pemisahan bagian darah

December 26, 2013 | ainilhamidah

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA

PEMISAHAN BAGIAN DARAH

OLEH :
KELOMPOK 5
ANGGOTA :
1. 1.
2. 2.

AINIL HAMIDAH
ARSY DWI PUTRI

3. 3.

TITO NISPUANDA

JURUSAN GIZI
POLTEKKES KEMENKES RI PADANG
TAHUN 2013

PRAKTEK KE II
Hari / Tanggal

: Selasa / 1 Oktober 2013-11-08

Judul

: Pemisahan Bagian Darah

Tujuan
: 1. Dapat mengamati komponen darah 9berupa plasma, serum, sel-sel
darah merah, packet cell dan buffy coat

2. Dapat mengamati 2 komponen utama protein darah (albumin,globulin) dan

membandingkan hasil pengamatan dengan nilai standar
3. mengamati perubahan yang terjadi pada eritrosit bila berada dalam lingkungan
hipertonik/hypotonik
Bahan

: Darah
Aquades

Alat

: Sentrifuge
Test Tube
Kertas pH
Kertas Saring
Tabung reaksi
Pipet Tetes

Tinjauan Pustaka

Komponen darah
Warna merah pada darah berasal dari sel darah merah ( eritrosit) yang mengandung pigmen
merah membawa zat besi yaitu hemoglobin. Untuk menentukan komponen penyusun darah
adalah dengan cara memusingkan darah yang ditempatkan didalam tabung reaksi didalam
senteifuge, sehingga cairan akan terpisah, bagian atas bening lebih kurang 55% adalah
plasma yang tersusun dari :
-

Air

Protein

Mineral

Bahan organik

Sedangkan endapan bawah tabung berwarna merah lebih kurang 45% berisi campuran sel
darah merah dan sel darah putih dengan yang cair dikenal dengan istilah hematokrit. Nilai
hematokrit manusia bervariasi, nilai normalnya 40-50%sedangkan pria dewasa 35-45% dan
wanita dewasa 30-35%, untuk memahami komponen darah, perhatikan gambar berikut ini :

Darah, yaitu cairan yang terdapat pada semua makhluk hidup (kecuali tumbuhan)
tingkat tinggi yang berfungsi mengirim zat-zat dan oksigen yang dibutuhkan jaringan tubuh.
Darah bersifat katalis lemah dengan pH 7,36. Endapan darah (packet cell) adalah sampel

yang akan ditentukan , dapat berupa darah, serum, plasma. Plasma darah , yaitu darah minus
sel-sel darah dan masuh mengandung fibrinogen.
Plasma darah mengandung beberapa senyawa baik organik maupun anorganik, yang
meliputi :
1)

Protein Darah

2)

Sari Makanan

3)

Garam Mineral

4)

Getah Secret Sel (enzim,hormon)

Plasma darah meliputi (7%), yang terdiri dari :

1)

Fibrinogen , yang berfungsi untuk pembekuan darah (0,3%)

2)

Globulin , yang berfungsi untuk pembentukan anti body (2,7 %)

3)

Albumin , yang berfungsi untuk menjaga tekanan osmotik darah (4%)

Protein, yaitu senyawa organik komplek berbobot molekul tinggi yang merupakan polimer
dan monomer-monomer asam amino yang dihubungkan saty sama lain dengan ikatan peptida.
Prosedur :
1. Pemisahan Plasma Dan Endapan (Packed Cell)
Masukkan atau darah kedalam test tube

dan sentrifuge selama 10-15 menit

Akan terlihat : lapisan atas yang bening (plasma) dan bagian bawah endapan merah (packed
cell). Diantara dua lapisan terdapat buffy coat (komponen leukosit dan trombosit)

Ukur pH plasma
2. Pemisahan Fibrin Dengan Serum
Ambil 1 ml plasma

lalu encerkan dengan 10 ml NaCl 0,9% + 3 tetes CaCl 20%

Homogenkan, maka akan terjadi endapan gel

Lalu saring ( filtrat = serum, endapan = fibrin)

