Pruebas Qumicas 1 (281) Residuo de Incineracin 163

USP 35

(281) RESIDUO DE
INCINERACIN

Figura 3. Distribucin del volumen de los poros como grfica semilogartmica.

CONTROL DEL DESEMPEO DEL

INSTRUMENTO
Puesto que la tcnica de porosimetra de mercurio es
considerada una prueba comparativa, este captulo no proporciona detalles sobre la misma. Sin embargo, se recomienda analizar un material de comparacin estable de manera rutinaria para monitorear la calibracin y el desempeo
del instrumento . usP35

(271) PRUEBA PARA SUSTANCIAS

FCILMENTE CARBONIZABLES
En las pruebas para sustancias fcilmente carboniz~bles, a
menos que se indique algo diferente, agregar 1~ ca~t1dad
especificada de la sustancia, reducida a polvo ftno SI se encuentra en forma slida, en pequeas porciones al recipiente para comparacin que es de vidrio incoloro resistente
a la accin del cido sulfrico y contiene el volumen especificado de cido sulfrico (ver en Especificaciones de Reactivos
en la seccin Reactivos, Indicadores y Soluciones).
Revolver la mezcla con una varilla de vidrio hasta completar su disolucin, dejar la solucin en reposo durante 15
minutos, a menos que se indique algo diferente, y comparar
el color de la solucin con el del Lquido de Comparacin
especificado (ver Color y ~~romatismo (6_~ 1 )) utiliza_nd? ~n
recipiente para comparac1on, que tamb1en es de v1dno Incoloro y tiene las mismas dimensiones internas y cruzadas, observando los lquidos transversalmente contra un fondo de
porcelana blanca o de vidrio blanco.
Cuando se aplica calor para disolver la sustancia en el
cido sulfrico, mezclar la muestra y el cido en un tubo de
ensayo, calentar segn se. ~ndica y transferir la soluci,n ~1
recipiente para comparaCton para observarla con el L1qu1do
de Comparacin designado (ver Color y Acromatismo (631 )).

Partes de este captulo general han sido armonizadas con

los textos correspondientes de la Farmacopea Europea y de la
Farmacopea japonesa. Las partes que no estn armonizadas
se indican con los smbolos ( .). Los textos armonizados de
estas farmacopeas son por lo tanto intercambiables y, en
lugar de este captulo general de la Farmacopea de fas Estados Unidos, se pueden usar los mtodos de fa Farmacopea
Europea y/o la Farmacopea japonesa para demostrar el cumplimiento con los requisitos. Estas farmacopeas se han comprometido a no realizar ningn cambio unilateral a este captulo armonizado.
La prueba de Residuo de Incineracin/Cenizas Sulfatadas
emplea un procedimiento para medir la cantidad de sustancia residual no volatilizada de una muestra cuando sta se
incinera en presencia de cido sulfrico conforme al procedimiento que se describe a continuacin. Generalmente esta
prueba se emplea para determinar el contenido de impurezas inorgnicas en una sustancia orgnica.
Procedimiento-Incinerar un crisol adecuado (por ejemplo de slice, platino, cuarzo o porcelana) a 600 50 durante 30 minutos, enfriar el crisol en un desecador (gel de
slice u otro desecante adecuado) y pesarlo con exactitud.
Pesar con exactitud 1 a 2 g de la sustancia o. la cantidad
que se especifica en la monografa individual, en el crisol.
Humedecer la muestra con una pequea cantidad (generalmente 1 mL) de cido sulfrico y luego calentar suavemente a una temperatura tan baja como sea posible hasta
que la sustancia se carbonice totalmente. Enfriar; y lue~o ,
a menos que se indique algo diferente en la monograf1a
individual,. humedecer el residuo con una pequea cantidad (generalmente 1 mL) de cido sulfrico; calentar suavemente hasta que no se generen humos blancos e incinerar a
600 50 , a menos que se especifique otra temperatura
en la mono~rafa individual,. hasta que el residuo est completamente tncinerado. Asegurarse, durante todo el procedimiento, de que no se produzcan llamas en ningn momento. Enfriar el crisol en un desecador (gel de slice u otro
desecante adecuado), pesar con exactitud y calcular el porcentaje del residuo.
A menos que se especifique algo diferente, si la cantidad
del residuo as obtenido excede el lmite especificado en la
monografa individual, humedecer nuevamente con cido
sulfrico, calentar e incinerar como se indic anteriormente,
usando un perodo de incineracin de 30 minutos, hasta
que dos pesadas consecutivas del residuo no difieran en ms
de 0,5 mg o hasta que el porcentaje del residuo cumpla con
el lmite establecido en la monografa individual.
Realizar la incineracin en una campana bien ventilada,
pero protegida de las corrientes de aire y a la menor temperatura posible para lograr la combustin completa del carbn. Puede usarse una mufla, si se desea, cuyo uso para la
incineracin final se recomienda a 600 50.
La mufla se puede calibrar empleando un termmetro
digital adecuado y una sonda termopar de trabajo calibrada
contra un termopar estndar rastreable al Instituto Nacional
de Normas y Tecnologa (NIST, por sus siglas en ingls).
Verificar la exactitud de los circuitos de medicin y control
de la mufla mediante la comprobacin de la temperatura
fijada para el uso previsto en distintas posiciones dentro de
la mufla. Seleccionar las posiciones que reflejen el mtodo
de uso eventual con respecto a la ubicacin de la muestra
en anlisis. La tolerancia es de 25 en cada posicin medida .

164 (291) Selenio

1 Pruebas Qumicas

(291) SELENIO
Solucin Madre-Disolver 40,0 mg de selenio metlico
en 100 ml de cido ntrico diluido (1 en 2) en un matraz
volumtrico de 1000 ml, calentar moderadamente en un
bao de vapor, si fuera necesario para completar la disolucin, agregar agua a volumen y mezclar. Pipetear 5 ml de
esta solucin y transferir a un matraz volumtrico de 200
ml, agregar agua a volumen y mezclar. Cada ml de la solucin resultante contiene la cantidad equivalente a 1 .1g de
selenio (Se).
Solucin de Diaminonaftaleno-Disolver 1 00 mg de
2,3-diaminonaftaleno y 500 mg de clorhidrato de hidroxilamina en cido clorhdrico O, 1 N para obtener 100 m l. Preparar esta solucin el mismo da de su uso.
Solucin Estndar-Pipetear 6 ml de Solucin Estndar y
transferir a un vaso de precipitados de 150 ml, y agregar
25 ml de cido ntrico diluido (1 en 30) y 25 ml de agua.
Solucin de Prueba-La combustin completa del material de prueba es un factor importante para realizar la
prueba. Para los compuestos que se queman mal y producen holln, la adicin de xido de magnesio por lo general
da como resultado una combustin ms minuciosa y reduce
la formacin de holln. Cuando se haya detectado la necesidad de agre~ar xido de magnesio, esta se especificar en
la monograf1a individual. Utilizando un matraz de combustin de 1 000 ml y empleando 25 ml de cido ntrico diluido (1 en 30) como lquido absorbente, proceder segn se
indica en Combustin en Matraz con Oxgeno (471 ), empleando 1 00 mg a 200 mg de muestra de prueba, a menos
que se indique algo diferente en la monografa individual. Al
finalizar la combustin, colocar algunos ml de agua en el
matraz, aflojar el tapn, luego enjuagar el tapn, el portamuestras y las paredes del matraz con aproximadamente 1 O
ml de agua. Transferir la solucin a un vaso de precipitados
de 150 ml con la ayuda de aproximadamente 20 ml de
agua y calentar moderadamente hasta temperatura de ebullicin. Calentar a ebullicin durante 1 O minutos y dejar que
se enfre a temperatura ambiente.
Procedimiento-Tratar concomitantemente y en paralelo
la Solucin Estndar, la Solucin de Prueba y el blanco de
reactivos constituido por 25 ml de cido ntrico diluido (1
en 30) y 25 ml de agua, segn se indica a continuacin.
Agregar solucin de hidrxido de amonio (1 en 2) para
ajustar a un pH de 2,0 0,2. Diluir con agua a 60 ml y
transferir a un separador de vidrio con proteccin actnica
con la ayuda de 1 O ml de agua, agregando los 1 O ml al
separador. Agregar 200 mg de clorhidrato de hidroxilamina,
agitar por rotacin moderada para disolver; de inmediato
agregar 5,0 ml de Solucin de Diaminonaftaleno, tapar y
mezclar por rotacin suave. Dejar la solucin en reposo a
temperatura ambiente durante 100 minutos. Agregar 5,0
ml de ciclohexano, agitar vigorosamente durante 2 minutos
y dejar que las capas se separen. Desechar la capa acuosa y
centrifugar el extracto de ciclohexano para eliminar el agua
dispersada. Determinar las absorbancias de los extractos de
ciclohexano de la Solucin de prueba y de la Solucin estndar en una celda de 1 cm, a la longitud de onda de mxima absorcin, aproximadamente a 380 nm, con un espectrofotmetro adecuado, usando el extracto de ciclohexano
del blanco de reactivos como blanco, y comparar las absorbancias: la absorbancia de la Solucin de Prueba no es mayor
que la de la Solucin Estndar cuando se ha tomado una
muestra de prueba de 200 m~, o no es mayor que la mitad
de la absorbancia de la Solucion Estndar cuando se ha tomado una muestra de prueba de 1 00 mg.

USP 35

OTRAS PRUEBAS Y VALORACIONES

(301) CAPACIDAD
NEUTRALIZANTE DE CIDO
NOTA-Todas las pruebas se deben realizar a una temperatura de 37 3.
Calibracin del Medidor de pH-Calibrar un medidor
de pH usando soluciones amortiguadoras de calibracin de
biftalato de potasio 0,05 m y de tetraoxalato de potasio
0,05 m como se describe en pH (791 ).
Mezclador Magntico-Transferir 1 00 ml de agua a un
vaso de precipitados de 250 ml que contenga una barra
mezcladora magntica de 40 mm x 1 O mm (u otro tamao
adecuado) recubierta con tefln y con un anillo de giro en
el centro. Ajustar la velocidad de la barra mezcladora, de
forma que cuando la barra mezcladora se centra en el vaso
de precipitados, la velocidad de mezclado sea de 300 30
rpm, determinada con un tacmetro ptico adecuado.
Preparacin de PruebaPo/vos-Transferir a un vaso de precipitados de 250 ml,
la porcin pesada con exactitud de la sustancia especificada
en la monografa individual, agregar 70 ml de agua y mezclar en el Mezclador Magntico durante 1 minuto.
Slidos Efervescentes-Transferir a un vaso de precipitados
de 250 ml, una cantidad pesada con exactitud, que equivalga a la dosificacin mnima declarada en la etiqueta,
agregar 1 O ml de agua y mezclar por rotacin moderada el
vaso de precipitados mientras se reduce la intensidad de la
reaccin. Agregar 1 O ml ms de agua y mezclar por rotacin suave. Lavar las paredes del vaso de precipitados con
50 ml de agua, y mezclar en el Mezclador Magntico durante 1 minuto.
Suspensiones y Otros Lquidos-Agitar el recipiente hasta
que el contenido sea uniforme y determinar la densidad.
Transferir a un vaso de precipitados de 250 ml una cantidad de la mezcla uniforme, pesada con exactitud, que equivalga a la dosificacin mnima declarada en la etiqueta,
agregar agua hasta obtener un volumen de aproximadamente 70 ml y mezclar en el Mezclador Magntico durante
1 minuto.
Tabletas de Disolucin Bucal-Pesar con exactitud no menos de 20 tabletas de disolucin bucal y determinar el peso
promedio. Seleccionar y pesar 2 tabletas de disolucin bucal
y transferirlas a un vaso de precipitados de 250 ml que
contenga 70 ml de agua.
Tabletas No Masticables-Pesar con exactitud no menos
de 20 tabletas y determinar el peso promedio de las tabletas. Moler las tabletas hasta un polvo fino, mezclar para
obtener una mezcla uniforme y transferir a un vaso de precipitados de 250 ml una cantidad pesada con exactitud, que
equivalga a la dosificacin mnima declarada en la etiqueta.
Si se desea humedecer, agregar no ms de 5 ml de alcohol
(neutralizado a un pH aparente de 3,5) y mezclar para humedecer bien la muestra. Agregar 70 ml de agua y mezclar
en el Mezclador Magntico durante 1 minuto.
Tabletas Masticab/es-Preparar segn se indica en Table-

