ESTERILIZACIN, DESINFECCIN Y TRATAMIENTO DE LOS

MATERIALES INFECTADOS
INDICE
Introduccin...................................................................................................................................... pag 1

Esterilizacin............................................................................................................................
.. pag 1
Calor al
rojo.............................................................................................................................pag 1
Calor
seco............................................................................................................................... pag 1
Carga.............................................................................................................................
pag 1
Tiempos y temperaturas de carga..................................................................................
pag 1
Control de los esterilizadores de aire
caliente......................................................................... pag 2
Vapor a
presin....................................................................................................................... pag 2
Carga del autoclave.......................................................................................................
pag 2
Tipos de autoclave........................................................................................................ pag
2
Olla a presin (instrucciones).................................................................................... pag 3
Autoclaves con eliminacin del aire por desplazamiento de la gravedad.................. pag 3
Pruebas de eficacia del autoclave..................................................................................
pag 4
Proteccin personal.......................................................................................................
pag 5

Tyndallizacin.........................................................................................................................
pag 5


Filtracin.................................................................................................................................
pag 6
Tipos de filtros.............................................................................................................. pag
6

Desinfeccin.............................................................................................................................
. pag 6
Tipos de desinfectantes y usos en el
laboratorio.................................................................... pag 7
Fenoles lquidos............................................................................................................ pag
7
Hipocloritos.................................................................................................................. pag
7
Aldehidos...................................................................................................................... pag
8
Alcohol y mezclas de alcoholes.................................................................................... pag
8
Compuestos de amonio cuaternario..............................................................................
pag 8
Iodoforos....................................................................................................................... pag 8
Compuestos mercuriales............................................................................................... pag

9
Precauciones con el uso de
desinfectantes.............................................................................. pag 9
La comprobacin de los desinfectantes en el
laboratorio....................................................... pag 9
Ensayos de los fabricantes............................................................................................
pag 9
Prueba de capacidad de Kesley - Sykess..................................................................... pag
10
La prueba de estabilidad ...............................................................................................
pag 11
La prueba de utilizacin ................................................................................................
pag 11

 Mtodo ....................................................................................................................... pag

11
Resultados .................................................................................................................. pag
11
El uso de desinfectantes en
hospitales .................................................................................... pag 12
Tratamiento y eliminacin de los materiales
infectados ............................................................ pag 12
Recipientes para material infectado
desechado ...................................................................... pag 12
Cestos y bolsas de un solo
uso ................................................................................................ pag 13
Vasijas de
desechos ................................................................................................................. pag 13
Eleccin del recipiente ..................................................................................................
pag 13
Dilucin correcta ...........................................................................................................
pag 13
Uso razonable ................................................................................................................
pag 13
Vaciado regular .............................................................................................................
pag 14
Vasijas de desecho
secas ......................................................................................................... pag 14

Pipeteros .................................................................................................................................
. pag 14
Bolsas de plstico para materiales
combustibles ..................................................................... pag 14
Mtodos de tratamiento y
eliminacin .................................................................................... pag 14
3.7.1 Organizacin del tratamiento ............................................................................................. pag 15
3.7.2 Procederes para diversos artculos ..................................................................................... pag 16
3.7.2.1 Material de vidrio contaminado ................................................................................. pag 16

3.7.2.2 Vasijas de desecho ..................................................................................................... pag 16

3.7.2.3 Pipetas reutilizables ................................................................................................... pag 16
3.7.2.4 Muestras de orina de 24 horas ................................................................................... pag 16
4 Incineracin ............................................................................................................................ pag 17
INTRODUCCION
La esterilizacin implica la destruccin de todos los microorganismos, incluyendo los esporos.
La desinfeccin supone la destruccin de los microorganismos vegetativos que pueden causar
enfermedades o en el contexto de las industrias de alimentos, los que pueden producir alteraciones. La
desinfeccin no mata necesariamente a los esporos.
Ambos trminos no son sinnimos.
ESTERILIZACION
Los mtodos utilizados corrientemente en los laboratorios microbiolgicos son:

Calor al rojo (flameado).

Calor seco (aire caliente).

Vapor a presin (esterilizacin al autoclave).

Vapor fluente (tyndallizacin).

Filtracin.
La incineracin es tambin un mtodo de esterilizacin, pero se aplica fuera del laboratorio para la
eliminacin final de los desechos producidos en l y se considera por separado.
CALOR AL ROJO
Los instrumentos tales como las asas y alambres de siembra y varillas secas se esterilizan
calentndolas en la llama de un mechero bunsen hasta que se ponen al rojo. Los microincineradores se
recomiendan para esterilizar asas de inoculacin contaminadas con material muy infeccioso (espulos
tuberculosos) para evitar el riesgo de chisporrotear partculas contaminadas sobre las zonas de
alrededor.
CALOR SECO
Se aplica en un horno calentado elctricamente que se controla mediante termostatos y que est
provisto de un gran ventilador circulante que asegura la uniformidad de la temperatura en todas las
partes del contenido. Los equipos modernos disponen de controles electrnicos que pueden llevar la
temperatura al nivel requerido, mantenerla en ese punto durante un tiempo establecido previamente y
desconectar seguidamente la corriente. En algunos modelos se incorpora una cerradura solenoide para
impedir que la estufa sea abierta antes de que se complete el ciclo. Este dispositivo salvaguarda y
protege al personal de quemaduras accidentales.

El material que puede esterilizarse por este mtodo incluye placas de petri, matraces y pipetas de vidrio
y objetos de metal. Pueden adquiriese de diversos proveedores cajas y cilindros metlicos que
almacenan convenientemente el material de vidrio durante la esterilizacin y lo conservan estril hasta
su utilizacin.
CARGA
El aire no es un buen conductor del calor, por lo que las estufas deben cargarse sin apretar el
contenido, de forma que queden abundantes espacios para permitir que circule el aire caliente.
TIEMPOS Y TEMPERATURAS DE CARGA
Cuando se calculan los tiempos de funcionamiento para el equipo de esterilizacin por aire caliente,
deben considerarse tres perodos:

El perodo de ascenso de la temperatura, que es el tiempo necesario para que toda la carga
alcance la temperatura de esterilizacin; puede llevar alrededor de 1 hora.

Los perodos de mantenimiento a las diferentes temperaturas de esterilizacin

recomendadas por el Medical Rescarch Councill que son 160C durante 45 minutos, 170C
durante 18 minutos, 180C durante 7 1/2 minutos y 190C durante 1 1/2 minutos.

El perodo de enfriamiento, que se realiza gradualmente para prevenir la rotura del

material de vidrio como consecuencia de un descenso demasiado rpido de la temperatura.
Este perodo puede llevar 2 horas.
CONTROL DE LOS ESTERILIZADORES DE AIRE CALIENTE
Los ensayos para los hornos de funcionamiento elctrico provistos de ventilador se describen en la
Norma Britnica 34212.
El equipo de esterilizacin por aire caliente, debe calibrarse con termopares cuando el aparato se
instala y comprobarse con termopares posteriormente cuando se considere necesario.
El control de rutina ordinario puede efectuarse sencillamente con la ayuda de tubos de Browne. Los
tubos de Browne de Tipo 3 (punto verde) se utilizan para estufas provistas de ventilador.
VAPOR A PRESION
Se realiza Mediante la esterilizacin en autoclave. Las bacterias se matan ms fcilmente por el calor
hmedo (vapor saturado) que por el calor seco. El vapor mata las bacterias por desnaturalizacin de
sus protenas. Una condicin de seguridad convenida para la esterilizacin es utilizar vapor a 121C
durante 15 minutos. Esta temperatura es adecuada para medios de cultivo, soluciones acuosas,
tratamiento de cultivos y muestras desechadas, etc.
El aire tiene una influencia importante en la eficacia de la esterilizacin al vapor de agua, porque su
presencia modifica la relacin presin/temperatura. Por ejemplo: la temperatura del vapor saturado a
1,054 kg/cm es 121C, siempre que se haya extrado todo el aire de la vasija, Si slo se ha eliminado la
mitad del aire, la temperatura de la mezcla aire-vapor que resulta es de solamente 112C a la misma
presin. Adems, la existencia de bolsas de aire impedir la penetracin del vapor.

Debe eliminarse primero todo el aire que rodea y penetra en la carga a antes de que pueda comenzar la
esterilizacin por vapor.
CARGA DEL AUTOCLAVE

Una buena esterilizacin por autoclave depende de la eliminacin de todo el aire de la cmara y de la
carga, y los materiales que van a esterilizarse deben colocarse sin apretar. Los artculos limpios pueden
ponerse en cestillos de alambre, pero el material contaminado (cultivos desechados) deben estar en
recipientes de fondo slido en una altura no mayor de 8 cm. Deben dejarse grandes espacios de aire
alrededor de cada recipiente y ninguno debe estar cerrado.
TIPOS DE AUTOCLAVE
Unicamente deben usarse autoclaves diseados para trabajo de laboratorio y que puedan recibir carga
mixta. Los autoclaves de carga porosa y los esterilizadores de lquidos embotellados son raramente
satisfactorios para el trabajo de laboratorio. Existen dos variedades de autoclave de laboratorio:

El tipo de olla a presin.

Los modelos de desplazamiento de la gravedad con descarga automtica de aire y vapor

condensado.
OLLA A PRESION
Se utilizan todava en muchas partes del mundo. El tipo ms comn es un aparato para agua hirviendo
a presin. Tiene una cmara vertical de metal provista de una tapa metlica fuerte que se aprieta y
cierra hermticamente mediante un aro de goma. Se disponen en la tapa una espita para la salida del
aire y del vapor, un indicador de presin y una vlvula de seguridad. El agua del fondo del autoclave se
calienta mediante mecheros de gas exteriores, un calentador elctrico de inmersin o un serpentn de
vapor.
INSTRUCCIONES PARA EL FUNCIONAMIENTO
Debe haber agua suficiente dentro de la cmara. Se carga el autoclave y se aprieta la tapa
manteniendo la espita de descarga abierta. Se ajusta seguidamente la vlvula de seguridad a la
temperatura requerida y se conecta la fuente de calor.

Cuando el agua hierva, fluir vapor por la espita de descarga, arrastrando con l el aire existente en la
cmara. Se deja que salgan libremente el aire y el vapor hasta que se haya eliminado todo el aire.
Puede comprobarse que se ha eliminado fijando un extremo de un trozo de tubo de goma a la espita de
descarga e introduciendo el otro extremo en un cubo u otro recipiente similar que contenga agua. El
vapor se condensa en el agua y las burbujas de aire salen a la superficie; cuando se ha eliminado todo
el aire de la cmara, cesa el burbujeo en el cubo. Cuando se ha alcanzado esta fase, se cierra la espita
de descarga de aire vapor y se quita el tubo de goma. La presin del vapor se eleva en la cmara hasta
que la presin deseada, generalmente 1,054 kg/cm2, se alcanza y fluye vapor por la vlvula de
seguridad.
Cuando la carga ha alcanzado la temperatura requerida, se mantiene la presin durante 15 minutos. Al
trmino del perodo de esterilizacin, se apaga el calentador y se deja que el autoclave se enfre. Se
abre la espita de descarga de aire vapor muy lentamente una vez que el indicador de presin ha llegado
a cero (presin atmosfrica). Si la espita se abre demasiado pronto, cuando el autoclave est todava
bajo presin, cualquier lquido que haya en su interior (medios de cultivo lquidos, etc.), hervir de forma
explosiva e incluso pueden explosionar las botellas que contengan lquidos. Se deja que el contenido se
enfre. Segn la naturaleza de los materiales que se estn esterilizando, el perodo de enfriamiento
necesario puede ser de varias horas para que los grandes frascos de agar se enfren hasta 80C y
puedan cogerse con la mano sin riesgo.
AUTOCLAVES CON ELIMINACION DEL AIRE POR DESPLAZAMIENTO DE LA
GRAVEDAD
Estos autoclaves estn por lo general dispuestos horizontalmente y son de forma rectangular,
permitiendo que la cmara se cargue ms fcilmente. Puede utilizarse un sistema de bandejas y
carretilla.
El dibujo situado ms abajo presenta en forma esquemtica un tipo de autoclave de desplazamiento de
gravedad, revestido de una camisa. Autoclaves similares pueden construirse sin camisa. La puerta debe
tener un mecanismo de seguridad que impida pueda ser abierta mientras la cmara est bajo presin.
La camisa que rodea al autoclave est compuesta de una pared externa que encierra un espacio
estrecho alrededor de la cmara, que se llena con vapor a presin para mantener la pared de la cmara
templada. El vapor penetra en la camisa desde la fuente principal que se halla a alta presin, a travs
de una vlvula que reduce la presin hasta el nivel de funcionamiento. La presin de funcionamiento se
mide en un indicador de presin independiente fijado a la camisa. Esta camisa tiene un drenaje
independiente para eliminar el aire y la condensacin.
El vapor penetra en la cmara de la misma fuente que suministra el vapor a la camisa. Se introduce de
forma tal que es desviado hacia arriba y llena la cmara desde la parte superior hacia la inferior,
impulsando as al aire y al condensado a fluir en el fondo de la cmara por el desplazamiento de la
gravedad. El desage est provisto de filtros para impedir que se obture por residuos. El desage lleva
generalmente un termmetro para registrar la temperatura del vapor que fluye. La temperatura
registrada por el termmetro del desage es generalmente inferior a la de la cmara. La diferencia debe
determinarse mediante ensayos con termopares. Tambin cuenta con una vlvula sensible al vapor.
La vlvula automtica de vapor o sensible al vapor est diseada para asegurar que nicamente se
retiene dentro de la cmara vapor saturado y que el aire y el lquido condensado, se eliminan
automticamente. Recibe el nombre de near-to-steam sensible al vapor porque se abre si la
temperatura desciende unos 2C por debajo de la del vapor saturado y se cierra alrededor de los 2C
por encima de la temperatura del vapor saturado. El sifn funciona por expansin y contraccin de un
fuelle metlico que abre y cierra una vlvula. El desage descarga en un embudo, de tal forma que hay