3. Pemisahan Globulin Dan Albumin
Ambil 1 ml serum

+ 2-3 ml ammunium sulfat 22%

Lalu homogenkan, maka akan terjadi endapan dari globulin

Saring (endapan & filtrat dipisah)

Endapan globulin dilarutkan dalaam 1% NaCl

Filtrat yang didapat diberi kristal ammonium sulfat

Akan akan terberbentuk jenuh

Lalu terjdi endapan albumin dan disaring

larutkan dalam air

4. Hemoloisa Sel Darah Merah Oleh Larutan Hypertonik/Hypotonik
Sediakan 7 bh test tube ( isi dengan air dan NaCl 2% dengan volume yang berbeda-beda)
Tabung
1
2
3
4
5
6
7

Air (ml)
8,5
7,5
6,5
5,5
4,5
3,5
2,5

NaC 2% (ml) % NaCl (ml)

1,5
0,3
2,5
0,5
3,5
0,7
4,5
0,9
5,5
1,1
6,5
1,3
7,5
1,5

Kocok/ homogenkan

Lalu tiap-tiap tabung + 2 tetes darah

Homogenkan kembali, dan biarkan selama 1 jam

Lihat dan catat perubahan yang terjadi

Hasil

Praktikum

1. 1.
Pemisahan Plasma Dan Endapan
2. Setelah disentripuse terjadi pemisahan :
Bagian atas

:plasma

Bagian tengah

:buffy coay

Bagian bawah

:packed cell

Plasma
2. Pemisahan Fibrin Dan Serum
a. Terjadi endapan seperti gel
Bagian atas

:serum

Bagian bawah

:fibrin

3.Pemisahan Globulin Dan Albumin

1. Serum ditambah ammunium sulfat , terbentuk :
Bagian atas

: filtrat

Bagian bawah

: endapan globulin, yang kemudian dilarutkan dengan NaCl 1%

1. Filtrat + kristal ammunium sulfat akan terjadi bentuk jenuh

2. Lalu endapan globulin disaring dan + air
4. Hemolisa Sel Darah Merah Oleh Larutan Hypotonik/Hypertonik
1)

Sebelum disentripuse :

Tabung 1

: merah bening

Tabung 2-5

:merah kering

Tabung 6

:merah pekat

Tabung 7

: merah pekat (pekat dari tabung 6)

2)

Setelah disentripuse :

Bagian atas

:bening

Bagian tengah

: merah kurang padat

Bagian bawah

:endapan merah tua

3)

Setelah pendiaman 1 jam

Tabung 1-2

:tidak ada pemisahan (ada garis merah diatas)

Tabung 3-6

:terjadi pemisahan (ada endapan)

Tabung 7

: terdapat cairan bening diatas (memisah)

Pembahasan
a)

: Pemisahan Bagian Darah

Pemisahan Plasma Dan Endapan (Packed Cell)

Pada pemisahan plasma dan endapan, darah yang disentrifuse selama 15 menit dengan
kecepatan 3 rpm akan menyebabkan terjadinya pemisahan antara filtrat dan endapan, dimana
pada bagian atas akan terdapat filtra, pada bagian tengah terdapat buffy coat, dan pada bagian
paling bawah terdapat packed cell.
b)

Pemisahan Fibrin Dan Serum

Pada pemisahan fibrin dengan serum, dimana plasma diencerkan dengan NaCl dan
CaCl2, sehingga akan terbentuk endapan seperti gel, dimana pada bagian atas terdapat serum
dan pada bagian paling bawah terdapat fibrin .
c)

Pemisahan Globulin Dan Albumin

Pada pemisahan globulin dan albumin dilakukan dengan 2 tahap, pada tahap pertama
serum + ammunium sulfat maka akan menghasilkan dibagian atas filtrat dan dibagian bawah
endapan globulin , lalu endapan globulin ini diencerka dengan NaCl 1%, selanjutnya tahap
kedua filtrat (bagian atas) + kristal ammunium sulfat akan menjadi jenuh dan endapan
albumin (bagian bawah) diencerkan dengan air.
d)

