Síntesis y Evaluación de La Actividad Anticonvulsionante de Las Fenil Alcohol Amidas

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS
Sntesis y evaluacin de la actividad

anticonvulsionante de las
fenil alcohol amidas
T E S I S
QUE PARA OBTENER EL GRADO DE
MAESTRO EN
CIENCIAS QUIMICOBIOLGICAS
P R E S E N T A
QFB. HILDA BEATRIZ POLANCO MINAYA
MXICO, D.F.
ENERO 2011
INSTITUTO POLITECNICO
NACIONAL
SECRETARIA DE INVESTIGACION Y POSGRADO
En la Ciudad de
diciembre
del
Mexico D. F.,
siendo las
10:00
horas del d.fa
17
del mes de
2010 se reunieron los miembros de la Comisi6n Revisora de Tesis designada
par el Colegio de Profesores de Estudios de Posgrado e Investigaci6n de

de Ciencias Biol68icas
la Escuela Nacional
para examinar la tesis titulada:
Presentada par el alumna:

Polanco
Minaya
Apellido paterno
Apellido materno
Con registro:
Maestrfa en Ciencias Quimicobiol6gicas

Despues de intercambiar opiniones, los miembros de la Comisi6n manifestaron APROBAR LA
OEFENSA DE LA TES/S, en virtud de que satisface los requisitos senalados par las
disposiciones reglamentarias vigentes.
iF:?:
Dr. Sergio Enrique Meza Toledo
J_rJ\
Dra.~alero
/NST/TUTO POL/TECN/CO NAC/ONAL

SECRETARiA DE INVESTIGACION Y POSGRADO
En la Ciudad de _Mexico, D.F., el dia _05_ del mes enero del ano _2011, el (la) que suscribe
QFB. Hilda Beatriz Polanco Minaya
Quimicobiol6gicas
alumno (a) del Programa de Maestrfa en Ciencias
con numero de registro B081639, adscrito a la Escuela Nacional de
Ciencias Biol6gicas, manifiesta que es autor (a) intelectual del presente trabajo de Tesis bajo
la direcci6n del Dr. German Alberto Chamorro Cevallos y del Dr. Sergio Emique Meza
Toledo y ceden los derechos del trabajo intitulado "Sintesis y evaluaci6n de la actividad
anticonvulsionante
de las fenil alcohol amidas", al Instituto Politecnico Nacional para su
difusi6n, con fines academicos y de investigaci6n.
Los usuarios de la infonnaci6n no deben reproducir el contenido textual, graficas
datos del
trabajo sin el pemliso expreso del autor y/o director del trabajo. Este puede ser obtenido
escribiendo a la siguiente direcci6n gchamcev@yahoo.com.mx
. Si el permiso se otorga, el
usuario debera dar el agradecimiento correspondiente y citar la fuente del mismo.
erman Alberto
Chamorro
Cevallos
Este trabajo fue realizado en el Laboratorio de Quimioterapia Experimental

del Departamento de Bioqumica
y en el Laboratorio de Toxicologa
Preclnica del Departamento de Farmacia de la Escuela Nacional De Ciencias

Biolgicas del Instituto Politcnico Nacional bajo la direccin de los
Doctores Germn Alberto Chamorro Cevallos y Sergio Enrique Meza Toledo
con el apoyo de la Secretara de Investigacin y Posgrado del IPN. Proyecto
SIP20100520.
Dedicatoria
A mis padres
A quienes agradezco su apoyo incondicional durante mi preparacin
acadmica, por su preocupacin durante mis desvelos y por la confianza que
depositan en m todos los das. Para ustedes con cario.
Agradecimientos
Al Dr. Sergio Enrique Meza Toledo
Por el tiempo y asesora que me brind durante el desarrollo de este trabajo
Al Dr. Germn A. Chamorro Cevallos

Por su apoyo y dedicacin en la direccin de este trabajo
A los profesores:
Dra. Norma Paniagua Castro
Dra. Elizdath Martnez Galero
Dr. Javier Peralta Cruz
Dr. Jorge Pacheco Rosado
Dr. Javier Peralta Cruz
Por sus valiosos consejos en la revisin de este trabajo
A Dra. Norma Paniagua Castro

Por su apoyo tcnico en la realizacin del ensayo de electrochoque
A M. en C. Mara Anglica Mojica Villegas

Por su valiosa colaboracin en la realizacin del ensayo de electrochoque
A mis compaeros del laboratorio de quimioterapia experimental

Gabriel, Claudia, Amelia, Miguel Angel y Guillermo por su apoyo incondicional
Al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa (CONACYT)

Por la beca con registro 210208 que me fue otorgada para realizar mis estudios
de posgrado
Al Instituto Politcnico Nacional

Por la beca institucional que me fue otorgada para la realizacin de la tesis
Indice general
Pginas
Resumen
1. Introduccin
1.1. Epilepsia
1.2. Clasificacin de las epilepsias
1.2.1. Crisis parciales
1.2.2. Crisis generalizadas
1.3. Neuroanatoma
1.4. Bases neuroqumicas de la epilepsia
1.4.1. Neurotransmisores
1.4.2. Sistema inhibidor GABArgico
1.4.3. Sistema excitador Glutamatrgico
1.5. Modelos experimentales de epilepsia en ratn
10
1.5.1. Electrochoque
10
1.6. Tratamiento de las epilepsias
11
1.6.1. Mecanismos de accin de los frmacos antiepilpticos
11
1.7. Hexanamidas: nuevos anticonvulsionantes desarrollados en Mxico 13

2. Justificacin
18
3. Hiptesis
19
4. Objetivos
20
4.1. Objetivo general
20
4.2. Objetivos especficos
20
5. Estrategia experimental
21
5.1. Sntesis de la 3-trifluorometil-propiofenona
21
5.1.1. Obtencin de la propionaldoxima (paso 1)
21
5.1.2. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona

(paso 2)
21
5.1.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-propiofenona (paso 3)
22
5.2. Sntesis de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona
23
5.2.1. Obtencin de la 3-trifluorometil-acetanilida (paso 2A)
23
5.2.2. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida (paso 2B)
24
5.2.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina (paso 2C)
24
5.2.4. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona
(paso 3)
25
5.2.5. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona (paso 4)
25
5.3. Sntesis de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP)
26
5.3.1. Activacin del zinc
26
5.3.2. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo
26
5.3.3. Formacin del dimetil-amino-aluminio
27
5.3.4. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP) 27

5.4. Sntesis de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida
(DL-3-CF3-HEPP)
28
5.4.1. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato

de etilo
28
5.4.2. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
29
5.5. Caracterizacin de los compuestos obtenidos
29
5.6. Evaluacin de la actividad anticonvulsionante
30
5.6.1. Animales de experimentacin
30
30
6. Resultados
32
6.1. Caracterizacin de los compuestos sintetizados
32
6.1.1. Sntesis de la 3-trifluorometil-propiofenona
32
6.1.1.1. Obtencin de la propionaldoxima
32
6.1.1.2. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona
33
6.1.1.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-propiofenona
34
6.1.2. Sntesis de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona
35
6.1.2.1. Obtencin de la 3-trifluorometil-acetanilida
35
6.1.2.2. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida
38
6.1.2.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
41
6.1.2.4. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona
44
6.1.2.5. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona
45
46
6.2.1. Obtencin del DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo
46
6.2.2. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP) 49

(DL-3-CF3-HEPP)
52
6.3.1. Obtencin del DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato de etilo
52
6.3.2. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
55
58
6.4.1. Electrochoque mximo
58
7. Discusin
63
7.1. Caracterizacin de los compuestos
63
7.1.1. Espectrofotometria de infrarrojo
63
7.1.1.1. Espectros de IR de 3-trifluorometil-acetanilida y 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida

7.1.1.2. Espectro de IR de 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
64
64
7.1.1.3. Espectros de IR de la 3-trifluorometil-propiofenona y de la 3trifluorometil-4-nitro-propiofenona
64
7.1.1.4. Espectros de IR de los hidroxiesteres de DL-HEPP y del DL-3

-CF3-HEPP
64
7.1.1.5. Espectros de IR del DL-HEPP y del DL-3-CF3 HEPP
65
7.1.2. Espectrofotometra de resonancia magntica nuclear de hidrgeno (RMN-1H)
65
7.1.2.1. Espectrofotometria de RMN-1H de 3-trifluorometil-acetanilida

y de 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida
1
7.1.2.2. Espectros de RMN- H de 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
66
66
7.1.2.3. Espectros de RMN-1H del DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenilpropionato

de etilo y del DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato de etilo
7.1.2.4. Espectros de RMN-1H del DL-HEPP y del DL-3-CF3-HEPP
66
67
7.1.3. Espectrofotometria de resonancia magntica nuclear de carbono 13 (RMN-13C)
68
7.1.3.1. Espectrofotometria de RMN-13C de 3-trifluorometil-acetanilida y 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida

7.1.3.2. Espectro de RNM-13C de 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
7.1.3.3. Espectros de RMN-13C del DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo y del DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-pro-
68
68
pionato de etilo
69
7.1.3.4. Espectros de RMN-13C del DL-HEPP y del DL-3-CF3-HEPP
70
7.2. Actividad anticonvulsionante
70
70
8. Conclusiones
73
9. Referencias bibliogrficas
74
Indice de figuras
pginas
Fig. 1. Sntesis de GABA
Fig. 2. Sinapsis GABArgica
Fig. 3. Sinapsis glutamatrgica
Fig. 4. Estructura del anillo heterocclico de los anticonvulsionantes
11
Fig. 5. Estructura qumica de las pirrolidinonas
14
Fig. 6. Estructura qumica del HEPB y de sus homlogos inferiores
15
Fig. 7. Estructura qumica de los homlogos estructurales del HEPA
16
Fig. 8. Esquema general de reaccin para la sntesis de la 3-trifluorometil-propiofenona
21
Fig. 9. Esquema general de reaccin para la sntesis de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofeno
23
Fig. 10. Esquema general de reaccin para la sntesis de DL-3-hidroxi3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP)
26
Fig. 11. Esquema general de reaccin para la sntesis de DL-3-hidroxi3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
28
Fig. 12. Espectro de IR de la propionaldoxima
32
Fig. 13. Espectro de IR de la oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona
33
Fig. 14. Espectro de IR de la 3-trifluorometil-propiofenona
34
Fig. 15. Espectro de IR de la 3-trifluorometil-acetanilida
35
Fig. 16. Espectro de RMN-1H de la 3-trifluorometil-acetanilida
36
Fig. 17. Espectro de RMN-13C de la 3-trifluorometil-acetanilida
37
Fig. 18. Espectro de IR de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida
38
Fig. 19. Espectro de RMN-1H de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida
39
13
Fig. 20. Espectro de RMN- C de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida
40
Fig. 21. Espectro de IR de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
41
Fig. 22. Espectro de RMN-1H de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
42
Fig. 23. Espectro de RMN-13C de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
43
Fig. 24. Espectro de IR de la oxima de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona
44
Fig. 25. Espectro de IR de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona
45
Fig. 26. Espectro de IR de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo 46

Fig. 27. Espectro de RMN-1H de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato
de etilo
47
Fig. 28. Espectro de RMN-13C de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato

de etilo
48
Fig. 29. Espectro de IR de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida

(DL-HEPP)
49
Fig. 30. Espectro de RMN-1H de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP)
50
Fig. 31. Espectro de RMN-13C de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP)
51
Fig. 32. Espectro de IR de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)propionato de etilo
52
Fig. 33. Espectro de RMN-1H protn de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato de etilo
53
13
Fig. 34. Espectro de RMN- C de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato de etilo
54
Fig. 35. Espectro de IR de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)

propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
55
Fig. 36. Espectro de RMN-1H de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
56
13
Fig. 37. Espectro de RMN- C de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
57
Fig. 38. Curva dosis-respuesta de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP)
60
Fig. 39. Curva dosis-respuesta de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
62
Indice de tablas
Tabla 1. Dosis utilizadas de los compuestos sintetizados
30
RESUMEN
El
DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenilpropionamida
(DL-HEPP)
es
un
compuesto anticonvulsionante que se encuentra en fase clnica II de estudio

en humanos. Con el fin de incrementar su potencia anticonvulsionante, se
plane introducir el grupo trifluorometilo en su anillo aromtico para
incrementar la hidrofobicidad de dicho compuesto.
Por lo anterior, se sintetiz y evalu la actividad anticonvulsionante
del compuesto DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida (DL3-CF3-HEPP). Este se sintetiz mediante la reaccin entre la 3trifluorometil-propiofenona con el bromoacetato de etilo, en presencia del
zinc, formndose el hidroxister correspondiente, el cual al tratarse con
amoniaco di el DL-3-CF3 HEPP.
El DL-3-CF3HEPP se caracteriz mediante las tcnicas de
espectroscopa de infrarrojo y resonancia magntica nuclear de hidrgeno y
de carbono 13, y los resultados obtenidos confirmaron la estructura
planeada. Se evalu la actividad anticonvulsionante del DL-3-CF3HEPP
utilizando el modelo de electrochoque como inductor de las convulsiones en
ratones. Las dosis efectivas al 50 % encontradas para el DL-HEPP y DL-3CF3HEPP fueron de 110.6 (96.1 145.8) y 39.9 (34.1 48.7) mg/kg,
respectivamente. La sustitucin del hidrgeno 3 del anillo aromtico del DLHEPP
por
un
anticonvulsionante.
grupo
trifluorometilo
increment
su
potencia
1. Introduccin
1.1. Epilepsia
La epilepsia es una afeccin crnica, de etiologa diversa, caracterizada
por la repeticin de crisis resultantes de la hiperactividad (descarga excesiva y
simultnea) de grupos de neuronas cerebrales (foco epilptico), (McNamara,
1994).
Las neuronas estn organizadas en redes complejas, en estado de
equilibrio permanente entre mecanismos excitadores e inhibidores. Las crisis
sobrevienen en el momento en que estas redes escapan a los procesos de
control del funcionamiento neuronal normal provocando una alteracin
repentina, involuntaria, de duracin limitada que se presenta como cambios
motores, sensoriales, autonmicos o de conciencia producidos por actividad
cerebral. Las crisis se pueden presentar con o sin interrupcin de la conciencia
(capacidad de responder a estmulos del medio ambiente y de recordarlos
despus), con movimientos de los ojos o del cuerpo o sin ellos. La forma en
que una crisis epilptica se manifiesta nos informa del rea cerebral implicada.
Aproximadamente el 1% de la poblacin mundial padece de epilepsia y
es el segundo trastorno neurolgico ms frecuente. El 80% de esta poblacin
sufre de convulsiones que pueden ser controladas con medicamentos (Porter y
Pitlick, 2007).
1.2. Clasificacin de las epilepsias

En la epilepsia participan las clulas que componen el sistema nervioso.
Las
crisis
de
epilepsia
se
caracterizan
por
sus
sntomas
clnicos,
(manifestaciones motoras, sensoriales, psquicas, etc.) y por su traduccin

electroencefalogrfica. Clasificar las crisis epilpticas significa describirlas
correctamente, identificarlas para su diagnstico y para la seleccin del
tratamiento especfico. La clasificacin de las crisis epilpticas est basada en
la diferencia entre crisis focales o parciales, y aquellas que son generalizadas
desde un principio (McNamara, 1994; Rubio, 1997; Chan et al., 2003).
1.2.1. Crisis parciales.

