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INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS


LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA MDICA

AGAR LIA (LISINA HIERRO AGAR)


Sandra Moreno Garca, 7QV1, seccin 1, equipo 2.
USO
Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos,
basado en la descarboxilacin y desaminacin de la lisina y
en la produccin de cido sulfhdrico
FRMULA
Peptona de gelatina...........................................5.0.
Extracto de levadura................. ........................3.0.
Glucosa..............................................................1.0.
Lisina................................................................10.0.
Citrato de hierro y amonio.................................0.5.
Tiosulfato de sodio............................................0.04.
Prpura de bromocresol...................................0.02.
Agar.................................................................15.0.
pH final: 6.7 0.2
FUNDAMENTO
DESCARBOXILACIN. La descarboxilacin es el proceso
por el cual las bacterias que poseen enzimas
descarboxilasas especificas atacan los aminocidos en su
carboxilo terminar (COOH). Las descarboxilasas son
enzimas adaptativas o inducida. Slo se forman cuando un
microorganismo es cultivado en un ambiente cido en
presencia de un sustrato especfico. Este proceso es
irreversible y no oxidativo
El aminocido L-lisina es descarboxilado para formar
cadaverina (una diamina) y dixido de carbono por la accin
de la enzima lisina descarboxilasa.

gaseoso. Las enzimas responsables de esta actividad son la


cistena desulfidrasa y la tiosulfato reductasa. Por lo tanto,
un microorganismo productor de H2S cultivado en un medio
con peptona reduce el azufre por hidrogenacin.
Adems, la bacteria puede reducir el tiosulfato de sodio
adicionado en el medio en una reaccin que da un sulfito y
un sulfato. Debe haber un pH cido (proporcionado por la
fermentacin de la glucosa).

El gas incoloro H2S reacciona con una sal fuerte de hierro, el


citrato de amonio frrico, para producir un precipitado negro
insoluble de sulfuro ferroso metlico. Es decir, la produccin
de H2S se detecta cuando el gas entra en contacto el hierro,
formando sulfuros.

SIEMBRA
A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio y
mediante el uso de un asa recta, inocular el medio de cultivo,
picando el fondo y estriando sobre la superficie del mismo.
INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS
Descarboxilacin de la lisina:

Resultado Positivo: superficie alcalina / profundidad


alcalina (Lo cual se observa como pico violeta /
fondo violeta). REPORTAMOS: K/K
Resultado negativo: superficie alcalina /profundidad
cida (pico violeta / fondo amarillo).
REPORTAMOS: K/A, fermentacin de glucosa.

Desaminacin de la lisina:

La cadaverina es un producto estable cuando se produce en


condiciones anaerobias. Adems, tiene lugar en medio
cido, por lo que es necesario que la glucosa sea
previamente fermentada
DESAMINACIN OXIDATIVA. Se produce un cido alfaceto-carbnico, el cual, con la sal de hierro y bajo la
influencia del oxgeno forma un color rojizo en la superficie
del medio.
PRODUCCIN DE H2S. La protelisis de las protenas
produce aminocidos individuales; ciertas bacterias
heterotrficas pueden liberar enzimticamente el azufre de
los diversos aminocidos azufrados, produciendo H2S

Resultado positivo: superficie rojiza / profundidad


cida. Esto sucede con cepas del gnero Proteus,
Providencia y algunas de Morganella spp.
REPORTAMOS: R/A fermentacin de glucosa.

Produccin de H2S:

Resultado positivo: ennegrecimiento del medio de


cultivo (especialmente en el lmite entre la
superficie y profundidad).
Resultado negativo: el medio de cultivo permanece
sin cambio de color.

BIBLIOGRAFIA

Figura 1. Resultados e interpretacin del Agar LIA, de


derecha a izquierda: descarboxilacin de lisina positiva
(K/K), descarboxilacin de lisina negativa y fermentacin de
glucosa (K/A), desaminacin de lisina positiva (R/A), y
descarboxilacin de lisina positiva con produccin de H2S

Britania Lab, Lisina Hierro Agar. Disponible en:


http://www.britanialab.com/productos/286_hoja_tec
nica_es.pdf
Forbes, B., Diagnstico Microbiolgico, 12 ed.
Buenos Aires: Ed. Medica Panamericana, 2009. P.
232
MacFaddin, J., Pruebas bioqumicas para la
identificacin de bacterias de importancia clnica, 3
edicin., Buenos Aires: Ed. Medica Panamericana,
2009, 2003, pp. 114-126