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COLOMBIANA
NTC
4508
1998-10-28
GESTIN AMBIENTAL.
CALIDAD DEL SUELO. DETERMINACIN DE LOS
EFECTOS DE CONTAMINANTES SOBRE LA
FLORA DEL SUELO. EFECTOS DE PRODUCTOS
QUMICOS SOBRE LA GERMINACIN Y EL
CRECIMIENTO DE PLANTAS SUPERIORES
E:
ENVIRONMENTAL
MANAGEMENT.
SOIL
QUALITY
DETERMINATION OF THE EFFECT OF POLLUTANTS ON
SOIL FLORA. EFFECT OF CHEMICALS ON THE EMERGENCE
AND GROWTH OF HIGHER
CORRESPONDENCIA:
DESCRIPTORES:
I.C.S.: 13.080.00
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC)
Apartado
14237
Bogot,
D.C.
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normas internacionales, regionales y nacionales.
DIRECCIN DE NORMALIZACIN
NTC 4508
GESTIN AMBIENTAL.
CALIDAD DEL SUELO. DETERMINACIN DE LOS EFECTOS DE
CONTAMINANTES SOBRE LA FLORA DEL SUELO. EFECTOS
DE PRODUCTOS QUMICOS SOBRE LA GERMINACIN Y
EL CRECIMIENTO DE PLANTAS SUPERIORES
INTRODUCCIN
Esta norma describe un mtodo para la evaluacin de contaminacin del suelo a continuacin
de la adicin de productos qumicos o despus de la contaminacin por una agente
desconocido. Antes de evaluar los efectos sobre la germinacin de las plantas de un producto
qumico incorporado en el suelo se requiere informacin sobre la solubilidad en agua y en
disolventes orgnicos y la presin de vapor de la sustancia de ensayo. Preferiblemente, el
laboratorio debe disponer de la frmula molecular, el coeficiente de particin (octanol: agua) y
la estabilidad qumica y biolgica. Todos los parmetros fsicos y biolgicos deben ser
considerados al interpretar los resultados del ensayo.
El ensayo, segn est redactado, evala los efectos en la germinacin y el crecimiento de las
plantas de un producto qumico incorporado en el suelo. En el caso de suelos contaminado, los
productos qumicos individuales son desconocidos y por lo tanto no se puede seleccionar
informacin correcta sobre solubilidad, presin de vapor, y frmula molecular. No se requiere
incorporacin, pero puede ser necesario diluir con suelo de control no contaminado o con arena
antes del ensayo.
1.
OBJETO
Esta norma describe un mtodo que es aplicable para la determinacin de los posibles efectos
txicos de productos qumicos slidos o lquidos, incorporados en el suelo, sobre la
germinacin y las primeras etapas de crecimiento y desarrollo de una diversidad de plantas
terrestres. No da una indicacin del dao resultante del contacto directo de las semillas con el
producto qumico en la fase de vapor o lquida fuera del medio ambiente del suelo.
El mtodo tambin es aplicable para la comparacin de suelos contaminados (con la sustancia
en estudio) es una concentracin conocida y no conocida. En el anexo B se da informacin
sobre como adaptar el mtodo para este propsito.
2.
Las siguientes normas contienen disposiciones que, mediante la referencia dentro de este
texto, constituyen disposiciones de sta. En el momento de su publicacin eran vlidas las
ediciones indicadas. Todas las normas estn sujetas a actualizacin; los participantes,
1
NTC 4508
mediante acuerdos basados en esta norma, deben investigar la posibilidad de aplicar la ltima
versin de las normas mencionadas a continuacin.
NTC 4113-6:1997, Gestin ambiental. Calidad de suelo. Muestreo. Gua para la recoleccin,
manejo y almacenamiento de suelo para la evaluacin de procesos microbianos aerbicos en
el laboratorio.
ISO 10390:1994, Soil Quality. Determination of pH.
3.
DEFINICIONES
UNIDADES
Las concentraciones de las sustancias de ensayo se expresan como miligramos por kilogramo
de suelo seco.
La germinacin se expresa como el porcentaje de plntulas que germinan en comparacin con
los recipientes de control.
Los efectos sobre el crecimiento se expresan como la diferencia en masa de las partes areas
de las plantas, entre las plantas tratadas y las de los recipientes de control.
5.
PRINCIPIO
NTC 4508
6.
6.1
EQUIPO
Los recursos adecuados para efectuar el ensayo incluyen fitotrones, cuartos para crecimiento
de plantas e invernaderos. Los recipientes para la siembra deben ser vasijas de plstico no
poroso o esmaltados con un dimetro superior interno que este entre 85 mm y 95 mm.
6.2
PLANTAS DE ENSAYO
Para el ensayo se debe seleccionar un mnimo de dos especies, incluyendo al menos una
especie de cada una de las dos categoras mostradas en la Tabla 1. La categora 1 son
monocotiledoneas y la categora 2 son bicotiledoneas.
