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Universidad Inca Garcilaso de la Vega

Facultad de Ciencias Farmacuticas y Bioqumica

BIOQUIMICA II

IDENTIFICACION DE CREATININA

Docente: Q.F. MARLON PADILLA HUARI


2015

Universidad Inca Garcilaso de la Vega


Facultad de Ciencias Farmacuticas y Bioqumica

BIOQUIMICA II

INTRODUCCIN

La creatinina es una molcula de desecho que se genera a partir del metabolismo muscular. La
creatinina proviene de la creatina, una molcula muy importante para la produccin de energa
muscular.
Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en creatinina cada da. La
creatinina se transporta desde los msculos por medio de la sangre hacia el rin. Los riones
filtran la mayora de la creatinina y la eliminan en la orina.
Aunque es una sustancia de desecho, la creatinina es una prueba diagnstica esencial, ya que
se ha observado que su concentracin en sangre indica con bastante fiabilidad el estado de la
funcin renal. Si los riones no funcionan bien, no eliminan bien la creatinina y por lo tanto sta
se acumula en la sangre.
Por esto la creatinina puede avisar de una posible disfuncin o insuficiencia renal, incluso antes
de que se presenten sntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los anlisis de sangre que
se realizan comnmente. La determinacin de creatinina es un indicador til para evaluar la
funcin glomerular renal, teniendo en cuenta el prerrequisito que la produccin de creatinina y
su excrecin sean iguales.
Esto se cumple en individuos sanos con dieta normal. Las variaciones entre individuales en
estas condiciones son mnimas mientras que las interindividuales son muy fluctuantes debido a:
Diferencia en la masa muscular y por tanto de produccin de creatinina en distintos individuos.
Diferencia en la ingesta de carne. Un Kg de carne contiene de 2 a 5 g de creatina que se
convierte en creatinina en el proceso de coccin. Del 15 al 30% de la creatinina excretada
diariamente es de origen alimentario.
La creatinina en suero no es un buen indicador de la tasa de filtracin glomerular (FGR) ya que
su valor se encuentra aumentado solamente cuando sta ha disminuido a valores de 60-40
mL/min/1.73 m2 .
La utilidad clnica de la determinacin de creatinina es el diagnstico y pronstico de las
nefropatas, obstrucciones urinarias por afeccin de prstata, vejiga y urteres. Tambin
anurias transitorias por litiasis.
Su medicin est sujeta a diversas variables pre analticas; as, por ejemplo, se ve aumentada
en casos de lipemia, hemlisis y ejercicio fsico excesivo, y disminuye por hiperbilirrubinemia y
el embarazo. Tambin algunas enfermedades pueden alterar su concentracin srica, entre
ellas, la diabetes, cualquier enfermedad que comprometa la funcin renal, ya sea aguda o
crnica, as las hemorragias, hipotensin, rabdomiolisis, acromegalia y gigantismo, en los que
se aumenta su concentracin. Mientras que la caquexia por reduccin de la masa muscular la
reduce. Su excrecin en orina est disminuida por insuficiencia renal, miopatas, leucemias y
anemias.

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MARCO TEORICO

La creatinina es un compuesto orgnico generado a partir de la degradacin de la creatina (que


es un nutriente til para los msculos). Es un producto de desecho del metabolismo normal de
los msculos que usualmente es producida por el cuerpo en una tasa muy constante
(dependiendo de la masa de los msculos), y normalmente filtrada por los riones y excretada
en la orina. La medicin de la creatinina es la manera ms simple de monitorizar la correcta
funcin
de
los
riones.
La creatinina es una molcula de deshecho que se genera a partir del metabolismo muscular.
La creatinina proviene de la creatina, una molcula muy importante para la produccin de
energa muscular. Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en creatinina
cada da. La creatinina se transporta desde los msculos por medio de la sangre hacia el rin.
Los riones filtran la mayora de la creatinina y la eliminan en la orina.
Aunque es una sustancia de deshecho, la creatinina es una prueba diagnstica esencial, ya
que se ha observado que su concentracin en sangre indica con bastante fiabilidad el estado
de la funcin renal. Si los riones no funcionan bien, no eliminan bien la creatinina y por lo tanto
sta se acumula en la sangre. Por esto la creatinina puede avisar de una posible disfuncin o
insuficiencia renal, incluso antes de que se presenten sntomas. Por eso la creatinina suele
figurar en los anlisis de sangre que se realizan comnmente.
La ruta principal de la excrecin de la creatinina est a travs de los riones, donde la
creatinina es filtrada por el glomrulo y tambin secretada por el tbulo prximo. La Creatinina
es un indicador til de la salud renal porque se excreta en la orina como subproducto sin
cambios y fcilmente medido del metabolismo del msculo. En un rin sano, se reabsorba
poco o nada de creatinina, mientras que en enfermedad de rin, la concentracin de la
creatinina en la sangre puede aumentar. La concentracin de la creatinina en la orina y la
sangre se puede por lo tanto utilizar para calcular el tipo en el cual el rin est borrando la
creatinina - el tipo de separacin (CrCl) de la creatinina. Este tipo de CrCl se correlaciona con
el ndice de filtrado glomerular (GFR), que es importante en la evaluacin clnica de la funcin
renal.
El estudio de niveles de creatinina en la sangre es un anlisis que se realiza por separado o en
una peticin general de bioqumico en la sangre.
La creatinina es el resultado de la degradacin de la creatina, que es un componente de los
msculos. La creatinina puede ser transformada en ATP que es una fuente de alta energa para
las clulas.
La produccin de creatinina depende de la modificacin de la masa muscular, y ello vara poco
y los niveles suelen ser muy estables.

