Relacin estructura-funcin en bacterias

Vamos a retomar la clasificacin de los

seres vivos, solo para recordar. Las
bacterias estaban en estos dominios:
eubacteria y archaebacteria. Las bacterias
de importancia clnica estn bsicamente
en las eubacterias.
Ahora vamos a ver como se clasifican
las bacterias. Hay muchsimas bacterias,
ms especies de bacterias que de
animales superiores, incluso hay
bacterias que no se conocen o no se han
clasificado porque no se pueden cultivar.
La taxonoma es lo que se llama la ciencia de la
clasificacin de las bacterias (de los
microorganismos en general). La taxonoma
bacteriana tiene dos disciplinas, la identificacin
y la nomenclatura. Podemos clasificar de
acuerdo a caractersticas fenotpicas (taxonoma
clsica), donde se fijan en la estructura y
caractersticas fisiolgicas; y las caractersticas
genotpicas, cuya clasificacin se le llama
taxonoma molecular.
La nomenclatura es como se
escriben los microorganismos, hay
reglas para escribir sus nombres,
como se agrupan. Por ejemplo la
escherichia coli pertenece a un orden
llamado Enterobacteriales; todos los
ordenes por convencin internacional
se escriben con maysculas y sufijo
ales, por lo que si me dicen algo
con sufijo ales es que me estn
hablando del orden. La familia es una
agrupacin de gneros y el nombre
corresponde al hbitat donde fueron
aisladas por primera vez; estas se
llaman Enterobacteriaceae, ya que fueron aisladas en el espacio entrico en el intestino,
y terminan en el sufijo aceae, adems se escriben en cursiva. El gnero es una
agrupacin de especies que comparten muchas caractersticas, y el gnero se escribe con
mayscula, en cursiva y tienen terminaciones tpicas: ilus, ella u occus. La
especie tiene una unidad taxonmica ms bsica, y es una coleccin de bacterias que
comparten propiedades esenciales y que se perpetan en la evolucin, la especie
evoluciona como un todo; se escriben con minsculas y en cursiva.

La taxonoma clsica es la
ms antigua, que ha existido
desde siempre, y que se basa
en
las
caractersticas
macroscpicas
y
microscpicas,
las
caractersticas metablicas y
bioqumicas,
los
requerimientos fsicos de
crecimiento (hay organismos
que para crecer necesitan
ms cosas que otros), las
estructuras
antignicas,
capacidad de esporular o no;
todo eso se usa para
clasificar a los microorganismos. La clasificacin ms ampliamente difundida es esta
que se usa en los laboratorios de microbiologa clnica; cuando se quiere clasificar
rpidamente un microorganismo, y ya que el tiempo es algo importante, se clasifican en
Gram positivos, Gram negativos y otros tipos de bacterias. Dentro de los Gram
positivos estn las cocaceas y los bacilos; dentro de las cocaceas Gram positivas (un
grupo muy abundante) estn los Streptococcus, Enterococcus y Staphylococcus; dentro
de los bacilos Gram positivos (que no son tantos) estn los Bacillus, la Listeria, y los
Corynebacterium. Gram positivo y Gram negativo se refiere a las capacidades
tintoriales en una tincin de Gram, a los positivos los veo violeta y los Gram negativos
los veo rojos. Las cocaceas Gram negativas (son muy pocas) son las Neisseria (por
ejemplo la Neisseria Gonorrea); dentro de los bacilos Gram negativos (son muchos)
estn las Enterobacteriaceae (Coli, Chigera, Enterobacter), y estn los bacilos Gram
negativos no fermentadores (Pseudomonas). Los otros son los fastidiosos, ya que no
crecen en los medios de cultivo convencionales. Por ejemplo cuando llevo una muestra
de un absceso al laboratorio clnico, se siembra en medios convencionales: agar sangre,
agar chocolate (agar sangre hidrolizado) y agar MacConkey; estos son medios ricos para
el crecimiento de microorganismos, y crecen todos los Gram positivos y Gram
negativos, pero los fastidiosos no crecen en esos medios, necesitan medios ms ricos
con vitaminas, extracto de cerebro, aminocidos que no se pueden sintetizar, etc. Los
fastidiosos no crecen en los medios convencionales, necesitan medios muy ricos para
crecer y se demoran en crecer (no como una Coli que demora 24 horas), adems
necesita que le adicione aminocidos, vitaminas u otro tipo de compuestos. Las
myccobacterias tambin estn en la categora otros porque no crecen en los medios
convencionales (por ejemplo tuberculosis), la Treponema (por ejemplo la Treponema
Pallidum causante de la sfilis), y las Deficitarias que son an ms fastidiosas ya que no
pueden crecer en un medio de cultivo, necesitan crecer dentro de otra clula (por
ejemplo la Clamidia, que es un patgeno genital), a estas bacterias le falta maquinaria
metablica para sintetizar sus propias vitaminas, sus propios aminocidos, entonces hay
que darle todo, adems tampoco tiene pared lo que la hace muy sensible.
Esta es la clasificacin que ms se usa en los laboratorios clnicos a pesar que estamos
en la era de la biologa molecular y la clasificacin por RNA.