6.3
SUELO
Se puede usar suelo estril o no estril. El suelo con la humedad original se debe pasar a
travs de un tamiz de malla cuadrada de 4 mm a 5 mm, para eliminar los fragmentos gruesos.
El contenido de carbn no debe exceder de 1,5 % (3 % de contenido orgnico). Las partculas
finas (menos de 0,02 mm) no deben exceder del 20 % de la masa seca. El pH (determinado de
acuerdo con la norma ISO 10390) debe estar entre 5 y 7,5. Si el suelo se prepara
especficamente para los propsitos del ensayo y esto implica la adicin de nutrientes, se
deben tomar las precauciones necesarias para asegurar que estos nutrientes no interfieran con
la sustancia de ensayo (por ejemplo dejando un perodo de tiempo suficientemente largo entre
la preparacin del suelo y la realizacin del ensayo).
Nota 1. Se recomienda agregar arena para llevar el contenido de partculas finas u orgnicas de suelos naturales
hasta dentro de los lmites aprobados.
Se puede usar cualquier mtodo que asegure una distribucin uniforme del producto qumico a
travs del suelo, excluyendo el uso de coadyudantes.
En el Anexo A se describen mtodos recomendados para la incorporacin del producto
qumico.
6.5
Nota 2. Se recomienda ensayar una sustancia de referencia para demostrar la uniformidad de las condiciones de
ensayo del laboratorio. La sustancia de referencia recomendada es el tricloroacetato sdico. Se debe efectuar un
ensayo de referencia si se introducen cambios importantes en los procedimientos operativos, por ejemplo cambio de
fitotrn/ habitacin de ensayo/ invernadero; cambio de suelo o cambio de rgimen de riego, etc.
NTC 4508
Tabla 1
Categoras
1
- Centeno o alpiste (nabo)
- Ballico perenne
- Arroz
- Avena comn
- Trigo
- Cebada
- Sorgo comn
(o caa cortada o
Durra blanca o
Omillo)
Especies de ensayo
Secale cereale L.
Lolium perenne L.
Oryza sativa L.
Avena sativa L.
Triticum vulgare L.
Hordeum vulgare L.
Sorghum bicolor*
(L) Moench
- Maz amarillo
Zea Mayz L.
2
- Mostaza blanca
- Colza o nabo
Synasis alba
Brassica napus (l)
- Rbano, silvestre
Raphanus sativus L.
Brassica rapa ssp. (DC)
Metzg
Brassica campetris L.
var. Chinensis
Trifolium SP
- Repollo chino
- Trebol o carretn
- Lechuga
- Chisgo
- Tomate
Lactuca sativa L.
Lepidium sativum L.
Lycopersicum Lycopersicum
esculentum Miller
- Frijo
Phaseolus SP
7.
MTODOS
7.1
DISEO EXPERIMENTAL
Los recipientes que contengan el suelo de control y cada concentracin del producto qumico
se deben replicar cuatro veces.
7.1.1 Ensayo preliminar
El ensayo preliminar se usa para encontrar el intervalo de concentraciones que afectan la
calidad del suelo. El producto qumico se incorpora en el suelo de acuerdo con el anexo A en
concentraciones de 0 (control), 1 mg/Kg, 10 mg/kg, 100 mg/kg, 1 000 mg/kg, del suelo secado
en horno.
7.1.2 Ensayo definitivo
Las concentraciones se deben seleccionar en una serie geomtrica (preferiblemente con un
factor que no exceda de dos) para dar una estimacin de la mnima concentracin que inducen
la germinacin y crecimiento reducidos (LOEC). No es necesario ensayar las sustancias a
concentraciones mayores de 1 000 mg/kg de suelo secado en horno.
NTC 4508
Nota 3. Una serie geomtrica es una serie de cantidades en la cual cada trmino se obtiene multiplicando el trmino
precedente por algn factor constante denominado razn comn por ejemplo 1, 2, 4, 8,16.
7.2
CONDICIONES DE CRECIMIENTO
La temperatura, la humedad y las condiciones de iluminacin deben ser tales que sean adecuadas
para mantener el crecimiento "normal de todas las especies seleccionadas durante al menos el
tiempo del perodo de ensayo. Despus de la evaluacin de la germinacin dentro de cada
recipiente, se entresacan las plntulas de modo que se obtenga un total de 5 especmenes
representativos espaciados uniformemente en los recipientes. Se termina el ensayo no antes de 14 d
ni despus de 21 d una vez que ha germinado el 50 % de las plntulas de control.
Nota:
4)
a)
b)
c)
Iluminacin: 16 h/da
Intensidad luminosa mnima de 7000lx en la longitud de onda adecuada para la fotosntesis. Por lo
tanto, en un invernadero, puede ser necesaria iluminacin adicional durante perodos de baja
intensidad de luz natural.