una separacin entre el desage y el embudo. Esta disposicin asegura que no retroceder agua
contaminada desde la tubera a la cmara.
INSTRUCCIONES PARA EL FUNCIONAMIENTO
Si el autoclave est provisto de camisa, esta camisa debe llevarse a la temperatura de funcionamiento
en primer lugar. Se carga la cmara, se cierra la puerta y se abre la vlvula de vapor, dejando que la
corriente de vapor entre la parte superior de la cmara. El aire y el agua de condensacin fluyen a
travs del desage del fondo. Cuando el termmetro del desage llegue a la temperatura requerida,
debe dejarse un tiempo adicional para que la carga alcance dicha temperatura. Este tiempo debe
determinarse inicialmente y peridicamente para cada autoclave, como ya se indicar ms adelante.
Salvo que se haga esto, es poco probable que la carga se esterilice. Se prosigue el ciclo del autoclave
para el tiempo de mantenimiento. Cuando se ha completado, se cierran las vlvulas de vapor y se deja
que el autoclave se enfre hasta que el indicador de temperatura seala 80C. No debe abrirse el
autoclave hasta este momento. Al principi s entreabrir o abrir muy ligeramente y se mantendr
en esa posicin durante varios minutos para permitir que salga el vapor y se enfre posteriormente la
carga.
PRUEBAS DE EFICACIA DEL AUTOCLAVE
Los esterilizadores de vapor deben comprobarse cuando se adquieren y despus a intervalos regulares,
mediante termopares. La medida de las temperaturas se realiza mediante termopares, colocados en el
interior del autoclave. Son alambres de cobre-constantan recubiertos de PTFE y pueden colocarse en la
carga. Son suficientemente delgados para no impedir el cierre de la puerta. Los extremos posteriores se
conectan aun registro digital o grfico (Comark). Generalmente son suficientes cuatro canales para
comprobar los autoclaves de laboratorio. Deben comprobarse los autoclaves en las condiciones de peor
carga. En la mayora de los laboratorios podra ser un recipiente lleno de frascos de 5 ml de tapn a
rosca. Se colocar en el centro del autoclave y, si se dispone de espacio, se colocan otros recipientes
cargados alrededor de l. Un termopar debe ponerse dentro de una botella en el centro de la carga.
Otros termopares se distribuyen en otros puntos del autoclave. Se inicia el ciclo de esterilizacin y se
mide el tiempo. Se anota el tiempo requerido para que la temperatura del desage de la cmara
alcance 121C y despus el que se necesita para que el termopar de la carga registre dicha
temperatura. En este momento comienza el tiempo de esterilizacin. Despus de que transcurran no
menos de 15 minutos puede desconectarse el vapor, comenzando el tiempo de enfriamiento. Hay as
cuatro perodos:

Calentamiento, hasta que el termmetro de desage de la cmara alcanza 121C.

Penetracin del vapor en la carga, hasta que el centro de la carga alcance 121C.

Esterilizacin, durante el que la carga se mantiene a 12 C, generalmente 15 minutos.

Tiempo de enfriamiento, hasta que la temperatura de la carga descienda a 80C, momento

en que puede retirarse.
Como no es practicable utilizar un termopar para cada carga salvo que se ponga un sensor dentro de la
cmara, es importante anotar estos tiempos para el funcionamiento normal. El perodo de exposicin
despus de que la temperatura en el desage alcance 121C es por tanto de 2+3 minutos. Deben
mortificarse de acuerdo con esto los autoclaves de ciclo automtico, que dependen de la temperatura
en el desage.

En algunos autoclaves la puerta no puede abrirse hasta que la temperatura en el desage descienda a
80C. Esto no implica que la temperatura en la carga haya descendido tambin al mismo nivel. En los
grandes frascos hermticamente cerrados, puede estar todava por encima de 100C, momento. En el
que su contenido estar a presin elevada. Un enfriamiento brusco puede determinar que el frasco
explosione. Por tanto, el autoclave no debe abrirse hasta que la temperatura de la carga haya bajado a
80C o ms. Puede ser necesario un tiempo muy largo y en algunos autoclaves hay cerraduras que
permiten que la puerta se abra tan slo fraccionalmente, para que la carga se enfre ms antes de que
quede libre finalmente. En otros, se utilizan dispositivos de enfriamiento complicados con rfagas de
aire y pulverizaciones de agua fra.
PROTECCION PERSONAL
La nica forma digna de confianza de comprobar la eficiencia del autoclave es mediante instrumentos,
aunque pueden utilizarse los tubos de Browne, tipo 2 (punto amarillo), para temperaturas superiores a
126C. Los tubos de Browne deben conservarse en un lugar fro (por debajo de 20C) para impedir se
deterioren.
Bennet ha elaborado otra clase de indicador de esterilizacin. Para algunas cargas, por ejemplo
material de vidrio y medios de cultivo, es til la cinta de autoclave, utilizada en los hospitales (3M).
En determinadas circunstancias puede ser deseable comprobar se han muerto los esporos bacterianos
durante el ciclo del autoclave. Se emplean esporos de Bacillus stearothermophilus. La resistencia de los
esporos al calor depende de muchos factores, incluyendo entre ellos el medio en el que se han
cultivado, de forma que es preferible usar preparados comerciales cuya calidad ha sido controlada.
Oxoid prepara cinta de esporos, como tambin sirven 3NI (Atiest) y 13BL (Killit).
Tras la exposicin al ciclo del autoclave, se retiran las cintas de su estuche y se ponen en el medio de
recuperacin caldo triptona glucosado y se incuban a 55-60 para comprobar su viabilidad.
Graves accidentes, que incluyen quemaduras escaldaduras en la cara y manos, se han producido
cuando se han abierto los autoclaves, incluso cuando el indicador de temperatura se hallaba por debajo
de 80 C y la puerta se haba abierto una grieta. Los lquidos de los frascos pueden estar todava a
temperatura superior a los 100 C y bajo considerable presin. Los frascos pueden explosionar al
contacto con el aire a la temperatura ambiente. Cuando los autoclaves se descargan, los operarios
deben llevar viseras protectoras de toda la cara del tipo que recubra la piel de la barbilla y de la
garganta. Tambin deben usar guantes de proteccin trmica.
TYNDALLIZACION
Este proceso, designado as despus de que el cientfico Tyndall utilizara un vaporizador de Koch (o de
Arnold), que es una caja metlica en el fondo de la cual el agua hierve mediante un mechero de gas,
una resistencia elctrica o un serpentn de vapor. El material que va a tratarse permanece en una
bandeja perforada, inmediatamente por encima del nivel del agua. La tapa es cnica, de manera que el
agua de condensacin resbala por los laterales en vez de gotear sobre el contenido. Un pequeo
orificio en la parte superior de la tapa permite que salgan el aire y el vapor. Se utiliza este mtodo para
esterilizar medios de cultivo que puede alterarse por exposicin a temperaturas ms elevadas, por
ejemplo medios que contienen carbohidratos fcilmente hidrolizables o gelatina. Estos medios se
vaporizan durante 30-45 minutos al da durante tres das consecutivos. La primera vez se matan las
bacterias vegetativas; cualquier esporo que sobreviva germinar en el medio nutritivo durante la noche,
dando lugar a formas vegetativas que sern muertas durante la segunda y tercera vaporizaciones.
FILTRACION

Las bacterias pueden eliminarse de los lquidos hacindolos pasar a travs de filtros con poros muy
pequeos que impiden el paso de las bacterias pero, en general, no de los mycoplasmas ni virus. Se
emplea este mtodo parra esterilizar el suero para su uso en el laboratorio, las soluciones de
antibiticos y los medios de cultivo especiales que se alteran por el calor. Se utiliza tambin para
separar los productos solubles del crecimiento bacteriano (toxinas) de los medios de cultivo lquidos.
TIPOS DE FILTROS
Los siguientes tipos de filtros tienen un inters histrico principalmente:

Bujas de barro de loza tales como los tipos de Berkefeld y Mandier, que estn hechas de
Kieseighur y el filtro de Chamberland de porcelana no vidriada.

Filtros de asbesto (filtros Seitz).

Filtros de vidrio incrustado, que se construyen con vidrio finamente pulverizado, fundido lo
suficiente para hacer que los grnulos de vidrio se adhieran entre si.
Las desventajas de las bujas de barro de loza y de los Filtros de asbesto son las de que son muy
absorbentes y tienen una velocidad de filtracin comparativamente baja. Los filtros de vidrio incrustado
tienen la ventaja de su poca absorcin, pero la velocidad de filtracin es comparativamente lenta.
FILTROS DE MEMBRANA
Estos filtros se fabrican de steres de celulosa (acetato de celulosa, nitrato de celulosa, colodin, etc.).
Tienen muchas ventajas sobre los primeros tipos de filtros bacteriolgicos, ya que son mucho menos
absorbentes y tienen una velocidad de filtracin elevada. Se fabrican con una gran variedad de tamao
de poro y algunas membranas pueden emplearse para separar partculas de virus, mediante el uso de
diferentes gradaciones de tamao de poro. Los filtros bacterianos tienen un tamao de poro menor de
0,75 umas. Las membranas pueden esterilizarse al autoclave.
Para su empleo, la membrana se monta sobre una plataforma soporte, generalmente de acero
inoxidable, que queda encerrada hermticamente entre los embudos superior e inferior. La filtracin se
obtiene aplicando presin positiva al lado de entrada o negativa en la salida. Existen pequeas
unidades filtrantes para filtrar pequeos volmenes de lquido (1-5 mi), come, los filtros Hemmings
(Beaumaris, Colab). El lquido se impulsa a travs de un filtro pequeo mediante una jeringa. Filtros de
membrana y portafiltros adecuados a distintos fines pueden obtenerse de BBL, Gelman, Millipore y
Oxoid, publicando cada una de estas firmas tiles manuales o folletos a cerca de sus productos.
DESINFECCION
Pueden utilizarse una gran variedad de sustancias qumicas y todas ellas reciben el nombre comn de
desinfectantes o biocidas. El primero de estos trminos es el que se va a usar en este libro. Algunos de
ellos son reactivos ordinarios, otros son formulaciones especiales, registradas con nombres
comerciales. Los microbilogos y gerentes de laboratorio se ven con frecuencia presionados por los
vendedores para que adquieran sus productos, para los que hacen extravagantes propagandas.
Generalmente hay diferencias marcadas entre la actividad de algunos desinfectantes cuando se
ensayan en condiciones ptimas por la tcnica de Rideal-Walker u otras menos acreditadas y cuando
se utilizan en la prctica. Los efectos del tiempo, temperatura, pH y la naturaleza qumica y fsica del
artculo que se va a desinfectar y la materia orgnica presente, no son a menudo totalmente
consideradas.