Las crisis parciales implican inicialmente una porcin limitada de las
neuronas corticales de un solo hemisferio cerebral; pueden o no generalizarse.
Tambin puede haber o no alteracin de la conciencia. Las manifestaciones de
estas crisis dependen del rea implicada. Entre las principales variedades se
tiene:
a) Crisis parciales simples, que empiezan con la hiperactividad de un
foco epilptico en la corteza cerebral, usualmente reas temporales o frontales.
Entonces se vern sntomas que implican las emociones, como un cambio en
la conducta, sin prdida de la conciencia. La persona se encuentra alerta,
responde a las preguntas y puede recordar sus crisis. Se producen alteraciones
que slo nota el paciente (olores anormales, sensaciones extraas, miedo,
etc.). Suelen durar menos de un minuto (Commission, 1989).
De acuerdo con sus manifestaciones, se han subclasificado en: i)
motoras, implican la activacin o relajacin repentina de un msculo o de un
grupo de msculos, por lo general localizados en el lado opuesto del cuerpo
aquel en que se generan en el cerebro, ii) sensoriales, provocan alteraciones
en la percepcin sensorial. Puede referirse como hormigueo o adormecimiento
de alguna parte del cuerpo, flashes o luces de colores localizadas en el lado
contrario a donde se encuentra el foco epilptico o sonidos u olores o sabores
extraos, iii) autonmicas, se relacionan a las partes del cuerpo que son
controladas
automticamente
por
el
sistema
nervioso;
consisten
en
sensaciones viscerales, nusea, vmito, palidez o sonrojo, sudoracin,

dilatacin pupilar, incontinencia urinaria o fecal, etc. Son frecuentes en casos
de epilepsia del sistema nervioso lmbico (amgdala, hipocampo, hipotlamo) y
iv) psquicas, pueden manifestarse a nivel del lenguaje, o de la memoria.
Suelen durar algunos minutos. Finalmente, las crisis parciales pueden
generalizarse si la actividad epilptica se propaga al resto del cerebro. Este es
uno de los principales niveles de accin de los frmacos antiepilpticos: la
proteccin del tejido sano de ser invadido por la actividad anormal proveniente
del foco irritativo (Commission, 1989).
.
b) Crisis parciales complejas, tambin llamadas psicomotoras o del

lbulo temporal. Pueden presentarse en personas de cualquier edad. En estas
crisis no se pierde la conciencia pero si se altera. Las crisis duran entre 30
segundos y 3 minutos. Este tipo de crisis tambin puede generalizarse,
produciendo un ataque tnico-clnico, tnico o clnico. Los pacientes son ms
vulnerables a emociones, las cuales pueden desencadenar una crisis
(Commission, 1989).
1.2.2. Crisis generalizadas

Las crisis generalizadas implican, desde el inicio y de manera difusa,
una gran porcin de neuronas corticales y subcorticales de ambos hemisferios
cerebrales al mismo tiempo; es decir, son simtricas y sincrnicas. Las vas de
proyeccin difusa del tlamo y al tallo cerebral se encuentran involucradas en
este tipo de crisis epilpticas. Entre las principales se incluye:
a) Las ausencias, en las cuales se activa un circuito tlamo-cortical de
manera rtmica y exagerada, que llega a afectar la capacidad del sujeto para
comunicarse con su medio. Es decir, son episodios breves de detencin brusca
de la actividad motora que implican la interrupcin de la conciencia, a veces
con movimientos automticos simultneos como relamerse los labios o
arreglarse la ropa, acompandose de una mirada fija e inexpresiva,
parpadeos y reclinacin ligera de la cabeza hacia atrs. Terminan bruscamente
reanudndose la actividad previa. Su duracin es de 5-20 segundos,
recobrndose con extraordinaria rapidez la conciencia, ocurren en su gran
mayora en nios de 4 a 14 aos (Commission, 1989).
b) Crisis mioclnicas, que se caracterizan por sacudidas musculares
sbitas, repentinas, breves de un msculo o de un grupo de msculos. Pueden
ser generalizadas o localizadas, simtricas o asimtricas, sincrnicas (ocurrir al
mismo tiempo en varias partes del cuerpo) o asincrnicas. Las contracciones
abarcan frecuentemente los msculos del cuello, los hombros, los brazos, el
cuerpo o los muslos (Commission, 1989).
c) Crisis atnicas, que consisten en periodos breves de prdida del tono
muscular. Puede ocurrir en un msculo o en un grupo de msculos. Estas crisis
son ms frecuentes en la infancia y se asocian a golpes, fracturas, ya que el

paciente no tiene fuerza para meter las manos (Commission, 1989).
d) Crisis tnicas, donde se presentan contracciones musculares
repentinas, bruscas de un solo msculo o de un grupo de msculos. Tambin
hay prdida de la conciencia. Duran menos de 20 segundos y son ms
frecuentes durante el sueo y en nios con algn retardo intelectual. Suelen
iniciar con rigidez del cuello, cabeza levantada, ojos abiertos, contracciones
sbitas de los msculos respiratorios y abdominales y a veces cada al suelo.
Despus de la crisis, el paciente se muestra confuso, cansado y con dolor de
cabeza (Commission, 1989).
e) Crisis clnicas, que ocurren casi exclusivamente en el recin nacido y
nios pequeos. Se inician con prdida o alteracin de la conciencia, una
sacudida muscular brusca, breve, seguida de otras que duran varios minutos.
Son frecuentemente asimtricas y pueden predominar en alguna parte del
cuerpo (Commission, 1989).
f) Crisis tnico-clnicas, que comienzan de forma brusca e inesperada.
Se distinguen dos fases: la primera es la fase de contraccin de todos los
msculos, llamada tnica, comienza con la prdida brusca del conocimiento,
continuada con rigidez en las cuatro extremidades; en ocasiones los labios
pueden ponerse morados, debido a que en esta fase no se respira. En la
segunda fase se presentan contracciones alternas de msculos flexores y
extensores de ambos lados del cuerpo o solo a un lado del cuerpo. Las crisis
duran de 1 a 3 minutos y pueden acompaarse de mordedura de la lengua o de
las mejillas, golpes contra objetos o muebles que estn cerca del paciente y
relajacin de los esfnteres, el paciente puede caer dormido o puede quedar
confuso, desorientado o algo agitado (Commission, 1989).
1.3. Neuroanatoma
La condicin esencial para que se presente una crisis epilptica es la
presencia de un sistema nervioso. Es decir, se puede producir una crisis de tipo
epilptico en cualquier animal, e incluso en clulas nerviosas de invertebrados
(Brailowsky 1999).
El sistema nervioso central (SNC) est formado por el cerebro y la

medula espinal. El cerebro se divide en 2 hemisferios, el derecho y el izquierdo,
y el cerebelo, una estructura que se encuentra en la parte posterior de la
cabeza, inmediatamente por arriba del cuello (Brailowsky 1999).
Las principales clulas del SNC son las neuronas y la gla. Las primeras
son las encargadas de producir unas sustancias qumicas llamadas
neurotransmisores, que tienen influencia sobre las clulas vecinas. Las
neuronas estn formadas de un cuerpo celular, o soma, y de ramificaciones
que sirven para que las seales que salen o que llegan a la neurona se
transmitan. La ramificacin de salida de la seal nerviosa (impulso nervioso o
potencial de accin) se llama axn. Las ramificaciones de llegada se llaman
dendritas. El punto de contacto entre dos neuronas se denomina sinapsis. Los
axones pueden o no estar recubiertos de una envoltura compuesta de varias
capas llamada mielina. La mielina esta formada por clulas gliales y sirve para
mantener a la neurona en buen estado y para proteger la transmisin elctrica
entre las neuronas. En los axones que no estn mielinizados, los impulsos
elctricos se atenan rpidamente con la distancia. Los hemiferios cerebrales
estn unidos por una estructura formada por los axones mielinizados
provenientes de las neuronas de la corteza cerebral, el cuerpo calloso
(Brailowsky 1999).
La corteza cerebral, la capa ms externa del cerebro, en donde se
encuentra la mayor densidad de neuronas y donde residen las funciones
primordiales, se puede dividir en varias zonas: la frontal, la parietal, la temporal
y la occipital. Las funciones nerviosas estn distribuidas en la corteza de cada
hemisferio; las motoras y las sensitivas estn cruzadas: los movimientos de la
parte izquierda del cuerpo se controlan por el hemisferio derecho, y viceversa.
Adems, existen reas visuales, auditivas, gustativas y las llamadas de
asociacin, en donde las seales de varias modalidades sensoriales se
combinan. Tambin existen regiones relacionadas con las emociones y la
memoria, en particular, el lbulo temporal y, por dentro de l, el hipocampo y la
amgdala (Brailowsky 1999).
En la parte ms baja del cerebro se encuentran el tlamo y el tallo
cerebral, y dentro de ste, la formacin reticular. En estas regiones se
5
encuentran
funciones
relacionadas
con
ambos
hemisferios cerebrales
(Brailowsky 1999).
1.4. Bases neuroqumicas de la epilepsia

1.4.1. Neurotransmisores
El lenguaje a travs del cual el sistema nervioso se expresa puede
interpretarse en trminos de estados de reposo (inhibicin) o de activacin
(excitacin) (Rowasky et al., 2004).
Cada neurona tiene un potencial de reposo (-50 a -80 mV) que
representa la diferencia del voltaje entre el interior y exterior de la membrana
neuronal. A lo largo del espacio extracelular abundan los iones sodio y cloro,
mientras que en el espacio intracelular predominan el potasio, protenas y
cidos orgnicos. Por tal razn, la neurona est polarizada; es decir, el interior
es negativo con respecto al exterior. Para que una neurona produzca un
impulso nervioso (potencial de accin) (Moncayo, 2006).
Es necesario que se abran suficientes canales o poros membranales y
que dejen pasar sodio; el aumento de concentracin de cargas positivas en el
interior de la clula hace que sta se despolarice. Todo aquel estimulo que
aumente el desbalance entre la cantidad de cargas entre el interior y el exterior
de la clula ser hiperpolarizante y tendr como efecto la inhibicin. Al
contrario, los estmulos despolarizantes producirn excitacin (Brailowsky,
1999).
Los neurotransmisores son los responsables de los procesos a travs
de los cuales una neurona puede excitarse o inhibirse. Hay neurotransmisores
excitadores, como el glutamato, e inhibidores como el cido gama
aminobutrico (GABA). Tambin hay frmacos que pueden aumentar o
disminuir los efectos del glutamato, del GABA y de todos los dems
neurotransmisores presentes en el sistema nervioso (Rogawski et al., 2004;
Moncayo, 2006).
Los neurotransmisores actan gracias a su interaccin con receptores,
que son molculas que los reconocen de manera especfica. La ocupacin de
estos receptores puede hacer que se activen (agonistas) o se desactiven
(antagonistas). Por tal razn, los agonistas del receptor al GABA imitan su
6
efecto inhibitorio, mientras que los antagonistas son convulsionantes. Estos

conceptos son necesarios para entender cmo se produce la epilepsia y el
mecanismo de accin de los frmacos antiepilpticos (Martnez, 2003).
1.4.2. Sistema inhibidor GABArgico

El cido
-aminobutrico se sintetiza por la descarboxilacin del L-
glutamato, catalizada por la enzima descarboxilasa del cido glutmico (GAD)

(Fig. 1). Esta reaccin requiere como cofactor al fosfato de piridoxal. (Carvajal
et al., 1997).
O
O
H2N
H2N
GAD
OH
OH
Fosfato de piridoxal
OH
cido -aminobutrico
cido glutmico
GABA-T
O
O
OH
Semialdehdo succnico
-Cetoglutarato
O
Succinato
Ciclo de Krebs
Fumarato
Fig. 1. Sntesis de GABA
El GABA sintetizado se almacena en vesculas previo a su liberacin al

espacio sinptico. La interaccin del GABA con el receptor postsinptico
GABAA (R-GABAA) conduce a la apertura del canal de Cl-, lo que hiperpolariza
7
el potencial de membrana neural presentndose el efecto inhibitorio. Una vez

en el espacio sinptico, el GABA se recaptura a travs de una protena
transportadora localizada en las neuronas presinpticas y en las clulas gliales.
Cuando esto sucede el GABA se inactiva por transaminacin a semialdehido
succnico, reaccin catalizada por la transaminasa del GABA (GABA-T). El
semialdehdo succnico formado se oxida a succinato y entra al ciclo del Krebs.
Fig. 2. Sinapsis GABArgica (Martnez et al., 2003)
El incremento de las concentraciones de GABA en la sinapsis conduce a

la activacin de los receptores GABAB (R-GABAB) presinpticos producindose
la inhibicin en la entrada de Ca++, lo que reduce la liberacin del GABA
vesicular a la sinapsis. En consecuencia, los antagonistas de los R-GABAB
presinpticos
podran
tener
efecto
anticonvulsionante,
favoreciendo
la
liberacin de GABA (Martnez et al., 2003).
1.4.3. Sistema excitador Glutamatrgico

El L-glutamato es un neurotransmisor excitador. Acta sobre dos clases
de receptores: i) ionotrpicos, que estn asociados directamente con canales
inicos. ii) los metabotrpicos, que estn acoplados a protenas G y a la
produccin de segundos mensajeros (Martnez et al., 2003). Los receptores
ionotrpicos contienen canales permeables a cationes y se clasifican de
acuerdo con sus agonistas selectivos afines a los compuestos N-metil-Daspartato
(NMDA), cido
-amino-3-hidroxi-5-metil-4-isoxazol
propanoico
(AMPA) y kainato. El receptor NMDA es un canal catinico que permite el paso

de Ca++; mientras que los receptores para kainato son canales inicos que
cuando se abren permiten la entrada de Na+ y la salida de K+ (Fig. 3).
Fig. 3. Sinapsis glutamatrgica (Feldman et al., 1997)

La inhibicin de la entrada de los iones Na+ a travs de los canales de
Na+ dependientes de voltaje (presentes en la membrana presinptica
glutamatrgica), impide la despolarizacin que se requiere para que se abran
los canales de Ca++ dependientes de voltaje, lo que reduce la liberacin del
9
glutamato vesicular. Los compuestos que bloquean al glutamato (antagonistas

de los receptores NMDA, AMPA e inhibidores de su liberacin) presentan
efecto anticonvulsionantes (Martnez et al., 2003).
1.5. Modelos experimentales de epilepsia en ratn.

