios comunes a lo largo de todo el
Mundo. En el caso de los laboratorios esta entidad se denomina ILAC y a ella pertenecen EA y
otros miembros. De esta manera se garantiza que el comercio internacional siga pautas fijas y
transparentes, evitndose barreras tcnicas fruto de diferentes tipos de evaluacin por
diferentes pases los que envan el microorganismo. Luego se emite un comunicado y as se
comprueba si realmente el Laboratorio funciona correctamente

3. Secciones del Laboratorio de Microbiologa:

3.1 rea administrativa, despachos y otras reas de apoyo
El laboratorio de microbiologa clnica debe contar con una serie de espacios destinados a
aspectos administrativos, incluyendo despachos para el personal facultativo. Esta distribucin
es necesaria por los siguientes motivos: a) las incidencias en la fase preanaltica son muy

comunes en el laboratorio de microbiologa por el amplio espectro de muestras que all se

procesan; b) suele requerirse informacin adicional durante el proceso analtico, sin la que
este proceso se interrumpe, y c) los usuarios (facultativos, pacientes, etc.) necesitan
frecuentemente de un acceso gil para consultas con el personal del laboratorio o para la
emisin de resultados, a veces preliminares. En cuanto a despachos para el personal, se
justifica por el tiempo creciente que emplea en actividades de gestin, formacin continuada
y, en algunas instituciones, tambin de investigacin.
Se recomienda que el rea administrativa est ubicada en un lugar adyacente o prximo,
aunque fuera de las reas de trabajo del laboratorio. La mayor parte de los laboratorios
planifican el rea administrativa a la entrada de las instalaciones, lo que facilita el acceso del
personal externo sin que interfiera en las actividades puramente analticas. Es recomendable
que este espacio disponga de una ventanilla o mostrador que permita atender directamente a
los usuarios sin que stos entren en el laboratorio. Tambin, por la fuerte implicacin del rea
administrativa con las actividades preanalticas, parece lgico que se ubique en un espacio
vecino al destinado a la recepcin de muestras. La proximidad tambin debe guiar la
ubicacin de los despachos. Por ltimo, en los hospitales docentes debe preverse tambin un
espacio para el personal en formacin; su localizacin puede ser ms flexible, pero nunca
demasiado alejado del ncleo del laboratorio.
Es difcil establecer unas dimensiones para el rea administrativa; en cualquier caso, se debe
contar con un mnimo espacio de 15m2, que permitira alojar a un trabajador; si fuesen
necesarios ms, se debera contar con 10m2 adicionales por persona. De esta manera, se
cumple con los requisitos reglamentarios generales de los lugares de trabajo y permite un
diseo funcional simple del espacio.
Las mismas dimensiones mnimas se aplican a los despachos de facultativos y de supervisin.
Se recomienda que sean individuales, para garantizar la privacidad, pero cuando las
limitaciones de espacio obliguen a compartirlos se puede seguir el mismo criterio que para el
rea administrativa. Para la direccin del laboratorio se debe contar con un espacio mnimo
de 30m2, de modo que permita instalar una pequea mesa de reuniones, adems del
mobiliario para uso del responsable de la direccin.
El rea administrativa debiera contar con un mostrador de atencin a los usuarios (de 90cm
de altura) y otra zona de pupitre corrido (de 75cm de altura) en el que se pueda alojar el
equipamiento de oficina e informtica propios de este lugar de trabajo. Es recomendable
disponer de un espacio libre de pared para instalar estanteras y algn armario de oficina.
Los despachos, individuales si es posible, debern contar con una mesa suficientemente
amplia para poder alojar los documentos de trabajo y los equipos de telefona y de
informtica, as como un espacio para archivo de libros y documentacin. Es recomendable
que cuenten con una ventana hacia el exterior, siempre que sea posible.
El rea administrativa y los despachos deben contar con mobiliario ergonmico, dada la
naturaleza del trabajo que all se realiza. Las sillas deben ser seguras (5 patas), slidas,
desplazables con ruedas y regulables en altura. Se recomienda mobiliario modular, fcilmente
removible, para archivos, armarios y cajoneras. Se deben prever sillas adicionales en los
despachos para el personal de visita.
El sistema de calefaccin y aire acondicionado de estas dependencias debe ser independiente
del laboratorio, por lo general ligado al del edificio que las aloja, cumpliendo con las
recomendaciones y normas legales. En todos los casos, se debe contar con una buena

iluminacin que asegure en torno a los 300 lux (OSHA), especialmente en las zonas de
trabajo.
Es imprescindible proyectar un nmero suficiente de puntos de electricidad, luz, telefona y
datos, especialmente en el rea administrativa.
Todo laboratorio debe contar con dependencias para el descanso del personal, servicios
sanitarios y vestidores. Estos locales constituirn reas de apoyo. El estar del personal
debera estar fsicamente separado del rea de trabajo del laboratorio por una puerta que
debe permanecer siempre cerrada. Esta puerta debe permitir la visibilidad de la zona a la que
se accede. ste debe ser el nico recinto donde se permita la degustacin de alimentos, por
lo que debe disponer de mesas, sillas, agua potable, lavamanos y fregadero. Debe haber
tomas de corriente que permitan la conexin de los electrodomsticos necesarios
(refrigerador, microondas, etc.) de forma segura. Los aseos deberan encontrarse fuera de las
reas de laboratorio, y es aconsejable disponer de extractores de aire y ventilacin al exterior.
El laboratorio, como centro de trabajo, debe disponer de vestuarios para uso del personal. La
superficie mnima de stos ser de 1,20m 2 por cada trabajador que simultneamente utilice el
vestuario. Debe estar provisto de asientos y armarios individuales. Los vestuarios del personal
del laboratorio no tienen por qu estar en el propio laboratorio, pueden ubicarse junto a los
dems vestuarios del Centro.

3.2 rea de extraccin y toma de muestras

La mayora de los laboratorios clnicos de microbiologa comparten recursos en la obtencin
de muestras, y slo en pocas ocasiones se requiere efectuar tomas de sangre en el
laboratorio de microbiologa, por lo que no es necesario el diseo de un rea organizada al
respecto. Por el contrario, la correcta obtencin de otras muestras distintas a la sangre es un
factor crucial en la calidad, que requiere personal entrenado y con conocimientos. Para eso, el
laboratorio de microbiologa debe disponer de espacios en donde realizarla con garantas y
con respeto a la privacidad del paciente.
La ubicacin ideal de este espacio es en la entrada del laboratorio, preferentemente con
acceso independiente para los pacientes desde el exterior. Generalmente basta con una
habitacin-consulta cerrada de 15m2 en donde se pueda alojar el mobiliario e instrumental
necesario, que debe disponer de un aseo contiguo para uso de los pacientes.
Es importante que el espacio est bien iluminado y ventilado, y que sea estticamente
agradable. Se debe contar con una camilla y una encimera con armarios, siempre de
materiales de fcil limpieza y desinfeccin, para depositar el pequeo instrumental y guardar
el material bsico. Tambin se debe disponer de una mesa con 2 asientos, por si fuera
conveniente entrevistar al paciente antes de proceder a la obtencin de la muestra. Por
ltimo, debe disponer de un pequeo lavamanos.
La instalacin elctrica es sencilla. Debe incluir varias tomas de corriente en la zona de
encimera y en las paredes, para conectar lmparas y pequeo instrumental. Tambin deben
existir tomas para conexin informtica, datos y telefona.

