Universidad Autnoma de Quertaro

Facultad de Medicina

Semestre: 2

Seccin: Martes

Laboratorio de Bioqumica II

Prctica 3:Determinacin de colesterol en sangre

Integrantes:

Alvarado Almanza Jos Miguel

Daz Tapia Adrin Itzrael

Osorno Ramrez Diana Pamela

Rodrguez Rivas Cesar Ivan

Fecha de entrega: Martes 22 de septiembre del 2015.

Introduccin
En este reporte se expone los resultados obtenidos durante la prctica de
determinacin de concentracin decolesterol total en plasma por medio del
espectrofotmetro, as como los fundamentos tericos, los respectivos materiales
usados y los procedimientos necesarios para haber realizado la determinacin de
colesterol. Gracias a este tipo de tcnicas se es posible medir el volumen de
colesterol en los individuos y determinar o prevenir patologas.
Marco terico
El colesterol proviene tanto de los alimentos y de su sntesis por el cuerpo, en
especial en las clulas hepticas e intestinales. El colesterol es un componente de
la membrana celular y de la membrana de los organelos celulares. Es un
precursor metablico de los cidos biliares, vitamina D y hormonas esteroides. El
colesterol, molcula insoluble, circula asociado a lipoprotenas (HDL, LDL y VLDL).
La cantidad del colesterol total permite detectar hipercolesterolemia, aislada o
asociada con hipertrigliceridemia. Las altas concentraciones de colesterol estn
asociadas con el alto riesgo de accidente vascular y la aparicin de aterosclerosis.
La relacin LDL/HDL debe ser tomada en consideracin para evaluar el riesgo de
desarrollo de enfermedades cardiovasculares.
Cul es la concentracin normal de colesterol total en plasma?
De acuerdo a la AHA (American Heart Association por sus siglas en ingls) la
colesterolemia por debajo de 200 mg/dL (miligramos por decilitros) es la
concentracin deseable para la poblacin general, pues se correlaciona con un
bajo riesgo de enfermedad cardiovascular. Colesterolemia entre 200 y 239 mg/dL
existe un riesgo intermedio en la poblacin general, pero es elevado en personas
con otros factores de riesgo como la diabetes mellitus. Colesterolemia mayor de
240 mg/dL puede determinar un alto riesgo cardiovascular y se recomienda iniciar
un cambio en el estilo de vida, sobre todo en lo concerniente a la dieta y al
ejercicio fsico.
Objetivo
Instruirse en la determinacin de concentracin de colesterol en plasma por medio
del espectrofotmetro.
Interpretar los resultados obtenidos durante la prctica en el laboratorio de
bioqumica, para que en un futuro al realizarse exmenes de colesterol a los
pacientes, podamos relacionar estos datos con una posible patologa, de forma
coherente y exacta.

Materiales y reactivos

Un espectrofotmetro
3 celdas
500 l de reactivo (x3)
Agua destilada
10 l de muestra estndar
10 l de muestra (suero sanguneo)
Celdilla
Tubos Eppendorf (x3)
Pipeta automtica (1000 l y 10 l)
Guantes estriles desechables

Procedimiento
Primero marcamos tres tubos Eppendorf blanco,
estndar y muestra y les colocamos 500 l de reactivo a
cada uno con ayuda de una pipeta automtica de 1000
l, para esto, primero pusimos la pipeta en 500 l para
que fuera esta la cantidad a tomar, colocamos una
boquilla azul en la pipeta automtica, ya estando esto,
presionamos el gatillo lateral de la pipeta hasta el primer
tope y absorbimos la cantidad marcada, despus
pusimos la pipeta en uno de los tubos y presionamos
nuevamente el gatillo pero esta vez hasta el segundo
tope, y expulsamos el contenido de la pipeta, hicimos este procedimientoen cada
una de los tres tubos y cuando terminamos, depositamos la boquilla en un vaso de
precipitado con cloro,para desinfectarla.
Despus con una pipeta de 10 l, colocamos 5 l de
agua destilada en el tubo blanco, siguiendo el mismo
procedimiento que con el reactivo, a continuacin
desechamos la boquilla en cloro y colocamos una
nueva boquilla en la pipeta y depositamos 5 l de la
muestra estndar en el tubo estndar, desechamos la
boquilla en cloro nuevamente y colocamos una nueva
boquilla, por ltimo depositamos 5 l de la muestra
(suero sanguneo) en el tubo de muestra, al acabar con
cada tubo mezclamos correctamente dando pequeos
golpes en la punta en todos los casos.

Encendimos el espectrofotmetro y esperamos unos

minutos para que estuviera listo, despus elegimos la
opcin de longitud de luz (de 500 nm en este caso), una
vez hecho esto vacamos el contenido del tubo con el
blanco en una celda, despus la colocamos dentro del
espectrofotmetro
(cuidando
que los lados donde tena
marcas quedaran laterales al
rayo de luz que se iba a
proyectar,
para
evitarnos
problemas con la medicin) y
presionamos en iniciar prueba con blanco, el espectro
comenz a calcular los datos del blanco y cuando estuvo
listo, anotamos los resultados y sacamos la celda de su
lugar.
Lo siguiente que pusimos en el espectro fue la celdilla con el contenido del tubo
estndar de la misma forma que el anterior, presionamos el botn
inmediatamente inferior al primero, y cuando este nos indic que haba terminado
los clculos, anotamos el resultado, de igual forma sacamos la celda y por ltimo
colocamos el contenido del tubo muestra en otra celda y la metimos dentro del
espectrofotmetro, presionamos el mismo botn, esperamos a que nos arrojara el
ltimo resultado y lo anotamos tambin.
Cuando terminamos de usar el espectrofotgrafo,
procedimos a apagarlo siguiendo las indicaciones
requeridas por el mismo, mientras los dems
compaeros lavbamos las celdas utilizadas en la
prctica con agua destilada, los dejamos secar para
su posterior guardado y uso.
Resultados
El resultado que nos dio el espectrofotmetro al colocar las celdas que contenan
el tubo estndar (0.087) y tambin de la celda con el contenido del tubo muestra
(0.060), despus de realizar los clculos correspondientes nos arroj el resultado
de el cual estaba dentro de los lmites normales (< 200 mg/dL).
A continuacin mostramos los clculos que realizamos para llegar al resultado:
Muestra
0.087
mg
mg
n=
100
=145
Estandar
0.060
dL
dL

Conclusin

Con esta prctica logramos familiarizarnos ms con el mtodo para medir el

colesterol en plasma (no fue tan difcil ya que en la prctica pasada realizamos los
mismos procedimientos pero a diferencia de esta era con glucosa en lugar de
colesterol), ya que es muy utilizada para proporcionar datos especficos que
puedan ayudar al diagnstico de enfermedades cardiovasculares, diabetes o sus
factores de riesgo en potencial desarrollo, incluso para deteccin de presin
arterial alta. Adems de lo anterior, como profesionales de la salud y futuros
mdicos es nuestro deber instruirnos en este tipo de tcnicas, independientemente
de si nos especialicemos en temas similares o no, porque son datos bsico que
pueden arrojar informacin vital para poder dar un diagnostico confiable y la
manera de proceder ante l.
Bibliografa (Vancouver)
Niveles de colesterol plasmtico segn la sociedad norteamericana de cardiologa
disponible en:
http://www.onsalus.com/niveles-de-colesterol-plasmatico-segun-la-sociedadnorteamericana-de-cardiologia/colesterol/293/1/debate/comunidad#ultimo_
comentario
Colesterol: Datos y caractersticas, disponible en:
https://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/cholesterol.html