RESUMEN MICROSCOPIOS

Microscopio

Fuente de
iluminacin
Luz visible

Lentes

Aumentos

Tratamiento a la muestra

Caractersticas

1000-1500 X

Lmite de
resolucin
200 nm

Biconvexas de
vidrio

Tinciones (simples diferenciales)

Biconvexas de
vidrio

1000-1500 X

200 nm

Lmpara mercurio
luz ultravioleta
(200 nm)

Cuarzo

1000-1500 X

100 nm

Flourescencia Lmpara mercurio

con luz
ultravioleta (200
nm)

Cuarzo

1000-1500 X

25-100 nm

Ninguno.
Para la observacin de clulas vivas
que estn por debajo de los lmites
de resolucin del microscopio
campo brillante. Las clulas se ven
con pocos detalles estructurales.
Uso preferente clulas mviles como
Treponema pallidum
Ninguno
La imagen presenta fluorescencia
propia al hacer incidir la luz UV en
el objeto (autofluorescencia de pigmentos como las clorofilas).
Debido la menor de la luz U.V. se
aumenta el lmite de resolucin.
Las preparaciones se tratan con
compuestos fluorescentes
(fluorocromo como fluorescena
rodamina) que se excitan con la
radiacin y emiten una luz de > .

El campo del microscopio est

intensamente iluminado. Los objetos
se observan oscuros.
Condensador especial de campo
oscuro que ilumina la muestra
indirectamente.
El campo visual es oscuro y la
muestra se ve con brillo.

Campo
oscuro

Luz visible (550

nm)
Condensador de
campo oscuro

Ultravioleta

Contrate de
fases

Biconvexas de
vidrio

1000-1500 X

200 nm

Campo claro

Luz visible (550

nm)

Preparaciones delgadas de clulas

vivas sin teir.
Produce un desplazamiento artificial
de la fase de las ondas no
difractadas del objeto y un efecto de
interferencia que genera diferencias
en el contraste de las estructuras.

El ocular posee un filtro de UV para

observar la imagen directamente.
La imagen es proyectada en una
pantalla o escner electrnico.

Filtro de excitacin.
Filtro de barrera.
Filtros de luz U.V. para la
observacin directa
Dispositivos para ver en una
pantalla o un escner.
Diafragma anular (abajo del
condensador).
Objetivo con una placa de fase
o difraccin que produce un
cambio de fase de de .

Microscopio

Fuente de
iluminacin
Lser
Argn 488 y 514
nm
Kriptn 568 y 647
nm
Lmpara de UV

Lentes

Aumentos

Biconvexas de
vidrio

1000-1500 X

Electrnico
de
transmisin
(TEM)

Lmpara de
tungsteno (genera
un haz de
electrnes)
velocidad
voltaje
calor
vaco

Electroimanes
(varios
sistemas de
placas
positivas
ctodos)

300 000
1 500 000 X

20 1 nm

Electrnico
de barrido
(SEM)

Lmpara de
tungsteno (genera
un haz de
electrnes)
velocidad
voltaje
calor
vaco

Electroimanes
(condensadora
y un
proyector)

20 100 000
X hasta
30000 X

3 25 nm

Confocal

Lmite de
resolucin
2048 pixeles
Se aumenta
notablemente
la resolucin
en las
muestras
fluorescentes

Tratamiento a la muestra

Caractersticas

Se puede observar directamente

tejidos intactos vivos, preparaciones
histolgicas gruesas, sin necesidad de
hacer cortes delgados.
Para la observacin de biopelculas.
Permite obtener la imagen de un solo
punto de la muestra, o la imagen
tridimensional completa, dada por la
reconstruccin de cada uno de los
puntos que la conforman.
Preparaciones de cortes ultra finos
(20 a 60 nm), fijados (tetrxido de
osmio glutaraldehdo),
deshidratados (alcohol-acetona),
recubiertos y teidos con tcnicas
especiales (acetato de uranilio, citrato
de plomo) e inmersos en acrlicos o
resinas epoxi para posteriormente
cortarlos en un ultramicrotomo. La
imagen revela la ultra estructura
celular.

Espejo dicroico
Ranura detectora
Permite imgenes directas en
tiempo real (in vivo) y permite
estudios ecolgicos in situ.
Permite el estudio de muestras
utilizando fluorocromos.

Materiales deshidratados clulas

muertas preparadas: fijar, deshidratar
(alcohol, CO2, temperatura y presin)
y cubrir con oro.
La muestra es barrida con los
electrones que son desviados como
electrones secundarios, recolectados
y enfocados sobre una pantalla.
Revela la topologa del espcimen.

Sistema de circulacin de agua fra

y vaco.
Un centilador que multiplica los e -.
Un sistema de impresin en una
placa fotogrfica.
Un sistema digitalizador que captura
la imagen y permite darle color
(2048 x 2048 pxeles).
Imagen plana con gran profundidad
de campo (claro a los e - cerca
denso e - lejos) tridimensional.

Sistema de circulacin de agua fra

para controlar la temperatura y
vaco.
Portaobjetos: pequeas grillas de
cobre, colodin, etc.
Una pantalla fluorescente donde se
proyecta la imagen.
Un sistema de impresin en una
placa fotogrfica.
Sistema digitalizado que captura la
imagen y permite darle color.

Microscopio
Efecto Tnel
STM
(Scanning
Tunnelling
Microscope)

Fuerza
Atmica
(ATM)

Fuente de
iluminacin
Corriente elctrica
a travs de una
punta conductora
afilada de
Wolframio que
recorre la muestra
dando un efecto
cuntico

Lentes

Aumentos

Lmite de
resolucin

Tratamiento a la muestra

Caractersticas

Efecto cuntico:
posibilidad que
tienen los ede atravesar
una barrera de
potencial
superior a su
energa.

106 108 X

Intensidad de
tnel permite
realizar la
topografa de
las imgenes
con resolucin
atmica: <0.1
- 1 nm.

Imgenes tridimensionales de
la red de tomos o molculas
que componen la superficie de
una muestra con una
resolucin en nanmetros.
Cada tomo se puede distinguir
de otro. til para
nanotecnologas y nanociencia.

Corriente
elctrica a travs
de una punta
que genera un
efecto electromagntico con
los tomos de la
muestra.

Una punta o
sonda de
barrido afilada
de nanotubos
de carbono,
que recorre la
muestra.

106 108 X

Atmica <0.1
- 1 nm.

Pueden observarse muestras

biolgicas debido a que se
pueden funciona con muestras
no conductoras lo que no es
posible con otros microscopios
de esta resolucin.
til para nanotecnologas y
biotecnologa.

Una sonda de barrio recorre la

superficie de una muestra, atrapa los
electrones que escapan al efecto tnel
y genera una imagen atmica ultra
detallada.
Una computadora registra la
trayectoria de la punta y crea una
representacin tridimensional de la
preparacin.
Una sonda de barrido
diodo lser
micro palanca
fotodiodo
tubo piazo elctrico
sensores de flexin

DRA. JANET JAN ROBLERO