La taxonoma gentica se basa

en la secuencia de material
gentico de la bacteria, por
ejemplo
el
porcentaje
guanina/citosina de la bacteria,
las distintas bacterias tienen
distintos porcentajes G/C como
las que viven en giseres que
tienen un porcentaje muy alto
en su DNA porque la G/C tiene
tres enlaces haciendo su DNA
ms estable. Secuenciar el gen de la citocromo oxidasa es un blanco muy utilizado para
ver la filogenia de las bacterias, si tengo todas estas bacterias y agarro el gen de la
citocromo oxidasa (una enzima respiratoria muy conservada) y hago un rbol
filogentico. Pero el ms usado es el RNA ribosomal 16S, que se usa para hacer la
filogenia de bacterias y es ese el que usaron para hacer la ltima clasificacin.
Si yo agarro en RNA 16S y lo meto en un programa que
hace rboles filogenticos obtengo esto. Esta es la ltima
clasificacin que se hizo de las bacterias en base al RNA
ribosomal 16S.
Ahora vamos a ver estructura de la bacteria con ms
detalle, vamos empezar por el material gentico y por la
composicin de la bacteria. Ellas
se componen de los mismos
elementos que nos componen a
nosotros: C, H, O, N, S, P y otros
elementos que se encuentran en el
organismo; estos son los ms
abundantes
y
son
los
componentes
de
las
macromolculas.
Las
macromolculas estn formadas
por monmeros, por ejemplo los
polisacridos estn formados por
monmeros de azcar y estos
estn en la cpsula, el glicocalix y
el biofilm en el caso del alginato; los aminocidos forman las protenas y estas a su vez
los ribosomas, los flagelos, todas las enzimas; los cidos grasos forman los lpidos, dos
cadenas de cidos grasos unidas a los carbonos del glicerol forma un lpido que forma
por ejemplo la membrana; los nucletidos forman cidos nucleicos que forma en
material gentico de la clula.
Ac tenemos el cido hialurnico muy conocido por ser el que forma la cpsula del
Streptococcus Pyogenes, aqu est lo que les contaba respecto al glicerol, donde el
carbono del glicerol se une a un cido graso que puede ser el palmtico, linoleico,
esterico, que ah forman un lpido.
La estructura de la bacteria: tiene su membrana que est
mucho ms adentro, su pared celular que est por fuera

y mucho ms afuera la cpsula y el glicocalix; adentro est el material gentico, los