tas No Mosticables.
Tabletas que Deben Masticarse-Transferir 1 Tableta a un

vaso de precipitados de 250 ml, agregar 50 ml de agua y

mezclar en el Mezclador Magntico durante 1 minuto.
Cpsulas-Pesar con exactitud no menos de 20 cpsulas.
Extraer completamente el contenido de las cpsulas con la
ayuda de un hisopo de al.9odn si fuera necesario. Pesar con
exactitud las cpsulas vac1as y determinar el peso promedio

USP 35

Pruebas Qumicas

del contenido de cada cpsula. Mezclar el contenido combinado de las cpsulas para obtener una mezcla uniforme y
proceder segn se indica en Tabletas No Masticab/es, comenzando donde dice "transferir una cantidad pesada con
exactitud".
Procedimiento para Polvos, Slidos Efervescentes,
Suspensiones y Otros Lquidos, Tabletas de Disolucin
Bucal, Tabletas No Masticables, Tabletas Masticables y
Cpsulas-Pipetear 30,0 ml de cido clorhdrico 1,O N SV y
transferir a la Preparacin de Prueba mientras se contina
mezclando con el Mezclador Magntico. [NOTA-Cuando la
capacidad neutralizante de cido de la muestra en anlisis es
mayor de 25 mEq, usar 60,0 ml de cido clorhdrico 1,O N
SV, y hacer las modificaciones correspondientes en los clculos.] Mezclar durante 15 minutos, cronometrados exactamente, despus de agregar el cido, comenzar a valorar de
inmediato y en un perodo que no exceda los 5 minutos
adicionales, valorar el cido clorhdrico en exceso con hidrxido de sodio 0,5 N SV para obtener un pH de 3,5 estable
(durante 1 O a 15 segundos). Calcular el nmero de mEq de
cido consumido por la frmula:

1 (311) Valoracin

de Alginatos 165

Se emplean tubos de plstico vinlico halogenado* y una

conexin de caucho, C, para conectar el caudalmetro a un
brazo lateral de un matraz de reaccin, D. El matraz D es un
matraz de fondo redondo, de 250 ml, para ebullicin, apoyado en un manto de calefaccin adecuado, E. El matraz D
est equipado con un condensador de reflujo de bobina
Hopkins de 225 mm, F. El condensador termina en una
trampa en U, G, que contiene dos bandas de 25 g de cinc
de malla 20; estas bandas estn limitadas y separadas por
tres tapones de lana de vidrio de 3 pulgadas. La trampa
termina en un adaptador, H, que por medio de un tubo de
plstico vinlico halogenado y un conector con llave de paso
por torsin, 1, se conecta con un frasco lavador de gas de
250 ml, ). El tubo de entrada (burbujeo) se extiende casi
hasta el fondo del frasco de lavado de gas y termina en un
disco sinterizado con una porosidad gruesa. El tamao de
todas las juntas de vidrio es de 24 / 40 , excepto la junta de 4 5/
so del frasco de lavado de gas.
G

mEq totales = (30 x NHcl) - (VNaoH x NNaoH)

en donde NHcl y NNaoH son las normalidades del cido clorhdrico SV y del hidrxido de sodio SV, respectivamente; y
VNaoH es el volumen de hidrxido de sodio SV usado para la
valoracin. Expresar el resultado como mEq del cido consumido por g de la sustancia analizada.
Procedimiento para Tabletas que Deben MasticarsePipetear 30,0 ml de cido clorhdnco 1,O N SV y transferir a
la Preparacin de Prueba mientras se contina mezclando
con el Mezclador Magntico durante 1O minutos, cronometrados con exactitud, despus de agregar el cido. Interrumpir el mezclado brevemente y retirar sin demora cualquier
base gomosa del vaso de precipitados usando una aguja
larga. Enjuagar sin demora la aguja con 20 ml de agua,
recogiendo los lavados en el vaso de precipitados y continuar mezclando durante 5 minutos exactamente cronometrados, despus comenzar a valorar de inmediato y en un
perodo que no exceda los 5 minutos adicionales, valorar el
cido clorhdrico en exceso con hidrxido de sodio 0,5 N SV
para obtener un pH de 3,5 estable (durante 1 O a 15 segundos). Calcular el nmero de mEq de cido consumido por la
Tableta analizada por la frmula:
mEq totales

= (30 x

E~=
Figura 1. Aparato para Valoracin de Alginatos.

NHcl) - (VNaOH x NNaoH)

en donde los trminos son los definidos anteriormente.

(311) VALORACIN DE
ALGINATOS
APARATO
El aparato necesario (ver Figura 7) contiene una vlvula
dosificadora capilar, A, seguida de un caudalmetro, B, para
controlar y vigilar el flujo de nitrgeno a travs del sistema.

APTITUD DEL SISTEMA

Empleando D-glucuronolactona como el estndar, proceder como se ind1ca en el Procedimiento, pero no realizar Jos
pasos previos a la ebullicin. El sistema es adecuado si se
cumplen los siguientes criterios: (1) la determinacin con un
blanco da como resultado un valor neto de volumetra, C,
de entre 0,02 y 0,06 mEq, calculado de la siguiente manera:
Ab- Bb
en donde Ab es el nmero de mEq de hidrxido de sodio
0,25 N en los 25 ml utilizados y Bb es el nmero de mEq
de cido clorhdrico O, 1 N utilizado en la volumetra con un
blanco; y (2) el porcentaje de dixido de carbono, C0 2,
obtenido a partir del estndar est entre 24,2% y 25,7%.
*Este tipo de tubos se denominan comnmente tubos Tygon. Esta nota se
agrega a los efectos de una mayor claridad y no implica que la USP avale este
producto.

166 (311) Valoracin de Alginatos 1 Pruebas Qumicas

PROCEDIMIENTO
A menos que se indique algo diferente en la monografa
individual, transferir una muestra de aproximadamente 250
mg, pesados con exactitud, al matraz de reaccin, D, agregar 50 mL de cido clorhdrico O, 1 N, agregar varias perlas
de ebullicin y conectar el matraz al condensador de reflujo,
F, empleando cido fosfrico como lubricante. [NOTA-Se
puede emplear grasa para llaves de paso para las otras conexiones.] Conectar la lnea de nitrgeno al brazo lateral del
matraz y ajustar el flujo de agua refrigerante aproximadamente a 2 L por minuto.
[NOTA-Los pasos previos a la ebullicin que se describen
en este prrafo son opcionales y nicamente es necesario
realizarlos cuando se sospecha de la presencia de carbonatos
inorgnicos.] Mantener el flujo de nitrgeno a travs del
aparato a una velocidad de 90 mL a 1 00 mL por minuto.
Acercar el manto de calefaccin, E, hasta el matraz, calentar
la muestra y llevarla a ebullicin, y mantener una ebullicin
moderada durante 2 minutos. Apagar la fuente de calor,
bajar el manto, E, y dejar que la muestra se enfre durante
aproximadamente 1 O minutos.
Conectar el frasco lavador de gas vaco, ], y purgar el
sistema con nitrgeno a .una velocida~ de 90. mL a ~ 09 mL
por minuto durante 5 mmutos. Reduc1r el flujo de n1trogeno
hasta 60 mL a 65 mL por minuto, a<;_regar al frasco 1 O gotas
de alcohol butlico, 25,0 mL de hidroxido de sodio 0,25 N
SV y 50 mL de agua destilada, enjuagando hacia el interior
del frasco lavador de gas y volver a colocar la tapa. Desconectar la conexin de caucho, C, del brazo lateral y agregar
46 mL de cido clorhdrico a travs del brazo lateral del
matraz de ebullicin. Volver a unir la lnea de nitrgeno,
acercar el manto de calefaccin y calentar la mezcla de reaccin hasta ebullicin. Despus de 2 horas de ebullicin,
aumentar el flujo de nitrgeno hasta 90 mL a 1 00 mL por
minuto, suspender el calentamiento y bajar el manto. Dejar
que se enfne durante 1 O minutos. Desconectar y desmontar
el frasco lavador de gas. Empleando un chorro dirigido de
agua destilada, enjuagar bien todas las partes del tubo de
burbujeo y tapar, recolectando los lavados en el frasco de
lavado de gas. Emplear nitrgeno para forzar suavemente la
salida de toda el agua del tubo de burbujeo. Agregar al
frasco inmediatamente 1 O mL de solucin de cloruro de bario al 1 O% y una barra de agitacin. Tapar hermticamente
y mezclar lentamente durante 1 minuto. Dejar en reposo
durante un mnimo de 5 minutos. Agregar tres gotas de
fenolftalena SR y valorar con cido clorndrico O, 1 N SV.
Realizar una determinacin con un blanco (ver Valoraciones
Volumtricas Residuales en Volumetra (541 )). Calcular el porcentaje de dixido de carbono, co2, por la frmula:

2200[(A - B) - C]/(1 OOOW)(1 - D)

en donde A es el nmero de mEq de hidrxido de sodio
0,25 N en los 25 mL empleados; B es el nmero d~ mEq de
cido clorhdrico O, 1 N empleado para la volumetna de la
muestra o del estndar; C es el valor neto de volumetra
calculado en la determinacin con un blanco; W es el peso,
en g, de la muestra o del est~~dar toma<;Jo; y D es el por-.
centaje expresado hasta la dec1ma de umdad (1 lugar decimal), obtenido en la prueba de Prdida por Secado para la
muestra o para el estandar.