Los modelos experimentales de epilepsia (MEE) son esenciales en la
investigacin de los procesos fisiopatolgicos de las crisis convulsivas de los
diferentes tipos de epilepsia. Son tiles en el estudio de nuevos frmacos con
actividad anticonvulsionante y su posible mecanismo de accin. Para
desarrollar un MEE, generalmente se eligen mamferos que presenten
manifestaciones elctricas y conductuales similares a las de la epilepsia
humana. Existe una gran variedad de MEE en los cuales se puede inducir, en
forma aguda, un nmero variable de crisis convulsivas apreciables conductual y
electrofisiolgicamente (Sols et al., 1997; Kupferberg, 2001).
Un MEE se puede clasificar de manera prctica, lo cual permite
seleccionar el modelo ms apropiado a las necesidades del estudio. La
induccin del proceso epilptico se puede realizar administrando compuestos
qumicos por va sistmica como
el pentilentetrazol, la bicuculina, la 4-
aminopiridina, etc. Tambin se puede producir la actividad convulsiva mediante

la aplicacin de estmulos elctricos (Kupferberg, 2001).
Es un procedimiento que consiste en la aplicacin de un estimulo
elctrico a travs de dos electrodos colocados en las orejas del animal para
provocarle convulsiones generalizadas tnico-clnicas. El estmulo consiste en
pulsos rectangulares de 0.2 milisegundos de duracin con una frecuencia de 60
a 100 pulsaciones por segundo (pps). Al aplicar un electrochoque a un ratn,
se presentar un cuadro que consta de 3 fases:
a) Flexin inicial
b) Extensin tnica de miembros posteriores
c) Clonus terminal
Un compuesto qumico administrado a un animal y evaluado por este
modelo tiene poder anticonvulsionante a las dosis empleadas si es capaz de
10
impedir la presentacin de la segunda fase (Giardina, 2000; Granillo et al.,

2002; Mare et al., 2006).
1.6. Tratamiento de las epilepsias

1.6.1. Mecanismos de accin de los frmacos antiepilpticos
Los agentes antiepilpticos previenen o anulan una crisis porque son
capaces de disminuir la excitabilidad celular. Esto puede lograrse actuando
sobre los neurotransmisores implicados en la sinapsis. De esta forma, se
favorece la inhibicin GABArgica o se bloquea la neurotransmisin producida
por aminocidos excitadores. Una tercer forma de actuar de stos frmacos es
modulando los canales inicos dependientes de voltaje involucrados en la
produccin y propagacin de potenciales de accin (Rogawski et al., 2004).
Casi
el 80% de las epilepsias pueden ser controladas mediante
frmacos. Por lo tanto, la aparicin de las crisis pueden prevenirse y el sujeto

puede llevar a cabo una vida normal en todos los aspectos (Porter y Pitlick,
2007).
La seleccin y utilizacin de los anticonvulsionantes se basa en su
espectro de accin y su eficacia clnica, aunque deben considerarse otros
factores entre frmacos de similar eficacia como las reacciones adversas y las
interacciones entre ellos. La eficacia del frmaco empleado en el tratamiento
depende del tipo de epilepsia (Porter y Pitlick, 2007).
Hasta 1990, se dispona de 16 frmacos anticonvulsionantes y 13 de
ellos pueden clasificarse en 5 grupos qumicos similares: barbitricos,
hidantonas, oxazolidinedionas, succinimidas y acetilureas.
Estos grupos
tienen en comn una estructura de anillo heterocclico similar, con diversos

sustituyentes (Fig. 1). La X vara como sigue: derivados de la hidantona, -N-;
barbitricos, -C-N; oxazolidinedionas; -O-; succinimidas, -C-; acetilureas, NH2
(N est conectado al C2). R1, R2 y R3 varan dentro de cada grupo (Porter y
Pitlick, 2007).
11
R1
R2
N
O
R3
Fig. 4. Estructura del anillo heterocclico de los anticonvulsionantes
Para los frmacos con esta estructura bsica, los sustituyentes en el

anillo heterocclico determinan la clase farmacolgica. Los frmacos restantes
como la carbamazepina, el cido valproico y las benzodiacepinas,
por
mencionar algunos, son estructuralmente distintos (Porter y Pitlick, 2007).

El mecanismo GABArgico es crucial para la prevencin de la actividad
epileptiforme; por lo tanto, el aumento de la inhibicin debera ser un medio
efectivo de los compuestos antiepilpticos para disminuir la excitabilidad
anormal de los procesos epilpticos. Para lograr este efecto, se puede i)
facilitar la sntesis de GABA y su liberacin en la sinapsis. ii) disminuir su
recaptura por bloqueo de los transportadores del GABA. iii) abatir su
catabolismo por inhibicin o bloqueo de la GABA-T iv) activar los receptores
GABAA (Martnez et al., 1989).
El cido valproico (VPA) o valproato, es un cido carboxlico de cadena
ramificada simple que inhibe a las enzimas que transforman metablicamente
al GABA como a la transaminasa del GABA (GABA-T) y la deshidrogenasa del
semialdehido succnico. Estimula a la enzima glutamato descarboxilasa que
interviene en la sntesis del aminocido, produciendo tambin el incremento del
gama-hidroxibutirato (GHB), metabolito del GABA, el cual podra ser el
responsable de su accin anticonvulsionante. Tambin es capaz de bloquear
los canales de sodio. Es un frmaco utilizado con frecuencia en enfermedades
del sistema nervioso (SN), especialmente en la epilepsia (crisis generalizadas),
debido a que no presenta efectos sedantes o conductuales (Macdonal et al.,
1993).
Tambin se utiliza el fenobarbital (PB), el cual es un derivado del cido
barbitrico; su efecto antiepilptico se debe a su fijacin a un sitio regulador
alostrico en el receptor GABA y potencia la corriente mediada por los
receptores de GABAA, mediante la prolongacin del tiempo de apertura de los
12
canales de Cl-. Tambin bloquea las respuestas excitatorias inducidas por

glutamato. Su accin es prolongada en casos de epilepsias generalizadas de
inicio o secundaria a crisis parciales (Martnez et al., 1986; Macdonald et al.,
1993).
La Lamotrigina bloquea la liberacin de L-glutamato a la sinapsis es un
antiepiltico (Martnez et al., 2003).
La fenitona, debe su efecto anticonvulsionante a la inhibicin de la
liberacin de glutamato, bloquea los canales de Na+ dependientes de voltaje, e
inhibe con rapidez la generacin de potenciales de accin de membrana
repetitivos. A causa de la formacin de radicales libres en los tejidos y de
metabolitos relacionados con efectos teratognicos, ha pasado a ser frmaco
de segunda eleccin para ciertos tipos de epilepsias parciales y parciales
complejas y las tnico-clnicas secundariamente generalizadas (Macdonald et
al., 1993).
La carbamazepina (CBZ), inhibe la propagacin del foco epilptico,
disminuye las descargas e impide su propagacin. Es de eleccin en la
epilepsia con crisis parciales. Durante su transformacin metablica forma un
epxido al que se le atribuye la actividad anticonvulsionante. Este bloquea los
canales de Na+ disminuyendo la transmisin sinptica. Al comienzo del
tratamiento puede producir nuseas, cefaleas, mareos, somnolencia, diplopa e
incoordinacin. A niveles elevados puede producir retencin de agua,
alteraciones gastrointestinales y cardiovasculares. Como inductor enzimtico
(CYP3A4) puede acelerar el metabolismo de otros frmacos, por lo que suele
utilizarse sola (Macdonal et al., 1993; McNamara, 1996).
1.7. Hexanamidas: nuevos anticonvulsionantes desarrollados en Mxico

En 1964, Carvajal y cols., disearon y sintetizaron una serie de 2pirrolidinonas para que penetraran fcilmente la barrera hematoenceflica e
inhibieran a la transaminasa del cido -aminobutrico (GABA-T) y tuvieran
efecto anticonvulsionante. Los compuestos se planearon mediante la
sustitucin por los grupos etilo y fenilo, metilo y fenilo y difenilo de los tomos
de hidrgeno del carbono
del cido
-aminobutrico. Estos radicales se
escogieron porque se conoce que los grupos hidrofbicos etilo, metilo y fenilo
13
tienen una lipofilicidad que favorece su entrada al sistema nervioso central por
libre difusin. Sin embargo, los productos seran tan polares como el GABA y
por lo tanto, no penetraran la barrera hematoenceflica. Por otro lado, se haba
demostrado que la 2-pirrolidinona si atraviesa la barrera hematoenceflica y se
sugiri que la pirrolidinona en el encfalo se hidrolizaba a GABA. Finalmente,
se plane hacer los compuestos -sustituidos ciclizndolos como estn en la 2pirrolidinona (Fig. 5).
H3C
N
H
CO
5-metil-5-fenil-2-pirrolidinona
N
H
CO
5,5-difenil-2-pirrolidinona
CH3CH2
N
H
CO
5-etil-5-fenil-2-pirrolidinona
Fig. 5. Estructura qumica de las pirrolidinonas
Estos compuestos presentaron un efecto inhibidor moderado de la

GABA-T; aunque no elevaron sus concentraciones demostraron tener un
amplio perfil de actividad anticonvulsionante al proteger a los ratones contra las
convulsiones y muerte producidas por el electrochoque mximo (Carvajal,
1964), pentilentetrazol (PTZ), tiosemicarbazida, bicuculina (Prez et al., 1973),
la 4-aminopiridina (Alemn et al., 1985). Tambin mostraron accin
antiepilptica en pacientes con convulsiones tnico-clnicas o de grand mal
(Carvajal, 1976). Adems protegieron a los gatos contra el kindling (Sols et
al., 1979).
En otros estudios realizados, el DL-HEPB, produjo una disminucin en la
duracin de las postdescargas producidas por la estimulacin del hipocampo
en gatos y en algunos de ellos, bloque su propagacin hacia la sustancia
nigra y la amgdala (Tapia et al., 1979).
Estudios posteriores de resonancia magntica nuclear revelaron que la
estructura real de la 5-etil-5-fenil-pirrolidinona era una
-hidroxi- -etil- -fenil
butiramida (HEPB; Fig. 6) (Nathan et al., 1978). Este hallazgo se confirm dos
aos ms tarde, cuando elucidaron la estructura por difraccin de rayos X y se
14
aclar que el HEPB era una hidroxi-amida-aliftica (Fig. 6) (Castellanos et al.,

1981). Se reevalu la eficacia farmacolgica de estos compuestos, de los
cuales el HEPB result ser el ms potente ante varios modelos experimentales
de epilepsia. Aos ms tarde a fin de mejorar su eficacia y reducir sus efectos
txicos, se modific la estructura qumica reduciendo la cadena carbonada y se
sintetiz la segunda generacin de anticonvulsionantes homlogos al HEPB
(Fig. 6); cuyos homlogos inferiores son: 3-hidroxi-3-fenil-pentanamida (HEPP)
y 2-hidroxi-2-fenil-butiramida (HEPA) (Meza et al., 1990).
OH
OH
NH2
HEPB
O
OH
NH2
NH2
HEPP
HEPA
Fig. 6. Estructura qumica del HEPB y de sus homlogos inferiores
Al ser evaluados el HEPP y el HEPA presentaron un amplio perfil

anticonvulsionante en varios modelos de epilepsia experimental en ratn.
(Meza y cols., 1990; Javier y cols., 1996). Adems, el HEPP tiene la cualidad
de impedir el status epilepticus experimental en ratas (Brailowsky et al., 1992).
Estos estudios sugieren que el perfil anticonvulsionante de HEPP es similar al
del PB y VPA.
La farmacocintica de HEPP ha sido caracterizada en ratas (Gmez et
al., 1995a) y perros (Gmez et al., 1995b) mostrando que el HEPP se absorbe
amplia y rpidamente es distribuido en tejidos extracelulares. El HEPP presenta
baja unin a protenas plasmticas y una relacin entre la concentracin de
HEPP en plasma y cerebro de 1:1. Los grupos de ratas tratados con HEPP
mostraron un cambio en el patrn de ataque, ya que solo mostraron una dbil
convulsin clnica o una dbil convulsin tnico-clnica. El HEPP alcanza su
efecto mximo de proteccin contra los ataques inducidos por PTZ durante la
primer hora despus de su administracin en ratas. El inicio rpido de la
15
proteccin
del
HEPP
sugiere
que
penetra
rpidamente
la
barrera
hematoenceflica (Gmez et al., 1995a,b).

En 1994 Chamorro et al., publicaron que la dosis txica 50 (TD50) via
intraperitoneal (ip) del HEPP es mayor que la de HEPB y HEPA en ratones; es
decir, que el HEPP es el menos txico de los 3 compuestos; mientras que el
HEPB y el HEPA mostraron entre ellos toxicidad similar. Tambin se evalu el
potencial teratognico del HEPB despus de la administracin oral en ratones.
Se observ que slo los grupos tratados con dosis altas muestran un ligero
efecto de embriotoxicidad y fetotoxicidad. Sin embargo, el tratamiento con
HEPB no provoc malformaciones en los fetos vivos o reabsorciones.
Meza et al., (1995), publicaron la resolucin del compuesto ()-2-hidroxi2-fenilbutiramida (HEPA) y la evaluacin de la actividad anticonvulsionante de
sus enantimeros y sus TD50 respectivas. Farmacolgicamente el racemato y
sus enantimeros presentaron una actividad anticonvulsionante similar contra
las convulsiones inducidas por el pentilntetrazol (PTZ). Sin embargo, la
actividad anticonvulsionate de los enantimeros en el tiempo, muestra una
variacin entre ellos, la cual probablemente sea debido a las diferencias en su
metabolismo o distribucin.
Aos ms tarde se determin por va oral que dosis de 50, 100 y 200
mg/kg de HEPB a ratas gestantes durante el perodo de organognesis y
tampoco produjeron malformaciones congnitas en los fetos. Los resultados del
estudio histopatolgico de estos animales mostraron que los rganos
estudiados no presentaron alteraciones macroscpicas, ni lesiones focales en
la superficie externa o al corte. Microscpicamente, no se observaron
alteraciones histolgicas en riones, hgado, bazo, ganglios linfticos y
glndulas submaxilares (Feria y Castellanos, 1996). Los estudios de toxicidad
subcrnica del DL-HEPB (en ratn) administrado durante 13 semanas por va
oral en un intervalo de dosis entre 100 y 230 mg/kg tampoco causaron efectos
txicos aparentes (Chamorro, 1996).
Se ha descrito que pequeos cambios en la estructura pueden alterar el
mecanismo de accin y las propiedades clnicas de un compuesto.
Las fenil alcohol amidas son nuevos frmacos anticonvulsionantes para
combatir la epilepsia de tipo ausencia. Sin embargo, para que presentaran
16
mayor actividad anticonvulsionante se sustituyeron con flor en la posicin para

del anillo fenlico de la HEPA (Fig. 7) (Carvajal et al., 1998). Tambin, la
sustitucin con cloro en la posicin para del anillo fenlico del HEPA (Fig. 7)
mostr un incremento en la actividad anticonvulsionante del compuesto (Meza
et al., 1998). As mismo, la sustitucin con bromo en la posicin para al anillo
fenlico (Fig. 7) gener un aumento en su actividad anticonvulsionante contra
las crisis y muerte provocados por PTZ (Meza et al., 2008). Lo anterior sugiere
que el anillo fenlico y su sustitucin es importante para la actividad
anticonvulsionante de las fenil alcohol amidas y de esta manera su
metabolismo sea ms lento se refleje un aumento en su actividad
anticonvulsionante.
O
OH
O
OH
O
OH
NH2
NH2
NH2
Cl
Br
Fig. 7. Estructura qumica de los homlogos estructurales del HEPA
Tambin se han realizado estudios en los cuales se evalu la interaccin

del HEPP con algunos de los frmacos anticonvulsionantes actuales. Medina et
al., (1998), reportaron una disminucin en los niveles en sangre y en la vida
media de HEPP, cuando ste se administr conjuntamente con la fenitona. En
cambio, Garca et al., 2003, indicaron una falta de interaccin entre HEPP y
CBZ, administrados conjuntamente; es decir, la CBZ no altera los parmetros
farmacocinticos de HEPP y viceversa. Como la fenitona es transformada
metablicamente por las isoenzimas CYP2C9 y 2C19, y la CBZ es oxidada por
CYP3A4; es probable que HEPP puede ser biotransformado por diferentes
isoenzimas del citocromo P450.
17
2. Justificacin
La epilepsia es un sndrome neurolgico que afecta al 1% de la
poblacin mundial. Los frmacos antiepilpticos establecidos: difenilhidantona,
carbamacepina, clonazepam, etosuccimida, cido valproico y barbituratos son
ampliamente prescritos, aunque presentan algunos efectos colaterales
indeseables. Los antiepilpticos introducidos a partir de 1989 como: el
felbamato, la gabapentina, la lamotrigina, la oxcarbazepina, la tiagabina, el
topiramato, la vigabatrina y la zonisamida, aunque son muy eficaces con
respecto a los antiepilpticos establecidos; sin embargo un nmero significativo
de pacientes epilpticos (20-30%) son resistentes al tratamiento. Por lo anterior
es importante continuar el desarrollo de nuevos frmacos que no induzcan
dicho fenmeno.
18
3. Hiptesis
La incorporacin de un grupo hidrofbico (grupo CF3) en el
aromtico
del
DL-HEPP
conducir
un
aumento
en
su
anillo
actividad
anticonvulsionante.
19
4. Objetivos
4.1. Objetivo general
Estudiar la actividad anticonvulsionante de fluoro fenil alcohol amidas en
ratones, como parte de los ensayos pre-clnicos necesarios en el desarrollo de
un nuevo frmaco.
4.2. Objetivos especficos

