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CROMATOGRAFA DE GASES
Cuestiones
1) Describir escuetamente el fundamento de la separacin
cromatogrfica.
La cromatografa es un mtodo de separacin que permite aislar, identificar y
cuantificar los diferentes componentes de una mezcla, los cuales se distribuyen entre
dos fases de diferente naturaleza (una estacionaria y una mvil) y quedan retenidos
en la fase estacionaria en funcin de las interacciones que tienen lugar. El proceso
cromatogrfico en s y la elucin de los analitos dependen del equilibrio de particin
que establece entre la especie y las dos fases que se puede cuantificar mediante la
constante de distribucin:

K D =C estac /C mvil K ' =(t R t M ) /t M .

El tiempo en que una sustancia tarda en eluir en la columna se denomina tiempo de

retencin y est directamente relacionado con las diferentes interacciones que tiene el
analito con las dos fases: cuanto ms afn sea a la fase estacionaria, mayor ser su
tiempo de retencin.
Las diferentes tcnicas de separacin mediante cromatografa se basan, entonces, en
las diferentes afinidades de los compuestos por un medio mvil y un medio
estacionario a travs del cual circulan.
2) Parmetros de optimizacin del alcohol isoamlico. Factor de
selectividad para las seales del acetato de isoamilo y del 1-butonal.
Tabla 1. Parmetros de optimizacin
Condiciones
Rampa 50-100C
(10C/min)
Isoterma a 40 C (con
split)

Compuesto
alcohol
isoamlico
alcohol
isoamlico

tM (min)
1,044
5
1,040
2

tR (min)
2,979
7
3,205
7

t'R (min)

k'
w (s)
N
1,85
108
1,935
4,04
3
49
2,06
588
2,161
5,90
9
8

En la tabla se resumen los parmetros de optimizacin del alcohol isoamlico en

dos diferentes condiciones: en una rampa de 50C a 100 aumentando la
temperatura a razn de 10C/min y en una isoterma a una temperatura de 40C
con split abierto. Los parmetros que se han calculado son:

Factor de
retencin

t '
k= R
tM
'

Nmero de platos tericos

t
N=5.54 R
w1/ 2

Altura equivalente
de un plato terico

( )

H=

L
H

H (m)
1,38E03
2,55E03

2
Podemos ver con claridad que las mejores condiciones son dadas con un aumento
gradual de la temperatura de la columna (rampa) ya que el nmero de platos terico
es mucho mayor. En ambas condiciones la elucin es adecuada (ni lenta ni rpida) ya
que el factor de retencin est incluido ente 2 y 10 unidades.
En la siguiente tabla se resumen los parmetros del factor de selectividad de dos de
los componentes de la mezcla

'

'

( =k B /k A ) :

Tabla 2. Factor de selectividad

Parmetros
Pareja
Rampa 50-100C
Acetato de isoamilo / 1(10C/min)
butanol
Isoterma a 40 C (con
Acetato de isoamilo / 1split)
butanol

1,296
091
1,362
034

Como el factor de selectividad nos brinda informacin la separacin o el solapamiento

de los picos de cada seal en el cromatograma, y sabiendo que cuando se aproxima a
la unidad es seal de que los pico estn solapados, podemos observar que en ambas
condiciones existe una separacin apropiada de los picos ya que

>1 .

3) Determinar el valor medio y la desviacin estndar para los tiempos de

retencin de dos de los compuestos analizados.
Se eligen estudiar el primero y el ltimo compuestos que han eluido, respectivamente
el iso-octano y el alcohol iso-amlico:
Tiempos de retencin (min)

t(medio)

SD(tiemp
o)

CV

0,91 0,91 0,91 0,91 0,91

0.098%
0,916
0,0009
5
5
7
5
6
Alcohol iso2,98 2,97 2,97
2,97
0.15%
2,97
2,974
0,004
amlico
1
4
1
6
Observamos que tanto la desviacin estndar (SD) como el coeficiente de variacin
(CV) nos indican que la precisin del anlisis (la concordancia entre los tiempos de
retencin) es alta.
Iso-octano

