Professional Documents
Culture Documents
COMPARTILHADO
CHILREAR
LINKEDIN
FIX-LO
O EMAIL
IMPRIMIR
AVISO PRVIO:
Se voc est procurando BAM Captulo 5: Salmonella (Dezembro de 2007 Edition)
que so incorporadas por referncia em 21 CFR Partes 16 e 118: Federal Register
final Regra (9 de julho de 2009, 74 FR 33030): Preveno de Salmonella Enteritidis
em Shell Eggs Durante Produo, Armazenamento e Transportes, use estas verses
do BAM Salmonella captulo (PDF, 189 Kb) e Apndice 1: Mtodos rpidos para
deteco de Patgenos Transmitidas por Alimentos (PDF, 195 Kb). Estes 2
documentos tambm esto disponveis como um arquivo combinado (PDF, 382 Kb).
A mais recente edio do BAM Captulo 5: Salmonella est disponvel abaixo deste
aviso.
Dezembro 2015 - A seo para o Processo Statens Serum Institute foi adicionado
a Seo E: Identificao deSalmonella.
Junho de 2006 - Ovos mtodo revisto para ovos com casca e os ovos inteiros
lquidos.
Abril 2003 - R mtodo pernas, casena lctico, coalho casena, caseinato de sdio
e mtodos Coelho carcaa revistos, orelhas de topo e outro co mastigar brinquedos
acrescentou. A.25 seo removida, agitador mecnico.
Para obter uma cpia de uma verso anterior no est publicado, por favor entre em
contato Thomas Hammack
Contedo do Captulo
Introduo
Equipamentos e Materiais
Mdia e Reagentes
Isolamento de Salmonella
Identificao de Salmonella
Referncias
Introduo
Vrias mudanas esto sendo introduzidas nesta edio de BAM (8 th Edition). A primeira
mudana envolve a ampliao do uso de Rappaport-Vassiliadis (RV) mdio para alimentos
com ambos os altos e baixos nveis de microflora competitivos. Na edio anterior, mdio
RV foi recomendado apenas para a anlise do camaro.Com base na concluso de AOAC
precollaborative (5, 6) e colaborativa (7, 8) estudos, forma RV est agora a ser
recomendada para a anlise de alta e baixa microbiana alimentos carga
microbiana. Forma RV substitui selenito cistina (SC) caldo para a anlise de todos os
alimentos, com excepo de goma de guar. Alm disso, o meio de RV substitui lauril caldo
de triptose para uso com levedura seca activa. Tetrationato (TT) caldo continua a ser
utilizado como o segundo caldo de enriquecimento selectivo. No entanto, o caldo TT deve
ser incubada a 43 C durante a anlise de alimentos com alto teor de carga microbiana e
a 35 C durante a anlise de alimentos de baixa carga microbiana, incluindo goma de
guar.
A segunda mudana envolve a opo de refrigerao preenrichments incubadas e
enriquecimentos seletivos de alimentos de baixa umidade por at 72 h. Com esta opo,
as anlises das amostras pode ser iniciada to tarde na quarta-feira ou quinta-feira sem
trabalho nos finais de semana estar envolvido.
A terceira mudana envolve a reduo do perodo de incubao do gar de ferro e lisina
(LIA) inclinaes. Na primeira edio (BAM-7), triplo gar de ferro e acar (ETI) e rampas
de LIA foram incubadas a 35 C durante 24 2 horas e 48 2 h, respectivamente. Dados
no publicados tm demonstrado que a leitura das 48 h inclinaes LIA sem valor de
diagnstico. De 193 inclinaes LIA examinados, todas deram resultados definitivos dentro
de 24 2 h de incubao. No ocorreram alteraes significativas alterou o resultado final
do ensaio quando os slants foram incubadas durante 24 h adicionais. Assim, ambos os
planos inclinados TSI e LIA esto agora incubadas durante 24 2 h.
A quarta mudana envolve o procedimento de desinfeco de superfcies de casca dos
ovos. Na edio anterior (BAM-7), cascas de ovos desinfectados foram superfcie por
imerso em soluo de cloreto mercrico a 0,1% durante 1 h, seguida por imerso em
etanol a 70% durante 30 min. Cloreto de mercrio classificado como resduo perigoso, e
caro para dispor de acordo com as diretrizes da Agncia de Proteo Ambiental.Nesta
edio (MAB-8) cascas de ovos so agora por imerso durante pelo menos 10 seg num 3
desinfectadas superficialmente: soluo 1 consiste em 3 partes de 70% de lcool (etlico
ou isoproplico) para 1 parte de iodo / iodeto de potssio .