USP 35

(341) AGENTES
ANTIMICROBIANOSCONTENIDO
Un componente esencial de las inyecciones conservadas
en envases multidosis es el agente o los agentes que se
incorporan para reduci~ el riesgo de que, en el mom.ent<? _de
retirar parte del conten1do, se produzca una contamtnaCI~>n
microbiana accidental del contenido restante. Es un reqUIsito farmacopeico que la presencia y la cantidad agregada
de tal(es) agente(s) consten en la etiqueta del envase. Los
mtodos proporcionados aqu para los agentes ms usados
deben emplearse para demostrar que el agente declarado
est presente pero no excede la cantidad declarada en la
etiqueta en ms de 20%.
La concentracin de un conservante antimicrobiano agregado a una preparacin para uso oftlmico, nasal, tico y
parenteral, multidosis o monodosis, puede disminuir durante
la vida til del producto. Por ello, el fabricante debe determinar el nivel mnimo en el que el conservante resulta eficaz
y debe formular el. producto de modo que se gar~ntic,e.que
este nivel de efectividad exceda durante toda la v1da utll del
producto. En el momento de su fabricacin, el producto
debe contener la cantidad declarada del conservante antimicrobiano (dentro de un 20% considerando las variaciones
originadas en la fabricacin y el an~lisi.s). La decl~racin de
la cantidad de conservante que se md1ca en la et1queta, no
pretende definir la cantidad de conservante a mantener durante la vida til del producto; sino la cantidad que fue
agregada, dentro de las limitaciones del proceso, y que no
se excedi en ms de 20%. Un ejemplo de tal declaracin
en la etiqueta es "_(unidad) agregado como conservante.
" [NOTA-" __ (unidad)" es un nmero seguido de la unidad de medida, por ej. 0,015 mg por mL o O, 1 o/o.]
Los agentes ms usados incluyen los dos derivados mercuriales, mtrato fenilmercrico y timerosal, los cuatro steres
homlogos del cido p-hidroxibenzoico, fenol, alcohol benclico y clorobutanol. Para los dos primeros mencionados se
emplea el mtodo polarogrfico, mientras que para la d~ter
minacin de los otros agentes se emplea la cromatograf1a
de gases cuantitativa.

MTODO GENERAL POR CROMATOGRAFA

DE GASES
Los procedimientos generales que se establecen a continuacin son aplicables a la determinacin cuantitativa de
alcohol benclico, clorobutanol, fenol y los steres metlico,
etlico, proplico y butlico del cido p-hidroxibenzoico; estos
ltimos se tratan como un grupo pero, si estn presentes en
forma individual, se los puede determinar por separado. Preparar la Solucin de Estndar Interno y la Preparacin Estndar
para cada agente segn se indica a continuacin. A menos
que se indique lo contrario, preparar la Preparacin de
Prueba a partir de porciones medidas con exact1tud de la
Solucin de Estndar Interno y la muestra de la prueba, de
tamao tal que la concentracin del agente y la composicin del disolvente se correspondan estrechamente con la
concentracin y la composicin de la Preparacin Estndar.
En la siguiente tabla se proporcionan los parmetros operativos recomendados para el cromatgrafo de gases; el gas
transportador es helio o nitrgeno y el detector es del tipo
de ionizacin a la llama.

Pruebas Qumicas 1 (341) Agentes Antimicrobianos-Contenido 167

USP 35

Parmetros Operativos Recomendados para

el Cromatgrafo de Gases

Aaente

Dimensiones
de la Columna
Lona.
DI

Alcohol Benzlico

18m

Clorobutanol
Fenol
Parabenos

18m
12m
18m

3
2
3
2

mm
mm
mm
mm

Relleno de la Columna
Fases v Sooorte

Velocidad de Flujo,
ml oor mln.

Temperatura de
la Columna

5% Gl6/51A
5% Gl6/51A
5%Gl6/51A
5% G2/51A

50
20
50
20

140
110
145
150

Alcohol Benclico
Solucin de Estndar Interno-Disolver aproximadamente 380 mg de fenol en 1O ml de metano! contenido en
un matraz volumtrico de 200 ml. Agregar agua a volumen
y mezclar.
Preparacin Estndar-Disolver aproximadamente 180
mg de ER Alcohol Benclico USP, pesados con exactitud, en
20,0 ml de metano! contenidos en un matraz volumtrico
de 1 00 ml. Agregar la Solucin de Estndar Interno a volumen y mezclar.
Procedimiento-Inyectar por separado en el cromatgrafo volmenes iguales (aproximadamente 5 J.1L) de la Preparacin Estndar y de la Preparacin de Prueba, registrar los
cromatogramas con el aparato ajustado a los parmetros establecidos en la tabla adjunta y medir las reas correspondientes a los picos de alcohol bencOico y fenol. Calcular el
contenido, en mg por ml, de alcohol benclico (C7Hs0) en
la muestra tomada, por la frmula:

1 OO(C/V)(p1 /p2)(P2/P1)
en donde C es la concentracin, en mg por ml, de alcohol
bencOico en la Preparacin Estndar; V es el volumen, en
ml, de la muestra de la prueba usada para preparar cada
100 ml de la Preparacin de Prueba; p1 y p2 son las reas de
los picos del alcohol benclico y el fenol, respectivamente,
obtenidos a partir de la Preparacin de Prueba; y P1 y Pz son
las reas de los picos del alcohol benclico y el fenol, respectivamente, obtenidos a partir de la Preparacin Estndar.

Clorobutanol
Solucin de Estndar Interno-Transferir aproximadamente 140 mg de benzaldehdo a un matraz volumtrico de
100 ml, agregar 1O ml de metano! y agitar por rotacin
moderada para disolver. Diluir a volumen con agua y mezclar.
Preparacin Estndar-Transferir aproximadamente 125
mg de ER Clorobutanol USP, pesados con exactitud, a un
matraz volumtrico de 25 ml. Agregar 2 ml de metanol,
agitar por rotacin moderada para disolver, diluir a volumen
con agua y mezclar. Transferir 5,0 ml de esta solucin y 5,0
ml de la Solucin de Estndar Interno a un matraz de 25 ml
y mezclar para obtener una solucin con una concentracin
conocida de aproximadamente 2,5 mg de clorobutanol por
ml.
Preparacin de Prueba-Diluir cuantitativamente, si
fuera necesario, un volumen medido con exactitud de la
muestra de la prueba con metano! para obtener una solucin que no contenga ms de aproximadamente 5,0 mg de
clorobutanol por mL. Combinar 3,0 ml de esta solucin con
3,0 ml de la Solucin de Estndar Interno y mezclar.
Sistema Cromatogrfico (ver Cromatografa (621 ))[NOTA-Ver la tabla adjunta para determinar las dimensiones
de la columna, el relleno de la columna con su fase y soporte, la velocidad de flujo y la temperatura de la columna.]
Mantener la temperatura del inyector a 180 y la del detector, a 220. Inyectar en el cromatgraf~ la Pr~pa.racin Estndar y registrar el.cromatograma s~9un se ~nd1ca en el
.
Procedimiento: los t1empos de retenc1on relat1vos son aprox1-

madamente 0,8 para el benzaldehdo y 1,O para el clorobutanol; la resolucin, R, entre el benzaldehdo y el clorobutanol no es menor de 2,0; y la desviacin estndar relativa
para inyecciones repetidas no es ms de 2,0%.
Procedimiento-Inyectar por separado en el cromatgrafo volmenes iguales (aproximadamente 1 J.1L) de la Preparacin Estndar y de la Preparacin de Prueba, registrar los
cromatogramas y medir las areas correspondientes a los picos principales. Calcular la cantidad, en mg, de clorobutanol
(C 4 H7CI 30) en cada ml de la muestra sometida a la prueba,
por la frmula:
C(L/D)(Ru/Rs)
en donde C es la concentracin, en mg por ml, de clorobutanol, calculada con respecto a la sustancia anhidra, en la
Preparacin Estndar; L es la cantidad declarada, en mg, de
clorobutanol en cada ml de la muestra de prueba; D es la
concentracin, en mg por ml, de clorobutanol en la Preparacin de Prueba, respecto al volumen de la muestra sometida a la prueba y el grado de dilucin; y Ru y Rs son los
cocientes entre el pico de clorobutanol y el pico de benzaldehdo obtenidos a partir de la Preparacin de Prueba y de la
Preparacin Estndar, respectivamente.

Fenol
Solucin de Estndar Interno-Pipetear 1 ml de ERAlcohol BencOico USP y transferir a un matraz volumtrico de
500 ml, agregar metano! a volumen y mezclar.
Preparacin Estndar-Disolver aproximadamente 75
mg de ER Fenol USP, pesados con exactitud, en 7,5 ml de
m etanol contenidos en un matraz volumtrico de 100 m l.
Agregar 20,0 ml de Solucin de Estndar Interno, luego
agregar agua a volumen y mezclar.
Procedimiento-Inyectar por separado en el cromatgrafo volmenes iguales (aproximadamente 3 J.1L) de la Preparacin Estndar y la Preparacin de Prueba, registrar los
cromatogramas con el aparato ajustado a los parmetros establecidos en la tabla adjunta y medir las reas correspondientes a los picos de fenol y alcohol benclico. Calcular el
contenido, en mg por ml, de fenol (C6H60) en cada ml de
la muestra tomada, por la frmula:

en donde C es la concentracin, en mg por ml, de fenol en

la Preparacin Estndar; V es el volumen, en ml, de la muestra de la prueba usada para preparar 100 ml de la Preparacin de Prueba; p1 y pz son las reas de los picos de fenol y
alcohol benclico, respectivamente, obtenidos a partir de la
Preparacin de Prueba; y P1 y Pz son las reas de los picos de
fenol y alcohol benclico, respectivamente, obtenidos a partir de la Preparacin Estndar.

Metilparabeno y Propilparabeno
Solucin de Estndar Interno-Colocar aproximadamente 200 mg de benzofenona en un matraz volumtrico
de 250 ml, diluir a volumen con ter y mezclar.

