Instituto Tecnolgico de la Paz

Ingeniera Bioqumica

Analisis Instrumental
Ingeniera Bioqumica

M.C. Jesus Ignacio Gonzalez Garcia



Instituto Tecnologico de la Paz

M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

1
"

Unidad 1
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PRINCIPIOS DEL ANLISIS INSTRUMENTAL

!

1.1 METODOS CLASICOS E INSTRUMENTALES
1.1.1 Relacin de la qumica analtica clsica e instrumental

El anlisis qumico se hizo necesario desde que el hombre empez a procesar

materiales y en general a manejar compuestos y elementos qumicos. Para hacer esto fue
necesario, en ocasiones, la purificacin o separacin de los componentes (analitos) con los
que se quera trabajar. As fueron diseados o desarrollados una serie de mtodos que
ayudaban a este fin como la precipitacin, sublimacin, destilacin, extraccin con
solventes, etc.



Muy pronto esto tomo cierto grado de desarrollo y sofisticacin ya que en
ocasiones no solo se requera identificar a un analito, si no tambin saber en que
proporcin o concentracin exista, y as naci la qumica analtica, una de las 5 ramas o
campos en los que se divide la qumica (ademas de la orgnica, inorgnica, fisicoqumica
y bioqumica), aunque en la actualidad son varias las disciplinas que interaccionan entre si
dando lugar a campos como la organometlica, la bioanaltica, etc.



El anlisis qumico proporciona informacin sobre la composicin de una muestra
de material a travs de un mtodo o protocolo que se compone de una serie de pasos
definidos para sacarle informacin a una muestra. Si el resultado del anlisis solo nos
indica de que est compuesto un material, o que tipo de grupo funcional tiene o que
caractersticas estructurales, etc., se denomina anlisis cualitativo.

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Si por el contrario obtenemos datos numricos como porcentaje de composicin,
p p m , mg, etc. entonces se denomina anlisis cuantitativo.

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Analisis cualitativo: Que es lo que esta presente?

!
Analisis cuantitativo: Cuanto esta presente?

!

En ambos tipos de anlisis, la informacin necesaria es obtenida por medio de la
medida de una propiedad fsica o qumica que sea caracterstica con el los
componentes de inters, y a esta seal se le denomina "SEAL ANALITICA".



Hay muy variadas seales analticas que se pueden utilizar como lo son; la
precipitacin ante un reactivo, el vire de color, la absorcin, dispersin o emisin de luz,
la conductividad elctrica, ndice de refraccin, etc. lo que da origen a que los Mtodos
Analticos se dividan en:

a) Clsicos

b) Instrumentales

En los clsicos, generalmente, primero se separan los analitos de inters de una
muestra por medio de algn mtodo como la extraccin, cristalizacin o destilacin y
posteriormente se determina la identidad del mismo por medio de una caracterstica como
un color desarrollado, precipitacin y pesado, Pf, Peb, olores, solubilidades, volmenes de
reactivos usados, etc.



Estos mtodos son utilizados en anlisis macro, trabajo de campo o cuando no se
cuenta con el equipo necesario. Si el anlisis es con fines cuantitativos entonces se hace
uso de la gravimetra o la volumetra para establecer una concentracin.



Estos mtodos se estudian en los cursos introductorios de la qumica analtica
denominada qumica analtica en solucin y se denominan mtodos hmedos.

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!
!

El uso de otras seales Analticas (ya conocidas desde antes) como la absorcin,
dispersin o emisin de una radiacin electromagntica (hv), cambios de espn, relaciones
masa/carga, etc solo fue posible con el desarrollo de la tecnologa, y en especial de la
electrnica.



Aunado a esto, el desarrollo de las separaciones cromatogrficas como mtodos de
separacin o mtodos analtico hace que estas sean incluidas en mtodos modernos que
conforman los denominados mtodos instrumentales de anlisis, motivo del presente
curso.

1.1.2 Clasificacin de los mtodos instrumentales

En los mtodos instrumentales el analito es excitado o estimulado mediante la
aportacin de cierta cantidad de energa proporcionada por una fuente en particular;
posteriormente se mide una seal analtica para establecer la identidad o la concentracin
del mismo.



Los mtodos instrumentales se pueden clasificar en funcin de la propiedad fsica
o qumica en la que se fundamentan y el nombre del mtodo en ocasiones se compone del
fenmeno fsico combinado, por ejemplo, con la regin del espectro en la que trabaja; en
otros casos, el nombre no lleva implcito ninguna de estas caractersticas.

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Cada propiedad fsica puede generar uno o mas mtodos en su aplicacin:

FENOMENO
Transicin de electrones internos
Transiciones de electrones internos

TIPO DE METODOS
Emisin gamma
Absorcin, emisin, fluorescencia y
difraccin de rayos X
Transiciones de electrones de enlace
Absorcin de radiacin ultravioleta
(principalmente enlaces )
en el vaco
transiciones de electrones de enlace y no enlace Absorcin, emisin y fluorescencia
de radiacin UV-Vis
Rotacin y vibracin molecular
Absorcin y dispersin Raman e
infrarrojo
Rotacin de molculas
Absorcin de microondas
Cambios de estados de energa de espn
Resonancia de espn electrnico
electrnico en un campo magntico
Cambios de energa de espn de ncleos en un
campo magntico

Resonancia magntica nuclear

La clasificacin tambin puede hacerse , mas especficamente, por medio de la

seal analtica generada:

Seal analtica

Mtodo Instrumental

Emisin de radiacin

Espectroscopia de emisin (rayos x, UV,

visible, de electrones, Auger); fluorescencia,
fosforescencia y luminiscencia (rayos x, UV,
visible)

Absorcin de radiacin

Espectroscopia (rayos x, UV, visible, IR);

espectroscopia fotoacustica; RMN y
resonancia de espn electrnico.

Dispersin de la radiacin

Turbidimetria, nefelometria y espectroscopia

Raman

Refraccin de la radiacin

Refractometria; interferometria

Difraccin de la radiacin

Difraccin de rayos x y de electrones

Rotacin de la radiacin

Polarimetria; dispersin rotatoria ptica;

dicroismo circular

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!
!