A quinta mudana envolve a preparao de amostras de ovos. O contedo dos ovos (gema
e albmen) so completamente misturados antes da anlise. Depois de misturar os
contedos do ovo, 25 g (ml) so adicionados a 225 ml de caldo de tripticase (trptica) de
soja suplementado com sulfato ferroso.
Um mtodo para a anlise de goma de guar foi includo. Quando a goma de guar
preenriched a uma proporo de 1: 9 de amostra / caldo, um altamente viscosos, mistura
resulta nonpipettable. A adio da enzima celulase ao meio preenrichment, no entanto,
resulta em uma mistura prontamente pipettable.
A.
Equipamentos e Materiais
1.
Blender e frascos esterilizados liquidificador (veja BAM Captulo 1)
2.
Estril, 16 oz (500 ml) de boca larga, frascos com tampa de rosca, estreis
de 500 ml frascos de Erlenmeyer, estreis 250 ml copos, vidro ou papel funis
estreis de tamanho apropriado, e, opcionalmente, recipientes de capacidade
apropriada para acomodar amostras composited
3.
4.
5.
6.
Incubadora, 35 2 C
7.
8.
Banho-maria, 49 1 C
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
Misturador Vortex
18.
19.
20.
21.
22.
B.
23.
24.
25.
26.
Mdia e Reagentes
Para a preparao de meios e reagentes, consulte Mtodos 967.25-967.28
em Official Methods of Analysis(1).
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.
39.
40.
41.
42.
43.
44.
45.
46.
47.
48.
49.
50.
51.
52.
53.
54.
C.
AVISO PRVIO:
Se voc est procurando BAM Captulo 5: Salmonella (Dezembro de 2007
Edition) que so incorporadas por referncia em 21 CFR Partes 16 e 118:Federal
Register final Regra (9 de julho de 2009, 74 FR 33030): Preveno de Salmonella
Enteritidis em Shell Eggs Durante Produo, Armazenamento e Transportes,
use estas verses do BAM Salmonella captulo (PDF, 189 Kb) eApndice 1:
Mtodos rpidos para deteco de Patgenos Transmitidas por Alimentos (PDF,
195 Kb). Estes 2 documentos tambm esto disponveis como um arquivo
combinado (PDF, 382 Kb). A mais recente edio do BAM Captulo
5: Salmonella continua abaixo deste aviso.
Gema de ovo seca, ovos brancos secos, ovos inteiros secos, leite
lquido (leite desnatado, leite gordo 2%, inteiras, e leitelho) e preparadas
misturas em p (bolo, biscoito, filhs, biscoito e po), frmula infantil, e
alimentao via oral ou tubo contendo ovo. De preferncia, no descongelar
as amostras congeladas antes da anlise. Se a amostra congelada deve ser
temperado para obter poro analtica, descongelar poro adequada, to
Ovos
a.
c.
3.
4.
Leite em p desnatado
a.
b.
5.
Casena
a.
c.
6.
7.
8.
10.
11.
Temperos
a.
b.
c.
13.
14.
15.
17.
18.
20.
21.
23.
25.
26.
Mamey polpa. Se congelado, amostra deve ser temperado para obter parte
analtica. Descongelar abaixo de 45 C durante <15 min com agitao contnua
Isolamento de Salmonella
1.
2.
Mix (vortex, se o tubo) e raia trs milmetros ansa (10 ul) incubadas caldo
de TT em sulfito de bismuto (BS) agar, xilose lisina desoxicolato
agar (XLD), e Hektoen entrica (HE) agar. Prepare placas BS no dia anterior
estrias e armazenar no escuro temperatura ambiente at estrias.
4.
Repita com trs milmetros ansa (10 mL) de meio de RV (para amostras de
alimentos de alta e baixa carga microbiana) e de SC caldo (para goma de guar).
5.
6.
Incubar as placas de 24 2 h a 35 C.
7.
b.
c.
e.
Toque levemente no centro da colnia para ser retirado com uma agulha de
inoculao estril e inocular ETI inclinao por estrias inclinao e esfaquear
bumbum. Sem flamejante, inocular LIA inclinao por esfaquear bunda duas
vezes e, em seguida, listando inclinao. Desde reao lisina decarboxylation
estritamente anaerbias, as inclinaes LIA deve ter bunda profunda (4
cm). Loja pegou placas de agar selectivo a 5-8 C.