168 (341) Agentes Antimicrobianos-Contenido 1 Pruebas Qumicas

Preparacin Estndar-Colocar 1 00 mg de ER Metilparabeno USP y 1O mg de ER Propilparabeno USP, pesados
con exactitud, en un matraz volumtrico de 200 ml, diluir a
volumen con Solucin de Estndar Interno y mezclar. Colocar
1 O ml de esta solucin en un matraz Erlenmeyer de 25 ml
y proceder segn se indica en la Preparacin de Prueba, comenzando desde donde dice "Agregar 3 ml de piridina".
Preparacin de Prueba-Pipetear 1 O ml de la muestra
sometida a la prueba y 1 O ml de la Solucin de Estndar
Interno en un separador pequeo. Agitar vigorosamente,
permitir que las capas se separen, retirar la capa acuosa y
ponerla en un segundo separador y transferir la capa de ter
a un matraz pequeo a travs de un embudo que contenga
sulfato de sodio anhidro. Extraer la capa acuosa con dos
porciones de ter de 1 O ml y filtrar tambin los extractos a
travs del sulfato de sodio anhidro. Evaporar los extractos
combinados en una corriente de aire seco hasta que el volumen se reduzca aproximadamente a 1 O ml y luego transferir el residuo a un matraz Erlenmeyer de 25 ml. Agregar 3
ml de piridina, completar la evaporacin del ter y hervir
en una placa de calentamiento hasta que el volumen se
reduzca aproximadamente a 1 ml. Enfriar y agregar 1 ml
de un agente silanizante adecuado, como por ejemplo
bis(trimetilsilil)trifluoroacetamida, bis(trimetilsilil)acetamida o
una mezcla de hexametildisilazano y trimetilclorosilano [2:1
3:1 (v/v)]. Mezclar y dejar en reposo durante no menos
de 15 minutos.
Procedimiento-Inyectar por separado en el cromatgrafo volmenes i_guales (2 11L) de la solucin silanizada de
la Preparacin Estandar y la Preparacin de Prueba, registrar
los cromatogramas con el aparato ajustado a los parametros
establecidos en la tabla adjunta y medir las reas correspondientes a los picos de metilparabeno, propilparabeno y benzofenona. Calcular el contenido, en 11g por ml, de metilparabeno (CsHsOJ) en la muestra sometida a la prueba, por la
frmula:

USP 35

matraz volumtrico de 1000 ml y entibiar si fuera necesario

para lograr una completa disolucin, agregar la solucin de
hidrxido de sodio a volumen y mezclar. Pipetear 1 O ml de
esta solucin, transferir a un matraz volumtrico de 25 ml y
proceder segn se indica en la Preparacin de Prueba, comenzando desde donde dice "agregar 2 ml de solucin de
nitrato de potasio (1 en 1 00)."
Preparacin de Prueba-Pipetear 1O ml de la muestra
de la prueba, transferir a un matraz volumtrico de 25 ml,
agregar 2 ml de solucin de nitrato de potasio (1 en 1 00) y
1 O ml de solucin amortiguadora alcalina de borato de pH
9,2 (ver Soluciones Amortiguadoras en la seccin Reactivos,
Indicadores y Soluciones) y, si fuera necesario, ajustar a un
pH de 9,2 agregando cido ntrico 2 N. Agregar 1,5 ml de
solucin de gelatina recin preparada (1 en 1 000), luego
agregar la solucin amortiguadora alcalina de borato de pH
9,2 a volumen y mezclar.
Procedimiento-Pipetear una porcin de la Preparacin
de Prueba y transferir a la celda polarogrfica y desairear
burbujeando nitrgeno a travs de la solucin durante 15
minutos. Insertar el electrodo de goteo de mercurio de un
polargrafo adecuado (ver Po/orografa (801)) y registrar el
polarograma desde -0,6 hasta -1,5 voltios en comparacin
con el electrodo de calomel saturado. Determinar la corriente de difusin de la Preparacin de Prueba, (id)u, como la
diferencia entre la corriente residual y la corriente limitante.
De forma similar y concomitante, determinar la corriente de
difusin, (id)s, de la Preparacin Estndar. Calcular la cantidad, en 11g, de nitrato fenilmercrico (C6HsHgNOJ) en cada
ml de la muestra tomada, por la frmula:

en donde C es la concentracin, en 11g por ml, de nitrato

fenilmercrico en la Preparacin Estndar.

Timerosal
en donde CM es la concentracin, en 11g por ml, de metilparabeno en la Preparacin Estndar; V es el volumen, en
ml, de la muestra tomada; P1 y Pl son las reas de los picos
del metilparabeno y la benzofenona, respectivamente, obtenidos a partir de la Preparacin de Prueba; y P1 y PJ son las
reas de los picos del metilparabeno y la benzofenona, respectivamente, obtenidos a partir de la Preparacin Estndar.
De modo similar, calcular el contenido, en 11g por ml, de
propilparabeno (C1oH1zOJ) en la muestra sometida a la
prueba, por la frmula:
1 O(Cp/V)(pz/pl)(PJ!P2)

en donde Cp es la concentracin, en 11g por ml, de propilparabeno en la Preparacin Estndar; V es el volumen, en

ml, de la muestra tomada; Pz y Pl son las reas de los picos
del propilparabeno y la benzofenona, respectivamente, obtenidos a partir de la Preparacin de Prueba; y P2 y PJ son las
reas de los picos del propilparabeno y la benzofenona, respectivamente, obtenidos a partir de la Preparacin Estndar.
El etilparabeno y el butilparabeno pueden determinarse
de modo similar.

MTODO POLAROGRFICO

Preparacin Estndar-En el da de uso, colocar aproximadamente 25 mg de ER Timerosal USP, pesados con exactitud, en un matraz volumtrico de 250 ml, agregar agua a
volumen y mezclar. Proteger de la luz. Pipetear 15 ml de
esta solucin en un matraz volumtrico de 25 ml, agregar
1,5 ml de solucin de gelatina (1 en 1 000), luego agregar
solucin de nitrato de potasio 1 en 1 00 a volumen y mezclar.
Preparacin de Prueba-Pipetear 15 ml de la muestra
en analisis, transferir a un matraz volumtrico de 25 ml,
agregar 1,5 ml de solucin de gelatina (1 en 1 000), agregar solucin de nitrato de potas1o (1 en 1 00) a volumen y
mezclar.
Procedimiento-Transferir una porcin de la Preparacin
de Prueba a la celda polarogrfica y desairear burbujeando
nitrgeno a travs de la solucin durante 15 minutos. Insertar ef electrodo de goteo de mercurio de un polargrafo
adecuado (ver Po/orografa (801 )) y registrar el polarograma
de -0,2 a -1 ,4 voltios en comparacin con el electrodo de
calomel saturado. Determinar la corriente de difusin, (id)u,
como la diferencia entre la corriente residual y la corriente
limitante. De forma similar y concomitante, determinar la
corriente de difusin, (id)s, de la Preparacin Estndar. Calcular la cantidad, en 11g, de timerosal (C6H9HgNaOzS) en cada
ml de la muestra sometida a la prueba, por la frmula:

Nitrato Fenilmercrico
Preparacin Estndar-Disolver aproximadamente 1 00
mg de nitrato fenilmercrico, pesados con exactitud, en una
solucin de hidrxido de sodio (1 en 250) contenida en un

en donde C es la concentracin, en 11g por ml, de timerosal

en la Preparacin Estndar y los otros trminos son los definidos anteriormente.

USP 35

(345) VALORACIN DE CIDO

CTRICO/CITRATO Y FOSFATO
El siguiente procedimient<;> general de c_romatow_afa i?nica se emplea para determina~ el conten1do de_ ae~do Cltrico/citrato y fosfato en los a;t1c_ulo~ ~armacope1cos, cuando
se especifica en las monograf1as 1nd1v1du~les. Las pruebas de
identificacin de citrato y fosfato se explican por .s~par~do
en el captulo general de la USP Pruebas de ldentdicaoon-.
General (191 ). El procedimiento para p_r~parar las Preparl?clones Estndar empleadas para la valorae~on depende de_ SI se
valoran el citrato y el fosfato concom1tantemente, segun se
indica a continuacin.
Estndares de Referencia USP (11 )-ER cido Ctrico
USP.
Fase Mvil-Transferir un volumen adecuado de agua
(de una resistividad de no m~~os de 18 m_egohm-cm) a un
recipiente adecuado y desgas1f1car con hel1o durante no _menos de 20 minutos. Agregar un volum~n adecuado de hidrxido de sodio o hidrxido de potas1o al 50% (p/p) l1bre
de carbonato, para obtener una solucin de hidr~xido de
potasio o de hidrxido de sodio 20 mM. Alternativamente,
se puede generar un eluyente de hi~rxido d~ s_odio o hidroxido de potasio 20 mM por med1os electron1cos empleando un generador automtico de eluyente. [NOTA-Proteger la Fase Mvil del dixido de carbono atmosfrico.]
Preparaciones Estndar-Usar la Preparacin Estndar 1
slo para una valoracin de cido ctri~o/citrato. Usar _1~ Preparacin Estndar 2 si se pretende realizar una valorae~on
concomitante de citrato y fosfato.
Preparacin Estndar 7-Disolver ER cido Ctrico USP en
hidrxido de sodio 1 mM recin p_reparado_ para obten~r
una solucin con una concentrae~on conoc1da de aproximadamente 20 Jlg de citrato (C6Hs07) por,ml.
Preparacin Estndar 2-Disolve:r E~ :"-cido Ctri~o USP y
fosfato monobsico de sodio en h1drox1do de sod1o 1 mM
recin preparado para obtener una solucin con concentraciones conocidas de aproximadamente 20 Jlg por ml y 12
Jlg por ml de citrato y fosfato (P04), respectivamente. ,
Preparacin de Valoracin para la y~Joracin d_e Acido
Ctrico/Citrato-A menos que se espec1flque algo diferente
en la monografa disolver una cantidad adecuada de la
forma farmacuti~a slida en hidrxido de sodio 1 mM recin preparado para obtener l!na solucin qu~ contenga
aproximadamente 20 Jlg d~, c1t~atc:> por ~~- S1 la forma farmacutica es una f~>rmula~IO'; l1_qU1da, di1~1r co~ _agua y
agregar una solucion de h1drox1do de sod1o rec1en preparada para obtener una solucin que ~on,te:nga aprox~mada
mente 20 Jlg de citrato por ml en h1drox1do de sod1o 1
mM.
Preparacin de Valoracin para la Valoracin de
Fosfato-A menos que se especifique algo diferente en la
monografa, disolver una cantidad ad~cuada de la_ !orma farmacutica slida en hidrxido de sod1o 1 mM rec1en preparado para obtener una solucin que contenga aproximadamente 12 Jlg de fosfato por mL. Si la forma farmacutica es
una formulacin lquida, diluir con agua y agregar una solucin de hidrxido de sodio recin preparada para obtener
una solucin que contenga aproximadamente 12 Jlg de fosfato por ml en hidrxido de sodio 1 mM.
Sistema Cromatogrfico (ver Cromatografa (621 ))Equipar un cromatgrafo de lquidos con una columna separadora de aniones adecuada; una guarda columna de 4 mm
x 50 mm y una columna analtica de 4 mm x 250 mm, ,
ambas rellenas con material L61; '1 un dete:ct<;>r electr?qUImico con deteccin de conductividad supnm1da med1ante
una micromembrana supresora de aniones o un sistema de

Pruebas Qumicas 1 (351) Valoracin de Esteroides 169

supresin qumica adecuado. Mantener todas las columnas
a una temperatura de 30 y eluir a una velocidad de flujo
de 2 ml por minuto. [NOTA-Se debe colocar una columna
para atrapar aniones antes del inyector para extraer las trazas de contaminantes aninicos en la Fase Mvil.] Inyectar
en el cromatgrafo la Preparacin Estndar 7 o la Preparacin
Estndar 2, segn corresponda, y registrar el crom~togr~ma
segn se indica en el Procedimiento: el factor de as1metna no
es mayor de 2,0 y la desviacin estn~ar relativa de las reas
de los picos de CltratC? (y fosfato, segun .c,orresponda), para
seis inyecciones repetidas de la Preparaoon Estandar 7 o de
la Preparacin Estndar 2, no es ms de 1 ,5%.
Procedimiento-Inyectar por separado en el croma!grafo 1 O Jll de la Preparacin Estndar y de la Preparaon de
Valoracin correspondientes, registrar los cromatogram?s y
medir las reas de los picos de citrato y de fosfato segun
corresponda. Determinar la concentracin de citrato o de
fosfato en la porcin de Preparacin de Valoracin tomada,
por la frmula:
Cs(ru/rs)
en donde C 5 es la concentracin de citrato o fosfato, en .g
por ml, en la Preparacin Estndar correspondiente;_ y ru y rs
son las reas de los picos de citrato o fosfato obten1dos a
partir de la Preparacin de Valoracin y de la Preparacin
Estndar, respectivamente.