Seal analtica

Mtodo Instrumental

Potencial elctrico

Potenciometria; cronopotenciometria

Carga elctrica

Coulombimetria

Corriente elctrica

Polarografia; amperometria

Resistencia elctrica

Conductimetria

Razn masa/carga

Espectroscopia de masas

Velocidad de reaccin

Mtodos cinticos

Propiedades trmicas

Conductividad trmica y mtodos de entalpia

Radiactividad

Mtodos de activacin y de dilucin isotpica

1.1.3 Componentes de los instrumentos de medicin

En los mtodos instrumentales de anlisis la informacin que se obtiene de los

tomos, iones, molculas o compuestos, procede de las seales analticas relacionadas con
las propiedades fsicas o qumicas de los mismos, sin embargo estas seales no son
interpretables por nuestros sentidos por lo que requerimos del uso de instrumentos o
equipos especiales que las transformen en una forma comprensible o medible por el
analista; de hecho, un instrumento analtico es una interfase que hace la comunicacin
entre analitos y analistas.
Los componentes de un equipo analtico dependen del tipo de fenmeno que se
esta midiendo o de la seal analtica en observacin, es decir, si es una radiacin
electromagntica, una corriente elctrica, un voltaje, pH, una flama, etc pero en la mayora
de los casos se requiere un generador de seales o una fuente de energa para generar las
seales (en otros casos el mismo analito genera la seal), un dispositivo que la convierta o
interprete (trasductor de entrada), un procesador de la seal (generalmente un
amplificador) y un trasductor de salida (convierte la seal procesada en una seal
entendible por el analista).

!
!

!
1.1.4 Dominio de los datos

Los dispositivos o equipos analticos transforman las seales de una forma a otra
que sea manejable por el analista y as se obtenga la informacin que debe ser
proporcional a la propiedad fsica o qumica que se esta midiendo. La informacin
obtenida por las propiedades medidas debe ser codificada para su interpretacin. A esta
codificacin se le denomina dominio de los datos.
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!

Los dominios de los datos se clasifican en: dominios no elctricos y dominios

elctricos.
Dominios no elctricos: cuando se miden propiedades fsicas o qumicas como la
longitud, densidad, composicin qumica, intensidad de luz o color, volumen, presin, etc.
Este dominio de datos esta asociado, generalmente a mtodos clsicos aunque la mayor
parte de estas mediciones, en la actualidad se encuentran asociadas a dispositivos
electrnicos que hace que estos dominios de datos estn asociados a dominios elctricos.
La obtencin o manejo de datos de dominio puramente no elctrico se encuentra en franca
extincin debido al avance de los dispositivos modernos.

Dominios elctricos: la seal se pasa de una forma a otra codificandola como una seal
elctrica. Existen tres modalidades, o tipos de dominios elctricos, de codificar la
informacin como una cantidad elctrica: Dominios analgicos, Dominios de tiempo y
Dominios digitales. En un anlisis se pueden combinar dominios elctricos con dominios
no elctricos como en los digitales que tienen que arrojar un numero.

Dominios analgicos: la informacin se codifica como la magnitud de una carga elctrica

(carga, potencia e intensidad de corriente). Son continuas en amplitud y tiempo y se
pueden medir continuamente o en determinados tiempos. Por ejemplo, un detector de
fotones que genera una corriente elctrica.

Dominios del tiempo: la informacin se guarda como variaciones de la seal con respecto
al tiempo, es decir como se comportan los mximos y mnimos en diferentes tiempos. En
estos dominios se utiliza la frecuencia y los periodos. Los dominios elctricos del tiempo
son frecuencia, amplitud y fase. Ejemplo el FID o seal de decaimiento utilizada en
espectroscopia de transformada de Fourier.

Dominios digitales: las seales se codifican en dos niveles y actan sobre dispositivos que
solo tienen dos posiciones posibles, por ejemplo una lampara solo puede estar encendida o
apagada, una palanca arriba o abajo, un diodo emitiendo o no emitiendo luz, una seal de
nivel lgico solo puede ser HI o LO. La interpretacin de que es abierto o cerrado o que es
HI o LO es una decisin arbitraria dependiente de un nivel de medicin dependiente del
equipo utilizado o del experimento. Por ejemplo cuando se rebasan mediciones en un
nivel o una cantidad de veces con un contador que hace que aparezca un numero en una
pantalla o una alerta. Los dominios digitales son computo, en serie, en paralelo y numero.
Aqu la codificacin es generalmente en nmeros binarios (base 2) ya que es mas eficiente
que hacerlo en serie. Esta codificacin puede accionar, por ejemplo diferentes diodos.

!
!
PARAMETROS DE CALIDAD DE UN METODO ANALITICO
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1.2.1 Parmetros cualitativos

Existe una gran diversidad de mtodos analticos instrumentales que hacen difcil
en ocasiones la decisin del uso de un mtodo instrumental u otro para resolver un
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!

problema analtico. Los equipos tienen criterios cuantitativos que permiten reducir el
numero de instrumentos a utilizar en funcin del problema a resolver; estas caractersticas
se dan en trminos numricos y se denominan parmetros de calidad. Una vez que los
criterios cuantitativos reducen la eleccin se puede recurrir a los criterios cualitativos para
tomar la decisin.

Parmetros
cualitativos
1. Velocidad
2. Facilidad y
comodidad
3. Habilidad del
operador
4. Costo y
disponibilidad
5. Costo unitario

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!

1.2.2 Parmetros cuantitativos

Son criterios numricos que se deben considerar en funcin de las necesidades del
anlisis y de la informacin que se desea extraer.

Criterio
1. Precisin

Parmetro de calidad
Desviacin estndar absoluta, desviacin estndar
relativa, coeficiente de variacin, varianza

2. Exactitud

Error absoluto, error relativo

3. Sensibilidad

Sensibilidad de calibracin, sensibilidad analtica

4. Limite de deteccin

Blanco mas tres veces la desviacin estndar del

blanco

5. Intervalo de concentracin

Concentracin entre el limite de cuantificacin

(LOQ) y el limite de linealidad (LOL)

6. Selectividad
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Coeficiente de selectividad
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1.3 RELACION SEAL-RUIDO

Cuando se realiza una medicin analtica se obtienen generalmente dos

componentes, una que lleva la informacin del analito que estamos buscando y otra que
contiene informacin indeseable, denominada ruido, que nos afecta la medicin de muy
diversas formas.

!
!

1.3.1 Fuentes de ruido

Hay bsicamente dos tipos de ruidos que afectan una medicin analtica: el ruido
qumico y el ruido instrumental.

Ruido qumico: hay muchas variables o factores que pueden afectar el ambiente qumico
de una muestra.
Por el principio de Le Chatelier, la posicin de un equilibrio qumico se puede ver
afectada, por ejemplo, al variar la temperatura o la presin, por la fluctuacin en la
humedad relativa, as como por vibraciones que pueden afectar la estructura de slidos, la
variacin en la intensidad de luz que afecta a sustancias sensibles a la misma, de la misma
forma que la presencia de humos que interactuan con muestras o reactivos. Estos son
algunos entre muchos otros factores que son considerados como fuentes de ruido qumico.