2.1 TIPOS DE DESINFECTANTES Y USOS EN EL LABORATORIO

Existe un espectro aproximado de sensibilidad de los microorganismos a los desinfectantes. Los ms
sensibles son las bacterias vegetativas, los hongos y los virus que contienen lpidos. Las mycobacterias
y los virus que no contienen lpidos son menos sensibles y los esporos son por lo general resistente.
En la eleccin de los desinfectantes, deben tenerse en cuenta algunas consideraciones a cerca de su
toxicidad y de los efectos perjudiciales que pueden tener sobre la piel, ojos y vas respiratorias.
Unicamente se tratan aqu aquellos desinfectantes que tienen aplicacin en el laboratorio.
Los desinfectantes utilizados ms corrientemente en los trabajos de laboratorio son los fenoles lquidos
y los hipocloritos. Los aldehdos tienen una aplicacin limitada y el alcohol y las mezclas de alcoholes
son menos populares, aunque merecen mayor atencin. Los compuestos yodforos y de amonio
cuaternario son ms populares en los EE.UU que en Gran Bretaa, mientras que los compuestos
mercuriales son los menos utilizados. Las propiedades de estos desinfectantes se resumen en una
tabla ms abajo. Otras sustancias tales como el xido de etileno y la propiolactona se usan
comercialmente en la preparacin de material de equipo estril para hospitales y laboratorios, pero no
se emplean en la descontaminacin de desechos de laboratorio y en otras actividades mencionadas
antes. Se excluyen por ello de esta exposicin.
2.1.1 FENOLES LIQUIDOS
Estos compuestos son eficaces contra las bacterias vegetativas (incluso Mycobacterias) y hongos. Son
inactivas contra esporos y virus que no contienen lpidos. La mayora de los compuestos fenlicos son
activos en presencia de cantidades considerables de protena, aunque se inactivan en parte por la
goma, madera y plsticos. No son compatibles con los detergentes catinicos. Los usos en el
laboratorio incluyen las vasijas de desechos y la desinfeccin de superficies. Los fenoles lquidos deben
emplearse a la concentracin ms alta que recomiendan los fabricantes para situaciones sucias, es
decir, cuando puedan encontrar grandes cantidades de materia orgnica. Generalmente esta
concentracin es la de 2-5%. Las soluciones deben prepararse diariamente y los fenlicos diluidos no
deben guardarse ms de 24 horas para utilizarlos en el laboratorio, aunque muchos fenoles lquidos
diluidos pueden ser eficaces durante ms de siete das.
Deben protegerse la piel y los ojos.
2.1.2 HIPOCLORITOS
La actividad se debe al cloro, el que es muy eficaz contra las bacterias vegetativas (incluso
mycobacterias) esporos y hongos. Los hipocloritos son inactivados considerablemente por las protenas
y en cierto grado por los materiales naturales no proteicos y por los plsticos y no son compatibles con
los detergentes cannicos. Se emplean en vasijas de desecho y desinfeccin de superficies, aunque es
necesario tener cuidado porque corroen los metales. No deben emplearse en partes metlicas de
centrfugas y otros aparatos que se debilitan con su uso. Con fines generales y para las vasijas para
pipe-tas y de desechos se recomienda una concentracin de cloro de 2.500 ppm en lugar de 1.000
ppms, aunque para sangre derramada y vasijas de desechos que pueden contener gran cantidad de
protena se recomienda una concentracin de 10.000 ppms. Los hipocloritos que se venden para uso
industrial y aplicaciones de laboratorio en Gran Bretaa contienen 100.000 ppm de cloro disponible y
deben diluirse para su empleo al 1:40 1:10. Algunos hipocloritos domsticos (los que se usan en la
limpieza de biberones) contienen 10.000 ppm y deben diluirse para su empleo al 1:4. Las lejas de uso
domstico de Gran Bretaa y EE.UU. contienen 50.000 ppm de cloro disponible y son apropiadas las
diluciones de 1:20 y 1:5. Los productos preparados slidos, incluyendo los que contienen hipocloritos,

usados en la desinfeccin domstica y los isocianuros clorados, utilizados en piscinas, pueden tener
aplicaciones en el laboratorio.
Los hipocloritos se deterioran rpidamente con el uso, aunque los pro-ductos tal como se suministran
son estables. Las soluciones diluidas deben sustituirse despus de 24 horas. La sustancia colorante
que se aade a algunos hipocloritos comerciales trata de identificarlos: no es un indicador de la
actividad.
Los hipocloritos pueden producir irritacin de la piel, ojos y pulmones.
2.1.3 ALDHEIDOS
El formaldehdo (gas) y el glutaraldehido (lquido) son buenos desinfectantes. Son activos frente a
bacterias vegetativas (incluso mycobacterias), esporos y hongos. Son activas en presencia de protena
y no se inactivan mucho por los materiales naturales o artificiales ni por los detergentes.
El formaldehdo no es muy activo a temperaturas inferiores a 20C y requiere una humedad relativa de
al menos 70%. No se suministra como gas, sino como un polmero slido, para formar aldehdo y como
un lquido, formalina o formol comercial, que contiene 37-40 % de formaldehdo. Ambas formas se
calientan para liberar el gas, que se utiliza para desinfectar espacios cerrados como cabinas de
seguridad y habitaciones. La formalina diluda al 1:10 para dar una solucin que contiene 4 % de
formaldehido, se emplea en la desinfeccin de superficies y en algunos casos, de cultivos. Se hallan
actualmente en el comercio compuestos slidos que liberan formaldehdo y dichos productos pueden
tener aplicaciones en el laboratorio, aunque todava no se han valorado para este fin. El formaldehdo
se usa principalmente para la descontaminacin de cabinas de seguridad y en habitaciones.
El glutaraldehdo necesita generalmente un activador, tal como el bicarbonato de sodio, que se
suministra con el lquido a granel. La mayora de los activadores contienen un colorante, para que el
usuario pueda tener seguridad de que el desinfectante ha sido activado. La eficacia y la estabilidad tras
la activacin batan con el producto y debe consultarse la literatura suministrada por los fabricantes.
Kelsey et al, hallaron que la actividad esporocida de una marca disminua a la mitad en siete das y
Coates sugiri que si se utilizaba glutaraldehdo activado de esa edad, debera doblarse el tiempo de
exposicin. Pueden emplearse en vasijas para desechos (aunque es caro) y son particularmente tiles
para la desinfeccin de las superficies metlicas, puesto que no son corrosivos.
Los aldelhdos son txicos. El formaldehdo es particularmente molesto porque afecta a los ojos y
produce dificultades respiratorias. Se requieren precauciones especiales. El glutaldehdo es menos
nocivo, pero debe evitarse el contacto con la piel y los ojos.
2.1.4 ALCOHOL Y MEZCLAS DE ALCOHOLES
El etanol y el propanol, a concentraciones de alrededor de 70-80 % en agua, son eficaces, aunque
lentamente, contra las bacterias vegetativas. No son activos frente a esporos y hongos. No se inactivan
de manera especial por la protena y otros materiales ni por los detergentes.
La efectividad se favorece por la adicin de formaldehdo, por ejemplo una mezcla de formalina al 10 %
en alcohol de 70 %2 o hipoclorito en solucin que tenga 2.000 ppm de cloro disponible. Los alcoholes y
las mezclas de alcoholes son tiles para desinfectar superficies y exceptuando las mezclas de alcoholhipoclorito, para equilibrar los portatubos de las centrfugas.
Son relativamente inofensivas para la piel, pero pueden producir irritacin de los ojos.

2.1.5 COMPUESTOS DE AMONIO CUATERNARIO

Son detergentes cati6nicos eficaces contra bacterias vegetativas y algunos hongos, aunque no contra
las mycobacterias o esporos. Son inactivos por la protena y por una diversidad de materiales naturales
y plsticos, por los detergentes no inicos y por el jabn. Su utilizacin en el laboratorio es por tanto
limitada, aunque tienen la clara ventaja de ser estables y de no corroer los metales. Se emplean
generalmente a diluciones de 1-2% para la limpieza de superficie, pero son muy comunes en los
laboratorios de higiene de los alimentos como consecuencia de su naturaleza detergente.
Los compuestos de amonio cuaternario no son txicos y son inofensivos para la piel y los ojos.
2.1.6 IODOFOROS
Como 105 compuestos de cloro, estos yoduros son efectivos contra bacterias vegetativas (incluidas
mycobacterias), esporos, hongos y ambos tipos de virus conteniendo o no lpidos. Son inactivos
rpidamente por la protena y, en cierto grado, por sustancias naturales y plsticas y no son compatibles
con los detergentes aninicos. Para su empleo en vasijas de desecho y para desinfeccin de
superficies deben usarse diludos para obtener 75-150 ppm de iodo, pero para la desinfeccin de las
manos o como esporocida diluidos en alcohol de 50% para dar una concentracin de 1600 ppm. En los
preparados comerciales a la venta, los yodforos suelen contener un detergente y llevar un indicador:
son activos en tanto aparecen de color pardo o amarillo. Tien la piel y las superficies, pero el colorante
puede eliminarse con solucin de tiosulfato sdico.
Los yodforos son relativamente inofensivos para la piel, pero puede apreciarse cierta irritacin en los
ojos.
2.1.7 COMPUESTOS MERCURIALES
La actividad contra las bacterias vegetativas es mala y son inefectivos contra los esporos. Tienen cierta
accin sobre los virus a concentraciones de 1:500 a 1:1.000 y un uso limitado, como soluciones
saturadas en el manejo inocuo de preparaciones microscpicas de mycobacterias.
Su limitada utilidad y su naturaleza muy venenosa convierten a los mercuriales en inadecuados para su
uso general en el laboratorio.
PRECAUCIONES CON EL USO DE DESINFECTANTES
ra los ensayos de desinfectantes en los laboratorios clnicos de Gran Bretaa.
Para satisfacer una necesidad creciente de ensayos ms prcticos para el empleo en hospitales, el
Public Health Laboratory Service (PHLS) ha sido responsabilizado del desarrollo de las pruebas de
dilucin de empleo. Se utilizan estas pruebas para recomendar una dilucin de empleo prctica para un
desinfectante que va a ser utilizado en condiciones de hospitales o de laboratorios, por ejemplo, para la
descontaminacin de instrumentos contaminados, limpieza de las paredes en los hospitales y carretillas
de quirfano y en los laboratorios de bacteriologa para usos tales como las vasijas de desecho de
laboratorio. Tales pruebas son:

Prueba de capacidad.

Prueba de estabilidad.

Prueba de utilizacin (descrita con detalle ms adelante).

Las pruebas de capacidad y de estabilidad se llevan a cabo principalmente en los laboratorios de los
fabricantes y en los de referencia. Las pruebas de utilizacin deben realizarse por los usuarios de los
desinfectantes para comprobar la eficacia real de los desinfectantes utilizados en los hospitales y
laboratorios propios. Esta prueba es fcil de realizar y es muy recomendada para ensayos rutinarios.
PRUEBA DE CAPACIDAD DE KESLEY-SYKES
La prueba de capacidad de Keisey-Sykes se emplea para estimar la concentracin de desinfectantes
que puede recomendarse para el uso en hospitales en condiciones limpias y sucias, es decir, en
ausencia de materia orgnica o en presencia de ella. Es adecuada para ensayar todos los tipos de
desinfectantes.
El trmino condicin limpia implica una situacin en la qu la materia orgnica est ausente, tales como
las superficies de preparacin de alimentos y partes superiores de las carretillas, las que primero se
lavan con agua caliente y detergente antes de aplicar el desinfectante. El trmino condicin sucia se
aplica a aquellas situaciones en las que hay presente materia orgnica, por ejemplo, superficies de
sillas de enfermos y vasijas de desecho de laboratorio y es necesaria una elevada concentracin de
desinfectante para neutralizar la accin inactivante de la materia orgnica y asegurar aun la
desinfeccin.
Bsicamente, la prueba consiste en la adicin de un volumen conocido de una suspensin de un
germen de prueba en una serie de intervalos a un volumen estndar de la concentracin particular del
desinfectante ensayado, con o sin adicin de materia orgnica. La materia orgnica que se aade es,
generalmente, levadura. A intervalos de tiempo regulares despus de la adicin de cada uno de los tres
volmenes de la suspensin de prueba, se toma una cantidad estndar de la mezcla en ensayo y se
aade a cinco tubos de medio de recuperacin.
Durante el desarrollo de la prueba, el desinfectante se diluye paulatinamente, pero es la concentracin
determinada al comienzo de la prueba la que se dice que pasa o falla el ensayo.
Una concentracin inicial que, tras la segunda adicin de suspensin de grmenes, no permite el
crecimiento en al menos dos de los cinco tubos de medio de recuperacin, se dice que pasa la prueba y
puede recomendarse para su empleo en condiciones limpias o en condiciones sucias si se ha aadido
levadura en el ensayo.
La prueba no se pretende se realice por quienes estn empleados en los hospitales, sino por los
laboratorios oficiales o por los fabricantes, como orientacin para la recomendacin de las
concentraciones de desinfectantes que deben utilizarse en hospitales, establecimientos de preparacin
de alimentos, etc.
2.3.3 LA PRUEBA DE ESTABILIDAD
Es una prueba simplificada ideada para comprobar la estabilidad y la eficacia a largo plazo de los
desinfectantes, en concentraciones recomendadas por los fabricantes para su empleo en situaciones
limpias y sucias. La prueba se utiliza como suplemento de la informacin dada por la prueba de
capacidad de Keisey-Sykes y es adecuada nicamente para laboratorios especializados. Una lectura
del trabajo de Maurer presenta datos que evidencian que las bacterias no slo sobreviven, sino que
tambin se multiplican en algunas soluciones desinfectantes.
LA PRUEBA DE UTILIZACION

Se toman muestras de desinfectantes lquidos de fuentes tales como las vasijas de desechos de
laboratorio, cubos de fregar el suelo, estropajos, lquidos desinfectantes en los que se guardan
materiales de limpieza o cepillos de taza de retrete, desinfectantes en Departamentos centrales de
materiales estriles, recipientes de instrumentos usados y soluciones madres de desinfectantes
diluidos. El fin es determinar si los lquidos contienen bacterias vivas y en qu nmero. Se describe en
este libro este mtodo detalladamente para que pueda utilizarse en cualquier laboratorio, ya que
pueden obtenerse resultados significativos nicamente a la luz de condiciones locales.
2.3.4.1 METODO
Mtodo (segn la descripcin de Maurer):

Fase 1: se toma un volumen de 1 ml del desinfectante utilizado de cada tarro o cubo, con
una pipeta estril para cada uno.

