PRACTICA # 1 DEMANDA BIOQUIMICA DEL AGUA

OBJETIVOS:
Determinar la DBO5 de diferentes concentraciones.
Interpretar los resultados de la DBO5 dependiendo del origen de la
muestra, a la normatividad y el tratamiento aplicado

INTRODUCCION
La determinacin de oxgeno disuelto (OD) es muy importante en Ingeniera
Ambiental por ser el factor que determina la existencia de condiciones aerobias o
anaerobias en un medio particular. La determinacin de Oxgeno Disuelto sirve
como base para cuantificar la Demanda Qumica de Oxgeno (DBO5), aerobicidad
de los procesos de tratamiento, tasas de aireacin en los procesos de tratamiento
aerobio y grado de contaminacin de los ros. El oxgeno disuelto se presenta en
cantidades variables y bajas en el agua; su contenido depende de la
concentracin y estabilidad del material orgnico presente y es por ello, un factor
muy importante en la auto purificacin de los ros. Los valores de O.D. en aguas
son bajos y disminuyen con la temperatura. El oxgeno libre en solucin,
especialmente cuando est acompaado de CO2 es un agente de corrosin
importante del hierro y el acero. La demanda bioqumica de oxgeno (DBO5) es
una prueba usada para la determinacin de los requerimientos de oxgeno para la
degradacin bioqumica de la materia orgnica en las aguas municipales,
industriales y en general aguas residuales; su aplicacin permite calcular los
efectos de las descargas de los efluentes domsticos e industriales sobre la
calidad de las aguas de los cuerpos receptores. Los datos de la prueba de la
DBO5 se utilizan en ingeniera para disear las plantas de tratamiento de aguas
residuales. En aguas residuales domsticas, el valor de la DBO5 a 5 das
representa en promedio un 65 a 70% del total de la materia orgnica oxidable. La
DBO como todo ensayo biolgico, requiere cuidado especial en su realizacin, as
como conocimiento de las caractersticas esenciales que deben cumplirse, con el
fin de obtener valores representativos confiables.
El ensayo supone la medida de la cantidad de oxgeno requerido por los
organismos en sus procesos metablicos al consumir la materia orgnica presente
en las aguas residuales o naturales, por lo que es necesario garantizar que
durante todo el perodo del ensayo exista suficiente O.D. para ser utilizado por los
organismos. Adems, debe garantizarse que se suministran las condiciones
ambientales adecuadas para el desarrollo y trabajo de los microorganismos, as
que se deben proporcionar los nutrientes necesarios para el desarrollo bacterial
tales como N y P y eliminar cualquier sustancia txica en la muestra. Es tambin
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necesario que exista una poblacin de organismos suficiente en cantidad y

variedad de especies, comnmente llamada simiente, durante la realizacin del
ensayo. Variaciones en el nmero inicial de bacterias tienen poco efecto sobre el
valor de D.B.O.5 siempre y cuando el nmero de bacterias sea mayor de 103/ml.
El efecto de una poblacin bacterial inicial baja sobre el valor de la DBO5 puede
observarse en la figura 1.

Si no estn adaptadas al substrato particular existente en la botella de DBO5, las

bacterias moriran o disminuiran en nmero hasta que logren adaptarse; es
importante, por lo tanto, obtener simientes aclimatadas para conseguir valores
verdaderos de la concentracin orgnica. El efecto de una simiente no aclimatada
sobre el valor de la DBO5 puede analizarse en la figura 2.

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MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPO

Materiales para oxgeno disuelto
3 pipetas graduadas de 10 ml
3 matraces Erlenmeyer de 250 ml
1 probeta de 100 ml
1 bureta
Soporte universal y pinzas para bureta