(351) VALORACIN DE
ESTEROIDES
El siguiente procedi_miento se aplica para detern:'inar los
esteroides Farmacope1cos que poseen grupos funcionales reductores tales como a-cetoles.
Preparacin Estndar-Disolver en alcohol una cantidad
adecuada del Estndar de Referencia USP especificado en la
monograf~ individual, previamen,te. se~a.do en las condiciones especificadas en la monograf1a md1v1dual y pesado con
exactitud, y diluir cuantitativamente y e~ diluciones sucesivas con alcohol para obtener una solucion co~ una concentracin de aproximadamente 1 O .g por m l. P1petear 20 ml
de esta solucin y transferir a un matraz Erlenmeyer de 50
ml con tapn de vidrio.
Preparacin de Valoracin-Preparar segn se indica en
la monografa individual.
Procedimiento-A sendos matraces que contienen la
Preparacin de Valoracin y la Preparacin Estndar, respectivamente, y a un matraz similar que contenga 20,0 _t;ll de
alcohol como blanco, agregar 2,0 ml de una soluc1on preparada por disolucin de 50 mg de azul de tetrazolio en 1 O
ml de metano! y mezclar. Agregar despus a cada matraz
2 O ml de una mezcla de alcohol e hidrxido de tetrametil;monio SR (9: 1 ), mezclar y dejar en reposo en la _oscuridad
durante 90 minutos. Sin demora, determinar al m1smo
tiempo las absorbancias de las soluciones de la Preparacin
de Valoracin y la Preparacin Estndar aproximadamente a
525 nm utilizando un espectrofotmetro adecuado, contra
el blanc~. Calcular el resultado por la frmula dada en la
monografa individual, en donde Ces la concentracin, en
.1$) por ml, del Estndar de Referencia en la Preparacin Estandar; y ,Au y As son l~,s absorbancias ~e las ~oluciones de _la
Preparacion de Valoraoon y la Preparaoon Estandar, respectivamente.

170 (361 >Valoracin de Barbitricos 1 Pruebas Qumicas

(361) VALORACIN DE
BARBITURICOS
/

Estndar Interno, Solucin del Estndar Interno,

Preparacin Estndar y Preparacin de Valoracin-Preparar segn se indica en la monografa individual.
Sistema Cromatogrfico-En condiciones tpicas, equipar un cromatgrafo de gases con un detector de ionizacin
a la llama y con una columna de vidrio de 4 mm x 0,9 m
rellena con fase lquida Gl O al 3% sobre soporte 51 A de
malla 80 a 1 OO. Mantener la temperatura de la columna a
200 1 0 y mantener el inyector y el detector aproximadamente a 225, la temperatura de la columna puede variar
dentro de la tolerancia especificada, segn sea necesario,
para cumplir las especificaciones de Aptitud del Sistema y
proporcionar tiempos de retencin apropiados. Emplear un
gas trasportador adecuado, tal como nitrgeno seco, a una
velocidad de flujo apropiada, como por ejemplo de 60 ml a
80 ml por minuto. Emplear inyeccion directa en la columna. [NOTA-Si el instrumento no est equipado para inyeccin directa en la columna, emplear un inyector recubierto de vidrio que se haya lavado sucesivamente con una
solucin de limpieza de cido crmico, agua, metanol, cloroformo, una solucin 1 en 1O de trimetilclorosilano en cloroformo y cloroformo.]
Aptitud del Sistema (ver Cromatografa (621 ))-Inyectar en el cromatgrafo cinco inyecciones repetidas de la Preparacin Estndar y registrar el cromatograma segn se indica en el Procedimiento: la desviacin estndar relativa para
el cociente Rs no es ms de 1,5o/o. En un cromatograma
apropiado, la resolucin, R, entre el cido barbitnco y el
Estndar Interno no es menor que el valor dado en la monografa individual y el factor de asimetra, T, para cada uno
de los dos picos no es mayor de 2,0.
Procedimiento-Inyectar en un cromatgrafo de gases
apropiado una porcin adecuada (aproximadamente 5 .tl)
de la Preparacion estndar y registrar el cromatograma. De
modo similar, inyectar una porcin adecuada de la Preparacin de Valoracion y registrar el cromatowama. Calcular el
contenido de barbiturato o cido barbiturico en la muestra
de valoracin por la frmula que se proporciona en la monografa individual, en donde Ru es el cociente de respuesta
entre los picos del cido barbitrico y del Estndar Interno
en la Preparacin de Valoracin; Os es el cociente entre el
peso del barbitrico en la forma de cido y el del Estndar
Interno en la Preparacin Estndar; C es la concentracin, en
mg por ml, de Estndar Interno en la Solucin de Estndar
Interno; y Rs es el cociente de respuesta entre los picos del
cido barbitrico y del Estndar Interno en la Preparacin
Estndar.

(371) VALORACIN DE
COBALAMINA CON MARCADOR
RADIOACTIVO
Todas las determinaciones de radioactividad requeridas
por este mtodo deben hacerse con un equipo de conteo
apropiado, durante un perodo de tiempo que sea ptimo
de acuerdo con el equipo de conteo especfico empleado.
Todos los procedimientos deben realizarse varias veces para
obtener la mayor exactitud posible.

USP 35

Estndares de Referencia USP (11 )-ER Cianocobalamina

USP.

Reactivo Marcador de Cianocobalamina-Diluir con

agua un volumen medido con exactitud de una solucin de
cianocobalamina radioactiva* para producir una solucin
que tenga una radioactividad entre 500 y 5000 conteos por
minuto por ml. Agregar 1 gota de cresol por litro de solucin preparada y almacenar en un refrigerador.
Estandarizacin-Preparar en agua una solucin de una
cantidad de ER Cianocobalamina USP, pesada con exactitud,
que contenga 20 )lg a 50 )lg por ml. Realizar la valoracin
entera de una porcin de 10,0 ml de esta solucin, procediendo segn se indica en la Preparacin de Valoracion, comenzando donde dice "Agregar agua para obtener un volumen medido".
Solucin de Cresol-Tetracloruro de Carbono-Mezclar
volmenes iguales de tetracloruro de carbono y cresol recientemente destilado.
Solucin de Fosfato-Cianuro-Disolver 100 mg de cianuro de potasio en 1 000 ml de una solucin saturada de
fosfato dibsico de sodio y mezclar.
Solucin de Butanoi-Cioruro de Benzalconio-Diluir
una solucin de cloruro de benzalconio (17 en 1 00) con
agua (3:1) y mezclar con 36 volmenes de alcohol butlico.
Columna de Almina-Resina-Colocar un trozo de lana
de vidrio en el fondo de un tubo de vidrio que posea una
constriccin en uno de sus extremos, como por ejemplo
una bureta de 50 ml. Sosteniendo el tubo en posicin vertical, agregar un volumen de una suspensin acuosa espesa
de resina de intercambio inico (ver en la seccin Reactivos,
Indicadores y Soluciones), suficiente para obtener una columna de resina sedimentada de 7 cm de alto. Cuando el
slido se haya sedimentado parcialmente, dejar que el agua
drene, de manera que quede slo 1 cm de l1quido encima
de la columna de resina y comprimir la resina suavemente.
Luego agregar una suspensin acuosa espesa de almina
anh1dra (que no est lavada con cido) suficiente para aumentar la altura de la columna sedimentada a 1 O cm; dejar
que drene el agua hasta que quede aproximadamente a 1
cm por encima de la almina. Agregar un trozo de lana de
vidno y lavar la columna, empleando un total de 50 ml de
agua y drenar nuevamente hasta un nivel de 1 cm por encima de la columna. Preparar una columna nueva para cada
determinacin.
Preparacin de Valoracin-Transferir a un vaso de precipitados una cantidad pesada o un volumen medido de la
preparacin a valorar, con una actividad de vitamina 812
equivalente a la de 200 .tg a 500 )lg de cianocobalamina.
Agregar agua para obtener un volumen medido de no menos de 25 ml; luego agregar 5,0 ml de Reactivo Marcador
de Cianocobalamina. TrabaJando bajo una campana, agregar
5 mg de nitrito de sodio y 2 mg de cianuro de potas1o por
cada ml de la solucin resultante. Ajustar la solucin con
cido clorhdrico diluido hasta pH 4 aproximadamente y calentar en bao de vapor durante 15 minutos. Enfriar y ajustar la solucin con hidrxido de sodio 1 N hasta un pH entre 7,6 y 8,0. Centrifugar o filtrar para eliminar cualquier
slido no disuelto.
Procedimiento-Transferir la Preparacin de Valoracin a
un frasco de centrfuga de 250 ml, agregar 1O ml de Solucin de Cresoi-Tetracloruro de Carbono, cerrar adecuadamente el frasco con un tapn de vidrio, de polietileno o de
goma envuelto en papel de aluminio, agitar vigorosamente
durante 2 a 5 minutos y centrifugar. Retirar y _guardar la
capa de disolvente inferior. Repetir la extraccion empleando
una porcin de 5 ml de Solucin de Cresoi-Tetracloruro de
Carbono y combinar los extractos de las capas de disolvente
inferiores en un frasco de centrfuga o separador de 50 ml
a 100 ml de capacidad.
*Una solucin de cianocobalamina, transformada en radioactiva mediante la
incorporacin de 6Co, est disponible de Merck and Co., lnc., Rahway, NJ
07065.