1. Sintetizar los compuestos: DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DLHEPP) yDL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3CF3-HEPP).
2. Caracterizar el DL-HEPP y DL-3-CF3-HEPP mediante espectroscopa
de infrarrojo (IR) y espectroscopia de resonancia magntica nuclear de
hidrgeno (RMN 1H) y de carbono 13 (RMN 13C).
3. Evaluar la actividad anticonvulsionante del DL-HEPP y del DL-3-CF3HEPP contra las convulsiones provocadas por electrochoque en ratones.
20
5. Estrategia experimental
5.1. Sntesis de la 3-trifluorometil-propiofenona
Fig. 8. Esquema general de reaccin para la sntesis de la 3-trifluorometilpropiofenona
5.1.1. Obtencin de la propionaldoxima (paso 1)

Se hicieron reaccionar 90.8 ml de propionaldehdo con 83.5 g (1.258
moles) de clorhidrato de hidroxilamina y una solucin de 69.18 g (0.65 moles)
de carbonato de sodio disueltos en 250 ml de agua, la mezcla de reaccin se
agit durante 2 horas a una temperatura de 5 a 10 C. A continuacin, la fase
orgnica se extrajo con ter. Los extractos etreos se dejaron secar sobre
Na2SO4 anhidro durante toda la noche. Al da siguiente se filtr y se concentr
en el rotavapor a fin de eliminar el ter de la mezcla de reaccin, obtenindose
la propionaldoxima.
5.1.2. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona (paso 2)
Se hicieron reaccionar 18 ml (0.144 moles) de 3-trifluorometil-anilina con
48 ml de cido clorhdrico al 37 % y 15 ml de cido actico glacial a una
21
temperatura de -10C. Se form una pasta blanquecina y se agit hasta que se

disolvi completamente. A continuacin se adicion una solucin de nitrito de
sodio (10.8 g de nitrito de sodio disueltos en 16 ml de agua). La adicin tard
60 minutos conservando la temperatura a -10C. Entonces la mezcla de
reaccin se dej reaccionar durante 45 minutos, observndose vapores naranja
que indicaron la formacin de cido nitroso, obtenindose la sal de diazonio de
la 3-trifluorometilanilina. Por otro lado, se prepar una mezcla de cido actico
glacial (144 ml) con 30 ml de tolueno y una solucin de 0.5 g de sulfato de
cobre pentahidratado en 30 ml de agua. Cuando la temperatura de la mezcla
de reaccin alcanz los 15C se adicionaron 20 g de propionaldoxima, la sal de
diazonio obtenida previamente y una solucin de 1.7 g de sulfato de cobre
pentahidratado en 7 ml de agua. La adicin tard 30 minutos. Despus la
mezcla de reaccin se verti en un vaso de precipitado que contena 240 ml de
agua fra y 240 g de hielo y se dej agitando hasta que el hielo se fundi.
Despus la mezcla de reaccin se extrajo con dos porciones de 100 ml de ter
etlico cada una y se obtuvieron los extractos etreos reunidos, se lavaron con
200 ml de una solucin saturada de bicarbonato de sodio y con agua destilada.
Posteriormente, los extractos etreos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro
durante la noche. Al da siguiente, se filtr y el filtrado ya seco se concentr en
el rotavapor a fin de eliminar el ter y el tolueno de la mezcla de reaccin,
obtenindose finalmente la oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona (30 g).
5.1.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-propiofenona (paso 3)
La oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona (30 g) obtenida previamente
se mezcl con 20 ml de agua y 22 ml cido clorhdrico al 37%. La mezcla de
reaccin se agit durante 3 horas a 100 5C, generndose un reflujo suave.
Despus la mezcla de reaccin se enfri durante 30 minutos a temperatura
ambiente y se extrajo con dos porciones de 50 ml de ter etlico cada una. A
continuacin, los extractos etreos reunidos se lavaron con 100 ml de una
solucin saturada de bicarbonato de sodio y se dejaron secar sobre sulfato de
sodio anhidro durante la noche. Al da siguiente, se filtr y el filtrado ya seco se
concentr en el rotavapor a fin de eliminar el ter y el tolueno de la mezcla de
reaccin, obtenindose finalmente la 3-trifluorometil-propiofenona (21 g).
22
5.2. Sntesis de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona
Fig. 9. Esquema general de reaccin para la sntesis de la 3-trifluorometil4-nitro-propiofenona

5.2.1. Obtencin de la 3-trifluorometil-acetanilida (paso 2A)
Se hicieron reaccionar 376 ml (3.024 moles) de 3-trifluorometilanilina y
se agit con un agitador mecnico, lentamente se adicionaron 332.8 ml (3.530
23
mole) de anhdrido actico manteniendo la temperatura entre 40 y 60C. A los

70 minutos de adicin comenz a verse la formacin de un precipitado blanco.
La adicin total del anhdrido dur aproximadamente 2 horas. Terminada la
reaccin, el producto se lav con 2 l de agua y se calent hasta su completa
fusin. La mezcla de reaccin se enfro y para evitar que se formaran
aglomerados del compuesto, se agit mecnicamente. Se filtr el producto y se
lav dos veces ms con agua obtenindose finalmente la 3-trifluorometilacetanilida (591.4 g).
5.2.2. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida (paso 2B)
Se enfriaron 2989.7 ml de H2SO4 al 98 % hasta disminuir la temperatura
entre -5 y 0C y se adicionaron 570.4 g (2.81 moles) de la 3-trifluorometilacetanilida recin obtenida. Una vez que se disolvi toda la amida se adicion
lentamente una mezcla de cidos (163.47 ml de HNO3 fumante y 284.1 ml de
H2SO4 al 98 %, cuidando que la temperatura no excediera los 0C. La adicin
total de los cidos dur 1 hora 45 minutos aproximadamente. Durante la
adicin, la mezcla de reaccin adquiri un color naranja. Se dej en agitacin
durante 3 horas. Posteriormente se calent a 40C por una hora con agitacin
constante. Al calentar la mezcla de reaccin sta tom un color oscuro y se
verti en hielo, generndose un slido color amarillo, ste se filtr y se lav con
agua, obtenindose finalmente la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida (657.6 g).
5.2.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina (paso 2C)
Se disolvieron 640 g (2.58 moles) de la 3-trifluorometil-4-nitroanilina en
3 l de etanol. Se dej enfriar y se adicionaron lentamente 1.2 l de una solucin
de NaOH 12.5 N. La mezcla de reaccin tom un color caf oscuro y al
disolverse adquiri un color vino oscuro y una consistencia espesa. La solucin
de NaOH se enfri previamente para facilitar la adicin y evitar que aumentara
mucho la temperatura durante la adicin. Despus de adicionar la solucin de
NaOH la mezcla de reaccin se homogeniz y se refluj durante 8 horas. A
continuacin, se dej enfriar y se evapor el etanol a presin reducida. El slido
formado se filtr y se lav con suficiente agua hasta que qued de un color caf
claro, obtenindose finalmente la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina (503 g).
24
5.2.4. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona

(paso 3)
Se hicieron reaccionar 15 g (0.0728 moles) de 3-trifluorometil-4-nitro
anilina con 24 ml de cido clorhdrico al 37 % y 7.5 ml de cido actico glacial a
una temperatura de -10C, se form una pasta blanquecina y se agit hasta
que se disolviera completamente. A continuacin se adicion una solucin de
nitrito de sodio (5.4 g de nitrito de sodio disueltos en 8 ml de agua), la adicin
tard 60 minutos conservando la temperatura a -10C. Entonces la mezcla de
reaccin se dej reaccionar durante 45 minutos, observndose vapores naranja
que indicaron la formacin de cido nitroso, obtenindose la sal de diazonio de
la 3-trifluorometil-anilina. Por otro lado, se prepar una mezcla de cido actico
(72 ml) con 15 ml de tolueno y una solucin de 0.25 g de sulfato de cobre
pentahidratado disueltos en 15 ml de agua. Cuando la temperatura alcanz los
15C se adicionaron 10 g de propionaldoxima, la sal de diazonio obtenida
previamente y una solucin de 0.9 g de sulfato de cobre pentahidratado
disueltos en 3.5 ml de agua. La adicin tard 30 minutos. La mezcla de
reaccin se verti en un vaso de precipitado que contena 120 ml de agua fra y
120 g de hielo y se dej agitando hasta que el hielo se fundi. Posteriormente
la mezcla de reaccin se extrajo con dos porciones de 100 ml de ter etlico
cada una y se obtuvieron los extractos etreos, se lavaron con 50 ml de una
solucin saturada de bicarbonato de sodio y con agua destilada. Despus, los
extractos etreos reunidos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro durante la
noche. Al da siguiente, se filtr y el filtrado ya seco se concentr en el
rotavapor a fin de eliminar el ter y el tolueno de la mezcla de reaccin,
obtenindose finalmente la oxima de la 3-trifluorometil-4-nitro propiofenona.
5.2.5. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona (paso 4)
La
oxima
de
la
3-trifluorometil-4-nitro
propiofenona
obtenida
previamente se mezcl con 10 ml de agua y 11 ml cido clorhdrico al 37%. La

mezcla de reaccin se agit durante 3 horas a 100 5C, generndose un
reflujo suave. Despus se enfri durante 30 minutos a temperatura ambiente y
se extrajo con dos porciones de 50 ml de ter etlico cada una. A continuacin,
los extractos etreos reunidos se lavaron con 50 ml de una solucin saturada
25
de bicarbonato de sodio y se dejaron secar sobre sulfato de sodio anhidro

durante la noche. Al da siguiente, se filtr y el filtrado ya seco se concentr en
el rotavapor a fin de eliminar el ter y el tolueno de la mezcla de reaccin,
obtenindose finalmente la 3-trifluorometil-4-nitro propiofenona.

OH
OH
O
BrCH2COOC2H5
Zn0
NH2
(CH3)3Al/NH3
Fig. 10. Esquema general de reaccin para la sntesis de DL-3-hidroxi-3etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP)
5.3.1. Activacin del zinc

S purific el zinc (18.12 g) lavndolo con 100 ml de solucin de
hidrxido de sodio 0.1 N, seguido por un lavado con 100 ml de agua destilada,
100 ml de solucin de cido actico 0.1 N, 100 ml de agua destilada, 40 ml de
etanol, 40 ml de acetona y finalmente con 40 ml de ter etlico anhidro. Con los
lavados anteriores se elimina el xido de las partculas lo que permitira el
desarrollo correcto de la reaccin. Posteriormente, el zinc se sec, colocndolo
en un matraz con vaco en un bao de aceite a 105 - 110 C, durante 5 horas.
5.3.2. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo

Se hicieron reaccionar 15.8 g (0.2417 moles) de zinc activado con una
mezcla de reaccin que contenia 31.6 g (0.2358 moles) de propiofenona, 35.7
g (0.2138 moles) de bromoacetato de etilo, 40 ml de benceno y 10 ml de ter
etlico, recientemente secos y destilados. De sta solucin se adicionaron 10 ml
sobre el zinc, bajo una atmsfera de nitrgeno. Se calent suavemente,
evaporndose rpidamente el ter. Una vez que la reaccin comenz se
adicion el resto de la solucin, manteniendo en reflujo la mezcla de reaccin
durante 5 horas. Posteriormente, la mezcla de reaccin se hidroliz por la
26
adicin de 150 ml de cido sulfrico al 10 %. Despus la fase bencnica se

separ y se lav con dos porciones de 60 ml de cido sulfrico al 5 %, 20 ml de
carbonato de sodio al 10 %, 25 ml de cido sulfrico al 5 % y finalmente con
dos porciones de 25 ml de agua fra. Las soluciones cidas combinadas se
extrajeron con dos porciones de 50 ml de ter etlico cada una. Despus las
fases etreas y bencnicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio
anhidro. Posteriormente se filtr y el filtrado ya seco se concentr en un
evaporador rotatorio. El residuo se destil a presin reducida y se recolect la
fraccin que se destil a 134 C, obtenindose 24.9 g (55.4 % de rendimiento),
de un lquido incoloro viscoso ligeramente amarillo, correspondiente al DL-3hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo.
5.3.3. Formacin del dimetil-amino-aluminio

Se hicieron reaccionar 250 ml de amonaco y 2 g de sodio metlico
cortado en pedazos, esta mezcla de reaccin se agit durante 10 min. A
continuacin, se destilaron 4.2 ml de amonaco lquido, el cual se condens en
una trampa Dewar (la cual contena una mezcla de hielo seco-acetona). El
amonaco se colect en un matraz que contena 250 ml de cloruro de metileno
(bajo una atmsfera de nitrgeno) en fro y se le adicionaron 50 ml (0.1 moles)
de trimetilaluminio disuelto en hexanos manteniendo una agitacin constante.
5.3.4. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP)

Se prepar una mezcla de reaccin que contena 7.31 g de
dimetilaminoaluminio (0.1 moles) y 11.4 g (0.051 moles) de DL-3-hidroxi-3-etil3-fenil-propionato de etilo. Dicha mezcla de reaccin se mantuvo en agitacin
constante durante 20 minutos. Posteriormente, la mezcla se refluj durante 24
horas. La reaccin se sigui por cromatografa en capa fina hasta que ya no se
observ incremento en el producto. A continuacin, en fro se adicionaron gota
a gota 200 ml de cido clorhdrico 1 % N. Se separ la fase orgnica y la fase
acuosa se extrajo con 3 porciones de 100 ml de ter etlico cada una. Las fases
orgnicas combinadas se lavaron con 3 porciones de 50 ml de solucin
saturada de cloruro de sodio, se sec sobre sulfato de magnesio anhidro, se
filtr y se concentr en un evaporador rotatorio. El residuo oleoso se lav con
27
hexano, se filtr y se recristaliz con agua, obtenindose 4.4 g (44.4%) del DLHEPP en forma de cristales finos con un punto de fusin de 102 a 103 C.