3.3 rea de recepcin y siembras

Todo laboratorio de microbiologa clnica debe disponer de un espacio especfico para la
recepcin de las muestras. Las reas centralizadas para la recepcin resultan ineficientes
para diferentes tipos de muestra requeridos en microbiologa.

Muchos laboratorios de microbiologa tienen centralizada la siembra y el preprocesamiento de

las muestras, algo que, conceptualmente, est ligado al proceso de recepcin. Por esto, desde
el punto de vista arquitectnico, ambas funciones estn integradas en una sola rea o en
reas contiguas.
La recepcin de muestras debe situarse a la entrada del laboratorio, de manera que se
reduzca la circulacin del personal no autorizado en el espacio de trabajo. Es recomendable
que disponga de un acceso directo (ventanilla, mostrador) con el exterior del laboratorio, de
manera que las muestras se depositen sin necesidad de acceder a las reas internas. Es
tambin recomendable que estos espacios tengan un acceso fcil con el rea administrativa,
que debiera situarse en una zona adyacente, pero separada.
Es difcil establecer dimensiones, al no existir estndares especficos. Una aproximacin de
15m2mnimos, a los que habra que aadir 10m 2 por trabajador adicional, parece una cifra
razonable de partida, pero debe tenerse en cuenta que esta rea puede estar sometida a
momentos pico durante la jornada laboral, pues las muestras suelen recibirse en una franja
de tiempo corta, especialmente si el laboratorio atiende demanda extrahospitalaria. En este
caso, se debe sobredimensionar sobre la cifra anterior, que es aproximativa. Si las reas de
recepcin, preparacin y siembra estn unificadas, el clculo debe contemplar el nmero de
personas y la carga de trabajo correspondiente. Cuando sea posible, el espacio total debe
rentabilizarse, por ejemplo repartiendo el tiempo de uso para las distintas funciones. Esto
ahorrar un espacio del que siempre se carece.
El mayor requerimiento en cuanto a instalaciones para la recepcin de muestras es la
existencia de un mostrador amplio para depositar las muestras y realizar las actividades de
manipulacin y registro. Es necesario que el material de la encimera permita su fcil limpieza
y desinfeccin, pues los vertidos son frecuentes, especialmente si la recepcin se acumula en
un tiempo corto. Adems, debe preverse espacio para una pila de agua, generalmente
aprovechando esquinas. En la parte superior de las paredes pueden alojarse estantes,
necesarios para material auxiliar. Es obligado disponer de un puesto de trabajo para el
ordenador del sistema informtico de laboratorio (SIL).
El rea de siembras puede ser una continuacin de la recepcin, con una encimera que
permita alojar pequeo instrumental (centrfuga, agitadores, etc.). Tambin debe contar con
una pileta adicional para lavado de manos y para la realizacin de tinciones. En cualquier
caso, debe preverse espacio libre para una cabina de seguridad biolgica tipo II en la que se
puedan procesar las muestras, as como una nevera para mantener las muestras en tanto se
inicia su procesamiento, y para guardar los medios que se van a utilizar en la jornada laboral.
La posibilidad de alojar incubadores depender de la organizacin de cada laboratorio.
Al igual que otras partes del laboratorio, estas reas deben estar correctamente iluminadas y
ventiladas. Debe contemplarse una instalacin elctrica acorde con el instrumental que se va
a instalar, y en la zona de recepcin de muestras es obligatorio disponer de conexiones
informticas, tomas de datos y de telefona.

3.4 reas de trabajo: Barreras secundarias y niveles de contencin

El trmino contencin se emplea para describir los mtodos que hacen seguro el manejo de
materiales infecciosos en el laboratorio. El propsito de la contencin es reducir al mnimo la
exposicin del personal de los laboratorios, del resto del personal y el entorno a agentes
potencialmente infecciosos. Se habla de contencin primaria, o barreras primarias, para
referirse a aquellas que protegen al trabajador y su entorno inmediato (tcnicas
microbiolgicas y equipos de proteccin). Las barreras secundarias se refieren al diseo y

construccin de un laboratorio, y contribuyen a la proteccin del propio personal del

laboratorio, proporcionan una barrera para proteger a las personas que se localizan fuera del
laboratorio y protegen a las personas y animales de la comunidad frente a posibles escapes
accidentales de agentes infecciosos. El director o jefe del laboratorio es el responsable de
seguridad, y es obligacin de la gerencia del Centro la provisin de la dotacin necesaria.
La normativa en Espaa est regida por el RD 664/97 y la adaptacin contenida en la Orden
del 25 de marzo de 1998. Los niveles de contencin o bioseguridad son 4 y se designan en
orden ascendente segn el grado de proteccin personal, del ambiente y de la comunidad
que proveen. Los laboratorios de microbiologa clnica raramente manejan agentes del grupo
4, por lo que desarrollaremos las barreras secundarias para niveles 1, 2 y 3.
Barreras secundarias en laboratorios de bioseguridad 1
Los laboratorios deben tener puertas para el control de acceso.
Se debe colocar una seal de advertencia de riesgo biolgico y el nivel de contencin.
Deben existir piletas para el lavado de manos.
Han de estar diseados de forma que su limpieza sea sencilla. No se permiten alfombras.
La iluminacin debe ser adecuada para todas las actividades y evitarse los reflejos y
brillos molestos.
Los suelos ha de ser antideslizantes.
El mobiliario debe ser fuerte y resistente. Los espacios entre mesas, cabinas y equipo
han de ser de fcil acceso para la limpieza.
Las superficies de las mesas de trabajo deben ser impermeables al agua y resistentes al
calor moderado, solventes orgnicos, cidos, lcalis, y otros productos qumicos.
Las sillas que se usen en el laboratorio deben estar cubiertas por otro material que no
sea tela, que se pueda limpiar fcilmente.
Si el laboratorio tiene ventanas que se abran al exterior, stas deben estar provistas de
mosquiteras.
Barreras secundarias en laboratorios de bioseguridad 2
Adems de las mencionadas en los laboratorios de bioseguridad 1:
Las puertas deben cerrarse automticamente y han de tener cerraduras de acuerdo con
las directrices de la institucin. Adems, deben llevar las necesarias seales de riesgo
biolgico.
Se debe considerar la ubicacin de nuevos laboratorios lejos de reas pblicas.
Deben existir piletas para el lavado de manos; se recomiendan las controladas con los
pies, las rodillas o las que operan automticamente. Deben localizarse cerca de las puertas
de salida.