Fase 2: se aaden a la muestra de 1 ml, 9 mi de diluyente en un recipiente universal estril

o en un frasco de tapn a rosca de 25 ml tambin estril. Debe escogerse el diluyente de
acuerdo con el grupo al que pertenece el desinfectante.

Fase3: el frasco de diluyente se vuelve a llevar al laboratorio en el plazo de 1 hora desde la

adicin del desinfectante. Individualmente, se utiliza una pipeta Pasteur o una pipeta de 50
gotas, estriles, para retirar un pequeo volumen de la mezcla desinfectante/diluyente y se
ponen diez gotas, por separado, sobre la superficie de cada uno de dos pocillos en placas
de agar nutritivo desecado.

Fase 4: se incuban las dos placas de la siguiente forma:

Se incuba una de las placas durante 3 das a 32 37C, lo que se estime ms

conveniente. La temperatura ptima para la mayora de las bacterias patgenas es de
37C, pero las que han sido daadas por los desinfectantes se recuperan ms fcilmente a
32C.

La segunda placa se incuba durante 7 das a temperatura del laboratorio.

Fase 5: tras la incubacin, se examinan las placas y se anota el crecimiento bacteriano.

2.3.4.2 RESULTADOS
A pesar de las dudas expresadas antes y las de otros autores en relacin con el empleo de S. typhi en
los ensayos de desinfectantes, estn claro que los fabricantes desean que persista su prctica. No
puede culprseles por completo por Esto, ya que su negocio es la venta de desinfectantes y sus
clientes exigen ndices fenol, incluso aunque no los comprendan. Se ha hecho en el pasado
demasiado poco por educar al comprador.
La British Association of Chemical Specialities public un Cdigo Prctico que formulaba apropiadas
precauciones de seguridad. Este Cdigo fue oportuno y necesario, como consecuencia de la aplicacin
defectuosa, en ciertas reas, del Cdigo de Prctica (Howie) para laboratorios no clnicos e industriales.
El Cdigo de Howie, como ya se ha dicho antes, prohibe el empleo de S. lyphi para los ensayos de
desinfectantes en los laboratorios clnicos. Sita asimismo a S. typhi en la categora B. Se especifican
instalaciones especiales y condiciones de contencin para manejar los microorganismos de la categora
B, entre las que se incluye las cabinas de seguridad bacteriolgica. Esto produce alguna confusin ya

que el Cdigo de Howie no indica qu organismos de la Categora B producen infecciones a travs del
aire y por ello requieren se manejen en cabinas de seguridad, ya que S. typhi infecta (generalmente)
por va alimentarla y puede manejarse en la bancada normal, aunque separado de las actividades
principales del laboratorio.
El Cdigo de Prctica BACS, que est aprobado oficialmente, clarifica ms este punto y este Cdigo y
no el de Howie el que debe observarse en los laboratorios clnicos en los que se realicen ensayos con
desinfectantes.
EL USO DE LOS DESINFECTANTES EN HOSPITALES
Es aconsejable que los hospitales elaboren un cdigo de prctica detallado sobre el uso de los
desinfectantes y antispticos que emplean para sus circunstancias particulares. Se han publicado
orientaciones para estos fines por el Public Health Laboratory Service en su Monografa N' 2 y
asimismo en una reunin de trabajo de la South Western Regional Health Authority.
Para una mayor informacin acerca de desinfeccin y esterilizacin, vase el libro de Russel et al.
TRATAMIENTO Y ELIMINACION DE LOS MATERIALES INFECTADOS
Es una regla fundamental que ningn material afectado debe salir del laboratorio.
En el contexto del tratamiento. Y eliminacin de los desechos de laboratorio contaminados (incluyendo
entre ellos los que estn contenidos en artculos recuperables), este sencillo precepto no ofrece
problemas a laboratorios adecuadamente equipados y bien dirigidos.
Est clara la responsabilidad de la direccin del laboratorio para asegurar que ningn desecho que
contenga organismos vivos salga de las instalaciones del laboratorio. Por desgracia, no se resuelve el
problema haciendo recaer con firmeza esta responsabilidad en la direccin del laboratorio. En algunos
establecimientos hay ideas muy fragmentarias en cuanto a las fugas de material con organismos vivos.
Hay acto de fe en el poder de los desinfectantes a diferentes concentraciones y edades indefinidas para
matar a los microbios sumergidos en ellos o incluso puestos cerca de ellos.
Hemos credo siempre que la desinfeccin es una primera lnea de defensa y para desechar el material
de trabajo contaminado es una medida temporal, que debe ir seguida, tan pronto como sea posible, por
el esterilizado en el autoclave o la incineracin. Los desinfectantes no deben utilizarse como mtodo
exclusivo de tratamiento de los cultivos bacterianos, incluso an cuando se sumerjan totalmente y se
eliminen todas las burbujas.
3.1 RECIPIENTES PARA MATERIAL INFECTADO DESECHADO
Debe haber en el laboratorio cuatro tipos importantes de recipientes para productos infectados
desechados:

Cestos o bolsas de un solo uso para recibir cultivos y muestras.

Vasijas de un solo uso para recibir portaobjetos, pipetas Pasteur y pequeos artculos a
desechar.

Pipeceros para pipetas graduadas (recuperables).

Bolsas de plstico para materiales combustibles tales como cajas para muestras y
envoltorios que puedan estar contaminados.
Todos estos recipientes deben ir a la cocina para el tratamiento final y eliminacin.
3.2 CESTOS Y BOLSAS DE UN SOLO USO
Los cestos de un solo uso tendrn fondos macizos para que no goteen; en caso contrario se diseminar
material contaminado. Para superar los problemas de penetracin de vapor, estos recipientes deben ser
bajos, de no ms de 8 cm de altura y con la anchura conveniente para que puedan ponerse en el
autoclave sin apretar. Nunca deben llenarse por completo. Se hallan en el comercio recipiente
adecuados de plstico (polipropileno), aunque no estn especialmente diseados para este fin (WCB,
Xion).
Son comunes las bolsas de plstico, pero solamente deben utilizarse las fabricadas especialmente para
este fin. Deben mantenerse en cubos o en cestos de un solo uso. Incluso las ms firmes pueden
romperse si se manejan con brusquedad (Jencons, Sterilin).
Para llevarlos con seguridad a la cocina los cestos deben llevar tapa y las bolsas pueden cerrarse
fuertemente con tiras de alambre.
Las cestas y bolsas de un solo uso deben tener colores codificados, es decir, deben ir marcados de
distinta forma para que todos los operarios los reconozcan como que contienen material infeccioso.
VASIJAS DE DESECHO
Las vasijas o tarros de desechos con desinfectante que se sitan en la bancada del laboratorio y dentro
de los cuales se sumergen los portaobjetos, pipetas pasteur y otros desechos usados, tienen una larga
historia de olvidos y abusos. En un gran nmero de laboratorios estas vasijas se rellenan con escasa
frecuencia, con diluciones de desinfectantes desconocidas, estn sobrecargadas de protena y
materiales que flotan y rara vez se vacan. Muy pocas veces est desinfectado su contenido.
ELECCIN DEL RECIPIENTE
Los recipientes viejos de mermelada y de caf instantneo no son adecuados. Estos recipientes se
rompen con facilidad y los vidrios rotos son un riesgo innecesario en un laboratorio, especialmente si
estn contaminados. Las vasijas de desechos deben ser fuertes y esterilizables por autoclave y los
recipientes ms adecuados son los bocales de 1 litro de polipropileno o los tarros del mismo material
con tapa a rosca. Son suficientemente profundos para mantener sumergidas la mayora de las cosas
que es probable se desechen, son irrompibles y resisten muchas esterilizaciones por autoclave. Se
obscurecen con el tiempo, pero esto no afecta su uso. Son mejores los tarros de polipropileno con tapa
a rosca, ya que pueden cerrarse despus de su uso, invertirse para asegurar que el desinfectante moja
completamente el contenido y eliminar las burbujas de aire que pueden impedir que el desinfectante
moje totalmente a los objetos.
DILUCION CORRECTA
Un recipiente de desecho de 1 litro debe contener 750 mi de desinfectante diluido, dejando espacio
para que ascienda el nivel sin que se derrame ni que gotee cuando se traslade. Debe hacerse una
seal en cada vasija en la capacidad de 750 mi, preferiblemente con pintura (el lpiz graso y los
rotuladores son menos permanentes). El volumen correcto de desinfectante nuevo que debe aadirse al
agua para hacer este volumen, adecuado para situaciones sacias, se calcular teniendo en cuenta

las recomendaciones del fabricante. Este volumen se marcar seguidamente en una pequea probeta
graduada, por ejemplo de hierro esmaltado o s Fija un dispensador de plstico que la vierta desde un
recipiente a granel. Se echa el desinfectante en la vasija y se aade agua hasta la seal de 750 ml.
USO RAZONABLE
Los supervisores de laboratorio deben asegurarse de que no se ponen en las vasijas de desecho cosas
inapropiadas. Hay un lmite razonable entre la cantidad de papel o de tohallitas de papel que dichas
vasijas pueden contener y los artculos que flotan no son adecuados para las vasijas de desecho, a
menos que stas puedan cerrarse e invertirse de vez en cuando para mojar todo el contenido.
Nunca deben aadirse grandes volmenes de lquido a los desinfectantes diluidos. Lquidos tales como
los sobrenadantes de la centrifugacin, deben verterse en vasijas de desecho, que contienen el
volumen usual de desinfectante puro, a travs de un embudo adaptado en la parte superior de la boca.
Esta disposicin impide se derramen gotas y se formen aerosoles. Al final del da puede aadirse agua
hasta la seal de 750 rnl y dejar la mezcla durante toda la noche. No debe agregarse a los
desinfectantes artculos que contengan grandes cantidades de protena, sino que deben desinfectarse
en el autoclave o incinerarse.
VACIADO REGULAR
Ningn material debe dejarse en el desinfectante de la vasija de desecho durante ms de 24 horas, ya
que en caso contrario se desarrollarn las bacterias supervivientes. Por tanto, todas las vasijas deben
vaciarse una vez al da, aunque es una cuestin particular s se Yacan al final del da o a la maana
siguiente. Deben vaciarse incluso las vasijas que hayan recibido poco o ningn material al llegar ese
momento.
VASIJAS DE DESECHO SECAS
En lugar de vasijas conteniendo desinfectante, en algunos laboratorios se disponen recipientes rgidos
de cartn o recipientes metlicos corno los utilizados en los hospitales para desechar las jeringas y
agujas de un solo uso, por ejemplo, Cin Bins (Labco). Estos recipientes pueden recibir pipetas pasteur,
portaobjetos, etc. pueden ser esterilizados al autoclave o incinerados.
PIPETEROS
Las vasijas para las pipetas recuperables deben estar hechas de polipropieno o de goma. Son de
mayor seguridad que el vidrio. Las vasijas deben ser suficientemente altas para permitir que las pipetas
se sumerjan totalmente sin que se derrame el desinfectante. Debe aadirse al desinfectante un
detergente compatible para facilitar la limpieza de las pipetas en la fase final. Las vasijas altas no son
convenientes para personas de baja estatura, que tienden a porteras en el suelo. Esto es peligroso. Las
vasijas de goma de base rectangular (Camlab) pueden inclinarse dentro de una caja o de un bastidor, lo
que es mucho ms conveniente y de mayor seguridad.
BOLSAS DE PLASTICO PARA MATERIALES COMBUSTIBLES
Estas bolsas se hallan en todos los hospitales y tienen colores codificados. Los laboratorios clnicos
deben seguir el cdigo local. En otro caso, deben introducir uno, por ejemplo, las bolsas rojas pueden
designarse para este fin y no para otros.
METODOS DE TRATAMIENTO Y ELIMINACIN

Existen tres mtodos prcticos para el tratamiento de los materiales de laboratorio desechados y de los
desechos contaminados:

La esterilizacin por autoclave.

La incineracin.

La desinfeccin qumica.
La eleccin se realiza atendiendo a la naturaleza de los materiales; si es desechable o recuperable y,
en este ltimo caso, si se ve afectado por el calor. Con ciertas excepciones, ninguno de estos mtodos
excluye a los dems. Puede verse en la ms abajo que la incineracin sola nicamente puede
aconsejarse si el incinerador se halla bajo el control del personal del laboratorio. La desinfeccin sola es
aconsejable nicamente para las pipetas graduadas recuperables.
MATERIAL INFECTADO
DESECHABLES RECUPERABLES
DESINFECTAR AUTOCLAVE DESINFECTAR AUTOCLAVE
INCINERAR LAVAR
BASURERO
Prctica normal.
Incinerador bajo control del laboratorio.
ORGANIZACION DEL TRATAMIENTO
Los diseos de una cocina para tratar los materiales de laboratorio desechados deben incluir
autoclaves, un trituradora, una unidad de eliminacin de basura conectada por tubera de plomo al
alcantarillado pblico, fregaderos hondos, mquinas para lavar material de vidrio, estufas de
desecacin, estufas de esterilizacin y grandes bancadas.
Estas habitaciones deben tener disposicin adecuada para evitar cualquier posible mezcla de
materiales contaminados y descontaminados. Los arquitectos deben trabajar por tanto, sobre un
diagrama de flujo o un plano de vas crticas, proporcionado por un microbilogo profesional.
Un plano de este tipo se presenta ms abajo. El material contaminado llega en sus recipientes de color
codificado a una bancada o una zona designada y utilizada nicamente para este fin. Se separan
seguidamente de acuerdo con su color y se envan al incinerador o se cargan en el autoclave. No hay
ningn cruce en esta zona. Tras la esterilizacin en el autoclave, los contenedores se llevan a la
bancada de separacin, en donde el contenido se separa en:

Desechos para incineracin, que se ponen en bolsas de color codificado.