Pruebas Qumicas 1 (381) Tapones Elastomricos para Inyectables 171

USP 35

Lavar los extractos combinados con porciones sucesivas

de 1 O mL de cido sulfrico 5 N hasta que el ltimo lavado
sea prcticamente incoloro (dos lavados bastan generalmente). Durante cada lavado, agitar durante 2 a 5 minutos,
dejar que las capas se separen, centrifugar si fuera necesario
y descartar la capa cida. La~?r luego con dos porciones
sucesivas de 1 O mL de SoluCJon de Fosfato-C1anuro. Fmalmente, lavar con 1 O mL de agua. Descartar todos los
lavados.
Al extracto lavado agregarle 30 mL de una mezcla de
Solucin de Butanoi-Cioruro de Benzalconio y tetracloruro de
carbono (2:1 ). Extraer con dos porciones de agua de 5 mL
cada una, agitando vigorosamente cada vez durante 1 minuto, centrifugar, retirar y guardar la capa superipr acuosa.
Pasar los extractos acuosos combinados a traves de la Columna de Almina-Resina a una velocidad de aproximadamente 1 mL por minuto, mantener una capa de 1 cm de
lquido sobre la parte superior de la columna, agregando
agua segn sea necesario. Descartar los primeros mL incoloros (generalmente alrededor de 5 mL) y recoger el eluato
coloreado (generalmente alrededor de 1 O mL) en un tubo
de centrfuga o separador de 50 mL que contenga 500 1L
de cido actico diluido. Extraer el eluato agitando durante
2 a 5 minutos con 5 mL de Solucin de Cresoi-Tetracloruro
de Carbono y desechar la capa acuosa superior. Agregar al
extracto 5,0 mL de agua, 5 mL de tetracloruro de carbono y
1 O mL de alcohol butlico. Agitar, dejar que se separe hasta
que la capa superior est transparente y retirar la capa supenor acuosa.
Determinar las absorbancias del extracto acuoso en una
celda de 1 cm, a 361 nm y 550 nm, con un .esp~ctr~f?t
metro apropiado, empleando una fuente de ilummaCion de
tungsteno. Hacer la lectura a 361 nm empleando un filtro
capaz de reducir la luz dispersada. Calcular el cociente A361/
A550 : la pureza del extracto acuoso es aceptable si el cociente es entre 3,1 O y 3,40. Si se observa un cociente fuera
de este intervalo, purificar el extracto acuoso repitiendo el
ciclo de extraccin, procediendo segn se indica en el prrafo anterior.
Si se observa un cociente de absorbancia aceptable en el
extracto acuoso, determinar la radioactividad, en conteos
por minuto, empleando un equipo de conteo apropia~o durante un perodo de tiempo pt1mo de acuerdo al equ1po
de conteo especfico empleado. Promediar los resultados y
corregir el promedio por la radioactividad de fondo observada durante dos o ms perodos de 30 minutos.
Clculos-Calcular el contenido de cobalamina, expresado en f19 de cianocobalamina, de la porcin tomada para
la valoracion, por la frmula:
R(Cs/Cu)(Au/ As)
en donde R es la cantidad, en 1g, de cianocobalamina en la
porcin de la solucin estndar tomada; Cs y Cu son los
valores de radioactividad promedio corregidos, expresados
en conteos por minuto por mL, de la solucin estndar y de
la solucin de valoracin, respectivamente; y Au y As son las
absorbancias, determinadas a 361 nm, de la solucin de
valoracin y de la solucin estndar, respectivamente.

(381) TAPONES ELASTOMERICOS

PARA INYECTABLES
INTRODUCCIN
Los tapones elastomricos para los envases usados en los
tipos de preparaciones definidas en el captulo de pruebas
generales Inyectables (1 ), estn hechos de materiales obtenidos por vulcanizacin (entrecruzamiento), polimerizacin,
poliadicin, o policondensacin de sustanc1as orgnicas macromoleculares (elastmeros). Las formulaciones de los tapones contienen elastmeros naturales o sintticos y aditivos
orgnicos e inorgnicos para facilitar o controlar la vulcanizacin, impartir propiedades fsicas y qumicas o color, o
estabilizar la formulacin del tapn.
Este captulo se refiere a tapones usados para el almacenamiento a largo plazo de preparaciones definidas en el captulo de pruebas generales Inyectables (1 ). Dichos tapones se
utilizan generalmente como parte de un vial, frasco o sistema de envasado de una jeringa prellenada.
Este captulo se refiere a tapones formulados con sustancias elastomricas naturales o sintticas. No concierne a tapones hechos de elastmero de silicona; sin embargo, s se
refiere a tapones tratados con silicona (p.ej., Dimet1cona,
NI} Al efectuar las pruebas de este captulo, no es necesario
tratar los tapones con silicona, aunque ninguna restriccin
prohbe el uso de tapones siliconizados.
Este captulo tambin se refiere a tapones recubiertos con
otros materiales lubricantes (p.ej., materiales unidos qumica
o mecnicamente al tapn) no destinados a proporcionar
una barrera para el elastmero base, y que de hecho no
funcionan como tal. Al efectuar las pruebas, los tapones con
recubrimientos lubricantes sin funcin de barrera deben
analizarse en su estado recubierto.
Los siguientes comentarios se refieren nicamente a los
tapones laminados o recubiertos con materiales destinados a
proporcionar, o que funcionan como, una barrera para el
elastmero base (p.ej., recubrimientos de PTFE o laca). No
se permite usar un material de barrera en un tapn que no
cumpla con los requisitos farmacopeicos para convertirlo en
uno que s los cumpla. Por lo tanto, todas las Pruebas Fisicoqumicas conciernen a la frmula base de dichos tapones, as
como sobre el tapn recubierto o laminado. Con el fin de
obtener los resultados de las Pruebas Fisicoqumicas, stas deben efectuarse sobre tapones del mismo compuesto elastomrico sin recubrimiento o laminado, as como al tapn recubierto o laminado. Las Pruebas de Funcionalidad
corresponden y deben efectuarse usando el tapn elastomrico laminado o recubierto. Las Pruebas Biolgicas conciernen
tanto al material de laminacin o recubrimiento como a la
frmula base. Las Pruebas Biolgicas pueden efectuarse sobre
el tapn laminado o recubierto, o sobre el material de !aminacin o recubrimiento y los tapones del mismo compuesto
elastomrico sin recubrimiento o laminado. En este ltimo
caso, los resultados deben informarse por separado. La frmula base usada para las pruebas fisicoqumicas o biolgicas, destinada a sustentar la conformidad farmacopeica de
un tapn recubierto con material de barrera, debera ser
similar al tapn recubierto correspondiente en cuanto a configuracin y tamao.
Para todas las pruebas de este captulo, Tapones Elastomricos para Inyectables (381 ), efectuadas sobre cualquier tipo
de tapn, es importante documentar el tapn en anlisis,
incluyendo una descripcin completa del elastmero y de
cualquier lubricante, recubrimiento, laminacin o tratamiento aplicado.
Este captulo establece los lmites de prueba para los tapones elastomricos Tipo 1 y Tipo 11. Los tapones Tipo 1 son
usados generalmente para preparaciones acuosas. Los tapo-

172 (381) Tapones Elastomricos para Inyectables 1 Pruebas Qumicas

nes Tipo 11 son los destinados generalmente a preparaciones
no acuosas, que si bien tienen propiedades optimizadas
para usos especiales, es posible que no cumplan con todos
los requisitos listados para los tapones Tipo 1 debido a su
configuracin fsica, a material de construccin o a ambos.
Si un tapn no cumple con uno o ms de los requisitos de
prueba para Tipo 1 pero cumple con los requisitos para Tipo
11, se le asigna una clasificacion final de Tipo 11. Todos los
tapones elastomricos adecuados para usar en preparaciones
inyectables deben cumplir con los lmites de prueba para
Tipo 1 o Tipo 11. Sin embargo, no se pretende que esta especificacin sirva como nico criterio de evaluacion para la
seleccin de dichos tapones.
El uso de este captulo resulta apropiado al identificar
tapones elastomricos que pueden ser aceptables para usar
en preparaciones inyectables basndose en su reactividad
biolgica, las propiedades fisicoqumicas de su extracto
acuoso y su funcionalidad.
Los siguientes requisitos para la evaluacin de los tapones
estn fuera del alcance de este captulo:
- El establecimiento de pruebas y especificaciones para
la identificacin de tapones
- La verificacin de la compatibilidad fisicoqumica entre
el tapn y el producto
- La identificacin y determinacin de seguridad de los
lixiviados de los tapones que se encuentran en el producto envasado
- La verificacin de la funcionalidad del tapn del producto envasado bajo condiciones reales de almacenamiento y uso
El fabricante del producto inyectable (el usuario final)
debe obtener del proveedor del tapn la garanta de que la
composicin del tapn no vara y que es igual a la del tapn usado durante las pruebas de compatibilidad. Cuando
el proveedor informa al usuario final de cambios en la composicin, se deben repetir las pruebas de compatibilidad,
total o parcialmente, dependiendo de la naturaleza de los
cambios. Los tapones deben almacenarse apropiadamente,
limpiarse para remover los contaminantes ambientales y las
endotoxinas, y para procesos aspticos, esterilizarse antes de
usar en el envasado de productos inyectables.

CARACTERSTICAS
Los tapones elastomricos son translcidos u opacos y no
tienen un color caracterstico; ste depende de los aditivos
usados. Son homogneos y prcticamente libres de rebabas
y materiales adventicios (p.e., fibras, partculas extraas y
residuos de goma).

IDENTIFICACIN
Los tapones se hacen de una gran variedad de materiales
elastomericos y recubrimientos polimricos opcionales. Por
esta razn, est ms all del propsito de este captulo especificar pruebas de identificacin que abarquen todas las posibles presentaciones de los tapones. Sin embargo, es responsabilidad del proveedor del tapn y del fabricante del
producto inyectable (el usuario final) verificar la formulacin
elastomrica del tapn y cualquier recubrimiento o material
laminado usado, de acuerdo con las pruebas de identifica-

USP 35

cin apropiadas. Ejemplos de algunas de las metodologas

analticas de prueba que se pueden usar incluyen peso especfico, anlisis del porcentaje de cenizas, determinacin del
contenido de azufre, prueba FTIR-ATR, cromatografa en
capa delgada de un extracto, espectrofotometna de absorcion UV de un extracto o espectrofotometra de absorcin IR
de un pirolisado.

PROCEDIMIENTOS DE PRUEBA
Los tapones elastomricos deben ajustarse a los requisitos
biolgicos, fisicoqumicos y de funcionalidad, tanto cuando
son enviados por el proveedor de tapones al fabricante del
producto inyectable (el usuario final) como cuando el usuario final los pone .en su estado definitivo, listos para usar.
Para aquellos tapones elastomricos procesados por el
proveedor antes de la distribucin al usuario final, el proveedor deber demostrar el cumplimiento con los requisitos farmacopeicos de los tapones expuestos a dichos pasos de
procesamiento y/o esterilizacion. De igual manera, si los tapones elastomricos recibidos por el usuario final son posteriormente procesados o esterilizados, el usuario final es responsable de demostrar que los tapones siguen cumpliendo
con los requisitos farmacopeicos despus de dichas condiciones de procesamiento y/o esterilizacin (es decir, en su
estado listo para usar). Esto es especialmente importante si
los tapones se deben exponer a procesos o condiciones que
podran impactar significativamente las caractersticas biolgicas, fisicoqumicas o de funcionalidad del tapn (p.ej., radiacin gamma).
Para tapones que normalmente se lubrican con silicona
antes de usar, est permitido efectuar las pruebas fisicoqumicas en los tapones no lubricados con el fin de evitar una
posible interferencia del mtodo y/o dificultades en la interpretacin de los resultados de la prueba. Para tapones suministrados con otros recubrimientos lubricantes sin funcin
de barrera, todas las pruebas se deben efectuar usando el
tapn recubierto.
Para tapones recubiertos o laminados con recubrimientos
destinados a proveer una barrera (p.ej., recubrimientos de
PTFE o laca), las pruebas farmacopeicas fisicoqumicas se
aplican al elastmero base no recubierto, as como al tapn
recubierto. En este caso, los proveedores son responsables
de demostrar el cumplimiento con los requisitos fisicoqumicos farmacopeicos tanto del tapn recubierto como del no
recubierto, procesado o tratado de forma tal que se simulen
las condiciones usadas para los tapones recubiertos antes del
envo al usuario final. E tapn no recubierto sujeto a las
pruebas fisicoqumicas debera ser similar en tamao y configuracin al tapn recubierto correspondiente. Los usuarios
finales de los tapones recubiertos son responsables tambin
de demostrar el continuo cumplimiento con los requisitos
fisicoqumicos farmacopeicos del tapn recubierto, procesado o tratado en una forma que simule las condiciones
tpicas empleadas por el usuario final previo al uso.
En todos los casos, al informar los resultados de las pruebas es apropiado documentar todas las condiciones del procesamiento, pretratamiento, esterilizacin o lubricacin de
los tapones.
La Tabla 7 resume los requisitos de prueba de los tapones
y las responsabilidades del proveedor y del usuario final.