Hemolisa Sel Darah Merah Oleh Larutan Hypotonik/Hypertonik

Larutan hipertonik adalah larutan dengan konsentrasi zat terlarut lebih tinggi dari pada yang
lainnya. Sedangkan hipotonik adalah larutan dengan konsentrasi zat terlarut lebih rendah dari
pada yang lainnya.
Hemolisa dengan cara darah masukkan kedalam tabung reaksi, dan dimana sebelumnya di
dalam tabung reaksi sudah dimasukkan atau sudah ada air dan larutan NaCl 2% (dengan
volume yang berbeda-beda dari ke 7 tabung), lalu masing masing tabung dihomogenkan dan
didiamkan selama 1jam , maka setelah diamat masing-masing tabung memberikan hasil yang
berbeda-beda. Didapatkan hasilnya bahwa dalam sampel diatas dengan 7 sampel yang
merupakan larutah hipertonik adalah larutan dalam tabung reaksi 3 sampai 7, sedangkan
larutan hipotonik adalah larutan dalam tabungh 1 dan 2.
Kesimpulan

Dapat dikatakn komponen darah terdiri dari :

1. Plasma
2. Buffy coats
3. Packed cells

Sedangkan plasma memalui proses pemisahan terdiri dari :

1. Fibrin
2. Serum
Serum terdiri dari :
1. Albumin
2. Globulin
Larutan hipertonik adalah larutan dengan konsentrasi zat terlarut lebih tinggi dari pada yang
lainnya. Sedangkan hipotonik adalah larutan dengan konsentrasi zat terlarut lebih rendah dari
pada yang lainnya.
Daftar Pustaka

Susilowarno, R Gunawan, dkk. Biologi. Grasindo. Jakarta

Waterbury, Larry.2001. Buku Saku Hematologi. EGC:Jakarta

1. A.

Tujuan
1. Mengetahui cara memisahkan plasma dan endapan darah
2. Mengetahui cara memisahkan fibrin dan serum
3. Mengetahui kandungan globulin dalam serum
4. Mengetahui kandungan albumin dalam serum

1. B.

Prinsip
1. Mahasiswa mampu memisahkan plasma dan endapan darah menggunakan
centrifuge
2. Mahasiswa mampu memisahkan fibrin untuk mendapatkan serum darah.
3. Mahasiswa mampu memisahkan kadar protein globulin dalam serum dengan
menggunakan metode setting out dan melakukan tes biuret untuk uji kadar
protein
4. Mahasiswa mampu menganalisis kadar protein albumin dalam serum dengan
menggunakan metode salting out dan melakukan tes biuret untuk uji kadar
protein.

1. C.

Tinjauan Pustaka

Darah bersifat alkalis lemah dengan Ph 7,36 berfungsi sebagai alat transport zat-zat terutama
O2, mengatur reaksi-reaksi tubuh supaya konstan, untuk regulasi panas badan dan pelindung
terhadap kemungkinan infeksi. Darah terdiri dari sel darah (eritrosit, leukosit, trombosit) dan
plasma darah (fibrinogen, serum darah yang terdiri dari albumin dan globulin

Darah
Plasma Darah
Fibrin
Serum

Albumin

Globulin
Trombosit

Eritrosit

Leukosit
Endapan Darah (Packel Cell)

Sampel darah yang akan ditentukan dapat berupa darah, plasma darah, serum darah. Plasma
darah adalah darah minus sel-sel darah dan masih mengandung fibrinogen.Dalam plasma
terdapat anti koagulen yang sengaja ditambahkan guna mencegah penjendalam.Plasma tanpa
fibrinogen disebut serum dan tidak mengandung bahan koagulan (Setyaningrum, 2002).
Plasma darah mengandung beberapa senyawa baik anorganik maupun organik yang meliputi
antara lain : Protein darah, sari makanan, garam mineral, getah secret sel seperti enzim,
hormon, zat-zat ekskresi.
Plasma darah (7%), meliputi :
Fibrinogen : Untuk pembekuan darah (0,3%)
Albumin

: Menjaga tekanan osmotic darah

(4%)

Globulin

: Membentuk zatkebal/zat antibiodi (2,7%)

Berdasarkan kerjanya zat anti (anti body) dibedakan :

Prepsipitasi
Aglutinasi

: kerjanya mengendapkan darah

: menggumpulkan

Netralisasi

:antigenik menutup tempat yang tosik (beracun)

Lisin

: menyerang dan memecah antigen

Antitoksin

: menetralkan racun (Aden bagus, 2011)

Istilah penting lain dalam plasma darah yaitu:

Serum
darah).