Desechos para la basura, que se ponen asimismo en bolsas de color codificado.

Desechos adecuados para la esclusa o unidad de eliminacin de desperdicios.

Material recuperable que pasa a la seccin o habitacin siguiente para su lavado y

esterilizacin.
Esta seccin o habitacin debe tener un autoclave independiente. No deben esterilizarse en el mismo
autoclave el material de desecho contaminado y el que va a volver a utilizarse o recuperarse.
UNIDAD DE DEPOSITO FINAL DE
INCINERADOR DE DESPERDICIOS DESECHOS
L
A AREA DE
B RECEPCION AUTOCLAVE ZONA DE SALIDA
O DE DESPERDICIOS
R
A
T
O
R VOLVER A USAR ESTERILIZAR LAVAR
I
O
Solo si el incinerador est bajo control del laboratorio.
PROCEDERES PARA DIVERSOS ARTICULOS
Antes de ser esterilizado al autoclave, deben quitarse las tapas desechables y despus incluidas en la
carga del autoclave de manera que no dificulten la penetracin del vapor. Deben quitarse las ligaduras
de las bolsas de plstico y abrir por completo las bolsas en las cestas o cubos que las mantienen.
MATERIAL DE VIDRIO CONTAMINADO
Despus de esterilizarlos al autoclave, los medios de cultivo pueden verterse o extraerse y los tubos,
frascos, etc., se lavan a mano o mecnicamente con un detergente adecuado. El tipo de lquido o
polvos de lavado que se utilice depender de la dureza del agua suministrada y del mtodo de lavado.
Deben tenerse en cuenta las recomendaciones de varios fabricantes de detergentes de laboratorio.
Los laboratorios con mucho trabajo precisan mquinas de lavado de material de vidrio. Antes de adquirir
una de estas mquinas es preferible estudiar varias de ellas y preguntar a otros laboratorios cules son
los modelos de que disponen que consideran satisfactorios. No todas las mquinas de lavado de
material de vidrio son tan buenas como proclaman sus fabricantes. Un requisito previo es un buen
aporte de agua destilada o desionizada.

Si se realiza el lavado a mano, son necesarias piletas dobles, para el lavado y para el aclarado posterior
y adems, cuencos de plstico o de acero inoxidable para el aclarado final en agua destilada o
desionizada. El agua destilada de alambiques no revestidos, independiente de la conduccin de vapor,
es raro sea satisfactoria para el trabajo bacteriolgico.
Los revestimientos de goma de los tapones a rosca deben separarse y lavarse por separado los
revestimientos y los tapones y unirlos despus. Son tiles para esto los coladores o tamices fabricados
de polipropileno.
El material de vidrio nuevo, excepto el fabricado de borosilicato o material similar, puede requerir
neutralizacin. Cuando se esterilizan al autoclave lquidos en tubos o frascos de vidrio sdico puede
liberarse lcali y alterar el pH. La inmersin durante varias horas en cido clorhdrico al 2-3% es por lo
general suficiente, aunque es conveniente comprobar una muestra llenndolos de agua destilada neutra
ms unas gotas de un indicador apropiado y esterilizndolos en el autoclave.
VASIJAS DE DESECHO
Despus de dejarlas toda la noche para permitir que acte el desinfectante, debe verterse
cuidadosamente el contenido de las vasijas a travs de un colador de polipropileno. El colador y su
contenido se ponen en un cesto desechable y se esteriliza al autoclave.
Deben utilizarse guantes de goma para estas operaciones. Las vasijas de desecho vacas se esterilizan
al autoclave antes de volver al laboratorio para su uso posterior. Pueden tener contaminacin residual.
3.7.2.3. PIPETAS REUTILIZABLES
Tras sumergirlas totalmente en desinfectante y detergente durante toda la noche, deben retirarse las
pipetas con las manos enguantadas.
Antes de lavar las pipetas, deben retirarse los tapones de algodn hidrfilo. Esto se puede hacer
insertando su punta en un tubo de goma fijado al grifo de agua corriente. Los tapones que presenten
dificultades para retirarlos pueden quitarse con un ganchillo. Se fabrican diversas excelentes mquinas
lavapipetas que se fundan en la presin del agua y/o en la accin de sifn, aunque el lavado final debe
hacerse en agua destilada o desionizada.
MUESTRAS DE ORINA DE 24 HORAS
Aunque es raro en los laboratorios de microbiologa, otros departamentos de patologa pueden
enviarlas para su eliminacin sobre la base de que pueden contener organismos patgenos. De manera
ideal, deben procesarse en el departamento correspondiente de la manera siguiente.
Debe aadirse a la orina la cantidad suficiente de desinfectante por ejemplo, hipoclorito, para que de la
dilucin de uso. Tras dejarla toda la noche, la orina debe verterse cuidadosamente en el fondo de la pila
o sumidero para que se rena con productos similares del alcantarillado pblico. Los recipientes, que
generalmente son de plstico, pueden ponerse en bolsas de color codificado para la incineracin.

INCINERACION
Los problemas con este mtodo de eliminacin son asegurarse de que los desechos llegan realmente al
incinerador y que son totalmente esterilizados, es decir que nada queda sin esterilizar, ya sea como
material incombustible o que escape por la chimenea. Es raro que el incinerador est controlado por el
personal de laboratorio. En ocasiones ni siquiera bajo el control del personal del hospital o de la

institucin, sino a cierta distancia fuera del establecimiento y el material contaminado e infeccioso debe
enviarse a l por vas pblicas. Puede ser que no llegue nunca o que no se incinere.
Los incineradores no siempre son eficientes. Ninguno de ellos est controlado. Pueden hallarse entre
las cenizas materiales incombustibles y de su aparicin puede dudarse si habrn sido suficientemente
calentados para matar a los microorganismos. Hemos recogido restos de animales sin quemar, incluso
pieles y plumas y vsceras en un incinerador de laboratorio. El tiro de aire puede arrastrar
microorganismos por la chimenea a la atmsfera, si est demasiado cargado o la carga mal distribuida.
Darlow (comunicacin personal) ha recuperado grmenes en placas expuestas sobre una chimenea.
Recomienda que los incineradores utilizados para material infeccioso dispongan de retroquemadores,
de manera que quemen su propio humo y conviertan sus emanaciones en inocuas. Esta
recomendacin est recogida en el Cdigo de Prctica (DHSS, 1978) que exige tambin una
supervisin adecuada de la incineracin de desechos de laboratorio infectados9.
Ala vista de los problemas e incertidumbres asociadas con la incineracin, parece aconsejable utilizar
este mtodo nicamente para materiales que se han esterilizado al autoclave o se han desinfectado y
que, por razones estticas u otras causas, no puedan echarse a la basura. Puede haber excepciones,
naturalmente, y es un ejemplo de ello los recipientes para muestras de orina de 24 horas. Debe tenerse
cuidado cuando se incineran los plsticos. Puede producirse un humo fuertemente txico y se
recomienda generalmente que los materiales plsticos no sobrepasen el 20 % de la carga.

1. INTRODUCCIN
Durante la rutina de trabajo diario que se realizan en todas las secciones del laboratorio clnico, se
manipulan diferentes tipos de muestras, los cuales pueden contener agentes infecciosos importantes,
que requieren ser eliminados antes de descartar los envases respectivos.
Por otro lado, existen materiales de laboratorio reusables que requieren posterior a su utilizacin, de
una limpieza y esterilizacin apropiada, tal que puedan ser utilizados posteriormente.
En todas estas situaciones, el personal de limpieza, desinfeccin y esterilizacin del laboratorio clnico,
realiza calladamente una labor extraordinaria en beneficio de todo el personal tcnico, el cual en
muchos casos no es valorado en su justa medida.
Es importante recordar que al realizar cualquier procedimiento de limpieza y desinfeccin, se deben
tener presente las precauciones universales, los equipos de bioseguridad requeridos y considerar
TODAS las muestras como de alto riesgo.
Concientes de la necesidad de proporcionar una gua de limpieza, desinfeccin y esterilizacin para los
compaeros que realizan sta misin, ponemos a su disposicin el presente trabajo que rene una
revisin bibliogrfica de la literatura especializada y la opinin de expertos en la materia, metodologas
aplicadas en hospitales forneos y en otros casos recomendaciones personales.

2. DEFINICIONES
a) Esterilizacin : Proceso que destruye toda forma de vida microbiana. Un objeto estril (en sentido
microbiolgico) est libre de microorganismos vivos.
b) Desinfeccin : Es la destruccin, inactivacin o remocin de aquellos microorganismos que pueden
causar infeccin u ocasionar otros efectos indeseables; la desinfeccin no implica necesariamente
esterilizacin.

c) Desinfectante : Agente usualmente qumico, que mata las formas en crecimiento de los
microorganismos, pero no necesariamente las esporas. El trmino se refiere a sustancias utilizadas
sobre objetos inanimados.
d) Antisptico : Sustancia que impide el crecimiento o la accin de los microorganismos, ya sea
destruyndolos o inhibiendo su crecimiento y actividad. Se aplica sobre superficies corporales.
e) Sanitarizante : Agente que reduce la poblacin microbiana a niveles seguros, segn los
requerimientos de salud pblica. Se aplica en objetos inanimados de uso diario, por ejemplo utensilios y
equipos para manipular alimentos, vasos, platos y otros objetos de uso similar.
f) Germicida : Agente que mata a los microorganismos, pero no necesariamente a sus esporas.
g) Bactericida : Agente que mata a las bacterias.
h) Bacteriosttico : Agente que inhibe el crecimiento de las bacterias, mientras permanece en contacto
con ellas.
i) Fungicida : Agente que mata los hongos.
j) Fungisttico : Agente que inhibe el crecimiento de los hongos, mientras permanece en contacto con
ellos.
k) Virucida : Agente que destruye los virus.

3. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA VELOCIDAD DE DESTRUCCIN DE LOS

MICROORGANISMOS
a) Temperatura:
Las temperaturas elevadas tienen efectos dainos sobre los microorganismos y se debe
tener en cuenta que cuando, adems de la temperatura, tambin se utiliza un agente antimicrobiano,
los incrementos en la temperatura aceleran la destruccin de los microorganismos. Por ejemplo, la
muerte de una suspensin bacteriana por fenol es mucho ms rpida a 42C que a 30C.
b) Tipo de microorganismos:
Las especies de microorganismos difieren en su susceptibilidad a los agentes fsicos y
qumicos. En las especies formadoras de esporas, las clulas vegetativas son mucho
ms susceptibles que las formas esporuladas.
c) Estado fisiolgico de las clulas:
El estado fisiolgico de los microorganismos puede influenciar la susceptibilidad a un
agente antimicrobiano. Las clulas jvenes, metabolicamente activas, son ms fcilmente destruidas
que las clulas viejas cuando el agente acta interfiriendo con el metabolismo.

d) Ambiente.
Las propiedades fsicas y qumicas del medio o sustancia donde se encuentran los microorganismos,
tambin tienen una profunda influencia sobre la eficacia de la destruccin microbiana, por ejemplo,
el calor es mucho ms eficaz en materiales cidos que en materiales alcalinos.
La consistencia del material influye notablemente en la penetracin del agente. La presencia de material
orgnico puede reducir significativamente la eficacia de un agente qumico, ya sea inactivndolo o
protegiendo de l a los microorganismos si estn presentes.

4. LIMPIEZA DE MATERIAL REUSABLE NO CONTAMINADO

La limpieza se define como el proceso de remover, a travs de medios mecnicos y/o fsicos, el polvo,
la grasa y otros contaminantes de las superficies, equipos, materiales, personal, etc. Este proceso, junto
con un adecuado proceso de desinfeccin, es indispensable para controlar la presencia de los
microorganismos en el ambiente.
El primer paso del proceso de desinfeccin es la limpieza. La limpieza remueve restos de tejido,
moco, sangre, etc., que podran interferir con la accin del desinfectante.
Para realizar una limpieza adecuada se deben considerar el tipo de accin del agente utilizado
(remocin mecnica, disolucin o detergente), las condiciones requeridas para aplicar la solucin
limpiadora y el tiempo de contacto necesario para que sta ejerza su efecto.
Los instrumentos con partes removibles debern desensamblarse de acuerdo con las instrucciones del
fabricante, para asegurarse que todas las superficies se expondrn al procedimiento de limpieza.
Aproximadamente 99.8% del material orgnico puede ser removido con una limpieza meticulosa. La
limpieza puede ser acompaada de lavado manual o mecnico.
Debe haber en el laboratorio cuatro tipos importantes de recipientes para productos potencialmente
infectados :

Cestos o bolsas autoclavables de un solo uso para recibir cultivos y muestras.