Tabla 1
Tipos de Tapones (Tal como
se Suministran o Utilizan)
Tapn con o sin
Recubrimiento de Silicona

Pruebas Flslcoqumlcas

Requisitos de Prueba
Pruebas de Funcionalidad

Pruebas Blolqlcas

Estas oruebas son obljg_atorias.

Estas pruebas son obliqatorias.

Estas pruebas son obliqatorias.

El uso de silicona es OQ_cional.

El uso de silicona es opcional.

El uso de silkona es opcional.

Responsibilidad: proveedor y
usuario final.

Responsibilidad: proveedor y
usuario final.

Responsibilidad: proveedor y
usuario final.

USP 35

Pruebas Qumicas

1 (381) Tapones Elastomricos para Inyectables 173

Tabla 1 (Continuacin)
Tipos de Tapones (Tal como
se Suministran o Utilizan)
Tapones con Recubrimiento
Lubricante (Material
Sin Funcin de Barrera; Dilerente de Silicona)

Tapones con Recubrimiento

de Barrera

Pruebas Fisicoqumicas
Estas pruebas se deben
realizar sobre el tapn recubierto.
Responsibilidad: proveedor y
usuario final.
Estas pruebas se deben realizar
sobre los tapones recubiertos.
Responsibilidad: proveedor y
usuario final.
Y:
Estas pruebas se deben realizar
sobre los tapones sin recubrimiento (frmula base).
Responsibilidad: proveedor.

PRUEBAS BIOLGICAS
Se establecen dos etapas de pruebas. La primera etapa es
la realizacin de un procedimiento de prueba in vitro segn
se describe en el captulo de ~ruebas generales Pruebas de
Reactividad Biolgica, In Vitro (87). Los materiales que no
cumplen con los requisitos de la prueba in vitro estn sujetos a la segunda etapa de pruebas, que es la realizacin de
pruebas in vivo, Prueba de Inyeccin Sistmica y Prueba lntracutnea, segn los procedimientos presentados en el captulo de pruebas generales Pruebas de Reactividad Biolgica, In
Vivo (88). Los materiales que cumplen con los requisitos de
las pruebas in vitro no necesitan someterse a pruebas in
vivo.

Los tapones Tipo 1 y Tipo 11 deben cumplir con los requisitos de las pruebas de reactividad biolgica in vitro o in vivo.
[NOTA-Ver tambin el captulo de informacin general Biocompatibilidad de los Materiales Usados en Envases de Medicamentos, Dispositivos Mdicos e Implantes (1 031 ).]

PRUEBAS FISICOQUMICAS

Preparacin de la Solucin S
Colocar dentro de un recipiente de vidrio adecuado, tapones enteros, sin cortar, que equivalgan a un rea superficial
de 100 1O cm 2 Cubrir los tapones con 200 mL de Agua
Purificada o Agua para Inyeccin. Si no es posible conseguir
el rea superficial de tapon prescrita (1 00 1O cm 2) usando
tapones sm cortar, seleccionar el nmero de tapones que se
aproximen mejor a los 100 cm 2 , y ajustar el volumen de
agua usado al equivalente de 2 mL por cada 1 cm 2 de rea
superficial real de tapn utilizada. Calentar a ebullicin durante 5 minutos y enjuagar cinco veces con Agua Purificada
o Agua para Inyeccin.
Colocar los tapones lavados en un matraz Erlenmeyer de
vidrio Tipo 1 con cuello ancho (ver Envases-Vidrio (660)),
agregar la misma cantidad de Agua Purificada o Agua para
Inyeccin agregada inicialmente a los tapones, y pesar. Cubrir la boca del matraz con un vaso de precipitados de vidrio Tipo l. Calentar en un autoclave hasta alcanzar una
temperatura de 121 2 dentro de 20 a 30 minutos y mantenerla durante 30 minutos. Enfriar a temperatura ambiente
durante un periodo de aproximadamente 30 minutos. Agregar Agua Purificada o Agua para Inyeccin para completar
de nuevo la masa original. Agitar e inmediatamente decan-

Requisitos de Prueba
Pruebas de Funcionalidad

Pruebas BioiQgicas

Estas pruebas se deben realizar

sobre el tapn recubierto.

Estas pruebas se deben realizar

sobre el tapn recubierto.

Responsibilidad: proveedor y
usuario final.
Estas pruebas se deben realizar
sobre los tapones recubiertos.
Responsibilidad: proveedor y
usuario final.

Responsibilidad: proveedor y
usuario final.
Estas pruebas se deben realizar
sobre los tapones recubiertos.
0:

Estas pruebas se deben realizar

sobre los tapones sin recubrimiento (frmula base) y al material de laminado/recubrimiento
(los resultados se informan por
separado).
Responsibilidad: proveedor y
usuario final.

tar y recoger la solucin. [NOTA-Esta solucin se debe agitar antes de usarse en cada una de las pruebas.]

Preparacin del Blanco

Preparar una solucin blanco en forma similar, usando
200 mL de Agua Purificada o de Agua para Inyeccin, pero
omitiendo los tapones.

Apariencia de la Solucin (Turbidez/

Opalescencia y Color)
Determinacin de Turbidez (Opalescencia)
NOTA-La determinacin de turbidez se puede efectuar
por comparacin visual (Procedimiento A), o instrumentalmente, con un turbidmetro de relacin adecuado (Procedimiento B). Para mayor informacin sobre turbidimetra, ver
Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ). La evaluacin
instrumental de transparencia constituye una prueba ms
sensible que no depende de la agudeza visual del analista.
Solucin de Sulfato de Hidrazina-Disolver 1,O g de sulfato
de hidrazina en agua y diluir con agua hasta 100,0 m l.
Dejar en reposo durante 4 a 6 horas.
Solucin de Hexametilentetramina-Disolver 2,5 g de hexametilentetramina en 25,0 mL de agua en un matraz Erlenmeyer de vidrio tapado de 1 00 m L.
Suspensin Madre de Opalescencia-Agregar 25,0 mL de
Solucion de Sulfato de Hidrazina a la Solucin de Hexametilentetramina en el matraz. Mezclar y dejar en reposo durante
24 horas. Esta suspensin es estable durante un perodo de
2 meses, siempre y cuando se almacene en un envase de
vidrio sin defectos en su superficie. La suspensin no debe
adherirse al vidrio y debe mezclarse bien antes de usar.
Suspensin del Estndar de Opalescencia-Preparar una
suspensin diluyendo 15,0 mL de la Suspensin Madre de
Opalescencia con agua hasta 1000,0 m l. La Suspensin del
Estndar de Opalescencia es estable durante aproximadamente 24 horas despus de la preparacin.
Suspensiones de Referencia-Preparar de acuerdo con la
Tabla 2. Mezclar y agitar antes de usar. [NOTA-Las suspensiones de formacma estabilizada que se pueden usar para
preparar estndares de turbidez estables y diluidos, estn
disponibles comercialmente y se pueden usar despus de la
comparacin con los estndares preparados como se ha
descrito.]

174 (381) Tapones Elastomricos para Inyectables 1 Pruebas Qumicas

USP 35

Tabla 2
Suspensin de Referenda A
Estndar de Opalescencia
Aqua
Unidades de Turbidez Nefelomtrica

Suspensin de Referencia 8

Suspensin de Referencia e

Suspensin de Referencla D

5O ml

10 O ml

30 O ml

50 O ml

95 O ml

90 O ml

70 O ml

50 O ml

3 NTU

6 NTU

18 NTU

30 NTU

Procedimiento A: Comparacin Visual-Usar tubos de

prueba idnticos, de vidrio neutro, incoloro y transparente
con base plana y un dimetro interno de 15 a 25 mm.
Llenar un tubo hasta una altura de lquido de 40 mm con
Solucin S, un tubo hasta la misma altura con agua y cuatro
tubos ms hasta la misma altura con Suspensiones de Refer~ncia A, B,. C y D. Comparar las solucion.~s bajo luz diurna
d1fusa 5 mmutos despues de la preparae~on de las Suspensiones de Referencia, observndolas verticalmente contra un
fondo negro. Las condiciones de luz deben ser tales que la
Suspensin de Referencia A puede distinguirse fcilmente del
agua y la Suspensin de Referencia B puede distinguirse fcilmente de la Suspensin de Referencia A.
Requi~ito-La Solucic(m S no es ms opalescente que la
Suspens1on de ReferenCia B para tapones Tipo 1 y no ms
opalescente que. )a Suspensi.n de Referencia C para tapones
T1po. 11. La Soluoon S se cons1dera transparente si su transparencl~ ~~ 1gual .que la del agua cuando se examina se$ln se
descnb1o antenormente o SI su opalescencia no es mas pronunciada que la de Suspensin de Referencia A (ver la Tabla
3).
Procedimiento B: Comparacin Instrumental-Medir la turbidez de las Suspensiones de Referencia en un turbidmetro
calibrado adecuado (ver Espectrofotometra y Dispersin de
Luz (851)). Medir el blanco y corregir los resultados por el
blanco. Las Suspensio_nes de Referen~ia A, B, C y o, representan 3, 6, 18 y 30 Un1dades de Turb1dez Nefelometrica (NTU
por sus siglas en ingls), respectivamente. Medir la turbidez'
de la Solucin S con el turbidmetro calibrado.
Requisito-La turbidez de la Solucin S no es mayor que
1~ de la Suspensin de Referencia B (6 NTU FTU) para tapones
T1po 1 y no es mayor que la de la Suspensin de Referencia C
(18 NTU FTU) para tapones Tipo 11 (ver la Tabla 3).

sodio 0,02 M y 20 mL de alcohol. Diluir con agua hasta 1 00

ml.
Procedimiento-A 20 mL de Solucin S, agregar O, 1 mL de
Solucin de Azul de Bromotimol. Si la solucin es amarilla,
valorar con hidrxido de sodio 0,01 N hasta alcanzar un
punto final azul. Si la solucin es azul valorar con cido
clorhdr!~o 0,01 N hasta alcanzar un punto final amarillo. Si
1~ ,solue~on es verde, es neutra y no se requiere una valoraCIOn.

