Nombres:

Delgado Ramrez Anna L.

Gonzlez Torres Karen
Mayorga Medina Jos Eduardo
Miranda Pintle Fabin
Palacios Cabriales Diana Montserrat
Vargas Vargas Leslie Lizet

Manual de Practicas

Fecha de entrega: 13-10-2015

Carrera: QFBT

Doctora: Olga Martnez

Pared de Vegetales

OBJETIVO

Observar las clulas vegetales y su morfologa mediante el microscopio.

Distinguir y comprender orgnelos asi como estructuras caractersticas de
una clula vegetal.

FUNDAMENTOS

La safranina
tiene afinidad muy marcada por la lignina y algo menor por la
suberina, tie de rojo intenso los tejidos que presentan lignina, como es el xilema y
las distintas clulas que forman los tejidos esquelticos de la planta
Al ser teidas con Safranina prcticamente la clula se tie de color rojo, ya que es
un colorante catinico que aporta color rojo a las estructuras histolgicas. Es muy
usada en histologa vegetal donde tie de rojo los ncleos y la lignina de las
paredes celulares secundarias. Esto da una mejor delimitacin a la clula ya que
esta toma un color ms denso en la pared celular que el resto que conforma la
clula, tambin al ncleo lo podemos distinguir a simple vista porque este se tie de
rojo intenso.

MATERIALES
Microscopio
Bistur
Porta objetos
Cubre objetos
Safranina (reactivo)
Barniz

METODOLOGA

1. Quitar la primera hoja Interna de la cebolla, desprender dos veces la delgada

membrana que esta adherida en la cara inferior cncava.
2. Depositar los fragmentos de membrana en cada porta objeto.

3. Aadirle una gota de agua destilada al primer porta objetos.

4. Al segunda muestra aadirle una gota del colorante de safranina.
5. colocamos nuestros cubre objetos y eliminamos el exceso de colorante,
observamos al microscopio (40x)

RESULTADOS

Observamos la muestra uno que es s/n colorante.

Identificamos el ncleo, la pared celular, el citoplasma y su membrana celular.
La clula epidrmica de la cebolla es de forma de rombos alargados, que son la
pared celular (que est formada por celulosa y principalmente por agua).

Observamos el segundo porta objetos c/n colorante safranina.

Donde observamos la morfologa de la eperdimes de la cebolla.
Identificamos el ncleo, la pared celular, el citoplasma y su membrana celular.
La safranina es un colorante catinico que aporta color rojo a las estructuras
histolgicas.

 CONCLUSIN
Como punto final de la prctica el equipo llego al objetivo principal, el cual era
distinguir a la perfeccin la pared celular de las clulas vegetales, as como tambin
se lograron ver sus ncleos, al realizar la diseccin de la capa ms fina de la
cebolla, se poda observar los ncleos de la clula y sus paredes celulares, se pudo
distinguir a primera instancia la pared celular ya que esta estaba denotada por un
gris ms fuerte, y recubra toda la clula delimitando a otras. Al ponerle colorante
safranina da una mejor delimitacin a la clula ya que esta toma un color ms
denso en la pared celular que el resto que conforma la clula, tambin al ncleo lo
podemos distinguir a simple vista porque este se tie de rojo intenso, y est
protegido por la pared celular.

Frotis Sanguineo
Objetivo
Realizar el procedimiento adecuado para elaborar un frotis sanguneo as como
investigar las diferentes tipos de clulas sanguneas.

Introduccin
Glbulos Rojos
A los glbulos rojos se las conoce como eritrocitos o hemates. Transportan oxigeno
hacia las dems clulas del cuerpo y gracias al componente hemoglobina en su
estructura, de la misma manera transporta dixido de carbono hacia los pulmones.

Glbulos Blancos
Los glbulos blancos o leucocitos forman parte de los efectores celulares del
sistema inmunolgico, y son clulas con capacidad migratoria que utilizan la sangre
como vehculo para tener acceso a diferentes partes de la anatoma. Los leucocitos
son los encargados de destruir los agentes infecciosos y las clulas infectadas, y
tambin secretan sustancias protectoras como los anticuerpos, que combaten a las
infecciones.
Segn las caractersticas microscpicas de su citoplasma (tinto riales) y su ncleo
(morfologa), se dividen en:
1.
Granulocitos o clulas polimorfo-nucleares: son los neutrfilos, basfilos y
eosinfilos; poseen un ncleo polimorfo y numerosos grnulos en su citoplasma,
con tincin diferencial segn los tipos celulares, y
2.
A granulocitos o clulas monomorfo-nucleares: son los linfocitos y los
monocitos; carecen de grnulos en el citoplasma y tienen un ncleo redondeado.
1.