: Cairan darah/plasma yang tidak mengandung Fibrinogen(komponen pembeku

Anti body

: Protein yang dapat mengenali dan mengikat antigen (proteinasing) tertentu.

Antigen

: Molekul protein asing yang tidak dikenal yang masuk keplasma darah.

Protein adalah senyawa organik kompleks berbobot molekul tinggi yang merupakan polimen
dari monomer-monomer asam amino yang dihubungkan satu sama lain dengan ikatan peptide
( Maura Maulina, 2012).
Hematokrit merupakan ukuran yang menentukan banyaknya jumlah sel darah merah dalam
100 mg darah yang dinyatakan dalam (%). Leukosit (White Blood Cell/WBC) merupakan
komponen darah yang berperan dalam memerangi infeksi yang disebabkan oleh virus,
bakteri, ataupun proses metabolic toksin, dll. Trombosit (platelet) merupakan bagian dari sel
darah yang berfungsi membantu dalam proses pembekuan darah dan menjaga integritas
vaskuler. Eritrosit (Red Blood Cell/RBC) merupakan komponen darah yang paling banyak
dan berfungsi sebagai pengangkut/pembawa oksigen dari paru-paru untuk diedarkan ke
seluruh tubuh dan membawa karbon dioksida dari seluruh tubuh ke paru-paru.
Laju endap darah adalah kecepatan zedimentasi eritrosit dalam darah yang belum membeku
dengan satuan mn/jam(Ridwan, 2012).
Fungsi darah :

Membawa produk sisa metabolism sel ke organ yang akan mengekskresikannya.

Melawan infeksi (leukosit dan antibodi)

Membawa zat yang dibutuhkan kelenjar untuk menghasilkan sekret

Mendistribusikan secret kelenjar dan enzim.

Mendistribusikan panas ke seluruh tubuh.

Menjaga asam-basa darah

Menghentikan perederan (proses pembekuan)(Almas, 2012).

1. D.

Alat Dan Bahan

Alat :

Bahan :
Sampel darah
Larutan biuret

Centrifuge
Corong

Tabung reaksi

Larutan NaCl 0,9 % 15 ml

Rak tabung reaksi

Larutan CaCl 20 % 5 tetes

Kertas saring

Gelas bekker

Larutan (NH4)2 SO4 22 % 2

ml

Larutan NaCl 1 % 20 ml

Mikro pipel + selotip

1. E.
Cara Kerja

1. Pemisahan plasma dan endapan

3 ml darah
- endapan

- Plasma

untuk percobaan 2

Di CeNtrifuge

selama 10 15 menit dengan kecepatan 1500 rpm.

- Plasma
untuk pe (sel darah)
1 ml plasma (menggunakan plasma)
+ 15 ml Nacl 0,9 %
+ 5 tetes Cacl 20%
Fitrat (Serum)
Endapan (fibrin)
Pemisahan Fibrin dan Serum
1. Pemeriksaan globulin dan albumin(salting out)
1. Globulin
1 ml serum
+ 2 ml (NH1)2 SO4 22%
Fitrat globulin
endapan
Di saring menggunakan kertas saring
endapan
Fitrat
untuk percobaan b
Bilas endapan dengan NaCl 1 % 20 ml
Tes biuret hingga berwarna biru muda
Diamkan 30 menit
1. Albumin

catat jumlah tetes biuret

Fitrat Globulin
Ukur Volumenya
Fitrat
Endapan
Fitrat
Endapan
+ (NH4)2 SO4 22% 1:1
Air (larutkan endapan dalam air)
Tes protein dengan biuret tetes demi tetes hingga berwarna biru muda (catat jumlah tetes
biuret)
1. F.
Hasil Pengamatan
1. Pemeriksaan Plasma dengan Endapan
No
1.