Ruido Instrumental: este es el tipo de ruido generado en una medicin por la afectacin de
los diferentes componentes del equipo instrumental utilizado para realizar la misma.
Todos los componentes de un equipo (fuentes de energa, trasductores, procesadores de
seales, etc.) pueden ser susceptibles de ser afectados por ruidos de diversas fuentes,
dependiendo del componente en cuestin.
Al final el ruido detectado o medido que aparece en el equipo va a ser la resultante
de la mezcla de todos estos ruidos, lo que va a dificultar la caracterizacin del tipo de
ruido y por lo tanto el control sobre el mismo. Sin embargo, existen algunos ruidos
instrumentales que son reconocibles y que es recomendable identificar sus caractersticas
para tratar de minimizarlos.
Los ruidos identificables son: el ruido trmico (o ruido de Johnson), el ruido de
disparo, el ruido de parpadeo (o ruido 1/f) y el ruido ambiental.

1. Ruido trmico: es debido a la agitacin trmica (debida a la friccin) de los electrones u

otros transportadores de carga en los diversos dispositivos como resistencias,
condensadores, detectores de radiacin o celdas electroquimica, entre otros. Este tipo de
ruido genera variaciones de voltaje por la heterogeneidad de la carga y solo es posible
que desaparezca en el cero absoluto, con ausencia de vibraciones.
2. Ruido de disparo: este se presenta cuando hay una corriente que genera movimiento de
electrones o partculas cargadas a travs de una unin. Ejemplos de esto se presentan en
los circuitos electrnicos con interfaces p y n (con dopaje con indio y arsnico), en
interfaces entre electrodos (de vidrio), etc.
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3. Ruido de parpadeo: las causas de este ruido no son del todo conocidas pero se
reconocen por su dependencia de la frecuencia y su valor es inversamente proporcional
a esta, razn por la que se le denomina tambin como 1/f. Este ruido es muy
significativo para frecuencias menores a 100 Hz. Este ruido se observa en
amplificadores de corriente y en galvanmetros.
4. Ruido ambiental: este tipo de ruido proviene del entorno. Entre mas radiaciones
electromagnticas haya en los alrededores, producidas por lineas de alimentacin de
corriente alterna, emisores de ondas de radio o televisin, sistemas de encendido de
motores de gasolina, conmutadores de arco elctrico, alumbrado, perturbaciones
ionosfricas, entre muchos otros, este ruido se convierte en significativo ya que en los
instrumentos analticos cada conductor funciona como una antena capaz de detectar
estas radiaciones y convertirla en una corriente elctrica.

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!

1.3.2 Aumento de la relacin seal-ruido

Regularmente la seal analtica es muy superior al ruido lo que hace relativamente

fcil mantener a este ultimo bajo control tomando algunas medidas en funcin del
conocimiento de los tipos de ruidos principales y reconocibles.
A pesar de esto, finalmente, la relacin seal-ruido afecta la precisin de una
medida, por lo que es conveniente aumentar esta relacin. Existen dos formas de hacerlo,
a travs de hardware y/o a travs de software.
En el diseo de los equipos (hardware) actualmente se estn incorporando
componentes como filtros, cortadores, escudos, moduladores y detectores sincrnicos que
eliminan o atenan al ruido y que no afectan a la seal analtica.
Por otro lado, existe software con algoritmos digitales que extraen ruidos despus
de convertir la seal de salida de analgica a digital, utilizando para tal efecto el uso de
una computadora.

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1.4 CALIBRACION DE LOS METODOS INSTRUMENTALES
!

Para tener las certeza de que los resultados obtenidos con un mtodo instrumental
son correctos, el mtodo debe ser calibrado relacionando la respuesta del mismo (la seal
analtica) con la concentracin del analito.
Existen diferentes maneras o mtodos de realizar la estandarizacin de los mtodos
instrumentales, dependiendo, principalmente, de la composicin de la matriz en la que se
encuentra el analito. Los principales mtodos, que no los nicos, para la calibracin son:
- Mtodo de Comparacin de estndares
- Mtodo del Estndar externo
- Mtodo de la Adicin de estndar
- Mtodo del Patron interno
En todos los casos la estandarizacin se puede hacer hacer por un camino muy
simple utilizando un solo punto (una solucin nica del estndar de concentracin
conocida) o se puede realizar haciendo una estandarizacin de puntos mltiples (lo mas
deseable) en la que se utilizan al menos tres soluciones del estndar a diferente
concentracin.
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1.4.1 Comparacin de estndares

En la variante de este mtodo denominada de Comparacin directa se realiza la

comparacin de una propiedad del analito con estndares o patrones. La propiedad
probada debe ser muy similar entre ambos. Como ejemplo de estos podemos considerar el
color producido por una reaccin aplicada tanto al analito como al estndar.
En otra variante, el analito se hace reaccionar con un reactivo estandarizado en una
reaccin estequiometrica.

!
!

1.4.2 Estndar externo

En este mtodo, el estndar se prepara por separado de la muestra. Es una tcnica

utilizada cuando la matriz no interfiere en la medicin y existen dos variantes: haciendo
una sola medicin del estndar a cierta concentracin (estandarizacin de un solo punto),
para encontrar la constante de proporcionalidad que se aplicara posteriormente al analito
problema o utilizando soluciones de estndar con las que se realiza una curva denominada
curva patrn o curva estndar o curva de calibracin. Se utiliza un blanco que emula la
matriz, para corregir la seal medida.
En el primer caso se prepara una solucin de concentracin conocida del estndar,
Cst, y se mide su seal analtica, Sst. Con estos datos se calcula el valor de k (la
sensibilidad del mtodo).

! CST SST

! CST = KSST

!k =

Sst
Cst

Donde C corresponde a la concentracin y S a la seal analtica.

Ya conocido el valor de k se puede sustituir en la formula el valor de la seal
analtica del analito, Sa, despejando encontramos Ca.
Este es un mtodo no muy recomendable ya que en la lectura inciden todo tipo de
errores, tanto determinados como indeterminados, y as se determina k. Cualquier
incertidumbre en el valor de k incide directamente en la medicin de la concentracin del
analito.

Ejemplo: un mtodo espectroscopico para la determinacin cuantitativa de los niveles de

Pb+2 en sangre da una medicin de 0.474 para el estndar, Sstand, de plomo de una
concentracin de 1.75 ppb. Cuantas partes por billn de Pb+2 hay en una muestra de
sangre si su lectura, Ssamp, es de 0.361?