ribosomas.
El material gentico de una
bacteria no est encerrado
en un ncleo como en las
clulas eucariotas, est
suelto en una zona que se
llama nucleoide. Es una
molcula circular, mientras
que el nuestro el lineal, y es
uno solo. Pueden tener
plasmidios,
formas
epigenticas de material,
pero el cromosoma es una
sola molcula. Es de
tamao variable, no todas
las bacterias tienen su cromosoma del mismo tamao. Haemophilus Influenzae est
dentro de las caractersticas de los fastidiosos que crece en agar chocolate y tiene un
genoma de 0.8 megabases, la Pseudomona tiene un genoma muy grande de 8 Mb. El
cromosoma es una copia nica y tiene el patrimonio gentico de la bacteria.
La membrana citoplasmtica. Aqu est la
cabeza hidrofilita del glicerol y colas
hidrofbicas de cidos grasos, esto forma una
monocapa y la membrana est formada por
una bicapa, con las cabezas hidrofbicas hacia
fuera y las colas hidrofbicas hacia adentro. La
bicapa es el andamio para que se inserten las
protenas. Esto es el esqueleto de la membrana
y las protenas formando canales para que
pasen los nutrientes. Una membrana de
bacterias (siempre que digo bacteria me refiero
a eubacteria).

Las archaebacterias tienen una

membrana
formada
por
compuestos diferentes, que se
llaman fitanil. Tambin tienen
cabezas hidroflicas de glicerol,
pero lo que sale ah no son cadenas de cidos grasos, es fitanil. El fitanil son unidades

de isopreno, un compuesto de tres carbonos, y la cadena se forma por sucesivas cadenas

de isopreno unidas. El isopreno tiene una ramificacin y por eso se dice que las
membranas de las archae son ramificadas y las de las eubacterias son lineales, esa es la
gran diferencia. La otra diferencia es que las cadenas de fitanil se pueden unir
covalentemente, lo que hace que se forme una monocapa, esto la hace mucho ms
estable. Todos estos mecanismos son para vivir en ambientes extremos (como 100C).
Y la membrana de los eucariotas es muy parecida a las de la eubacteria. Est formada
por fosfolpidos de cadena lineal, y la particularidad que tiene la membrana de los
eucariontes es que tiene colesterol, un lpido que le da rigidez a las membranas, y es
exclusivo de los eucariontes, no existe en bacterias ni hongos. Los hongos tienen un
smil que se llama ergosterol. El colesterol es exclusivo de eucariontes superiores, por
eso el colesterol es una grasa animal.
*El bifitanil es cuando el fitanil se uni covalentemente formando la monocapa.
La importancia de la membrana plasmtica es la misma que en eucariotas. Es la barrera
de permeabilidad que separa el medio externo y medio interno, y otorga permeabilidad
selectiva. La permeabilidad selectiva es un decir, ya que no pasa nada a travs de la
membrana excepto agua y molecular hidrofbicas muy pequeas, pero no pueden pasar
ni siquiera iones de hidrgenos ni nutrientes, de ah la existencia de las protenas de
membrana, que hacen canales para el paso de nutrientes. El rol estructural de la
membrana plasmtica es la sntesis y transporte de macromolculas, transporte por que
all se asientan protenas transportadoras y sntesis porque en la membrana plasmtica
de las bacterias se pegan los ribosomas (ya que no tienen membranas internas).
Generacin de energa: gradiente de iones y sntesis de ATP; en la membrana
plasmtica se inserta la ATP sintetasa que sintetiza el ATP de la bacteria, y el gradiente
de iones, ya que saben que saca protones por lo que se forma la membrana polarizada
que est cargada positivamente por fuera y adentro est cargada negativamente, y la
disipacin de ese gradiente a travs de la ATP sintetasa es lo que le da energa para su
funcionamiento.

Dentro de la bacteria hay 70-80%

de agua, materiales en suspensin,
sales
minerales,
estructuras
citoplasmticas (ribosomas, inclusiones y citoesqueleto).
Los ribosomas son las fbricas de protenas, los ribosomas procariotas y eucariotas son
diferentes, el S (coeficiente de sedimentacin de los ribosomas) es diferente, 70S en
procariotas y 80S en eucariotas. Estn formados por una subunidad pequea y una

subunidad grande, ambas formadas por una o dos molculas de RNA y protenas, eso
es un ribosoma, una mezcla de RNA ribosomal y protenas. Lo que hacen es sintetizar
las protenas.