Nama
Perlakuan
Hasil Pengamatan
Keterangan
Sampel
Darah Dipisahkan
3 ml sampel darah
Setelah sampel vena
Vena(3 ml) antaraplasmadenganendapan
centrifuge
(Darah) di centrifuge
menggunakan centrifuge
- Plasma
selama 10-15 dengan

selama 10-15 menit dengan

kecepatan 1500 rpm

- endapan

kecepatan 1500 rpm

akun mengalami
pemisahan antara
plasmadarah
denganendapannya.

1. Pemisahan Fibrin dengan Serum

No.
1.

Nama
Perlakuan
Hasil Pengamatan
Sampel
Plasma (1 Sampel plasma di
1 ml plasma
ml)
tambahkan 15 ml
Ditambah
Nacl 0,9 % dan 5
15 ml Nacl
tetes Cacl 20%
kemudian didiamkan 5 tetes Cacl
selama 30 menit Didiamkan 30 menit
Fitrat
Endapan
1 ml serum

Keterangan
1 ml plasma diambil
lalu ditambahkan 15
ml Nacl dan 5 tetes
Cacl, didiamkan
selama 30 menit, maka
terjadilah endapan.
Fitrat adalah serum
dan endapan adalah
fibrm.

1. Pemeriksaan Globulin dan Albumin

1. Globulin
No. Nama
perlakuan
Hasil pengamatan
Sampel
1.
Serum (1 Sampel serum (1 1 ml serum
ml)
ml) ditambah 2 ml Di tambah 2 ml NH4
(N H4)2 SO4 22%
lalu didiamkan 30 Di diamkan 30 menit
Fitrat
menit setelah itu
Endapan
disaring dengan
kertas saring, lalu di
bilas dengan Nacl
dan di tetesi biuret
sampai biru.

1. G.

keterangan
1 ml serum diambil
lalu didiamkan 2 ml
(NH4)2 SO4 didiamkan
30 menit, maka
terjadi endapan lalu
dilung endapan di bilas
dengan Nacl 1% 20 ml
tertinggal di saringan
lalu di tetesi biuret
hingga berubah warna
menjadi biru muda

Pembahasan

Darah bersifat alkalis lemah dengan Ph 7,36 dan berfungsi sebagai alat transportasi zat-zat
terutama O2, mengatur reaksi-reaksi tubuh supaya konstan, untuk regulasi panas badan dan
pelindung terhadap kemungkinan infeksi. Darah terdiri dari sel darah (eritrosit, leukosit,
trombosit) dan plasma darah (fibrinogen, yaitu serum darah yang terdiri dari albumin dan
globulin).Pada praktikum ini, kami menggunakan sampel darah yang sebanyak 3 ml yang
diambil dari salah satu anggota kelompok. Sampel darah tersebut diletakkan pada tabung
reaksi dan disentrifuge selama 10-15 menit dengan kecepatan 1500 rpm (rotate per menit),
setelah disentrifugasi, plasma darah akan terpisah dengan endapan. Karena, jika darah diputar
pada sentrifuge maka zat protein tersebut akan mengendap dan terpisah sebagai endapan

