DETERMINACIN DE VISCOSIDAD INTRNSICA Y MASA

MOLECULAR DE PECTINA COMERCIAL

I OBJETIVOS
-

Conocer los fundamentos del uso del viscosmetro capilar Canon Fenske en la
determinacin de la viscosidad intrnseca

Estimar el valor de la masa molecular media de cualquier sustancia orgnica,

basada en el volumen hidrodinmico que puede ocupar una partcula de la
misma.

II FUNDAMENTO TERICO

La viscosidad y el peso molecular de la pectina

La viscosidad y el peso molecular de la pectina La viscosidad de las soluciones de
pectina de HM es muy dependiente del nmero de variables, grado de
esterificacin, longitud de la molcula, concentracin de electrolitos, pH y
temperatura.
Concentraciones diferentes de un azcar y diferentes azcares afectan a la
viscosidad de manera diferente. La viscosidad se incrementa marcadamente a
medida que la temperatura se acerca a la temperatura de ebullicin.
El peso molecular de la pectina, relacionado con la longitud de la cadena, es una
caracterstica muy importante de la que dependen la viscosidad de sus
disoluciones y su comportamiento en la gelificacin de las jaleas. La
determinacin cuidadosa del peso molecular es difcil, parcialmente debido a la
extrema heterogeneidad de las muestras y parcialmente debido a la tendencia de
las pectinas a agregarse,, an bajo condiciones no favorables a la gelacin.
Los pesos moleculares de pectinas pueden ser expresados tanto como el valor del
peso promedio (Mw) como el del nmero promedio (Mn), siendo:

donde Nx es el nmero de molculas de peso molecular Mx presente (Richards,

1980). Diferentes tcnicas experimentales dan diferentes pesos moleculares
promedio.
Hace cuarenta aos los pesos moleculares de pectinas y su distribucin fueron
estudiados sistemticamente por Owens et al., (1948) por viscosimetra y
determinaron que los pesos moleculares variaban de 20000 a 300000.
En dispersiones de pectina, una propiedad muy til de la viscosidad es la
resistencia de la pectina soluto a fluir en relacin al agua conteniendo un
electrolito. El objeto del electrolito es la de disminuir la ionizacin de los grupos
carboxilos de la pectina. La pectina, entonces pasa a ser un polmero neutro (Pals
y Hermans, 1952), en vez de comportarse como un electrolito con gran efecto
electroviscoso.
Los viscosmetros operan con muchos principios bsicos. Los diseos capilar y
rotacional han sido los ms frecuentemente aplicados a la pectina. En la
viscosimetra capilar, el flujo se inicia a travs de una columna de vidrio vertical
capilar a presin y temperatura constante. Los datos son tratados para obtener la
viscosidad intrnseca []. La unidad de viscosidad intrnseca se expresa como
volumen/peso (Carpenter and Westerman, 1975).
Huggins (1942) relacion la viscosidad intrnseca con la concentracin de soluto
y por medio de una ecuacin derivada, se abord el estudio de la funcionalidad de
la pectina. Smidsrod y Hang (1971) descubrieron un mtodo implicando [] y
fuerza inica en un test comparativo de la rigidez de las cadenas del polielectrolito
en respuesta a la concentracin salina de la disolucin.
La viscosidad intrnseca [], se relaciona con el peso molecular a travs de la
ecuacin de Mark-Houwink: (Axelos y Thibault, 1991)

donde Mw es el peso molecular promedio (Billmeyeer, 1984). En forma

logartmica, al representar ln [] frente a ln Mw se obtiene una recta, cuya
ordenada en el origen es ln K y la pendiente es el parmetro a. La ecuacin es
vlida a alrededor de 105 g/mol (Anger y Berth, 1986). El exponente es variable

entre 0,5 para polmeros enrollados y 1,7 para molculas extendidas y rgidas. Los
diferentes disolventes, polmeros y temperaturas afectan al exponente a (Daniels et
al., 1956, 1970).