En la estandarizacin de estndar externo de puntos mltiples se construye una

curva de calibracin utilizando diversas soluciones del estndar a diferente concentracin.
Si la curva de calibracin resultante es lineal (las mas recomendables), la pendiente nos
dar el valor de k. Si la curva patrn es no lineal el problema es mas complejo y requiere
un mayor numero de mediciones o soluciones estndar, y el valor de k (sensibilidad del
mtodo), es funcin de la concentracin del analito, su valor ser mayor cuando la
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concentracin del analito es pequea y decrece continuamente conforme la cantidad del

analito aumenta; el valor de k en cualquier punto es la pendiente de la curva en ese punto.
La curva se realiza en el intervalo de concentraciones tiles, en las que se va a encontrar la
concentracin del analito (para minimizar variaciones de la pendiente).
El problema en este tipo de estandarizacin es de que las mediciones del estndar
y el analito podran variar en gran medida si la matriz en la que se encuentran ambos
(estndar y analito)presenta diferencias.

Ejemplo: un mtodo espectroscopico para la determinacin cuantitativa de los niveles en

sangre de Pb+2 da una curva lineal normal de calibracin para la cual
Sstand = (0.296 ppb-1 ) x Cs + 0.003
Cual es el nivel de plomo (en ppb) en una muestra de sangre si Ssamp es de 0.397?

En el mtodo del estndar interno o Mtodo del Patron interno se utiliza una sustancia
de referencia que tenga caractersticas fsico-qumicas similares al analito, la cual es
adicionada a las soluciones estndar, blanco y muestra. En este caso se mide la relacin
que existe entre la respuesta del analito y la respuesta del estndar (el cual se encuentra en
las mismas condiciones de deteccin en relacin a reactivos, equipo, presin, pH, etc.). Se
hace una curva con la concentracin en el eje x y la relacin de respuestas en el eje y.

!
!

!C $! S $
! K = # IS & # A &
" C A % " SIS % Std

!C $! S $
! C = # IS & # A &
" K % " SIS % Muestra

Ejemplo: un mtodo para la cuantificacin de Pb+2 en sangre utiliza Cu+2 como estndar
interno. Un estndar que contiene 1.75 ppb de Pb+2 y 2.25 ppb de Cu+2 produce una
razn SA/Sst de 2.37. Una muestra problema de sangre es spiked (fortificada) con la
misma concentracin de Cu+2 dando una seal con una razn SA/Sst de 1.80. Determine la
concentracin de Pb+2 en la muestra.

!C $! S $
2.25
! K = # St & # A & =
x 2.37 = 3.05
" C A % " SSt % St 1.75

!
Por lo tanto, la concentracin de Pb
!

+2

es:

2.25
!C $! S $
! C A = # St & # A &
=
x 1.80 = 1.33 ppb Pb +2
" K % " SSt % muestra 3.05

Cuando se trabaja con matrices muy complejas, difciles de duplicar, se utiliza el mtodo
de las adiciones de estndar en el cual lo que se agrega es el mismo analito en forma de
una solucin estndar. Se utilizan dos porciones de la muestra, una se mide normalmente
y la otra es adicionada con la solucin estndar del analito (mtodo de solucin estndar
en un solo punto) y se calcula la concentracin de la muestra suponiendo la relacin lineal
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entre la respuesta y la concentracin. En una variante se llevan las dos soluciones al

mismo volumen final y en otra variante se agregan y no se diluye.

!
Mtodo de adicin de estndar con dilucin y de un solo punto
!
Sspike
SA
=
!V $
!V $
!V $
C A # 0 & C A # 0 & + Cspike # spike &
" Vf %
" Vf %
" Vf %

Ejemplo: Un mtodo para la determinacin cuantitativa de Pb+2 en sangre da una

lectura, SA , de 0.193 para 1.00 ml de muestra de sangre el cual fue diluido a 5.00 ml. Una
segunda muestra de 1.00 ml fue spiked (fortificada) con 1.0 l de un estndar de una
solucin de Pb+2 con una concentracin de 1560 ppb de Pb+2 y la cual tambin es diluida
a 5.00 ml dando una lectura, Sspike , de 0.419. Determine la concentracin de Pb+2 en la
muestra original de sangre.

0.193
0.419
=
! 1.00ml $
! 1.0 x10 3 ml $
! 1.00ml $
CA #
CA #
+
1560
ppb
&
#" 5.0ml &%
" 5.00ml %
" 5.00ml &%

0.193
0.419
=
0.2C A 0.2C A + 0.312 ppb

! 0.0386 C A + 0.0602 ppb = 0.0838 C A

!
0.0452 C = 0.0602 ppb
por lo tanto C = 1.33 ppb
!
!
Mtodo de adicin de estndar sin dilucin y de un solo punto
!
A

SA
=
CA
!

Sspike
!
V0
CA #
#" V0 + Vspike

$
! Vspike
& + Cspike #
&%
#" V0 + Vspike

$
&
&%

Una variante es el mtodo de adiciones mltiples en el que a varias alcuotas del analito
se les agrega cierta cantidad de solucin estndar, para con estas obtener una curva de
calibracin de adiciones mltiples. Este ultimo mtodo, aunque implica mas trabajo y
tiempo esto es compensado por la eliminacin de efectos de interferencia complejos y en
ocasiones desconocidos por el analista.

!0 =

KC AV0 KCspike
+
Xint ercepto
V0
Vf

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! Xint ercepto =

C AV0
Cspiked

!12

! V
V $
! Sspike = K # C A 0 + CS S &
Vf %
" Vf

!
!

1.5 PROPIEDADES DE LAS RADIACIONES ELECTROMAGNETICAS

Una parte muy importante de los mtodos instrumentales son los denominados
mtodos espectroscopicos o espectrometricos, originalmente basados en la interaccin
entre la materia y una radiacin electromagntica, pero en la actualidad el termino agrupa
tambin a mtodos en los que se hace interactuar a la materia con otras formas de energa
como haces de electrones, ondas acsticas o haces de iones.

!
!

1.5.1 Dualidad onda-partcula

!
!

