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CUESTIONARIO:

1. Cul es la diferencia entre un fotocolormetro y un espectrofotmetro?


La diferencia fundamental entre un espectrofotmetro y un fotmetro o
fotocolormetro, consiste en que el fotocolormetro trabaja nicamente en el
espectro de luz visible y selecciona una longitud de onda determinada mediante
filtros fijos.
En cambio, un Espectrofotmetro es capaz de trabajar, no solo con la luz visible
sino que en otras regiones del espectro electromagntico (ultravioleta e infrarrojo).
Adems posee un monocromador para seleccionar la longitud de onda deseada.
2. Explique las diferencias entre los instrumentos de un solo haz y de doble
haz para las mediciones de absorbancia
Los instrumentos de un solo haz son aquellos que la luz sigue una nica
trayectoria entre la fuente y el detector. La banda de luz atraviesa la muestra que
se halla contenida en una celda y la luz transmitida por la muestra pasa el
detector, originndose una corriente elctrica que por medio de diferentes circuitos
permite observar una seal. El sistema puede tener una o dos celdas para la
muestra en blanco y la de problema en el caso de un solo haz sed debe
desplazar las cubetas a diferencia de un instrumento doble haz que se dirige una
haz a la muestra y otro a la problema a la vez se hace el barrido.

3. Cul es criterio para seleccionar el uso de un instrumento de un solo haz


o de doble haz?
Espectrofotmetro de un solo haz
Espectrofotmetro de un doble haz
es un equipo sencillo econmico.
La radiacin se divide en dos uno
Trabaja en la regin visible y
pasa por la muestra y el otro por
otros en la regin uv-vis.
blanco
Presencia de ruido de parpadeo
Equipo costoso
Realiza correcciones:
de las fuentes y detectores
(La intensidad de la fuente de luz,
Transmisin del monocromador,
Sensibilidad del detector.)
Resultados ms confiables

El espectrofotmetro de doble haz (con dos celdas para dos cubetas): las
disoluciones de la muestra problema y de referencia se someten simultneamente
a la radiacin, el aparato automticamente recorre toda la zona del espectro que
se desea estudiar y graficar directamente en un aparato registrador, la diferencia
de absorbancias observadas en funcin de la longitud de onda.
El espectrofotmetro de un solo haz (con una sola celda para alojarla cubeta
con la muestra): Las disoluciones de la muestra problema y de referencia se
someten independientemente a la radiacin, el resultado de la absorbancia o
transmitancia se tiene que anotar par luego graficar en un papel milimetrado
diferencia de absorbancias observadas en funcin de la longitud de onda.

4. Defina cada trmino:


Exactitud fotomtrica: es el grado de concordancia entre la absorbancia real y la
absorbancia medida.
Ruido: en una definicin simplista, es la sensacin sonora que no resulta
agradable y que no comunica nada til.
Ancho de banda: el ancho de banda espectral practico es el ancho de banda de
un instrumento operado a un periodo de integracin y mantienen una relacin
seal a ruido fija.
Sistema dispersor: focaliza sobre la placa fotogrfica todas las imgenes rendija
de la red de forma espectral por la accin aptica del prisma.

5. Qu es el error absoluto de un espectrofotmetro? Cul es su valor


numrico?
Exactitud del mtodo: La exactitud de un mtodo analtico indica que tan alejado
se encuentra el valor medido del valor verdadero o valor real, se mide mediante:
El error absoluto: Es la diferencia entre el valor de la medida y el valor tomado
como exacto. Puede ser positivo o negativo, segn si la medida es superior al
valor real o inferior
Valor absoluto = (Valor medido - Valor esperado) x 100

6. Deduzca matemticamente la frmula: A = 2 log %T. Cul es el rango


de valores de transmitancia y de la absorbancia?
T = I / I0
I=Intensidad de la radiacin que llega al detector luego de pasar por la muestra.
I0=Intensidad de la radiacin que llega al detector

Si A = - log T= log I0 / I
T= I/I0 (x 100)
% T = 100 (I / I0 )
I0 /I = 100/ % T
Entonces:
A=log (100 / %T)
A= log (100) log (%T)
A= 2 - log %T.

Los rangos de los valores de transmitancia varan de 0 - 1 y los valores de


absorbancia varan de 0.15 a 0.7

7. Cmo se califica
espectrofotmetro?

el

estado

de

la

fuente

luminosa

de

un

La fuente luminosa debe poseer estabilidad, direccionalidad, distribucin de


energa espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: lmpara
de wolframio o tungsteno, lmpara de arco de xenn y lmpara de deuterio que
es utilizada en los laboratorios atmicos.

8. Cmo se hace la limpieza de las cubetas de muestras luego de ser


usadas con una solucin coloreada y grasa?
Para el caso de las cubetas de cuarzo se utiliza para lavarlas una solucin de
NaOH, 0.1M y una de HCl diluido 0.1 M. Luego se enjuaga varias veces con agua
destilada para que no quede resto de la sustancia coloreada o de grasa. Se seca
con papel tissue por el exterior o se lleva a una estufa de desecacin libre de
polvo o un enjuague con un disolvente voltil como etanol y esperar su
evaporacin.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Duymovich C, Acheme R, Sesini S y Mazziotta D. Espectrofotometro y


fotocolorimetroguiapactica de actualizacion. Acta BioquimLatinuam; 2005;
39 (4) 529-39.
Suarez C, Carsedo L, Medina J, Ortega P y Trinidad P. Tratado de
otorrinolaringologa y crugia de cuello y cabza.Ed. 2. Espaa:
panamericana; 2007.
Artigas J. Fundamento de colorimetra. Ed 2.Universitad :Valencia ; 2002
Florencio De la Torre. Espectrofotometra. (recuperado el 25 de agosto del
2015) Disponible en:
http://www.bioquimica.ucv.cl/paginas/central/bioquimica%20clinica/apuntes
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Brown G, SalleeE.Quimicacuantitativa.Ed. Reimpresa. Espaa: Reverte;
1967
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Disponible en: https://docs.google.com/document/d/1IStRYXgU2LMyemg7GI0enZuSYGqecjBfocWL_LfYeI/edit?pli=1
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ofotometria.doc.
Comerciallabor. Cubetas para espectrofotometra. Disponible en:
http://comerciallabor.com/documents/cubetas.pdf
Bvsde.
Espectrofotometro.
Disponible
en:
http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/cd29/laboratorio/cap11.pdf

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