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Niveles altos: su aumento es causado por deshidratacin, fallo renal (por glomerulonefritis o
piedras en el rin), alteraciones de las vas urinarias como la obstruccin producida por un
clculo o por el aumento del tamao de la prstata, y tambin se ve en estadios iniciales de las
enfermedades musculares (distrofias).
Niveles bajos: su descenso se observa en los pacientes que tienen poca masa muscular, y
tambin puede estar causado por distrofias musculares graves.

Los adultos con mucha masa muscular pueden tener ms creatinina en la sangre que la
poblacin normal. Las personas ancianas, por otro lado, pueden tener menos creatinina en la
sangre
de
lo
normal.
Algunos frmacos pueden producir una elevacin anormal de las concentraciones de creatinina
en sangre. Una concentracin muy elevada de creatinina en la sangre puede indicar la
necesidad de someterse a dilisis para eliminar las sustancias de deshecho de la sangre.
Determinacin de la creatinina
El mejor parmetro bioqumico sanguneo de la funcin renal es la creatinina. En principio,
cuando mayor es el descenso de la funcin renal, tanto ms elevado es el valor de la creatinina
srica.
Los aminocidos glicina, arginina y metionina forman en el hgado la creatina, que por
fosforilacin da la fosfocreatina, que circula por la sangre hacia el musculo y cerebro, y
solamente en cantidades trazas se elimina por la orina. La fosfocreatina acumulada en el
musculo es un depsito de energa y con la prdida del fosforo se convierte en creatina, la cual
por deshidratacin pasa a creatinina. La creatinina es, por tanto, el anhdrido de la creatina, la
cual una vez que pasa a sangre no vuelve a ser utilizada y se excreta de forma constante por la
orina. La creatina, en cambio vuelve a ser reabsorbida por los tbulos, lo que explica que solo
aparezcan trazas de este metabolito en la orina.
La creatina se forma endgenamente en el metabolismo muscular, existiendo una relacin
directa con la masa muscular.
Fundamentalmente la creatinina es filtrada por los glomrulos, no se reabsorbe en
circunstancias normales, y solo en una mnima proporcin se secreta a nivel tubular,
aumentando dicha secrecin con el incremento de la concentracin srica de cratinina en la
insuficiencia renal progresiva. Puede haber reabsorcin tubular de creatinina en pacientes con
insuficiencia cardiaca grave. A diferencia de la uremia, la concentracin plasmtica de

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creatinina es prcticamente constante en un mismo sujeto e independiente del contenido