(DL-3-CF3-HEPP)
OH
OH
O
BrCH2COOC2H5
(CH3)3Al/NH3
Zn0
CF3
NH2
O
CF3
CF3
Fig. 11. Esquema general de reaccin para la sntesis de DL-3-hidroxi-3etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3-CF3-HEPP)

5.4.1. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato
de etilo
Se hicieron reaccionar 20.22 g ( 0.3093 moles) de zinc activado con una
mezcla
de
reaccin
que
contena
40
(0.198
moles)
de
3-
trifluorometilpropiofenona, 41.3 g (0.2475 moles) de bromoacetato de etilo, 50

ml de benceno y 15 ml de ter etlico, recientemente secos y destilados. De
sta solucin se adicionaron 30 ml sobre el zinc, bajo una atmsfera de
nitrgeno. Se calent suavemente, evaporndose rpidamente el ter. Una vez
que la reaccin comenz se adicion el resto de la solucin, manteniendo en
reflujo la mezcla de reaccin durante 5 horas. Posteriormente, la mezcla de
reaccin se hidroliz por la adicin de 184 ml de cido sulfrico al 10 %.
Despus la fase bencnica se separ y se lav con dos porciones de 72 ml de
cido sulfrico al 5 %, 26 ml de carbonato de sodio al 10 %, 17 ml de cido
sulfrico al 5 % y finalmente con dos porciones de 25 ml de agua fra. Las
soluciones cidas combinadas se extrajeron con dos porciones de 70 ml de
ter etlico cada una. Despus las fases etreas y bencnicas reunidas se
secaron sobre sulfato de magnesio anhidro. Posteriormente se filtr y el filtrado
ya seco se concentr en un evaporador rotatorio. El residuo se destil a presin
reducida y se recolect la fraccin que se destil a 118 - 119 C, obtenindose
28
46.8 g (81.5 % de rendimiento) de DL--3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)propionato de etilo.
5.4.2.
Obtencin
de
DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-
Se prepar una mezcla de reaccin que contena 40 g (0.1379 moles)
de DL--3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato de etilo, 144 ml de
etanol absoluto y 144 ml de hidrxido de amonio. Dicha mezcla se enfri y se
satur con amonaco. El matraz se tap con un tapn de hule y se dej
reaccionar a temperatura ambiente durante 21 das. Despus, la mezcla de
reaccin se enfro, se destap el matraz y se adicionaron 11 g de cloruro de
sodio. Entonces la mezcla de reaccin se extrajo con 4 porciones de 100 ml de
ter etlico cada una. Los extractos etreos reunidos se secaron sobre sulfato
de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron en un evaporador rotatorio. El
residuo se lav con hexano, se filtr y se recristaliz con agua, obtenindose
29.4 g (81.68 %) del DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida, el
cual present un punto de fusin de 87 - 88 C.
5.5. Caracterizacin de los compuestos obtenidos

Tanto el DL-HEPP como el DL-3-CF3-HEPP se caracterizaron mediante
las siguientes tcnicas:
i) Espectrofotometra de infrarrojo (IR). Se us un espectrofotmetro
Perkin Elmer modelo Spectrum GX 2000, con accesorio de reflectancia
total atenuada (ATR).
ii) Resonancia magntica nuclear de hidrgeno (RMN-1H). Se utiliz un
espectrmetro JEOL Eclipse a 400 MHz, emplendose cloroformo
deuterado como disolvente. Los desplazamientos qumicos ( ) se
indican en ppm relativas al tetrametilsilano (TMS).
iii) Resonancia magntica nuclear de carbono 13 (RMN-
13
C). Se realiz
en un espectro JEOL Eclipse a 100 MHz, emplendose cloroformo

deuterado como disolvente. Los desplazamientos qumicos
( ) se
indican en partes por milln (ppm) relativas al (TMS).

Simbologa: s =seal simple; d =seal doble; t = seal triple; q = seal
29
cudruple; bs = banda ancha; m =seal mltiple.

iv) Punto de fusin. Se utiliz un aparato Mettler Toledo automtico
modelo FP62.

5.6.1. Animales de experimentacin
Se emplearon ratones machos de la cepa Swiss Webster de 25-30 g de
peso. Los ratones fueron acondicionados en jaulas con cama de aserrn en un
cuarto con temperatura de 22-24 C, humedad relativa de 40-50 %, con ciclos
de luz/oscuridad de 12 horas cada uno (9:00 a 21:00 horas/luz) y con alimento
y agua ad libitum. Se formaron grupos de 8 ratones (asignados aleatoriamente)
y se trataron con
diferentes dosis de DL-HEPP y DL-3-CF3-HEPP. Los
compuestos se disolvieron en polietilnglicol-400 (PEG - 400) al 10%; cada una

de las soluciones se prepar inmediatamente antes de su uso. Todos los
compuestos se administraron por va intraperitoneal (i.p).
Durante la evaluacin de la actividad anticonvulsionante del DL-HEPP y
del DL-3-CF3-HEPP se aplic una corriente elctrica en el cerebro a travs de
electrodos colocados en los pabellones de las orejas del ratn para inducir los
ataques a los 30 minutos posteriores a la administracin del DL-HEPP y del
DL-3-CF3-HEPP.
El estimulo que recibieron los ratones fue de 30-35 mA, en pulsaciones
de 100 Hz durante 200 ms y una amplitud de 0.5 ms por medio del estimulador
ECT-Unit 7801 Ugo Basile.
Compuesto
Dosis
(mg/Kg, ip)
DL-HEPP
79, 100, 112, 125
DL-CF3-HEPP
31, 39, 44, 50
Vehculo
PEG-400 al 10%
Tabla 1. Dosis utilizadas de los compuestos sintetizados

30
Este experimento demostr que todo ratn estimulado present la fase

tnica y clnica de la convulsin. La abolicin de la extensin tnica se tom
como punto final del ensayo despus de la administracin de los tratamientos.
Se consider que la convulsin tnica era bloqueada si la extensin tnica de
las extremidades era igual a un ngulo de 90C y se mantena esta postura
ms de 3 segundos con respecto al cuerpo del ratn.
Finalmente, se determin la DE50 y los intervalos de confianza del 95 %
del DL-HEPP y del DL-3-CF3-HEPP por el mtodo de Litchfield y Wilcoxon
(Litchfield et al., 1949) por lo que, utilizamos el programa de anlisis de probit
de la EPA para calcular los valores de CL/CE, versin 1.5.
31
6. Resultados
6.1. Caracterizacin de los compuestos sintetizados
6.1.1. Sntesis de la 3-trifluorometil-propiofenona
6.1.1.1. Obtencin de la propionaldoxima
La propionaldoxima obtenida se caracteriz mediante espectrofotometra
de infrarrojo (IR), observndose la banda de absorcin del grupo O-H de las
oximas a 3256 cm-1.
NHOH
Fig. 12. Espectro de IR de la propionaldoxima
32
6.1.1.2. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona

La oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona obtenida se caracteriz por
espectrofotometra de infrarrojo (IR), observndose las siguientes bandas de
absorcin: la del grupo O-H de las oximas 3256 cm-1 y la del grupo CF3 a 1322
y a 1072 cm-1.
NHOH
CF3
Fig. 13. Espectro de IR de la oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona
33
6.1.1.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-propiofenona

La
3-trifluorometil-propiofenona
obtenida
se
caracteriz
por

absorcin: la del grupo C=O de las cetonas en 1697 cm-1, la del grupo CF3 a
1322 y a 1071 cm-1.
CF3
Fig. 14. Espectro de IR de la 3-trifluorometil-propiofenona
34
6.1.2. Sntesis de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona

6.1.2.1. Obtencin de la 3-trifluorometil-acetanilida
La
3-trifluorometil-acetanilida
obtenida
se
caracteriz
por

absorcin: la del grupo C=O de la acetanilida en 1669 cm-1; la del grupo N-H de
la acetanilida a 3305 y a 3278 cm-1 y la del grupo CF3 a 1374 y a 1160 cm-1.
O
HN
CH3
CF3
Fig. 15. Espectro de IR de la 3-trifluorometil-acetanilida
35
La 3-trifluorometil-acetanilida tambin se caracteriz por resonancia

magntica nuclear de hidrgeno (RMN-1H), observndose los siguientes
desplazamientos qumicos:
RMN-1H ( ): 1.95 (s, 3H, H2); 7.07 (d, 1H (J=7.5 Hz), H6) 7.18 (t, 1H (J=7.8 Hz),
H5); 7.58 (d, 1H (J=7.8 Hz), H4); 7.76 (s, 1H,
H2); 9.54 (s, 1H, NH).
Fig. 16. Espectro de RMN-1H de la 3-trifluorometil-acetanilida
36
La 3-trifluorometil-acetanilida se caracteriz por resonancia magntica

nuclear de carbono (RMN-13C), observndose los siguientes desplazamientos
qumicos:
RMN-13C ( ): 24.3 (C2); 116.4 (q, C2 3JC-F = 4Hz); 120.0 (q, C4,3JC-F = 4Hz);
122.9 (C6); 124.2 (q, C3, 1JC-F = 272 Hz); 129.3 (C5); 130.8 (q, C3 2JC-F = 32
Hz); 139.7 (C1); 169.6 (C1).
Fig. 17. Espectro de RMN-13C de la 3-trifluorometil-acetanilida
37
6.1.2.2. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida

La
3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida
obtenida
se
caracteriz
por

absorcin: la del grupo N-H de la acetanilida a 3359 cm-1; la del grupo C=O de
la acetanilida en 1709 cm-1; la del grupo CF3 a 1330 y a 1137 cm-1 y la del
grupo NO2 en 858 cm-1.
O
HN
CH3
CF3
NO2
Fig. 18. Espectro de IR de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida
38
La 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida se caracteriz por resonancia

RMN-1H ( ): 2.55 (s, 3H, H2) 8.24 (d, 1H (J=9.1 Hz), H6); 8.35 (d, 1H (J=9.0
Hz), H5); 8.49 (s, 1H, H2); 10.82 (s, 1H, NH).
O
HN
1
2
1'
6'
CH3
2'
5'
4'
3'
CF3
NO2
Fig. 19. Espectro de RMN-1H de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida
39
La 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida se caracteriz por resonancia

magntica nuclear de carbono (RMN-13C), observndose los siguientes
RMN-13C ( ): 25.0 (C2); 118.5 (q, C2 3JC-F = 6 Hz); 122.5 (C5); 122.7 (C3, 1JC-F =
273 Hz); 124.9 (q, C3, 2JC-F = 34 Hz); 127.6 (C6); 142.3 (C4); 144.7 (C1); 170.5
(C1).
Fig. 20. Espectro de RMN-13C de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida
40
6.1.2.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina

La 3-trifluorometil-4-nitro-anilina se caracteriz por espectrofotometra
de infrarrojo (IR), observndose las siguientes bandas de absorcin: del grupo
N-H de la anilina a 3481 y a 3369 cm-1; la del grupo CF3 a 1322 y a 1129 cm-1 y
la del grupo NO2 en 878 cm-1.
NH2
CF3
NO2
Fig. 21. Espectro de IR de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
41
La
3-trifluorometil-4-nitro-anilina
se
caracteriz
por
resonancia

RMN-1H ( ): 4.67 (bs, 2H, NH2); 6.57 (dd, 1H (J=2.6 Hz; J=9.0Hz), H6); 6.84 (d,
1H (J=2.6 Hz), H2); 7.73 (d, 1H, (J=9.1 Hz), H5).
Fig. 22. Espectro de RMN-1H de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
42
La
3-trifluorometil-4-nitro-anilina
se
caracteriz
por
resonancia

RMN-13C ( ): 112.7 (q, C2, 3JC-F = 6 Hz); 114.9 (C6); 122.5 (q, C1, 1JC-F = 273
Hz); 126.4 (q, C3, 2JC-F = 33 Hz); 129.2 (C5); 135.9 (C4); 153.3 (C1).
Fig. 23. Espectro de RMN-13C de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
43
6.1.2.4. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-4-nitropropiofenona

La oxima de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona obtenida se
caracteriz por espectrofotometra de infrarrojo (IR), observndose las
siguientes bandas de absorcin: la del grupo O-H de las oximas a 3260 cm-1, la
del grupo CF3 a 1353 y a 1047 cm y la del grupo NO2 en 865 cm-1.
NHOH
NO 2
CF 3
Fig. 24. Espectro de IR de la oxima de la 3-trifluorometil-4-nitropropiofenona
44
6.1.2.5. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona

La
3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona
se
caracteriz
por

absorcin: la del grupo C=O de las cetonas en 1701 cm -1, la del grupo CF3 a
1305 y a 1047 cm-1 y la del grupo NO2 en 865 cm-1.
CF3
NO2
Fig. 25. Espectro de IR de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona
45

6.2.1. Obtencin del DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo
El DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo, intermediario en la
sntesis del DL-HEPP se caracteriz por espectrofotometra de infrarrojo (IR),
observndose las siguientes bandas de absorcin: la del grupo O-H en 3493
cm-1, la del grupo C=O del ster en 1710 cm-1.
Fig. 26. Espectro de IR de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo
46
El DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo, se caracteriz por

resonancia magntica nuclear de hidrgeno (RMN-1H), observndose los
siguientes desplazamientos qumicos:
RMN-1H ( ): 0.77 (t, 3H (J=7.3 Hz), H5); 1.07 (t, 3H (J=7.3 Hz), HB); 1.80 (dq,
2H (J=7.5 Hz), H4); 2.87 (dd, 2H (J=15.6 Hz; J=15.9 Hz), H2); 4.01 (q, 2H (J=7.0
Hz), HA); 4.34 (s, 1H, OH); 7.21 (t, 1H (J=7.1 Hz), H4); 7.32 (t, 2H (J=7.3 Hz),
H3,5); 7.40 (d, 2H (J=7.8 Hz), H2,6).
Fig. 27. Espectro de RMN-1H de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de

etilo
47
El DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo,
se caracteriz por
resonancia magntica nuclear de carbono (RMN-13C), observndose los

siguientes desplazamientos qumicos:
RMN-13C ( ): 0.8 (C5); 14.2 (CB); 36.1 (C4); 45.3 (C2); 60.9 (CA); 75.4 (C3); 125.4
(C3,5); 126.9 (C4); 128.3 (C2,6); 145.5 (C1); 173.1 (C1).
Fig. 28. Espectro de RMN-13C de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de

etilo
48
6.2.2. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP)

La
DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida
se
caracteriz
por

absorcin: la del grupo O-H en 3375 cm-1, la del grupo N-H en 3176 cm-1 y la
del grupo C=O de la amida en 1666 cm-1.
OH
NH2
O
Fig. 29. Espectro de IR de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DLHEPP)
49
La DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida, se caracteriz por resonancia