darah. Sisanya, berupa cairan bening/jernih yang disebut plasma.Plasma darah terpisah,
karena pada endapan darah terkandung protein yang berperan dalam pembekuan
darah.Selanjutnya, dilakukan pemisahan antara fibrin dan serum. Pemisahan dilakukan
dengan menambahkan 2 ml plasma dengan 15ml Nacl 0,9% dan 5 tetes Cacl 20% setelah itu
didiamkan kurang lebih 30 menit, sehingga terbentuk endapan gel di dalam gelas beker. Pada
penelitian kami, terdapat endapan gel dan sedikit cairan di dalam gelas beker. Gel tersebut
adalah fibrin, dan cairan sisanya adalah serum. Adapun fibrinogen berfungsi untuk
pembekuan darah. Saat terjadi luka, benang-benang fibrin akan terbentuk dan membentuk
anyaman untuk menjaring sel darah dan menutupi luka. Sifat fibrinogen yang membekukan
darah membuatnya berubah menjadi gel dan berpisah dari serum.
Prosedur kerjanya ketiga adalah pemisahan globulin dan albumin.Di dalam serum terdapat
protein albumin dan globulin.Untuk mendapatkan atau menentukan adanya globulin
ditambahkan (NH4)2 SO4 22% (ammonium sulfat jenuh).Prosedur ini untuk memisahkan
protein dengan salting out.Protein mempunyai struktur yang tidak stabil sehingga mudah
mengalami denaturasi yang meliputi presipitasi dan koagulasi.Albumin merupakan protein
yang larut dalam air sedangkan globulin mempunyai sukar larut dalam air. Akan tetapi di
dalam serum yang mengandung kedua protein (albumin dan globulin) ini ditambahkan garam
ammonium sulfat 22%, maka protein akan terdenaturasi atau daya larut globulin akan
berkurang sehingga globulin akan terpisah sebagai endapan. Denaturasi protein ini
dipengaruhi adanya garam logam berat, Ph, panas, perubahan tipe pelarut dan lain
sebagainya.Pada denaturasi terjadi perubahan terhadap struktur sekunder ternier, dan
kuartener.Molekul protein tanpa terjadinya pemecahan ikatan kovalen sehingga terkadang
dapat berlangsung secara rifersebel dan dapat mengalami metanuvasi atau penyusunan
kembali molekul protein. Dimana globulin akan mengendap pada penambahan amonium
sulfat 22% sedangkan albumin akan larut pada penambahan amonium sulfat 22%.
Pengendapan dapat terjadi karena saat amonium sulfat 22% ditambahkan pada serum, ion-ion
garam amonium sulfat menarik molekul air dan albumin menjauh dari globulin. Hal ini
disebabkan ion-ion pada garam amonium sulfat memiliki muatan berat jenis yang lebih besar
dibandingkan protein, sehingga ketika ditambahkan akan berikatan dengan molekul air dan
albumin yang dapat memaksa globulin berinteraksi, dan ketika menambahkan amonium
sulfat dalam jumlah cukup menyebabkan terpresifitasi. Setelah protes ini, akan didapatkan
endapan globulin yang akan disaring dengan kertas saring dan diperoleh fitrat yang akan
digunakan untuk pengujian albumin. Dengan analisis nitrogen dalam fitrat, setelah pemisahan
tersebut, diperoleh albumin dalam serum. Karena sifat albumin yang tidak larut atau
mengendap dalam amonium sulfat jenuh atau larutan garam yang sangat pekat, maka setelah
fitrat ditambah (NH4)2 SO4 22% diperoleh endapan gel. Kemudian, masing-masing endapan
dilakukan pemisahan, pemisahan globulin dilakukan dengan menuangkan cairan pada corong
yang telah diberi kertas saring dan dibawahnya terletak gelas beker, endapan berupa gel akan
tersangkut pada kertas saring dan fitratnya akan mengalir ke beker gelas. Endapan berupa gel
tersebut kemudian dibilas menggunakan pelarut Nacl 1 % (sifat globulin larut dalam larutan
garam encer) dengan volume kurang lebih 20 ml. Larutan ini kemudian ditetesi
menggunakan biuret untuk membuktikan adanya protein dalam darah. Apabila setelah diberi
tetesan biuret, larutan berubah warna menjadi warna biru muda, darah pasitif mengandung
protein globulin.
Untuk albumin, dilarutkan dalam air (sifat albumin larut dalam air) dan di lakukan uji
biuret.Pertama, ukur volume fitrat globulin dan tambahkan dengan (NH4) SO4 22%,
kemudian diamkan hingga 30 menit.Selain itu, saring cairan menggunakan kertas saring.
Endapan yang tersisa pada kertas saring itulah yang akan dilarutkan ke dalam air sebanyak 20

ml, dan dilakukan uji biuret. Apabila setelah diberi tetes biuret berubah warna menjadi biru
muda berarti darah positif mengandung albumin. Dari kedua percobaan diperoleh menjadi
hasil positif uji biuret, perubahan warna bias terjadi karena biuret bereaksi terhadap ikatan
popride pada protein.
Hitunglah seberapa banyak tetesan biuret tersebut, semakin banyak tetesan biuret tersebut,
semakin banyak tetesan biuret, maka semakin sedikit kadar proteinnya. Sebaliknya, semakin
sedikit tetesan biuret maka semakin banyak kadar proteinnya.
Dalam parktikum kami tetesan biuret untuk pemeriksaan globulin sebanyak 65 dan untuk
albumin 33 tetes.
1. H.