proteico de la dieta y dependiente solo de su funcin renal.
Por todo ello, como medida de filtracin glomerular, la determinacin de creatinina es muy
superior a la de la urea. Es decir, la medicin de los niveles de creatinina srica es clnicamente
ms especfica como ndice de la funcin renal que la determinacin de urea; sin embargo,
esta ltima es ms sensible.
Por tanto, si utilizamos ambas determinaciones como pruebas de screening de la funcin renal,
la determinacin de la urea producira ms falsos positivos, mientras que la determinacin de la
creatinina nos dara ms falsos negativos; de hecho la funcin renal puede estar claramente
restringida a pesar de los valores normales de la creatinemia. En principio se recomienda la
valoracin conjunta de ambas determinaciones, as como la relacin entre ambas, expresada
por el cociente de los valores plasmticos de urea/creatinina, que normalmente se sita
alrededor de 40. Valores superiores se observan en situaciones de hipercatabolismo o cuando
hay un enlentecimiento del flujo de orina tubular (que permite una mayor reabsorcin de urea),
como cuando hay una disminucin de la perfusin renal o en la obstruccin urinaria parcial
bilateral. Un nivel de creatinina prximo al lmite superior de la normalidad indica nicamente
que el paciente debe tener aun un filtrado glomerular y un rendimiento renal de por lo menos el
50 por 100 del normal. Aunque los valores plasmticos de urea y creatinina sean normales no
se pueden descartar la existencia de nefropata, de hecho puede haber hasta un 50-60 por 100
de nefronas no funcionales sin que ello alteren los niveles de urea y creatinina.
Por tanto estas determinaciones bioqumicas presentan un valor limitado por su escasa
sensibilidad diagnostica. En este aspecto ambas pruebas son superadas por un test de
funcionalidad renal, el aclaramiento de creatinina.
Las tcnicas analticas de determinacin de la creatinina se resumen en el mtodo
colorimtrico de Jaff y en el mtodo enzimtico de la creatininasa. En la reaccin de Jaff, el
cido pcrico en medio alcalino forma con a creatinina un tautmero de picrato de creatinina de
color naranja rojizo brillante que se mide a 500nm. El metodo enzimtico se basa en la
utilizacin de la enzima creatinasa (creatina- almifohidrolasa) que hidroliza la molcula de
creatinina segn la reaccin:

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SINTESIS DE CREATININA
La creatina es sintetizada en el hgado por metilacin del guanidoacetato usando SAM como
donante metilo.
El guanidoacetato se forma en el rin a partir de los aminocidos arginina y glicina.
La creatina es utilizada como forma de almacenamiento del fosfato de alta energa. El fosfato
del ATP es transferido a la creatina, generando fosfato de creatina, a travs de la accin de la
creatinfosfocinasa.
La reaccin es reversible cuando la demanda energtica es alta (e.g. durante el esfuerzo
muscular) la creatinfosfato dona su fosfato al ADP para producir ATP.
La creatina y la creatinfosfato se encuentran en msculo, cerebro y sangre. La creatinina es
formada en msculo a partir de la creatinfosfato por una deshidratacin no enzimtica y perdida
del fosfato.
La cantidad de creatinina producida se relaciona con la masa muscular y se mantiene
constante da a da. La creatinina es excretada por los riones y el nivel de excrecin
(porcentaje de clearance de creatinina) es una medida de la funcin renal.

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FUNCION BIOLOGICA

La creatina quinasa cataliza la produccin de fosfocreatina a travs de la fosforilacin de


una molcula de creatina, consumiendo una molcula de ATP en el proceso. La molcula de
ADP formada para crear una molcula de fosfocreatina se convierte inmediatamente en ATP
por las mitocondrias.
En la miofibrilla, al inicio de la contraccin muscular, la concentracin de ADP aumenta a medida
que disminuye los niveles de ATP. En esta situacin la enzima cataliza la reaccin inversa,
transfiriendo un radical fosforilo al ADP, restaurando rpidamente la concentracin de ATP.
As, la fosfocreatina, por intermedio del ATP, constituye una reserva energtica rpidamente
utilizable por el msculo esqueltico y otros tejidos, como por ejemplo el del cerebro (metabolismo
anaerbico). Sin embargo, la reserva de fosfocreatina no permite este gasto por un gran perodo de
tiempo. Este proceso de obtencin de energa, pasados 10 segundos, da lugar a otros mecanismos,
como la gluclisis anaerobia y por ltimo la respiracin celular, que toma el relevo despus de unos
dos minutos hasta el final del ejercicio muscular.

ESTRUCTURA QUIMICA E ISOFOPRMAS

La

creatina

quinasa

(CK)

es

una

enzima dimrica compuesta

por

dos

tipos

de

subunidades monomricas, M (muscular) y B (cerebral) que se combinan para formar


tres isoenzimas creatina quinasa distintas: CK-1 (BB), CK-2 (MB) y CK-3 (MM). La principal
proporcin de la actividad total de la CK se encuentra en los msculos esquelticos y sta es
predominantemente la isoforma CK-3. Otros tejidos con unos niveles de creatina quinasa
relativamente elevados incluyen el miocardio, del cual aproximadamente el 40% es la isoforma CK2, el tracto gastrointestinal y el cerebro, en el que predomina la isoforma CK-1.