En los ribosomas se dejan lugares para que vengan los tRNA que son los que traen los
aminocidos, entonces los tRNA se van colocando en distintos sitios que hay dentro de
los cromosomas y se va formando la cadena polipeptdica.
Los ribosomas se pegan a un RNA mensajero, varios de ellos, y estas cadenas es lo que
se ve al microscopio electrnico, cada uno de ellos es un cromosoma, y de cada uno de
estos va saliendo una cadena polipeptdica. Esa cadena se llama polirribosoma, la
cadena de ribosomas pegados a un RNA mensajero, y son tpicas de bacterias.
Las inclusiones citoplasmticas son
reservas de la bacteria, cuando hay
abundancia de nutrientes la bacteria
aprovecha y guarda. Puede haber de
varios tipos, estn las orgnicas con
polisacridos (como glucgeno o
almidn), de hidrocarburos, etc.;
tambin estn las inorgnicas, como
los grnulos de azufre, como en esas
bacterias que pueden vivir solo
oxidando azufre para obtener su
energa, ellas guardan grnulos de
azufre; y las inclusiones de sales
minerales y de pigmentos solubles.
As se ven las bacterias del azufre, los grnulos de azufre se
ven dentro como muy refractarios a la luz, eso que est ah es
azufre elemental (azufre cero), ellas lo oxidan y obtienen
energa.
El otro elemento que podemos encontrar en el citoplasma de la
bacteria es el citoesqueleto. Hace algunos aos se pensaba que
las bacterias no tenan citoesqueleto, as como se pensaba que no tenan intrones, esto
era como reglas o dogmas. Hasta que en 1970-1980 empezaron a aparecer las primeras
ideas de actina y tubulina bacteriana; actina y tubulina son las protenas que forman el

citoesqueleto eucarionte, y empezaron a encontrar homlogos en las bacterias, hasta que

en el 2001 encontraron el homologo de la actina y despus de eso el citoesqueleto
bacteriano fue aceptado por todo el mundo y demostrado.

Esto es una clula eucariota teida

con verde para tubulina y la actina en
amarillo, los filamentos intermedios con el otro color. Entonces lo que encontraron fue
el anlogo de la actina que en bacterias se llama MreB y FtsA. Si ustedes miran aqu, la
protena del MreB se dispone en espiral en bacterias con forma de bacilo; cuando mutan
esa protena y le sacan el gen a la bacteria, se vuelve redonda, entonces el MreB le da la
forma de bacilo. El peptidoglicano se va a ubicar de acuerdo a donde este el MreB. El
anlogo de la tubulina se llama FtsZ y BtubA/B; si ustedes miran FtsZ se localiza en la
bacteria en un anillo entremedio, el anillo Z, este se contrae y es responsable de la
divisin bacteriana. Los filamentos intermedios tienen de anlogo la crescentina y es
algo exclusiva, ya que solo algunas bacterias la producen. Es esto que est ac, los
vibrios son bacilos curvos por la crescentina, cuando no hay crescentina el vibrio clera
(por ejemplo) se hace recto. Tambin hay protenas que no tienen homologo en
eucariotas que son protenas sin contraparte, por ejemplo MinD, en este dibujito MinD
est ubicado en los polos de la bacteria ya que es un antagonista de FtsZ, cuando est
MinD no est FtsZ y viceversa. MinD se ubica ac como forma de hacer que FtsZ se
ubique siempre en el medio, lo que hace posible que la divisin sea siempre en el
medio.
Las endosporas bacterianas son formas de
reposo que desarrollan algunas bacterias en
respuesta a la escasez de nutrientes.
Cuando hay condiciones como escasez de
nutrientes, de agua, mucho calor,
radiactividad, hay bacterias (no todas) que
pueden esporular. Estos gneros son los
que pueden esporular, los ms conocidos
son Bacilus y Clostridium. La espora es
una condensacin de citoplasma, en una
zona casi sin agua rodeada me muchas
cortezas que la protegen, y eso es lo que
constituye la endoespora.