Aparte de los mtodos citados de determinacin del peso molecular de pectina por
19 difusin de luz (Jordan y Brant, 1978) y el viscosimtrico, se usan tambin
ampliamente el mtodo de cromatografa de filtracin molecular en columna
(Fishman et al., 1989) y el de cromatografa lquida de alta resolucin (mtodo de
control de calidad de pectina de Copenhagen Pectin,1991). El peso molecular
medio de las pectinas comerciales de manzana es de 80000 (Pilnik y Rombouts
1985).
La mayora de los mtodos empleados para la medicin de la viscosidad de los
lquidos se basa en las ecuaciones de Poiseuille o de Stokes. La ecuacin de
Poiseuille para el coeficiente de viscosidad de lquidos es:

donde V es el volumen del liquido de viscosidad

que fluye en el tiempo t a

travs de un tubo capilar de radio r y la longitud L bajo una presin de P dinas

por centmetro cuadrado. Se mide el tiempo de flujo de los lquidos, y puesto
que las presiones son proporcionales a las densidades de los lquidos, se
puede escribir como:

Las cantidades t1 y t2 se miden mas adecuadamente con un viscosmetro de

Ostwald. Una cantidad definida de liquido se introduce en el viscosmetro
sumergido en un termostato y luego se hace pasar por succin al bulbo B hasta

que el nivel del liquido este sobre una marca a. Se deja escurrir el liquido el
tiempo necesario para que su nivel descienda hasta una marca b y se mide con
un cronometro. El viscosmetro se limpia, luego se aade el liquido de
referencia y se repite la operacin. Con este procedimiento se obtienen t1 y t2 y
la viscosidad del lquido se calcula con la ecuacin anterior.
Influencia de la temperatura
El efecto de la temperatura sobre la viscosidad de un lquido es notablemente
diferente del efecto sobre un gas; mientras en este ltimo caso el coeficiente
aumenta con la temperatura, las viscosidades de los lquidos disminuyen
invariablemente de manera marcada al elevarse la temperatura. Se han
propuesto numerosas ecuaciones que relacionan viscosidad y temperatura como
por ejemplo:

Donde A y B son constantes para el liquido dado; se deduce que el diagrama de

log( ) frente a 1/T seta una lnea recta. Se pens en otro tiempo que la variacin
de la fluidez con la temperatura resultara ms fundamental que la del coeficiente
de viscosidad; pero el uso de una expresin exponencial hace que la opcin
carezca de importancia.
La determinacin de la viscosidad intrnseca y masa molecular media
La determinacin de la masa molecular media a travs de la viscosidad
intrnseca, requiere de mucha atencin durante el control de la temperatura,
limpieza del viscosmetro, y sobre todo un riguroso control del tiempo.
Determinar la viscosidad intrnseca a travs del mtodo de Huggins, donde
est relacionada
dilucin

al volumen

hidrodinmico

infinita, esto es ; el espacio

interaccionando con el solvente.

Red(dl / gr.)

[ ]

de la macromolcula

en una

que una macromolcula ocupara

0.00

0.0625 0.125 0.250 0.500 [ ] (g / dl)

Finalmente calcular la masa molecular por la relacin de Mark-HouwinkSaturada.

[ ] = K M

Donde:
K, a

= Constantes

Mv

= Masa molecular viscosimtrica media

= 1 (si se usa hexametafosfato de sodio 1.0%)

= 4.7 x 10-5 (si se usa hexametafosfato de sodio 1.0%)

= 0.73 (si se usa solucin de cloruro de sodio 0.1M pH=7.0)

= 9.55x10-4dl/g (para solucin de cloruro de sodio 0.1M, pH=7.0)

III MATERIALES Y MTODOS

3.1. MATERIALES
-

Viscosmetro capilar Cannon Fenske

Balones de vidrio de 50ml

Termmetro

Balanza analtica

Bao mara

Vaguetas

Vasos de precipitados de 50ml

Erlenmeyers de 250ml

Cronmetro

Pignmetros

3.2. REACTIVOS
-

Muestras de pectina comercial (soluciones al 0.5%; 0.25%; 0.125% y

0.0625% en NaCl 0.1M pH = 7.0 a 25C)

Cloruro de sodio

Agua destilada

IV PROCEDIMIENTO
1

Se prepar previamente las soluciones de cloruro de sodio 0.1M pH = 7.0 a

25C, pectina al 0.5%; 0.25%; 0.125% y 0.0625%

Luego se limpi el viscosmetro lavando previamente con agua destilada,

luego con alcohol.
Coloc en la estufa a fin de evaporar los posibles restos de alcohol ,
peridicamente pueden acumularse trazas de materia orgnica ,por lo que
debe lavarse cada cierto tiempo con solucin de cido crmico.
Se arm el equipo necesario con trpode y bao Mara a fin de regular
correctamente la temperatura.

3
4
5

Se coloc el viscosmetro dentro del bao y mantenerlo a temperatura

constante.

Luego se coloc aproximadamente 10 ml. De solvente en el viscosmetro y

determinar el tiempo de flujo del mismo, tomando 2 veces el tiempo.