 El diseo ha de facilitar la limpieza y descontaminacin.

El mobiliario debe ser capaz de soportar cargas y usos anticipados. Su superficie debe
ser impermeable y resistente al calor, solventes orgnicos, cidos, lcalis y otros
productos qumicos.
No se recomiendan ventanas que puedan abrirse al exterior. No existen requisitos de
ventilacin especficos. Sin embargo, cuando se planifique una nueva instalacin habr
que prever un sistema mecnico de ventilacin que introduzca aire del exterior sin
recirculacin a espacios fuera del laboratorio. Cuando no se disponga de ventilacin
mecnica, las ventanas debern poder abrirse, y debern estar provistas de mosquiteras.
Deben disponer de cabinas de seguridad biolgica (CSB), situadas lejos de posibles
alteraciones del flujo areo, como puertas, ventanas, reas de gran flujo de trabajo. Las
CSB deben tener un sistema de filtrado y recirculacin de aire verificado.
Las lneas de vaco deben estar protegidas con filtros HEPA (high efficiency particulate
airborne) o equivalentes.
Se debe disponer de una estacin para el lavado de ojos, as como de duchas para casos
de urgencia.
Se debe disponer de un sistema de descontaminacin de desechos (por ejemplo:
autoclave, desinfeccin qumica, incineracin, u otro mtodo validado).
Barreras secundarias en laboratorios de bioseguridad 3
Adems de las mencionadas en los laboratorios de bioseguridad 2:
El laboratorio debe estar separado de otras reas abiertas al flujo de trfico irrestricto
dentro del edificio, y el acceso al laboratorio debe estar restringido.
El pasaje a travs de una serie de puertas que se cierran automticamente es el
requisito bsico de ingreso al laboratorio desde los corredores de acceso. Se debe incluir
un vestuario en el camino entre las 2 puertas de cerrado automtico.
Las puertas se deben poder cerrar con llave.
Deben disponer de piletas para el lavado de manos, que se operen automticamente o
sin manos, ubicadas cerca de la puerta de salida. Si el laboratorio est dividido en
pequeos laboratorios, debe disponerse de una pileta por zona.
Las superficies interiores de paredes, pisos y techos han de ser fciles de limpiar y
descontaminar. Los bordes y penetraciones deben sellarse. Las superficies han de ser
lisas, impermeables a los lquidos y resistentes a sustancias qumicas y desinfectantes.
Los pisos deben ser monolticos (sin fisuras) y antideslizantes.
Todas las ventanas deben ser cerradas y selladas.
Las CSB debern estas situadas lejos de las puertas, rejillas de ventilacin y reas muy
transitadas.

 Se han de proteger las lneas de vaco con trampas de desinfectante lquido y filtros
HEPA o equivalentes.
Debe existir una estacin para lavado de ojos dentro del laboratorio.
Sistema de ventilacin de aire de escape por conductos. Este sistema crea un flujo de
aire direccional que toma el aire para el laboratorio de reas limpias y lo elimina en
reas contaminadas. El aire de escape no se recircula a ninguna otra parte del edificio.
El personal debe ser capaz de verificar la direccin del flujo de aire. Se recomiendan
sistemas de monitorizacin visual en la entrada. Se deben considerar alarmas audibles.
La salida del aire del laboratorio en el edificio debe estar localizada lejos de zonas
ocupadas y de zonas de toma de aire del edificio, o el aire de salida debe estar filtrado por
filtros HEPA.
El aire filtrado con HEPA de las CSB II puede ser recirculado en el ambiente del
laboratorio, siempre y cuando la cabina est revisada de acuerdo con las instrucciones del
fabricante y al menos una vez al ao. Las CSB III deben estar directamente conectadas con
el segundo sistema de escape con filtros HEPA de la cabina. El suministro de aire se debe
realizar de forma que se prevenga la presin positiva de la cabina.
Se debe disponer de un mtodo de descontaminacin de los residuos, preferentemente
dentro del laboratorio (por ejemplo: autoclave, desinfeccin qumica, incineracin, u otro
mtodo validado).
Los equipos que puedan producir aerosoles deben estar contenidos en dispositivos en los
que el aire de salida se filtre por filtros HEPA u otra tecnologa equivalente.
El diseo de las instalaciones ha de tener en consideracin la descontaminacin de
grandes piezas de equipo antes de sacarlas del laboratorio.
Se requiere la inclusin de proteccin ambiental adicional, por ejemplo, una o ms de las
siguientes:
Una antesala para limpieza de material y suministros con vestidor y duchas.
Filtracin HEPA de aire de escape.
Contencin de otros servicios entubados (caeras, etc.).
Provisin de descontaminacin de efluentes (drenajes de baos, lavabos, cmaras
de autoclave, etc.).
El diseo, los parmetros y los procedimientos deben ser verificados y documentados
antes del funcionamiento. Las instalaciones deben reverificarse anualmente, como
mnimo.
Como normas generales aplicables a los distintos laboratorios, independientemente de su
nivel de contencin, indicamos:
a) Slo el personal especializado y adiestrado en las tcnicas microbiolgicas utilizadas en los
respectivos laboratorios debera trabajar en este tipo de instalacin.

b) Al no existir recomendaciones de tamao especficas para los distintos laboratorios

asumiramos las generales para un laboratorio (1418m 2 por trabajador). Para los laboratorios
de serologa y microbiologa molecular con elevado grado de automatizacin, el tamao y
distribucin dependen, fundamentalmente, del nmero de autoanalizadores, sistemas
robotizados, equipos y puestos de trabajo de stos, en funcin de la cartera de servicios. Al
ser stos ms numerosos y voluminosos que en otras reas del laboratorio de microbiologa,
no son del todo ptimas las recomendaciones de tamao general dadas para otras reas. Una
forma de clculo de la superficie total, basada en la experiencia de ms de 177 laboratorios
altamente automatizados en los ltimos 9 aos consiste en multiplicar la superficie del
mobiliario y los equipos por un factor de entre 1,7 y 2,0 (datos no publicados). Tambin se
podra aplicar la normativa general que aconseja 2m 2 libres por trabajador. Se recomienda
una separacin entre equipos suficiente, que permita el acceso a stos para funciones de
mantenimiento y reparacin.
c) Los distintos laboratorios deben estar separados, fundamentalmente cuando se diferencian
en el tipo de agentes biolgicos que manejan, con lo que se minimiza el riesgo. El acceso
debe estar restringido, con sealizacin de RIESGO BIOLGICO. ACCESO RESTRINGIDO. SLO
PERSONAL AUTORIZADO
d) Todas las reas de trabajo de los laboratorios deben disponer de la sealizacin adecuada
indicando su nivel de riesgo biolgico y contencin.
Tabla 1. Caractersticas de los laboratorios internos
Agentes
Laboratorio biolgic Requisitos mnimos
os
Bacteriologa 2/3