RMN-1H ( ): 0.74 (t, 3H, H5); 1.80 (m, 2H, H5); 2.67 (d, 2H, H2); 5.06 (s, 1H,
OH); 5.78 5.97 (bs, 2H, NH2); 7.21 (t, 1H, H4); 7.31 (t, 2H, H3,5); 7.36 (d, 2H,
H2,6).
Fig. 30. Espectro de RMN-1H de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida

(DL-HEPP)
50
La DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida, se caracteriz por resonancia

RMN-13C ( ): 7.75 (C5); 35.82 (C4); 45.92 (C2); 75.57 (C3); 125.16 (C3,5);
126.70 (C4); 128.16 (C2,6); 145.14 (C1); 174.88 (C1).
Fig. 31. Espectro de RMN-13C de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida

(DL-HEPP)
51

(DL-3-CF3-HEPP)
6.3.1. Obtencin del DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato
de etilo
El
DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato
intermediario
en
la
sntesis
del
DL-3-CF3-HEPP
se
de
caracteriz
etilo,
por

absorcin: la del grupo O-H en 3493 cm-1, la del grupo C=O del ster en 1711
cm-1.
Fig. 32. Espectro de IR de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)propionato de etilo
52
El
de
etilo
se
caracteriz por resonancia magntica nuclear de hidrgeno (RMN-1H),

observndose los siguientes desplazamientos qumicos:
RMN-1H ( ): 0.75 (t, 3H, H5); 1.07 (t, 3H, HB); 1.73 1.87 (m, 2H, H4); 2.88 (dd,
2H, H2); 4.01 (q, 2H, HA); 4.45 (bs, 1H, OH); 7.40 - 7.50 (m, 2H, H5,6); 7.57 7.6 (d, 1H, H4); 7.68 (s, 1H, H2).
Fig.
33.
Espectro
de
RMN-1H
protn
de
DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-
trifluorometilfenil)-propionato de etilo
53
El
de
etilo,
se
caracteriz por resonancia magntica nuclear de carbono (RMN-13C),

RMN-13C ( ): 7.86 (C5); 14.04 (CB); 36.04 (C4); 44.90 (C2); 61.11 (CA); 75.32
(C3); 122.30 (C4); 123.90 (C2); 124.46 (CF3); 128.8 (C5); 128.91 (C6); 130.64
(C3); 146.71 (C1); 172.97 (C1).
Fig.
34.
Espectro
de
RMN-13C
de
trifluorometilfenil)-propionato de etilo
54
6.3.2.
Obtencin
de
DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-
La
DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida
se
caracteriz por espectrofotometra de infrarrojo (IR), observndose las

siguientes bandas de absorcin: la del grupo O-H en 3325 cm-1, la del grupo NH2 de la amida en 3166 cm-1, la del grupo C=O de la amida en 1673 cm-1.
Fig. 35. Espectro de IR de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
55
La
DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida,
se
caracteriz por resonancia magntica nuclear de hidrgeno (RMN-1H),

RMN-1H ( ): 0.73 (t, 3H, H5); 1.81 (m, 2H, H4) 2.71 (s, 2H, H2); 5.33 (s, 1H, OH);
6.09 (bs, 2H NH2); 7.44 (m, 2H, H5,6); 7.54 7.57 (d, 1H, H4); 7.66 (s, 1H, H2).
Fig. 36. Espectro de RMN-1H de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
56
La
DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida,
se
caracteriz por resonancia magntica nuclear de carbono (RMN-13C),

RMN-13C ( ): 7.8 (C5); 35.91 (C4); 45.61 (C2); 75.66 (C3); 122.27 (C4); 123.88
(C2); 124.49 (CF3); 128.90 (C5,6); 130.63 (C3); 146.66 (C1); 174.97 (C1).
Fig.
37.
Espectro
de
RMN-13C
de
trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
57

6.4.1. Electrochoque mximo
Se emplearon grupos de 8 ratones macho de la cepa Swiss Webster de
25 a 30 g de peso. Para inducir las crisis epilpticas se aplic una corriente
elctrica a travs de electrodos colocados en la oreja del ratn. El estmulo fue
de 30-35 mA, en pulsaciones de 100 Hz durante 200 ms. El PEG-400 al 10 %
fue inactivo. Se evalo la proteccin del DL-HEPP y del DL-CF3-HEPP,
obtenindose las DE50 correspondientes mediante un programa de anlisis de
probit de la EPA para calcular los valores de CL/CE, versin 1.5.
6.4.1.1. Clculo de la DE50 del DL-HEPP

Dosis
(mg/Kg)
80
100
112
125
Animales
expuestos
8
8
8
8
No
convulsionaron
1
2
4
6
Respuesta
observada
0.1250
0.2500
0.5000
0.7500
Respuesta
ajustada
0.1250
0.2500
0.5000
0.7500
Respuesta
esperada
0.0854
0.3403
0.5195
0.6897
Chi - cuadrado para la heterogeneidad (calculado) = 0.599

Chi - cuadrado para la heterogeneidad
(Valor de tabla en el 0,05) = 5.991
Mu = 2.043999
Sigma = 0.106888
Error
Parmetros
Estimado
Intercepto
-14.122790
7.630762
( -29.079082,
Pendiente
9.355578
3.764177
estndar
Lmites de confianza del 95%
0.833502)
1.977792, 16.733364)
Velocidad de respuesta espontnea terico = 0.0000
58
Estimacin de LC / CE y de los valores de lmites de confianza

Exposicin
Punto
Conc.
Bajo
Alto
DL/DE 1.00
62.423
8.457
80.195
DL/DE 5.00
73.821
18.560
88.721
DL/DE 10.00
80.726
28.126
93.952
DL/DE 15.00
85.747
37.119
97.961
DL/DE 50.00
110.662
96.110
145.825
DL/DE 85.00
142.816
121.804
443.499
DL/DE 90.00
151.700
126.574
587.270
DL/DE 95.00
165.889
133.688
892.260
DL/DE 99.00
196.179
147.593
1962.296
59
10+
9+
8+
.
7+
.
..
..
...
....
6+
....
....
o...
....
....
5+
..o
....
....
... o
....
4+
....
o....
...
..
..
3+
.
-.
2+
1+
0+
-+--------------+--------+---------+---------+--------+-------+DE01
DE10
DE25
DE50
DE75
DE90
DE99
Fig. 38. Curva dosis-respuesta de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida

(DL-HEPP)
60
6.4.1.2. Clculo de la DE50 del DL-3-CF3-HEPP

Dosis
(mg/Kg)
25
31
39
44
50
Animales
expuestos
8
8
8
8
8
No
convulsionaron
1
1
3
6
6
Respuesta
observada
0.1250
0.1250
0.3750
0.7500
0.7500
Respuesta
ajustada
0.1250
0.1250
0.3750
0.7500
0.7500
Chi - cuadrado para la heterogeneidad (calculado) =
Respuesta
esperada
0.0677
0.2101
0.4708
0.6224
0.7642
1.622
Ch Chi - cuadrado para la heterogeneidad

(Valor de tabla en el 0,05) =
Mu
Sigma
7.815
1.601035
0.136048
Error
Parmetros
Estimado
Intercepto
-6.768169
3.716293
(-14.052104, 0.515766)
Pendiente
7.350353
2.339301
(2.765323, 11.935384)
estndar
Velocidad de respuesta espontnea terico = 0.0000
Estimacin de LC / CE y de los valores de lmites de confianza

Exposicin
Punto
Conc.
Bajo
Alto
DL/DE 1.00
19.255
5.969
25.670
DL/DE 5.00
23.837
10.434
29.538
DL/DE 10.00
26.710
14.000
31.953
DL/DE 15.00
28.843
17.018
33.801
DL/DE 50.00
39.906
34.165
48.739
DL/DE 85.00
55.212
46.241
104.245
DL/DE 90.00
59.620
48.791
127.045
DL/DE 95.00
66.807
52.671
170.820
DL/DE 99.00
82.703
60.502
299.119
61
10+
9+
8+
.
7+
.
..
..
...
....
6+
....
....
o ... o
....
....
5+
...
....
....o
...
....
4+
....
..o.
...
..
..
3+
.
-.
2+
1+
0+
-+--------------+--------+---------+---------+--------+-------+DE01
DE10
DE25
DE50
DE75
DE90
DE99
Fig.
39.
Curva
dosis-respuesta
de
trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3-CF3-HEPP)
62
7. Discusin
Para intentar incrementar la actividad anticonvulsionante del DL-HEPP
se sintetiz el compuesto DL-3-CF3-HEPP, que se diferencia del DL-HEPP por
la presencia de un grupo hidrofbico (CF3) en la posicin 3 del anillo
aromtico.
Para la sntesis de DL-HEPP y del DL-3-CF3-HEPP se parti de las
propiofenonas correspondientes, las cuales se transformaron mediante la
reaccin de Refotmatsky en los respectivos steres, los cuales mediante una
reaccin de amoniolisis produjeron las amidas esperadas.
La forma de obtener la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina es mediante una
acetilacin previa de la 3-trifluorometil-anilina debido a que si se hace
reaccionar esta ltima con cido ntrico y cido clorhdrico se obtendra una
mezcla de compuestos nitrados. Estos productos se deben a que se tiene un
grupo amino, el cual es un grupo activador del anillo por efecto mesomrico
positivo, haciendo as ms susceptible de nitrar las posiciones orto y para del
anillo aromtico. As la necesidad de acetilar primero la 3-trifluorometil-anilina
es para disminuir el aporte de carga electrnica del grupo amino sobre el anillo,
y dirigir la nitracin hacia la posicin para, impidiendo estricamente la nitracin
de la posicin orto. Posteriormente a partir de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
se obtuvo la correspondiente 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona.
7.1. Caracterizacin de los compuestos

7.1.1. Espectrofotometria de infrarrojo
Cuando una molcula vibra constantemente, sus enlaces se alargan y
contraen recprocamente. La absorcin de luz infrarroja produce cambios en las
vibraciones de una molcula. El espectro infrarrojo es una propiedad
caracterstica de un compuesto orgnico y puede emplearse para establecer la
identidad de los compuestos y revelar su estructura al informar los grupos que
se encuentran en la molcula. Un grupo de tomos determinado da origen a
bandas de absorcin caractersticas; es decir, un grupo especfico absorbe
frecuencias determinadas, que son caractersticas de un compuesto (Morrison
y Boyd, 1998).
63
7.1.1.1. Espectros de IR de 3-trifluorometil-acetanilida y 3-trifluorometil4-nitro-acetanilida

Los espectros de IR para la 3-trifluorometil-acetanilida y 3-trifluorometil4-nitro-acetanilida (Figs. 15 y 18, respectivamente) confirman la acetilacin al
observarse una absorbancia en 1669 y 1709 cm -1, respectivamente; estas
absorciones indican la presencia de un grupo carbonilo de amida en la
molcula. El grupo nitro, presenta absorciones caractersticas en el espectro de
IR (858 y 878 cm-1) en los intermediarios obtenidos. El grupo trifluorometil,
presenta absorciones en 1137 y en 1330 cm-1.
7.1.1.2. Espectro de IR de 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
El espectro de IR de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina (Fig. 21) muestra
seales a 3481 y 3369 cm-1, que indican la presencia de un grupo amino
correspondiente
la
anilina.
El
grupo
nitro,
presenta
absorciones
caractersticas en el espectro de IR (878 cm-1) en los intermediarios obtenidos.

El grupo trifluorometil, presenta absorciones en 1129 y en 1322 cm -1.
7.1.1.3. Espectros de IR de la 3-trifluorometil-propiofenona y de la 3trifluorometil-4-nitro-propiofenona
Los espectros de IR para la 3-trifluorometil-propiofenona y de la 3trifluorometil-4-nitro-propiofenona (Figs. 14 y 24, respectivamente) muestran
una absorbancia en 1697 y 1701 cm -1, respectivamente; estas absorciones
indican la presencia de un grupo carbonilo de cetona en la molcula. El grupo
trifluorometil, presenta absorciones en 1322 (Fig. 14) y en 1353 (Fig. 24) cm -1.
El grupo nitro, presenta absorciones caractersticas en el espectro de IR (865
cm-1) en el intermediario obtenido.
7.1.1.4. Espectros de IR de los hidroxiesteres de DL-HEPP y del DL-3-CF3HEPP

Los espectros IR del DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo y DL3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato de etilo revelan la presencia
del grupo hidroxi: 3480 cm-1 para el hidroxister del DL-HEPP, y a 3493 cm-1
para el hidroxister del DL-3-CF3 HEPP (Figs. 26 y 32, respectivamente). El
64
grupo carbonilo apareci a 1700 cm-1 para el hidroxister del DL-HEPP, y a

1711 cm-1 para el hidroxister del DL-3-CF3 -HEPP, los cuales son grupos
caractersticos de los hidroxisteres intermediarios. Las seales registradas en
el espectro IR para los grupos carbonilo e hidroxi corresponden al nmero de
onda de absorcin caracterstico para estos grupos funcionales publicados en
la bibliografa (Morrison y Boyd, 1998; Pretsch et al., 1998; Silverstein y
Webster, 1998). La incorporacin del grupo CF3 en posicin meta en el anillo
aromtico, afect solo marginalmente la energa vibracional de los grupos de
inters en la estructura del intermediario del DL-3-CF3 -HEPP, segn se
observ en su espectro IR.
7.1.1.5. Espectros de IR del DL-HEPP y del DL-3-CF3 HEPP
Los espectros IR del DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida y del DL-3hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida revelaron la presencia del
grupo hidroxi a 3375 cm-1 para DL-HEPP, y a 3325 cm-1 para el DL-3-CF3HEPP (Figs. 29 y 35, respectivamente). El grupo amino del DL-HEPP apareci
en 3176 cm-1, y a 3166 cm-1 en el DL-CF3-HEPP. El grupo carbonilo apareci
para el DL-HEPP a 1666 cm-1, y en 1673 cm-1 para el DL-3-CF3-HEPP. Las
seales registradas en el espectro IR para los grupos mencionados
corresponden al nmero de onda de absorcin caracterstico para dichos
grupos funcionales publicados (Morrison y Boyd, 1998; Pretsch et al., 1998;
Silverstein y Webster, 1998).
7.1.2. Espectrofotometra de resonancia magntica nuclear de hidrgeno