Correccin del Blanco-Probar 20 mL de Blanco de manera

similar. Corregir los resultados obtenidos para la Solucin S,
sustrayendo o agregando el volumen de la solucin volumtrica requerida para el Blanco segn sea apropiado. (Ver Volumetra (541 ).)
Requisito-No ms de 0,3 mL de hidrxido de sodio
0,01 N producen un color azul, o no ms de 0,8 mL de
cido clorhdrico 0,01 N producen un color amarillo o no se
requiere una valoracin.

Absorbancia
Procedimiento-[NOTA-Efectuar esta prueba dentro de las
5 horas de la preparacin de la Solucin S.] Pasar la Solucin
S a travs de ~n filtro con tamao de poro 0,45 .Lm, desechando los pnmeros mL de filtrado. Medir la absorbancia
del filtrado a una longitud de onda entre 220 y 360 nm en
una celda de 1 cm, usando el blanco en una celda pareada
en el haz de referencia. Si se requiere diluir el filtrado antes
de medir la absorbancia, corregir los resultados de la prueba
por la dilucin.
Requisito-Las absorbancias a estas longitudes de onda
no exceden de 0,2 para tapones Tipo 1 o 4,0 para tapones
T1po 11.

Tabla 3

Sustancias Reductoras

Mtodo de Comoaracln
Procedimiento
Requisitos de
Ooalescencla
Tapones Tipo 1
Tapones Tipo 11

Procedimiento A
(VIsual)
No ms opalescente que
la Susoensin B
No ms opalescente que
la Suspensin C

(Instrumental)
No ms de 6 NTU
No ms de 18
NTU

Determinacin de Color
Estnqar. de Color-Prepa.r?r una solucin diluyendo 3,0
mL de L1qwdo de Comparaoon O (ver Color y Acromatismo
(631 )) con 97,0 mL de cido clorhdrico diluido.
Procedimiento-Usar tubos idnticos de vidrio neutro, incoloro y transparente con base plana y un dimetro interno
de 15 a 25 mm. Llenar un tubo hasta una altura de lquido
de 40 mm con Solucin S y el segundo con Estndar de
Color. Comparar los lquidos bajo luz diurna difusa observndolos verticalmente contra un fondo blanco. '
Requisito-La Solucin S no est ms intensamente coloreada que el Estndar de Color.

Procedimiento-[NOTA-Efectuar esta prueba dentro de las

de la preparacin de la Solucin S.] A 20,0 mL de
Soluoon S, agregar 1 mL de cido sulfrico diluido y 20,0

hor.~s

mL de permanganato de potasio 0,002 M. Calentar a ebullicin ~urante 3 minut.os. En!riar, agregar 1 g de yoduro de
potasio, y valorar de mmed1ato con t1osulfato de sodio
0,01 M, usando 0,25 mL de solucin de almidn SR como
indicador. Efectuar una valoracin usando 20,0 mL de
blanco y anotar la diferencia en volumen de tiosulfato de
sodio 0,01 M requerido.
Requisito-La diferencia entre los volmenes de las valoraciones no es mayor de 3,0 mL para tapones Tipo 1 y no es
mayor de 7,0 mL para tapones Tipo 11.

Metales Pesados
Procedimiento-Proceder segn se indica en Mtodo 1 en
Metales Pesados (231 ). Preparar la Preparacin de Prueba
usando 10,0 mL de Solucin S.
Requisito-La Solucin S contiene no ms de 2 ppm de

metales pesados como plomo.

Acidez o Alcalinidad
Solucin de Azul de Bromotimoi-Disolver 50 mg de azul
de bromot1mol en una mezcla de 4 mL de hidrxido de

Pruebas Qumicas 1 (381) Tapones Elastomricos para Inyectables 175

USP 35

Cinc Extrable
Solucin de Prueba-Preparar una Solucin de Prueba diluyendo 10,0 mL de Solucin S con cido clorhdrico O, 1 N
hasta 100 m l. Preparar un blanco de prueba de forma similar, usando el Blanco en lugar de la Solucin S.
Solucin Estndar de Cinc-Preparar una solucin (1 O
ppm de Zn) disolviendo sulfato de cinc en cido clorhdrico
0,1 N.
Soluciones de Referencia-Preparar no menos de tres Soluciones de Referencia, diluyendo la Solucin Estndar de Cinc
con cido clorhdrico O, 1 N. Las concentraciones de cinc en
estas Soluciones de Referencia deben abarcar el lmite esperado para la Solucin de Prueba.
Procedimiento-Usar un espectrofotmetro de absorcin
atmica apropiado (ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz
(851 )) equipado con una lmpara de cinc de ctodo hueco
y una llama de aire-acetileno. Se puede usar un procedimiento alterno tal como un anlisis de plasma inductivamente acoplado (ICP, por sus siglas en ingls) apropiadamente validado.
Probar cada una de las Soluciones de Referencia en la lnea
de emisin de cinc a 213,9 nm por lo menos tres veces.
Registrar las lecturas estables. Enjuagar el aparato con la solucin del blanco de prueba cada vez, para garantizar que la
lectura retorna al valor inicial del blanco. Preparar una curva
de calibracin a partir de la media de las lecturas obtenidas
para cada Solucion de Referencia. Registrar la absorbancia de
la Solucin de Prueba. Determinar la concentracin de cinc
en ppm de la Solucin de Prueba usando la curva de
calibracin.
Requisito-La Solucin S contiene no ms de 5 ppm de
cinc extrable.

Amonio
Solucin de Tetrayodomercuriato de Potasio Alcalina-Pre-

parar una solucin de 1 00 mL que contenga 11 g de yoduro de potasio y 15 g de yoduro mercrico en agua. Inmediatamente antes de usar, mezclar 1 volumen de esta
solucin con un volumen igual de una solucin de hidrxido de sodio de 250 g por L.
Solucin de Prueba-Diluir 5 mL de Solucin S con agua
hasta 14 ml. Alcalinizarla, si fuera necesario, agregando hidrxido de sodio 1 N y diluir hasta 15 mL con agua. Agregar 0,3 mL de Solucin de Tetrayodomercuriato de Potasto
Alcalina y cerrar el recipiente.
Solucin Estndar de Amonio-Preparar una solucin de
cloruro de amonio en agua (1 ppm NH4). Mezclar 1 O mL de
la solucin de cloruro de amonio de 1 ppm con 5 mL de
agua y 0,3 mL de Solucin de Tetrayodomercuriato de Potasio
Alcalina. Cerrar el recipiente.
Requisito-Despus de 5 minutos, cualquier color amarillo
en la Solucin de Prueba no es ms oscuro que el de la
Solucin Estndar de Amonio (no ms de 2 ppm de NH4 en
la Solucin S).

Sulfuros Voltiles
Procedimiento-Colocar tapones, cortados si fuera necesario, con un rea superficial total de 20 2 cm 2 en un matraz
dE. 1 00 mL y agregar 50 mL de una solucin de cido ctrico de 20 g por L. De la misma manera y en forma simultnea, preparar una solucin de control en otro matraz de
1 00 mL, disolviendo O, 154 mg de sulfuro de sodio en 50
mL de una solucin de cido ctrico de 20 g por L. Colocar
un trozo de papel de acetato de plomo sobre la boca de
cada matraz y asegurarlo en posicin, poniendo sobre l un
frasco para pesada invertido. Calentar los matraces en un
autoclave a 121 2o durante 30 minutos.

Requisito-Cualquier mancha negra en el papel, producida por la solucin de prueba, no es ms intensa que la
producida por la solucion de control.

PRUEBAS DE FUNCIONALIDAD
NOTA-Las muestras tratadas segn se describi para la
preparacin de la Solucin S y secadas al aire, se deben usar
par?, las Pruebas de Funcionalidad de Penetrabilidad, Fragmentacton y Capactdad de Autosellado. Las Pruebas de Funcionalidad se efectan en tapones destinados a ser perforados por
una aguja hipodrmica. La prueba de Capacidad de Autosellado se requiere slo para tapones destinados a envases
mul~ido.sis. L~ aguja especificada para cada prueba es una
aguja h1poderm1ca lubncada de b1sel largo (ngulo de bisel:
122)1.

Penetrabilidad
Procedimiento-Llenar con agua 1 O viales adecuados
hasta el volumen nominal, colocar los tapones a examinar y
asegurar con una tapa. Usando una aguja hipodrmica
nueva, segn se describi a~teriormente, para cada tapn,
perforar el tapn con la aguja perpendicular a la superficie.
Requisito-La fuerza de la perforacin no es mayor que
1 O N (1 kgf) para cada tapn, determinada con una exactitud de 0,25 N (25 gf).

Fragmentacin
. Tapr;mes. para Preparaciones Lquidas-Llenar con agua 12
v1ales hmp1os hasta 4 mL menos de la capacidad nominal.
Colocar los tapones a examinar, asegurarlos con una tapa y
dejar en reposo durante 16 horas.
Tapones para Preparaciones Secas-Colocar los tapones a
examinar en 12 viales limpios y asegurar cada uno con una
tapa.
Procedimiento-Usando una aguja hipodrmica segn se
describi anteriormente,, colocada en una jeringa limpia, inyectar dentro de cada v1al 1 mL de agua mientras se retira 1
mL de aire. Repetir este procedimiento cuatro veces para
cada tapn, perforando cada vez en un sitio diferente. Usar
una aguja nueva para cada tapn, verificando que no se
vuelva roma durante la prueba. Filtrar el volumen total de
lquido en todos los viales a travs de un nico filtro con un
tamao de poro nominal no mayor que 0,5 .tm. Contar los
fragmentos de caucho que se puedan ver a simple vista en
la superficie del filtro.
Requisito-No hay ms de cinco fragmentos visibles. Este
lmite se basa en la suposicin de que los fragmentos con
un d;metro >50 .tm se pueden ver a simple vista. En caso
de duda o controversia, examinar las part1culas microscpicamente para verificar su naturaleza y tamao.

Capacidad de Autosellado
Procedimiento-llen?r 1 O viales adecuados con agua
hasta el volumen nom1nal. Colocar los tapones a examinar y
tapar. Usando una jeringa hipodrmica nueva para cada tapon, segn se describi anteriormente, perforar cada tapn
1 O veces en un sitio diferente cada vez. Sumergir los 1 O
viales en u. na soluc!<?n de azul de metileno al O, 1 o/o (1 g por
L) y reduc1r la pres1on externa en 27 kPa durante 1O minutos. Restablecer la presin atmosfrica y dejar los viales sumergidos durante 30 minutos. Enjuagar el exterior de los
viales.
Requisito-Ninguno de los viales contiene vestigios de solucin azul.
1 Consultar ISO 7864, Agujas hipodrmicas estriles para nico uso con un
dimetro externo de 0,8 mm (Calibre 21 ).