Nivel contencin 2 +
cabina de bioseguridad
(recomendable clase II)

Ubicacin y caractersticas

Ubicacin prxima reas administrativa,

limpieza y recepcin y siembras.
Aconsejable subdivisin modular en funcin
de cargas de trabajo

Micobacteria
3
s

Nivel de contencin 3.
Doble puerta de acceso
con vestidor

Micologa

Nivel contencin 2 +
cabina de bioseguridad
clase II. Nivel 3 segn
frecuencia de agentes
grupo 3

2/3

Aislado del resto de laboratorios

Parasitologa 2

Nivel de contencin 2

Aconsejable campana de gases (ter, dietilter)

Virologa

2/3

Nivel contencin 2 +
cabina de bioseguridad
clase II. Aconsejable
nivel contencin 3

Aislado del resto de laboratorios para evitar

contaminacin de cultivos celulares y por
normativa si es nivel de contencin 3

Serologa

2/3

Nivel contencin 2 +
cabina de bioseguridad

Almacenamiento (reactivos y muestras)

Microbiologa
2/3
molecular

clase II

independiente

Nivel contencin 2 +
cabina de bioseguridad
clase II

Separacin en reas: preparacin de

reactivos, extraccin, amplificacin y
deteccin. Segn grado de automatizacin,
simplificar reas con tendencia a un rea
nica con cabinas de bioseguridad clase II y
flujo laminar.
Almacenamiento (reactivos y muestras)
independiente.

3.5 rea de limpieza de material y esterilizacin. rea de preparacin de

medios
En los laboratorios se utiliza cada vez ms material desechable de un solo uso y medios de
cultivo y reactivos comerciales preparados. El rea de limpieza y esterilizacin de cada
laboratorio debe adaptarse, por tanto, a su protocolo de trabajo, que debe estar de acuerdo,
adems, con lo que supone la esterilizacin de residuos, con el Plan de Gestin de Residuos
del Hospital y con la legislacin vigente. Sera recomendable que estuviera prxima a las
otras reas de trabajo y, por ser la zona en la que se ubica la autoclave, cerca de una salida
de emergencia.
El diseo, las instalaciones y los equipos de esta rea del laboratorio deben cumplir con el
nivel de contencin del laboratorio al que pertenezca, como mnimo de nivel 2. Dispondr de,
al menos, un fregadero y una autoclave y, dependiendo de la actividad desarrollada, otros
aparatos como hornos Pasteur o lavavajillas. Los aparatos con toma elctrica deben instalarse
cumpliendo las normativas de seguridad correspondiente, con especial atencin a las zonas
hmedas.
En la actualidad, son muy pocos los laboratorios de microbiologa que preparan medios de
cultivo de forma habitual. En el caso de que s lo hagan, el laboratorio debera disponer de un
rea especfica, prxima al rea de limpieza y esterilizacin, al laboratorio de bacteriologa
general y a la zona de almacenamiento de medios.

3.6 rea de almacenamiento

Un laboratorio de microbiologa, incluso de tamao pequeo, se caracteriza por el gran
nmero de materiales, productos, medios y reactivos que utiliza. Si se quiere garantizar su
funcionalidad y seguridad, es necesario que disponga de reas de almacenamiento que
permitan desarrollar con normalidad el trabajo diario.
a) Reactivos y muestras. La cmara fra (28C) debe ser el elemento central. En los de
pequeo tamao y complejidad se podr recurrir a refrigeradores y armarios individuales
alojados en diferentes partes del laboratorio, preferentemente diferenciados de los destinados
a las muestras. Si se disea de nuevo el laboratorio sera aconsejable ubicarlo dentro del rea
de trabajo. Otra opcin sera disponer de frigorficos para aprovisionar diariamente a partir del
almacn externo. Las dimensiones de la cmara fra dependern del nmero de muestras y
cartera de servicios del laboratorio. No existen estndares; una aproximacin sera un espacio
til de 6m2 hasta 10m2 con una altura de 2m segn el tamao del laboratorio. Las puertas
deben ser de apertura hacia el exterior y con sistemas de alarma y de apertura de seguridad
desde el interior.

Debe preverse la ubicacin de los compresores de la cmara fra que son una fuente de calor,
ruido, vibraciones y presentan un alto potencial de riesgo de incendio. Existen otras
soluciones como habitaciones fras modulares que pueden instalarse en espacios
arquitectnicos.
Por otro lado, sera conveniente disponer de un pequeo espacio para productos que se
almacenen a temperatura ambiente, que puede compartirse con el almacn de material
fungible.
b) Productos qumicos. La tendencia en los laboratorios diagnsticos modernos es hacia una
menor dependencia de productos qumicos puros, lo que reduce el riesgo qumico, pero
siguen utilizndose productos inflamables, corrosivos, txicos y nocivos, a veces formando
parte de sistemas comerciales diagnsticos (kits). Existe una normativa especfica de
almacenamiento de productos qumicos 16. En los laboratorios actuales de microbiologa suele
ser suficiente disponer de una serie de armarios situados en un rea comn de almacn
suficientemente ventilada. Los productos qumicos deben alojarse segn criterios de
agrupamiento por tipo de riesgo, y respetando las incompatibilidades entre grupos 16.
Existen en el mercado armarios de seguridad de diferente capacidad y con caractersticas
especficas para el almacenamiento de los distintos tipos de productos qumicos. A poco que
sea posible, se recomienda disponer de ellos.
c) Gases. Es aconsejable establecer un lugar externo y bien ventilado para la instalacin de
los gases a presin (caseta de gases). Si ello no es posible, debe procurarse que el rea del
laboratorio donde sean necesarios est bien ventilada y, si es posible, disponga de un sistema
de ventilacin de emergencia. Las botellas deben estar fijadas a la pared para evitar
accidentes7.
d) Residuos. En el laboratorio de microbiologa se originan todo tipo de residuos. En cada rea
de trabajo deben existir contenedores adecuados y diferenciados para la clasificacin y
segregacin de los diferentes grupos, con especial atencin a los residuos peligrosos
sanitarios (grupo III). En la actualidad es habitual transferir los residuos a empresas
autorizadas. En este caso, el tiempo de almacenamiento de los residuos en el laboratorio
(almacenamiento intermedio), una vez llenos y cerrados los contenedores, no debe superar
las 24h. Para que el almacenamiento intermedio de los residuos sea lo ms seguro, debe
existir en el laboratorio una zona acotada y especfica para este fin.
Determinados residuos qumicos, como los colorantes, no se deben eliminar en la red de
saneamiento. Una opcin es que los colorantes se recojan en contenedores especiales
directamente desde los desages de las piletas de tincin; esto se ha de tener en cuenta
tambin a la hora de proyectar la fontanera del laboratorio.