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CREATINA QUINASA CEREBRAL

La isoforma cerebral de la creatina quinasa (CK-BB) es un dmero de las subunidades


cerebrales. Tiene como sustrato natural principal a la creatina, pero tambin a ciclocreatina,
glicociamina

N-etilglicociamina.

Usa

como

cofactores

al

ADP,

ATP, MgADP

, MgATP2
, Mg, Mn2+
y NaCl.

DIABETES Y LA CREATININA
El deterioro que caracteriza la enfermedad renal en los pacientes diabticos tiene lugar en los
glomrulos y alrededor de los mismos. Los glomrulos son las unidades filtradoras de sangre
de los riones. Al comienzo de la enfermedad, la eficiencia de la filtracin disminuye y se
pierden protenas importantes de la sangre por la orina. Los profesionales mdicos juzgan la
presencia y extensin de la enfermedad renal incipiente midiendo el contenido de protenas de
la orina. Ms adelante, en el curso de la enfermedad, los riones pierden la capacidad de retirar
de la sangre los productos de desecho, como la creatinina y la urea. Mediante la determinacin
de estos productos en la sangre se sabe qu tanto ha avanzado la enfermedad renal.
Los sntomas relacionados con la insuficiencia renal por lo general slo ocurren en las ltimas
etapas de la enfermedad, cuando la funcin renal ha disminuido a menos del 10 al 25 por
ciento de la capacidad normal. Durante muchos aos antes de que se llegue a ese punto, la
enfermedad
renal
en
la
diabetes
es
un
proceso
silencioso.
LOS CINCOS ESTADIOS DE LA ENFERMEDAD

Los cientficos han descrito cinco estadios de la evolucin de la insuficiencia renal en personas
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diabticas.
Estadio I. Aumenta el flujo de sangre a travs de los riones, y por lo tanto, de los glomrulos.
Esto se llama hiperfiltracin. Los riones son ms grandes de lo normal. Algunas personas se
quedan indefinidamente en el estadio I; otras pasan al estadio II despus de muchos aos.
Estadio II. La tasa de filtracin permanece elevada o a niveles casi normales y los glomrulos
comienzan a mostrar daos. Aparecen en la orina pequeas cantidades de una protena
sangunea llamada albmina. Esto se conoce como microalbuminuria. En estos estadios
incipientes es posible que no se detecte la microalbuminuria en cada examen. Sin embargo, a
medida que aumenta la tasa de prdida de albmina de 20 a 200 microgramos por minuto, el
hallazgo de microalbuminuria se hace ms constante. (Las prdidas normales de albmina son
de
menos
de
5
microgramos
por
minuto.)
Para detectar la microalbuminuria se requiere una prueba especial. Las personas que tienen
diabetes tipo 1 y 2 pueden permanecer en el estadio II durante muchos aos, especialmente si
se controlan bien la tensin arterial y las concentraciones de glucosa en la sangre .
Estadio III. La prdida de albmina y de otras protenas en la orina pasa de 200 microgramos
por minuto y puede detectarse en los anlisis corrientes de orina. Estos anlisis se realizan
generalmente sumergiendo tiras indicadoras en la orina. Al estadio III se le llama a veces
"albuminuria clnica" o "nefropata diabtica franca". Algunos pacientes presentan hipertensin
arterial. Los glomrulos sufren daos mayores. Los riones pierden paulatinamente la
capacidad de filtrar los desechos y aumentan las concentraciones sanguneas de creatinina y
nitrgeno ureico. Las personas que tienen diabetes tipo 1 y 2 pueden permanecer en el estadio
III
durante
muchos
aos.
Estadio IV. Se conoce como "nefropata clnica avanzada". La tasa de filtracin glomerular
disminuye a menos de 75 mililitros por minuto, se excretan grandes cantidades de protenas en
la orina y casi siempre se presenta hipertensin arterial. Las concentraciones de creatinina y de
nitrgeno
ureico
en
la
sangre
se
elevan
an
ms.
Estadio V. El estadio final es la insuficiencia renal. La tasa de filtracin glomerular desciende a
menos de 10 mililitros por minuto y se manifiestan los sntomas de insuficiencia renal.
Estos estadios describen la evolucin de la enfermedad renal en la mayora de las personas
con diabetes tipo 1 que presentan insuficiencia renal. En la diabetes tipo 1, el tiempo promedio
entre el comienzo de la enfermedad renal y el estadio IV es de 17 aos. El tiempo promedio
para avanzar hasta la insuficiencia renal es de 23 aos. Este avance puede ocurrir con ms
rapidez (de 5 a 10 aos) en personas con hipertensin arterial para la que no se reciba
tratamiento. Si no se presenta proteinuria en 25 aos, el riesgo de desarrollar una enfermedad
renal avanzada comienza a disminuir. La diabetes tipo 1 representa slo del 5 al 10 por ciento
de todos los casos diagnosticados de diabetes, pero es responsable del 30 por ciento de los
casos de insuficiencia renal causada por enfermedad.
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MATERIALES:

Espectrofotmetro

Bao maria

Pipetas

REACTIVO

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Tubos de ensayo

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Rvo. Picrico

Rvo. Standart

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Buffer

PARTE EXPERIMENTAL

Obtener la muestra clnica.


La muestra debe recolectarse en ayuno excepto por el agua, durante ocho horas cuando
menos antes de la prueba. La muestra debe recolectarse en tubo colector de tapn rojo para
suero el cual no contiene anticoagulante, o de color lila el cual contiene EDTA anticoagulante
para obtener plasma.

Obtencin de la
muestra de sangre

Desproteinizacin de la muestra
La desproteinizacion es la remocin de protenas de la sangre, suero o plasma para
obtener un filtrado libre de protenas y poder cuantificar la muestra sin interferencias para
evitar la formacin de espuma, turbidez, precipitado En esta prctica utilizamos la
desproteinizacion de la muestra mediante un mtodo de metales pesados: Zn, Hg, Cd, Fe,
Pb, etc. Se formara protenas insolubles con las formas ionicas de las molculas proteicas.
Se producen enlaces de tipo salino entre los grupos carboxilo con carga negativa.

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0.6 ml de suero agregar 3 ml de reactivo pcrico. Mezclar vigorosamente, dejar reposar 10


minutos y centrifugar.

0.6 ML SUERO

3 ml ACIDO PICRICO

La muestra se centrifugo a 3000 rpm durante 10min y temperatura ambiente para


separar el suero y plasma. La glucosa en suero o plasma es estable al menos 3 das a
2- 8C.

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Centrifugamos la
muestra de sangre a
3000 rpm x 10 min

Se dej por unos minutos el


ambiente.
Rotular, limpiar y secar con papel tis los tres tubos.

Preparar las soluciones segn el siguiente cuadro:

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reactivo

temperatura

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Sobrenadante
(ml)

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Blanco

Standard

Muestra

---

---

1.2

Standard

(ml)

---

0.2

---

Agua

(ml)

0.4

0.2

---

R.Pcrico

(ml)

0.8

0.8

---

Buffer Alcalino (ml)

0.2

0.2

0.2

Programar el espectrofotmetro a 530 nm y ponerlo en cero con blanco de agua destilada.

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Leer cada tubo, en absorbancia de 530 nm llevando el equipo a cero con el blanco de
reactivo.

CALCULOS:
Creatina en suero (mg/dl)= Abs. Muestra

x 1.50

Abs. Standard

Creatinina en orina (mg/dl) = Abs. Muestra

x 1.50

Abs. Standard
Cr. Orina (mg/24h) = Cr. Orina (mg/dl) X Vol. 24h (L) x 10
Calculo del Clearence de Creatina
Clearence (ml/min) = Cr. Orina (mg/dl) x V orina 24 H (ml)
Creatina en suero (mg/dl) x 1440

RESULTADOS:
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Blanco

0.268

Standard

0.519

[CREATINI
NA]
Muestra
Abs.
Standard

Abs. Muestra
0.251

x 1.50

= 0.173 x1.50

BIOQUIMICA II

= 1.03

0.441

DISCUSIONES:
El paciente presenta rangos normales de creatinina en la sangre esto demuestra que
estn funcionando bien sus riones y no presenta fallas.

CONCLUSIN:

Por medio de esta prctica se realiz la determinacin cuantitativa de creatinina en


suero detectando la formacin del complejo color amarillento de creatinina picrato al
efectuarse la reaccin de la creatinina ( del metabolismo muscular)formada en la
muestra con el reactivo del picrato de sodio en medio alcalino (por el NaOH).

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BIBLIOGRAFA:

Instituto de Ciruga Urolgica Avanzada (2002). Creatinina. Recuperado de:


http://www.urologia.tv/icua/es/diagnostics.aspx?cod=7

http://analisisdesangre.org/creatinina
Daz ,J. Portillo,M.; Aspectos bsicos de bioqumica clnica (1997)

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