1.5.2 El espectro electromagntico

Las radiaciones electromagnticas, o luz, son ciertas formas o manifestaciones de

la energa que se trasmiten a la distancia y a velocidades muy altas pero finitas y que, a
diferencia del sonido, no requieren de un medio para trasmitirse por lo que lo pueden
hacer en el vaco. Todas las radiaciones electromagnticas tienen la misma velocidad en el
vaco y su velocidad varia en otros medios debido a las interacciones con el mismo.
Estas radiaciones electromagnticas, en funcin de su comportamiento o
propiedades, pueden ser descritas tanto como ondas como partculas, es decir presentan un
comportamiento dual. El comportamiento ptico de las radiaciones electromagnticas,
como la difraccin, es mejor descrito por su comportamiento ondulatorio, en tanto que
cuando interacciona con la materia y se observan los fenmenos de absorcin o emisin
es el comportamiento corpuscular, como partcula, fotn, el que mejor la describe.
Son varias las formas como las radiaciones electromagnticas se manifiestan,
siendo la luz visible la mas comn, pero tambin tenemos otras como lo es los rayos X,
radiacin infrarroja, radiacin ultravioleta, rayos gamma, ondas de radio, etc. El termino
luz, aunque originalmente fue utilizado para referirse a la radiacin visible para el ojo
humano, tambin se usa en las radiaciones del tipo ultravioleta e infrarrojo.

Todas estas formas de radiacin o luz, en virtud de ser distintas manifestaciones

del mismo fenmeno, se les agrupa en lo que se denomina "El espectro
electromagntico", del cual la luz visible es solo una pequea porcin.

!
!

M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

!13

!
Casi cada porcin del espectro electromagntico puede ser utilizada para algn
mtodo espectroscpico, el nombre de los mismos depender del tipo de radiacin y el
fenmeno que utilicemos.

!
!

1.5.3 Propiedades generales de las radiaciones electromagnticas

Para entender, entonces, que es lo que diferenca a estas radiaciones, requerimos

analizar sus propiedades estudindolas tanto desde el punto de vista clsico, como ondas,
como desde el punto de vista cuntico, como partculas. Estas dos formas de analizar al
mismo fenmeno no son excluyentes ya que en algunos casos es necesario utilizar un
modelo y en otros, donde este modelo no funciona, como es el caso de la absorcin de
energa, hay que recurrir al otro, aunque sabemos que en realidad la luz tiene propiedades
y un comportamiento mecano-cuntico caracterstico.
Desde el punto de vista ondulatorio, una radiacin electromagntica es una onda
con comportamiento sinusoidal que presenta ciertas caractersticas y parmetros. La onda
viajera transporta a la energa y consta de dos campos oscilantes en fase: uno elctrico y
otro magntico el cual viaja perpendicularmente al primero (ngulo recto) en la direccin
de la propagacin.

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!

Esta es una representacin grfica de una radiacin monocromtica polarizada en un

plano. La componente elctrica es, la mayor parte de las veces, la responsable de los
fenmenos de interaccin con la materia que se utilizan en los mtodos pticos, y solo en
contados mtodos (resonancia magntica nuclear, resonancia de espn electrnico) se
utiliza la componente magntica.
Los parmetros a considerar en una radiacin electromagntica vista como una
onda son:



= Longitud de onda. Distancia entre dos crestas tamao de una onda completa (un
ciclo).
A = Amplitud. Altura de las crestas desde cero.
P = Periodo. Tiempo necesario para que dos mximos mnimos (una onda completa)
pasen por un punto fijo.
= Frecuencia. Numero de ciclos u oscilaciones del campo que pasan por un punto dado
por segundo.

Cabe sealar que la velocidad de todas estas radiaciones en el vaco es de 2.99792

x 108 m/s (3x108 m s-1 cuando se redondea) y se representa por la letra C:

Cuando la radiacin viaja a travs de otro medio su velocidad disminuye y si la
frecuencia () permanece constante (por lo tanto tambin su energa), lo que se modifica
es la longitud de onda y, en ese caso se expresa como: 
Las unidades de la longitud de onda varan segn la regin espectral con la
finalidad de trabajar principalmente con nmeros enteros: ngstrom (A = 10-10 m) en

M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

!15

rayos X y ultravioleta corto, Nanmetro (nm = 10-9 m) para ultravioleta y visible,

Micrmetro (m = 10-6 m) para infrarrojo, etc.
Las unidades de frecuencia son cps (ciclos por segundo) mas correctamente Hz
(Hertz) y s-1.

Algunos mtodos utilizan el denominado numero de onda, ! el cual es el inverso o

reciproco de la longitud de onda y sus unidades son cm-1.
_
1
! =

Otros trminos utilizados en el fenmeno ondulatorio de la luz son potencia (P) e

intensidad (I), relacionados ambos con el flujo de energa de una fuente de radiacin
electromagntica. Entendiendo al primer termino como flujo de energa por unidad de
tiempo, en tanto que el segundo seria el flujo de energa por unidad de tiempo por rea.

!
!

1.5.4 Tipos de espectros

Cuando tomos, iones o molculas se relajan a niveles de menor energa despus

de ser excitados desprenden el exceso de energa en forma de radiaciones
electromagnticas. Si estas radiaciones son caracterizadas en un espectroscopio, presentan
lo que se denomina como espectros de emisin.
Existen tres tipos de espectros de emisin: de lineas, de bandas (lineas encimadas
no resueltas) y espectros continuos.
Los primeros son los espectros que presentan los tomos de los elementos luego de
ser excitados y emitir el exceso de energa en forma de radiacin. Si esta es descompuesta
en un espectroscopio presentara solo ciertas lineas con una longitud de onda (o
frecuencia) caracterstica y reproducible en todos los casos.
Algunas sustancias presentan una serie de lineas muy cercanas en su longitud de
onda que ocasiona que se vean como bandas de lineas. Esto es debido a subniveles
vibracionales los cuales en ocasiones son difciles de resolver por algunos equipos de baja
resolucin.
Cuando algunas sustancias o materiales son llevadas a temperaturas elevadas, por
ejemplo, al emitir luz y ser esta descompuesta presentan un espectro continuo con todas
las longitudes de onda, como la luz blanca que presenta todos los colores del arco iris.
Esta es la denominada radiacin de cuerpo negro y depende mas de la temperatura que del
tipo de sustancia.

!
M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

!
16
!

Un caso aparte se presenta cuando se pasa radiacin electromagntica a travs de

la materia la cual solo absorbe ciertas longitudes de onda dependiendo de la naturaleza de
la misma. Si se pasa luz blanca a travs de la materia en estado gaseoso o en solucion se
absorbern selectivamente solo ciertas frecuencias y la luz resultante presentar un
espectro con huecos donde estaban las frecuencias absorbidas.
Podemos irradiar una muestra con las longitudes de onda de un rango especifico
midiendo cual de estas son absorbidas. El resultado es lo que se denomina un espectro de
absorcin el cual es un grfico de la absorcin de radiacin electromagntica en funcin
de la longitud de onda o de la frecuencia. Es la huella dactilar para propsitos de
identificacin.