Granulocitos o clulas polimorfo-nucleares

a)
Neutrfilos, presentes en sangre entre 2.500 y 7.500 clulas por mm. Son los
ms numerosos, ocupando entre un 55% y un 70% de los leucocitos. Se tien
plidamente, de ah su nombre. Se encargan de fagocitar sustancias extraas
(bacterias, agentes externos, etc.) que entran en el organismo. En situaciones de
infeccin o inflamacin su nmero aumenta en la sangre. Su ncleo caracterstico
posee de 3 a 5 lbulos separados por finas hebras de cromatina, por lo cual antes
se los denominaba "polimorfo-nucleares" o simplemente "poli-nucleares",
denominacin errnea.
b)
Basfilos: se cuentan de 0,1 a 1,5 clulas por mm en sangre,
comprendiendo un 0,2-1,2% de los glbulos blancos. Presentan una tincin
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basfila, lo que los define. Segregan sustancias como la heparina, de propiedades

anticoagulantes, y la histamina que contribuyen con el proceso de la inflamacin.
Poseen un ncleo a menudo cubierto por los grnulos de secrecin.
c)
Eosinfilos: presentes en la sangre de 50 a 500 clulas por mm (1-4% de los
leucocitos) Aumentan en enfermedades producidas por parsitos, en las alergias y
en el asma. Su ncleo, caracterstico, posee dos lbulos unidos por una fina hebra
de cromatina, y por ello tambin se las llama "clulas en forma de antifaz".
2.

Agranulocitos o clulas monomorfo-nucleares

a)
Monocitos: Conteo normal entre 150 y 900 clulas por mm (2% a 8% del total
de glbulos blancos). Esta cifra se eleva casi siempre por infecciones originadas
por virus o parsitos. Tambin en algunos tumores o leucemias. Son clulas con
ncleo definido y con forma de rin. En los tejidos se diferencian hacia macrfagos
o histiocitos.
b)
Linfocitos: valor normal entre 1.300 y 4000 por mm (24% a 32% del total de
glbulos blancos). Su nmero aumenta sobre todo en infecciones virales, aunque
tambin en enfermedades neoplsicas (cncer) y pueden disminuir en
inmunodeficiencias. Los linfocitos son los efectores especficos del sistema
inmunolgico, ejerciendo la inmunidad adquirida celular y humoral. Hay dos tipos de
linfocitos, los linfocitos B y los linfocitos T.

Material
Portaobjetos

Reactivos
PBS

Mechero bunsen

Giemsa

Cristalizado

Etanol

Puente
Microscopio
Lanceta

Metodologa

1. Agregar en etanol los portaobjetos durante 15 minutos ya transcurrido ese

tiempo aadirlos en agua destilada durante 10 minutos.

2. Dejar secar los portaobjetos.

3. Limpiar el dedo con alcohol para pincharlo con una lanceta.

4. Agregar la segunda gota de sangre en un portaobjetos (se harn dos

muestras).

5. Expandir la sangre con otro portaobjeto hasta que abarque todo el

portaobjeto.

6. Dejar secar la muestra Ya seca la muestra agregar a la primera muestra

Giemsa y a la segunda muestra PBC con Giemsa dejar de 15 a 20 minutos.

Resultados
Linfocito
Un linfocito es un tipo de clulas blancas de la
sangre y que por lo tanto, est presente en la
misma. Los glbulos blancos ayudan a proteger
el cuerpo contra las enfermedades y combatir
las infecciones.

Neutrfilo
Los neutrfilos son un tipo de glbulo blanco, de
tipo de granulocito, cuya principal funcin es
fagocitar y destruir a bacterias y participar en el
inicio del proceso inflamatorio.

Monocitos
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Puede pasar a los tejidos, lleva a cabo la fagocitosis puede actuar como clula
presentadora de antgenos.

Discusin

Una extensin de sangre bien teida debe caracterizarse por una buena
diferenciacin de las estructuras celulares de los leucocitos, definicin completa de
los hemates y de la usencia de precipitados que d lugar a artefactos no deseados.
Todos los colorantes anteriormente descritos pueden producir resultados poco
satisfactorios en la coloracin del frotis, siendo algunas de las causas de estos
malos resultados como: Tiempo prolongado, dando lugar a sobre tincin, Lavado
insuficiente porta objetos mal esterilizados.

Conclusin

Se extrajo sangre para realizar dos laminillas con dos tipos de tincin diferente, una
solo con giemsa y la segunda con un mililitro de giemsa por nueve de pbs.
La laminilla teida con giemsa se identific todas las clulas de la sangre ya que, la
tcnica de Giemsa est formada por varios colorantes: los tintes neutros utilizados
combinan el azul de metileno como tinte bsico y la eosina como tinte cido, lo que
da una amplia gama de colores. El azul de metileno es un colorante meta
cromtico, de ah que muchas estructuras se tian de prpura y no de azul, esto
hizo visualizar eritrocitos, leucocitos y plaquetas.
En la siguiente laminilla se utiliz tincin de Wright cuyo colorante est compuesto
de azul de metileno, que tie de color azul las partes cidas de las clulas y eosina
que tie las partes alcalinas, disueltos en metanol, que permite la fijacin de las
clulas, adicionando a la preparacin buffer de fosfatos, que rehidrata a las clulas
despus de la exposicin con metanol.

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