REACTIVOS Y SOLUCIONES
Reactivos para oxgeno disuelto
1. Sulfato manganoso (MnSO4.4H2O MnSO4.2H2O MnSO4.H2O)
2. Hidrxido de potasio (KOH)
3. Yoduro de potasio (KI) o yoduro de sodio (NaI)
4. Azida de sodio (NaN3)
5. Almidn soluble
6. Tiosulfato de sodio pentahidratado (Na2S2O3.5H2O)
7. cido sulfrico concentrado (H2SO4)
8. Dicromato de potasio (K2Cr2O7)
9. Hidrxido de sodio (NaOH)
10. cido saliclico (C6H4(OH)COOH)
11. Disolucin de sulfato manganoso. Disolver en agua 480 g de sulfato
manganoso, 400 g de MnSO4.2H2O, 364 g de MnSO4.H2O, filtrar y diluir
a 1 L. Esta disolucin debe usarse siempre y cuando no de color al
adicionarle una disolucin cida de yoduro de potasio en presencia de
almidn.
12. Disolucin alcalina de yoduro-azida de sodio. Disolver en agua 500 g de
hidrxido de sodio, y 135 g de NaI, diluir a 1 L con agua destilada. A esta
disolucin agregar 10 g de azida de sodio disueltos en 40 ml de agua. Esta
disolucin no debe dar color con la disolucin de almidn cuando se diluya
y acidifique.
13. Disolucin indicadora de almidn. Disolver 2 g de almidn soluble y 0.2 g
de cido saliclico como conservador en 100 ml de agua destilada caliente.
Mantener en refrigeracin siempre que no est en uso.
14. Disolucin estndar de tiosulfato de sodio (aprox. 0,025M). Pesar
aproximadamente 6,205 g de tiosulfato de sodio y disolver en agua
destilada y diluir a un litro; agregar un gramo de hidrxido de sodio en
lentejas. Titular con una disolucin de dicromato de potasio 0,025 N,
usando la disolucin de almidn como indicador (1 ml de la disolucin
valorada de tiosulfato de sodio 0,025 M es equivalente a 1mg de oxgeno
disuelto).
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15. Disolucin de dicromato de potasio (0,025 N). Pesar aproximadamente y

con precisin 1,226 g de dicromato de potasio previamente secado a 105C
durante 2 h y aforar a 1 L con agua destilada.
16. Valoracin de la disolucin de tiosulfato de sodio. Verter una alcuota de 10
a 20 ml de solucin de dicromato de potasio, medido con pipeta volumtrica
y adicionar 1 g de KI, 3 ml de HCl 6N y una pizca de bicarbonato de
sodio, diluir 50 m L con agua destilada, agitar, tapar el matraz y dejar en la
oscuridad durante 5 minutos. Lavar las paredes del matraz con agua
destilada y valorar con la solucin de tiosulfato de sodio hasta que la
coloracin de la solucin cambie de pardo rojizo a amarillo, en este
momento se adiciona 1 ml de almidn al 1% y se contina la adicin de
tiosulfato hasta que la solucin cambie de azul a azul tenue o incoloro.
17. Disolucin de cido sulfrico 0,10 N. Lentamente y mientras se agita,
agregar 2,8 ml de cido sulfrico concentrado a un volumen aproximado de
500 ml de agua destilada, mezclar bien y diluir a 1 L de agua destilada.
18. Disolucin de hidrxido de sodio 0,1 N. Pesar aproximadamente y con
precisin 4 g de lentejas de hidrxido de sodio y diluir a 1 L.
DESARROLLO EXPERIMENTAL
Tcnica de dilucin
Tcnica de dilucin Utilizando una pipeta volumtrica, adanse cantidades
adecuadas de muestra a los frascos Wheaton de acuerdo a la DBO5 esperada
segn la siguiente tabla:

Llnense los frascos con agua de dilucin, de forma que a la insercin del tapn
derrame el agua de la boca del frasco, verificar que no haya burbujas en el frasco.
Ajstese hermticamente el tapn al segundo frasco, pngase un sello hidrulico e
incbese durante 5 das a 20C.
Tcnica de Inoculacin
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Cuando una muestra contiene algn agente txico que inhibe el desarrollo natural
de los microorganismos, inocular el frasco wheaton con algn agua residual que
tenga valor alto de DBO5, como son los efluentes municipales, de rastros o agua
de ros contaminados.
1. Establecer el valor esperado de la DBO5 del inculo
2. Agregar al menos 1 ml del agua de inculo dependiendo del valor de
DBO5 establecido en el prrafo anterior
3. Seguir el procedimiento de la tcnica de dilucin directa en el frasco
4. Manejar dos blancos, uno de reactivo con el agua de dilucin y otro con el
agua de dilucin ms el inculo agregado a la muestra.
5. El consumo de OD del agua de dilucin ms el inculo puede estar en el
intervalo de 0,6 a 1,0 mg/L.
El OD consumido por el agua de dilucin debe ser menor de 0,2 mg/L y
preferiblemente no mayor de 0,1 mg/L.
Incubacin
Incube a 20C 1C las botellas de DBO5 que contengan las muestras con las
diluciones deseadas, los controles de siembra y los blancos de reactivos.
Determinacin del OD inicial
Para fijar el oxgeno, adicionar a la botella de DBO5 que contiene la muestra, 2 ml
de sulfato manganoso con una pipeta graduada, cuidando que la punta de la
misma penetre aproximadamente 0.5 cm en el seno del agua.
Agregar 2 ml del reactivo lcali-yoduro-azida, en la misma forma que el reactivo
anterior.
Tapar la botella de DBO (evitar burbuja) y agitar vigorosamente y dejar sedimentar
el precipitado (al menos a la mitad del frasco). Aadir 2 ml de cido sulfrico
concentrado, volver a tapar y mezclar por inversin hasta completa disolucin del
precipitado.
Titular 100 ml de la muestra con la disolucin de tiosulfato 0.025 N agregando el
almidn hacia el final de la titulacin, cuando se alcance un calor amarillo plido.
Continuar hasta la primera desaparicin del color azul.
Despus de 5 das de incubacin determnese el OD en las diluciones de la
muestra, en los controles y en los blancos.
CLCULOS
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OD mg/L = N tiosulfato x ml de tiosulfato x 8 x 1000/200

Donde 8 = gramos/equivalente de oxgeno
200= volumen de la muestra
Cuando el agua de dilucin no est sembrada, utilice la siguiente frmula:
DBO5=

DO1DO 5
p

Dnde:

DO1=oxigenodisuelto inicial

DO5=oxigeno disueltoal quinto dia

p=fraccion residual decimal de la muestra de agua residual u

La p se calcul con la siguiente relacin:

p=

volumen de muestra de agua residual ml

volumen del frasco para DBO(300 ml)

Donde 300 es por el volumen total del tubo.

RESULTADOS y ANALISIS
equipo
1
2
3
4
5
6
7

dilucin(ml)
0
1
2
3
5
10
20

OD1
6.9
7.1
8.1
6.9
7.5
6.9
6.3

OD6
7
5.7
4.3
3.9
3.1

OD1-6
-0.1
1.4
3.8
3
4.4

p
0
0.003
0.007
0.010
0.017
0.033
0.067

DBO
420
570
300
264

En la tabla se puede ver en primera por cuestiones de tiempo no se determin el

oxgeno disuelto a los cinco das sino hasta el sexto da despus de la inoculacin.
Lo lgico de suponer es que con el tiempo el oxgeno disuelto en el medio de
estudio se reduzca, pero en el caso del equipo uno sucedi lo contrario lo cual
muestra un error, que puede ser al titular o al diluir la muestra.
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Mientras tanto el equipo 6 y 7 por ser concentraciones muy grandes la exactitud

de clculo se pierde la totalidad del oxgeno disuelto, es por ello que no pudieron
obtener la cantidad de oxgeno disuelto al sexto da.
Con lo que respecta a los dems se observa la disminucin de oxgeno disuelto
proporcional a la cantidad de muestra disuelta, es decir entre ms agua de
muestra, ms microorganismo bacterial y ms oxgeno disuelto consumen
reduciendo as la candad disponible. Esto ltimo explica porque los ltimos dos
equipos ya no encontraron nada de oxigeno disponible.
CONCLUSIN
Se determin la demanda bioqumica del agua residual relacionando la cantidad
de oxigeno presente al primer da de la prueba y la del sexto da. Se concluye que
la determinacin de la DBO5 no es tan sencillo pero que es una prueba necesaria
para plantas de tratamientos de aguas residuales o estudios a fines.
BIBLIOGRAFIA
1. NMX-AA-012-SCFI-2001. Anlisis de agua.- Determinacin de la Demanda
Bioqumica de Oxgeno en aguas naturales, residuales y residuales
tratadas.- Mtodo de Prueba
2. Manual de Prcticas Qumica Ambiental, UPIBI, IPN, 2007
3. Metcalf & Eddy. Ingeniera de Aguas Residuales. Tratamiento Vertido y
Utilizacin. Vol. 1 Ed. Mc Graw Hill. Mxico 1996.

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