Las sustancias presentan espectros de absorcin caractersticos, con uno o mas

mximos y mnimos, por lo que son tiles en la identificacin o confirmacin de una
especie qumica. El color de la solucin (en el visible) se relaciona con su espectro de
M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

!17

absorcin, ya que una especie qumica puede absorber uno o mas colores y presentar
soluciones con los colores complementarios.

!
1.6 PROPIEDADES MECANO-CUANTICAS DE LA RADIACION
ELECTROMAGNETICA

Cuando la radiacin interacciona con la materia la radiacin puede ser absorbida y

la muestra experimenta un cambio de energa. En estos casos el modelo ondulatorio ya no
nos sirve y es necesario considerar a las radiaciones desde el punto de vista corpuscular,
en funcin de su energa, por lo que recurriremos al modelo cuntico que nos dice que la
luz esta formada por pequeos paquetes de energa denominados fotones. Cuando un
fotn es absorbido por una muestra este es destruido y su energa pasa a esta. La
energa esta cuantizada y todos los fotones de un tipo de radiacin tendrn la misma
cantidad de energa la cual es diferente para los diferentes tipos de radiaciones. Las
radiaciones, desde este punto de vista, se analizan desde el punto de vista de su energa, la
cual es directamente proporcional a la frecuencia de la radiacin de acuerdo a la siguiente
ecuacin: E = h

donde h es una constante de proporcionalidad denominada constante de Planck la cual
tiene diferentes valores en funcin de las unidades utilizadas:
h = 6.63 x 10-34 joule s
6.63 x 10-27 erg s
por lo tanto, una alta frecuencia implica indica una alta energa.
Podemos relacionar a la energa de la radiacin con su longitud de onda con el
numero de onda, que es el numero de ondas por centmetro, a travs de las siguientes
ecuaciones:







M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

!
!18

Ejemplo: calcule el numero de onda de un haz de radiacin infrarroja con longitud de

onda de 5.0 m y calcule la energa de los fotones de dicha radiacin y la energa de un
mol de fotones de dicha radiacin:

!


 

!


!
E = Joule / fotn
Numero de Avogadro = 6.022 x 10
!
1.6.1 El efecto fotoelctrico
!

23

El efecto fotoelctrico es el fenmeno que se presenta cuando la superficie de un

metal es irradiada con luz de determinada frecuencia generando una corriente elctrica. El
fenmeno fue descubierto por Hertz a finales del siglo XIX cuando coloco dos electrodos
en un tubo de vaco y los irradi con diferentes radiaciones electromagnticas observando
que algunas generaban un paso de corriente (en forma de chispa) desde el ctodo al
nodo. Observ que no todas las frecuencias generaban esta corriente ni aun
incrementando la intensidad de la misma, siendo este una de los escollos de la fsica
clsica.
En 1905 Einstein encontr una respuesta a esto a travs de los cuantos de energa
de Planck enunciando que las radiaciones electromagnticas estaban compuestas por
pequeos paquetes de energa a los que denomino fotones y estos tenan una energa fija
en valores enteros de hv. Cuando uno de estos fotones choca o golpea a un electrn de una
tomo el fotn va a transferir su energa al electrn y si esta es suficiente para arrancarlo
del tomo y generar una corriente elctrica. Si los fotones no tienen la energa necesaria
para arrancar al electrn no se genera la corriente ni aun incrementando la intensidad ya
que esta solo aumenta el numero de fotones pero no la energa de los mismos que es una
dependencia de su frecuencia.
Fue hasta 1916 que Millikan hizo mediciones precisas del fenmeno y con esto
confirmo lo expresado por Einstein. Millikan encontr que para cada tipo de metal haba
un frecuencia umbral abajo de la cual los electrones no podan ser arrancados (aplicaba un
potencial negativo al nodo hasta que la corriente se hacia cero). Arriba de esta frecuencia
umbral los electrones adquiran la energa en exceso y la convertan en energa cintica.

1.6.2 Estados de energa de la materia

Como resultado de la teora cuntica de Planck, considerando la cuantizacion de la

energa, fue posible, gracias a aportaciones posteriores, explicar los espectros de absorcin
y de emisin de la materia en base a los postulados de la teora.

M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

19
!

De esta teora se establece que la materia (tomos, iones o molculas) solo puede
existir en ciertos estados discretos de energa. Una sustancia puede pasar de un estado a
otro absorbiendo o emitiendo energa por un valor igual al diferencial de los dos estados.
Si el cambio de estado se realiza absorbiendo o emitiendo una radiacin
electromagntica la longitud de onda o la frecuencia se deber relacionar energticamente
con la diferencia entre los estados a travs de la siguiente ecuacin:
C
! E1 E0 = h = h

Donde E1 es el estado inicial y E0 es el estado final de energa.

Los diferentes estados de energa son debidos, en este contexto, a el movimiento
de los electrones en torno al ncleo en tomos o iones, o entorno a dos ncleos en las
molculas. Ademas en el caso de las molculas sus cambios energticos tambin pueden
ser debidos a vibraciones de sus enlaces o cambios rotacionales de las mismas.
A temperatura ambiente el estado de menor energa se denomina estado
fundamental o basal en tanto que estados de mayor energa se denominan estados
excitados.

!
!

1.6.3 Emisin y absorcin de la radiacin electromagntica

Cuando una sustancia pasa de un estado de mayor energa hacia un estado de

menor energa lo hace desprendiendo o liberando el diferencial de energa. Esta energa
puede tener diferentes formas, una de las cuales es como una radiacin electromagntica,
como fotones. En este caso la radiacin emitida puede ser caracterizada mediante un
espectrmetro y se denomina espectro de emisin, el cual se puede presentar en sus tres
modalidades: de lineas, de bandas o continuo.