Para la determinacin de la densidad se utiliz el mtodo del picnmetro,

pesando respectivamente este vaci, con agua, con el cloruro de sodio y con
las muestras con diferentes concentraciones.

Y se calcul la viscosidad cinemtica

, utilizando para ello

el factor de

calibracin correspondiente a cada viscosmetro , se indica continuacin:

Tabla N1
Rango de
Tamao

Constantes

viscosidad

aproximadas

cinemtica

(centistokes/segundos

(centistokes)

)
25

0.002

0.5 - 2.0

50

0.004

0.8 - 0.4

75

0.008

1.8 - 8.0

100

0.015

3.0 - 15

150

0.035

7.0 - 35

200

0.100

20 - 00

300

0.250

50 - 250

350

0.500

100 - 500

400

1.200

240 - 1200

450

2.500

500 - 2500

500

8.000

1000 - 8000

600

20.00

4000 - 20000

650

45.00

9000 - 45000

700

100.0

20000 -100000

V CLCULOS
Tamao de viscosmetro =200

Ya que
Entonces, segn la tabla N1

Constante= 0.1 centistokes/s

Pesando:
-

Peso (picnmetro vaco)

= 10,744gr

Peso (picnmetro+ H2O)

= 21,042

gr

peso del pictometro+solvente(NaCl) = 20,592

gr

peso del pictometro+pectina(0.0625) = 20,576gr

-

peso del pictometro+pectina(0.125)

= 20,595gr

peso del pictometro+pectina(0.25)

= 20,587gr

peso del pictometro+pectina(0.5)

= 20,611gr

Luego:
Volumen (H2O)= P(picnmetro+ H2O) P(picnmetro vaco)
Volumen (H2O)= P(H2O)= 10.298 ml
Utilizando las dems frmulas para determinar la:

Densidad=

P ( pictometro+muestra )P( pictometro vacio) gr

=
ml
Volumen(H 2O)

( )

Vicosidad cinematica=Tiempo x Contante=(centistokes)

Vicosida d Absoluta=v ( cinematica ) x Densidad =( cp)

V ( absoluta)
Vicosidad Relativa= V (NaCl) =(cp)

Vicosidad Especifica=

v ( absoluta )v ( NaCl)
=(cp)
v ( NaCl)

v (especifica)
Vicosidad
Reducida=
=(cp)

concentracion

Obtenindose:
CUADRO N1

VI RESULTADOS

[ n ] a travs del mtodo de

Para determinar la viscosidad intrnseca

Huggins:
GRFICA N1

Viscosidad reducida vs concentracin

4.000
2.000
f(x) = 3.26x + 0.2

vicosidad Reducida (dl/g)

0.000
-2.000

Linear ()

0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

concentracion (g/dl)

X=0
y = 3,2564x + 0,1973

[ n ] =0.1973

Para determinar la masa molecular por la relacin de Mark-Houwink Sakurada

[ n ] =K Mv a
Mv=
Mv=

n
k

()

1
a

0.1973
4
9.55 10

1
0.73

Mv=1483.892
VII DISCUSIN
El tiempo tomado para las soluciones de pectina de 0.0625 y 0.25, no fueron
correctas, alterando las viscosidades de estas, ya que estas deberan resultar una
viscosidad mayor que la solucin de NaCl.
En la grfica N1 se puede observar que los puntos no estn correlacionados,
obtenindose una viscosidad intrnseca de

0.1973 .

Y mediante la relacin de Mark-Houwink Sakurada, se pudo determinar una

masa molecular de

1483.892 , que esta muy lejos del rango de 20000 a 300000,

adems de que el peso molecular medio de las pectinas comerciales de manzana,

segn Pilnik y Rombouts, es de 80000.

Al no controlar la temperatura, para las posteriores anlisis de la pectinas, pudo
suceder una aumento de temperatura, disminuyendo la viscosidad en las las
soluciones de pectina de 0.0625 y 0.25.
VIII CONCLUSIN
Se debe tomar mucha importancia al control de la temperatura y sobretodo del
tiempo, al momento de determinar el tiempo de flujo en el viscosmetro.
Se obtuvo una viscosidad intrnseca de

0.1973 .

La masa molecular media de la pectina comercial es de masa molecular de

1483.892 .

IX CUESTIONARIO
1

Cmo usar la pera de goma?