Vamos a comparar ahora dos cromatogramas: el cromatograma rosa corresponde a

una muestra de los estndares (muestra 5, en donde los diferentes analitos tienen
concentracin de 300 ppm) mientras que el cromatograma negro corresponde a la
muestra problema que se ha analizado. En la segunda imagen se ha tratado de hacer
un zoom para poder apreciar mejor los diferentes picos. Observamos que el nico pico
que coincide en ambos cromatograma es el del cuarto compuesto el cual coincide con
el patrn interno (ter del etil-glicol) que se ha mantenido constante en todas las
disoluciones para llevar a cabo un anlisis mediante patrn interno, minimizando el
error. Cabe destacar la presencia de dos picos entre la seal del disolvente y la del nbutilacetato las cuales son, muy probablemente, impurezas en el medio.

4) Se muestran a continuacin los parmetros de calidad analticos de las

curvas de calibrado1 y las ecuaciones de las rectas de calibrado:
Compuesto

Incert. a

Incert. b

Isoctano

14759

24896

1887

125

n-butilacetato

-7267

29367

1480

147

1-butanol

16635

26766

2037

135

18343

22759

1719

114

12766

26198

1644

132

acetato de
isoamilo
alcohol
isoamlico

[LOD
[LOL
[LOQ]
]
]
ppm
11.8
300
39.55
7
17.8
300
59.48
4
11.8
300
39.40
2
11.9
300
39.71
1
14.3
300
47.79
4

Area= (19 1 ) 10 [ isoctano ] + (1 2 ) 10

Area= (15 1 ) 102 [ nbutilacetato ] ( 7 30 ) 103

Area= (20 1 ) 102 [ 1butanol ] ( 2 2 ) 104
Area= (17 1 ) 102 [ Ac . de Isoamilo ] + ( 2 2 ) 104
1 Las curvas de calibrado se encuentran representadas en la Hoja Excel.

Coef.
Correlacin
0,9987
0.9985
0.9994
0.9993
0.9990

4
2

Area= (16 1 ) 10 [ Alcohol Isoamlico ] + ( 1 3 ) 10

5) Determinacin del contenido de analitos en la muestra PR-5.

En la tabla se muestran los resultados obtenidos y la concentracin de cada analito.
Compuesto

Area
C(ppm)
1,40E+0
Isoctano
5
66,56
2,02E+0
n-butilacetato
5
141,06
3,59E+0
1-butanol
5
184,46
acetato de
2,55E+0
isoamilo
5
159,12
alcohol
2,92E+0
isoamlico
5
185,64
A continuacin se determina la incertidumbre asociada a cada concentracin analito,
sabiendo que:

ym
Isoctano
n-butilacetato
1-butanol
acetato de
isoamilo
alcohol
isoamlico

3,54E+
05
2,59E+
05
3,50E+
05
2,91E+
05
2,83E+
05

4,58E+
10
3,32E+
09
8,26E+
07
7,15E+
08
7,81E+
08

b
1,89E+
03
1,48E+
03
2,04E+
03
1,72E+
03
1,64E+
03

[ Isoctano ] =( 7 2 ) 102 ppm

[ nbutilacetato ] =( 14 2 ) 102 ppm

[ 1butanol ]= (18 1 ) 102 ppm

[ acetato de isoamilo ] =( 16 1 ) 102 ppm

[ alcohol isoamlico ] =( 19 2 ) 102 ppm

Sy/x

Sx0

t0,05;3

Incertidumbre

7464,000

4,94

3,18

15,71

8805,000

6,63

3,18

21,10

8026,000

4,32

3,18

13,74

6824,000

4,36

3,18

13,88

7856,000

2
36000

( xx m ) 5,25

3,18

16,72