9.
10.
11.
b.
E.
Identificao de Salmonella
1.
Culturas mistas. Streak culturas de agar TSI que parecem ser misturados
em agar MacConkey, HEAgar, ou agar XLD. Incubar as placas de 24 2 h a 35
C. Examinar as placas para presena de colnias que se suspeita a Salmonella.
a.
b.
c.
2.
a.
3.
a.
b.
c.
5.
b.
c.
6.
2.
3.
4.
5.
7.
2.
b.
c.
d.
2.
8.
Resultado
Teste ou
substrato
Positivo
Negativo
Salmonella
espcies
de reaco
1.
Glicose (TSI)
bunda amarelo
bumbum vermelho
2.
Lisina
descarboxilase
(LIA)
bunda roxo
bunda amarelo
3.
H S (TSI e LIA)
escurecimento
nenhum enegrecimento
4.
Urease
cor vermelhoprpura
5.
Lisina caldo
descarboxilase
cor roxa
cor amarela
6.
Fenol caldo
dulcitol vermelho
cor e / ou gs
amarelo
7.
Caldo de KCN
crescimento
nenhum crescimento
8.
Caldo Malonato
cor azul
(B)
(C)
(a)
Resultado
Teste ou
substrato
Positivo
Negativo
Salmonella
espcies
de reaco
1.
Glicose (TSI)
bunda amarelo
bumbum vermelho
9.
Teste de indol
cor vermelha na
superfcie
10.
Teste flagelar
polivalente
aglutinao
sem aglutinao
11.
Teste somtica
polivalente
aglutinao
sem aglutinao
12.
Fenol caldo de
lactose vermelho
cor e / ou gs
amarelo
13.
Fenol caldo de
sacarose vermelho
cor e / ou gs
amarelo
14.
Teste de VogesProskauer
-pink-a cor
vermelha
15.
Teste de vermelho
de metilo
(C)
(a)
1.
16.
Resultado
Teste ou
substrato
Positivo
Negativo
Salmonella
espcies
de reaco
Glicose (TSI)
bunda amarelo
bumbum vermelho
Citrato Simmons
crescimento; cor
azul
nenhum
crescimento; nenhuma
mudana de cor
(a)
Teste ou substrato
Resultados
1.
Urease
2.
Teste de indol e
flagelar
Polivalente teste
(H);
ou
teste de indol e
teste flagelar
Spicer-Edwards
1.
Resultado
Teste ou
substrato
Positivo
Negativo
Salmonella
espcies
de reaco
Glicose (TSI)
bunda amarelo
bumbum vermelho
3.
Descarboxilase
lisina e
caldo de KCN
4.
Fenol caldo de
lactose vermelho
5.
Fenol caldo de
sacarose vermelho
6.
Caldo de KCN,
teste de VogesProskauer, e
teste de vermelho
de metilo
(crescimento) positivo
positivo (rosa-a-cor vermelha)
negativo (difuso cor amarela)
(a), (b)
(b)
malonato de caldo de teste culturas positivas ainda mais para determinar se eles
so S. arizonae. No descarte culturas de caldo positivos se correspondentes culturas LIA dar
tpicas de Salmonella reaes; testar ainda mais para determinar se eles so de
Salmonella espcies.
um
9.
(a)
10.
a.
b.
c.
Referncias
1.
AOAC INTERNATIONAL. 2000. Official Methods of Analysis, 17a ed., Methods
967,25-967,28, 978,24, 989,12, 991,13, 994,04 e 995.20. AOAC INTERNATIONAL,
Gaithersburg, MD.
2.
3.
4.
5.
6.
Jacobson, AP, Gill, VS, Irvin, KA, Wang, H., e TS Hammack. 2012. Avaliao de
mtodos para preparar amostras de vegetais de folhas verdes para preenrichment
com o mtodo de cultura de Salmonella manual Analtico
Bacteriolgico. J. Food Prot. 75: 400-404.
7.
8.
9.
10.
11.
13.
14.
15.
16.
Wang, H., Gill, VS, Irvin, KA, Bolger, CM, Zheng, J., Dickey, EE, Duvall, RE,
Jacobson, AP, e TS Hammack.2012. A recuperao de Salmonella a partir de
tomates inteiros interna e externamente contaminados usando vrios procedimentos
de preparao de amostras diferentes. J. AOAC Int. 95: 1452-1456.