Las caractersticas de una

endospora.
Puede
durar
muchsimos aos en un
estado
de
dormancia,
hipometabolia,
vida
al
mnimo. Tiene muy poca
agua, y tiene resistencia a
rayos UV y a otro tipo de
radiacin, y a agentes
qumicos y calor. Es una
estructura muy resistente.
Una
clula
en
estado
vegetativo, para matarla,
80C por 5-10 minutos, pero
una
espora
como
C.
Botulinum necesitamos de
330 minutos a 100C para poder matarla. Un poco menos de tiempo para la espora C.
tetani o la C. perfrigens. Entonces por esto una clula vegetativa, cuando hervimos una
leche recin obtenida en el campo, es la nica en morir, matamos la mayoria de las
cosas, pero con ese hervor solo matamos las bacterias vegetativas, pero no las esporas ni
de bacterias ni de hongos (si hubieran no las matan).
Para matar las esporas tenemos los mtodos
de esterilizacin: el calor hmedo de 121C
por 15 minutos que se logra dentro del
autoclave, y calor seco que se logra en una
estufa (como lo que ven cuando van al
odontlogo). El material quirrgico se
esteriliza con calor seco y los medios de
cultivo en el autoclave. El xido de etileno
es un mtodo esterilizante usado mucho en
industria.
Esto es un control que se pone dentro del
autoclave, Geobacilius stearotermophilus
son esporas de bacilos que se ponen dentro
del autoclave junto con las cosas a
esterilizar, luego las cultivo y si al da
siguiente se pone amarillo es porque no
hubo esterilizacin, la esporas estn vivas,
metabolizaron algo y cambiaron el color
del medio. Cuando yo me pongo etanol en
las manos estoy solo bajando la carga
microbiana, pero no esterilizando (los
mtodos esterilizantes son solo estos que
estn aqu). El alcohol mata las clulas
vegetativas, pero no las esporas que cuando encuentran nuevamente condiciones
benvolas ellas germinan, se desprenden de las cubiertas y vuelven a ser clulas
vegetativas y vivir normalmente (se puede inducir en el laboratorio con altas
temperaturas, radiacin ionizante, bajo pH o tratndolas con sulfhdrilo libre).

La pared celular es una

estructura rgida compuesta
por
peptidoglicanos,
compuestos exclusivos de
bacterias, no existe en
eucariontes. Rodea a la
bacteria por fuera de la
membrana, manteniendo su
forma y evitando la lisis por
cambios osmticos. Como les
dije la bacteria tiene dentro
sales, solutos, y si hay agua
afuera por difusin tiende a
diluir lo que est ms
concentrado,
pudiendo
reventar a la bacteria, cosa que no pasa por la presencia de pared celular. Por esto puedo
poner una bacteria en agua pura y no le pasa nada, pero si pongo una clula heptica
revienta inmediatamente por no tener pared (necesita un ambiente isotnico). Dentro de
la bacteria hay una presin como la de un neumtico de auto por los solutos que tiene.
La estructura de la pared permite diferenciarlos en Gram positivos y Gram negativos,
pero tambin hay excepciones como las myccobacterias que tienen una pared celular
diferente o los myccoplasmas que no tienen pared.
As se estructura una Gram positiva, que tiene la membrana y una capa muy gruesa de
peptidoglicanos. Los Gram negativos tienen la membrana y una fina capa de
peptidoglicanos y una membrana externa. Los myccobacterias tienen una membrana,
una pared fina de peptidoglicanos y una membrana externa muy distinta a esta (nada
que ver con la Gram negativa).
As se ve un esquema de la pared de un
Gram positivo, que tienen una capa de
peptidoglicano muy gruesa fuera de su
membrana plasmtica; y tienen cosas muy
particulares que no estn en los Gram
negativos, por ejemplo los cidos teicoicos,
que son alcoholes de glicerol o ribitol, y
fosfato unido al peptidoglicano que
permite diferenciar a las bacterias. Cuando
esa molcula de cido teicoico esta unida a
los lpidos de la membrana se llama cidos
lipoteitoicos, esta estructura es exclusiva
de las bacterias. El peptidoglicano, el cido teicoico son lo que se conocen como
PAMPs (patogen asociated molecular patrons), son las seales de alerta para cuando
algo de esto se mete dentro de nosotros, son cosas tpicas de bacterias que dispara toda
la cascada de citoquinas, reacciones inflamatorias.
Esto es una pared de Gram negativo. Ac est la membrana y por fuera la pared de
peptidoglicano finita (de solo una o dos capas). Esta est separada de la membrana y
entre ellas se forma el espacio periplsmico, donde van a parar muchas de las enzimas
de las Gram negativas, por ejemplo las beta-lactamasas que son las responsables de la