Vasijas de un solo uso para recibir portaobjetos, pipetas Pasteur y pequeos artculos a
desechar.
Vasijas altas para pipetas graduadas (reusables).
Bolsas de plstico para materiales combustibles tales como cajas para muestras y envoltorios
que puedan estar contaminados.
Todos estos recipientes deben ir a la seccin de limpieza y esterilizacin para el tratamiento final y
esterilizacin de aquellos potencialmente contaminados.
Eleccin del recipiente :
Las vasijas de desechos deben ser fuertes y esterilizables por autoclave y los recipientes ms
adecuados son los bocales de 1 litro de polipropileno o los tarros del mismo material con tapa a rosca.
Son suficientemente profundos para mantener sumergidas la mayora de las cosas que es probable se

desechen, son irrompibles y resisten muchas esterilizaciones por autoclave. Son mejores los tarros de
polipropileno con tapa a rosca, ya que pueden cerrarse despus de su uso, invertirse para asegurar que
el desinfectante est en contacto con el material.
Un recipiente de desecho de 1 litro debe contener 750 mi de desinfectante diluido, dejando espacio
para que ascienda el nivel sin que se derrame ni que gotee cuando se traslade.
Los supervisores de la seccin debe asegurarse de que no se coloquen en las vasijas de desecho
cosas inapropiadas. Nunca deben aadirse grandes volmenes de lquido a los desinfectantes diluidos.
Lquidos tales como los sobrenadantes de la centrifugacin, deben verterse en vasijas de desecho, que
contienen el volumen usual de desinfectante puro, a travs de un embudo adaptado en la parte superior
de la boca. Esta disposicin impide se derramen gotas y se formen aerosoles. No debe agregarse a los
desinfectantes artculos que contengan grandes cantidades de protena, sino que deben desinfectarse
en el autoclave o incinerarse.
Ningn material debe dejarse en el desinfectante de la vasija de desecho durante ms de 24 horas, ya
que en caso contrario se desarrollarn las bacterias supervivientes. Por tanto, todas las vasijas deben
vaciarse una vez al da, aunque es una cuestin particular s se hacen al final del da o a la maana
siguiente. Deben vaciarse incluso las vasijas que hayan recibido poco o ningn material al llegar ese
momento.
Las vasijas para las pipetas recuperables deben estar hechas de polipropieno o de goma. Son de
mayor seguridad que el vidrio. Las vasijas deben ser suficientemente altas para permitir que las pipetas
se sumerjan totalmente sin que se derrame el desinfectante. Debe aadirse al desinfectante un
detergente compatible para facilitar la limpieza de las pipetas en la fase final
Ref: Esterilizacin, desinfeccin y tratamiento de los materiales infectados.
http://html.rincondelvago.com/esterilizacion-y-desinfeccion-de-instrumentos-de-laboratorio.html
El agente seleccionado de limpieza deber:
1. Ser capaz de remover tejido orgnico.
2. Capaz de prevenir depsitos flotantes.
3. Con baja formacin de espuma.
4. Capaz de ser enjuagado completamente.
5. Compatible con los materiales que estn siendo limpiados.
Los detergentes enzimticos estn especficamente diseados para penetrar y desbaratar
las protenas y la materia orgnica. Los agentes de limpieza debern ser preparados de acuerdo con
las recomendaciones del fabricante en cuanto a dilucin, compatibilidad con los artculos, el uso
adecuado y la temperatura de la solucin.
Enjuague y secado:
Despus de la limpieza los instrumentos que se desinfectarn debern ser enjuagados vigorosamente
para remover cualquier residuo de detergente.

Hay que secar cuidadosamente cada instrumento usando aire para secar orificios y ranuras pequeas
para prevenir la dilucin del desinfectante.
Desinfeccin
De acuerdo a su definicin, la desinfeccin se emplea cuando se tratan los instrumentos de uso mdico,
utensilios, paredes y pisos de las habitaciones de los enfermos, etc., con el propsito de evitar una
posible infeccin. Para realizar este proceso se usan agentes qumicos (desinfectantes)
o procesos fsicos como el calor.
El trmino sanitarizacin usualmente se refiere al proceso empleado para reducir el contenido de
microorganismos viables remanentes en una superficie limpia. En la industria se emplea este trmino
cuando se tratan, con agentes qumicos o fsicos, las reas de produccin y los equipos empleados en
la elaboracin de productos, con el propsito de reducir el contenido microbiano hasta niveles
insignificantes.
Limpieza de Equipos :
El personal de limpieza y desinfeccin tambin ser responsable de la limpieza de los equipos de
laboratorio, tales como las refrigeradoras, autoclave ( reas no tcnicas ), hornos, etc , lo cual debe
realizarse al menos una vez al mes y en coordinacin con los jefes de cada seccin del laboratorio.

5. FLUJOGRAMA DE TRABAJO EN LA DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN DE

MATERIALES DE LABORATORIO

6. TRATAMIENTO Y ELIMINACIN DE MATERIALES POTENCIALMENTE

CONTAMINADOS
En primer lugar, todo material " sucio " de laboratorio, deber considerarse como de alto riesgo con el
potencial de transmitir infecciones. Por lo que se deben tomar las medidas adecuadas en su manejo y
descontaminacin.
Existen tres mtodos prcticos para el tratamiento de los materiales de laboratorio desechados y de los
desechos contaminados:

La esterilizacin por autoclave.

La incineracin ( no utilizada en los laboratorios )

La desinfeccin qumica.
La eleccin se realiza atendiendo a la naturaleza de los materiales; si es desechable o recuperable y,
en este ltimo caso, si se ve afectado por el calor. Con ciertas excepciones, ninguno de estos mtodos
excluye a los dems. Puede verse en la ms abajo que la incineracin sola nicamente puede
aconsejarse si el incinerador se halla bajo el control del personal del laboratorio. La desinfeccin sola es
aconsejable nicamente para las pipetas graduadas recuperables.

Organizacin del rea de desinfeccin y descontaminacin :

Los diseos del rea de limpieza y esterilizacin para tratar los materiales de laboratorio desechados
deben incluir autoclaves, un trituradora, una unidad de eliminacin de basura conectada por tubera de
plomo al alcantarillado pblico, fregaderos hondos, mquinas para lavar material de vidrio, estufas de
desecacin, estufas de esterilizacin y mesas grandes de acero inoxidable.
Estas habitaciones deben tener disposicin adecuada para evitar cualquier posible mezcla de
materiales contaminados y descontaminados. Los arquitectos deben trabajar por tanto, sobre
un diagrama de flujo o un plano de vas crticas, tomando especial cuidado en la eliminacin del vapor
del autoclave.
El material contaminado llega en sus recipientes de color codificado a una bancada o una zona
designada y utilizada nicamente para este fin. Se separan seguidamente de acuerdo con su color y se
envan al incinerador o se cargan en el autoclave. No hay ningn cruce en esta zona. Tras la
esterilizacin en el autoclave, los contenedores se llevan a la mesa de separacin
Antes de ser esterilizado al autoclave, deben quitarse las tapas desechables y despus incluidas en la
carga del autoclave de manera que no dificulten la penetracin del vapor. Deben quitarse las ligaduras
de las bolsas de plstico y abrir por completo las bolsas en las cestas o cubos que las mantienen.
Materiales de vidrio contaminados :
Despus de esterilizarlos al autoclave, los medios de cultivo pueden verterse o extraerse y los tubos,
frascos, etc., se lavan a mano o mecnicamente con un detergente adecuado. El tipo de lquido o
polvos de lavado que se utilice depender de la dureza del agua suministrada y del mtodo de lavado.
Deben tenerse en cuenta las recomendaciones de varios fabricantes de detergentes de laboratorio.
Los laboratorios con mucho trabajo precisan mquinas de lavado de material de vidrio. Antes de adquirir
una de estas mquinas es preferible estudiar varias de ellas y preguntar a otros laboratorios cules son
los modelos de que disponen que consideran satisfactorios. No todas las mquinas de lavado de
material de vidrio son tan buenas como proclaman sus fabricantes. Un requisito previo es un buen
aporte de agua destilada o desionizada.
Si se realiza el lavado a mano, son necesarias piletas dobles, para el lavado y para el aclarado posterior
y adems, cuencos de plstico o de acero inoxidable para el aclarado final en agua destilada. El
agua destilada de alambiques no revestidos, independiente de la conduccin de vapor, es raro sea
satisfactoria para el trabajo bacteriolgico. La tecnologa moderna tiene a disposicin maquinas
lavadoras automatizadas para ste fin y otras por el mtodo de sonificacin.
Los revestimientos de goma de los tapones a rosca deben separarse y lavarse por separado los
revestimientos y los tapones y unirlos despus. Son tiles para esto los coladores o tamices fabricados
de polipropileno.
El material de vidrio nuevo, excepto el fabricado de borosilicato o material similar, puede requerir
neutralizacin. Cuando se esterilizan al autoclave lquidos en tubos o frascos de vidrio sdico puede
liberarse lcali y alterar el pH. La inmersin durante varias horas en cido clorhdrico al 2-3% es por lo
general suficiente, aunque es conveniente comprobar una muestra llenndolos de agua destilada neutra
ms unas gotas de un indicador apropiado y esterilizndolos en el autoclave.
Vasijas de desechos :

Despus de dejarlas toda la noche para permitir que acte el desinfectante, debe verterse
cuidadosamente el contenido de las vasijas a travs de un colador de polipropileno. El colador y su
contenido se ponen en un cesto desechable y se esteriliza al autoclave.
Deben utilizarse guantes de goma para estas operaciones. Las vasijas de desecho vacas se esterilizan
al autoclave antes de volver al laboratorio para su uso posterior. Pueden tener contaminacin residual.
Pipetas reutilizables :
Tras sumergirlas totalmente en desinfectante y detergente durante toda la noche, deben retirarse las
pipetas con las manos enguantadas.
Antes de lavar las pipetas, deben retirarse los tapones de algodn hidrfilo. Esto se puede hacer
insertando su punta en un tubo de goma fijado al grifo de agua corriente. Los tapones que presenten
dificultades para retirarlos pueden quitarse con un ganchillo. Se fabrican diversas excelentes mquinas
lavapipetas que se fundan en la presin del agua y/o en la accin de sifn, aunque el lavado final debe
hacerse en agua destilada.
Ref: Esterilizacin, desinfeccin y tratamiento de los materiales infectados.
http://html./esterilizacion-y-desinfeccion-de-instrumentos-de-laboratorio.html

7. METODOS DE DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN

7.1 Mtodos Fsicos:
-- Calor Hmedo (Ej. Autoclave).
-- Calor Seco (Ej. Horno).
-- Radiaciones (Ej. Ultravioletas).
-- Filtracin (Ej. Filtros Millipore ).
7.2 Mtodos Qumicos:
-- Antispticos (Ej. Alcohol).
-- Desinfectantes / Esterilizantes (Ej. Cloro).

8. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS MTODOS

8.1 Mtodos Fsicos:
8.1.1 Calor Hmedo: Autoclave
El Autoclave es el aparato ms comnmente utilizado en los laboratorios para esterilizar cultivos
y soluciones que no se desnaturalicen a temperaturas mayores a 100C. Una temperatura de 121 C
( 15 Lbs de presin) con un tiempo de exposicin de 15 minutos sirve para destruir microorganismos,
incluso los formadores de esporas.

Ventajas del calor hmedo:

Rpido calentamiento y penetracin.

Destruccin de bacterias y esporas en corto tiempo.

No deja residuos txicos.

Hay un bajo deterioro del material expuesto.

Econmico.
Desventajas del Calor Hmedo:

No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua.

Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metlicos.

Materiales que se pueden esterilizar con vapor:
- Material textil - Material de vidrio- Material de goma- Instrumental quirrgico de acero inoxidableSoluciones acuosas - Todo aquel material cuyo fabricante certifique pueda ser esterilizado por vapor.
Materiales que no se pueden esterilizar con vapor:
- Sustancias oleosas- Sustancias grasas- Polvos- Instrumental quirrgico cromado o niqueladoArtculos elctricos sin cobertura especial- Todo material que no tolera la exposicin al calor y a la
humedad.

AUTOCLAVE

MOVIMIENTO DEL VAPOR DENTRO DE LA AUTOCLAVE

Relacin de Presin Vs Temperatura en el Autoclave
Presin ( Libras ) Temperatura ( C )
5 108
10 116
15 >>>>>>>>>>> 121
20 127
25 131
30 134
Resumen de un ciclo esterilizacin en autoclaves:
1. Se abre la vlvula de admisin de vapor a la camisa precalentando la cmara.
2. Al terminar de salir el aire de la camisa, se abre la vlvula que comunica camisa y cmara
permitiendo la entrada de vapor a la cmara.