(RMN-1H)
Este espectro muestra picos de absorcin que reflejan diferencias en el
ambiente de los protones. Un conjunto de protones de un mismo entorno son
equivalentes, por lo tanto, el nmero de seales en el espectro RMN-1H revela
el nmero de conjunto de protones que contiene la molcula. La intensidad
efectiva en cada protn depende del ambiente de ste, la densidad electrnica
y la presencia de otros protones cercanos. Cada conjunto de protones
equivalentes tendr un ambiente ligeramente diferente de cualquier otro
conjunto, por lo que requerir una intensidad de campo aplicada diferente para
65
producir la misma intensidad de campo efectiva. La posicin de las seales

ayuda a identificar el tipo de protones (aromtico, aliftico, primario, secundario
o terciario). Un protn protegido comparado con un protn desnudo requiere
una intensidad de campo aplicado mayor, y uno desprotegido, una menor. La
proteccin desplaza la absorcin al campo ms alto (hacia la derecha), y la
desproteccin la desplaza al campo ms bajo (hacia la izquierda). Dichos
desplazamientos de las posiciones de absorcin de RMN causadas por la
proteccin y desproteccin electrnica se denominan desplazamientos
qumicos. La unidad para expresar dicho desplazamiento es en partes por
milln del campo magntico total aplicado utilizando como referencia al
tetrametisilano (Morrison y Boyd, 1998).
7.1.2.1. Espectrofotometria de RMN-1H de 3-trifluorometil-acetanilida y de
Los espectros de RMN-1H de la 3-trifluorometil-acetanilida y de la 3trifluorometil-4-nitro-acetanilida (figs. 16 y 19, respectivamente), muestran las
seales esperadas para las estructuras propuestas mas una seal extra, cuyo
desplazamiento (2.96 ppm y 3.67 ppm, respectivamente) es atribudo a la
presencia de agua.
7.1.2.2. Espectros de RMN-1H de 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
La incertidumbre existente acerca de la posicin en la cual se adicion el
grupo nitro se ve eliminada al obtener el espectro de RMN-1H de la 3trifluorometil-4-nitro-anilina (Fig. 22). En el se observan las seales de los 3
hidrgenos aromticos; es decir, los sistemas acoplados esperados para los
protones 2, 5 y 6.
7.1.2.3. Espectros de RMN-1H del DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenilpropionato de
etilo y del DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato de etilo.
Los desplazamientos qumicos para protones equivalentes en la cadena
aliftica (carbonos 2, 5, 2, A y B) fueron similares para los intermediarios DL-3hidroxi-3-etil-3-fenilpropionato
de
etilo
trifluorometilfenil)-propionato de etilo, pues las pequeas variaciones de

66
desplazamiento qumico no son significativas (Figs. 26 y 33). Con lo que

respecta al hidrgeno del grupo hidroxi,
ste tambin mantuvo un
desplazamiento qumico similar en ambos intermediarios. Sin embargo la

introduccin del grupo CF3 en el anillo aromtico del hidroxister del DL-HEPP
provoc cambios significativos en los desplazamientos qumicos para los
protones en dicho anillo. En el caso del hidroxister del DL-HEPP (Fig. 26), en
el anillo aromtico existen dos pares de protones equivalentes: los de los
carbonos 3 y 5 pues aparecieron en una sola seal a 7.32 ppm, as como los
protones de los carbonos 4 y 6 se encuentra en 7.40 ppm. La
electronegatividad del grupo CF3 modific los desplazamientos qumicos de los
protones en el anillo aromtico del hidroxister del DL-3-CF3-HEPP (Fig. 33).
Slo se registr un par de protones equivalentes, los de los carbonos 5 y 6
que aparecieron en una seal de 7.45 ppm en promedio. Tambin los protones
de los carbonos 2 y 4 registraron seales separadas en el caso del DL-3-CF3HEPP. Los desplazamientos qumicos registrados en los espectros de RMN-1H
para los hidroxisteres intermediarios corresponden a lo esperado (Pretsch et
al., 1998; Silverstein y Webster, 1998).
7.1.2.4. Espectros de RMN-1H del DL-HEPP y del DL-3-CF3-HEPP
Los desplazamientos qumicos para los protones equivalentes en la
cadena aliftica (carbonos 2, 4 y 5) fueron similares para el DL-HEPP y para el
DL-3-CF3-HEPP; como en el caso de los hidroxisteres, las pequeas
variaciones de desplazamiento qumico no son significativas (Figs. 30 y 36). El
hidrgeno del grupo hidroxi del DL-HEPP present un mayor desplazamiento
hacia el campo bajo si se compara con el desplazamiento del mismo grupo en
el DL-HEPP (5.33 y 5.06 ppm, respectivamente) esto debido a la introduccin
del grupo electroatractor CF3 en el anillo aromtico. Los desplazamientos
qumicos de los protones del grupo amino en el DL-HEPP indican que estos
protones no son magnticamente equivalentes pues se registran dos seales
en el espectro de RMN-1H para dicho grupo amino (5.78 y 5.97 ppm, fig. 30).
Mientras que en el DL-3-CF3-HEPP los protones del mismo grupo son casi
equivalentes apareciendo a 6.09 ppm (Fig. 36). De forma anloga a los
hidroxisteres del DL-HEPP y del DL-3-CF3-HEPP, la presencia en ste ltimo
67
del grupo CF3 en el anillo aromtico provoc diferencias significativas en los

desplazamientos qumicos para los protones en dicho anillo. Para el DL-HEPP,
los dos pares de protones equivalentes en el anillo aromtico son: los
hidrgenos 3 y 5 que aparecen en 7.31 ppm; y los protones 2 y 6 con una
seal en 7.36 ppm. En el espectro de RMN-1H del DL-3-CF3-HEPP slo se
registr un par de protones equivalentes, los unidos a los carbonos 5 y 6 que
aparecieron a 7.44 ppm; mientras que los protones de los carbonos 2 y 4
registraron seales separadas (Fig. 36). Los desplazamientos qumicos
registrados en los espectros de RMN-1H para las propionamidas corresponden
a lo esperado (Pretsch et al., 1998; Silverstein y Webster, 1998).
7.1.3. Espectrofotometria de resonancia magntica nuclear de carbono 13

(RMN-13C)
El espectro
de
resonancia
magntica nuclear de
carbono
13
complementa la espectroscopa de resonancia magntica nuclear de

hidrgeno, y est relacionado con el esqueleto carbonado. El nmero de
seales indica cuntos carbonos diferentes, o conjunto de carbonos
equivalentes, existen en una molcula. El desplazamiento qumico indica la
hibridacin de cada carbono y su ambiente electrnico con respecto a otros
carbonos vecinos o grupos funcionales.
7.1.3.1. Espectrofotometria de RMN-13C de 3-trifluorometil-acetanilida y
Los espectros de RMN-13C de 3-trifluorometil-acetanilida y 3trifluorometil-4-nitro-acetanilida (Figs. 17 y 20, respectivamente) muestran
seales a 169.6 y 170.5 ppm caractersticas de los carbonos carbonlicos de
las acetanilidas correspondientes.
7.1.3.2. Espectro de RNM-13C de 3-trifluorometil-4-nitro-anilina
En el espectro de RMN-13C de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina (Fig.
23). El grupo CF3 apareci a 122.5 ppm y la constante de acoplamiento C-F de
273 Hz corresponde a lo esperado (Pretsch et al., 1998; Silverstein y Webster,
1998).
68
7.1.3.3. Espectros de RMN-13C del DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de

etilo y del DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato de etilo.
Los desplazamientos qumicos de los carbonos de la cadena aliftica de
los hidroxisteres anlogos fueron similares ya que las pequeas variaciones
de desplazamiento qumico no son significativas (Figs. 28 y 34). Lo mismo
ocurri para el carbono 1 del anillo aromtico. El carbono 1 present el mayor
desplazamiento qumico hacia el campo bajo, y corresponde al grupo carbonilo
de acuerdo a la bibliografa (Pretsch et al., 1998; Silverstein y Webster, 1998).
Mientras que el de mayor desplazamiento hacia el campo alto es el carbono 5,
seguido del carbono B, estos dos ltimos corresponden a carbonos primarios
(Figs. 28 y 34). En el espectro de RMN-13C del hidroxister del DL-HEPP (Fig.
28) los carbonos 2 y 6 mostraron una sola seal a 128.3 ppm, esto sugiere
que son carbonos magnticamente equivalentes; lo mismo ocurre con el par de
carbonos 3 y 5 con una seal en 125.14 ppm. Los carbonos 1 y 4 mostraron
seales independientes. La introduccin del grupo CF3 en el anillo aromtico
del DL-HEPP provoc cambios en los desplazamientos qumicos para los
carbonos del anillo fenilo. En el espectro de RMN-13C (Fig. 34) del hidroxister
del DL-3-CF3-HEPP, los carbonos 5 y 6 registraron desplazamientos qumicos
prximos entre s (128.8 y 128.9 ppm, respectivamente). Los carbonos 2 y 4
tambin registraron desplazamientos qumicos similares entre s (123.90 y
122.3 ppm, respectivamente). El grupo CF3 en la posicin 3 del anillo
aromtico provoc un mayor desplazamiento del carbono 3 hacia el campo
bajo a 130.6 ppm (Fig. 34).
7.1.3.4. Espectros de RMN-13C del DL-HEPP y del DL-3-CF3-HEPP
Los desplazamientos qumicos de los carbonos de la cadena aliftica (carbonos
1 al 5) de las propionamidas anlogas fueron similares entre s; las pequeas
variaciones de desplazamiento qumico no son significativas. Lo mismo ocurri
para el carbono 1 del anillo aromtico (Figs. 31 y 37). Como en el caso de los
hidroxisteres, se observaron diferencias en los desplazamientos qumicos de
los carbonos del anillo aromtico entre el DL-HEPP y su derivado
trifluorometilado. Para el DL-3-CF3-HEPP existe un par de carbonos
69
equivalentes en el anillo aromtico, estos son los carbonos 5 y 6 pues ambos

registraron el mismo desplazamiento qumico (128.90 ppm; fig. 37), mientras
que el resto de los carbonos aromticos, incluyendo el del grupo CF3,
registraron seales independientes. Para el DL-HEPP existen dos pares de
carbonos equivalentes aromticos, stos son: los carbonos 2 y 6 que
presentaron un desplazamiento qumico de 128.16 ppm; y los carbonos 3 y 5
con un desplazamiento qumico de 125.16 ppm. La presencia del grupo CF3 en
el DL-HEPP provoc que el carbono 3 ya no fuera magnticamenteequivalente
con el carbono 5, desplazando su seal hacia el campo bajo apareciendo a
130 - 63 ppm (Fig. 37). Los espectros de RMN-13C para las propionamidas
confirmaron la identidad de los compuestos sintetizados, de acuerdo a lo
publicado en la bibliografa (Pretsch et al., 1998; Silverstein y Webster, 1998).
7.2. Actividad anticonvulsionante

La actividad anticonvulsionante de un frmaco puede ser caracterizada
por induccin de las convulsiones en ratones con pentilentetrazol (PTZ) o con
electrochoque. El PTZ es el convulsionante qumico ms utilizado. Puede ser
administrado va subcutnea a dosis de 85 mg/kg para inducir convulsiones
clnicas. Estas son bloqueadas por etosuximida, cido valproico, fenobarbital y
diazepam, frmacos capaces de controlar las convulsiones generalizadas de
ausencia y mioclnicas. De tal manera que, la induccin de las convulsiones
con PTZ es considerado un modelo experimental de epilepsia de tipo ausencia
y mioclnica. Cuatro de los frmacos ms efectivo contra las convulsiones
tnico-clnico en humanos son fenitona, carbamacepina, cido valproico y
fenobarbital. Estos frmacos bloquean el estmulo elctrico inducido con
electrochoque. Por lo tanto, el modelo de electrochoque es considerado como
un modelo experimental de epilepsia de tipo tnico-clnico generalizada en
animales (Giardina, 2000).
Se ha demostrado que las fenil alcohol amidas presentan actividad
anticonvulsionante contra las convulsiones inducidas por un amplia variedad de
modelos experimentales de epilepsia (Carvajal G et al., 1964; CarvajalSandoval G et al., 1998; Meza et al., 1990; Meza-Toledo et al., 1998; Meza et
70
al., 2008).
La DE50 de HEPA para el modelo de PTZ (100 mg/kg va i.p) se
reporta en 61 (55 - 68) mg/kg; mientras que para F-HEPA se reporta en 49 (43
- 56) mg/kg. En cambio, para el HEPP su DE50 se reporta en 54 (48 - 61)
mg/kg y la del F-HEPP en 43 (34 - 54) mg/kg. La DE50 de HEPB, 56 (51 - 61)
mg/kg, F-HEPB se reporta en 46 (41 - 51) mg/kg (Carvajal et al., 1998).
Se observ que la incorporacin de tomos de flor, cloro o bromo al
anillo
fenlico
de
las
fenil
alcohol
amidas
incrementa
su
actividad
anticonvulsionante (Carvajal et al., 1998; Meza et al., 2004; Meza et al., 2008).
Por otro lado, se ha reportado que la DE50 de HEPA para el modelo de
electrochoque es de 126 (119 133) mg/kg; mientras que para el HEPP es de
144 (139 149) mg/kg y para el HEPB se reporta en 148 (138 158) mg/kg.
Este trabajo, se llev a cabo mediante el modelo experimental de
electrochoque. El tipo y
la severidad de la convulsin dependen de la
intensidad del estmulo que se aplique a los animales para el caso del modelo
de electrochoque; mientras que en otros modelos depende de la dosis y la va
de administracin del inductor de las convulsiones. La estimulacin elctrica
puede ser transcorneal o transauricular; nosotros utilizamos la segunda por ser
ms efectiva en la generacin de la convulsin tnica y manifestacin del
clonus de las extremidades (Mare et al., 2006).
En el modelo clsico de electrochoque se aplica un estmulo de 60 Hz
durante 0.2 s con una corriente de 50 mA para ratn y 150 mA para ratas. En
trabajos previos, Meza et al. (1990), aplicaron un estmulo de 60 Hz durante 0.2
s pero disminuyeron la intensidad de la corriente a 30 35 mA y reportaron que
la DE50 de DL-HEPP es de 144 (139 - 149) mg/kg en ratones macho de la cepa
NMR1 de 28 32 g de peso; sin embargo, en este estudio se aplic un
estmulo de 100 Hz pero con la misma intensidad de corriente y con la misma
duracin que Meza et al., (1990) y se obtuvo que la DE50 de DL-HEPP es de
110.6 (96 - 146) en ratones macho de la cepa Swiss Webster de 25 30 g de
peso. Lo que sugiere la variabilidad en los resultados dependiendo de las
condiciones en las que se realice el ensayo; sin embargo la DE50 que reporta
Meza et al., (1990) cae dentro de los intervalos de confianza del valor que se
obtuvo en este trabajo.
71
Se ha descrito que pequeos cambios en la estructura pueden alterar el

mecanismo de accin y las propiedades farmacolgicas de un compuesto. Con
la finalidad de aumentar la actividad anticonvulsionante de DL-HEPP se
modific su estructura qumica, adicionndole un grupo hidrofbico (grupo CF3)
en su anillo aromtico, observndose que la DE50 de su nuevo homlogo (DLCF3-HEPP) es de 39.9 (34 - 49) mg/kg en el modelo de electrochoque. Por lo
que, la presencia de un grupo trifluorometilo en el anillo aromtico del DLHEPP aument su potencia anticonvulsionante.
El perfil de actividad anticonvulsionante de la serie homloga de las fenil
alcohol amidas sugiere que
son anticonvulsionantes contra las crisis
epilpticas de tipo ausencia. Los resultados obtenidos en nuestro trabajo

mediante el modelo de electrochoque sugieren que las fenil alcohol amidas
tambin son anticonvulsionantes contra las convulsiones tnico clnico
generalizadas.
72
8. Conclusiones
Se prepar la 3-trifluorometilpropiofenona, la cual es la cetona
intermediaria en la sntesis de los compuestos DL-3-CF3-HEPP, DL-3CF3-HEPB y DL-3-CF3-HEPA.
Se prepar la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona, la cual es la cetona
intermediaria en la sntesis de los compuestos: DL-3-CF3-4-NO2-HEPP,
DL-3-CF3-4-NO2-HEPB y DL-3-CF3-4-NO2-HEPA
Se sintetizaron los compuestos DL-HEPP y DL-3-CF3-HEPP, los cuales
se caracterizaron mediante espectroscopa de infrarrojo (IR)
resonancia magntica nuclear de hidrgeno y de carbono 13, siendo los