4. Aplicacin en el laboratorio de microbiologa

El control de calidad en un laboratorio microbiolgico, debe evaluar y documentar el
desempeo de todos los aspectos de sus procedimientos. Esto incluye la calidad de la
muestra, la eficiencia de los reactivos, los medios de cultivo, el funcionamiento de los
diversos instrumentos o equipos y la verificacin o validacin de los resultados obtenidos.

4.1. Control de calidad de las muestras clnicas:

Uno de los aspectos ms importantes en un laboratorio de microbiologa es la apropiada
seleccin, recoleccin y transporte de las muestras clnicas. Por lo que todo el personal

relacionado con estas responsabilidades, debe comprender lo determinante que es el

mantenimiento de la calidad de la muestra, en la evaluacin e informe de un espcimen
clnico. Es responsabilidad del laboratorio proveer sta informacin en forma clara y que sea
fcilmente incorporada en la metodologa de trabajo.
La muestra debe ser representativa del proceso infeccioso.
Importante evitar la contaminacin con microorganismos de la flora normal del rea
afectada.
Debe seleccionarse el lugar anatmico correcto de donde se obtendr la muestra, utilizar la
tcnica apropiada y los instrumentos o elementos adecuados para su obtencin.
Se debe recolectar un volumen apropiado de muestra para evitar los resultados falsos
negativos.
Se debe identificar cada muestra con el nombre del paciente y su nmero de identificacin.
Se debe colocar la muestra en un recipiente adecuado para su transporte, con el fin de
asegurar la sobrevivencia del posible agente infeccioso.
Por ltimo, se debe evitar derramar la muestra y mantener en todo momento las medidas
de bio seguridad apropiadas.

4.2. Control de calidad de los medios de cultivo:

Se debe mantener un registro de cada frasco de medio de cultivo, con el nombre del
producto, nombre de la casa proveedora, fecha de recibo, fecha de expiracin, nmero de lote
y fecha en que se abri el frasco.
Cada lote preparado de medio de cultivo se debe probar antes de su uso rutinario, mediante
la inoculacin de microorganismos cuyo comportamiento se conoce, tanto para reacciones
positivas, como negativas. Para esto pueden utilizarse cepas bacterianas control de la ATCC
(American Type Culture Collection). Se debe guardar un registro de los resultados obtenidos.
Para el agar Mueller-Hinton, empleado como medio de soporte para realizar la prueba de
susceptibilidad por el mtodo de difusin en agar (Mtodo de Bauer and Kirby), el control de
calidad debe extenderse hacia la determinacin de las concentraciones de timina/timidina, la
concentracin de cationes, as como en medir la profundidad del agar y que sta sea igual en
todo el plato de agar.
La concentracin adecuada de timina/timidina se monitoriza utilizando la cepa de
Enterococcus faecalis ATCC 29212 y el disco de trimetoprin sulfa.
La concentracin adecuada de cationes se monitoriza utilizando la cepa de Pseudomonas
aeruginosa ATCC 27853 y el disco de gentamicina.
Las pruebas bsicas de control de calidad de los medios preparados deben incluir: medicin
del pH, pruebas de esterilidad, capacidad de crecimiento y reaccin, aspecto, dureza y
profundidad del agar.
-Medios de cultivo comerciales. Es recomendable que sean proporcionados por fabricantes
certificados. En cada envo, el fabricante debe aportar informacin sobre: el nombre del
medio, nmero de lote, cantidad enviada y fecha de caducidad. Adems, para cada lote de
medio debe facilitar un certificado del control de calidad en el que se especifican las
condiciones de conservacin, control de esterilidad, criterios de aceptabilidad, control del

funcionamiento indicando las cepas utilizadas, fecha de emisin y firma del responsable del
laboratorio fabricante.
Antes de introducir un nuevo medio en el laboratorio, debe ser validado con cepas de
referencia; este procedimiento debe repetirse siempre que el fabricante indique que las
caractersticas del medio han cambiado o que se detecte alguna deficiencia en el uso
rutinario. Tras la recepcin de los medios en el laboratorio y antes de usarlos, hay que
comprobar las caractersticas fsicas (color, precipitados, placas rotas, excesivo nmero de
burbujas, crecimiento de colonias, etc.) y se debe documentar cualquier anomala detectada.
El control de calidad se completa con el estudio de la esterilidad y la comprobacin del
crecimiento de microorganismos especficos y/o inhibicin de otros, o bien produccin de
reacciones bioqumicas o morfologas tpicas de los microorganismos ensayados.
Segn los requerimientos de control de calidad los medios comerciales se clasifican en:
Algunos de los medios recogidos como exentos son:
- Agar sangre (no selectivo)

- Agar Brucella

- Agar Salmonella

- Agar alcohol fenil etlico

- Shigella (SS)

- Agar yema de huevo

- Agar chocolate

- Agar selectivo para enterococo

- Caldo Selenito o caldo GN

- Agar sangre lacada con

kanamicina

- Caldo tioglicolato
- Agar CLED
- Caldo BHI o TSB
- Agar Levine o Agar EMB
- Medios de hemocultivo
- Agar MacConkey
- Agar sangre colistina nalidxico
- Agar para Legionella CYE/BCY
- Agar manitol-sal

- Agar TCBS
- Agar Sabouraud dextrosa
- Agar Hektoen
- Agar cornmeal
- Agar XLD
- Lowenstein-Jensen
- Agar CIN
- Agar Middlebrook