La pipeta se une al aparato a travs del ajuste de la parte inferior (I)

Consta de 3 guas, y en cada una se encuentra una vlvula la que al
presionar se abre y al soltar se cierra.
-

La vlvula de la parte superior de la pera permite hacer un vaco y

deformar la pera de goma (A)

La vlvula que se encuentra en la base de la pera, permite comunicar

el vaco a la pipeta y de esta forma se puede aspira el lquido (S)

La vlvula que se encuentra en la ramificacin lateral permite la

entrada del aire y la descarga del lquido que sostiene la pipeta (E)

X BIBLIOGRAFA
-

Jordi Pagan i Gilabert. Degradacin enzimtica y caractersticas fsicas

y qumicas de la pectina del bagazo de melocotn. Universitat de
Lleida. 142 pginas.

Determinar la densidad del solvente (hexametafosfato de sodio 1.0 %).

Determinar la viscosidad absoluta del solvente

Hacer lo propio con cada una de las soluciones de pectina , determinando

la viscosidad absoluta y posteriormente la viscosidad reducida para cada

Determinar la viscosidad intrnseca a travs del mtodo de Huggins, donde

est relacionada al volumen hidrodinmico de la macromolcula en una
dilucin

infinita, esto es ; el espacio

que una macromolcula ocupara

interaccionando con el solvente.

Red(dl / gr.)

[ ]
0.00

0.0625 0.125 0.250 0.500 [ ] (g / dl)

Finalmente calcular la masa molecular por la relacin de Mark-HouwinkSaturada.

[ ] = K M

Donde:
K, a

= Constantes

Mv

= Masa molecular viscosimtrica media

= 1 (si se usa hexametafosfato de sodio 1.0%)

= 4.7 x 10-5 (si se usa hexametafosfato de sodio 1.0%)

= 0.73 (si se usa solucin de cloruro de sodio 0.1M pH=7.0)

= 9.55x10-4dl/g (si se usa solucin de cloruro de sodio 0.1M

pH

=7.0)

Solucin De Pectina 0.0625%

Luego de haber tomado el tiempo cuatro veces,

a la solucin a travs del

viscosmetro, tenemos:
t = segundos
t = 12,02

Viscosidad cinemtica = 12,02 x 0,100 = 1,202 centistokes

Para hallar la densidad de la solucin:
Volumen = (85,382 35,382) = 50 ml
Masa = (85,823 35,382) = 50,441 g

Densidad = D = 50,441g = 1,00882g/ml

50 ml
Viscosidad absoluta = 1,00882g /ml x 1,202 = 1,2126cp
Viscosidad relativa = 1,2126cp= 1,1031

1.0992cp
Viscosidad especfica = 1,2126 - 1.0992 = 0.1031
1.0992
Viscosidad reducida =

0.1031= 1.6496
0.0625

Solucin De Pectina 0.125%

Luego de haber tomado el tiempo cuatro veces,

a la solucin a travs del

viscosmetro, tenemos:
t = segundos
t = 13.15 s
Viscosidad cinemtica = 13.15 x 0.100 = 1.315centistokes
Para hallar la densidad de la solucin:
Volumen = (80,532 30,517) = 50,015 ml
Masa = (80,986 35,382) = 50,376 g

Densidad = D = 50,376 g =1,0072g/ml

50,015 ml
Viscosidad absoluta = 1.0072 x 1.315 = 1.3244cp
Viscosidad relativa = 1.3244cp =1,2048
1.0992cp
Viscosidad especfica = 1.3244 - 1.0992 = 0.2048
1.0992

 Viscosidad reducida = 0.2048 = 1.6384

0.125

Solucin De Pectina 0.25%

Luego de haber tomado el tiempo 4 veces, a la solucin a travs del viscosmetro,
tenemos:
t = segundos
t = 13,5

Viscosidad cinemtica = 13,5 x 0.100 = 1.35 centistokes

Para hallar la densidad de la solucin de hexametafosfato:
Volumen = (85,382 35,382) = 50 ml
Masa = (85,986 35,382) = 50,604 g
Densidad = D = 50,604 g = 1.01208 g/ml
50ml
Viscosidad absoluta = 1.01208 x 1,35= 1.3663 cp
Viscosidad relativa = 1.3663 cp = 1.243 cp
1.0992cp

Viscosidad especfica = 1.3663 - 1.0992 = 0.2429

1.0992
Viscosidad reducida = 0.2429 = 0,9716
0.250

Solucin De Pectina 0.5%

Luego de haber tomado el tiempo 4 veces, a la solucin a travs del viscosmetro,
tenemos:
t = segundos
t = 21,2
Viscosidad cinemtica = 21,2x 0.100 = 2,12 centistokes