Objetivos Generales

Conocer los principios generales de preparacin de soluciones.

Objetivos Especficos

Aplicar los cuidados particulares que se deben tener al preparar las

soluciones para biologa molecular.
Adquirir la destreza en los clculos para la preparacin de soluciones
cuyas concentraciones estn expresadas en unidades fsicas y qumicas.

Mtodos y Materiales
Instrumentos

Probetas
Vasos qumicos
Matraces
Erlenmeyer
Pipetas
Balanza
Ph- metro
Cinta adhesiva
Esptulas

Reactivos

Agarosa
cido clorhdrico
cido actico
Cloruro de sodio
Cloruro de magnesio
Hidrxido de sodio
Glucosa
Acetato de potasio
cido brico

Procedimiento:
Buscar los pesos moleculares de los qumicos del listado de abajo.

Preparar 100 ml de TBE 0.1X

a partir de una solucin
madre 5X.
C1V1 = C2 V2

(5X)(v1) = (0.1X)(100 ml)

V1=

(0.1 x)(100 ml)

5x

Preparar 20 ml de MgCl2 1M

M=

1 m/L = mol/ 0.02L

m=

Preparar 20 ml de NaCl 5M.

M=

mol
v

5 m/L = mol/ 0.02L

5 mol
1 L (0.02 L)= 0.1mol

m=

58.4 g
0.1mol 1 mol de NaCl

= 5.84

1 mol/L = mol/ 0.05L

m=

1 mol
1 L (0.05 L)= 0.05

mol

7.878 g

157.56 g

0.05mol 1 mol de TrisHCl

Preparar 50 ml de EDTA
0.1M, Ph 8.

mol
v

M=

0.1 m/L = mol/ 0.05L

m=

0.1mol
(0.05 L)=
1L

0.005mol

292.24 g

0.005mol 1 mol de EDTA

1.46 g

mol
v

M=

95.211 g

0.02mol 1 mol de MgCl2

Preparar 50 ml de Tris-HCl
1M, Ph 7.5.

1 mol
1 L (0.02 L)=

1.90 g

mol
v

0.02mol

V1= 2.0 ml

Preparar 40 ml de agarosa al
0.7% en TBE 1X
C1V1 = C2 V2
(1x)(V1) = ()(40 ml)

Preparar 50 ml de NaOH 2N
Preparar 50 ml de Acetato de
potasio

Preparar 10 ml de glucosa 1M

M=

1 m/L = mol/ 0.01L

m=

mol
v
1 mol
1 L (0.01 L)=

0.01mol

180.16 g

mol
v

M=

1.80 g

3 m/L = mol/ 0.02L

Preparar 20 ml de SDS 1% a
partir de una solucin madre
10%.
Preparar 25 ml de HCl 2 N
Preparar 20 ml de Acetato de
sodio 3M Ph 5.2.

m=

0.01mol 1 mol de glucosa

3 mol
1 L (0.02 L)=

0.06mol

82.03 g

0.06mol 1 mol de NaCl

4.92 g

Preguntas

1. Cul es la diferencia entre molaridad, molalidad, porcentaje y

normalidad de una solucin?
Molaridad: Concentracin de un soluto en una disolucin, que se
encuentra en un volumen dado expresado en moles por litro.
Siendo el volumen dependiente de la temperatura, Sus
disoluciones se preparan en un matraz aforado.

Molalidad: (m) es el nmero de moles de soluto que contiene

un kilogramo de disolvente. se puede hacer en un vaso de
precipitados y pesando con una balanza analtica, Depende de la
masa

Porcentaje: Las unidades fsicas de concentracin estn

expresadas en funcin del peso y del volumen, en forma
porcentual, y son las siguientes: a) Tanto por ciento
peso/peso %P/P = (cantidad de gramos de soluto) / (100 gramos
de solucin) b) Tanto por ciento volumen/volumen %V/V =
(cantidad de cc de soluto) / (100 cc de solucin) c) Tanto por
ciento peso/volumen % P/V =(cantidad de gr de soluto)/ (100 cc
de solucin)

Normalidad: s el nmero de peso-frmula-gramo o Masa

Molecular Relativa por litro de disolucin.

2. De qu depende la concentracin de una solucin?

Proporcin o relacin que hay entre la cantidad de soluto y la cantidad
de disolvente, donde el soluto es la sustancia que se disuelve, el
disolvente es la sustancia que disuelve al soluto, es decir de la cual
depende la concentracin de la solucin.

3. Qu cuidados se deben tener en la preparacin de las soluciones para

biologa molecular?
Normas de Seguridad:
Siempre utilizar gabachas.
Cuando se trabaja con cidos, alcalis o sustancias que
desprenden vapor, utilizar guantes y anteojos.
No oler los reactivos en forma directa, hacerlo usando la mano.

No saborear sustancia alguna.

No frotarse los ojos con las manos contaminadas.

No pipetear directamente con la boca, especialmente sustancias

txicas.
No comer, beber ni fumar en el laboratorio.
No mezclar reactivos sin antes conocer sus propiedades

4. Qu es un amortiguador (Buffer)?
5. Haga el esquema de cmo preparar una dilucin seriada decimal, 1/10,
1/100, 1/1000 y 1/10000 a partir de una solucin madre de 50 ml,
manteniendo un volumen total de 10 ml.
6. Cmo usted preparara 1 ml de una solucin 50 mM glucosa, 10 mM
EDTA, 25mM tris. A partir de una soluciones patrn de 100mM de
glucosa, 0.5M EDTA y 1Mm Tris?

Conclusiones

Infografa