Entre los medios no exentos se encuentran el agar Mueller-Hinton, los medios selectivos para
cultivo de Neisseria spp. y Campylobacter spp., entre otros.
Si los medios comercializados proceden de empresas no certificadas por la norma ISO o no
cumplen con las especificaciones de calidad recomendadas, el usuario debe realizar el control
de todos los lotes que se reciben como si se tratase de medios preparados en el laboratorio.
Cualquier deficiencia en el aspecto fsico, esterilidad, no crecimiento de la cepa deseada, o no
inhibicin de la cepa no deseada, ser documentada y notificada a los fabricantes para que
emprendan las medidas correctoras.
- Medios de cultivo preparados en el laboratorio. Algunos medios de cultivo se preparan en el
propio laboratorio, bien porque es necesario que sean recientes para determinados cultivos o
porque se debe disponer de ellos inmediatamente y no hay tiempo de solicitarlos a un

fabricante. En este caso, hay que controlar el medio deshidratado, los aditivos que se van a
utilizar, el procedimiento de la elaboracin, el envasado, etiquetado y almacenamiento y por
ltimo, comprobar las caractersticas fsicas, esterilidad y funcionamiento del medio
preparado con cepas de referencia.
Todas las fases del proceso han de estar documentadas en un manual de procedimiento y
debe mantenerse un registro detallado de las mismas. Los medios deshidratados y aditivos
que se utilizan para preparar los medios deben estar etiquetados con las fechas de
caducidad, de recepcin y la fecha en la que se abrieron por primera vez y se deben
almacenar en condiciones adecuadas. El proceso de elaboracin debe quedar registrado,
anotando la identidad de los medios, nmero de lote o fecha de preparacin, condiciones de
almacenamiento, fecha de caducidad y la identidad de la persona que los ha preparado. Es
recomendable que cada placa o tubo individual vaya identificado con el nombre del medio y
nmero de lote o fecha de preparacin.
Para realizar el control de calidad del medio una vez preparado, se seguir el mismo
procedimiento que para los medios comerciales no exentos.
-Control de esterilidad de cada lote (autoclave o filtrado). En el proceso de esterilizacin se
aadir 1 placa control si hay menos de 100 unidades y 3 placas control si hay ms de 300
unidades. Tras la esterilizacin las placas, en general, se dejan durante 24 horas a 37C, y en
caso del agar sangre se dejar, adems de las 24 horas a 37C, otras 24 horas a
temperatura ambiente.
- Control de crecimiento: se realiza cada vez que recibimos o preparamos un nuevo lote. Se
lleva a cabo a travs de un microorganismo control o cepas de coleccin.
Para realizar la siembra se utiliza un inculo reducido. El inculo reducido es un inculo
estndar del cual hacemos una dilucin al 1/10 de una suspensin del microorganismo con
turbidez correspondiente al 0,5 de la escala de Mc Farland (la turbidez es proporcional al
nmero de microorganismos formadores de colonias).
Despus de preparar el inculo estndar, se siembra con un asa de 0,001 mL.
- Control de las caractersticas selectivas: sembramos microorganismos que crecen en el
medio que estamos controlando y microorganismos que no crecen en l. Si ambos crecen, el
medio de cultivo no es bueno. El medio de cultivo selectivo slo permite el crecimiento del
microorganismo para el que ha sido creado.
- Control de las caractersticas bioqumicas (diferenciales): algunos medios de cultivo tienen
en su composicin sustancias que permiten un viraje de color dependiendo de la colonia que
est creciendo. Ej. Cuando el medio contiene lactosa, ste nos permite diferenciar entre las
bacterias que usan la lactosa (viraje rosa) de las que no la usan (incoloro).

4.3. Control de Calidad de reactivos:

Se consideran como tales, entre otros, los colorantes para tinciones, discos con reactivos o
con antimicrobianos, y los kits o sistemas comerciales que incorporan una variedad de
medios, sustancias bioqumicas y reactivos o cualquier combinacin de los mismos.
Un elemento fundamental en el trabajo diario del laboratorio de microbiologa lo constituyen
los reactivos, tanto comerciales como de preparacin domstica, que son utilizados en la
caracterizacin de microorganismos. Por ello, deben efectuarse controles diarios con las
bacterias tipo y seguir estrictamente las indicaciones en cuanto a almacenamiento de los
reactivos, metodologa de la prueba y tiempo de lectura. Es recomendable que los reactivos

comerciales sean examinados inmediatamente cuando se abre un nuevo lote o vial y llevar un
registro de su funcionamiento.
En el caso de preparados comerciales deben solicitarse al fabricante evidencias de que
cumplen criterios de calidad. Todos los reactivos deben estar etiquetados con su contenido,
concentracin, condiciones de conservacin, fecha de preparacin o de reconstitucin, y
fecha de caducidad o periodo recomendado de almacenamiento, y se deben conservar
siguiendo las recomendaciones de los fabricantes. Debe existir un documento o ficha para
cada reactivo o kit donde se detallen sus componentes y proporcin, la indicacin (ensayo
microbiolgico para el que se utiliza), los controles que deben utilizarse y los criterios de
aceptabilidad, el plan y frecuencia de control, las condiciones de conservacin, limitaciones
de su uso o de interpretacin, descripcin del tipo de lectura de los resultados y mtodo de
lectura. En el caso de los kits comerciales, solamente se podrn utilizar los componentes de
uno con otros si pertenecen al mismo nmero de lote, salvo especificaciones concretas del
fabricante.
Se deben utilizar cepas de referencia para el control de todos los reactivos, colorantes para
tinciones y discos. Al menos se debe incluir un microorganismo que produzca una reaccin
positiva y otra negativa con cada control.
La concentracin de las soluciones de tincin, por efecto de la evaporacin de los solventes o
las variaciones introducidas en los mtodos recomendados, pueden afectar los resultados de
las tinciones para diferenciar microorganismos por su reaccin a la tincin de Gram y la
morfologa, tintes para cpsulas, esporas, etc.
El control de calidad de stos tintes debe realizarse primero con cada nuevo lote, luego basta
con un control semanal para mantener un grado de seguridad apropiado en su uso.
Para el control diario de la tincin de Gram, se recomienda el uso de una cepa ATCC de
Staphylococcus aureus y de Escherichia coli.
Es necesario llevar un registro de estos controles.

4.4. Control de calidad de antisueros y otros productos comerciales como

kits de identificacin:
En microbiologa existen cada vez ms productos comerciales que tienen como objetivo
ayudar en el diagnstico de agentes etiolgicos de enfermedades en el menor tiempo posible,
con el mayor grado de especificidad y sensibilidad. Estos antisueros deben ser probados cada
vez que se recibe un nuevo lote y cada vez que se utilicen, deben de analizarse los controles
positivo y negativo que vienen con cada juego de reactivos. Se deben llevar registros con la
fecha de expiracin del lote, casa comercial, fecha en que ingres al laboratorio, fecha en que
se abri el juego y el registro de los controles realizados.
Las cepas de referencia o cepas patrn se definen como microorganismos procedentes de un
cultivo puro, definidos por lo menos al nivel de gnero y especie, catalogados y descritos
segn sus caractersticas y preferiblemente de origen conocido. El laboratorio de
Microbiologa debe mantener una coleccin de microorganismos de referencia para utilizarlos
en la verificacin y validacin de los medios de cultivo, reactivos, colorantes para tincin y
otras sustancias bioqumicas y para el control de la exactitud de las pruebas de sensibilidad a
antimicrobianos y de los distintos ensayos microbiolgicos. El laboratorio debe manejar las
cepas de referencia siguiendo procedimientos que aseguren una conservacin adecuada, el
control de su pureza y que no hayan perdido sus caractersticas.