5)
d)
Contenido de humedad del suelo: se necesita ajuste diario del contenido de humedad el suelo para
mantener una capacidad porcentual predeterminada de contencin de agua por ejemplo 80 % para
Avena sativa y 60 % para Brassica rapa. Se puede hacer una verificacin suficiente pesando
varios recipientes seleccionados al azar diariamente se deben evitar las condiciones anaerobias y
anotar en el informe de ensayo.
e)
f)
Cuando se ensayen sustancias voltiles, se debe evitar la interaccin entre lotes usando fitotrones
separados o mediante separacin especializada. Si esto no es posible en el informe de ensayo se
debe incluir una nota para este efecto.
Se puede efectuar un ensayo lmite en las condiciones de este ensayo con el fin de demostrar que el LOEC
est ms all de la concentracin lmite.
NTC 4508
CRITERIOS DE VALIDEZ
La germinacin debe ser suficiente para suministrar 5 plntulas saludables por recipiente en el
control.
8.
EVALUACIN DE RESULTADOS
8.1
Los datos se presentan en forma tabular, registrando el nmero de plantas que germinan por
replicacin y la masa total de retoos de plntulas por replicacin en la cosecha; bien sea la
masa fresca, pesada inmediatamente despus de cortar los retoos sobre las superficies del
suelo o la masa seca despus de secar en hornos de 70 C a 80 C durante 16 h.
Nota 6. Para minimizar el error de ensayo, es preferible usar masa seca.
8.2
CLCULOS
8.3
EXPRESIN DE RESULTADOS
a)
b)
en
Nota 8. Siempre que sea posible, tambin conviene representar grficamente los datos de la respuesta de
crecimiento.
9.
INFORME DE ENSAYO
a)
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b)
c)
Temperatura
Humedad
Condiciones de iluminacin
d)
e)
f)
g)
h)
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i)
j)
k)
l)
NTC 4508
Anexo A (Informativo)
DETALLES DE MTODOS PARA LA INCORPORACIN
A.1
Se disuelve el producto qumico en agua y se mezcla con arena seca. Para esto es til un
tambor rotatorio. Se mezclan la arena tratada con suelo. Si se requieren grandes cantidades
de agua, es decir, aquellas que excedan la capacidad de retencin de agua requerida del
suelo, la arena puede ser secada en el tambor rotatorio, con una corriente de aire, antes de
mezclar con el suelo.
A.3
QUMICOS
QUE
SEAN
El suelo seco suficiente para todos los replicados se coloca en un dispositivo de mezcla
adecuado (por ejemplo mezclador de extremo sobre extremo) y se agrega la cantidad
requerida de producto qumico slido. A continuacin del perodo de mezcla, se agrega el
suelo a los recipientes.
A.5
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Se llena un tubo de volumen conocido, cuya base este cerrada por una lmina con papel de
filtro, con el suelo y se tapa el tubo. Se sumerge el tubo en un bao de agua a temperatura
ambiente (con el nivel de agua por debajo de la parte superior del tubo) durante dos horas.
Despus se baja el tubo por debajo del nivel del agua durante una hora adicional. Se coloca el
tubo en una bandeja de arena hmeda de cuarzo finamente molido durante dos horas. Se seca
la muestra y se pesa hasta masa constante a 105 C.
La capacidad de retencin de agua se calcula como un porcentaje de masa seca.
WC =
ms mt md
x 100
md
Donde:
ms
mt
md
es la masa seca del suelo (masa del tubo con suelo seco y papel de filtro
menos la masa conocida del tubo y el papel de filtro).
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NTC 4508
Anexo B (Informativo)
ADAPTACIN DEL MTODO PARA LA COMPARACIN DE SUELOS DE
CONCENTRACIN DE CONTAMINANTE CONOCIDA Y DESCONOCIDA
B.1
PRINCIPIO
SUELO
El suelo sometido a ensayo y el suelo de control de la misma clase textural pero de una calidad
que es conocida como buena se debe preparar y almacenar en las mismas condiciones que el
segundo suelo de control usado como un patrn (en el numeral 6.3 se dan recomendaciones
relacionadas con un patrn adecuado). La equivalencia precisa de las propiedades del suelo no
es crtica para el ensayo: la mayora de las plantas son suficientemente robustas como para no
ser relativamente afectadas por las pequeas diferencias en las propiedades del suelo.
B.3
DISEO EXPERIMENTAL
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Anexo C (Informativo)
BIBLIOGRAFA
ISO 11465:1993, Soil Quality. Determination of Dry Matter and Water Content on a Mass Basis
Gravimetric Method.
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DOCUMENTO DE REFERENCIA
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION. Soil Quality. Determination of
the Effects of Pollutants on Soil Flora. Part 2. Effects of Chemicals on the Emergence and
Growth of Higher Plants. Geneve: ISO, 1995 (ISO 11269-2).
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