3. Cuando el vapor ocupa totalmente la cmara y el termmetro marca la temperatura establecida

empieza el ciclo de esterilizacin.
4. Al terminar el ciclo se expulsa el vapor de acuerdo a necesidades: lentamente si se trata de lquidos
para evitar una descompresin rpida o rpidamente si se trata de otras cargas.
5. Una vez expulsado el vapor se abre la vlvula que comunica la camisa con la atmsfera. Se produce
presin negativa y se realiza el secado por medio de la succin de aire en la cmara.
En los autoclaves de desplazamiento por gravedad que son los primeros modelos fabricados, el tiempo
de penetracin es prolongado por una incompleta penetracin de aire y por lo tanto los tiempos de
esterilizacin tambin son mayores. En la actualidad an cuando funcionan con el mismo principio,
facilitan su operacin y aumentan el nivel de seguridad por medio de la incorporacin de controles
automticos, bomba de vaco y microprocesadores.
8.1.2 Calor Seco: Horno
Todos los microorganismos son susceptibles en distinto grado, a la accin del calor. El calor provoca en
ellos coagulacin y desnaturalizacin de sus protenas.
La efectividad del calor como mtodo de esterilizacin depende de :
-- Temperatura
-- Tiempo de exposicin
La estufa de esterilizacin ( Horno ), es el artefacto utilizado en los laboratorios para esterilizar por calor
seco. Se requiere mayor temperatura y tiempo de exposicin que el autoclave. La temperatura vara
entre 120 y 180C, requirindose distintos tiempos de exposicin. A 140C se necesitan por lo menos 5
horas de exposicin, mientras que a 160C se requieren al menos 2 horas de exposicin.

HORNO
Ventajas del Calor Seco:

No es corrosivo para metales e instrumentos.

Permite la esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias viscosas no

voltiles.
Desventajas del Calor Seco:

Requiere mayor tiempo de esterilizacin, respecto al calor hmedo, debido a la baja penetracin
del calor.
Materiales que pueden esterilizarse por calor seco.

Instrumental quirrgico cromado- Materiales de vidrio, aluminio o porcelana- Aceites, parafina,

sustancias grasas, vaselina- Polvos (talco).
Materiales que NO se pueden esterilizar por calor seco
- Material textil (algodn, sedas, lino, etc.)
- Gomas - Materiales sintticos - Todo material que se altere a la temperatura trabajo.
Temperatura
La temperatura de esterilizacin por Calor Seco deber estar entre 160 C 170 C.
Tiempos
El tiempo de exposicin del material se determina mediante la correspondiente validacin del ciclo.
El material a esterilizar se deber cargar con el esterilizador fro, teniendo en cuenta las siguientes
recomendaciones:
Cada unidad deber quedar separada de las vecinasLos materiales no debern estar en contacto con
las paredes, piso y techo del esterilizador. La carga del esterilizador ser homognea y no deber
superar el 80% de la capacidad total de la cmara
Etapas del ciclo de esterilizacin por calor seco :
1. Colocar el material dentro del Esterilizador2. Encender el Esterilizador3. Verificar que los
instrumentos de control de ciclo, tiempo y temperatura se encuentren en la posicin correcta4. Esperar
hasta que los instrumentos de medicin registren la temperatura seleccionada para el ciclo5. Cuando se
alcance la temperatura seleccionada, se comenzar a descontar el tiempo de esterilizacin 6. Cumplido
el tiempo de exposicin se apagar el Esterilizador7. La descarga del Esterilizador se efectuar una vez
que el material se haya enfriado
Precauciones
Durante el ciclo de Esterilizacin no deber abrirse la puerta del Esterilizador porque ello implicara
abortar el ciclo, debiendo en este caso recomenzarlo.
Otros agentes fsicos:
- Radiaciones ionizantes (rayos Gamma)

- Luz ultravioleta
- Filtracin (Filtros Millipore )
- Ultrasonido
8.2 Mtodos Qumicos:
La efectividad de estos agentes depende de las condiciones bajo las que actan:

Concentracin: vara con el tipo de agente y de microorganismo, pues una misma

concentracin del agente puede producir un efecto diferente en distintos microorganismos.

Tiempo: Los microorganismos no son susceptibles a un agente en la misma forma, por lo que no
todos los microorganismos mueren al mismo tiempo.

pH: el pH determina el grado de disociacin y la efectividad del agente qumico, pues a menor
disociacin, mayor permeabilidad y mayor efectividad.
Listado de Desinfectantes (agrupados por su radical qumico)

Compuestos Fenlicos:

Fenoles

Cresoles

Alcoholes:

Etlico

Isoproplico

Halgenos:

Yodo

Cloro

Oxidantes:

Perxido de hidrgeno

Permanganato de potasio

Colorantes:

Azul de metileno

Giemsa

Acridina

Metales Pesados:

Bicloruro de mercurio

Nitrato de plata

Vapores y Gases:

Formaldehdo (2 5 %)

Ozono (O3)

Oxido de etileno

Glicol.

cidos:

cido actico (1%)

cido brico

9. RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL USO DE LOS

DESINFECTANTES

No deben mezclarse en un mismo recipiente productos antispticos o desinfectantes de distinta

composicin.
No se debe modificar la concentracin establecida para cada procedimiento.

Nunca se deben tapar utilizando cubiertas de metal, algodn, gasa, corcho o papel. Usar la tapa
original.

Una vez que se vierte el contenido del desinfectante o antisptico, no deben retornarse a su
envase original.

Nunca debe llenarse un envase semivaco a partir de otro.

Las diluciones deben hacerse a la temperatura, y segn el procedimiento indicado por el
fabricante.

Deben almacenarse en reas secas, ventiladas y protegidas de la luz.

Vigilar y controlar la fecha de vencimiento de los antispticos y desinfectantes

Seleccin de un desinfectante :

Tipo y cantidad aproximada de microbios.

Tipo y cantidad de materia orgnica presente.

Tiempo de contacto.

Tipo de superficie a ser desinfectada.

Descripcin de la fecha de eficacia e instrucciones de su uso.

Seguridad y aceptabilidad ambiental del producto.

Buena actividad residual.

Costos. No necesariamente lo mejor es lo ms costoso.

TAMPOCO AHORRE DINERO A COSTA DE LA SEGURIDAD PERSONAL

10. LOS TIPOS DE GERMICIDAS Y SUS MECANISMOS DE ACCIN

10.1 Inorgnicos :
1.- Metales: Los ms efectivos son el mercurio, plata ,cobre y zinc. Actan inactivando las protenas
celulares al combinarse con ellas. Entre los compuestos de mercurio que se emplean como
antispticos en heridas superficiales de la piel y mucosas estn el mercurocromo (mercromina) y el
mertiolato. Entre los compuestos de plata utilizados como antispticos est el nitrato de plata (AgNO3) .
Entre los compuestos de cobre se encuentra el sulfato de cobre (CuSO4) que se utiliza como algicida
en los recipientes abiertos que contienen agua. Los compuestos de zinc tambin son fungicidas por lo
que se utilizan para tratar el pie de atleta2.- Acidos y lcalis: Actan alterando la permeabilidad y
coagulando las protenas. En general los cidos son ms eficaces que los lcalis. Dentro de estos
compuestos se encuentran el sulfrico (H2SO4), ntrico (HNO3), hidrxido sdico (NaOH)
e hidrxido potsico (KOH). 3.- Compuestos inorgnicos oxidantes: actan oxidando los
componentes de la membrana y enzimas. El agua oxigenada (H2O2) al 6% (20 volmenes) se utiliza
como antisptico en pequeas heridas de la piel.4.- Halgenos: Los halgenos especialmente el cloro
y el iodo son componentes de muchos antimicrobianos. Los halgenos son agentes fuertemente
oxidantes por lo que son altamente reactivos y destructivos para los componentes vitales de las clulas
microbianas. El iodo es un antisptico y el cloro un desinfectante.
a) Cloro: La muerte de los microorganismos por accin del cloro se debe en parte a la combinacin
directa del cloro con las protenas de las membranas celulares y los enzimas. El cloro es un
desinfectantes que actan sobre protenas y cidos nucleicos de los microorganismos. El producto
clorado ms utilizado en desinfeccin es el Hipoclorito de sodio ( NaOCl ), que es activo sobre todas las
bacterias, incluyendo esporas. El hipoclorito de sodio al 1% se puede utilizar como desinfectante
domstico y hospitalario, y de hecho es el ms barato, pero tambin el ms efectivo. La nica
desventaja reconocida es su relativa toxicidad provocando reacciones alrgicas en algunas personas.
Aparte se describen los sntomas ( Pgina No. 34 ).
Concentracin del cloro puro casero : 5.25 %

Concentracin til : 1 al 2 %
El Cloro es un biocida de amplio espectro barato y eficaz, que se utiliza en disoluciones de 500- 5000
ppm para desinfeccin medioambiental Sin embargo, una vez disuelto, los tomos de cloro tienen una
vida media muy corta y para que el formulado tenga efecto, debe ser preparado in situ antes de su
utilizacin.
NOTA: Si la solucin comercial de Hipoclorito de Sodio es al 5.25%, la solucin al 1% se prepara
mezclando 1 litro de solucin comercial y 4.25 litros de agua.
Tambin se puede utilizar el siguiente mtodo:
Ejemplo: Tenemos Cloro comercial al 5% y deseamos preparar un litro al 0.5% (5000 ppm).
FORMULA :
CD x VD
V = -------------CC
VD : Volumen deseado.
CD : Concentracin deseada.
CC : Concentracin conocida.
0.5% x 1000 c.c.
V = -------------------- = 100 c.c.
5%
Por tanto, se debe agregar 100 c.c. de hipoclorito de sodio al 5% a 900 c.c. de agua para tener 1000
c.c. de una dilucin al 0.5%.
Compuestos de amonio cuaternarios :
Son agentes desinfectantes por su accin detergente, rompen la membrana citoplasmtica debido a
que disuelven las capas lipdicas, adems desnaturalizan las protenas. Son detergentes catinicos
eficaces contra bacterias vegetativas y algunos hongos, aunque no contra las mycobacterias ni
esporas. Son inactivados por las protenas y por una diversidad de materiales naturales y plsticos, por
los detergentes no inicos y por el jabn. Su utilizacin en el laboratorio es por tanto limitada, aunque
tienen la clara ventaja de ser estables y de no corroer los metales. Se emplean generalmente a
diluciones de 1-2% para la limpieza de superficie e instrumentos.
Los compuestos de amonio cuaternario no son txicos y son inofensivos para la piel y los ojos.
Ej. Cetrimida, Cloruro de benzalconio, etc.

b) Iodo: El mecanismo mediante el cual el iodo ejerce su accin antimicrobiana es debido a su accin
oxidante. El iodo se puede utilizar como antisptico bajo dos formas:

i) tintura de iodo, es una solucin alcohlica (tintura) de iodo (I2) ms ioduro potsico (KI) o
ioduro sdico (NaI).

ii) ii) iodforos, son mezclas de iodo (I2) con compuestos que actan como agentes
transportadores y solubilizadores del iodo. Por ejemplo, la povidona iodada (Betadine) es un complejo
de iodo y polivinil pirrolidona (PVP).
Los agentes alquilantes actan aadiendo pequeas cadenas de tomos de carbono a las enzimas,
que como consecuencia quedan inactivadas, lo que ocasiona la muerte de las clulas. El formaldehdo,
la formalina y el glutaraldehdo son algunos de estos compuestos.
El xido de etileno es un compuesto gaseoso que se utiliza como agente esterilizante para el
tratamiento de material termosensible y objetos voluminosos que no pueden ser esterilizados mediante
otros sistemas. Sin embargo, es un compuesto muy txico para la especie humana y su uso ya ha sido
reemplazado por otros ms seguros.
10.2 Orgnicos :
a) Alcoholes: Los alcoholes actan desnaturalizando las protenas, disolviendo las capas lipdicas y
como agentes deshidratantes. Se recomienda la utilizacin del Alcohol Etlico, no desnaturalizado, o
Alcohol Isoproplico al 70%. La accin deshidratadora de ambos alcoholes al 95% limita su utilidad, ya
que las protenas deshidratadas resisten la desnaturalizacin. El etanol al 70% se usa como antisptico
de la piel y como desinfectante en los termmetros clnicos orales y algunos instrumentos quirrgicos.
El etanol y el isopropanol son utilizados como desinfectantes y antispticos clnicos. Tomar en cuenta
que el alcohol etlico al 70% tiene un efecto bacteriosttico y que al 95% su efecto es bactericida.
Su actividad cae bruscamente en concentraciones menores al 50%. Las bacterias sometidas a la accin
de alcohol concentrado sufren destruccin de la pared celular, permitiendo el paso de contenido
intracelular y componentes de la pared celular al medio externo (endotoxinas). Las bacterias sometidas
a la accin de alcohol al 70% sufren una deshidratacin menos violenta, conservando la integridad
celular. El alcohol se considera un desinfectante de nivel intermedio y se usa en la desinfeccin de
superficies y artculos no crticos
El alcohol tiene la ventaja de no ser corrosivo. El alcohol Isoproplico es hasta cierto grado ms
germicida que el Etlico, pero es altamente deshidratante.
Las desventajas de los alcoholes en los equipos son que daan la cubierta de los lentes, tienden a
alterar y endurecer el material de goma y plstico, se inactivan en presencia de materia orgnica y se
evaporan rpidamente. Esto condiciona que no se deben usar alcoholes como mtodo de desinfeccin
de alto nivel ni para materiales en inmersin.
b) Fenol y compuestos fenlicos: Una solucin acuosa al 5% de fenol mata rpidamente a las
clulas vegetativas de los microorganismos. Sin embargo, las esporas son mucho ms resistentes al
fenol. Debido a que el fenol es txico y tiene un olor desagradable ya casi no se usa como desinfectante
o antisptico, siendo reemplazado por compuestos fenlicos que son sustancias derivadas del fenol
menos txicas y ms activas frente a los microorganismos. Lysol es una mezcla de compuestos
fenlicos que se utiliza para desinfectar objetos inanimados como los suelos, paredes y superficies. El
fenol y compuestos fenlicos actan alterando la permeabilidad de la membrana citoplsmica as como

desnaturalizando protenas. El hexaclorofeno es un compuesto fenlico que ha sido reemplazado por la

clorhexidina, menos txica para la especie humana.
Recomendaciones generales :
a) No deben mezclarse en un mismo recipiente productos antispticos o desinfectantes de distinta
composicin.
b) No se debe modificar la concentracin establecida para cada
procedimiento.
c) Nunca se deben tapar utilizando cubiertas de metal, algodn, gasa, corcho o papel. Usar la tapa
original.
d) Una vez que se vierte el contenido del desinfectante o antisptico, no deben retornarse a su envase
original.
e) Nunca debe llenarse un envase semivaco a partir de otro.
f) Las diluciones deben hacerse a la temperatura, y segn el
procedimiento indicado por el fabricante.
g) Deben almacenarse en reas secas, ventiladas y protegidas de la luz.
h) Vigilar y controlar la fecha de vencimiento de los antispticos y
desinfectantes