Cada vez que se reciba una cepa de referencia debe quedar registrado el nombre completo y
origen de la cepa, organismo suministrador, fecha de recepcin, nmero de envases
recibidos, tipo y lugar de conservacin y firma de la persona que recibe la cepa de referencia,
as como los controles (pureza, pruebas bioqumicas) realizados. Las cepas de referencia
deben reconstituirse siguiendo las instrucciones del suministrador.

4.5. Control de calidad de la prueba de sensibilidad:

Se debe monitorear la precisin y exactitud del procedimiento de la prueba de
susceptibilidad, el comportamiento de los reactivos utilizados en la prueba y el desempeo de
las personas que llevan a cabo las pruebas y sus resultados.
Al hacer el control de calidad de discos, tiras de E-test o mtodos de sensibilidad para
sistemas automatizados o semi automatizados, se recomienda utilizar cepas ATCC. Cada
nuevo lote de estos insumos debe evaluarse antes de su uso rutinario y luego una vez al mes,
si no existe cambio de lote en ese periodo.

4.6. Control de calidad de equipos:

Todos los instrumentos utilizados en el laboratorio deben estar respaldados por un programa
de control de calidad y de mantenimiento preventivo y correctivo, basados en las
instrucciones del fabricante y los procedimientos establecidos. Debe mantenerse un registro
de todo lo realizado al respecto, con el nombre del instrumento, fecha, resultado y
comentarios.
Debe redactarse un manual de procedimientos operacionales que incluya:
Listado de los equipos con nombre, marca, modelo, nmero de serie, fecha de recibo y
nmero de inventario de la institucin.
Registro del mantenimiento preventivo y correctivo, periodicidad de la inspeccin y fallas del
instrumento.
Debe incluirse un apartado de correccin de fallas y acciones correctivas efectuadas.
Instrucciones de uso del instrumento, redactadas en forma clara y en el idioma de los
usuarios. Incluir precauciones de seguridad, procedimientos de limpieza, cuidado del
instrumento y acciones correctivas.
El control de los equipos incluye la recepcin, validacin y puesta en uso de los equipos.
Cuando un nuevo equipo se recibe en el laboratorio hay que comprobar que cumple con lo
especificado en el contrato, solicitud de compra o condiciones explcitas o implcitas de
cesin, adems de verificar la documentacin que lo acompae y su estado. Antes de ponerlo
en uso se le realizar una validacin inicial que puede incluir, en caso de ser un instrumento
de medida, su caracterizacin determinando la incertidumbre en las medidas y otras
caractersticas en las medidas como exactitud, precisin, etc. Una vez que se haya
comprobado el adecuado funcionamiento del equipo, se autorizar su puesta en servicio.
Es necesario identificar los equipos de forma nica con un cdigo siguiendo el sistema que
elija el laboratorio y abrir el expediente del equipo, que no es ms que el conjunto de
documentacin referente al equipo archivada de manera que est fcilmente localizable y sea
de fcil manejo.
El expediente del equipo debe contener lo siguiente:
Ficha de equipo con la siguiente informacin:

- Descripcin y cdigo del equipo.

- Localizacin habitual del equipo.

-Tipo de validacin/calibracin y
verificacin y periodicidad.

- Datos del fabricante.

- Procedimiento de mantenimiento
y periodicidad.

- Fecha de recepcin.

- Precauciones de bioseguridad.

- Fecha de puesta en servicio.

- Ficha histrica donde se

describen todas las revisiones
hechas al equipo.

- Firma de quien abra la ficha o

autorice la puesta en servicio del
equipo.

Documentacin del fabricante (manual del equipo).

Instrucciones de uso y mantenimiento, que deben estar fcilmente disponibles para el
personal del laboratorio autorizado.
Registros de las revisiones realizadas.
Instrucciones de uso resumidas, en caso de que existan, que deben permanecer junto al
equipo. El laboratorio debe disponer de un inventario de equipos, que es un listado de los
equipos actualmente en uso en el laboratorio, el cual debe estar actualizado y es
recomendable que incluya la siguiente informacin:
- Denominacin del equipo, fabricante, nmero de serie.
- Cdigo de identificacin y localizacin del equipo.
- Tipo de revisin: validacin/ calibracin/ verificacin/mantenimiento, interno o
externo.
- Periodicidad.
- Documento de referencia en el que se describen las instrucciones para la revisin
del equipo.
Revisin de equipos. El laboratorio debe disponer de un programa de validacin (o
calibracin), verificacin y mantenimiento de sus equipos; la frecuencia de cada
procedimiento se establecer en funcin del uso, tipo y funcionamiento previo de los mismos.
Cada procedimiento de revisin debe quedar registrado y los registros mantenerse y estar
fcilmente disponibles durante la vida til del equipo.
-Incubadoras:
Controle diariamente la temperatura de las incubadoras, antes de sacar los platos y anote en
una hoja control el resultado. Es altamente recomendable que la hoja en que se captura la
data de temperatura diaria, sea en formato semanal o mensual, ya que formatos con periodos
largos desmejoran la atencin que debe darse al control y desviaciones de la temperatura.
Observe el termorregulador por cualquiera alteracin en su posicin preestablecida.
Coloque las muestras, platos y tubos, en una posicin segura.
Un papel de filtro humedecido con agua en el fondo de la incubadora, es adecuado para
mantener la humedad requerida.
Las incubadoras de CO2 requieren medir el nivel de gas diariamente.

El jefe de seccin debe ser notificado cuando una incubadora falla en mantener el rango de
temperatura aceptable.
Observe macroscpicamente los platos Petri para observar desecacin.
En incubadoras de CO2, se puede colocar un cultivo de N. gonorrhoeae ATCC 43069 ,
subcultivndola cada da, para observar su ptimo crecimiento, ya que es un microorganismo
que necesariamente requiere CO2 para crecer.
Todas las incubadoras deben ser limpiadas mensualmente y llevar un rcord
de mantenimiento preventivo.