Kesimpulan
1. Cara memisahkan plasma dari endapan darah yaitu darah disentrifuge 10-15
menit dengan kecepatan 1000 rpm. Maka akan terlihat lapisan atas bening
(plasma) dan bagian endapan darah.
2. Cara memisahkan fibrin dan serum yaitu 1 ml plasma ditambah 15 ml Nacl
0,9% dan 5 tetes Cacl 20%, maka akan terjadi endapan. Fitrat adalah fibrin.
3. Globulin dalam serum mengandung protein yang lebih sedikit dari albumin.
Terbukti pada pemeriksaan endapan globulin yang ditetesi biuret
membutuhkan 65 tetes.
4. Albumin dalam serum mengandung protein yang lebih banyak. Terbukti pada
pemeriksaan endapan albumin yang ditetesi biuret membutuhkan 33 tetes.

1. I.

Daftar Pustaka

Bagus, Aden 2011. Pengertian globulin.

File:///D:/darah/pengertianglobulin.html14-03-2013
Alfinda, 2012. Pemeriksaan Darah.
http://www.scribd.com/doc/96III017/pemeriksaan -Darah
Novia, Almas.2012.Fungsi darah. http://relovia.blogspot.com/2012/10/fungsi-darah.html1403-2013
Lohninger, Albert.2008.dasar-dasar Biokimia Jilid I.Jakarta:Erlangga

Peara, Evvelyn C.2006.Anatomi dan fisiologi untuk

paramedis.Jakarta:PT.Gramedia
Rahmawaty,Setyaningrum.2002.Petunjuk Praktikum Biokimia Gizi.
Ridwan.2012.Pengertian darah dan bagiannya.
WordPress.com/2012/08/12)
Pengertian darah dan bagiannya Maulina,
Maura.2012.Albumin.http://id.shvoong.com/social.scienca/psychology/2198689.

Pemeriksaan Darah Secara Kualitatif

TUJUAN:

Untuk Mendapatkan spesimen darah vena untuk pemeriksaan darah secara kualitatif.
Untuk pemisahan plasma dengan packed cells.

Untuk pemisahan fibrin dengan serum

Untuk pemisahan globulin dan albumin

ALAT DAN BAHAN:

Torniquit

Spuit-kapas alkohol 96%

kapas kering

tabung reaksi

centrifuge

pipet tetes

BAHAN:

Darah

EDTA

NaCl 0,9%

CaCl 20%

Ammonium Sulfat 22%

NaCl 1%

air

CARA KERJA:
1. Pengambilan darah vena
2. Bersihkan daerah vena media cubiti dengan alkohol 96% dan biarkan menjadi kering
kembali.
3.

Pasang ikatan pembendung /torniquit 3 jari di atas fossa cubiti.

4.

Meminta partner kita yang akan diambil darahnya untuk mengepal dan membuka
tangannya beberapa kali agar vena jelas terlihat.

5.

menegangkan kulit di atas vena dengan jari tangan kiri agar vena tidak bergerak.

6.

Menusuk kulit di atas vena dengan jarum menggunakan tangan kanan sampai
menembus lumen vena.

7.

mengambil darah sesuai yang dibutuhkan.

8.

melepas torniquit dari ikatan tangan.

9.

menaruh kapas di atas jarum dan mencabut jarum secara perlahan.

10. mengalirkan darah dari spuit ke dalam tabung melalui dinding tabung.
11. memberi label pada tabung yang berisi darah.
2.Pemisahan Plasma dengan Packed Cells
1. Pemisahan sample darah ke dalam centrifuge selama 15 menit.
2. Lapisan atas yang bening adalah plasma dan endapan merah adalah packed cells.
3. Pemisahan Fibrin dengan Serum.
4.