resistencia a antibiticos. La particularidad que tienen las Gram negativas es que tienen
membrana externa por
fuera del peptidoglicano,
que tiene una estructura
asimtrica, pero tambin
es una bicapa, los lpidos
que componen esta bicapa
son distintos que los de
esta, y tienen insertadas
unas
protenas
de
membrana
llamadas
porinas por la que entran
los nutrientes, antibiticos
y muchos compuestos. La
mitad interna de la
membrana externa est
formada por fosfolpidos
igual a los de la membrana interna; la monocapa externa est formada por un compuesto
lipdico especial llamado LPS.
LPS es el lipopolisacarido, con una
estructura compleja (de todo un
poco). Tiene un lpido A, un Core y
un antgeno O. El lpido A son dos
glucosaminas unidas que tienen
cadenas de cidos grasos normales
(como los de los fosfolpidos); a
una de las molculas de
glicosamina
est
unido
el
cetodesoxioctonato (KDO) que
tiene azucares convencionales
(glucosa, galactosa), esto forma el
core del polisacrido; y unidos al
KDO hay cadenas de azucares no convencionales (rha, abe, man), y esto es el
lipopolisacarido bacteriano.
El lpido A (tambin llamado endotoxina) es el responsable de la fiebre, el shock txico,
la coagulacin intravascular diseminada; por lo tanto una persona tiene sepsis por una
bacteria Gram negativa; dar antibiticos es muy complicado, ya que pueden hacer lisis
en la bacteria liberando la endotoxina
(se libera solo cuando la bacteria
muere). No es inmunognico, pero es
pirognico.
El antgeno O, por otra parte es muy
antignico y es muy til para
diferenciar las bacterias, por ejemplo la
Salmonella tiene como 2000 tipos
distintos
dependiendo
de
las
combinaciones de azucares, y en base a
eso se clasifican.