Para efectuar los procedimientos de desinfeccin de alto nivel siempre deben cumplirse los
siguientes aspectos:
1. - El material que ser sometido a desinfeccin de alto nivel debe estar totalmente libre de materia
orgnica, porque sta interfiere en el proceso de desinfeccin.

2. - Los agentes qumicos utilizados deben corresponder a los aprobados por el Ministerio de Salud.
3. - La solucin debe estar vigente. Para estos efectos se debe consignar la fecha de vencimiento en el
contenedor o bidn.
4. - Las soluciones se deben manipular con proteccin adecuada para evitar
Exposicin laboral del personal que los manipula.
5. - El tiempo de desinfeccin de alto nivel debe ser establecido de acuerdo a las caractersticas propias
de cada desinfectante.
6. - Si se trata de un procedimiento por medio de agentes qumicos se deben
Sumergir completamente los materiales a desinfectar. Si los materiales tienen canales o tubos se debe
verificar que el desinfectante llene el lumen y tenga
contacto con todas las superficies a desinfectar.
7. - Los contenedores deben mantenerse tapados para evitar la evaporacin y
vapores txicos en el ambiente.
8. - Pasado el tiempo de exposicin se deben sacar los artculos manipulndolos con tcnica asptica
(guantes estriles) y enjuagarlos con agua estril o destilada cuidando de no contaminarlos. En caso
que los productos no sean utilizados de inmediato deben secarse por medio de aire filtrado o
compresas estriles y guardarse envueltos en paos estriles siguiendo iguales recomendaciones que
para elalmacenamiento de material estril. Se debe tener presente que bajo ninguna circunstancia los
artculos pueden almacenarse hmedos.
9. - Se debe utilizar controles qumicos que midan la concentracin del desinfectante en la medida que
exista disponibilidad de ellos.
10. - Los procedimientos de desinfeccin de alto nivel deben ser realizados en reas bien ventiladas a
fin de evitar exposicin del personal a vapores producidos por el agente qumico.
11. - No es recomendable enjuagar los artculos desinfectados de alto nivel con agua corriente debido a
la posibilidad de contacto con superficies contaminadas. En caso de no contar con agua estril para
este fin debe usarse alcohol etlico o isoproplico para el ltimo enjuague. Este producto eliminar
microorganismos residuales y contribuir en el proceso de secado.

11. CONTROL DE LA ESTERILIZACIN

Los controles de esterilizacin pueden ser: fsicos, qumicos y biolgicos .
Controles fsicos. Se trata de controlar el funcionamiento mecnico mediante termoelementos,
manmetros, higrmetros, termmetros, de que estn dotados la mayora de los distintos sistemas de
esterilizacin, as como las grficas.
Indicadores qumicos. Llamados termocromos e indicadores colorimtricos, se trata de compuestos
principalmente a base de sales de diferentes metales.

Indicadores biolgicos. Los controles microbiolgicos confirman si el proceso es capaz de alcanzar la

pequesima probabilidad de supervivencia microbiana (10-6), considerada en toda la legislacin
internacional como garanta de esterilidad.
Existen muy diversos tipos de controles biolgicos con esporas bacterianas, como:
a) tiras de papel impregnadas de esporas en envases individuales
b) ampollas con tiras o discos de papel inoculados de esporas y provistas de un medio de cultivo
incorporado
c) suspensiones de esporas dosificadas para inocular los productos a esterilizar.
d) suspensiones de esporas en el propio caldo de cultivo. Las esporas utilizadas provienen de Bacillus
subtilis como control biolgico de la esterilizacin por calor seco y xido de etileno y de Bacillus
stearothermophilus para la esterilizacin por vapor de agua.
Ref. Nurses and hospital infection control: knowledge, attitudes and behaviour of Italian operating
theatre staff. Angelillo IF, Mazziotta A, Nicotera GJ Hosp Infect 1999, Jun;42(2):105-12

12. ROTULADO DEL MATERIAL ESTERILIZADO

El rotulado de los materiales envasados puede ser: manual o mecnico
El rotulado mecnico se har con mquinas o plantillas destinadas a este fin.
Si el rotulado se hace manualmente, hacerlo con etiquetas autoadhesivas o etiquetas previamente
impresas. Habr que tener mucho cuidado de no daar el envoltorio al escribir. En caso que esto
suceda, habr que descartarlo y envasar nuevamente. Tener mucho cuidado que las tintas
de escritura no manchen el material.
Evitar escribir sobre papel que constituye la envoltura del material.
El material deber estar identificado con los siguientes datos:
a) Nombre del material b) Destinoc) Fecha de elaboracin y/od) Validez del productof) Cdigo del
responsableg) Nmero de lote
13. ALMACENADO
El producto terminado y esterilizado se deber colocar en canastos o contenedores,
preferentemente plsticos, que se encuentren identificados externamente y que se puedan apilar para
el ahorro de espacio fsico.
A su vez estos contenedores se colocarn dentro de armarios cerrados, higinicos, frescos, y secos.
Se deber evitar la manipulacin innecesaria de todos los materiales procesados.

14. VIGENCIA DE LA ESTERILIZACIN :

Si bien se acepta universalmente que la validez de la esterilizacin est condicionada a los eventos a
los que el material est expuesto, hasta tanto podamos tener un control estricto del material
almacenado, se sugiere tener en cuenta las siguientes recomendaciones del CDC, segn el tipo de
envoltorio y el lugar donde se almacenan los materiales esterilizados (solamente vlido para
almacenamiento dentro del Servicio de Esterilizacin).
Este cuadro es orientador y slo bajo las condiciones ambientales y controladas en el Servicio de
Esterilizacin
DURACION DE LA ESTERILIDAD
TIPO DE ENVOLTORIO

EN ARMARIO
CERRADO

EN ARMARIO ABIERTO

Tela simple

1 semana

2 das

Tela doble

7 semanas

3 semanas

Papel simple

8 semanas

3 semanas

Papel crep simple

10 semanas

Sobre tela simple

Bolsa plstica
termosellada

Mnimo 1 ao

Ref. Recomendaciones y gua de tratamiento en la desinfeccin y esterilizacin. Sociedad Argentina de

Infectologa.

15. BIOSEGURIDAD
Los principios de BIOSEGURIDAD se pueden resumir en:
a) Universalidad: Las medidas deben involucrar a todo el personal, el cual debe seguir las precauciones
estndares rutinariamente para prevenir la exposicin de la piel y de las membranas mucosas, en todas
las situaciones que puedan dar origen a accidentes, estando o no previsto el contacto con sangre o
cualquier otro fluido corporal de los paciente.
b) Uso de barreras: Comprende el concepto de evitar la exposicin directa a sangre y otros fluidos
orgnicos potencialmente contaminantes, mediante la utilizacin de materiales adecuados que se
interpongan al contacto de los mismos. La utilizacin de barreras (ej. guantes) no evitan los accidentes
de exposicin a estos fluidos, pero disminuyen las consecuencias de dicho accidente.
c) Medios de eliminacin de material contaminado: Comprende el conjunto de dispositivos y
procedimientos adecuados a travs de los cuales los materiales utilizados en la atencin de pacientes,
son depositados y eliminados sin riesgo.
Equipo protector personal :

Cada institucin tiene la obligacin de proveer equipo de proteccin adecuado (EPA) para los
trabajadores, que estn en contacto con materiales qumicos o contaminados. Es responsabilidad del
personal que trabaja en el rea donde los Instrumentos estn siendo descontaminados, limpiados y
procesados, vestir los artculos de proteccin para el trabajo que se est realizando.
El EPA deber minimizar la transferencia de microorganismos a los artculos que estn siendo
limpiados.
El EPA deber proteger a los trabajadores de organismos potencialmente patgenos que puedan estar
presentes en los artculos contaminados.
El EPA deber incluir:

Bata de manga larga o delantal para prevenir el contacto directo con artculos contaminados y las
superficies de trabajo.

Gorro desechable o reusable que se lava diariamente.

Mascarilla para proteger boca y nariz del contacto con gotas o aerosoles.

Lentes protectores con cubierta lateral.

Guantes de trabajo rudo con manga larga, que pueden ser hipoalergnicos, sin ltex o talco para
disminuir la posibilidad de sensibilizacin.
Zapatos adecuados para disminuir la posibilidad de resbalones o cadas.
Los accidentes biolgicos se producen generalmente por:
- Inoculacin accidental.
- Ingesta accidental.
- Derrames y salpicaduras.
- Derrames en la recepcin de muestras.
- Salpicaduras en cara y ojos.
- Salpicaduras y contacto directo.
- Salpicaduras en la superficie de trabajo.
- Aerosoles.
- Por el aire.
- Deliberados.
- De origen desconocido.

La mayora de los accidentes potenciales en el rea de limpieza y esterilizacin, son por

la naturaleza del espcimen, de origen biolgico.
Para que se produzca un accidente por agente biolgico deben concurrir bsicamente cuatro
elementos:

a) Un husped susceptible

b) Un agente infeccioso

c) Una concentracin suficiente de ste

d) Una ruta de transmisin apropiada.

El primer principio de bioseguridad es la contencin. El trmino contencin se emplea para describir
los mtodos que hacen seguro el manejo de materiales infecciosos en el laboratorio. El propsito de la
contencin es reducir al mnimo la exposicin del personal de los laboratorios, otras personas y el
entorno, con agentes potencialmente peligrosos.
Accidentes por exposicin a sangre o lquidos corporales : Se denomina a todo contacto con
sangre o fluidos corporales y que lleva una solucin de continuidad (pinchazo o herida cortante) o un
contacto con mucosas o con piel lesionada (eczema, escoriacin, etc.).
Agentes infecciosos transmitidos por accidentes ocupacionales : Numerosos agentes infecciosos
en la sangre o fluidos corporales de lo que se denomina "fuente", pueden ser transmitidos en el curso
de un accidente.
El riesgo de transmisin depende de numerosos factores, fundamentalmente de: la prevalencia de la
infeccin en una poblacin determinada la concentracin del agente infeccioso la virulencia del
mismo el tipo de accidente
En la prctica cualquier agente microbiano es capaz de producir una infeccin ocupacional, en
embargo, es aceptado que los agentes ms frecuentemente comprometidos son:

Virus de la Inmunodeficiencia humana (VIH), el riesgo de infectarse por este virus en

un accidente laboral a travs de una aguja que tiene sangre contaminada es estimado en 0.3-0.4%. En
un contacto mucoso con sangre contaminada baja a un 0.05%.

Virus de la Hepatitis B (HBV), el riesgo de infectarse por este virus en un accidente laboral a
travs de una aguja que tiene sangre contaminada es promedio un 15%, llegando hasta un 40%.

Virus de la Hepatitis C (HCV), el riesgo en este caso no est todava bien precisado citndose
cifras de hasta un 10%
Algunos componentes del programa de salud laboral del personal de Limpieza y Esterilizacin:
Examen de salud al ingreso
Barreras de proteccin del operador especficas por tipo de equipo
Condiciones de planta fsica donde estn ubicados los equipos.

 Evaluacin de los lmites permisibles ponderados (LPP).

Vacunacin anti Hepatitis B e Influenza.
Vigilancia de exposiciones laborales