1 ml plasma diencerkan dengan 15ml NaCl 0,9%

5.

menambahkan 1 tetes CaCl2 20%, sampai terjadi endapan.

6.

Menyaring endapan ,filtrat adalah serum dan endapan adalah fibrin.

4.Pemisahan globulin dengan Albumin.

1. Menambahkan 2-3 ml ammonium sulfat 22% ke dalam 1 ml serum,maka akan terjadi
endapan dari globulin.
2. Endapan globulin dilarutkan dengan Nacl 1%.
3.

Melakukan protein test.

4.

Filtrat yang di peroleh , di tambah dengan kristal ammonium sulfat hingga

jenuh,maka terjadi endapan albumin.

5.

Menyaring endapan kemudian di larutkan dengan air.

6.

Melakukan test dengan protein test.

DATA PENGAMATAN:

NO

PERLAKUAN

Darah dicentrifuge selama 15menit (darah

yang sudah di tambah EDTA).

HASIL PENGAMATAN

Terjadi pemisahan komponen

drah yaitu plasma dengan
packed cells,

Plasama berbentuk /berwarna

bening di bagian atas.

Packed cells berbentuk

endapan berwarna merah yang
menggumpul di bagian bawah.
Terjadi endapan

1 ml plasma di encerkan dengan 15 ml NaCl

0,9% di tambah 1 tetes CaCl 20%

2 ml ammonium sulfat 22% di

masukkan ke dalam 1 ml serum.

endapan +Nacl 1 %

Filtrat +Kristal ammonium sulfat.

Menyaring endapan +air.

Disaring

filtrat:serum

Endapan :fibrin.
Terjadi endapan globulin.

Endapan larutan putih.

Terjadi endapan albumin,

warna larutan jenuh. (Tidak
dilakukan)

PEMBAHASAN:

1.

Dalam pengambilan sample darah vena,digunakan torniquit dengan maksud untuk

memperjelas pembuluh vena.Pengusapan kapas beralkohol pada daerah yang akan
diambil darahnya supaya daerahnya steril.
2. Pada pemisahan plasma dengan packed cells,darah sample harus ditambah dengan
EDTA,kemudian dicentrifuge selama 15 menit.Pemisahan dilakukan selama 15 menit
agar plasma dan packed cells terpisah secara sempurna.Hasil dari perlakuan ini darah
akan terpisah menjadi 2 bagian yaitu bagian bening yang merupakan plasma,dan
bagian yang mengendap yang merupakan packed cells.
3.

Plasma yang di hasilkan dari pemisahan, kemudian dipisahkan komponen

4.

Komponennya yaitu fibrin dan serum.Pemisahan dilakukan dengan menambah 15ml

NaCl 0,9% kedalam 1 ml dan menambah 1 tetes CaCl2 20% sampai terjadi
endapan.Filtrat yang di peroleh adalah serum dan endapan adalah fibrin.

5.

Pada pemisahan globulin dengan albumin ,serum yang diperoleh selanjutnya

ditambah dengan 2 ml ammonium sulfat 22% ke dalam 1 ml serum,terjadi endapan
dari globulin yng selanjutnya dilarutkan dengan NaCl 1%.Pada Percobaan ini,tidak di
lakukan protein test karena hambatan alat dan bahan serta reagen yang
digunakan.Sedangkan pemisahan albumin belum bisa dilakukan karena pada
pemisahan globulin,filtrat albumin belum nampak.

KESIMPULAN:

Komponen darah di bagi menjadi 2 yaitu: plasma dan packed cell,pada pemisahan ,
bagian bening,Plasma dan yang mengendap merah adalah packed cells.

Plasma dibagi menjadi 2 bagian:serum dan fibrin,pada pemisahan filtrat adalah

serum dan endapan adalah fibrin.

Pada serum,di bagi menjadi 2 komponen :albumin dan globulin,endapan pada

globulin dilarutkan dengan NaCl1%,pada albumin dilarutkan dengan air.