Estos espectros de emisin se presentan, generalmente, como grficos de potencia

relativa de la radiacin en funcin de la longitud de onda o de la frecuencia.
El valor de la energa (hv) de la radiacin emitida depende de en que estado
superior se encontraba la especie y este se da en funcin de la fuente de excitacin. Un
bombardeo con electrones u otras partculas elementales lleva a estados de muy alta
energa que se libera como rayos X; la excitacin a travs de un arco elctrico, chispas de
corriente alterna, una flama o un horno provee de energa que se libera como radiacin
ultravioleta, visible o infrarroja; cuando la energa extra proviene de una radiacin
electromagntica se observan espectros de emisin de fluorescencia o fosforescencia en
M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

!20

tanto que reacciones qumicas exotrmicas pueden generar espectros de

quimioluminiscencia.
En otros casos, si se enva una o una serie de radiaciones electromagnticas a
travs de una capa de una muestra slida, lquida o gaseosa la energa de los fotones de la
radiacin se puede transferir a los iones, tomos o molculas de la sustancia para pasarlos
a uno o mas estados excitados. Esto ocurrir solo si los fotones tienen la energa necesaria
igual al diferencial energtico entre el estado fundamental y algn estado excitado
considerando que estos estn cuantizados.
Una representacin grfica de la disminucin de la potencia de la energa radiante
en funcin de la frecuencia o de la longitud de onda es lo que se denomina un espectro de
absorcin el cual es caracterstico para cada especie qumica ya que estas presentan
estados cuantizados de acuerdo a su estructura o interacciones con el medio u otras
especies qumicas, entre otros factores. En vista de esto, los espectros de absorcin nos
pueden servir para caracterizar a una sustancia y utilizando la ley de Lambert-Beer se
pueden lograr anlisis cuantitativos de la misma.
El espectro de absorcin resultante puede tener diferente estructura dependiendo
de si la muestra son tomos, iones o molculas. Se pueden encontrar espectros de picos
aislados o combinados o espectros que son curvas continuas sobre todo en molculas con
varios enlaces donde se presentan tambin fenmenos vibracionales.

!
!

1.6.4 Ley de Lambert-Beer

Para utilizar la absorcin de luz con fines cuantitativos se requiere considerar

ciertos parmetros y relacionar la dependencia de estos con la cantidad de radiacin
absorbida, en este sentido la ley de Lambert-Beer, producto de la fusin de dos leyes,
cumple con este cometido al relacionar directamente la absorcin de radiacin
electromagntica con el numero de molculas o tomos que esta encuentra a su paso.

Ley de Bouguer (Lambert): Para una cierta concentracin de absorbente, la

intensidad de luz trasmitida, que previamente se ha logrado que sea paralela, plana y que
entre al medio absorbente formando ngulos rectos con el plano, disminuye
logaritmicamente a medida que la longitud del trayecto aumenta en forma aritmtica. Es
decir, la cantidad de radiacin absorbida es proporcional al espesor atravesado.

Ley de Beer: Al aumentar la concentracin del absorbente, la intensidad de luz

trasmitida disminuye logaritmicamente. Es decir, cada molcula de soluto absorber
siempre la misma cantidad o fraccin de radiacin incidente independientemente de la
concentracin, aunque esta ultima marcara cuantos fotones o fracciones de radiacin sern
absorbidos.

Ley de Lambert y Beer:

La intensidad de la luz trasmitida disminuye
logaritmicamente con el aumento proporcional de la concentracin de absorbente y el
aumento proporcional de la longitud del trayecto de absorcin de la radiacin.

M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

!21

La ley de Lambert-Beer tiene gran utilidad en mediciones de tipo cuantitativo (su

utilidad es menor cualitativamente hablando) al relacionar a la radiacin (los fotones de la
misma) con la cantidad o numero de especies qumicas con las que interacta. Esta ley
nos dice que un haz de radiacin electromagntica se ve atenuado (disminuye su energa
por unidad de rea) al interactuar con especies qumicas absorbentes.

!
DIAGRAMA DE DISMINUCION DE POTENCIA

Como consecuencia de las interacciones entre los fotones y las partculas

absorbentes, la potencia del haz disminuye de Po (antes Io intensidad) a P. Adems de la
absorcin en una medicin de este tipo tambin hay perdidas por reflexin y dispersin,
dependiendo de los materiales de la celda, el solvente, la concentracin, el tipo de
sustancia y los diversos cambios de interfase, por lo que es conveniente trabajar con
blancos.
Potencia: es la energa de un haz que sale de una fuente por unidad de tiempo y se mide
en watts; en el caso de la absorcin se mide la energa de la radiacin que, despus de
atravesar la muestra, llega al detector por metro cuadrado del mismo, por segundo.

Transmitancia: La transmitancia, T, de una solucin es la la fraccin de radiacin

P
incidente trasmitida por la solucin: ! T =
P0
P
y generalmente se expresa como porcentaje : ! %T = 100
P0
Absorbancia: La absorbancia de una solucin es el logaritmo negativo de la
transmitancia:
P
! A = logT = log 0
P
La absorbancia de una solucin aumenta cuanto mayor es la atenuacin del haz.
De la ley de Lambert-Beer se obtiene que la absorbancia es directamente
proporcional a la longitud (b) de la trayectoria del haz a travs de la solucin, y a la
concentracin de la especie absorbente: 
Introduciendo una constante de proporcionalidad esto quedara: A = abc, en donde
a es la constante de proporcionalidad, la cual es denominada absortividad y es
caracterstica de cada especie. La magnitud de a depende de las unidades de b y c.
M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

!22

Cuando b = cm y
Cuando b = cm

c = gramos por litro

c = moles por litro

!a =

l
cm g

!a =

l
cm mol

y entonces se denomina

absortividad molar y se representa por  , por lo tanto, en este caso: 
Estas ecuaciones (Lambert-Beer) nos pueden ser tiles cuando deseamos o
necesitamos determinar concentraciones o absortividades, parmetro, este ultimo, de gran
importancia en algunas espectroscopias como es la de ultravioleta visible.
Para hacer estudios cuantitativos de una especie se utiliza el pico de mayor
absorcin de su espectro de absorcin, siempre y cuando este se encuentre libre de otras
absorciones. Se hacen mediciones de un solo punto o de mltiples puntos (curvas de
calibracin) que son las mas deseables, utilizando cualquier mtodo de calibracin,
dependiendo de la muestra, estndar externo, adiciones mltiples o patrn interno.
La seleccin de la longitud de onda debe ser siempre buscando la mayor linealidad
con la ley de Beer (concentracin). Se busca un pico en el espectro de absorcin (de
preferencia el de la mayor absorcin) donde se observe la mayor sensibilidad del analito a
la radiacin, es decir, donde el cambio de absorbancia por cambio en la concentracin sea
muy marcado. Se busca que en ese punto la curva de absorcin sea plana para que se
afecte menos la lectura por las fluctuaciones o falta de precisin del equipo. En esta
longitud de onda no deben de haber interferencias de otras sustancias ni del disolvente, es
decir, el pico debe estar libre y no debe tener picos de otras absorciones encimados ni
traslapados con el. En el caso de los fotocolorimetros de filtros, se utiliza el filtro que nos
de la mayor pendiente.