El LPS tambin es un PAMPs, exclusivo de las bacterias. Los peptidoglicanos son

monmeros de N-acetil-glucosamina y N-acetil-murmico. As es como est formada la
molcula de peptidoglicano, al NAM se le pega un tetrapptido, que se forma por
alanina, glutamina, lisina, alanina; en Gram positivo tiene esa secuencia, y en Gram
negativo tiene la misma, pero en lugar de lisina tiene un cido meso-diaminopimelico
(solo un carbono lo diferencia de la lisina). Entonces esto es el monmero de
peptidoglicano que despus se va a ensamblar para formar la pared.
Ac est el monmero, glucosamina,
murmico con su tetrapptido, se une al de
al lado en cadenas, y las cadenas se unen
entre ellas por un puente que une la Dalanina terminal y el DAP de la cadena de
al lado, ese entrecruzamiento le da la
fortaleza a la cadena de al lado. Este
puente son de 5 glicinas (este ejemplo es
del Stafilo aurius), y todo esto lo hacen
distintas enzimas, estas se llaman
transpeptidasas, y esta la transglicosilasa.
Los
antibiticos
engaan
a
la
transglicosilasa, porque los antibiticos se unen a la enzima, inutilizndola para formar
pared, y al menor cambio osmtico muere.
As es como se ve un Gram positivo
(violeta) (para ms informacin este es un
estafilococco aureus), y as es como se ve
un Gram negativo (rojo). La tincin de
Gram se hace en el laboratorio clnico
cuando llega por ejemplo una muestra de
un absceso infectado, lo primero que pide
el mdico es tincin de Gram por ser
barata y muy rpida (en 10 min est lista);
se tratan distinto con antibiticos los Gran
negativos respecto a los Gram positivos.
Lo primero que se hace es agarrar un
puado de bacterias, fijarlas sobre un
portaobjeto de vidrio, se le echa cristal
violeta que entra en las bacterias, y se
lava el exceso. Despus agregamos
lugol, yodo, que es un fijador del cristal
violeta. Luego la decoloramos con
alcohol-acetona; en la decoloracin
como los Gram positivos tienen una
pared muy gruesa, el complejo que se
form lugol-cristal violeta no puede
salir, pero en las gram negativas escapa
y se decoloran. La Gram negativa
decolora porque la pared es muy delgadita y el alcohol-acetona forma hoyos en la
membrana por donde se escapa el complejo lugol-cristal. Despus le pongo safranina

(rojo) para poder ver las que decoloraron; el resultado es que las Gram negativas se ven
rojas, y las Gram positivas violeta. Esto habla sobre la estructura de la pared, permite
ver la forma de la bacteria, y su disposicin; por ejemplo en la diapo anterior es un
estafilococco (en racimo, como montoncitos de bacterias), el estreptococo son cadenas
largas, el estreptoneumonia es un diplococo, dos pegaditos y que en agar sangre se ven
de color muy particular.

Las myccobacterias, que tienen una

pared diferente a las de Gram
positivo/negativo. Las diferencia la
presencia de cidos miclicos, que son
lpidos complejos; los lpidos normales,
los fosfolpidos que forman la
membrana de las clulas tienen como
20 carbonos, mientras que estos tienen
como 80-90 carbonos, por eso se les
dice complejos. El lpido externo est
formado por el cido miclico, y tienen
una capa fina de peptidoglicano. Esto
cambia las propiedades tintoriales, por
ejemplo la resistencia a la decoloracin
cido-alcohol, si tio las myccobacterias con fucsina bsica quedan fucsia, y despus les
doy calor y las trato de decolorar con cido-alcohol, fallo en el intento; si lo hago con
cualquier otra bacteria si decoloran, porque se hacen hoyos en la membrana. Las
micobacterias se ven fucsia, si hago tincin de Ziehl Neelsen (que es para verlas) y veo
esto, es porque hay micobacterias positivas. Tambin son muy resistentes a la
desecacin y a otros factores ambientales.
No solamente tienen cidos miclicos,
tambin tienen lpidos micsidos, que
son lpidos superficiales que dan
patogenicidad. Estn los arabigo
galactanos, que unen los cidos
miclicos con los peptidoglicanos; y el
lpido Lipoarabinomanano (LAM),
tambin muy patognico ya que
estimula la liberacin de citoquinas.
Todos estos son PAMPs.