resultados obtenidos compatibles con sus estructuras.
Se evalu la actividad anticonvulsionante (electrochoque mximo) de
DL-HEPP y de 3 CF3-HEPP, obtenindose que la DE50 es de 110.6 (96
- 146) y 39.9 (34 49) mg/Kg, respectivamente.
La incorporacin del grupo trifluorometilo (CF3) al anillo aromtico del
DL-HEPP increment su potencia de su actividad anticonvulsionante; lo
que sugiere la presencia de un sitio hidrofbico en el receptor del DLHEPP, donde el grupo CF3 pudiera favorecer la interaccin con el
receptor y as aumentar la potencia anticonvulsionante de las fenil
alcohol amidas.
73
9. Bibliografa
Alemn V., Martnez de Muoz D. 1985. Estudio sobre la generacin de
convulsiones por drogas. Ciencia. 36:145-155.
Brailowsky S. 1999. Un poco de neuroanatoma. En: Epilepsia: enfermedad
sagrada del cerebro. La ciencia para todos/170. Fondo de Cultura
Econmico. Mxico. Pg. 29-33.
Brailowsky S., Montiel T., Hernndez E., Marescaux C., and Vergnes M. 1992.
Effects of 3-hidroxy-3-ethyl-3-phenyl-propionamide (HEPP) on rat models
of generalized and focal epilepsy. Epilepsy Res. 11:167-172.
Carvajal G. 1976. Bases bioqumicas en el desarrollo de frmacos. Gac. Md.
Mx. 111:196-202.
Carvajal G., Russek M., Tapia R., Massieu G. 1964. Anticonvulsive action of
substances designed as inhibitors of gamma-amino-butyric acid-alphaketoglutaric acid transaminase. Biochem Pharmacol. 13:1059-69.
Carvajal-Sandoval G., Jurez-Carvajal E., Cruz-Peinado C., Meza-Toledo S.E.
1998. Synthesis and pharmacological evaluation of a new homologous
series of
()-p-fluoro-phenyl alcohol amide anticonvulsants. Arzneim-
Forsch/Drug Res. 48:349-352.

Carvajal, G. y Meza, S. 1997. La planeacin de frmacos antiepilpticos en:
Epilepsia, aspectos neurobiolgicos, mdicos y sociales. A. Feria., D.
Martnez y F. Rubio (Eds.). Instituto Nacional de Neurologa y
Neurociruga, Mxico. Pgs. 173-191.
Castellano E.E., Zukerman-Schpector y Carvajal G. 1991. 4-hydroxy-4-phenylhexanamide, an anticonvulsant molecule. Acta Crystallogr. B37:284-286.
Chamorro C. G., Salazar M., Salazar S., Ulluoa V., Carvajar G., Martnez de
Muoz D. 1994. Evaluation of the toxic and teratogenic potential of the
anticonvulsant drug 4-hydroxy, 4-ethyl, 4-phenylbutiramide in mice. Arch
Med Res. 25:441-446
Chamorro C.G. 1996. Estudios de toxicologa preclnica para nuevos frmacos.
Arch Neurocien (Mx). 1:118-121.
Chan B.S., and Lowenstein D.H. 2003. Mechanisms of disease epilepsy. N Eng
J Med. 349:1257 1266.
74
Commission on classification and terminology of the International League Again

Epilepsy. 1989. Proposal for revised classification of epilepsies and
epileptic syndromes. Epilepsia 30:389-399.
Feria V.A., Castellanos R. 1996. Evaluacin del efecto anticonvulsionante de la
DL-4-hidroxi, 4-etil, 4-fenil butiramida (HEPB) y de la DL-3-hidroxi, 3-etil,
3-fenil propionamida (HEPP) sobre la actividad convulsiva inducida por
glutamato monosdico en ratn adulto. Arch. Neurocien. (Mx). 1:81-84.
Feldman
R.S.,
Meyer
neurotransmitters
J.S.
Quenzer
and
L.F.
histamine.
(1997).
en:
Amino
acids
Principles
of
neuropsychopharmacology. Sinauer. 1a edicin. 391-408. USA.

Garca A.L., Medina R.L., Prez M.R., and Jung C.H. 2003. Lack of interaction
between HEPP, a new anticonvulsant agent, and carbamazepine in
rabbits. Biopharm Drug Disposition. 24:205-209.
Giardina W.J. 2000. Anticonvulsonant determination using electroshockinduced convulsions in the mouse. En: Model of epilepsy: electroshock
and chemical induced convulsion in the mouse. Curr Protocols Pharm
5.22.1 5.22.22
Gmez Lisbeth E., Cueva Roln R., and Lehmann F.P. 1995a. Disposition
kinetic of HEPP in rats after intravenous, oral, and intraperitoneal
administration.
Correlation
of
plasma and
brain
levels with
the
anticonvulsant effect. Biopharm Drug Dispos. 16: 77-89.

Gmez Lisbeth E., Lehmann F.P. 1995b. Pharmacokinetic of the novel
anticonvulsant HEPP after single intravenous administration of three
different doses in dogs. Biopharm Drug Dispos. 16:105-112
Javier A.M., Snchez G., Martnez de Muoz. 1996. Espectro de accin
antiepilptica de la DL-4-hidroxi, 4-etil, 4-fenil butiramida y de sus
homlogos inferiores. Arch Neurocien (Mx). 1:76-80.
Kupferberg H. 2001. Animal model used in the screening of antiepileptic drugs.
Epilepsia 42:4-12.
Litchfield, J.T. y Wilcoxon, F. (1949). A simplified method of evaluating doseeffect experiments. J. Pharmacol. Exp. Ther. 96: 99-113.
Macdonald R.L. and Kelly K.M. (1993). Antiepileptic drug mechanisms of action.
Epilepsia 34:S1-S8.
75
McNamara J.O. 1994. Cellular and molecular basic of epilepsy. J Neurosci

14:3413-3425.
McNamara J. 1996. Frmacos eficaces para el tratamiento de la epilepsia. En:
Las bases farmacolgicas de la terapetica, Hardman J.G. Linabre L.E.,
Molinoff P.B. Goodman G.A. 9 edicin. Ed. Mc Graw Hill Interamericana
pp. 491-519.
Mare P., and Kubov H. 2006. Electrical stimulation-induced model of
seizures. en: Model of seizure and epilepsy. A. Pitknen., P.A.
Schwartkruin and S.L. Mosh. Elsevier Academic Press. Pp. 153-159.
Martnez de Muoz, D. y S. Meza. 2003. Mecanismos bioqumicos de los
antiepilpticos, en: Farmacologa clnica. V. Uriarte, y S. Trejo (Eds.).
Editorial Trillas. Pgs. 799-806.
Martnez D.M., Pacheco M.F. 1986. Frmacos antiepilpticos sintetizados en
Mxico. Arch Neuroscien 1:58.
Medina L., Garca L., Prez R., Fernandez A., Jung H. 1998. Pharmacokinetic
interaction in rabbits between a new anticonvulsant, DL-3-hydroxy-3-ethyl3-phenylpropionamide, and phenytoin. J Pharm Pharmacol. 50:13931396.
Meza Toledo S.E., Zenteno Garca S.T., Jurez Carvajal E., Martnez de Muoz
D., Carvajal S.G. 1990. A new homologous series of anticonvulsants:
phenyl-alcohol-amides.
Synthesis
and
pharmacological
evaluation.
Arzneim-Forsch/Drug Res. 40:1289-91.

Meza Toledo S.E., Ortega Gonzalez C., Jurez Carvajal E., Carvajal Sandoval
G. 1995. Stereoselective anticonvulsant activity of the enantiomers of ()2-hydroxy-2-phenylbutiramide. Arzneim-Forsch/Drug Res. 45:756-759.
Meza-Toledo S.E., Juarez-Carvajal E., Carvajal-Sandoval G. 1998. Synthesis of
a new homologous series of p-chlorophenyl alcohol amides, and their
testing as potential GABAB receptor antagonists. Arzneim-Forsch/Drug
Res. 48:797-801.
Meza-Toledo S.E., Yasukate-Kimoto L., Alcal-Rentera M., DominguezRodriguez M.A., Jaime-Rodrguez R., Nava-Arzaluz M.G., Gutierrez-Laflor
G., Peralta-Cruz J., Carvajal-Sandoval G. 2008. Synthesis of DLhydroxybenzenamides anticonvulsants. Arzneim-Forsch/Drug Res. 58:3-8.
76
Moncayo A.E. 2006. Fisiopatologa de la epilepsia. En: Manual de epilepsia

para el pediatra y el mdico general. Trillas pp. 26-30.
Morrison, R. y Boyd, R. (1998). Espectroscopa y estructura, en: Qumica
Orgnica. 5 edicin. Addison Wesley Longman. Mxico. Pgs. 564-602.
Nathan P.J., Massieu G., Carvajal G., Tapia R. 1978. Gamma-hydroxy, gammaphenyl caproamide, an anticonvulsant molecule. Rev. Lat. Am. Qum.
9:90-91.
Prez de la Mora M., Tapia R. 1973. Anticonvulsant effect of 5-ethyl, 5-phenyl,
2-pyrrolidinone and its posible relationship to
-aminobutyric acid-
dependent inhibitory mechanism. Biochem Pharmacol. 22:2635-3639.

Porter, R. J. y W. H. Pitlick. (1993). Antiepilpticos, en: Farmacologa bsica y
clnica. B. G. Katzung. El Manual Moderno. Mxico. Pgs. 291-292.
Pretsch, E., Seibl, J., Simon, W. (1998). Tablas para la determinacin
estructural por mtodos espectroscpicos. Springer. Espaa.
Rogawski M.A. and Lscher W. 2004. The neurobiology of antiepileptic drugs.
Neurosci 5:553-564.
Rubio, F. (1997). Aspectos generales y clasificacin de la epilepsia en:
Epilepsia, aspectos neurobiolgicos, mdicos y sociales. A. Feria. D.
Martnez y F. Rubio (Eds.). Instituto Nacional de Neurologa y
Neurociruga. Mxico. Pgs. 1-23.
Silverstein, R. M., Webster, F. X. 1998. Spectrometric Identification of Organic
Compounds. John Wiley & Sons, Inc. USA.
Sols H., Jurado J.L., Fernndez G.A. 1979. En: La accin de la butiramida
sobre el desarrollo del Kindling y el Kindling amigdalino ya establecido
en el gato. Neurobiologa,
Symposium Internacional. Eds: Velasco-
Surez M., Escobedo Ros F., pp:83-94. Instituto Nacional de Neurologa

y Neurociruga, Mxico.
Sols H., Bravo J., Galindo-Morales A., Lpez E. 1997. Participacin de la
inhibicin recurrente en algunos modelos de convulsiones generalizadas
En: epilepsia, Aspectos neurobiolgicos, mdicos y sociales, Feria V.A.,
Martnez de Muoz D., y Rubio D.F., (Eds.), 1a edicin. pp 66-84. Instituto
Nacional de Neurologa y Neurociruga, Mxico.
77
Tapia R., Drucker Coln R.R., Meza-Ruiz G., Durn L., Levi G. (1979).
Neurophysiological and neurochemical studies on the action if the
anticonvulsant g-hydroxy-g-ethyl-g-phenyl-butiramide. Epilepsia. 20:135145.
78

Síntesis y Evaluación de La Actividad Anticonvulsionante de Las Fenil Alcohol Amidas

Uploaded by

Document Information

Original Title

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

Síntesis y Evaluación de La Actividad Anticonvulsionante de Las Fenil Alcohol Amidas

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

Sntesis y evaluacin de la actividad

SECRETARIA DE INVESTIGACION Y POSGRADO

horas del d.fa

2010 se reunieron los miembros de la Comisi6n Revisora de Tesis designada

par el Colegio de Profesores de Estudios de Posgrado e Investigaci6n de

para examinar la tesis titulada:

Presentada par el alumna:

Maestrfa en Ciencias Quimicobiol6gicas

Dr. Sergio Enrique Meza Toledo

/NST/TUTO POL/TECN/CO NAC/ONAL

alumno (a) del Programa de Maestrfa en Ciencias

con numero de registro B081639, adscrito a la Escuela Nacional de

de las fenil alcohol amidas", al Instituto Politecnico Nacional para su

difusi6n, con fines academicos y de investigaci6n.

Los usuarios de la infonnaci6n no deben reproducir el contenido textual, graficas

usuario debera dar el agradecimiento correspondiente y citar la fuente del mismo.

Este trabajo fue realizado en el Laboratorio de Quimioterapia Experimental

Preclnica del Departamento de Farmacia de la Escuela Nacional De Ciencias

Al Dr. Germn A. Chamorro Cevallos

A Dra. Norma Paniagua Castro

A M. en C. Mara Anglica Mojica Villegas

A mis compaeros del laboratorio de quimioterapia experimental

Al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa (CONACYT)

Al Instituto Politcnico Nacional

1.2. Clasificacin de las epilepsias

1.2.1. Crisis parciales

1.2.2. Crisis generalizadas

1.4. Bases neuroqumicas de la epilepsia

1.4.2. Sistema inhibidor GABArgico

1.4.3. Sistema excitador Glutamatrgico

1.5. Modelos experimentales de epilepsia en ratn

1.6. Tratamiento de las epilepsias

1.6.1. Mecanismos de accin de los frmacos antiepilpticos

1.7. Hexanamidas: nuevos anticonvulsionantes desarrollados en Mxico 13

4.1. Objetivo general

4.2. Objetivos especficos

5.1. Sntesis de la 3-trifluorometil-propiofenona

5.1.1. Obtencin de la propionaldoxima (paso 1)

5.1.2. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona

5.1.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-propiofenona (paso 3)

5.2. Sntesis de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona

5.2.1. Obtencin de la 3-trifluorometil-acetanilida (paso 2A)

5.2.2. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-acetanilida (paso 2B)

5.2.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-anilina (paso 2C)

5.2.4. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona

5.2.5. Obtencin de la 3-trifluorometil-4-nitro-propiofenona (paso 4)

5.3. Sntesis de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP)

5.3.1. Activacin del zinc

5.3.2. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionato de etilo

5.3.3. Formacin del dimetil-amino-aluminio

5.3.4. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-fenil-propionamida (DL-HEPP) 27

5.4.1. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionato

5.4.2. Obtencin de DL-3-hidroxi-3-etil-3-(3-trifluorometilfenil)-propionamida (DL-3-CF3-HEPP)

5.5. Caracterizacin de los compuestos obtenidos

5.6. Evaluacin de la actividad anticonvulsionante

5.6.1. Animales de experimentacin

6.1. Caracterizacin de los compuestos sintetizados

6.1.1. Sntesis de la 3-trifluorometil-propiofenona

6.1.1.1. Obtencin de la propionaldoxima

6.1.1.2. Obtencin de la oxima de la 3-trifluorometil-propiofenona

6.1.1.3. Obtencin de la 3-trifluorometil-propiofenona