!
!



M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

!23

Ejemplo 1: Una disolucin patrn de concentracin 1 x 10-3 moles/ L presenta una

absorbancia de 1.29 a 275 nm de longitud de onda. Cual es la concentracin de una
muestra si su absorbancia es de 0.75 y ambas lecturas se efectuaron en cubetas de paso
ptico de 1 cm.

solucin: Para aplicar la ley de Lambert-Beer, primero despejamos la concentracin y

posteriormente analizamos que datos tenemos y cuales nos faltan:
A

por lo tanto ! C =
observamos que no tenemos el valor de la absortividad
b
por lo que hay que calcularlo a partir de los datos de la disolucin patrn, tambin
A
despejando de la misma ecuacin: ! =
; sustituyendo valores nos queda:
bC
1.29
! =
por lo que, en la muestra, la concentracin ser:
(1) 1x10 3

!C =

0.75
(1) (1290 )

Cuando se hace trabajo de laboratorio no es recomendable recurrir a las tablas de

absortividad en virtud de que puede haber variaciones debidas al solvente, a la
temperatura o a las celdas, entre otros factores, que nos arrojaran datos errneos, por lo
que es preferible obtenerla a travs del uso de un patrn.
Ejemplo 2: A 510 nm de longitud de onda una disolucin de KMnO4 que contiene 20
ppm de manganeso presenta una absorbancia de 0.7 cuando se mide en cubetas de 1 cm de
espesor. Determinar la absortividad molar del KMnO4.

Esta ley, sin embargo, no es infalible y esta sujeta a ciertas restricciones ya que en
determinadas condiciones o situaciones, pierde su linealidad. Las principales causas son
las que se enumeran a continuacin:

a) Por concentracin
Esta es una ley limite que funciona bien para soluciones diluidas. Concentraciones
mayores al 0.01 M hace que la ley pierda linealidad porque al estar muy cerca las
molculas interactan entre si y cada una afecta la distribucin de carga de la otra, adems
se puede afectar el ndice de refraccin de la solucin y hace que se presenten otros
fenmenos como la reflexin, dispersin, etc. Esta perdida de linealidad tambin se
observa, en contadas ocasiones, a muy bajas concentraciones de algunas especies como
son algunos colorantes (ejemplo el azul de metileno).

b)Desviaciones Qumicas
Estas se presentan cuando la sustancia bajo anlisis sufre una transformacin, es
decir, cuando se disocia, asocia o reacciona con el disolvente. As la sustancia resultante o
producto, dar un espectro diferente al esperado.
Ejemplo: indicadores Acido-base
M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

!24

FORMULAS DE DESVIACIN QUMICA

El pH tambin desplaza este equilibrio. Para trabajar con una de las tres especies
hay que manipular el pH.

c) Desviaciones instrumentales
Hay que seleccionar bien la longitud de onda, de lo contrario nos dara una
absorbancia diferente y por lo tanto, tambin una absortividad diferente con el
consecuente cambio en la concentracin obtenible
Hay que utilizar equipos con buenos sistemas de aislamiento o monocromacin de
la radiacin, es decir, con bandas angostas
de longitudes de onda.Tambin hay
radiaciones parsitas, producto de dispersiones y reflexiones en las superficies interiores.
Se puede incluir aqu tambin a las celdas utilizadas en las mediciones ya que si la
calidad de las mismas (grosor, espesor, homogeneidad, etc.) nos pueden arrojar resultados
variables.

!
!

1.6.5 Clasificacin de los mtodos espectroqumicos

Los mtodos espectroquimicos o espectroscopicos estn basados en la interaccin

de la materia con radiaciones electromagnticas. Estas radiaciones presentan varias
caractersticas entre las que se incluyen su energa, velocidad, amplitud, frecuencia,
ngulo de fase, polarizacin y direccin de propagacin.
Para que se realice la espectroscopia se requiere que la interaccin de los fotones
con la muestra le produzcan a estos un cambio en una o mas de las caractersticas
mencionadas. As, la espectroscopia se divide en dos grandes clases: la espectroscopia
donde se transfiere la energa de los fotones hacia los tomos, iones o molculas de la
muestra y, la espectroscopia donde no hay trasferencia de energa entre los fotones y las
partculas de la muestra.
En la espectroscopia con trasferencia de energa de los fotones a la muestra
tenemos espectroscopia de absorcin y de emisin dependiendo como se va a obtener el
espectro. La fuente de energa depender del estado energtico al que se llevara al analito.
En la espectroscopia de absorcin el analito va a ser llevado de un estado de menor
energa hacia un estado de mayor energa:

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!25

!
Posteriormente se va a obtener el grfico de absorbancia contra longitud de onda o
frecuencia o se mide la absorcin contra una concentracin:

!
En la espectroscopia de emisin, por el contrario, se va a excitar a la muestra y
posteriormente se obtiene el espectro de la radiacin emitida en el proceso de relajacin o
liberacin del exceso de energa o energa absorbida:

!
ESPECTROSCOPIAS QUE ENVUELVEN CAMBIOS DE ENERGIA
Tipo de energa transferida

Regin del espectro

Tcnica espectroscopica

electromagntico
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!26

ESPECTROSCOPIAS QUE ENVUELVEN CAMBIOS DE ENERGIA

Absorcin

Rayos gamma

Espectroscopia de Mossbauer

Rayos X

Espectroscopia de absorcin

de rayos X

UV-Vis

!
!
Infrarrojo

Espectroscopia de UV-Vis
Espectroscopia de absorcin
atmica
Espectroscopia de infrarrojo
Espectroscopia Raman
Espectroscopia de

Microondas

microondas

Espectroscopia de resonancia

Ondas de radio

de espn electrnico
Espectroscopia de resonancia
magntica nuclear

Emisin (excitacin trmica)

UV-Vis

Espectroscopia de emisin
atmica

Fotoluminiscencia

Rayos X

Fluorescencia de rayos X

UV-Vis

Espectroscopia de
fluorescencia
Espectroscopia de
fosforescencia
Espectroscopia de

!
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fluorescencia atmica

!27

ESPECTROSCOPIAS QUE NO ENVUELVEN UN CAMBIO DE ENERGA

Regin del espectro

Tipo de interaccin

Tcnica espectroscopica

Rayos X

Difraccin

Difraccin de rayos X

UV-Vis

Refraccin

Refractometra

Dispersin

Nefelometra

electromagntico

Turbidimetra

!
!
!

M.C. Jess Ignacio Gonzlez Garca

Dispersin rotatoria ptica

!28