-Autoclaves:

Control de calidad del autoclave:

Para controlar la eficiencia del autoclave, recomendamos utilizar la cepa control Geobacillus
(antes Bacillus ) stearothermophilus ATCC 7953.
Tambin puede utilizarse otros controles comerciales, tales como las tiras reactivas, tapes
para autoclave, cpsulas spot, etc.
De no contarse con ninguna de las anteriores, un mtodo cualitativo consiste en colocar una
cepa de Bacillus subtilis en un Tioglicolato. Incubar por 24 horas a 35C y posteriormente
colocar el tubo durante la rutina de trabajo del autoclave. Luego de la esterilizacin, se
transfiere con un hisopo a un agar sangre el cual se incuba a 35C por 24 horas. No debe
haber crecimiento en el agar sangre, si la autoclave a trabajado adecuadamente.
-Cmaras de bioseguridad:
Apague la lmpara Ultravioleta antes de comenzar a trabajar.
Encienda el sistema de ventilacin 15 minutos antes de utilizar.
Observe que no se obstruye el flujo de aire.
Si hay derrame dentro de la cabina, limpie con un desinfectante apropiado, manteniendo
apagada la cabina.
Evite el uso de mecheros de flama dentro de la cabina.
Lleve un control de la medida del flujo de aire.
Lleve un control de la calibracin del flujo de aire.

Lleve un control del reemplazo de los filtros.

Compruebe los sistemas de alarma de funcionamiento.
La superficie interior de la mesa de trabajo de la cabina, puede ser cultivada semanalmente
para detectar contaminacin.
Desinfecte la cabina antes y despus de utilizar.
No utilice las cabinas biolgicas para hacer mezclas de sustancias qumicas y viceversa.
Cuando trabaje en la cabina, evite la entrada brusca de aire y el uso innecesario de las
puertas del rea.
-Incinerador:
Temperatura ptima de esterilizacin (815 C) durante 5 segundos para destruir bacterias,
hongos y micobacterias.
Inspeccionar la cermica del incinerador en busca de imperfecciones, rajas o grietas.
Mantener el equipo de incineracin alejado de productos inflamables o potencialmente
peligrosos que puedan incendiarse debido al calor generado.
-Refrigeradoras:
Control diario de la temperatura en hoja de formato mensual.
Coloque las placas Petri en posicin invertida con la tapa hacia abajo.
Mantenga la temperatura entre 4 8 C.
Utilice refrigeradoras que no generen escarcha.
No coloque medios de cultivo an ligeramente calientes dentro de la refrigeradora.
Evite abrir con frecuencia la puerta de la refrigeradora.
Lleve un registro de problemas de funcionamiento, causa y solucin.
No guarde alimentos en refrigeradoras para especmenes clnicos.
-Microscopios
Limpieza del aceite de los objetivos, condensador, etc.
Apagar la fuente de luz.
Colocar cubrepolvo al finalizar su uso.
Limpieza de oculares y diafragma con el liquido especificado para ello.
Limpieza y lubricacin del sistema mecnico.
Limpieza y ajuste del sistema ptico.

4.7. Supervisin del personal:

El personal es el factor ms importante en la calidad del trabajo en el laboratorio de
microbiologa. Este personal debe tener una dedicacin y actitud positiva hacia el trabajo,

capacidad acadmica, actualizacin constante y contar con los elementos indispensables para
su labor.
Debe existir una ficha tcnica de cada trabajador donde se registren los posibles accidentes
sufridos, as como las infecciones suscitadas al manipular secreciones u organismos
infecciosos. Adems, se recomienda realizar estudios radiolgicos y colocacin de PPD, en
aquel personal ligado al trabajo con Mycobacterium tuberculosis.
En el laboratorio de Microbiologa debe existir una relacin detallada de puestos de trabajo,
en la que se defina para cada puesto la titulacin, cualificacin y obligaciones del personal
que lo ocupa. Se debe establecer una sistemtica para garantizar que el personal est
formado y capacitado para desempear las funciones especficas de su puesto de trabajo y
as asegurar en este aspecto la calidad en todas las etapas del proceso analtico. Es necesario
que el personal est entrenado en los principios de las buenas prcticas de laboratorio, que
reciba la formacin y entrenamiento adecuados para las tcnicas que va a realizar y que se
evale su competencia de modo continuo. La direccin del laboratorio debe mantener
registros de la formacin y cualificacin, de la experiencia profesional y de la competencia de
todo el personal.

4.8. Control de calidad externo:

Es recomendable que los laboratorios de microbiologa puedan participar en programas de
evaluacin externa. Estos programas miden la capacidad del laboratorio para evaluar una
muestra desconocida y llegar a un resultado seguro,basndose en el cuidado que ha recibido
al aparataje del laboratorio el cual debe estar calibrado y/o limpio.
Estos controles de calidad externos pueden ser nacionales o internacionales.

4.9 Serologa:
El laboratorio de diagnstico serolgico debe tener establecido un sistema que permita el
aseguramiento de la calidad. As, se deben establecer unos indicadores de calidad que
permitan la identificacin de los errores. Estos indicadores deben incluir aspectos
preanalticos, analticos y postanalticos
-Fase preanalitica
En la fase preanaltica hay que considerar como factores importantes la idoneidad de las
peticiones analticas y la calidad de la muestra (ausencia de hemlisis, contaminacin o
lipemia). El transporte no es especialmente crtico para la realizacin de estudios serolgicos,
aunque se debe realizar en fro y lo ms rpidamente posible. Una fuente importante de error
consiste en la identificacin de la muestra, siendo recomendable utilizar sistemas
automticos para el reconocimiento de las muestras.
-Fase postanalitica
En la fase postanaltica hay que controlar tres aspectos: la emisin de resultados, que
pueden causar errores en la transcripcin; el tiempo de respuesta, y, muy importante, la
interpretacin de los resultados, por lo que debe ser siempre realizada por personal
facultativo especializado.
-Fase analtica
Se deben emplear siempre ensayos validados. Los ensayos comerciales con marcado CE han
sido validados por el fabricante, pero antes de incorporarse al laboratorio deben ser

verificadas las caractersticas de su funcionamiento. Por otra parte, los ensayos propios del
laboratorio, as como aquellos con etiquetado CE que se pretenden aplicar para un fin distinto
al establecido por el fabricante, por ejemplo para aplicar a muestra de LCR un ensayo
diseado para muestra de suero, o para caracterizar la avidez de IgG en un ensayo diseado
para medir IgG especfica, deben ser objeto de validacin por el laboratorio. Para la validacin
y para la verificacin se deben emplear muestras de resultado conocido, a ser posible con
resultado contrastado en laboratorios de referencia. Tanto la validacin como la verificacin
de ensayos se deben llevar a cabo antes de ponerlos en uso para emitir resultados sobre
muestras clnicas.
Control de calidad de serologa se realiza haciendo:
-Pruebas de capacidad para asegurar que el trabajo realizado es correcto.
-Muestras de suero de titulacin conocida.
-Control estricto de la caducidad de los reactivos.