El micobacterio ms
tpico
es
el
Mycobacterium
tuberculosis, que forma
parte
del
complejo
tuberculosis.
El
diagnstico
de
tuberculosis, se hace junto
a
Mycobacterium
tuberculosis, para todas
estas, que forman el
Mycobacterium
tuberculosis
complex:
Bovis, Africanum, Caprae,
Microtii y Pinnipedii.
Todos ellos son patgenos
para el ser humano, que a pesar de los antibiticos siguen teniendo una prevalencia alta,
con alta mortalidad. Tienen alto contenido de lpidos de alto peso molecular. Y tienen
muchos genes involucrados en la sntesis de cidos miclicos, ya que son difciles de
sintetizar, por eso que su tiempo de generacin es de 15-20 horas (Coli tiene 20
minutos); para obtener una colonia tengo que esperar de 3 a 8 semanas, esto es porque
se demora mucho en crecer por la capa de lpidos complejos, que adems limita mucho
el paso de nutrientes. As se ve una basiloscopa positiva, es una expectoracin teida
con la tincin de Ziehl Neelsen, si aparece esto es porque hay bacilos cido-alcohol
resistentes muy sugerentes de tuberculosis. As se ve una colonia de Mycobacterium
tuberculosis que crece en medio slido llamado Lowenstein Jensen, y este es un medio
especial que se hace con clara de huevo y cosas especiales.
Estas son las otras bacterias que no
encajan en el esquema de Gram
positivo/negativo. Estas no tienen
pared, son las micoplasmas, son
patgenos
humanos
muy
conocidos;
el
micoplasma
neumona, causante de neumona,
etc. Su particularidad es que son
pequeitas, no tienen pared y por lo
tanto son resistentes a betalactmicos (ya que estos actan
contra las que tienen pared). Tiene
una membrana celular de tres
capas, y con esterol y colesterol que
roban del hospedero y clulas que colonizan. Son bacterias muy pequeas, en
comparacin, este es el estafiloaurius, y as sera el micoplasma. Son fastidiosas porque
tener este tamao les cuesta caro, les falta un montn de maquinaria para sintetizar sus
propias molculas, hay que darle todo eso en el medio de cultivo.

Las estructuras externas

que pueden tener las
bacterias son varias. Est
la cpsula de cido
hialurnico; el biofilm, que
es el glicocalix donde se
meten las bacterias. Los
flagelos, las fimbrias, el
pili sexual.
Les quiero mostrar algo de
la cpsula porque justo
trabaje en esto. Algunas
cepas de Streptococcus
Pyogenes producen una
cpsula
de
cido
hialurnico. La cpsula la rodea y tapa todos sus determinantes antignicos, tapa el
peptidoglicano, tapa el cido lipoteitoico para que no la vean. El cido hialurnico es lo
que tenemos en la piel, por eso cuando las clulas inmunitarias lo ven no reaccionan. La
cpsula encubre los determinantes antignicos haciendo que pase desapercibida.

Las cepas encapsuladas estn asociadas a bacterias invasoras. Lo que nosotros hicimos
fue analizar 110 cepas aisladas de sujetos distintos que tenan faringitis o infecciones en
regiones ms ???. Digo invasoras porque las cepas fueron sacadas de lquido sinovial,
biopsias, sangre, etc. Entonces vimos su genotipo y fenotipo, y vimos que 3/110 tenan
cpsula. As se ve una colonia de un Pyogenes capsulado. Lo que vimos al agrupar las
cepas invasoras y no invasoras, fue que el contenido de cido hialurnico era mayor en
las invasoras (es decir, contribuye a la invasividad). Lo que hicimos fue secuenciar un
represor de la sntesis de cpsulas; la cpsula est normalmente reprimida, y 2/3
capsuladas tenan mutado el represor, como no tenan represor sintetizaban cpsula
como locas.

El flagelo bacteriano tambin es una

estructura externa, que tiene una
estructura muy compleja formada por
muchas partes insertadas tanto en la
membrana externa como interna.
Tiene su propio motor, una protena
que sintetiza ATP para mover el flagelo. El flagelo puede ser de muchos tipos (ver
diapo).
El flagelo ayuda a la bacteria a invadir. Ac vemos a la Salmonella invadiendo la capa
de mucus que hay por encima de la mucosa, y una vez que lleg secreta factores de
virulencia que lo que puede hacer es internarse dentro de los entericitos, y de ah pasar
al medio interno y producir toda la variedad de cuadros infecciosos.

Este es un resumen de la estructura.